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Ca^2+对α-1,2-甘露糖苷酶活性影响的分子动力学模拟研究 预览
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作者 熊静 《化学研究与应用》 CSCD 北大核心 2018年第7期1120-1124,共5页
采用分子动力学模拟方法讨论了Ca^2+对α-1,2-甘露糖苷水解酶(Bt3990)催化性能的影响,以及Bt3990与底物分子的相互作用方式,并测试了删除活性中心Ca^2+对酶-底物复合物结构的影响。研究结果表明,当Bt3990活性中心含有Ca^2+时酶的... 采用分子动力学模拟方法讨论了Ca^2+对α-1,2-甘露糖苷水解酶(Bt3990)催化性能的影响,以及Bt3990与底物分子的相互作用方式,并测试了删除活性中心Ca^2+对酶-底物复合物结构的影响。研究结果表明,当Bt3990活性中心含有Ca^2+时酶的体系结构很稳定,同时Ca^2+有助于使具有催化功能的残基处于特定的位置,便于其发挥催化作用。Ca^2+能促使底物偏离基态构象稳定在近似进攻构象。当Bt3990活性中心失去Ca^2+时,酶的体系结构不再稳定。 展开更多
关键词 α-1 2-甘露糖苷酶 CA^2+ 分子动力学模拟
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Man5GlcNAc2哺乳动物甘露糖型糖蛋白的毕赤酵母表达系统构建 被引量:7
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作者 杨晓鹏 刘波 +4 位作者 宋淼 巩新 唱韶红 薛奎晶 吴军 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期108-117,共10页
蛋白的糖基化对蛋白的活性、高级结构及功能都有重要的影响。酵母表达的糖蛋白不同于哺乳动物表达的杂合型或复杂型糖蛋白,而是高甘露糖型或过度甘露糖化糖蛋白。在前期成功敲除毕赤酵母α-1,6-甘露糖转移酶(Och1p)基因、阻断毕赤酵... 蛋白的糖基化对蛋白的活性、高级结构及功能都有重要的影响。酵母表达的糖蛋白不同于哺乳动物表达的杂合型或复杂型糖蛋白,而是高甘露糖型或过度甘露糖化糖蛋白。在前期成功敲除毕赤酵母α-1,6-甘露糖转移酶(Och1p)基因、阻断毕赤酵母过度糖基化,获得毕赤酵母过度糖基化缺陷菌株GJK01(ura3、och1)的基础上,通过表达不同物种来源的α-1,2-甘露糖苷酶I(MDSI)的活性区与酵母自身定位信号的融合蛋白,并通过DSA-FACE(基于DNA测序仪的荧光辅助糖电泳)分析筛选报告蛋白HSA/GM-CSF(人血清白蛋白与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白)的糖基结构,发现当编码酿酒酵母α-1,2-甘露糖苷酶(MnsI)基因的内质网定位信号与带有完整C-端催化区的拟南芥MDSI基因融合表达时,毕赤酵母工程菌株能够合成Man5GlcNAc2哺乳动物甘露糖型糖蛋白。这为在酵母体内合成类似于哺乳动物杂合型或复杂型糖基化修饰的糖蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 α-1 2-甘露糖苷酶I Man5GlcNAc2 糖基化 毕赤酵母 甘露糖型
稻瘟病菌一个假定的α-1,2-甘露糖苷酶生物信息学分析 预览
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作者 周洁 王思毅 +2 位作者 林成增 鲁国东 王宗华 《福建农林大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2008年第2期 127-134,共8页
对稻瘟病菌一个假定的α-1,2-甘露糖苷酶MgManI生物信息学进行分析的结果表明,该蛋白与海枣曲霉、桔青霉等丝状真菌的已知α-1,2-甘露糖苷酶(E123.2.1.113)氨基酸序列具有高度同源性,并具有其相同的活性中心位点.基序分析表... 对稻瘟病菌一个假定的α-1,2-甘露糖苷酶MgManI生物信息学进行分析的结果表明,该蛋白与海枣曲霉、桔青霉等丝状真菌的已知α-1,2-甘露糖苷酶(E123.2.1.113)氨基酸序列具有高度同源性,并具有其相同的活性中心位点.基序分析表明,该蛋白可能含有4个N-糖基化位点、3类19个磷酸化位点和12个N-肉豆蔻酰位点.该蛋白的相对分子质量预测为58.2ku,理论等电点pI为5.17,并且为细胞外分泌蛋白,信号肽剪切位点为21A和22S之间.系统发育分析表明:MgManⅠ与丝状真菌中的海枣曲霉、桔青霉α-1,2-甘露糖苷酶之间亲缘关系最近,形成一大类;动物的α-1,2-甘露糖苷酶与植物的α-1,2-甘露糖苷酶分别聚成二大类;酿酒酵母α-1,2-甘露糖苷酶SeManⅠ与丝状真菌不同,单独成为一类.进一步以已知结构的PeManⅠ为模板,通过同源建模得到的三维结构图形基本反映了MgManⅠ的空间构象,为深入研究该蛋白的生化特性和生物学功能奠定了基础. 展开更多
关键词 稻瘟病菌 α-1 2-甘露糖苷酶 生物信息学
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1-脱氧甘露糖野尻霉素诱导人肝癌SMMC7721细胞发生内质网应激 预览
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作者 徐莺莺 陆祎 申宗侯 《复旦学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 437-440,450,共5页
目的探讨人肝癌SMMC7721细胞中1-脱氧甘露糖野尻霉素(1-deoxymannojirimycin,DMJ)对高尔基体中α-甘露糖苷酶Ⅰ活性的抑制作用与内质网应激的关系。方法人肝癌SMMC7721细胞经DMJ诱导后.用RT-PCR和Western blot检测内质网应激中的重... 目的探讨人肝癌SMMC7721细胞中1-脱氧甘露糖野尻霉素(1-deoxymannojirimycin,DMJ)对高尔基体中α-甘露糖苷酶Ⅰ活性的抑制作用与内质网应激的关系。方法人肝癌SMMC7721细胞经DMJ诱导后.用RT-PCR和Western blot检测内质网应激中的重要分子葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、X盒结合蛋白1(X box binding protein 1,XBP1)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologus protein,CHOP)及caspase-12的表达变化。结果GRP78的mRNA和蛋白质表达量升高;XBP1的mRNA发生剪接.蛋白相对分子质量从33000变为54000;CHOP蛋白表达量上调;caspase-12剪切激活。结论DMJ可诱导SMMC7721细胞发生内质网应激。 展开更多
关键词 内质网应激 1-脱氧甘露糖野尻霉素 α-甘露糖苷酶Ⅰ
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