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PM2.5对人Ⅱ型肺泡上皮细胞A549的作用及机制研究
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作者 徐金兰 程婧 马翠卿 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第2期275-280,共6页
随着工业化、城市化的飞速发展,空气污染加剧, PM2.5浓度越来越高,对人类的危害也越来越大。由于多数病原体可以直接进入下呼吸道,所以肺的抗炎作用显得尤为重要。大量的资料显示,Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)是一类具有干细胞潜能、自我更... 随着工业化、城市化的飞速发展,空气污染加剧, PM2.5浓度越来越高,对人类的危害也越来越大。由于多数病原体可以直接进入下呼吸道,所以肺的抗炎作用显得尤为重要。大量的资料显示,Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)是一类具有干细胞潜能、自我更新、参与肺纤维化的多功能细胞。A549是人肺腺癌上皮细胞,其可以合成卵磷脂,并且含有高度不饱和脂肪酸,这对于维持细胞膜磷脂有重要意义。目前, A549细胞被广泛作为Ⅱ型肺泡上皮细胞的体外模型。该文以A549为模型,从PM2.5对A549细胞诱导型一氧化氮合酶合成、各种炎性因子分泌和对细胞自噬和凋亡的影响以及对A549细胞迁移、侵袭能力的增强四个方面展开介绍,就A549在PM2.5作用下的功能机制作一综述。 展开更多
关键词 PM2.5 A549细胞 炎性因子 对A549生理性状的影响
肺癌患者外周血miR-214表达及对肺癌细胞凋亡和多药耐药的影响
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作者 谭川 黄杰 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第11期1073-1077,共5页
目的探讨miR-214在肺癌患者外周血中的表达及其对肺癌细胞存活、凋亡、多药耐药的影响。方法小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者30例为SCLC组,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者30例为NSCLC组,30例体检健... 目的探讨miR-214在肺癌患者外周血中的表达及其对肺癌细胞存活、凋亡、多药耐药的影响。方法小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者30例为SCLC组,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者30例为NSCLC组,30例体检健康者为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测3组外周血miR-214相对表达量。取对数生长期人SCLC H446细胞、人NSCLC A549细胞,人正常肺上皮BEAs-2B细胞,采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞miR-214相对表达量;H446、A549细胞转染miR-214mimics质粒,BEAs-2B细胞不转染miR-214mimics质粒,于转染24h采用CCK-8法检测3组细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein,LRP)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)mRNA相对表达量,Western blot法检测P-gp、LRP、MRP蛋白表达,MTT比色法检测阿霉素、长春新碱、依托泊苷、顺铂、吉西他滨处理48h的半数抑制剂量(the half maximal inhibitory concentration,IC50)。结果SCLC组、NSCLC组、对照组外周血miR-214相对表达量(0.572±0.024、0.711±0.048、1.001±0.001)依次增高(P<0.05);H446细胞、A549细胞、BEAs-2B细胞miR-214相对表达量(0.476±0.078、0.710±0.042、1.000±0.001)依次增高(P<0.05);转染24h,H446细胞、A549细胞、BEAs-2B细胞存活率[(43.5±5.2)%、(73.3±4.5)%、(100.0±0.1)%]依次增高(P<0.05),细胞凋亡率[(18.221±1.721)%、(13.523±1.825)%、(5.296±0.331)%]依次降低(P<0.05);转染24h,A549、H446、BEAs-2B细胞P-gp mRNA相对表达量(0.683±0.047、0.817±0.021、1.002±0.005)、LRP mRNA相对表达量(0.415±0.062、0.678±0.077、1.001±0.002)和MRP mRNA相对表达量(0.502±0.072、0.708±0.049、1.000±0.003)依次增高(P<0.05),P-gp蛋白相对表达量(1.225±0.022、1.763±0.021、2.401±0.032)、MRP蛋白相对表达量(1.325±0.072、1.662±0.068、1.872±0.074)依次增高(P<0.05);LRP蛋白相对表达� 展开更多
关键词 肺癌 miR-214 增殖 凋亡 多药耐药性 H446细胞 A549细胞 BEAS-2B细胞
下调miR-92a对非小细胞肺癌细胞增殖及血管生成因子表达的影响 预览
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作者 汤建华 冯平 +1 位作者 张志华 王布 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期38-42,共5页
目的探讨miR-92a下调对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖及血管生成的影响。方法将NSCLC中A549细胞分为三组培养:A549组(未转染A549细胞)、sc-siRNA组(转染sc-siRNA的A549细胞)、miR-92a-siRNA组(转染miR-92a-si... 目的探讨miR-92a下调对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖及血管生成的影响。方法将NSCLC中A549细胞分为三组培养:A549组(未转染A549细胞)、sc-siRNA组(转染sc-siRNA的A549细胞)、miR-92a-siRNA组(转染miR-92a-siRNA的A549细胞)。分别采用RT-PCR和Western blot检测A549细胞和正常人支气管上皮(human bronchial epithelial,HBE)细胞中miR-92a相对表达量、PTEN、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白相对表达水平。采用活细胞计数法和结晶紫染色实验检测各组A549细胞的增殖能力。结果miR-92a在A549组细胞中的相对表达量高于HBE细胞(P<0.05);A549组细胞中PTEN蛋白表达水平低于HBE细胞(P<0.05),VEGF蛋白表达水平高于HBE细胞(P<0.05);miR-92a-siRNA组细胞中miR-92a相对表达量降低(P<0.05),PTEN蛋白表达水平升高(P<0.05),VEGF蛋白表达水平降低(P<0.05);miR-92a-siRNA组细胞中PI3K和Akt蛋白表达水平均下降(P<0.05);miR-92a-siRNA组细胞数目减少,细胞增殖能力减弱。结论NSCLC中A549细胞的miR-92a表达明显上调,miR-92a基因沉默能明显抑制细胞增殖、血管生成,PTEN和VEGF相关PI3K/Akt信号通路可能在此过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 A549细胞 人支气管上皮细胞 miR-92a 细胞增殖 血管生成
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夏枯草醇提物抑制肿瘤细胞的研究 预览
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作者 杨亚冬 罗涛 +2 位作者 杨耿 徐怡朦 张文元 《医学研究杂志》 2019年第1期62-68,共7页
目的采用水提醇沉法将夏枯草成分分成醇溶出部分和醇沉淀部分,并就这两部分药物对肺癌A549细胞和人肝癌HepG2细胞的增殖、迁移作用进行研究。方法采用80%以上的乙醇浓度对夏枯草水煎液进行醇沉法提取,不同生药浓度的夏枯草醇溶物和醇沉... 目的采用水提醇沉法将夏枯草成分分成醇溶出部分和醇沉淀部分,并就这两部分药物对肺癌A549细胞和人肝癌HepG2细胞的增殖、迁移作用进行研究。方法采用80%以上的乙醇浓度对夏枯草水煎液进行醇沉法提取,不同生药浓度的夏枯草醇溶物和醇沉物处理A549细胞和HepG2细胞,用倒置显微镜观察细胞形态的变化,MTT法检测药物对肿瘤细胞增殖影响,细胞划痕实验检测对细胞迁移的影响。结果MTT检测发现醇沉淀物各浓度抗肿瘤效果呈浓度依赖性,浓度越高,抑制肿瘤细胞增殖的效果越强,浓度<0.25g/ml后基本无抑制作用。醇溶解物组在0.05~1.0g/ml浓度范围内呈“V”字型的抑制作用,在浓度为0.1g/ml时抑制作用最强,<0.05g/ml后基本无抑制作用。细胞形态观察与MTT结果一致,抑制作用越强,细胞圆缩,状态较差,数量少。细胞划痕实验结果发现醇溶物与醇沉物抑制细胞迁移效果呈浓度依赖性,浓度高,抑制迁移效果越强,该结果与MTT检测出现中间某浓度抑制细胞增殖效果最强的结果不一致,且醇溶物对HepG2细胞的抑制迁移效果较A549更强。结论夏枯草各种提取物均可抑制A549细胞和HepG2细胞的增殖和迁移,醇溶物MTT结果显示在一定范围内对A549细胞和HepG2细胞的增殖呈“V”字型的抑制作用。 展开更多
关键词 夏枯草 醇沉法 A549细胞 HEPG2细胞 增殖
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LPS对A549和Hela细胞SPLUNC1蛋白表达的影响 预览
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作者 曹留霞 武涧松 陈洁 《武警医学》 CAS 2019年第9期752-755,759共5页
目的探讨脂多糖(LPS)对人肺腺癌上皮A549细胞和人子宫颈癌上皮Hela细胞短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(short palate,lung and nasal epithelium clone 1,SPLUNC1)蛋白表达的影响。方法将两类细胞各随机分为对照组、实验组,CCK-8法观察LP... 目的探讨脂多糖(LPS)对人肺腺癌上皮A549细胞和人子宫颈癌上皮Hela细胞短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1(short palate,lung and nasal epithelium clone 1,SPLUNC1)蛋白表达的影响。方法将两类细胞各随机分为对照组、实验组,CCK-8法观察LPS与细胞增殖活性的时间-反应和剂量-反应关系,筛选各自的最佳效应浓度和作用时间,以LPS最佳效应浓度和作用时间处理后,免疫组化和免疫荧光定量法检测两类细胞SPLUNC1蛋白相对表达量的变化。结果 LPS对A549细胞的最佳效应浓度为20 mg/L,最佳效应时间为12 h,对Hela细胞的最佳效应浓度为40 mg/L,12~24 h为其最佳效应时间窗。SPLUNC1在两类细胞中均呈阳性表达,LPS处理后表达均显著上调(P <0. 05),两类细胞间比较,LPS处理后Hela细胞SPLUNC1相对表达量高于A549细胞(P <0. 05),较对照的增量值(Δ)也明显大于A549细胞(P <0. 05)。结论 SPLUNC1在宫颈癌细胞中存在表达,可能是肺腺癌和宫颈癌病变中的保护性因子,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1 A549细胞 HELA细胞 肿瘤 发病机制
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雷公藤内酯醇对肺癌荷瘤小鼠髓系抑制性细胞的影响及机制研究 预览
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作者 孙蕾 赵嘉璐 +3 位作者 蓝秀 吕祝庆 黎媛 李伟文 《浙江医学》 CAS 2019年第22期2379-2383,共5页
目的探讨雷公藤内酯醇对肺癌髓系抑制性细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSC)的影响及其分子机制。方法将6~8周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、雷公藤内酯醇组、内质网应激抑制剂(4-PBA)组和4-PBA+雷公藤能内酯醇组4组... 目的探讨雷公藤内酯醇对肺癌髓系抑制性细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSC)的影响及其分子机制。方法将6~8周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、雷公藤内酯醇组、内质网应激抑制剂(4-PBA)组和4-PBA+雷公藤能内酯醇组4组,每组8只。取5×10^6个/ml A549细胞接种于小鼠腋下皮下,建立肺癌移植瘤模型;雷公藤内酯醇组每日腹腔注射0.2ml(浓度为1μg/ml)雷公藤内酯醇+0.4ml 0.9%氯化钠注射液,4-PBA组每日腹腔注射0.4ml(浓度为100μg/ml)4-PBA+0.2ml0.9%氯化钠注射液,4-PBA+雷公藤内酯醇组每日注射0.2ml雷公藤内酯醇和0.4ml 4-PBA,对照组给予腹腔注射等量的0.9%氯化钠注射液。每周监测小鼠的肿瘤体积变化,第21天处死小鼠剥离皮下肿瘤,并测量肿瘤的重量;分离提取脾脏组织细胞,采用流式细胞术分析各组MDSC细胞数量;用流式细胞术分选MDSC,膜联蛋白V/碘化丙啶双染法分析MDSC细胞凋亡,RT-q PCR法分析MDSC中重组人精氨酸酶1(ARG1)、一氧化氮合酶(i NOS);Western blot法分析MDSC中Bcl-2、Bax、CHOP、GRP78和PERK的表达水平。结果与对照组相比,雷公藤内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均明显降低,MDSC比例、ARG1、i NOS m RNA表达均明显下降,MDSC细胞凋亡率、CHOP、GRP78和PERK表达均明显增加(均P<0.05);与雷公藤内酯醇组相比,4-PBA+雷公藤内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均增加,MDSC比例、ARG1、i NOS m RNA均明显增加,细胞凋亡率和CHOP、GRP78和PERK表达均明显降低(均P<0.05);与4-PBA组相比,4-PBA+雷公藤能内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均明显降低(均P<0.05)。结论雷公藤内酯醇对肺癌A549细胞移植瘤具有抑制作用,其机制与雷公藤内酯醇诱发内质网应激抑制MDSC有关。 展开更多
关键词 雷公藤内酯醇 髓系抑制性细胞 内质网应激 A549细胞 肺癌
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白花蛇舌草对A549肺癌干细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 预览
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作者 曾珠 何成诗 +3 位作者 孙剑峰 刘磊 杨秀丽 肖玮 《重庆医学》 CAS 2019年第13期2202-2205,共4页
目的探讨白花蛇舌草对肺癌干细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法诱导培养A549肺癌干细胞球,免疫组织化学检测Sox2、Oct4表达,CCK-8检测白花蛇舌草提取物对细胞增殖的影响,流式细胞检测白花蛇舌草提取物对细胞凋亡率及细胞周期的影响... 目的探讨白花蛇舌草对肺癌干细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法诱导培养A549肺癌干细胞球,免疫组织化学检测Sox2、Oct4表达,CCK-8检测白花蛇舌草提取物对细胞增殖的影响,流式细胞检测白花蛇舌草提取物对细胞凋亡率及细胞周期的影响。结果 A549肺癌干细胞中的CD133阳性率(70.483 30±0.092 92)%,A549细胞中仅为(5.056 70±0.185 83)%。Sox2、Oct4表达在A549细胞及A549肺癌干细胞中均呈阳性,主要在细胞质,在A549肺癌干细胞中染色强度更强。白花蛇舌草能抑制A549肺癌干细胞增殖,且呈时间依赖性(P<0.05);白花蛇舌草使A549肺癌干细胞的细胞凋亡率增加(P<0.05),G1期细胞数目增多(P<0.05)。结论白花蛇舌草能抑制A549肺癌干细胞增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于G1期。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 A549细胞 肺肿瘤 干细胞
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Ursolic Acid Derivatives Induced Apoptosis and Reduces the NF-<i>κ</i>B in Human Lung Adenocarcinoma Cells 预览
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作者 Elaine Carlos Scherrer Ydia Mariele Valadares +8 位作者 Caio Cesar Souza Alves Gabriella Freitas Ferreira Marcela Pereira Le?o Jessica Aline Soares Fernando Sa Silva Alessandra Paula Carli Oswaldo Cardoso Jr. Fabiana Sim?o Machado Sandra Bertelli Ribeiro Castro 《癌症治疗(英文)》 2019年第10期863-876,共14页
Lung cancer is the major cause of death in the neoplastic diseases. In spite of the advances in the chemotherapy, the lung cancer treatments are still complex and costly, being necessary the seeking of new drugs. In t... Lung cancer is the major cause of death in the neoplastic diseases. In spite of the advances in the chemotherapy, the lung cancer treatments are still complex and costly, being necessary the seeking of new drugs. In this context, the ursolic acid (UA) becomes the target of studies that investigate its antitumor potential and, thus, structural modifications can enhance its biological activities. Eight UA semisynthetic derivative compounds (UAD1-8) were synthesized and evaluated their cytotoxic activity against human alveolar adenocarcinoma cells (A549). UAD1, UAD3, UAD5, UAD6 and UAD8 were able to reduce the viability of the A549 cells. Only UAD1 and UAD6 reduced the viability at 24 h, and only UAD3 didn’t reduce the NF-κB expression. The compound UAD1 showed the greater apoptosis induction. Moreover, the compound UAD1 showed better results than UA in all assays. The present study shows, for the first time, the action of these compounds in the apoptotic effect, in the expression of NF-κB and in the A549 cell line. The ursolic acid derivatives showed substantial results in the apoptosis, cytotoxicity and NF-κB inhibition of A549 cells, and further studies are necessary for the development of possible new therapeutic drugs. 展开更多
关键词 Ursolic Acid APOPTOSIS NF-κB A549 Cells Tumoral
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欣力康胶囊对肺癌A549细胞增殖抑制作用机制及有效成分分析
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作者 刘硕 胡笑燊 林洪生 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期613-618,共6页
目的STAT1、STAT3和NF-κB信号通路是多种细胞因子和生长因子在细胞内传递信号的共同途径,其与肿瘤细胞增殖有密切关联.本研究观察欣力康胶囊提取物对A549细胞增殖的影响,同时研究欣力康胶囊对IFN-γ/STAT1、IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB... 目的STAT1、STAT3和NF-κB信号通路是多种细胞因子和生长因子在细胞内传递信号的共同途径,其与肿瘤细胞增殖有密切关联.本研究观察欣力康胶囊提取物对A549细胞增殖的影响,同时研究欣力康胶囊对IFN-γ/STAT1、IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB信号通路的作用并分析其有效成分.方法利用MTT法检测欣力康提取物对A549细胞株增殖的影响;利用稳定转染了STAT1/STAT3-luciferase和NF-κB-luciferase报告基因质粒的细胞,分别检测欣力康提取物、欣力康10种药材提取物(丹参、当归、郁金、半枝莲、蛇莓、龙葵、黄芪、雪莲花、红参、轮环藤根)和10种药材对应单体成分(隐丹参酮、阿魏酸、姜黄素、野黄芩苷、齐墩果酸、澳洲茄碱、黄芪甲苷、秋水仙碱、人参皂苷、木兰花碱)对IFN-γ/STAT1、IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB信号通路的作用.结果欣力康提取物呈浓度依赖性的抑制A549细胞增殖,0.1、0.5、1、2.5和5mg/mL处理A549细胞,细胞存活率分别为(103.51±10.92)%、(78.14±6.03)%、(65.73±5.78)%、(40.41±9.20)%和(5.89±5.04)%,F=85.25,P<0.001;欣力康提取物对3条信号通路均有抑制作用,0.5、1和5mg/mL提取物对STAT1抑制率分别为(50.90±5.89)%、(70.24±2.39)%和(94.79±7.53)%(F=36.98,P<0.001),对STAT3抑制率分别为(30.39±3.86)%、(48.39±5.64)%和(97.40±5.34)%(F=41.23,P<0.001),对NF-κB抑制率分别为(-16.41±3.67)%、(1.01±3.85)%和(54.60±8.32)%(F=41.23,P<0.001);丹参、轮环藤根、半枝莲、蛇莓、雪莲花和龙葵提取物对3条信号通路均有不同程度抑制作用,10种单体成分对3条信号通路的抑制作用大部分都不同于其对应药材提取物作用.结论欣力康胶囊能够抑制A549细胞增殖,推断其作用机制可能与抑制IFN-γ/STAT1、IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB信号通路有关,其中丹参、轮环藤根、半枝莲、蛇莓、雪莲花和龙葵药材可能起主要作用,但其活性并非单一化合物,而是多种化合物成分共同作用� 展开更多
关键词 欣力康胶囊 A549细胞 信号通路 有效成分 协同作用
艾叶挥发油对A549细胞的抑制作用 预览
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作者 丁圆平 刘靖怡 +3 位作者 田洋 李艳丽 吴明哲 赵志鸿 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2063-2068,共6页
目的研究艾叶挥发油对A549细胞的抑制作用。方法 MTT法检测挥发油对A549细胞的抗增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。皮下注射A549细胞建立肺癌模型后,裸鼠随机分为阴性对照组、5-氟尿嘧啶组(10 mg/kg)及艾叶挥发油低、中、... 目的研究艾叶挥发油对A549细胞的抑制作用。方法 MTT法检测挥发油对A549细胞的抗增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期。皮下注射A549细胞建立肺癌模型后,裸鼠随机分为阴性对照组、5-氟尿嘧啶组(10 mg/kg)及艾叶挥发油低、中、高剂量组(57.5、115、230 mg/kg),考察挥发油对肿瘤生长及体质量的影响。HE染色观察病理组织。结果挥发油明显抑制细胞增殖,并呈浓度依赖性。424.8μg/mL挥发油处理细胞48 h后,细胞凋亡率最高(67.1%),G0/G1期细胞比例降低,G2/M期细胞比例无明显变化,S期细胞比例增加。与阴性对照组比较,挥发油组肿瘤质量和体积显著降低(P<0.05,P<0.01),裸鼠体质量无明显变化(P>0.05)。结论艾叶挥发油可阻滞A549细胞于S期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,而且安全性高。 展开更多
关键词 艾叶挥发油 A549细胞 增殖 凋亡
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香附挥发油诱导A549细胞凋亡作用 预览
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作者 宋必卫 杨轶安 《浙江工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期92-97,共6页
超临界CO2装置提取香附挥发油(ACA),研究ACA体外诱导A549细胞凋亡作用及机制。采用MTT法和LDH活性测定确定ACA杀伤A549量效和时效关系;Annexin V-EGFP/PI双重荧光染色观察ACA致细胞凋亡。测定细胞内Ca^2+,MDA和ATP浓度及SOD活性,罗丹明1... 超临界CO2装置提取香附挥发油(ACA),研究ACA体外诱导A549细胞凋亡作用及机制。采用MTT法和LDH活性测定确定ACA杀伤A549量效和时效关系;Annexin V-EGFP/PI双重荧光染色观察ACA致细胞凋亡。测定细胞内Ca^2+,MDA和ATP浓度及SOD活性,罗丹明123(Rh123)检测线粒体膜电位(Δψ)分析其诱导凋亡的机制。结果显示:与阳性对照药顺铂(cisplatin,DDP)相比较,ACA诱导肺癌细胞A549凋亡作用效能强大、起效迅速。ACA诱导细胞钙超载、增加氧化损伤,抑制能量代谢致线粒体结构和功能受损,最终使线粒体凋亡通路激活诱导A549细胞凋亡。ACA在抗肺癌药物开发方面具有良好的前景。 展开更多
关键词 挥发油 肺癌 细胞凋亡 A549细胞 线粒体通路
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激动线粒体乙醛脱氢酶2可降低高糖诱导的A549细胞炎性小体生成
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作者 王文连 曹瑞平 +4 位作者 林欣 刘贤莉 徐洪宝 黄礼年 胡俊锋 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期458-462,467共6页
目的探讨激动线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对高糖诱导的A549细胞炎性小体生成的影响。方法25 mmol/L高糖完全培养基体外培养肺泡上皮A549细胞,实验分为4组:对照组,ALDH2激动剂20μmol/L Alda-1组,ALDH2阻断剂60μ... 目的探讨激动线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对高糖诱导的A549细胞炎性小体生成的影响。方法25 mmol/L高糖完全培养基体外培养肺泡上皮A549细胞,实验分为4组:对照组,ALDH2激动剂20μmol/L Alda-1组,ALDH2阻断剂60μmol/L Daidzin组,20μmol/L Alda-1+60μmol/L Daidzin组。干预处理24 h后,四甲基噻唑盐(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测细胞增殖活力,二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)荧光染色检测细胞活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测ALDH2及炎性小体主要成员核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)蛋白的表达。结果与对照组相比,Alda-1特异性激动ALDH2后,细胞增殖活力无明显变化,细胞ROS水平和细胞迁移率均明显降低(P<0.05),ALDH2蛋白表达增加(P<0.05),炎性小体主要成员NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05);Daidzin特异性阻断ALDH2后,细胞增殖活力、细胞ROS水平、细胞迁移率、ALDH2蛋白和ASC蛋白表达无明显变化,NLRP3蛋白表达明显升高(P<0.05),caspase-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与Alda-1组相比,Alda-1+Daidzin组细胞增殖活力及ROS水平无明显变化,细胞迁移率明显增高(P<0.05),ALDH2蛋白表达降低(P<0.05),NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显增高(P<0.05)。结论提高ALDH2在肺泡上皮A549细胞中的表达可减轻高糖诱导的细胞炎症反应,可能是通过降低细胞ROS水平、降低炎性小体的表达来实现。 展开更多
关键词 A549细胞 线粒体乙醛脱氢酶2 炎性小体 高糖
长链非编码RNA肿瘤抑制因子对阿霉素诱导的A549细胞凋亡的影响 预览
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作者 张延慧 王涛 +3 位作者 刘靖 刘翠云 李培峰 王昆 《转化医学杂志》 2019年第2期71-74,84共5页
目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)对阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的肺癌细胞系A549细胞凋亡的影响。方法采用高通量lncRNAs基因芯片技术,筛选出2μmol/L的DOX处理组中差异表达的lncRNAs,同时通过实时荧光定量PCR技术... 目的探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)对阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的肺癌细胞系A549细胞凋亡的影响。方法采用高通量lncRNAs基因芯片技术,筛选出2μmol/L的DOX处理组中差异表达的lncRNAs,同时通过实时荧光定量PCR技术进行复筛,得到差异表达最显著的lncRNA,lncZMYM6-2-1,我们命名为lncRNA肿瘤抑制因子(tumor inhibitory factor,TIF)。进一步比较19对肺癌组织和癌旁组织样本中lncRNA TIF的表达差异。通过MitoTracker线粒体染色法检测lncRNA TIF对细胞线粒体分裂与融合的影响,通过流式细胞仪检测lncRNA TIF对细胞凋亡的影响。结果(1)通过基因芯片与实时荧光定量PCR检测发现,与不做处理的对照组相比,DOX处理组中lncRNA TIF表达显著上调(n=3;t=6. 4,P<0. 01);(2)与癌旁组织比较lncRNA TIF在肺癌组织样本中低表达(n=19;t=18. 5,P <0. 01);(3)敲低lncRNA TIF能够抑制DOX引起的线粒体分裂和细胞凋亡。结论化疗药物DOX能够诱导lncRNA TIF的表达进而诱导细胞凋亡,其机制可能通过促进线粒体分裂来促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 长链非编码RNA A549细胞 线粒体分裂 细胞凋亡
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镰形棘豆黄酮含药血清对人肺癌A549细胞活力、凋亡及周期的影响
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作者 牛俐燃 李冠聪 +2 位作者 张婉婷 杨光明 潘扬 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期790-795,共6页
目的研究镰形棘豆黄酮提取物(OFF)含药血清对人肺腺癌A549细胞活力、细胞形态学、凋亡率及增殖周期的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:空白对照组,阳性对照组(环磷酰胺CTX,40 mg·kg-1),OFF低剂量组(0.587 g·kg-1)、中剂量组(1.... 目的研究镰形棘豆黄酮提取物(OFF)含药血清对人肺腺癌A549细胞活力、细胞形态学、凋亡率及增殖周期的影响。方法将SD大鼠随机分为5组:空白对照组,阳性对照组(环磷酰胺CTX,40 mg·kg-1),OFF低剂量组(0.587 g·kg-1)、中剂量组(1.174 g·kg-1)、高剂量组(2.348 g·kg-1);早晚各给药1次,连续4 d,制备含药血清。采用CCK-8法检测细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期。结果在12、24、48 h给药时间内,OFF含药血清各剂量组的细胞活力随剂量递增呈抑制增强效果,且在24 h抑制作用最强,48 h抑制作用减弱,但与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P <0.001);倒置显微镜下观察, OFF含药血清作用24 h后,各剂量组的A549细胞均生长缓慢,细胞呈不规则形态。与空白对照组比较,OFF含药血清低、中、高剂量组的凋亡细胞比例上升,凋亡率分别为47.91%、55.09%、60.37%,差异均有统计学意义(P <0.001);OFF各剂量组的细胞周期中,G0/G1期细胞比例明显上升(P <0.01),S期(P<0.05,OFF高剂量组)及G2期(P<0.01,OFF中、高剂量组)比例下降。结论OFF含药血清对A549人肺腺癌细胞活力有较好的抑制作用,并能够诱导细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G0/G1期。 展开更多
关键词 镰形棘豆 黄酮提取物 含药血清 A549细胞 细胞活力 细胞凋亡 细胞周期
华蟾素联合多柔比星通过Fas/线粒体通路促进肺癌A549细胞凋亡 预览
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作者 董伯升 徐克友 +1 位作者 左彩莹 张镇 《临床肺科杂志》 2019年第1期121-125,143共6页
目的探究华蟾素联合多柔比星对肺癌A549细胞凋亡及Fas/线粒体通路的影响。方法用不同浓度华蟾素(0、0.1、0.2、0.4、0.8μg/mL)、不同浓度多柔比星(0、0.25、0.5、1.0、2.0μg/mL)或联合用药(多柔比星0.5μg/mL分别与华蟾素0、0.1、0.2... 目的探究华蟾素联合多柔比星对肺癌A549细胞凋亡及Fas/线粒体通路的影响。方法用不同浓度华蟾素(0、0.1、0.2、0.4、0.8μg/mL)、不同浓度多柔比星(0、0.25、0.5、1.0、2.0μg/mL)或联合用药(多柔比星0.5μg/mL分别与华蟾素0、0.1、0.2、0.4、0.8μg/mL联合使用)处理A549细胞。四甲基偶氮唑(MTT)法检测华蟾素联合多柔比星对A549细胞增殖的影响;流式细胞仪检测华蟾素联合多柔比星对A549细胞凋亡的影响;蛋白质印迹(Westernblot)技术检测A549细胞Fas/线粒体凋亡通路相关蛋白的表达变化。结果MTT结果显示,华蟾素和多柔比星对A549细胞均具有增殖抑制作用(P<0.05),且呈时间-剂量依赖关系。0.5μg/mL多柔比星分别与0.1、0.2、0.4、0.8μg/mL华蟾素联合处理下,A549细胞的增殖抑制率呈时间-剂量依赖性。②流式细胞仪结果显示,与空白对照组比较,单用0.4μg/mL华蟾素或0.5μg/mL多柔比星处理后A549细胞凋亡率显著上升(P<0.05);与单独用药比较,两药联合处理后A549细胞凋亡率显著上升(P<0.05)。③Westernblot结果显示,与空白对照组比较,单用0.4μg/mL华蟾素或0.5μg/mL多柔比星处理后A549细胞Fas、FasL、TNF-R1、Bax及Cyt-c表达显著上调、Bcl-2表达显著下调、裂解型Caspase-3/8/9显著增多(P<0.05);与单独用药比较,两药联合处理后A549细胞Fas、FasL、TNF-R1、Bax及Cyt-c表达显著上调、Bcl-2表达显著下调、裂解型Caspase-3/8/9显著增多(P<0.05)。结论华蟾素联合多柔比星可显著促进肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与Fas/线粒体凋亡通路强化有关。 展开更多
关键词 肺癌 A549细胞 华蟾素 多柔比星 Fas信号通路 线粒体信号通路
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白藜芦醇抑制TGF-β1/Smad3信号通路对人肺上皮细胞A549 EMT调控的影响及机制 预览
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作者 张云珍 方海燕 +3 位作者 余红 饶珊珊 石喆 邵松军 《广东医学》 CAS 2019年第15期2130-2134,共5页
目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对TGF-β1诱导的人肺上皮细胞(A549细胞株)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的抑制作用及其机制。方法本实验设立对照组、转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)... 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对TGF-β1诱导的人肺上皮细胞(A549细胞株)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的抑制作用及其机制。方法本实验设立对照组、转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)组(TGF-β1组)、TGF-β1+Res组(TGF-β1+Res组)。甲基偶氮唑盐比色法(MTT)确定白藜芦醇的干预浓度;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定不同组细胞蛋白的表达变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测钙黏蛋白E(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)mRNA的表达。结果 TGF-β1刺激后,与对照组相比,A549细胞的增殖能力明显增强;总的Smad3蛋白(t-Smad3)表达无变化,但磷酸化的Smad3蛋白(p-Smad3)表达增多;上皮细胞标志蛋白E-cadherin表达减少(P<0.05),间质细胞标志蛋白α-SMA表达明显增多(P<0.05);白藜芦醇干预后,t-Smad3蛋白表达几乎无变化,p-Smad3蛋白表达减少;E-cadherin蛋白表达增加(P<0.05),α-SMA蛋白表达减少(P<0.05);RT-qPCR的检测结果与Western blot结果一致。结论白藜芦醇通过阻断TGF-β1/Smad3信号通路转导,抑制了TGF-β1诱导的人肺上皮细胞A549的增殖及上皮间质转化。 展开更多
关键词 白藜芦醇 A549细胞 上皮间质转化 TGF-β1/Smad3信号通路
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干扰UCA1及抑制miR-185-5p对非小细胞肺癌β-Catenin通路的活化、自噬和存活影响
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作者 杨雁 刘行仁 金钊 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期157-163,共7页
目的探究在非小细胞肺癌中,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)尿路上皮癌抗原1(urothelial carcinoma associated 1,UCA1)敲降miR-185-5p对β-Catenin通路的影响。方法选取非小细胞肺癌A549细胞为研究材料,设置A549空白对照组... 目的探究在非小细胞肺癌中,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)尿路上皮癌抗原1(urothelial carcinoma associated 1,UCA1)敲降miR-185-5p对β-Catenin通路的影响。方法选取非小细胞肺癌A549细胞为研究材料,设置A549空白对照组、sh-scramble阴性对照组、sh-UCA1干扰组、miR-185 inhibitor组和sh-UCA1+inhibitor组。Western blot验证体系中增殖、凋亡和自噬相关分子表达;qRT-PCR鉴定体系中lncRNA UCA1和miR-185-5p的表达;生物信息学软件和荧光素酶实验检测lncRNA UCA1和miR-185-5p之间结合性。BrdU染色鉴定细胞增殖,免疫荧光染色检测细胞中LC3~+细胞含量。结果在A549细胞中,lncRNA UCA1干扰后,UCA1表达量显著下降并促进miR-185-5p表达,有效抑制肺癌细胞增殖和自噬,促进凋亡发生(P<0.01);经生物信息学和双荧光素酶报告系统验证lncRNA UCA1和miR-185-5p有较强结合性;并进一步验证lncRNA UCA1可以有效抑制β-Catenin/TCF-4及Beclin 1和LC3Ⅱ表达,降低miR-185-5p对肺癌细胞增殖和自噬效果,减少细胞内LC3含量(P<0.01)。结论 lncRNA UCA1干扰后,可以有效降低UCA1对miR-185-5p的抑制效果,进而解除β-Catenin/TCF-4、Beclin 1和LC3Ⅱ受到的抑制作用,从而减少肺癌细胞自噬发生和减缓增殖。 展开更多
关键词 长链非编码RNA UCA1 miR-185-5p A549肺癌细胞 Β-CATENIN
桦褐孔菌诱导肺癌细胞周期阻滞和凋亡的研究 预览
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作者 陈晨 李岩 +2 位作者 卓勤 霍军生 万丽葵 《中国食物与营养》 2019年第9期79-82,共4页
目的:研究桦褐孔菌诱导肺癌细胞周期阻滞和凋亡的作用,为桦褐孔菌在抗肿瘤方面的应用提供科学依据。方法:将不同浓度的桦褐孔菌与人肺癌A549细胞共同培养后,采用CCK-8法检测细胞存活率,使用流式细胞技术检测细胞周期分布和细胞凋亡率的... 目的:研究桦褐孔菌诱导肺癌细胞周期阻滞和凋亡的作用,为桦褐孔菌在抗肿瘤方面的应用提供科学依据。方法:将不同浓度的桦褐孔菌与人肺癌A549细胞共同培养后,采用CCK-8法检测细胞存活率,使用流式细胞技术检测细胞周期分布和细胞凋亡率的变化。结果:桦褐孔菌能够抑制A549细胞的生长,并诱导其凋亡。浓度为2、4mg/mL的桦褐孔菌液作用于A549细胞48h后,与对照组相比,细胞存活率分别显著下降至83.32%和69.27%(P<0.05,对照组为92.11%),早期凋亡率分别显著增至6.47%和8.07%(P<0.01,对照组为1.98%),总凋亡率显著增至14.27%和27.54%(P<0.05,对照组为5.91%),晚期凋亡率增至7.8%(P>0.05)和19.48%(P<0.01,对照组为3.94%)。细胞周期检测结果显示,与对照组相比,4mg/mL桦褐孔菌与A549细胞孵育24h后,G 2/M期细胞显著增加至22.12%(P<0.01,对照组为12.5%);孵育48h后,G 0/G 1期显著增加至68.87%(P<0.01,对照组为59.87%)。结论:桦褐孔菌能够诱导A549细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G 0/G 1期以及G 2/M期。 展开更多
关键词 桦褐孔菌 A549细胞 凋亡 细胞周期
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五味子乙素对香烟烟雾提取物和脂多糖损伤的肺上皮细胞干预作用研究 预览
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作者 胡素珍 黎宛妍 +2 位作者 敖然 张大鹏 张志敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期30-34,共5页
目的:观察五味子乙素(Sch B)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期细胞模型的影响,并初步探讨其作用机制。方法:用香烟烟雾提取物(CSE)联合脂多糖(LPS)作用于肺上皮细胞株A549,制备COPD急性加重期体外模型,并给予相应浓度的五味子乙素进... 目的:观察五味子乙素(Sch B)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期细胞模型的影响,并初步探讨其作用机制。方法:用香烟烟雾提取物(CSE)联合脂多糖(LPS)作用于肺上皮细胞株A549,制备COPD急性加重期体外模型,并给予相应浓度的五味子乙素进行干预,通过MTT法测定各组细胞存活率、RT-PCR法测定细胞炎症因子白细胞介素8(IL-8)、环氧合酶2(COX-2)的mRNA水平;ELISA法测定细胞上清中IL-8、COX-2水平;Western blot法测定细胞磷酸化NF-κB蛋白水平。结果:4%CSE联合0.1μg/ml LPS作用24 h能够促进肺上皮细胞增殖,炎症因子表达明显上升,给予Sch B能够明显抑制CSE联合LPS对细胞的增殖作用,改善细胞炎症状态;降低损伤细胞IL-8、COX-2 mRNA表达水平;减少细胞上清中IL-8、COX-2含量;降低细胞中磷酸化NF-κB的蛋白表达水平。结论:Sch B可改善CSE联合LPS引起的肺上皮细胞炎症,其作用机制可能与抑制肺上皮细胞增殖,抑制炎症因子表达,发挥抗炎作用有关。该研究为Sch B应用于COPD急性加重期的临床治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 五味子乙素 慢性阻塞性肺疾病 香烟烟雾提取物 脂多糖 A549细胞
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PI3K/Akt通路在缺氧活化钙敏感受体介导的A549细胞转移中的作用 预览
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作者 李光伟 王珺 +5 位作者 肖薇 金莉 李波 赵宇 张宁宁 汪娜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期776-781,共6页
目的 探讨PI3K/Akt信号通路在缺氧活化钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)介导的A549及A549/DDP细胞转移中的作用。方法 将处于对数生长期的A549及A549/DDP细胞随机分为对照组、缺氧组、缺氧+GdCl 3(CaSR激动剂)组、缺氧+NPS214... 目的 探讨PI3K/Akt信号通路在缺氧活化钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)介导的A549及A549/DDP细胞转移中的作用。方法 将处于对数生长期的A549及A549/DDP细胞随机分为对照组、缺氧组、缺氧+GdCl 3(CaSR激动剂)组、缺氧+NPS2143(CaSR抑制剂)组、缺氧+LY294002(PI3K通路抑制剂)+GdCl 3组。应用Western blot分析不同处理情况下,CaSR、MMP-2及p-Akt蛋白在A549、A549/DDP细胞的表达水平;采用细胞划痕及Transwell小室方法,检测不同处理因素对细胞迁移和侵袭能力的影响;应用ELISA法,分析不同处理因素对A549及A549/DDP细胞分泌MMP-2蛋白的影响。结果 与对照组比较,缺氧能够增强A549及A549/DDP细胞CaSR的表达,增强细胞迁移能力,提高细胞及培养液中MMP-2蛋白表达水平、促进Akt蛋白的磷酸化,NPS2143能减弱缺氧的作用,GdCl 3放大缺氧的作用,而LY294002抑制缺氧和GdCl 3的上述作用。结论 缺氧活化CaSR促进A549及A549/DDP细胞转移,其机制可能涉及PI3K/Akt通路。 展开更多
关键词 钙敏感受体 A549细胞 缺氧 转移 磷脂酰肌醇-3激酶 磷酸化AKT
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