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自噬基因ATG7、ATG12在成人急性淋巴细胞白血病骨髓单个核细胞中的表达及意义
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作者 杨秀丽 唐庆华 于洋 《武汉大学学报:医学版》 CAS 2019年第2期239-242,共4页
目的:探讨自噬基因ATG7、ATG12在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)骨髓单个核细胞中的表达及意义。方法:收集2015年1-12月在我院确诊的成人ALL患者骨髓标本80例,将其分为初治组42例,缓解组25例,难治复发组13例,选取同期非肿瘤性疾病患者骨... 目的:探讨自噬基因ATG7、ATG12在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)骨髓单个核细胞中的表达及意义。方法:收集2015年1-12月在我院确诊的成人ALL患者骨髓标本80例,将其分为初治组42例,缓解组25例,难治复发组13例,选取同期非肿瘤性疾病患者骨髓标本30例作为对照组,应用淋巴细胞分离液分离出骨髓单个核细胞,经单丹磺酰尸染色后使用流式细胞仪检测细胞自噬率,使用RT-PCR技术检测自噬基因ATG7和ATG12mRNA的表达水平。结果:流式细胞仪检测结果显示,初治组、难治复发组的自噬率显著高于对照组的自噬率(P<0. 05),缓解组的自噬率与对照组相比无显著性差异(P>0. 05),难治复发组的自噬率显著高于缓解组(P<0. 05)。RT-PCR检测结果显示,初治组、难治复发组的ATG7 mRNA和ATG12 mRNA的相对表达量显著高于对照组(P<0. 05),缓解组的ATG7 mRNA和ATG12 mRNA的相对表达量与对照组相比无显著性差异(P>0. 05),难治复发组的ATG7 mRNA和ATG12 mRNA的相对表达量显著高于缓解组(P<0. 05)。结论:成人ALL骨髓单个核细胞的自噬活性增强,自噬基因ATG7、ATG12 mRNA表达上调,提示自噬基因ATG7、ATG12激活诱导的自噬活性增强可能与成人ALL的发生、发展和复发有关。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 成人 骨髓单个核细胞 ATG7 ATG12
自噬相关蛋白在2型糖尿病大鼠胰腺组织中的变化 预览
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作者 杨雯雯 魏巍 张丽 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第6期739-742,747共5页
目的通过动物实验探讨细胞自噬与糖尿病的可能相关性。方法将6只SPF级雄性SD大鼠适应性喂养3 d,随机分成正常组和模型组;正常组喂以常规饲料,模型组给予高糖高脂饲料,喂养4周;4周后隔夜空腹给予模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/... 目的通过动物实验探讨细胞自噬与糖尿病的可能相关性。方法将6只SPF级雄性SD大鼠适应性喂养3 d,随机分成正常组和模型组;正常组喂以常规饲料,模型组给予高糖高脂饲料,喂养4周;4周后隔夜空腹给予模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg,1周后再次腹腔注射30 mg/kg,正常组注射相应体积的生理盐水。模型组STZ注射4周后大鼠禁食,剪尾取血,测量空腹血糖(FBG),FBG>7.8 mmol/L为糖尿病诊断标准。模型构建成功后处死正常组和模型组,取胰腺组织采用蛋白免疫印迹法检测自噬基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬相关蛋白7(Atg7)和自噬相关蛋白Beclin-1和P62蛋白(sequestosome-1蛋白)表达水平,采用免疫组织化学法检测LC3和Beclin-1蛋白表达量。结果与正常组相比,WB法检测提示模型组大鼠胰腺组织LC3、Atg7和Beclin-1表达量增加(t=-39.984,-39.049,-59.157,P均<0.01),P62蛋白表达水平较正常组明显降低(t=90.466,P<0.01),免疫组织化学法检测提示LC3和Beclin-1蛋白表达量均增加(t=14.561,7.342,P均<0.01)。结论细胞自噬功能的紊乱可能导致糖尿病的发生。 展开更多
关键词 糖尿病 自噬基因微管相关蛋白1轻链3(LC3) 自噬相关蛋白7(Atg7) 自噬相关蛋白Beclin-1
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miR-17-5p靶向自噬相关蛋白ATG7调控巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染作用的研究
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作者 洪丹彤 张帆 +5 位作者 王淑娥 王红霞 刘昆梅 徐广贤 霍正浩 郭乐 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1-8,共8页
目的:通过研究miR-17-5p对自噬相关基因ATG7的靶向调控机制和对细胞自噬的作用,探究miR-17-5p在结核分枝杆菌介导的自噬途径中的作用及其机制。方法:生物信息学分析得到miR17-5p的靶基因ATG7,通过成功构建载体ATG7野生型(pMirGLO-ATG7-3... 目的:通过研究miR-17-5p对自噬相关基因ATG7的靶向调控机制和对细胞自噬的作用,探究miR-17-5p在结核分枝杆菌介导的自噬途径中的作用及其机制。方法:生物信息学分析得到miR17-5p的靶基因ATG7,通过成功构建载体ATG7野生型(pMirGLO-ATG7-3'UTR-WT)和突变型,利用双萤光素酶报告系统、Western blot验证miR-17-5p和ATG7的靶向关系,同时构建结核分枝杆菌(H37Ra)感染的人源性THP-1巨噬细胞模型,将做不同处理的细胞分为三组:miR-17-5p mimics、miR-17-5p inhibitor、miR-17-5p nc。通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测H37Ra感染对miR-17-5p表达量的影响,并且进一步通过Western blot、免疫荧光观察检测LC3蛋白的表达量和自噬小体的数量。结果: MTB感染能够引起miR-17-5p的下调,随着感染复数的增加有明显的降低。而生物信息学预测结果显示miR-17-5p与ATG7具有靶向性,双萤光素酶报告实验、Western blot验证miR-17-5p能够和ATG7靶向结合,并对其进行负调控。进一步通过Western blot、免疫荧光观察发现miR-17-5p mimics组LC3Ⅱ的表达下调,自噬小体表达降低,而miR-17-5p inhibitor组相反。其中对H37Ra感染组与未感染组之间比较,ATG7和LC3Ⅱ蛋白表达明显增强。结论: miR-17-5p直接靶向结合ATG7 3'UTR抑制自噬,在巨噬细胞抗MTB过程中发挥作用。 展开更多
关键词 自噬 结核分支杆菌 miR-17-5p ATG7
晚发散发性帕金森病与自噬相关基因Atg7 rs2606757位点基因多态性的关联研究
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作者 赵西耀 陈煜森 +2 位作者 王力 李向新 陈霄仪 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期10-13,共4页
目的探讨晚发散发性帕金森病(PD)与自噬相关基因Atg7基因rs2606757位点多态性的关联。方法在124例晚发散发性PD患者(病例组)和同期105例年龄、性别匹配的健康体检者(对照组)中,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及对... 目的探讨晚发散发性帕金森病(PD)与自噬相关基因Atg7基因rs2606757位点多态性的关联。方法在124例晚发散发性PD患者(病例组)和同期105例年龄、性别匹配的健康体检者(对照组)中,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及对部分标本基因测序的方法检测Atg7基因rs2606757位点的基因型频率,并分析其基因型及等位基因频率在两组中的分布特点。结果病例组和对照组AA基因型频率分别为34.7%(43/124)和53.3%(56/105),(χ^2=8.063,P=0.005),OR值为0.465(95%CI:0.273~0.791)。性别分层分析发现携带rs2606757 AA基因型的男性发生晚发散发性PD的风险降低[病例组33.3%(23/69)比对照组53.2%(33/62)](χ^2=5.280,P=0.022),OR值为0.439(95%CI:0.217~0.891)。Logistics回归分析发现,两组间Atg7基因rs2606757位点AA基因型频率差异有统计学意义(P=0.004),OR值为2.210(95%CI:1.289~3.789)。结论Atg7基因rs2606757位点AA基因型可能与男性晚发散发性PD患病风险降低有关。 展开更多
关键词 自噬 Atg7基因 多态性单核昔酸 帕金森病
lncRNA PVT1促进卵巢癌细胞自噬相关机制研究
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作者 刘冰 郑明男 +2 位作者 刘立峰 张斌 曲竞 《解剖科学进展》 2019年第1期4-7,共4页
目的探究长链非编码RNA PVT1对卵巢癌细胞自噬的影响及其调控机制。方法 Real-timePCR检测PVT1在卵巢癌组织样本中表达情况及PVT1在卵巢癌细胞株中的表达;免疫荧光实验和Western blot检测过表达PVT1对卵巢癌细胞自噬水平的影响;Western ... 目的探究长链非编码RNA PVT1对卵巢癌细胞自噬的影响及其调控机制。方法 Real-timePCR检测PVT1在卵巢癌组织样本中表达情况及PVT1在卵巢癌细胞株中的表达;免疫荧光实验和Western blot检测过表达PVT1对卵巢癌细胞自噬水平的影响;Western blot用于研究过表达PVT1对自噬相关蛋白ATG7表达的影响;利用共转染实验验证PVT1通过上调ATG7从而影响自噬水平。结果 Real-time PCR结果表明卵巢癌组织中PVT1的表达水平高于正常组织,各卵巢癌细胞系(ES2、OVCAR3、A2780)中PVT1表达高于正常卵巢细胞系(HOSEpiC)。Western blot和免疫荧光实验结果表明,与对照组相比,过表达PVT1能增加自噬标志蛋白LC3II/LC3I比例,能够显著促进卵巢癌细胞的自噬并通过上调ATG7的表达促进细胞自噬的发生。结论 lncRNA PVT1能够上调ATG7表达,促进卵巢癌细胞自噬的发生,有望成为卵巢癌新的治疗靶点。 展开更多
关键词 卵巢癌 lncRNA PVT1 自噬 ATG7
miR-17在动脉粥样硬化中下调ATG7蛋白水平抑制巨噬细胞的自噬功能 预览
6
作者 林庚海 阮发晖 +2 位作者 陈劲松 庄金龙 范伟伟 《医学研究杂志》 2018年第1期62-65,164共5页
目的 在动脉粥样硬化患者的血液中检测自噬相关miRNA的水平变化,探究差异miRNA是否参与巨噬细胞的自噬过程,并影响巨噬细胞的凋亡及炎症表达。方法 在动脉粥样硬化患者的血液中,用荧光定量PCR的方法检测miRNA的水平。在转染miR-17后... 目的 在动脉粥样硬化患者的血液中检测自噬相关miRNA的水平变化,探究差异miRNA是否参与巨噬细胞的自噬过程,并影响巨噬细胞的凋亡及炎症表达。方法 在动脉粥样硬化患者的血液中,用荧光定量PCR的方法检测miRNA的水平。在转染miR-17后,通过蛋白质免疫印迹的方法检测巨噬细胞中ATG7蛋白以及自噬标志物LC3Ⅱ表达。同时,使用MTT实验检测转染miR-17后双氧水诱导巨噬细胞凋亡的改变,通过荧光定量PCR检测炎性因子水平探究转染miR-17后巨噬细胞的炎症表达。结果 在动脉粥样硬化患者的血液中,miR-17的水平特异升高。而转染miR-17后,巨噬细胞中miR-17靶向蛋白ATG7和自噬标志物LC3Ⅱ表达下降。miR-17在巨噬细胞中的升高同时促进了双氧水诱导的细胞凋亡,并增强了TNF-α等炎性因子的表达。结论 miR-17水平在动脉粥样硬化患者的血液中特异升高,并在巨噬细胞通过靶向ATG7介导细胞自噬水平降低,进而增强巨噬细胞的炎症表达并促进其凋亡。 展开更多
关键词 miR~17 自噬 ATG7蛋白 巨噬细胞 动脉粥样硬化
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白花丹醌对肝癌细胞SMMC-7721凋亡和自噬的影响 预览 被引量:1
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作者 林宇宁 王声善 +5 位作者 吕贝贝 马静 陈永欣 钟静 刘雪梅 韦燕飞 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1419-1424,共6页
目的 研究白花丹醌对肝癌细胞SMMC-7721凋亡和自噬的影响。方法 MTT法检测白花丹醌对SMMC-7721细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞凋亡与自噬的形态变化;免疫荧光检测自噬蛋白LC3的变化;qPCR法检测自噬基因Beclin1、Atg7、Atg5mRNA的变化;... 目的 研究白花丹醌对肝癌细胞SMMC-7721凋亡和自噬的影响。方法 MTT法检测白花丹醌对SMMC-7721细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞凋亡与自噬的形态变化;免疫荧光检测自噬蛋白LC3的变化;qPCR法检测自噬基因Beclin1、Atg7、Atg5mRNA的变化;Westernblot检测自噬蛋白LC3、Beclin1、Atg7、Atg5的表达水平。结果 白花丹醌对SMMC-7721细胞增殖有抑制作用,且呈剂量-时间依赖关系;透射电镜下,白花丹醌组细胞凋亡形态明显,并出现自噬体;免疫荧光显示,白花丹醌处理后细胞LC3蛋白的表达上升;qPCR结果表明白花丹醌组自噬基因Beclin1、Atg7、Atg5mRNA的表达增加;Westernblot提示白花丹醌分别与凋亡抑制剂Z-VAD-FMK和自噬抑制剂3-MA联合使用时,能够影响自噬蛋白Atg5、Atg7、LC3-Ⅱ、Beclin1的表达水平。结论 白花丹醌促进SMMC-7721肝癌细胞的凋亡与自噬,其机制可能与上调SMMC-7721细胞自噬有关基因及蛋白的表达水平有关。 展开更多
关键词 白花丹醌 肝癌细胞 凋亡 自噬 LC3 BECLIN-1 Atg7
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姜黄素通过提高自噬体形成相关蛋白的表达增强N2a/APP695swe细胞的自噬作用
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作者 康清梅 梁洁 +4 位作者 张雄 周凡琳 李丹 高敏娜 李昱 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期481-486,共6页
目的:全面研究姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞自噬作用的影响,进一步探讨姜黄素调节N2a/APP695swe细胞自噬的可能机制。方法:将细胞分为4组:野生型对照组(WT组)、空白对照组(Control组)、溶剂对照组(Sham组)、姜黄素... 目的:全面研究姜黄素(curcumin)对N2a/APP695swe细胞自噬作用的影响,进一步探讨姜黄素调节N2a/APP695swe细胞自噬的可能机制。方法:将细胞分为4组:野生型对照组(WT组)、空白对照组(Control组)、溶剂对照组(Sham组)、姜黄素处理组(Curcumin组,5μmol/L)。Western blot分别检测自噬标志性蛋白LC3Ⅱ和底物蛋白SQSTM1的表达,以及Atg蛋白Beclin1、Atg5、Atg7、Atg12、Atg16L1的表达;免疫荧光法进一步验证SQSTM1蛋白的表达。各组分别转染细胞自噬体指示探针(GFPLC3)和溶酶体红色探针(Lyso Red)后,激光共聚焦显微镜观察自噬体和自噬溶酶体的数量检测自噬流。结果:Western blot结果表明,Curcumin组LC3Ⅱ蛋白表达量较对照组明显增高(0.59±0.03 vs.0.11±0.01,P=0.000);同时,Curcumin组SQSTM1蛋白表达量较对照组明显降低(0.19±0.04 vs.0.66±0.05,P=0.000)。免疫荧光实验再次验证了SQSTM1蛋白的这个表达趋势。共聚焦显微镜观察发现,与对照组相比,Curcumin组细胞内自噬体数量增加(154.67±7.37 vs.89.00±7.21,P=0.000),同时自噬溶酶体数量也显著增加(84.67±12.50 vs.42.33±6.51,P=0.000)。Western blot进一步检测发现,与对照组相比,Curcumin组Atg蛋白Beclin1、Atg7、Atg16L1的表达均明显增加(0.55±0.09 vs.0.10±0.02,P=0.000;0.89±0.12 vs.0.39±0.07,P=0.000;0.36±0.07vs.0.13±0.02,P=0.003),而Atg5和Atg12改变差异无统计学意义(0.79±0.12 vs.0.79±0.10,P=0.470;0.94±0.13 vs.0.87±0.16,P=0.587)。结论:姜黄素增强N2a/APP695swe细胞的自噬水平,其机制可能与提高自噬体形成相关蛋白Beclin1、Atg7、Atg16L1的表达有关。 展开更多
关键词 姜黄素 自噬 阿尔茨海默病 BECLIN1 Atg7 Atg16L1
新风胶囊治疗大鼠骨关节炎 预览 被引量:3
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作者 阮丽萍 刘健 +2 位作者 王亚黎 叶文芳 万磊 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2114-2120,共7页
目的主要观察新风胶囊(黄芪、薏苡仁、雷公藤、蜈蚣)对骨关节炎大鼠外周血免疫球蛋白IgG1、IgG2α及细胞因子IL-4、TNF-α,软骨、胸腺、脾脏自噬基因(Atg5、Atg7、Atg12)的表达的影响。方法大鼠随机设正常对照组和模型对照组(均予... 目的主要观察新风胶囊(黄芪、薏苡仁、雷公藤、蜈蚣)对骨关节炎大鼠外周血免疫球蛋白IgG1、IgG2α及细胞因子IL-4、TNF-α,软骨、胸腺、脾脏自噬基因(Atg5、Atg7、Atg12)的表达的影响。方法大鼠随机设正常对照组和模型对照组(均予生理盐水)、氨基葡萄糖对照组,以及新风胶囊组,每组10只。除正常对照组外,采用关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸方法制成骨关节炎大鼠模型,造模后第14天给药30 d。以光镜对大鼠软骨进行Mankin标准评分;采用ELISA法检测血清细胞因子IgG1、IgG2α、IL-4,和TNF-α;采用RT-PCR对骨关节炎大鼠软骨、胸腺、脾脏中的自噬相关基因Atg5、Atg7和Atg12进行检测。结果给药后,与正常组比较,模型组体质量明显下降,Mankin评分明显升高,血清IgG1、IgG2α、TNF-α升高,IL-4降低,在胸腺、脾脏、软骨等各组织中,Atg存在不同程度的降低(P〈0.05或P〈0.01);与氨基葡萄糖组比较,新风胶囊组体质量明显升高,Mankin评分明显降低,IL-4及Atg5、Atg7、Atg12升高(P〈0.01或P〈0.05)。结论新风胶囊可以抑制炎症反应,调节大鼠整体自噬水平,达到治疗骨关节炎。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 新风胶囊 免疫球蛋白 IGG1 IgG2α IL-4 TNF-α 自噬基因 Atg5 Atg7 Atg12
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诱导/封闭自噬相关基因7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用研究 预览 被引量:1
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作者 王振龙 邓骞 王子明 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2015年第4期264-268,共5页
目的:探讨诱导/封闭A tg7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用。方法构建上调A tg7的慢病毒载体plenti6.3-A tg7,下调Atg7的慢病毒载体sh-Atg-1 lv、sh-Atg-2 lv ,空载对照慢病毒载体sh-scramb-con lv、plenti6.3-GFP ,分别转染肾癌78... 目的:探讨诱导/封闭A tg7对肾癌786-0细胞自噬的调控作用。方法构建上调A tg7的慢病毒载体plenti6.3-A tg7,下调Atg7的慢病毒载体sh-Atg-1 lv、sh-Atg-2 lv ,空载对照慢病毒载体sh-scramb-con lv、plenti6.3-GFP ,分别转染肾癌786-0细胞系,未转染的786-0细胞系为空白对照。RT-PCR和Western blot检测各组Atg7的表达,研究plenti6.3-Atg7激活Atg7效率和sh-Atg-1 lv、sh-Atg-2 lv抑制Atg7效率。Western blot检测上述各组细胞LCII/LC3I蛋白比值,研究上调及下调 Atg7对肾癌786-0细胞自噬的激活及抑制作用。结果经过筛选,成功构建稳定上调Atg7的786-0/plenti6.3-Atg7xbx细胞系、稳定下调Atg7的786-0/sh-Atg-2 lv细胞系、空载对照786-0/sh-scramb-con lv、786-0/plenti6.3-GFP细胞系。与空白对照组比较,Atg7上调组786-0细胞LCII/LC3I比值显著升高(3.31±0.12 vs .2.23±0.10 P<0.01),具有稳定的自噬激活作用;Atg7下调组的786-0细胞LCII/LC3I比值显著降低(1.45 ± 0.11 vs .2.23±0.10 P<0.01),具有稳定自噬抑制作用。结论上调Atg7对肾癌786-0细胞系具有自噬激活作用,下调A tg7对肾癌786-0细胞系具有自噬抑制作用。 展开更多
关键词 自噬 肾透明细胞癌 自噬相关基因7 sh-A tg7 plenti6.3-A tg7
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津力达颗粒联合通心络胶囊对2型糖尿病大鼠胰腺组织自噬的影响 被引量:7
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作者 孙颖 金鑫 +3 位作者 郭勇英 刘红利 崔雯雯 魏聪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期92-96,共5页
目的:观察中药复方津力达颗粒联合通心络胶囊对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠胰岛β细胞超微结构损伤情况、胰岛β细胞功能及胰腺组织自噬相关蛋白Beclin-1,Atg7,p62表达的影响。方法:采用高脂喂养结合小剂量链脲... 目的:观察中药复方津力达颗粒联合通心络胶囊对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠胰岛β细胞超微结构损伤情况、胰岛β细胞功能及胰腺组织自噬相关蛋白Beclin-1,Atg7,p62表达的影响。方法:采用高脂喂养结合小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)30 mg·kg^-1ip建立T2DM大鼠模型,15只雄性SD大鼠设为正常组正常饲料喂养,75只雄性SD大鼠高脂饲料喂养6周后STZ腹腔注射,根据血糖随机分为:模型组,津力达组(JLD),通心络胶囊组(TXL),联合用药组(JT),吡格列酮组(PLZ),JLD组于模型成功后给予津力达颗粒(3.0 g·kg^-1·d^-1),TXL组于模型成功后给予通心络胶囊(0.4 g·kg^-1·d^-1),JT组于模型成功后给予津力达颗粒(3.0 g·kg^-1·d^-1)加通心络胶囊(0.4 g·kg^-1·d^-1),PLZ组于模型成功后给予吡格列酮(10 mg·kg^-1·d^-1),连续ig 6周后,检测空腹血糖及血清胰岛素以计算胰岛β细胞功能指数,电镜观察各组大鼠胰岛β细胞超微结构;Western blot方法检测胰腺组织Beclin-1,Atg7,p62蛋白的表达变化。结果:与正常组相比较,模型组大鼠胰岛β细胞损伤减轻,胰岛β细胞功能指数明显降低,胰腺组织Beclin-1,Atg7蛋白表达明显减少,p62蛋白表达明显增加(P〈0.01);与模型组比较,各给药组大鼠胰岛功能指数升高,Beclin-1,Atg7表达升高,p62蛋白表达减少(P〈0.01),与JLD,TXL组比较,JT组Beclin-1,Atg7表达升高,p62蛋白表达减少(P〈0.05)。结论:津力达颗粒联合通心络胶囊可以提高胰岛β细胞功能指数,其作用可能与促进胰岛自噬有关,而维持胰腺组织自噬水平可能是延缓糖尿病进展的有效措施。 展开更多
关键词 津力达颗粒 通心络胶囊 胰岛β细胞 胰腺 自噬 BECLIN-1 Atg7 P62
Atg7 in development and disease: panacea or Pandora's Box?
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作者 Jianhua Xiong 《蛋白质与细胞:英文版》 SCIE CAS CSCD 2015年第10期722-734,共13页
关键词 疾病控制 盒子 发育 磷脂酰乙醇胺 微管相关蛋白 使用寿命 哺乳动物 蛋白成分
COPD合并肺性脑病患者脑脊液β-GBA、Atg7、p62水平变化及意义 预览 被引量:5
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作者 周媛媛 曾凡军 +3 位作者 熊晓琦 阮玉姝 万晓蓉 宋新宇 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第4期78-79,共2页
目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺性脑病患者脑脊液中神经元自噬相关标志物β-葡糖脑苷酶(β-GBA)、Atg7、p62水平变化,并探讨其临床意义。方法选择COPD合并肺性脑病者50例(观察组)及单纯COPD患者50例(对照组),采集患者脑脊液,ELIS... 目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺性脑病患者脑脊液中神经元自噬相关标志物β-葡糖脑苷酶(β-GBA)、Atg7、p62水平变化,并探讨其临床意义。方法选择COPD合并肺性脑病者50例(观察组)及单纯COPD患者50例(对照组),采集患者脑脊液,ELISA法检测脑脊液中的β-GBA、Atg7,Western blot法检测p62蛋白。结果观察组脑脊液β-GBA为(34.6±6.8)pg/m L、Atg7为(12.4±3.2)pg/m L、p62为0.35±0.05,对照组分别为(15.5±3.6)pg/m L、(2.8±0.6)pg/m L、0.23±0.03,P均<0.05。结论 COPD合并肺性脑病患者脑脊液β-GBA、Atg7、p62蛋白水平升高,神经元自噬在肺性脑病的发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 肺性脑病 神经元自噬 β-葡糖脑苷酶 Atg7 P62
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急性递增负荷运动对骨骼肌自噬系统相关基因表达的影响 预览 被引量:2
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作者 钱帅伟 漆正堂 丁树哲 《武汉体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2014年第3期76-81,共6页
目的:通过建立急性递增负荷运动的时相性模型,检测骨骼肌细胞自噬启动阶段关键基因Bec-lin1、膜螯合关键基因Atg9、自噬泡延伸阶段关键基因Atg7和微管相关蛋白1轻链3(LC-3)表达的动态变化,探讨自噬发生不同阶段的关键基因在运动中的... 目的:通过建立急性递增负荷运动的时相性模型,检测骨骼肌细胞自噬启动阶段关键基因Bec-lin1、膜螯合关键基因Atg9、自噬泡延伸阶段关键基因Atg7和微管相关蛋白1轻链3(LC-3)表达的动态变化,探讨自噬发生不同阶段的关键基因在运动中的适应性情况.方法:40只健康雄性ICR小鼠,7~8周龄,体重19~21g,随机分为安静组(Con)、急性递增负荷运动45min(E45)、90min(E90)、120min(E120)和150min(E150)组,各组均8只.小鼠进行适应性跑台运动,坡度0°,速度0.8km/h,持续时间5min,共训练3天.正式运动遵循以下程序:第1级负荷:1km/h,15min;第2级负荷:1.2km/h,15min;第3级负荷:1.4~1.5km/h,各组分别运动到相应时间点.安静组于安静状态、运动组于运动中相应时间点即刻断颈椎处死,迅速取出完整的下肢腓肠肌.实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测骨骼肌Beclin1、Atg9、Atg7、LC-3基因表达水平.结果:(1)骨骼肌Beclin1 mRNA表达在递增负荷运动开始即急剧上升,在45min达到峰值,随后又呈现持续下降态势.(2)骨骼肌Atg9、Atg7 mRNA表达在递增负荷运动开始即稳步上升,在90min达到峰值,并维持一段时间,随后又呈现稳步下降态势.(3)骨骼肌LC-3 mRNA表达与安静组相比以及各组间相比均未见显著性差异.结论:自噬对递增负荷运动具有较好的应答能力,但这并不总是持续不变的,随着运动时间的延长,其应答能力逐渐降低,表现出一种良好的应激-适应的反应机制. 展开更多
关键词 骨骼肌 细胞自噬 BECLIN1 Atg9 Atg7 LC-3 急性递增负荷运动 时相性
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Beclin1及Atg7在维格列汀保护db/db小鼠胰岛β细胞中的作用
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作者 吴彦菊 张捷 +2 位作者 单春艳 陈莉明 刘德敏 《国际内分泌代谢杂志》 北大核心 2014年第2期73-76,F0003共5页
目的 探讨维格列汀对糖尿病小鼠胰岛β细胞自噬相关因子表达及β细胞存活的影响.方法 16只db/db小鼠按血糖水平分为糖尿病组(DM组,n=8)及维格列汀治疗组(VT组,n=8),同龄野生型小鼠作为正常对照组(NC组,n=8),其中DM组及VT组间血糖... 目的 探讨维格列汀对糖尿病小鼠胰岛β细胞自噬相关因子表达及β细胞存活的影响.方法 16只db/db小鼠按血糖水平分为糖尿病组(DM组,n=8)及维格列汀治疗组(VT组,n=8),同龄野生型小鼠作为正常对照组(NC组,n=8),其中DM组及VT组间血糖水平无显著差异(t=1.918,P> 0.05).VT组小鼠给予维格列汀(35 mg&#183;kg-1&#183;d-1)灌胃,DM组及NC组小鼠给予生理盐水灌胃.干预6周后,经心脏穿刺取血检测随机HbA1c水平;采用免疫荧光技术分析胰岛形态及结构;TUNEL法检测β细胞凋亡;RT-PCR技术分析胰岛β细胞自噬相关基因6(Beclin1)及自噬相关基因7(Atg7)mRNA表达水平;免疫组化技术分析β细胞Beclin1蛋白表达水平.结果 DM组小鼠血HbA1c水平明显高于NC组;VT组小鼠血HbA1c水平较DM组降低(F=579.19,P<0.01).免疫荧光及细胞凋亡检测发现,与NC组相比,DM组胰岛α及β细胞分布紊乱,凋亡增加(P<0.001);与DM组相比,VT组胰岛α及β细胞分布趋于正常,β细胞凋亡减少(F =37.25,P<0.01).RT-PCR结果显示,DM组小鼠胰岛β细胞Beclin1及Atg7 mRNA表达显著高于NC组(P <0.001);VT组中上述基因mRNA表达较DM组降低(F=61.35,41.43,P均<0.001).免疫组化分析结果显示,DM组Beclin1蛋白表达高于NC组,而VT组中表达较DM组降低(F=15.92,P<0.05).结论 维格列汀治疗可下调Beclin1及Atg7在糖尿病小鼠β细胞中的表达,该作用可能与其改善胰岛结构及促进β细胞存活有关. 展开更多
关键词 糖尿病 自噬 细胞凋亡 BECLIN1 Atg7 BECLIN1 Atg7
pGenesil-1-Atg7-shRNA真核表达载体的构建
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作者 魏传杰 肖双 +1 位作者 夏炎 龙鼎新 《实用预防医学》 CAS 2014年第4期385-387,共3页
目的 利用RNA干扰技术,构建pGenesil-1质粒载体介导靶向自噬基因Atg7的shRNA真核表达载体. 方法 根据GenBank中Atg7基因的cDNA序列(NM 001136031),设计有小发卡结构的三条寡核苷酸序列,连接到空载体pGenesil-1中,转化到JM109菌株,选... 目的 利用RNA干扰技术,构建pGenesil-1质粒载体介导靶向自噬基因Atg7的shRNA真核表达载体. 方法 根据GenBank中Atg7基因的cDNA序列(NM 001136031),设计有小发卡结构的三条寡核苷酸序列,连接到空载体pGenesil-1中,转化到JM109菌株,选取阳性克隆,进行酶切鉴定和DNA测序分析. 结果 经双酶切结果显示合成的shRNA序列成功连接到pGenesil-1质粒载体中,DNA测序结果证实干扰序列和目的序列相同,重组载体pGenesil-1-Atg7-shRNA构建成功. 结论 成功构建干扰人Atg7基因的重组表达载体,为研究Atg7蛋白的生物学功能提供了研究基础. 展开更多
关键词 Atg7 RNA干扰 pGenesil-1 自噬 载体构建
耐力运动和Pifithrin—μ对ICR小鼠骨骼肌自噬相关基因表达的影响
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作者 刘静霞 苏玉慧 +1 位作者 漆正堂 丁树哲 《西安体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2013年第6期725-730,共6页
摘要:目的探讨耐力运动和p53抑制剂Pifithrin—μ对ICR小鼠腓肠肌自噬相关基因转录的影响。方法将24只雄性ICR,28周龄小鼠,体重(45±5)g随机分成对照组(C组),Pifithrin-μ组(P—μ组),Pifithrin-μ耐力训练组(P—μ训... 摘要:目的探讨耐力运动和p53抑制剂Pifithrin—μ对ICR小鼠腓肠肌自噬相关基因转录的影响。方法将24只雄性ICR,28周龄小鼠,体重(45±5)g随机分成对照组(C组),Pifithrin-μ组(P—μ组),Pifithrin-μ耐力训练组(P—μ训练组),每组8只。Pifithrin-μ组和Pifithrin-μ耐力训练组均进行皮下注射Pifithrin-μ制剂,其中Pifithrin-μ耐力训练组进行4周跑台训练。经过饲养,末次运动结束12~24h内处死各组小鼠,Real—timePCR测定鼠腓肠肌p53mRNA、Beclin-1mRNA、LC3mRNA和Atg7mRNA水平进行比较。结果(1)P-μ组与C组比较p53mRNA、LC3mRNA、LC3mRna、Atg7mRNA(P〉0.05)的表达均无显著性差异,P-μ组Beelin—1mRNA的表达极显著高于C组(P〈0.01);(2)P-μ训练组p53mRNA表达显著高于C组,P-μ训练组Beclin-1mRNA、LC3mRNA、Atg7mRNA表达均极显著高于C组;(3)P-μ训练组与P-μ组比较p53mRNA无显著性差异(P〉0.05),P-μ训练组Beclin-1mRNA表达极显著高于P-μ组(P〈0.01),P-μ训练组Atg7mRNA、LC3mRNA表达显著高于P-μ组P〈0.05。结论在Pifithrin-μ和耐力训练的共同干扰下,骨骼肌中细胞自噬呈增强趋势,其中叠加了耐力训练干扰因素比单纯注射p53抑制剂因素的分组增强趋势明显;其机制是否通过运动激活p53线粒体自噬分子通路尚需要进一步的深入研究。 展开更多
关键词 耐力运动 ICR小鼠 Pifithrin-μ p53 BECLIN-1 LC3 Atg7
ATG5和ATG7在糜烂型口腔扁平苔藓中的表达 预览
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作者 聂吉山 殷喆 聂莉 《河北医药》 CAS 2012年第14期2134-2135,共2页
目的探讨ATG5、ATG7在糜烂型口腔扁平苔藓(OLP)组织中表达情况及细胞自噬与口腔扁平苔藓之间的关系。方法随机将27例患者划分为对照组14例和观察组13例,对照组患者给予复方四环素泼尼松膜进行治疗,观察组患者在对照组基础上加用肿痛... 目的探讨ATG5、ATG7在糜烂型口腔扁平苔藓(OLP)组织中表达情况及细胞自噬与口腔扁平苔藓之间的关系。方法随机将27例患者划分为对照组14例和观察组13例,对照组患者给予复方四环素泼尼松膜进行治疗,观察组患者在对照组基础上加用肿痛安胶囊药粉。治疗前后分别取患者糜烂型OLP部分组织采用免疫组织化学检验并与正常口腔黏膜进行对比。结果 ATG5、ATG7在不同组织中显阳性,但在糜烂型OLP组织表达升高与正常组织表达差异有统计学意义(P〈0.05)。结论细胞自噬在糜烂型OLP组织中表现异常且与其恶化相关。 展开更多
关键词 ATG5 ATG7 细胞自噬
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ATG5和ATG7在糜烂型口腔扁平苔藓中的表达 预览 被引量:1
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作者 常珍 李春阳 +1 位作者 李容林 莫佳莉 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2011年第6期 14-17,共4页
目的检测ATG5、ATG7在糜烂型口腔扁平苔藓组织中的表达,探讨细胞自噬在口腔扁平苔藓恶变中的作用。方法采用免疫组织化学方法,检测ATG5、ATG7在正常口腔黏膜、糜烂型口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌组织中的表达。结果ATG5、ATG7在三种... 目的检测ATG5、ATG7在糜烂型口腔扁平苔藓组织中的表达,探讨细胞自噬在口腔扁平苔藓恶变中的作用。方法采用免疫组织化学方法,检测ATG5、ATG7在正常口腔黏膜、糜烂型口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌组织中的表达。结果ATG5、ATG7在三种不同组织中均呈阳性表达.在糜烂型口腔扁平苔藓组织中表达量升高,在口腔鳞状细胞癌组织中表达下降,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论糜烂型口腔扁平苔藓组织中存在细胞自噬的异常。 展开更多
关键词 ATG5 ATG7 口腔扁平苔藓 细胞自噬
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免疫性血小板减少症(ITP)患儿外周血调节性T细胞数量减少伴随自噬的降低
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作者 王琦 计雪强 +3 位作者 邵惠江 季正华 朱宏 邵雪君 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期834-838,共5页
目的检测自身抗体阳性的免疫性血小板减少症(ITP)患儿CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞(Treg)数量以及自噬相关蛋白的表达。方法通过流式细胞术分选出初诊ITP患儿和健康对照儿童外周血中的Treg,根据抗体的平均荧光强度分别统计自噬相关基... 目的检测自身抗体阳性的免疫性血小板减少症(ITP)患儿CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞(Treg)数量以及自噬相关蛋白的表达。方法通过流式细胞术分选出初诊ITP患儿和健康对照儿童外周血中的Treg,根据抗体的平均荧光强度分别统计自噬相关基因5(ATG5)和ATG7蛋白水平,Western blot法检测CD4^+CD25^+Treg的蛋白激酶B(AKT)和细胞外信号调节激酶(ERK)的磷酸化水平。结果与健康对照儿童相比,ITP患儿Treg数量显著降低,ATG5和ATG7表达降低,AKT和ERK的磷酸化水平均显著降低。结论在初诊自身抗体阳性的ITP患儿中,Treg数量降低,伴随增殖相关蛋白磷酸化水平及细胞自噬水平的降低。 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症(ITP) 调节性T细胞(Treg) 自噬相关基因5(ATG5) 自噬相关基因7(ATG7)
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