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相异度算法结合邻接法构建系统进化树的评估 预览
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作者 刘雪梅 李文 +3 位作者 黄管大 黄天来 叶宇中 徐国皓 《华南理工大学学报:自然科学版》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期136-141,148共7页
在系统发育学中,构建系统进化树的算法是研究进化关系的基础.本文探讨并验证了基于k-mer的相异度算法d2S结合邻接法NJ构建系统进化树的可行性,对两种进化情景下的12个16S rRNA和36个噬菌体分子序列构建了系统进化树(其中 k =4,6,8,10),3... 在系统发育学中,构建系统进化树的算法是研究进化关系的基础.本文探讨并验证了基于k-mer的相异度算法d2S结合邻接法NJ构建系统进化树的可行性,对两种进化情景下的12个16S rRNA和36个噬菌体分子序列构建了系统进化树(其中 k =4,6,8,10),3类16S rRNA很清晰的按照古菌、细菌和真核生物分类开来,效果和Woese目录基本一致;同时可把4种类型的噬菌体按原来的进化关系区分开,而且受参数k影响小,分类效果非常好.这展现了相异度算法d2S结合邻接法NJ强大的功能.使用相异度算法d2S结合邻接法NJ构建系统进化树,将为系统进化关系提供新的算法和思路. 展开更多
关键词 相异度算法d2S 邻接法(NJ) k-mer 16S RRNA 噬菌体
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长期低温保藏野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的活性观察及分析
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作者 李存香 祁芝珍 +7 位作者 赵海红 戴瑞霞 张青雯 冯建萍 徐小青 金星 吴海生 金泳 《医学动物防制》 2019年第5期464-466,共3页
目的观察长期低温保藏野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的活性。方法采用液体法、点滴法和双层琼脂平皿法检测不同保藏时间野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的效价。结果分离自四川省石渠县的3株野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体,于1998年采用液体法检测其效... 目的观察长期低温保藏野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的活性。方法采用液体法、点滴法和双层琼脂平皿法检测不同保藏时间野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体的效价。结果分离自四川省石渠县的3株野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体,于1998年采用液体法检测其效价分别为10-4、10-4、10-9,4℃保藏10年后采用点滴法测定3株鼠疫噬菌体,发现川4和川157不完全裂解,川212完全裂解,经过20年采用双层琼脂平板法测定其效价分别为10、10、104PFU/ml。分离自青海、西藏的9株鼠疫耶尔森菌噬菌体4℃保藏了10年,尽管效价降低了1~3个梯度,但仍以104~106PFU/ml的低效价状态存活。结论野生型鼠疫耶尔森菌噬菌体以赫氏肉汤作为保护介质,密封于普通安瓿内,4℃保藏10~20年仍然具有较低的活性。该悬液保藏方法操作简便、有效且成本低廉,适合于实验室和野外鼠疫检测工作时培养和保藏鼠疫耶尔森菌噬菌体。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森菌 噬菌体 保藏 活性
Bacteriophages Isolated in China for the Control of Pectobacterium carotovorum Causing Potato Soft Rot in Kenya
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作者 Peter Muturi Junping Yu +3 位作者 Alice Nyambura Maina Samuel Kariuki Frantis B.Mwaura Hongping Wei 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2019年第3期287-294,共8页
Soft rot is an economically significant disease in potato and one of the major threats to sustainable potato production.This study aimed at isolating lytic bacteriophages and evaluating methods for and the efficacy of... Soft rot is an economically significant disease in potato and one of the major threats to sustainable potato production.This study aimed at isolating lytic bacteriophages and evaluating methods for and the efficacy of applying phages to control potato soft rot caused by Pectobacterium carotovorum.Eleven bacteriophages isolated from soil and water samples collected in Wuhan,China,were used to infect P.carotovorum host strains isolated from potato tubers showing soft rot symptoms in Nakuru county,Kenya.The efficacy of the phages in controlling soft rot disease was evaluated by applying individual phage strains or a phage cocktail on potato slices and tubers at different time points before or after inoculation with a P.carotovorum strain.The phages could lyse 20 strains of P.carotovorum,but not Pseudomonas fluorescens control strains.Among the 11 phages,Pectobacterium phage Wc5r,interestingly showed cross-activity against Pectobacterium atrosepticum and two phage-resistant P.carotovorum strains.Potato slice assays showed that the phage concentration and timing of application are crucial factors for effective soft rot control.Phage cocktail applied at a concentration of 1×10^9 plaque-forming units per milliliter before or within an hour after bacterial inoculation on potato slices,resulted in>90%reduction of soft rot symptoms.This study provides a basis for the development and application of phages to reduce the impact of potato soft rot disease. 展开更多
关键词 PECTOBACTERIUM carotovorum POTATO soft ROT BACTERIOPHAGES PHAGE resistance
噬菌体在眼部疾病中的应用前景 预览
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作者 徐烁(综述) 张红(审校) 《中华实验眼科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期724-727,共4页
噬菌体是能够感染细菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称,自然环境产生的噬菌体不能独立生存,只能寄生于宿主菌进行繁殖,这种繁殖过程也是其杀菌的过程。近年来,全球范围细菌耐药性的增加导致了"后抗生素时代"即将到来,... 噬菌体是能够感染细菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称,自然环境产生的噬菌体不能独立生存,只能寄生于宿主菌进行繁殖,这种繁殖过程也是其杀菌的过程。近年来,全球范围细菌耐药性的增加导致了"后抗生素时代"即将到来,促使科学家们探索抗生素的替代疗法,噬菌体疗法重新进入研究者视线中。已有研究者应用噬菌体及噬菌体裂解酶成功治疗了细菌性角膜炎、眼内炎及结膜炎,它在杀灭病原菌同时,还可保持眼部结构的完整。本文主要阐述噬菌体结构及分类、发现及发展历程、侵染细菌过程、治疗眼科疾病的应用和治疗特点,并进一步探讨该疗法在眼科疾病中的应用前景。 展开更多
关键词 噬菌体 噬菌体疗法 耐药菌 眼部感染性疾病
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单克隆抗体制备技术研究进展
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作者 卢晓 凌志洋 孙兵(综述) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2018年第5期220-224,共5页
抗体药物的开发离不开抗体制备技术。随着分子生物学和二代测序技术的发展以及流式细胞分选技术的广泛应用,抗体制备技术也得以不断发展。此文概述了鼠杂交瘤技术、噬菌体展示技术、转基因小鼠技术等经典的单克隆抗体制备技术,重点介... 抗体药物的开发离不开抗体制备技术。随着分子生物学和二代测序技术的发展以及流式细胞分选技术的广泛应用,抗体制备技术也得以不断发展。此文概述了鼠杂交瘤技术、噬菌体展示技术、转基因小鼠技术等经典的单克隆抗体制备技术,重点介绍了新兴的单细胞逆转录PCR技术。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 杂交瘤 细菌噬菌体 小鼠 转基因 逆转录聚合酶链反应
噬菌体裂解酶对兔膝关节假体感染和生物膜形成的影响
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作者 程永帅 戚超 +3 位作者 赵夏 逄博 李肯 于腾波 《中华骨科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期724-730,共7页
目的探讨噬菌体裂解酶LysGH15关节腔内局部注射对兔膝关节假体周围感染模型的全身炎症、局部感染和假体表面生物膜形成的影响。方法建造兔膝关节假体植入术后金黄色葡萄球菌感染模型,分为关节腔内注射裂解酶的实验组(裂解酶组)和生... 目的探讨噬菌体裂解酶LysGH15关节腔内局部注射对兔膝关节假体周围感染模型的全身炎症、局部感染和假体表面生物膜形成的影响。方法建造兔膝关节假体植入术后金黄色葡萄球菌感染模型,分为关节腔内注射裂解酶的实验组(裂解酶组)和生理盐水的对照组(生理盐水组)。合成并纯化噬菌体裂解酶LysGH15,在兔膝关节腔接种细菌后的第1、2、3天,注射0.5ml裂解酶稀释液到裂解酶组兔的假体植入侧膝关节腔;而生理盐水组则注入0.5ml生理盐水到假体植入侧膝关节腔。在注射后的第1、3、7、14天,采集兔耳缘静脉血,做血浆降钙素原检测,评估兔全身感染程度。最后一次采集耳缘静脉血标本后,将兔处死,游离假体植入侧膝关节;取假体周围组织做HE染色,观察局部感染和组织坏死程度并做评分;取假体做扫描电镜观察,检测其表面生物膜生成情况并做半定量评估。结果裂解酶组兔膝关节腔内注射LysGHl5后,全身炎症标志物血清降钙素原迅速下降,以药物注射后第3天为著,与生理盐水组相比,感染程度明显降低。裂解酶组兔假体周围组织感染和坏死程度较生理盐水组显著减轻,将标本进行半定量评分、分级后,做等级秩和检验,两组比较差异有统计学意义(U=2.4948,P=0.0126);两组的生物膜形成质量的等级秩和检验比较,差异有统计学意义(U=2.2539,P=0.0242)。结论噬菌体裂解酶LysGH15能减轻兔膝关节假体植入术后金黄色葡萄球菌感染所致的全身炎症反应,降低细菌及炎症对组织的破坏程度,抑制植入假体表面细菌生物膜的形成。 展开更多
关键词 膝关节 细菌噬菌体 生物膜 假体相关感染 金黄色葡萄球菌
噬菌体介导的结核分枝杆菌Rυ2346c基因敲除株的构建及其毒力初步研究
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作者 陈晓林 陈思遐 +3 位作者 姚静 舒磊 邓凯丽 冯旰珠 《中华传染病杂志》 CSCD 2018年第8期490-495,共6页
目的利用分枝杆菌噬菌体重组系统构建结核分枝杆菌Rυ2346c基因敲除株,体内感染小鼠肺组织,观察Rυ2346c基因的毒力,从而探讨结核分枝杆菌Rυ2346c基因功能。方法构建同源交换位点,随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基因组,获得噬... 目的利用分枝杆菌噬菌体重组系统构建结核分枝杆菌Rυ2346c基因敲除株,体内感染小鼠肺组织,观察Rυ2346c基因的毒力,从而探讨结核分枝杆菌Rυ2346c基因功能。方法构建同源交换位点,随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基因组,获得噬菌粒,将噬菌粒导人耻垢分枝杆菌,获得整合有同源交换位点的重组噬菌体,经体外扩增获得高滴度的重组噬菌体,对结核分枝杆菌进行转染,将转染后的结核分枝杆菌涂布到潮霉素抗性的固体培养基,37℃培养4周,挑取单克隆,通过PCR验证基因敲除成功,将野生株(wildtype,wT)及敲除株(knockout,KO)结核分枝杆菌感染C57BL/6J小鼠肺组织,6~8周后观察小鼠死亡率、小鼠肺组织炎性反应程度及肺组织结核分枝杆菌体外培养菌落形成数。两组间比较采用配对t检验,率的比较采用X2检验。结果经鉴定PCR产物及插入片段大小与预期值相符,且为所需目的基因片段,成功切除靶片段,体内感染小鼠6~8周,KO株感染小鼠肺组织后,体外菌落形成数明显低于WT株感染(15.0±0.8比90.0±1.5,t=23.0361,P〈0.05),小鼠肺组织炎性反应程度明显轻于wT株感染(1040±89比1960±56,t=7.1016,P〈0.05),其小鼠总死亡率明显低于wT株感染(53%比20%,3(X2=6.1112,P〈0.05)。结论成功构建了噬菌体介导的结核分枝杆菌Rυ2346c基因敲除株,为Rυ2346c基因功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 细菌噬菌体 分枝杆菌 结核 基因敲除株 Rυ2346c基因
噬菌体复配抑菌剂对三文鱼中沙门氏菌的抑制与保鲜作用 预览 被引量:1
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作者 江艳华 许东勤 +5 位作者 姚琳 李风铃 朱文嘉 郭莹莹 张媛 王联珠 《农业工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第16期287-293,共7页
为控制生三文鱼中沙门氏菌和产品腐败,通过最小抑菌浓度试验和噬菌体稳定性试验筛选出乳酸链球菌素(nisin)、双乙酸钠与沙门氏菌噬菌体SLMP1进行复配,将抑菌剂(噬菌体108pfu/g、nisin0.1mg/g、双乙酸钠2.0mg/g)单独和复配应用于预先污... 为控制生三文鱼中沙门氏菌和产品腐败,通过最小抑菌浓度试验和噬菌体稳定性试验筛选出乳酸链球菌素(nisin)、双乙酸钠与沙门氏菌噬菌体SLMP1进行复配,将抑菌剂(噬菌体108pfu/g、nisin0.1mg/g、双乙酸钠2.0mg/g)单独和复配应用于预先污染了沙门氏菌(104cfu/g)的生三文鱼片中,在低温下(4.1)℃贮藏,通过测定沙门氏菌、菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)以及噬菌体效价来评估复配抑菌剂的效果。结果显示,含噬菌体的抑菌剂能显著(P<0.05)降低样品中沙门氏菌的数量,含nisin的抑菌剂能显著抑制样品中菌落总数的增长,含双乙酸钠的抑菌剂能显著抑制TVB-N的增加。噬菌体、nisin和双乙酸钠复配抑菌效果最好,在14d后沙门氏菌低于检测限1cfu/g,与空白对照相比菌落总数减少了2.5lgcfu/g,TVB-N值降低了13.73mg/100g。结果表明,噬菌体、nisin及双乙酸钠复配剂在生三文鱼沙门氏菌控制及防腐保鲜中具有良好应用前景。 展开更多
关键词 噬菌体 品质控制 沙门氏菌 抑菌剂 生三文鱼 保鲜
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NDM-5阳性大肠杆菌裂解性噬菌体的生物学特性 预览
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作者 葛展霞 钟希娜 +3 位作者 朱炳海 何涛 魏瑞成 王冉 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期699-705,共7页
NDM-5基因是在动物源细菌尤其是鸡源大肠杆菌中主要流行的碳青霉烯类耐药基因,携带该基因的菌株呈现多重耐药性,传播能力强,被称为"超级细菌"。本研究以携带NDM-5基因的鸡源大肠杆菌SQ-C-E5为宿主菌,从污水中分离了对该细菌具有裂解... NDM-5基因是在动物源细菌尤其是鸡源大肠杆菌中主要流行的碳青霉烯类耐药基因,携带该基因的菌株呈现多重耐药性,传播能力强,被称为"超级细菌"。本研究以携带NDM-5基因的鸡源大肠杆菌SQ-C-E5为宿主菌,从污水中分离了对该细菌具有裂解作用的噬菌体,命名为vBEcoMBp5。通过透射电镜观察,最佳感染复数测定,一步生长曲线绘制,杀菌试验,热稳定性及酸碱稳定性测定等试验分析该噬菌体的生物学特性。结果表明,该噬菌体为肌尾病毒科,其噬菌斑透亮,无晕圈,最佳感染复数为10,潜伏期为5 min,爆发期为65 min,该噬菌体在温度为30~60℃和pH为5~10时较稳定,并且噬菌体vBEcoMBp5的裂解谱较广,对多株NDM-5阳性和阴性大肠杆菌都具有裂解作用。因此,噬菌体vBEcoMBp5在防治携带NDM-5基因的大肠杆菌方面具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 NDM-5阳性大肠杆菌 噬菌体 生物学特性
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一株枯草芽孢杆菌噬菌体的生物学特性分析及抗性菌株的诱变筛选 预览 被引量:1
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作者 刘秀侠 徐海燕 +3 位作者 辛国芹 穆熙军 孙学森 谷巍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期143-148,共6页
枯草芽孢杆菌工业生产发酵过程中经常出现噬菌体污染的问题,分离筛选以枯草芽孢杆菌为宿主菌的噬菌体,分析其生物学特性并采用自发突变方法筛选噬菌体抗性菌株。以枯草芽孢杆菌KC-260为宿主菌,从车间异常发酵液中分离纯化得到一株噬菌体... 枯草芽孢杆菌工业生产发酵过程中经常出现噬菌体污染的问题,分离筛选以枯草芽孢杆菌为宿主菌的噬菌体,分析其生物学特性并采用自发突变方法筛选噬菌体抗性菌株。以枯草芽孢杆菌KC-260为宿主菌,从车间异常发酵液中分离纯化得到一株噬菌体,将其命名为P260,富集培养后测定效价,对其热稳定性、最佳感染复数、宿主范围、抑制剂和消毒剂耐受性等生物学特性进行了研究。为防治噬菌体P260的污染,利用自发突变的方法筛选对噬菌体P260有抗性的枯草芽孢杆菌突变菌。结果显示,分离纯化得到一株效价为3.45×10^10 PFU/m L的噬菌体P260,该噬菌体具有一定的宿主专一性,对凝结芽孢杆菌和短小芽孢杆菌不敏感。噬菌体P260在高温条件下很容易失活,不耐热,70℃处理15 min存活率下降极为明显;25 mg/L的Cl O2对P260有极强的杀灭作用;0.5%的草酸铵和柠檬酸铵对该噬菌体有一定的抑制作用。P260感染宿主菌的最佳感染复数为0.01,增殖的潜伏期为15 min,45 min进入裂解期。通过自发突变的方法获得了抗噬菌体菌株ZF-260,发酵过程中添加噬菌体后ZF-260的生长不受影响,说明ZF-260是一株可以抗噬菌体P260的优良菌株。研究了噬菌体P260的生物学特性,获得了遗传稳定且活菌数高的抗性菌株ZF-260。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 噬菌体 抑制剂 消毒剂 自发突变
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参量阵差分Pattern时延差编码冰下水声通信方法
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作者 殷敬伟 张晓 +2 位作者 朱广平 唐胜雨 孙辉 《声学学报》 EI CSCD 北大核心 2017年第1期48-52,共5页
为提高差分Pattern时延差编码水声通信方法的通信速率以及抗多途能力,使其能有效适用于冰下水声环境,提出了基于参量阵的差分Pattern时延差编码水声通信方法,推导了Pattern码的参量发射原理,分析了参量阵发射对该方法性能的影响,利用参... 为提高差分Pattern时延差编码水声通信方法的通信速率以及抗多途能力,使其能有效适用于冰下水声环境,提出了基于参量阵的差分Pattern时延差编码水声通信方法,推导了Pattern码的参量发射原理,分析了参量阵发射对该方法性能的影响,利用参量阵发射产生低频宽带窄指向性声柬,减少了声线触碰上下边界的次数,提高了系统抗多途的能力。冰下水域外场试验结果表明:本方法可有效抑制多途效应,同时低频宽带特性提高了系统通信速率。 展开更多
关键词 水声通信 Pattern 时延差 宽带特性 通信速率 水声信道 多途效应 水声环境 信道冲激响应 于冰
不同滴度噬菌体D29对气道上皮细胞9HTE的生长及功能影响研究 预览 被引量:1
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作者 梁梅 郭述良 张红梅 《重庆医学》 北大核心 2017年第15期2024-2026,共3页
目的研究噬菌体D29不同滴度对气道上皮细胞株9HTE的生长及功能影响。方法分别用高滴度(109PFU/mL)和低滴度(107 PFU/mL)噬菌体D29及噬菌体缓冲液组作用于9HTE细胞株后,用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长情况;用酶联免疫吸... 目的研究噬菌体D29不同滴度对气道上皮细胞株9HTE的生长及功能影响。方法分别用高滴度(109PFU/mL)和低滴度(107 PFU/mL)噬菌体D29及噬菌体缓冲液组作用于9HTE细胞株后,用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长情况;用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测量细胞上清液白细胞介素(IL)-6、IL-8水平;用逆转录PCR(RT-PCR)检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达,用流式细胞技术检测细胞凋亡率。结果高、低滴度噬菌体D29作用气道上皮细胞一段时间后,对细胞生长活性、细胞因子IL-6、IL-8和ICAM-1mRNA的表达,以及细胞凋亡率的影响与噬菌体缓冲液组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论高、低滴度噬菌体D29对体外培养的气道上皮细胞生长及功能无明显影响。 展开更多
关键词 细菌噬菌体 气管 白细胞介素类 血管细胞黏附分子1 气道上皮细胞 安全性
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筛选及鉴定IgG型单克隆抗-D噬菌体克隆的实验研究
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作者 吴凡 庄乃保 +2 位作者 张印则 苏宇清 梁延连 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第10期1121-1125,共5页
目的利用随机噬菌体12肽库筛选出血型D抗原的模拟多肽并验证。方法采用Ig G型单克隆抗-D筛选噬菌体随机12肽库,测定每轮筛选后洗脱物与抗-Rh D的结合情况。对经特异性筛选得到的阳性噬菌体克隆进行DNA序列测定,将推导出的12肽氨基酸序... 目的利用随机噬菌体12肽库筛选出血型D抗原的模拟多肽并验证。方法采用Ig G型单克隆抗-D筛选噬菌体随机12肽库,测定每轮筛选后洗脱物与抗-Rh D的结合情况。对经特异性筛选得到的阳性噬菌体克隆进行DNA序列测定,将推导出的12肽氨基酸序列进行同源性比较,通过凝集抑制试验验证阳性噬菌体与Ig G型单克隆抗-D的反应。结果随着筛选轮次增加,噬菌体洗脱物与抗-Rh D的结合力逐渐增强。经过4轮淘洗后,得到8个亲和力较强且具有较高重合率的保守区域的12肽序列。凝集抑制实验表明具有相同氨基酸序列的阳性噬菌体对Ig G型单克隆抗-D与Rh D阳性红细胞的凝集反应具有抑制作用。结论随机噬菌体12肽库筛选得到的血型D抗原模拟多肽,为Rh D结构与功能研究及研制针对Rh D新生儿溶血病的新型诊断抗原、制备特异疫苗以及探索新的治疗方法提供实验基础。 展开更多
关键词 肽库 RHD抗原 细菌噬菌体 表位
酸奶生产中噬菌体的预防与控制 预览 被引量:1
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作者 杨洋 李启明 +1 位作者 高航 马维 《饮料工业》 2017年第6期43-46,共4页
噬菌体污染是导致酸奶发酵异常的主要原因之一。该文对噬菌体主要特性,分布方式,感染途径和症状进行了总结分析。依据酸奶工厂特点和噬菌体的特性,提出了如何控制和减少噬菌体感染的措施与对策,以期为酸奶中噬菌体污染的研究开发提供参考。
关键词 酸奶 发酵剂 噬菌体 控制
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6株铜绿假单胞菌噬菌体的分离及其生物学特性 被引量:1
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作者 张凡 陈昊 +4 位作者 柳鹏程 王海民 李志斌 李玉民 马兴铭 《兰州大学学报:医学版》 CAS 2017年第6期28-34,共7页
目的分离铜绿假单胞菌噬菌体,比较其形态、裂菌特性并测定其裂解谱,根据裂解谱筛选出裂解百分比最高的噬菌体,并测定其最佳感染复数和体内代谢动力学等基本生物学特性。方法取兰州市区污水样品经0.22um滤膜过滤,用双层琼脂平板培... 目的分离铜绿假单胞菌噬菌体,比较其形态、裂菌特性并测定其裂解谱,根据裂解谱筛选出裂解百分比最高的噬菌体,并测定其最佳感染复数和体内代谢动力学等基本生物学特性。方法取兰州市区污水样品经0.22um滤膜过滤,用双层琼脂平板培养法分离、纯化铜绿假单胞菌噬菌体并测定其裂解谱;纯化后的噬菌体进行扫描电镜观察;评估裂解谱后筛选出裂解百分比最高的为PaP106,分别按照感染复数(MOI)=10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7比例加入PaPl06和铜绿假单胞菌共培养后测定噬菌体滴度,确定其最佳感染复数;不同途径(腹腔、肌肉、皮下)给小鼠注射1×10^16pfu/mLPaPl06100止,分别于O.5、1、3、6、12、24、36hN定小鼠血液、肝脏、脾脏组织中噬菌体的浓度,分析噬菌体体内代谢动力学变化。结果共分离到6株形态不同的铜绿假单胞菌噬菌体,对铜绿假单胞菌耐药菌株的裂解百分比为25%-75%,其中PaPl06噬菌体对铜绿假单胞菌耐药菌株的裂解百分比最高(75%),PaPl06噬菌体的最佳感染复数为1X10~,腹腔注射PaPl06噬菌体后,其在血液、肝脏、脾脏的达峰时间短于皮下注射和肌肉注射途径。结论在分离得到的6株铜绿假单胞菌噬菌体中,PaPl06噬菌体裂解性强、裂解谱宽,腹腔注射噬菌体后血液、肝脏、脾脏的分布及达峰时间最快,为今后临床治疗感染多重耐药铜绿假单胞菌提供了理论基础。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 噬菌体 裂解谱 最佳感染复数 代谢动力学
噬菌体控制致病性大肠杆菌的研究进展
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作者 付丽娜 徐永平 +4 位作者 李晓宇 渠坤丽 张楠 王佳宁 王丽丽 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第12期140-144,共5页
大肠杆菌是引起细菌类食物中毒的主要原因之一,近年来,由大肠杆菌引起的食品安全事件频发,严重危害人类健康。各国科学家相继从肉类、蔬菜水果和牛奶等食品,或养殖场中分离得到了一些血清型的致病性大肠杆菌,其中最常见、流行最广泛的有... 大肠杆菌是引起细菌类食物中毒的主要原因之一,近年来,由大肠杆菌引起的食品安全事件频发,严重危害人类健康。各国科学家相继从肉类、蔬菜水果和牛奶等食品,或养殖场中分离得到了一些血清型的致病性大肠杆菌,其中最常见、流行最广泛的有O157:H7,K88,K99,O149等。然而,由抗生素滥用导致的耐药菌株出现,以及在动物饲养方面,抗生素种类和用量上的限制,使得人们对致病性大肠杆菌的控制更加困难。噬菌体是细菌的天敌,具有感染并裂解细菌的功能,与抗生素相比,噬菌体制剂具有特异性强、自我增殖快、研发时间短等优点,因此近年来噬菌体作为控制致病性大肠杆菌的研究受到广泛关注。本文就噬菌体在致病性大肠杆菌的生物防控方面的应用研究进展作一综述,以期为噬菌体及其制剂在保障动物性食品安全及动物疾病治疗领域的深入研究提供一定的参考。 展开更多
关键词 噬菌体 致病性大肠杆菌 生物防控 食品安全
噬菌体治疗的研究历程和发展方向 预览 被引量:1
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作者 李刚 胡福泉 《中国抗生素杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期807-813,共7页
噬菌体为能感染和杀灭细菌的病毒。作为天然抗菌物质,噬菌体自发现伊始,便被认为可用于治疗和预防细菌感染,即噬菌体治疗。噬菌体生物学知识的匮乏和抗生素黄金时代的到来,使得西方医学界逐渐摒弃了噬菌体治疗。近年来,面对全球范围内... 噬菌体为能感染和杀灭细菌的病毒。作为天然抗菌物质,噬菌体自发现伊始,便被认为可用于治疗和预防细菌感染,即噬菌体治疗。噬菌体生物学知识的匮乏和抗生素黄金时代的到来,使得西方医学界逐渐摒弃了噬菌体治疗。近年来,面对全球范围内日益严峻的细菌耐药性威胁,科学界开始重新审视和评估噬菌体的治疗价值。本文就噬菌体的发现、噬菌体治疗的研究历程以及发展方向作一综述。 展开更多
关键词 噬菌体 细菌感染 噬菌体治疗 细菌耐药
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关于噬菌体实用保藏方法的研究进展 预览
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作者 丛聪 袁玉玉 +4 位作者 渠坤丽 耿慧君 王丽丽 李晓宇 徐永平 《中国抗生素杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期742-748,共7页
近年来,噬菌体在人、畜疾病防控以及食品安全保障方面应用的研究愈发受到人们的重视,并已逐渐显示出替代抗生素的巨大潜力。然而,不当保藏方法引发的噬菌体效价降低甚至失活现象屡有发生,这不仅导致应用的失败,而且严重动摇了人们将噬... 近年来,噬菌体在人、畜疾病防控以及食品安全保障方面应用的研究愈发受到人们的重视,并已逐渐显示出替代抗生素的巨大潜力。然而,不当保藏方法引发的噬菌体效价降低甚至失活现象屡有发生,这不仅导致应用的失败,而且严重动摇了人们将噬菌体视为抗生素替代品的信心。鉴于此,本文作者收集、归纳、整理了多年来,特别是近年来有关噬菌体不同保藏方法(如悬液法、冻液法和干燥法)、不同影响因素(如介质、分散剂和温度)等方面的文献,整合分析以期找出维持噬菌体高活性的规律和恰当的方法,为未来噬菌体的广泛应用奠定理论基础。 展开更多
关键词 噬菌体 保藏 悬液 干燥 稳定剂
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人源性TRAbFab段单克隆抗体的筛选和鉴定 预览
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作者 杜晓明 李宁 方佩华 《天津医药》 CAS 2017年第8期851-855,共5页
目的通过噬菌体表面展示技术,运用已构建的人源性噬菌体抗体库,筛选、表达人源性促甲状腺激素受体抗体(TRAb)Fab段。方法以人TSHR膜外区的氨基端(hTSHRn)、人TSHR膜外区的羧基端(hTSHRc)的融合蛋白为抗原,通过数轮“吸附-洗脱... 目的通过噬菌体表面展示技术,运用已构建的人源性噬菌体抗体库,筛选、表达人源性促甲状腺激素受体抗体(TRAb)Fab段。方法以人TSHR膜外区的氨基端(hTSHRn)、人TSHR膜外区的羧基端(hTSHRc)的融合蛋白为抗原,通过数轮“吸附-洗脱-扩增”富集噬菌体抗体,筛选阳性克隆。从已构建的抗体库中筛选到甲状腺刺激性抗体(TSAb)Fab、甲状腺阻断性抗体(TBAb)Fab,噬菌体(Phage)-ELISA检测选取阳性克隆,PCR及双酶切鉴定TRAb阳性克隆。检测可溶性TRAbFab片段阳性克隆的表达,Westernblotting鉴定TRAb阳性克隆的免疫学活性,对TRAbFab阳性克隆进行测序分析。结果经过5轮富集筛选,成功筛选到特异性TRAb(TSAb、TBAb)Fab噬菌体抗体,产率分别提高约77、94倍。通过Phage-ELISA检测,鉴定出了具有抗原结合活性的单克隆抗体,实现可溶性表达。Westernblotting证实其免疫学活性。测序分析单克隆48的轻链可变区与人的免疫球蛋白轻链Vλ同源性达到94.4%,重链可变区与人的免疫球蛋白IgG重链VH4同源性为88.9%。克隆56的轻链可变区与人的免疫球蛋白轻链Vλ同源性达到95.6%,重链可变区与人的免疫球蛋白IgG重链VH3同源性为84.6%。结论本研究通过成功筛选获得人源性TRAb(TSAb、TBAb)Fab片段的单克隆抗体。 展开更多
关键词 受体 促甲状腺素 抗体 单克隆 免疫球蛋白Fab片段 细菌噬菌体 噬菌体展示库
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泛耐药鲍曼不动杆菌宽宿主谱噬菌体vB—AbaP—PD—AB9的生物学特性分析 被引量:4
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作者 刘一力 郭晓奎 +6 位作者 石毅 汤瑾 陈斌 刘芳芳 范惠清 严育忠 徐英 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期296-300,共5页
目的探讨从医院污水中分离出针对泛耐药鲍曼不动杆菌的宽宿主谱噬菌体,并对其生物学特性进行研究。方法2013年12月至2014年7月在上海多家医院检验科收集的泛耐药鲍曼不动杆菌为宿主菌,采用双层琼脂法从这些医院收集的污水中分离噬菌... 目的探讨从医院污水中分离出针对泛耐药鲍曼不动杆菌的宽宿主谱噬菌体,并对其生物学特性进行研究。方法2013年12月至2014年7月在上海多家医院检验科收集的泛耐药鲍曼不动杆菌为宿主菌,采用双层琼脂法从这些医院收集的污水中分离噬菌体,对宽宿主谱噬菌体进行生物学特性分析,包括电镜形态的观察,温度、pH稳定性及最佳MOI(感染复数)的测定,吸附性曲线、一步生长曲线和感染曲线的绘制,以及噬菌体基因组DNA的序列测定。结果分离出1株泛耐药鲍曼不动杆菌宽宿主谱噬菌体vD—AbaP-PD.AB9(PD—AB9),电镜形态属短尾噬菌体科。PD—AB9在4℃~50℃、pH4~11范围保持稳定,其最佳MOI为0.001。吸附试验中,5min内PD—AB9吸附率达95%以上。PD—AB9潜伏期为4min,爆发量为213。PD.AB9能明显抑制宿主菌的生长,且高MOI组(MOI=1,0.1,0.叭)比低MOI组(MOI=0.001,0.0001)作用更快。PD.AB9基因组为40938bp大小的线性双链DNA,GC含量39.34%。结论PD.AB9温度稳定性好、pH耐受范围广、吸附极快、潜伏期短、爆发量大、感染后迅速明显抑制宿主菌生长,有望作为新型抗菌制剂控制耐药鲍曼不动杆菌感染,其基因组生物学信息尚待进一步研究。 展开更多
关键词 细菌噬菌体 鲍氏不动杆菌 抗药性 细菌 生物学鉴定法 基因组成分
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