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miR-34a通过SIRT1诱导高糖条件下骨髓间充质干细胞衰老 预览
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作者 刘晓虹 张凤云 +2 位作者 王坤 王志荣 张卓琦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期994-1003,共10页
目的:研究微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)对高糖条件下骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老的调控及潜在机制。方法:从60~80 g的雄性SD大鼠骨髓中分离和培养BMSCs,将细胞分为5组:正常葡萄糖(NG... 目的:研究微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)对高糖条件下骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老的调控及潜在机制。方法:从60~80 g的雄性SD大鼠骨髓中分离和培养BMSCs,将细胞分为5组:正常葡萄糖(NG)组、高糖(HG)组、HG+miR-34a mimic组、HG+miR-34a NC组和HG+miR-34a inhibitor组;为了探究miR-34a是否通过沉默信息调节因子1(silent information regulator 1, SIRT1)调控高糖条件下BMSCs的衰老水平,除了上述5组,另增加HG+siRNA-SIRT1组、HG+siRNA-NT组和HG+miR-34a inhibitor+siRNA-SIRT1组。RT-qPCR法检测各组细胞中miR-34a及SIRT1 mRNA的表达,CCK-8法检测细胞的活力,衰老相关β-半乳糖苷酶染色法检测细胞的衰老情况,Western blot检测SIRT1、叉头框蛋白O3a(forkhead boxO3a, FOXO3a)和P21蛋白的表达。结果:与NG组相比,HG组miR-34a表达明显上调(P<0.01),细胞活力减弱(P<0.05),衰老细胞明显增加(P<0.01);与HG+miR-34a NC组相比,HG+miR-34a mimic组的细胞活力明显减弱(P<0.01),衰老细胞明显增加(P<0.01),SIRT1蛋白表达明显降低(P<0.01),FOXO3a蛋白表达明显升高(P<0.01),HG+miR-34a inhibitor组上述各参数则表现相反;与HG组相比,HG+siRNA-SIRT1组P21及FOXO3a蛋白表达均明显升高(P<0.01),当向HG+miR-34a inhibitor组加入siRNA-SIRT1后,miR-34a inhibitor对高糖条件下BMSCs中P21及FOXO3a蛋白表达的抑制作用被部分减弱(P<0.05)。结论:miR-34a通过靶向调节SIRT1的表达实现对高糖条件下BMSCs衰老的调控。 展开更多
关键词 微小RNA-34a 骨髓间充质干细胞 糖尿病 衰老 沉默信息调节因子1
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ApoJ基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对脑出血大鼠凋亡的影响 预览
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作者 普绢 刘茂春 +4 位作者 陈慧 刘亮 徐斌 刘学良 郑晓梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第6期846-850,共5页
目的探讨载脂蛋白(ApoJ)修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脑出血(ICH)大鼠凋亡可能的作用及其机制。方法体外分离及培养大鼠BMSCs,通过脂质体介导重组绿色荧光蛋白质粒pEGFP-N1-ApoJ转染BMSCs。将108只雄性SD大鼠随机分为ApoJ/BMSC... 目的探讨载脂蛋白(ApoJ)修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脑出血(ICH)大鼠凋亡可能的作用及其机制。方法体外分离及培养大鼠BMSCs,通过脂质体介导重组绿色荧光蛋白质粒pEGFP-N1-ApoJ转染BMSCs。将108只雄性SD大鼠随机分为ApoJ/BMSCs组、BMSCs组和生理盐水(NS)组,通过“二次注血法”制备ICH模型,造模成功后分别移植等体积的转染细胞悬液、BMSCs悬液和生理盐水至出血部位。通过干湿重法测量脑组织含水量,利用改良神经功能评分(mNss)评估大鼠神经功能情况。并采用RT-PCR、Westernblot检测血肿周围线粒体促凋亡因子(Omi/HtrA2)的表达情况。结果3组大鼠移植后,ApoJ/BMSCs组在第1、3、5、7天脑组织含水量明显低于同时间点的BMSCs组和NS组,其中BMSCs组低于NS组(P<0.05)。3组在移植后第1天时mNss评分差异无统计学意义(P>0.05),ApoJ/BMSCs组在移植后第3、5、7天的mNss评分明显低于BMSCs组和NS组,其中BMSCs组低于NS组(P<0.05)。RT-PCR结果显示,ApoJ/BMSCs组在第1、3、5、7天OmimRNA的表达较BMSCs组和NS组显著下调,其中BMSCs组低于NS组(P<0.05)。Westernblot结果显示,ApoJ/BMSCs组在第1、3、5、7天Omi/HtrA2蛋白的表达较BMSCs组和NS组显著下调,其中BMSCs组又低于NS组(P<0.05)。结论外源性ApoJ可能通过抑制Omi/HtrA2介导的细胞凋亡途径,减轻脑水肿,促进神经功能恢复,减轻ICH后继发性神经损伤。 展开更多
关键词 载脂蛋白J 骨髓间充质干细胞 脑出血 OMI/HTRA2 神经功能评分 脑含水量
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转录因子Krüppel样因子4抑制骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化研究
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作者 王亚寒 罗建平 +2 位作者 王小刚 杨彬 张新胜 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期27-30,共4页
目的 观察Krüppel样因子4(KLF4)对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的影响。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测TGF-β1诱导BMSCs 7 d和14 d对KLF4 mRNA和蛋白表达... 目的 观察Krüppel样因子4(KLF4)对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的影响。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测TGF-β1诱导BMSCs 7 d和14 d对KLF4 mRNA和蛋白表达的影响;建立KLF4过表达BMSC细胞株,用TGF-β1诱导7 d或14 d,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,Real-time PCR和Western blot分析髓核细胞相关蛋白聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白α1链(Col2A1)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、角蛋白19(KRT19)和叉头蛋白(FOXF1)表达。结果 与对照组比较,TGF-β1诱导后KLF4 mRNA和蛋白表达均显著降低(第7天mRNA:0.653±0.083比1.027±0.068,t=6.012,P<0.01;第14天mRNA:0.453±0.065比1.063±0.096,t=9.105,P<0.01;第7天蛋白,0.601±0.112比0.873±0.051,t=3.874,P<0.05;第14天蛋白:0.251±0.087比0.893±0.078,t=9.543,P<0.01),细胞增殖增加(第7天,166.355±11.132比99.647±6.220,t=9.064,P<0.01;第14天:195.333±10.512比124.667±9.609,t=8.598,P<0.01),Aggrecan、Col2A1、SOX9、KRT19、FOXF1 mRNA (Aggrecan:2.600±0.255比1.017±0.095,t=10.07,P<0.01;Col2A1:3.441±0.259比1.010±0.076,t=15.58,P<0.01;SOX9:2.767±0.139比1.033±0.111,t=16.92,P<0.01;KRT19:3.710±0.210比1.005±0.076,t=20.95,P<0.01;FOXF1:2.783±0.174比1.035±0.132,t=13.88,P<0.01)和蛋白(Aggrecan:0.760±0.072比0.233±0.055,t=10.05,P<0.01;Col2A1:0.941±0.046比0.190±0.040,t=21.36,P<0.01;SOX9:1.237±0.140比0.317±0.065,t=10.31,P<0.01;KRT19:0.897±0.072比0.137±0.051,t=14.84,P<0.01;FOXF1:1.033±0.191比0.181±0.056,t=7.434,P<0.01)表达升高。与TGF-β1单独处理比较,过表达KLF4抑制了细胞增殖(第7天:125.750 ±10.386比166.355±11.132,t=4.620,P<0.05;第14天:148.526±13.449比195.333±10.512,t=4.702,P<0.01),降低了Aggrecan、Col2A1、SOX9、KRT19、FOXF1 mRNA (Aggrecan:1.510±0.187比2.600±0.255,t=5.970,P<0.01;Col2A1:1.727±0.254比3.441±0.259,t=8.176,P<0.01;SOX9:1.493±0.169比2.767±0.139,t=10.08,P<0.01;KRT19:2.117±0.387比3.710±0.210,t=6.273,P<0.01;FOXF 展开更多
关键词 Krüppel样因子4 骨髓间充质干细胞 髓核细胞 增殖 分化
低强度全身振动与绝经后骨质疏松症 被引量:1
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作者 李汇明 李良 《生物医学工程学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期301-306,313共7页
绝经后骨质疏松症是体内雌激素降低而导致的一类高骨转换型骨质疏松症,是以骨量减少、骨折风险性增加为特征的一种全身性骨骼疾病。近年来,低强度全身振动,即加速度小于1 g(g=9.81 m/s^2)的全身振动,作为一种非药理性防治骨质疏松症... 绝经后骨质疏松症是体内雌激素降低而导致的一类高骨转换型骨质疏松症,是以骨量减少、骨折风险性增加为特征的一种全身性骨骼疾病。近年来,低强度全身振动,即加速度小于1 g(g=9.81 m/s^2)的全身振动,作为一种非药理性防治骨质疏松症的方式,因其副作用小、操作简单且相对安全而受到广泛关注。研究表明,低强度全身振动可以改善骨强度,增加骨体积和骨密度。但大量的研究结果发现,针对动物模型或人类患者,由于年龄和激素水平不同,低强度全身振动的治疗效果也不尽相同。迄今尚未有明确的低强度全身振动治疗方案适用于不同的治疗对象。整体和细胞水平的研究亦表明,低强度全身振动刺激很可能与改变机体激素水平和干细胞的定向分化有关。本文分析了近年来相关文献,从振动参数、振动效果以及作用机制三方面进行综述,以期为低强度全身振动用于绝经后骨质疏松症的治疗提供科学依据和临床指导。 展开更多
关键词 低强度全身振动 绝经后骨质疏松症 非药理性 骨髓间充质干细胞
小鼠骨髓间充质干细胞对人舌鳞状细胞癌Cal27细胞的归巢作用及其对Cal27细胞增殖和迁移的促进作用 预览
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作者 孟琳 王璐 +6 位作者 布文奂 丁鑫鑫 高华丽 王梓霖 刘玉兰 李琛 孙宏晨 《吉林大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第5期891-896,共6页
目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSCs)对舌鳞状细胞癌Cal27细胞的归巢作用,并观察mBMSCs影响下舌鳞状细胞癌Cal27细胞的生物学行为。方法:以全骨髓法分离提纯mBMSCs,采用流式细胞术分析细胞表型进行鉴定。将mBMSCs分为空白对照组、Ha... 目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSCs)对舌鳞状细胞癌Cal27细胞的归巢作用,并观察mBMSCs影响下舌鳞状细胞癌Cal27细胞的生物学行为。方法:以全骨髓法分离提纯mBMSCs,采用流式细胞术分析细胞表型进行鉴定。将mBMSCs分为空白对照组、Hacat细胞对照组和Cal27细胞实验组,将正常培养基、Hacat细胞条件培养基和Cal27细胞条件培养基分别与mBMSCs共培养后,通过细胞迁移实验检测mBMSCs迁移的细胞数。再将Cal27细胞分为单纯Cal27细胞对照组和与mBMSCs共培养Cal27细胞实验组(共培养组),共培养组使用Transwell法共培养Cal27细胞和mBMSCs,采用细胞增殖实验和克隆形成实验检测共培养后Cal27细胞的增殖能力;细胞迁移实验检测共培养后Cal27细胞的迁移能力。结果:倒置显微镜观察,mBMSCs多数细胞呈短梭形,细胞质丰富,细胞核呈椭圆形或肾形,细胞突长短不一,细胞排列整齐。流式细胞术检测,mBMSCs表面标志物CD44、CD29和Sca-1呈阳性,CD45和CD11b呈阴性。与空白对照组和Hacat细胞对照组比较,Cal27组细胞实验归巢至Cal27细胞的mBMSCs数量明显增加(P<0.01)。与单纯Cal27细胞对照组比较,共培养组Cal27细胞从共培养第3天起生长速度明显高于对照组(P<0.01),克隆形成数增加。细胞迁移实验,共培养组Cal27细胞穿膜细胞数较单纯Cal27细胞对照组明显增加(P<0.01)。结论:mBMSCs可归巢至舌鳞状细胞癌,促进舌鳞癌Cal27细胞的增殖和迁移,从而促进舌鳞癌的发展,提示mBMSCs可作为抗肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 口腔鳞状细胞癌 共培养 归巢
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三七总皂苷通过活化骨髓来源的间充质干细胞改善急性心肌梗死大鼠的心功能 被引量:2
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作者 周剑 吴荣 王龙 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期605-611,共7页
目的观察三七总皂苷(PNS)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影响并探讨其对骨髓来源的间充质干细胞(BM-MSC)的动员作用。方法将48只大鼠随机分成假手术组、AMI组(模型组)、PNS低剂量组(在造模后给予100mg/kgPNS灌胃)、PNS高剂量组(在造... 目的观察三七总皂苷(PNS)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影响并探讨其对骨髓来源的间充质干细胞(BM-MSC)的动员作用。方法将48只大鼠随机分成假手术组、AMI组(模型组)、PNS低剂量组(在造模后给予100mg/kgPNS灌胃)、PNS高剂量组(在造模后给予500mg/kg PNS灌胃)。使用冠脉结扎法建立AMI动物模型,分别用高低剂量PNS处理7d和21d后,每组处死6只大鼠;处死前超声检测大鼠心功能,随后取外周血和心脏组织。流式细胞术检测CD90、CD105、CD54、CD106的频数反映BM-MSC的动员情况,ELISA检测干细胞因子(SCF)含量,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色观察心肌梗死面积,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学染色法检测CD105表达。结果与假手术组相比,模型组细胞凋亡水平显著增加;PNS处理7d和21d后,与模型组比较,低剂量和高剂量PNS组心肌梗死面积和细胞凋亡水平均降低。与假手术组比较,术后7d和21d,模型组左室射血分数(LVEF)和左室缩短分数(LVFS)降低,而收缩期左室内径(LVID)、舒张期左室内径(LVIDd)、左心室舒张末期容积(LVEDV)和左心室收缩末期容积(LVESV)增加;而PNS处理可有效改善上述指标。与模型组比较,PNS呈浓度依赖性增加外周血中CD90、CD105阳性细胞数和SCF的含量,降低CD54和CD106阳性细胞数。PNS处理组心脏组织内CD105表达明显高于模型组。结论PNS处理可改善心肌梗死后左心室功能,可能与PNS抑制心肌细胞凋亡,促进BM—MSC动员有关。 展开更多
关键词 三七总皂苷(PNS) 急性心肌梗死 骨髓来源的间充质干细胞(BM-MSC) 细胞迁移
乳鼠心肌细胞上清液对大鼠MSCs心肌动作电位相关离子通道基因表达的影响 预览
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作者 闫福曼 张进 +3 位作者 周乐全 孙雨菡 黄进 丁富平 《山东医药》 2018年第22期8-11,共4页
目的观察不同状态下培养的乳鼠心肌细胞上清液对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌动作电位相关离子通道基因表达的影响。方法 分别取大鼠骨髓MSCs和乳鼠心肌细胞进行体外培养。实验分为MSCs组、5-氮胞苷(5-Aza)诱导组、正常诱导组、缺氧... 目的观察不同状态下培养的乳鼠心肌细胞上清液对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌动作电位相关离子通道基因表达的影响。方法 分别取大鼠骨髓MSCs和乳鼠心肌细胞进行体外培养。实验分为MSCs组、5-氮胞苷(5-Aza)诱导组、正常诱导组、缺氧诱导组和心肌细胞组,MSCs组为正常培养的MSCs,5-Aza诱导组为心肌定向诱导剂5-Aza干预的MSCs,正常诱导组为正常心肌细胞上清液干预的MSCs,缺氧诱导组为缺氧状态下的心肌细胞上清液干预的MSCs,心肌细胞组为不予干预的正常心肌细胞。采用RT-PCR法检测各组细胞膜上钠通道(SCN2a)、钾通道(Kv2.1、Kv1.4、Kir1.1、EAG1)和钙通道基因(CCHL2α)mRNA表达的变化。结果 MSCs组细胞膜上表达与心肌动作电位相关的离子通道基因。与MSCs组相比,其余各组SCN2a、Kv2.1、Kir1.1、EAG1、CCHL2αmRNA表达均升高(P<0.05或<0.01),且缺氧诱导组、心肌细胞组Kv1.4 mRNA表达升高(P<0.05或<0.01),但5-Aza诱导组、正常诱导组、缺氧诱导组各种离子通道基因表达两两比较差异无统计学意义。结论 乳鼠正常心肌细胞上清液和缺氧心肌细胞上清液可诱导大鼠MSCs心肌动作电位相关离子通道基因表达增加,心肌微环境有利于大鼠MSCs发生心肌电生理变化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 心肌细胞 离子通道 动作电位
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神经细胞黏附分子对小鼠骨髓间充质干细胞黏附、迁移及细胞形态的影响 预览 被引量:1
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作者 毕佳佳 王磊 +2 位作者 李静 丁琼琼 冯志伟 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第8期1082-1087,共6页
目的探讨神经细胞黏附分子(NCAM)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附、迁移及细胞形态的影响。方法从野生型小鼠和NCAM基因敲除小鼠中分离、培养BMSCs,Westernblot和免疫荧光标记检测NCAM的表达;划痕实验和黏附实验分别检测细胞... 目的探讨神经细胞黏附分子(NCAM)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附、迁移及细胞形态的影响。方法从野生型小鼠和NCAM基因敲除小鼠中分离、培养BMSCs,Westernblot和免疫荧光标记检测NCAM的表达;划痕实验和黏附实验分别检测细胞迁移和黏附能力;倒置显微镜下观察细胞形态;Westernblot检测β1整联蛋白、E—cadherin、β—catenin和N—cadherin的表达。结果NCAM基因敲除后细胞的迁移能力和黏附能力明显降低,β1整联蛋白的表达下调(P〈0.01),BMSCs形态由不规则形变为扁平形,且成簇增殖,上皮细胞标记蛋白E—cadherin和β-catenin的表达显著上调(P〈0.05),而间质细胞标记蛋白N-cadherin的表达下调(P〈0.01)。结论NCAM通过调控β1整联蛋白的表达影响BMSCs的黏附和迁移,同时NCAM可能对BMSCs的间质上皮转化起负调控作用。 展开更多
关键词 神经细胞黏附分子 骨髓间充质干细胞 迁移 间质上皮转化
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Wenshen Zhuanggu formula effectively suppresses breast cancer bone metastases in a mouse xenograft model
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作者 Jia-jia LI Wei-ling CHEN +5 位作者 Jian-yi WANG Qian-wen HU Zhen-ping SUN Shuai ZHANG Sheng LIU Xiang-hui HAN 《中国药理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第10期1369-1380,共12页
Wenshen Zhuanggu 公式(WSZG ) 是在乳癌病人为骨头转移的预防用作一个助手的繁体中文药。在这研究,我们在在乳癌骨头转移的一个老鼠异种皮移植模型阻止骨头转移和潜在的机制调查了 WSZG 的功效。这个模特儿被独自一个的人的 MDA-MB-23... Wenshen Zhuanggu 公式(WSZG ) 是在乳癌病人为骨头转移的预防用作一个助手的繁体中文药。在这研究,我们在在乳癌骨头转移的一个老鼠异种皮移植模型阻止骨头转移和潜在的机制调查了 WSZG 的功效。这个模特儿被独自一个的人的 MDA-MB-231BO-Luc 乳癌房间或癌症房间的混合物的注射与骨头建立导出髓的间充质的干细胞(BMSC ) 进在雌裸体老鼠的心的左室。然后,鼠标与 WSZG 被对待(P 的 3.25, 6.5 或 13.0 mgwith 协会值 < 5 s 作为引用数据从第一颈的椎骨被获得到脚关节关节。SMM 从数字化的代表性的区域的求和被计算。全部、地区性的 LSTM 用 DXA.Results 被测量:强壮的重要关联在 DXA 为男孩和女孩在模特儿发展组获得的 MRI 和 LSTM 测量的匹配地点的 SMM (总数,手臂,箱子和腿)之间被观察( R <sup>2</sup><sub >形容词</sub>=0.86-0.97, P < 0.01 ,估计的标准错误(看) =0.08-0.44kg )。当这些 SMM 预言方程被用于确认组时,测量小孩?? 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 异种移植 模型 小鼠 公式 骨髓间充质干细胞 肿瘤干细胞 阳性对照
缺氧条件下骨髓间充质干细胞对人冠状动脉内皮细胞自噬和凋亡的影响 预览 被引量:1
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作者 马迅 李鸿木 +4 位作者 王略力 陶俊 林喜锋 华平 熊利华 《岭南现代临床外科》 2017年第2期140-146,共7页
目的 探索缺氧状况下MSC对内皮细胞自噬的诱导以及对早期凋亡率的影响。方法 构建HCAEC与MSC间接共培养模型,实验分组:共培养组:MSC与HCAEC共培养;单独培养组:HCAEC单独培养;对照组:HCAEC使用与共培养组相同的培养基进行单独培养。... 目的 探索缺氧状况下MSC对内皮细胞自噬的诱导以及对早期凋亡率的影响。方法 构建HCAEC与MSC间接共培养模型,实验分组:共培养组:MSC与HCAEC共培养;单独培养组:HCAEC单独培养;对照组:HCAEC使用与共培养组相同的培养基进行单独培养。上述各组分别予常氧(5%CO2,95%空气)和缺氧(1%O2,5%CO2,94%N2)培养24 h,Western blotting检测各组HCAEC细胞LC3蛋白和Beclin-1蛋白的表达量,RT-q PCR检测各组HCAEC细胞LC3基因和Beclin-1基因的表达水平,流式细胞术检测各组HCAEC细胞早期凋亡率。结果 共培养组与单独培养组相比、以及缺氧组与常氧组相比,LC3蛋白和Beclin-1蛋白表达量均有升高(P〈0.05)。各组间LC3基因和Beclin-1基因的表达水平没有检测到明显差异(P〉0.05)。缺氧组中共培养组的早期凋亡率为(8.86%±1.48%),明显低于单独培养组(15.23%±2.56%)和对照组(14.49%±3.31%)(P〈0.05)。结论 MSC可以诱导HCAEC产生自噬,并在缺氧状况下改善HCAEC的生存状况,减少早期凋亡率。 展开更多
关键词 缺氧 冠状动脉内皮细胞 骨髓间充质干细胞 共培养 自噬 凋亡
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MSCs与CD34+单核细胞共培养联合脱细胞支架植入体内构建兔阴茎海绵体 预览
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作者 李瑞庭 刘志瀚 +3 位作者 冀晨阳 肖小莲 梁伟强 张金明 《岭南现代临床外科》 2017年第2期177-182,共6页
目的 研究将异体骨髓间充质干细胞(MSCs)和CD34+单核细胞(MNCs)共培养体系种植于脱细胞海绵体支架上在兔体内构建阴茎海绵体组织的可行性。方法 分别从兔骨髓与兔外周血中提取并鉴定MSCs与CD34+MNCs,将两种细胞组分以107/m L的密... 目的 研究将异体骨髓间充质干细胞(MSCs)和CD34+单核细胞(MNCs)共培养体系种植于脱细胞海绵体支架上在兔体内构建阴茎海绵体组织的可行性。方法 分别从兔骨髓与兔外周血中提取并鉴定MSCs与CD34+MNCs,将两种细胞组分以107/m L的密度种植于制备好的兔阴茎海绵体脱细胞胶原支架上,同时将相同密度的MSCs、CD34+MNCs分别种植于支架上,培养4天后植入一种兔阴茎海绵体缺损模型中。3个月后对工程化组织进行取材,行H&E及Masson三色染色等组织学检测。结果 MSCs和CD34+MNCs共培养组近白膜处的海绵体保留了正常海绵体结构,而MSCs组、CD34+单核细胞组及空白支架组以疤痕增生为主,尽管较之CD34+单核细胞组及空白支架组,间充质干细胞组疤痕组织中的血管数目较多(P〈0.05)。结论 我们的研究证明了将MSCs和CD34+MNCs的共培养体系种植于脱细胞支架上植入兔体内可以构建出一段组织学上与原生海绵体相似的组织;CD34+MNCs在体内主要通过协同MSCs而非单独发挥其促血管化的生物学效应。 展开更多
关键词 CD34+单核细胞 骨髓间充质干细胞 脱细胞海绵体支架 组织工程 组织工程化阴茎海绵体 阴茎再造
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沉默PARP-1对氢醌所致大鼠骨髓间充质干细胞凋亡影响 被引量:2
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作者 高羽亭 杜进林 +1 位作者 杨慧 唐焕文 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2017年第1期36-41,共6页
目的探讨沉默聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)对氢醌所致大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)凋亡的影响。方法①PARP-1基因RNA干扰表达质粒转染BMMSCs后,经新霉素筛选获得PARP-1沉默BMMSCs,以免疫印迹法鉴定所构建的细胞。②以空载体BM... 目的探讨沉默聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)对氢醌所致大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)凋亡的影响。方法①PARP-1基因RNA干扰表达质粒转染BMMSCs后,经新霉素筛选获得PARP-1沉默BMMSCs,以免疫印迹法鉴定所构建的细胞。②以空载体BMMSCs为对照组,以PARP-1沉默BMMSCs为实验组。分别以质量浓度为0.0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0和320.0μmol/L的氢醌(溶于磷酸盐缓冲液)作用于2组细胞24 h,以噻唑蓝法检测细胞活力,根据细胞活力检测结果选择后续实验氢醌染毒剂量。③以浓度为0.0-20.0μmol/L的氢醌作用于2组细胞24 h后,以流式细胞技术检测细胞凋亡情况,以实时荧光定量-聚合酶链反应检测PARP-1 mRNA表达情况。结果①用质量浓度为400 mg/L的新霉素成功筛选出PARP-1沉默BMMSCs和空载体BMMSCs,PARP-1沉默BMMSCs中PARP-1蛋白表达量较BMMSCs下降85.00%,成功建立PARP-1沉默细胞。②根据细胞活力检测结果,后续实验选择氢醌染毒剂量为0.0-20.0μmol/L。3与氢醌染毒剂量为0.0μmol/L时比较,对照组及实验组细胞早期凋亡率分别在氢醌染毒剂量为10.0和5.0μmol/L时即出现有统计学意义的升高(P〈0.05);且在浓度为0.0-10.0μmol/L时,随着氢醌染毒剂量的增加,2组细胞早期凋亡率均增加(P〈0.01),均呈剂量-效应关系。③与氢醌染毒剂量为0.0μmol/L比较,对照组和实验组细胞的PARP-1 mRNA相对表达水平均在氢醌染毒剂量为5.0μmol/L时即出现有统计学意义的升高(P〈0.05),且在每个氢醌染毒剂量下实验组细胞PARP-1 mRNA相对表达水平均低于对照组(P〈0.05);在浓度为0.0-20.0μmol/L时,随着氢醌染毒剂量的增加,2组细胞PARP-1 mRNA相对表达水平均增加(P〈0.01),均呈剂量-效应关系。结论 PARP-1沉默BMMSCs在氢醌作用下更易发生凋亡,PARP-1可能参与了氢醌诱导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1 氢醌 骨髓间充质干细胞 凋亡 大鼠
鼻阻塞对幼年大鼠髁突骨髓间充质干细胞成软骨分化的作用 被引量:1
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作者 王晓玲 孙蕙珺 +4 位作者 朱妍菲 唐艳梅 薛晓晨 聂萍 朱敏 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2017年第1期1-5,共5页
目的 :通过幼年大鼠开口呼吸动物模型探讨鼻阻塞对髁突骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨向分化的作用。方法:40只4周龄SD大鼠随机分为2组,双侧鼻阻塞组28只,阻塞时间为8:00-16:00,至8周;对照组12只,不作处理。在建模初始、2周末、4... 目的 :通过幼年大鼠开口呼吸动物模型探讨鼻阻塞对髁突骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨向分化的作用。方法:40只4周龄SD大鼠随机分为2组,双侧鼻阻塞组28只,阻塞时间为8:00-16:00,至8周;对照组12只,不作处理。在建模初始、2周末、4周末分别取2组双侧髁突BMSCs体外培养并鉴定,CCK-8法比较2组细胞的增殖差异,RT-PCR法检测2组BMSCs成软骨标志基因(Agg、COL-Ⅱ、SOX-9)表达的差异。采用SPSS19.0软件包对实验数据进行统计学分析。结果:鼻阻塞组髁突BMSCs的细胞增殖曲线与对照组无显著差异(P〉0.05),但成软骨标志基因的表达显著下降(P〈0.05)。结论:幼年大鼠双侧间歇性鼻阻塞致其生长发育期开口呼吸,出现下颌骨发育不足,与髁突BMSCs软骨向分化受到抑制有关。 展开更多
关键词 鼻阻塞 下颌骨 髁突 骨髓间充质干细胞 成软骨分化
骨髓间充质干细胞对染矽尘大鼠肺纤维化干预作用 被引量:4
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作者 张应洵 黄明 +6 位作者 陆丰荣 程樱 陈建忠 梁伟辉 夏丽华 曾小菁 黄汉林 《中国职业医学》 北大核心 2017年第2期121-126,共6页
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对染矽尘大鼠不同时期肺纤维化的干预作用.方法 无特定病原体级SD大鼠随机分为模型组、2周组、4周组和对照组,每组6只,雌雄各半.采用一次性非暴露式气管注入法,前3组大鼠予0.5 mL质量浓度为30 g/L... 目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对染矽尘大鼠不同时期肺纤维化的干预作用.方法 无特定病原体级SD大鼠随机分为模型组、2周组、4周组和对照组,每组6只,雌雄各半.采用一次性非暴露式气管注入法,前3组大鼠予0.5 mL质量浓度为30 g/L的无菌矽尘悬液,对照组大鼠予等体积0.90%氯化钠溶液.2周组、4周组大鼠分别在染尘后第2和4周经尾静脉单次注射0.5 mL细胞密度为5×10^9/L的BMMSCs悬液,模型组和对照组大鼠予等体积0.90%氯化钠溶液.染尘后第12周对4组大鼠进行肺部计算机断层扫描(CT)检查,观察大鼠肺部组织病理改变,检测肺脏脏器系数、肺组织羟脯氨酸(HYP)及血清转化生长因子β1(TGF-β1)的水平.结果 肺部CT显示:对照组大鼠肺野清透,肺纹理清晰;模型组大鼠肺部见弥漫分布、大小不一的颗粒状高密度影及条索状或网状纤维影;2周组大鼠肺部可见散在分布的细小颗粒状阴影;4周组大鼠肺部可见散在的颗粒状高密度影及网状阴影,颗粒大小及分布面积均小于模型组.模型组、2周组和4周组大鼠肺部CT值、肺脏脏器系数、肺组织HYP水平和血清TGF-β1水平均高于对照组(P〈0.05).肺部CT值、肺组织HYP水平和血清TGF-β1水平从低到高依次为对照组〈2周组〈4周组〈模型组(P〈0.05);模型组和4周组大鼠肺脏脏器系数均高于2周组(P〈0.05).结论 BMMSCs可减轻矽尘导致的肺纤维化,在纤维化早期应用效果更佳. 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 矽肺 肺纤维化 计算机断层扫描 脏器系数 羟脯氨酸 转化生长因子β1
骨髓间充质干细胞移植对光气吸入性肺损伤大鼠肺组织及血浆炎症因子的干预作用 预览 被引量:1
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作者 闵思庆 何岱昆 +2 位作者 钟志越 陈俊峰 申捷 《中国临床医学》 2017年第3期400-404,共5页
目的:观察骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMD-MSCs)移植对光气吸入性肺损伤大鼠肺组织及血浆炎症因子的干预作用。方法:96只雄性SD大鼠随机分为:空气对照组(A组)、BMD-MSCs干预对照组(AM组)、... 目的:观察骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMD-MSCs)移植对光气吸入性肺损伤大鼠肺组织及血浆炎症因子的干预作用。方法:96只雄性SD大鼠随机分为:空气对照组(A组)、BMD-MSCs干预对照组(AM组)、光气染毒组(PH组)、光气染毒后BMD-MSCs干预组(PM组),每组8只。染毒组按8.33 mg/L动态恒量染毒5min。PM组染毒后即刻经尾静脉注射10~6 BMD-MSCs。4组分别于模型完成后6、24、48h处死大鼠,取肺组织行病理检查及肺湿/干比、血气分析,取血浆行Bio-Plex细胞因子检测。结果:PH组较A组TNF-α浓度明显升高(P〈0.05);PM组较PH组TNF-α浓度降低(P〈0.05)。PM组与PH组血浆IL-4浓度6h、24h均降低,以PM组下降更明显(P〈0.05);48h明显升高,以PM组升高更明显(P〈0.05)。PH组较A组IL-10浓度高(P〈0.05);PM组较PH组IL-10浓度高(P=0.013)。结论:经尾静脉注射BMD-MSCs后可以使大鼠血浆中抗炎因子IL-4和IL-10逐渐升高,促炎因子TNF-α逐渐下降,提示其对光气致急性肺损伤大鼠肺具有保护作用。 展开更多
关键词 光气 急性肺损伤 细胞因子 骨髓间充质干细胞
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尼古丁对大鼠骨髓间充质干细胞软骨分化的干预作用研究 预览
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作者 邓宇 陈廖斌 《骨科》 CAS 2017年第5期389-393,共5页
目的从细胞水平证实尼古丁对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导分化为软骨细胞的干预作用。方法大鼠BMSCs传代至第3代,以海藻酸钠微球生物支架进行BMSCs三维培养。加入转化生长因子β1(TGF-β1)进行诱... 目的从细胞水平证实尼古丁对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导分化为软骨细胞的干预作用。方法大鼠BMSCs传代至第3代,以海藻酸钠微球生物支架进行BMSCs三维培养。加入转化生长因子β1(TGF-β1)进行诱导分化,在细胞分化过程中,分别给予0.1、1、10、100μmol/L尼古丁干预,设对照组。第28天收获细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞代谢活力、阿利新蓝特殊染色检测细胞中氨基葡聚糖的含量、实时荧光定量PCR检测软骨分化标志基因(COL2A1、Aggrecan、COL1A1、COL10A1)的表达情况。结果诱导培养28d后,MTT法结果示不同浓度尼古丁干预后的各组细胞代谢活力与对照组细胞相比,没有明显改变;当尼古丁作用浓度分别为0、0.1、1、10和100μmol/L时,其BMSCs海藻酸钠微球的阳性染色区域占切片的百分比分别为90.1%、76.5%、64.8%、44.1%、4.5%;与对照组比较,尼古丁能显著抑制软骨诱导分化下的BMSCs细胞中Aggrecan、COL2A1的表达,同时促进COL1A1、COL10A1的表达(P均<0.05),并且存在浓度依赖性。结论尼古丁能够明显抑制大鼠BMSCs的软骨分化,导致其软骨分化质量差。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 尼古丁 软骨分化 组织工程
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骨髓间充质干细胞不同时相干预对SD大鼠急性肺损伤的修复作用 预览 被引量:1
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作者 叶永顺 廖画 +2 位作者 李文丰 王依 刘华 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第5期657-661,共5页
目的 探究骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)不同时间干预对以静脉注射脂多糖(LPS)构建大鼠急性肺损伤(ALI)模型的修复作用。方法 体外分离、培养并鉴定大鼠BM-MSCs。将120只雄性SD大鼠纳入研究,分成对照组、LPS组和LPS+BM-MSCs组,上述... 目的 探究骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)不同时间干预对以静脉注射脂多糖(LPS)构建大鼠急性肺损伤(ALI)模型的修复作用。方法 体外分离、培养并鉴定大鼠BM-MSCs。将120只雄性SD大鼠纳入研究,分成对照组、LPS组和LPS+BM-MSCs组,上述3组因BM-MSCs处理时间差异分成2、8、24、48、96 h共5个亚组(n=8)。LPS组以5 mg/kg尾静脉注射LPS,LPS+BM-MSCs组在注射LPS后分别在上述不同时间点尾静脉注射1 mL的BM-MSCs(1×10^6·mL^-1);对照组则在上述时相点注射等剂量的生理盐水。检测各组肺泡灌洗液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)^-1α等炎症因子浓度、肺湿干比及肺损伤病理评分。结果 成功分离、培养、纯化BM-MSCs,并诱导向成骨、成软骨、成脂细胞分化;流式细胞术鉴定所培养细胞系CD90、CD105、CD45、CD34阳性率分别为98.89%、97.37%、3.17%及1.41%。在LPS诱导的ALI中,TNF-α、IL^-1α、IL^-10在8 h亚组中测得最高值[分别为(364.911±32.182)pg/mL、(286.316±18.567)pg/mL、(162.037±22.377)pg/mL],随着时间延长逐渐下降;肺湿干比在2 h亚组中测得最高值(6.361±0.265);肺水肿及组织损伤程度在2 h亚组中最严重,病理评分也测得最高值(0.462±0.048),随着时间延长逐渐下降。在LPS+BM-MSCs组中,2、8、24 h的炎症因子、湿干比及病理评分均有显著改变(P〈0.05),随着时间延长,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 早期应用BM-MSCs可减少TNF-α、IL^-1α等炎症因子,从而减轻肺组织损伤及肺泡水肿。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 急性肺损伤 炎症因子
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ESM-1改善小鼠MSCs生物学特性的机制研究 预览
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作者 朱宗成 盛晓东 +2 位作者 周建龙 范韬 金骁琦 《医学研究杂志》 2017年第3期95-98,共4页
目的探讨内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell—specific molecule1,ESM-1)预处理小鼠骨髓间充质干细胞(bonemarrow—derived mesenchymal stem cells,MSCs)后改善其生物学特性的机制。方法通过不同浓度的ESM-1,对MSCs进行预... 目的探讨内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell—specific molecule1,ESM-1)预处理小鼠骨髓间充质干细胞(bonemarrow—derived mesenchymal stem cells,MSCs)后改善其生物学特性的机制。方法通过不同浓度的ESM-1,对MSCs进行预处理,分析其分泌的细胞凋亡相关因子包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肿瘤坏死因子-β(TNF-β)和干细胞生长相关因子:缺氧诱导因子(HIF)、转化生长因子(TGF-β1)等细胞因子含量的改变情况,以明确ESM-1预处理MSCs改善其生物学特性的机制。结果通过不同浓度的ESM-1干预MSCs后,各浓度组TNF-α、TNF—β、HIF、TGF—β1含量随着ESM-1干预浓度的升高而升高,各组之间差异有统计学意义(P=0.000)。结论ESM-1预处理MSCs可提高与炎性反应、细胞凋亡和细胞生长分化相关的多种细胞因子的含量,可能通过多种信号转导通路改善MSCs的生物学特性。 展开更多
关键词 内皮细胞特异性分子-1 骨髓间充质干细胞 小鼠
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Bone marrow-derived mesenchymal stem cells ameliorate sodium nitrite-induced hypoxic brain injury in a rat model 预览
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作者 Elham H.A.Ali Omar A.Ahmed-Farid Amany A.E.Osman 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第12期1990-1999,共10页
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生长分化因子15对骨髓间充质干细胞增殖及基因表达的影响 预览
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作者 戈旌 李萌宇 +4 位作者 华洪飞 王宁涛 汪湧 张志愿 王绍义 《口腔医学》 CAS 2017年第9期778-784,共7页
目的探讨生长分化因子15(GDF15),对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的调控作用及其机制。方法分离、培养大鼠BMSCs,流式细胞术和免疫荧光染色鉴定BMSCs;CCK8检测不同浓度rh-GDF15对BMSCs增殖的影响,流式细胞周期检测不同浓度rh-GD... 目的探讨生长分化因子15(GDF15),对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖的调控作用及其机制。方法分离、培养大鼠BMSCs,流式细胞术和免疫荧光染色鉴定BMSCs;CCK8检测不同浓度rh-GDF15对BMSCs增殖的影响,流式细胞周期检测不同浓度rh-GDF15对BMSCs细胞周期的影响;Realtime PCR检测不同浓度rh-GDF15对BMSCs中ALP、RunX2、COL-1、VEGF、b FGF和HIF-1α基因表达的影响。结果常氧条件下,GDF15可以在48 h内促进BMSCs的增殖,并上调VEGF的基因表达,且具有浓度相关性,50μg/L的rh-GDF15可以显著降低BMSCs的G1期,上调S期和G2期细胞比例,促增殖作用最显著。结论 GDF15可以在短时间内促进BMSCs的增殖和VEGF基因表达,其机制还需进一步探索。 展开更多
关键词 生长分化因子15 骨髓干细胞 增殖
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