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牛大力漆酶基因CsLAC17的克隆与载体构建
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作者 罗冬梅 赵亚文 +2 位作者 荆永琳 徐立 李志英 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1906-1912,共7页
为研究漆酶在牛大力生长发育过程中的生物学功能,本实验以牛大力叶片为材料,从反转录PCR获得的cDNA中扩增出漆酶基因CsLAC17全长。序列分析表明,CsLAC17 c DNA全长为2 010 bp,开放阅读框大小为1 755 bp,编码一个由584个氨基酸组成的蛋... 为研究漆酶在牛大力生长发育过程中的生物学功能,本实验以牛大力叶片为材料,从反转录PCR获得的cDNA中扩增出漆酶基因CsLAC17全长。序列分析表明,CsLAC17 c DNA全长为2 010 bp,开放阅读框大小为1 755 bp,编码一个由584个氨基酸组成的蛋白质。结构域分析表明,Cs LAC17蛋白的保守结构域具有漆酶典型结构域的特征--铜离子结合域(Cu-oxidase和Cu-oxidase-2)。同源序列分析表明,Cs LAC17蛋白序列与绿豆(Vigna radiata var. radiata)和野生大豆(Glycine soja)同源性为88%、藜豆(Mucuna pruriens)87%、蒺藜苜蓿(Medicago truncatula) 85%。组织特异性表达分析显示,CsLAC17在茎中表达量最高,叶中表达量次之,根中较少。此外,进一步构建了pBI121-CsLAC17过表达载体并转入农杆菌。本研究为日后CsLAC17基因的功能验证以及为牛大力开展分子生物学研究提供帮助。 展开更多
关键词 牛大力 CsLAC 17 基因克隆 组织表达特异性 表达载体
不同栽培基质对牛大力根系发育的影响 预览 被引量:1
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作者 魏志远 李志英 +1 位作者 李克烈 徐立 《热带农业科学》 2017年第3期28-32,共5页
以不同比例泥土、砂、椰糠、草炭混合作为牛大力栽培基质,并进行盆栽试验,研究不同栽培基质条件下,基质的养分特征及其对牛大力根系生长和膨大状况的影响。结果表明:由草炭+泥土(体积比2∶1)及草炭+椰糠+砂(体积比1∶2∶1)混合... 以不同比例泥土、砂、椰糠、草炭混合作为牛大力栽培基质,并进行盆栽试验,研究不同栽培基质条件下,基质的养分特征及其对牛大力根系生长和膨大状况的影响。结果表明:由草炭+泥土(体积比2∶1)及草炭+椰糠+砂(体积比1∶2∶1)混合的基质p H值较适中,有机质含量与氮磷钾养分含量均较高,养分状况较理想,牛大力根系发达,但膨大块根较少;而泥土与砂混合基质各项指标均比较低,养分比较贫乏,牛大力根系发达,但块根膨大明显。在本研究条件下,基质养分不是根系膨大的关键因素,泥土含量高的基质可能因为较为理想的通气和热量条件而有利于块根的膨大。 展开更多
关键词 牛大力 栽培基质 根系生长
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牛大力腋芽小滴玻璃化法超低温保存后遗传稳定性分析 预览 被引量:1
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作者 李腾敏 徐立 李志英 《广东农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第15期149-151,共3页
使用ISSR和SSR两种分子标记检测小滴玻璃化法超低温保存牛大力(Callerya speciosa)腋芽后再生植株的遗传稳定性。从100条ISSR引物中筛选出17条适合引物,共扩增出128条DNA条带。从53条牛大力SSR引物中选出8条引物进行银染检测。结果显... 使用ISSR和SSR两种分子标记检测小滴玻璃化法超低温保存牛大力(Callerya speciosa)腋芽后再生植株的遗传稳定性。从100条ISSR引物中筛选出17条适合引物,共扩增出128条DNA条带。从53条牛大力SSR引物中选出8条引物进行银染检测。结果显示,ISSR和SSR分子标记,对照和超低温保存后再生植物无差异性条带。两种分子标记的结合充分证明了牛大力在超低温保存后其基因组DNA序列均无变异,因此该材料的遗传稳定性没有受到影响。 展开更多
关键词 牛大力 ISSR SSR 遗传稳定性
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牛大力总RNA提取的CTAB法改进及优化 预览 被引量:4
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作者 郝宏刚 李志英 +1 位作者 丛汉卿 徐立 《广东农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第18期165-166,共2页
采用改良CTAB法提取牛大力总RNA,采用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白分析仪和RT—PCR检测所提取总RNA样品的质量。结果表明,改良CTAB法提取的牛大力不同组织或器官的RNA纯度和完整性良好,可满足RT-PCR反应等后续试验的要求。
关键词 牛大力 RNA提取 RT—PCR
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美丽鸡血藤种质资源遗传多样性的ISSR分析 预览 被引量:2
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作者 李丽 李志英 +2 位作者 黄碧兰 李克烈 徐立 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第12期2320-2325,共6页
采用ISSR分子标记技术对来自广东、广西及海南3省的19个居群57份美丽鸡血藤种质及其易混淆的3份近似种种质的遗传多样性和亲缘关系进行研究,旨在为美丽鸡血藤种质资源的鉴定、保护和开发利用提供参考.结果表明:8条ISSR引物在美丽鸡血... 采用ISSR分子标记技术对来自广东、广西及海南3省的19个居群57份美丽鸡血藤种质及其易混淆的3份近似种种质的遗传多样性和亲缘关系进行研究,旨在为美丽鸡血藤种质资源的鉴定、保护和开发利用提供参考.结果表明:8条ISSR引物在美丽鸡血藤基因组中扩增条带共91条,其中多样性条带76条,占84.4%;Nei,s基因多样性指数(H)和Shannon信息指数(Ⅰ)分别为0.258 3和0.396 0,这表明美丽鸡血藤种质的多样性丰富;群体遗传分化系数(Gst)和基因流(Nm)分别为0.651 5和0.267 5,这表明居群间遗传分化明显,基因流水平偏低:聚类分析结果显示所有美丽鸡血藤种质主要分为2大类,亲缘关系与地理分布并不具有明显的一致性.4个近似种间的遗传距离为0.235 2~0.416 2,其中以广东鸡血藤与美丽鸡血藤的亲缘关系最近,筛选出的4条ISSR引物能对这4个物种进行有效区分,可用于物种的鉴别分析. 展开更多
关键词 美丽鸡血藤 遗传多样性 亲缘关系 ISSR
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