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肿瘤相关成纤维细胞对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制研究
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作者 金倩文 冯国生 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2019年第6期426-430,共5页
[目的]观察肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌HGC-27细胞侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。[方法]取胃癌患者癌组织及癌旁正常胃黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),建立胃癌HGC-27细胞与CAFs或NF... [目的]观察肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌HGC-27细胞侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。[方法]取胃癌患者癌组织及癌旁正常胃黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),建立胃癌HGC-27细胞与CAFs或NFs共培养体系,CCK-8比色法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变,免疫印迹法检测细胞上皮间质转化(EMT)标志物[E-钙粘素(E-cadherin)蛋白、波形蛋白(Vimentin)和纤维连接蛋白(Fibronectin)蛋白]、MMP-9、STAT3、p-STAT3蛋白表达的改变。[结果]胃癌HGC-27细胞与CAFs共培养后其增殖和侵袭能力均较HGC-27细胞单独培养组或与NFs共培养组显著增强,且E-cadherin蛋白表达明显下调,同时Vimentin、Fibronectin蛋白的表达明显上调,MMP-9蛋白表达上调;STAT3总量未发生变化,p-STAT3表达上调。[结论]CAFs可促进胃癌细胞的侵袭能力,其机制可能是通过激活STAT3通路进而促进细胞EMT。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 胃癌 侵袭 STAT3通路 上皮间质转化
肿瘤相关成纤维细胞对大肠癌LoVo细胞增殖和侵袭能力的影响 预览
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作者 李明 谭诗云 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第5期514-518,共5页
目的观察肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)对大肠癌LoVo细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法从6例大肠癌患者癌组织及癌旁正常结肠黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibrobl... 目的观察肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)对大肠癌LoVo细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法从6例大肠癌患者癌组织及癌旁正常结肠黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts ,NFs),并鉴定CAFs,建立大肠癌LoVo细胞与CAFs或NFs共培养体系,CCK-8比色法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变,免疫印迹法(Western blotting)检测细胞COX-2、MMP-9蛋白表达的改变,ELISA法检测细胞上清液中前列腺素E 2(PGE 2)的含量。结果成功分离CAFs,CAFs中成纤维细胞活化蛋白(fibroblast-activated protein,FAP)与平滑肌激动蛋白-α(α-smooth-muscle actin,α-SMA)表达较NFs 细胞的表达量显著增加;LoVo细胞与CAFs共培养后其增殖和侵袭能力均较LoVo细胞单独培养或与NFs共培养组显著增强,且COX-2和MMP-9蛋白表达明显升高,细胞上清液中PGE 2含量显著增加。结论 CAFs可促进大肠癌细胞的增殖、提高其侵袭能力,其机制可能是通过上调大肠癌细胞COX-2表达和PGE 2含量。但CAFs如何调控大肠癌细胞COX-2/PGE 2表达有待进一步探讨。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 大肠癌 环氧合酶-2 侵袭 增殖
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肿瘤相关成纤维细胞对大肠癌LoVo细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响 预览
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作者 李明 谭诗云 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第5期519-522,共4页
目的观察肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)对大肠癌LoVo细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响,并探讨其可能的作用机制。方法取大肠癌患者癌组织及癌旁正常结肠黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibrob... 目的观察肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)对大肠癌LoVo细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响,并探讨其可能的作用机制。方法取大肠癌患者癌组织及癌旁正常结肠黏膜组织分别分离培养CAFs和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),建立大肠癌LoVo细胞与CAFs或NFs共培养体系,奥沙利铂处理后CCK-8比色法检测LoVo细胞存活率,PI/AnnexinV双染法检测细胞凋亡率;免疫印迹法(Western blotting)检测共培养体系中大肠癌细胞COX-2、上皮间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin)表达的改变,ELISA法检测共培养体系中细胞上清液中前列腺素E2(PGE2)含量。结果CAFs可提高奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率,并降低细胞凋亡率;LoVo细胞与CAFs共培养后,细胞COX-2蛋白表达上调,细胞上清液中PGE2含量显著增加,且细胞EMT标志物蛋白E-cadherin表达降低,Vimentin、Fibronectin蛋白表达上调。结论CAFs可降低大肠癌LoVo细胞对奥沙利铂的敏感性,其机制可能是通过上调大肠癌细胞COX-2表达和PGE2合成,继而诱导EMT。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 大肠癌 环氧合酶-2 奥沙利铂 化疗敏感性
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肿瘤相关成纤维细胞中雌激素/GPER/PKA/FGF2信号轴促进乳腺癌细胞侵袭
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作者 余腾骅 王智亮 +1 位作者 彭美茜 邱宇安 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期1730-1737,共8页
目的探讨共培养下乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中细胞质G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)活化对成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factors 2,FGF2)的表达调控机... 目的探讨共培养下乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中细胞质G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)活化对成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factors 2,FGF2)的表达调控机制及其对肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法细胞免疫荧光法检测单独及与雌激素受体阳性(estrogen receptor positive, ER~+)乳腺癌MCF-7或ER阴性(ER~-)乳腺癌MDA-MB-468细胞共培养下CAFs中GPER的细胞内定位;荧光定量PCR法与ELISA法分别检测不同处理后CAFs细胞内FGF2的mRNA表达及细胞上清液中的分泌水平;Western blot法检测CAFs细胞中GPER下游ERK、AKT及PKA信号通路活化情况;Transwell小室实验检测不同药物处理下乳腺癌细胞侵袭能力的改变。结果两种亚型的乳腺癌细胞均可诱导CAFs中GPER由细胞核转位入细胞质。共培养条件下,17-β雌二醇(E2)可显著促进CAFs中FGF2的mRNA表达及细胞上清液中的分泌量,突变GPER氨基酸序列中的核输出信号(nucleus export signal, NES)可显著抑制以上变化(P<0.05)。CAFs单独培养下则无以上现象。同时,E2处理共培养下CAFs细胞后显著活化细胞内GPER/AKT与GPER/PKA信号通路,促进下游p-AKT与p-PKA的蛋白表达(P<0.05)。突变GPER中NES序列后可显著抑制下游PKA信号的活化,反而促进p-ERK的表达(P<0.05)。用PKA特异性抑制剂(H-89)可明显阻断CAFs中E2诱导的FGF2表达(P<0.05),AKT特异性抑制剂(WM)则不能。CAFs中E2刺激下的FGF2旁分泌明显提高乳腺癌细胞侵袭能力,该效应被FGF2中和抗体所阻断(P<0.05)。结论雌激素活化CAFs中细胞质GPER依赖性的下游PKA信号旁分泌FGF2进而促进乳腺癌细胞侵袭,上述通路或在肿瘤进展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 G蛋白偶联雌激素受体 成纤维细胞生长因子2 细胞侵袭 乳腺癌
结直肠癌分子亚型共识简介及各亚型特征分析 预览
5
作者 闫兆鹏 苏琪 《医学综述》 2019年第14期2726-2730,共5页
结直肠癌是世界范围内常见的恶性肿瘤。随着手术技术的进步以及新的治疗药物的出现,结直肠癌的 5年生存率逐渐提高,但结直肠癌仍是导致肿瘤相关性死亡的重要原因之一。结直肠癌具有高度异质性,其生物学行为在不同个体间或同一个体的不... 结直肠癌是世界范围内常见的恶性肿瘤。随着手术技术的进步以及新的治疗药物的出现,结直肠癌的 5年生存率逐渐提高,但结直肠癌仍是导致肿瘤相关性死亡的重要原因之一。结直肠癌具有高度异质性,其生物学行为在不同个体间或同一个体的不同病灶间具有广泛的遗传学和表观遗传学差异,可进一步导致患者预后以及对治疗反应的不同。在分子层面对结直肠癌进行分型,了解每种亚型的分子改变特征及其相应的肿瘤生物学行为特征,对结直肠癌的治疗具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 结直肠癌 分子亚型共识 肿瘤浸润免疫细胞 癌相关成纤维细胞 精准医学
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口腔鳞状细胞癌肿瘤微环境细胞间相互作用的研究进展 预览
6
作者 曹娟 刘可可 +3 位作者 刘璐瑶 张雯雯 李波 董春玲 《中国医药导报》 CAS 2019年第20期45-48,共4页
口腔鳞状细胞癌(OSCC)肿瘤微环境(TME)中包括肿瘤细胞、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)、内皮细胞等。在OSCC的发生、发展过程中,肿瘤细胞产生某些物质影响TAMs和CAFs的募集、分化、活化等行为,TAMs和CAFs分泌细胞... 口腔鳞状细胞癌(OSCC)肿瘤微环境(TME)中包括肿瘤细胞、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)、内皮细胞等。在OSCC的发生、发展过程中,肿瘤细胞产生某些物质影响TAMs和CAFs的募集、分化、活化等行为,TAMs和CAFs分泌细胞因子促进肿瘤细胞增殖、侵袭、转移等活动,它们之间的交互作用形成了有利的TME,在肿瘤发生发展的各个阶段起重要作用。本文就肿瘤细胞分别与TAMs和CAFs的交互作用以及CAFs对TAMs的作用的最新进展作一综述。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 肿瘤相关巨噬细胞 肿瘤相关成纤维细胞 肿瘤微环境
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CAFs条件培养液上调人肝内胆管癌HCCC-9810细胞中survivin基因表达
7
作者 马永红 谭姣 +3 位作者 雷静 石明娟 唐启胜 杨龙飞 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期542-547,共6页
目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associatedbroblasts,CAFs)条件培养液对人肝内胆管癌HCCC-9810细胞中survivin基因表达的影响。方法:采用MTT法检测CAFs条件培养液对HCCC-9810细胞增殖能力的影响,FCM法检测CAFs条件培养液对HCC... 目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associatedbroblasts,CAFs)条件培养液对人肝内胆管癌HCCC-9810细胞中survivin基因表达的影响。方法:采用MTT法检测CAFs条件培养液对HCCC-9810细胞增殖能力的影响,FCM法检测CAFs条件培养液对HCCC-9810细胞周期分布的影响,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测CAFs条件培养液对HCCC-9810细胞中survivin mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:CAFs条件培养液能够明显促进HCCC-9810细胞的增殖(P<0.05)。CAFs条件培养液处理组G0/G1期HCCC-9810细胞所占百分比低于RPMI 1640培养液培养的对照组(P<0.05),S期HCCC-9810细胞所占百分比高于对照组(P<0.05),G2/M期HCCC-9810细胞所占百分比与对照组间的差异无统计学意义(P>0.05)。CAFs条件培养液能够上调HCCC-9810细胞中survivin mRNA和蛋白表达水平(P值均<0.05)。结论:CAFs条件培养液能够促进HCCC-9810细胞的增殖和细胞周期进程,这一作用可能与上调survivin mRNA和蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 癌相关成纤维细胞 基因表达 SURVIVIN
肿瘤相关成纤维细胞中G蛋白偶联雌激素受体胞浆转位介导的旁分泌对乳腺癌细胞生长的影响
8
作者 余腾骅 涂刚 +2 位作者 彭美茜 孙可馨 柳满然 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期573-580,共8页
目的:探讨乳腺癌微环境肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中G蛋白偶联雌激素受体(GPER)活化对成纤维细胞生长因子2(FGF2)的表达调控作用及其诱导的旁分泌对肿瘤细胞生长的影响。方法:免疫荧光法检测单独培养及与ER+乳腺癌MCF-7与ER-乳腺癌MDA-MB... 目的:探讨乳腺癌微环境肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)中G蛋白偶联雌激素受体(GPER)活化对成纤维细胞生长因子2(FGF2)的表达调控作用及其诱导的旁分泌对肿瘤细胞生长的影响。方法:免疫荧光法检测单独培养及与ER+乳腺癌MCF-7与ER-乳腺癌MDA-MB-468细胞共培养条件下CAFs和GPER突变型CAFs中GPER的表达定位。用荧光定量PCR法与ELISA法分别检测17-β雌二醇(E2)或GPER特异性激动剂G1处理后单独培养或与乳腺癌细胞共培养的CAFs细胞以及与乳腺癌细胞共培养的GPER突变型CAFs的FGF2mRNA表达和FGF2分泌水平;流式细胞术与CCK-8法检测与CAFs共培养的两种乳腺癌细胞经E2和G1处理后细胞增殖能力的变化,以及FGF2中和抗体的干预作用。结果:单独培养下,GPER定位于CAFs及GPER突变型CAFs的细胞核,与两种乳腺癌细胞共培养后,CAFs细胞中GPER出现明显胞浆转位,而GPER突变型CAFs无此现象。E2和G1处理后,共培养条件下的CAFs中FGF2的mRNA表达及上清液中的FGF2含量均明显增加(均P<0.05),但单独培养的CAFs与共培养条件下的GPER突变型CAFs无上述变化(均P>0.05)。E2和G1处理后,共培养条件下的两种乳腺癌细胞的增殖能力均明显增强(均P<0.05),但该作用均被FGF2中和抗体取消。结论:在乳腺癌微环境下,CAFs中GPER有明显的胞浆转位,这有利于雌激素/GPER/FGF2通路的活化,从而可能促进在乳腺癌的进展。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 肿瘤相关成纤维细胞 受体 G-蛋白偶联 成纤维细胞生长因子2 旁分泌细胞细胞间通讯
肿瘤相关成纤维细胞的机制研究及其在乳腺癌中的临床应用
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作者 叶佳慧 张伟杰 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2019年第6期358-361,共4页
乳腺癌的发生、发展是多因素相互作用的复杂过程,肿瘤相关成纤维细胞(CAF)分泌多种因子可导致乳腺癌的发生,诱导肿瘤血管生成,促进肿瘤的转移,诱导肿瘤耐药;同时,亦可通过CAF的表达判断患者的临床预后.CAF有望成为肿瘤治疗的新靶点.
关键词 癌相关成纤维细胞 乳腺肿瘤 肿瘤微环境 生物标记 预后
肿瘤相关成纤维细胞在口腔鳞状细胞癌中的作用及其靶向治疗的研究进展 预览
10
作者 张雯雯 刘可可 +3 位作者 刘璐瑶 曹娟 李波 董春玲 《中国医药导报》 CAS 2019年第14期29-32,共4页
口腔鳞状细胞癌(OSCC)是世界排名第六的恶性肿瘤,5年生存率不足50%,其发病机制目前尚未完全阐明。肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)作为肿瘤微环境中的重要细胞成分之一,在肿瘤的侵袭、转移及血管生成中发挥重要的作用。CAFs主要通过分泌生长... 口腔鳞状细胞癌(OSCC)是世界排名第六的恶性肿瘤,5年生存率不足50%,其发病机制目前尚未完全阐明。肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)作为肿瘤微环境中的重要细胞成分之一,在肿瘤的侵袭、转移及血管生成中发挥重要的作用。CAFs主要通过分泌生长因子、修饰细胞外基质、支持血管生成以及抑制抗肿瘤免疫应答来促进肿瘤的发生发展。以CAFs作为治疗靶点,可以有效地抑制OSCC的侵袭和转移,限制肿瘤血管生成,进而为OSCC的干预提供新的治疗策略。本文就CAFs在OSCC的作用及其靶向治疗的研究进展进行综合论述。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 口腔鳞状细胞癌 侵袭 转移 治疗
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胆管癌相关成纤维细胞对人胆管癌细胞转移的影响
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作者 武伟 孟柠 +3 位作者 潘志坚 李杭 何桦波 李国兰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1211-1214,共4页
目的观察肿瘤相关成纤维细胞对胆管癌细胞RBE生长的影响.方法收集2016年6月至2017年5月来杭州师范大学附属医院诊断为临床原发性胆管癌患者的肿瘤组织分离到的肿瘤相关成纤维细胞(CAF),建立了CAF和癌旁成纤维细胞(PTF)的原代培养,并采... 目的观察肿瘤相关成纤维细胞对胆管癌细胞RBE生长的影响.方法收集2016年6月至2017年5月来杭州师范大学附属医院诊断为临床原发性胆管癌患者的肿瘤组织分离到的肿瘤相关成纤维细胞(CAF),建立了CAF和癌旁成纤维细胞(PTF)的原代培养,并采用流式细胞术检测细胞内波形蛋白(Vimentin)和细胞角蛋白(Cytokeratin)的表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测成纤维细胞标记蛋白成纤维细胞激活蛋白(FAPα)、成纤维特异性蛋白1(FSP1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.在CAF和RBE共培养的条件下,流式分析细胞增殖和凋亡,Transwell检测迁移、侵袭.应用SPSS 2.0软件统计分析.计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验.结果与PTF比较,CAF中FSP1、FAPα、α-SMA表达水平更高,Vimentin阳性率更高;在共培养条件下,CAF比PTF能显著提高胆管癌RBE细胞的增殖活性[(5.97±1.59)%]比[(1.59±0.35)%],促进RBE的侵袭[24 h,(86.76±6.11)%比(51.33±4.04)%]和迁移[24 h,(103.33±5.73)%比(87.00±4.85)%],差异有统计学意义(t=2.776,均P<0.05),但不影响RBE的凋亡,差异无统计学意义(t=2.776,P>0.05).结论胆管癌相关成纤维细胞CAF能促进RBE的侵袭和迁移,在胆管癌转移过程中起着重要作用. 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 增殖 侵袭 转移 胆管癌
乳腺癌中Tenascin C、α-SMA和PDGFRα的表达及意义 预览
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作者 张哲珺 陆元志 钟雪云 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1013-1017,共5页
目的探讨乳腺癌组织间质成纤维细胞活化相关分子标记Tenascin C(TN-C)、α-SMA和PDGFRα的表达,明确其与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测81例乳腺浸润性导管癌间质及癌细胞中TN-C、α-SMA和PDGFRα蛋白... 目的探讨乳腺癌组织间质成纤维细胞活化相关分子标记Tenascin C(TN-C)、α-SMA和PDGFRα的表达,明确其与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测81例乳腺浸润性导管癌间质及癌细胞中TN-C、α-SMA和PDGFRα蛋白表达水平,分析这三者与乳腺癌临床病理特征的关系。结果在乳腺腺病、乳腺导管内癌和浸润性导管癌三种不同病变中,TN-C在间质成纤维细胞中的阳性率分别为0、0、51.9%(P<0.001);α-SMA的阳性率分别为0、20.0%、70.4%(P<0.001);PDGFRα的阳性率分别为10.0%、0、37.0%(P<0.01)。三者在间质表达均与乳腺癌分子亚型相关(P<0.05),且均在HER-2阳性乳腺癌间质中的表达水平最高。TN-C、α-SMA和PDGFRα在乳腺癌细胞中的表达水平明显低于导管内癌或乳腺腺病,其中TN-C在癌细胞中表达水平与患者年龄有关(P<0.05),乳腺癌细胞α-SMA表达水平与淋巴结转移显著相关(P<0.05),但PDGFRα在癌细胞中表达水平与患者年龄、肿瘤组织学分级、肿瘤分期、淋巴结转移、分子分型均无明显相关性(P>0.05)。结论与乳腺腺病和乳腺导管内癌相比,乳腺浸润性导管癌间质成纤维细胞中TN-C、α-SMA和PDGFRα的表达水平明显增高,并与乳腺癌分子分型存在明显相关性。提示间质成纤维细胞活化是促进乳腺癌恶性演进的重要因素,成纤维细胞活化相关分子有望成为乳腺癌临床预后的分子标记。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 癌相关成纤维细胞 肿瘤微环境 转移
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肿瘤相关成纤维细胞自噬促进肺腺癌细胞侵袭迁移
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作者 刘桐言 方攀奇 +4 位作者 韩忱成 王思炜 马志飞 尹荣 许林 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1543-1545,共3页
目的肿瘤细胞自噬与肿瘤发生、发展密切相关,但肿瘤微环境细胞自噬与肿瘤的关系尚不清楚.肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境的重要组成部分,可分泌细胞因子促进肿瘤侵袭转移.本研究旨在探讨CAFs自噬对肺腺癌侵袭迁移的影响.方法以... 目的肿瘤细胞自噬与肿瘤发生、发展密切相关,但肿瘤微环境细胞自噬与肿瘤的关系尚不清楚.肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境的重要组成部分,可分泌细胞因子促进肿瘤侵袭转移.本研究旨在探讨CAFs自噬对肺腺癌侵袭迁移的影响.方法以肺腺癌细胞株A549和CAFs进行非接触共培养为实验组,单独培养的A549为对照组,观察CAFs过表达自噬核心基因自噬相关基因5(ATG5)及CAFs对照组对A549侵袭迁移的影响.酶联免疫吸附试验检测培养上清白细胞介素-6、及白细胞介素-8表达水平.应用SPSS 23.0统计软件分析,计量资料采用均值±标准差(Mean±SD),两组间样本均数比较采用t检验;多组间两两样本均数比较采用方差分析.结果与单独培养的A549比较,CAFs共培养后A549侵袭[(54.6±8.6)个/cm^2比(124.3±19.6)个/cm^2]迁移能力[(57.0±10.5)个/cm^2比(122.7±17.6)个/cm^2]增强,而与过表达ATG5的CAFs共培养后,A549侵袭[(124.3±19.6)个/cm^2比(280.0±32.1)个/cm^2]迁移能力[(122.7±17.6)个/cm^2比(269.3±72.7)个/cm^2]进一步增强,差异有统计学意义(F=18.640、80.630,P<0.05).过表达ATG5后CAFs分泌的IL-6[(545.5±28.2)ng/L比(865.4±70.9)ng/L]和IL-8[(374.2±62.2)ng/L比(672.4±24.2)ng/L]明显增高,差异有统计学意义(t=7.261、7.738,P<0.05).结论CAFs自噬可通过分泌IL-6/IL-8促进肺腺癌细胞侵袭迁移. 展开更多
关键词 肺腺癌 肿瘤相关成纤维细胞 自噬 侵袭迁移
癌相关成纤维细胞来源的外泌体在促骨肉瘤侵袭转移中作用的实验研究
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作者 陈成龙 孙雪娇 +4 位作者 李志慧 孙晓娟 韩鹏飞 张龙 吕智 《中华解剖与临床杂志》 2019年第4期332-340,共9页
目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源的外泌体对骨肉瘤侵袭及转移的影响。方法利用人源骨肉瘤细胞株Saos-2采用差速贴壁法分离、培养CAFs,显微镜下观察CAFs的形态,免疫组织化学观察α-SMA蛋白表达对CAFs进行鉴定。培养CAFs,采用ExoQuick... 目的探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源的外泌体对骨肉瘤侵袭及转移的影响。方法利用人源骨肉瘤细胞株Saos-2采用差速贴壁法分离、培养CAFs,显微镜下观察CAFs的形态,免疫组织化学观察α-SMA蛋白表达对CAFs进行鉴定。培养CAFs,采用ExoQuick-TC外泌体提取试剂盒分离外泌体。通过透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测外泌体特异性标记蛋白β-actin、CD63表达情况对外泌体进行鉴定。培养人源骨肉瘤细胞株Saos-2,分为外泌体组和对照组,采用细胞划痕及Transwell小室实验观察外泌体对Saos-2细胞迁移和侵袭能力的影响。选取一级5周龄BALB/c-nu雌性裸鼠12只,按编号随机分为外泌体组和对照组,每组6只。两组均采用皮下移植成瘤法在裸鼠右侧背部皮下接种人骨肉瘤Saos-2细胞与Matrigel基质胶混合悬液,建立裸鼠骨肉瘤肿瘤模型。造模结束后即刻进行尾静脉注射:外泌体组每只裸鼠通过尾静脉注射浓度为0.1μg/μL的外泌体悬液30μL,对照组裸鼠尾静脉注射等量生理盐水,两组均1次/周,共注射6次。第1次注射后每日观察裸鼠成瘤情况,从裸鼠右侧背部皮下可触及肿块开始,测量两组裸鼠肿块的最长径和最长径的最大垂直短径,计算肿瘤体积,此后每周测量1次,共测量6次。完成最后一次测量后腹腔麻醉断椎法处死裸鼠,完整取出肿块并称重。取裸鼠肺组织进行切片HE染色观察两组裸鼠肺转移情况。结果显微镜下观察CAFs呈长梭形,排列杂乱,无方向性;细胞免疫组织化学染色结果显示:CAFs的α-SMA蛋白表达阳性,提示CAFs提取成功。电镜观察外泌体呈70~100 nm圆形或椭圆形膜性囊泡状结构;Western blot结果显示外泌体中CD63蛋白呈高表达,β-actin蛋白表达较弱,提示成功分离CAFs来源外泌体。细胞划痕实验、侵袭实验结果显示:外泌体组细胞迁移距离、迁移率、侵袭细胞数目分别为(0.19±0.02)mm、0.81%±0.11%� 展开更多
关键词 骨肉瘤 外泌体 癌相关成纤维细胞 肺转移 肿瘤微环境
肿瘤相关成纤维细胞与胰腺导管腺癌关系的研究进展
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作者 孟强 张雷 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第1期89-91,共3页
肿瘤相关成纤维细胞是胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)肿瘤微环境的重要组成部分,可通过分泌各种细胞因子影响PDAC的生物学行为,包括增殖、存活、侵袭、转移、血管生成和免疫抑制。本文就肿瘤相关成纤维细胞对PDA... 肿瘤相关成纤维细胞是胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)肿瘤微环境的重要组成部分,可通过分泌各种细胞因子影响PDAC的生物学行为,包括增殖、存活、侵袭、转移、血管生成和免疫抑制。本文就肿瘤相关成纤维细胞对PDAC细胞增殖、迁袭和免疫监视及与化疗药物耐药关系的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 胰腺导管腺癌 肿瘤微环境 肿瘤相关成纤维细胞 靶向治疗
癌相关成纤维细胞活化机制的研究进展
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作者 高彦君 姚颐 +4 位作者 宋启斌 郑忠亮 李营歌 董熠 吴彬 《肿瘤学杂志》 CAS 2019年第5期453-457,共5页
癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤微环境的重要组成部分,具有活性的CAFs已经被证实可促进肿瘤的发生、发展、转移和耐药,成为癌症治疗的重要目标。现已发现细胞因子、炎症、缺氧、活性氧、自噬及放射线等都... 癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤微环境的重要组成部分,具有活性的CAFs已经被证实可促进肿瘤的发生、发展、转移和耐药,成为癌症治疗的重要目标。现已发现细胞因子、炎症、缺氧、活性氧、自噬及放射线等都可以引起CAFs的活化。深入了解CAFs活化的分子机制和病理机制,有利于为恶性肿瘤治疗提供新的思路和靶点。 展开更多
关键词 肿瘤发生 肿瘤微环境 癌相关成纤维细胞 活化
胃癌组织中胃癌相关成纤维细胞、胃正常成纤维细胞的分离鉴定及增殖情况观察 预览
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作者 封兰兰 孙伟 +3 位作者 朱吉海 刘珺 赵珺 刘燕 《山东医药》 2018年第31期5-8,共4页
目的从胃癌组织中分离胃癌相关成纤维细胞(CAFs)及胃正常成纤维细胞(NFs),并鉴定其功能。方法3例胃癌患者,均行胃癌切除术,术中保留胃癌组织及胃正常黏膜组织。采用组织贴壁块法及胶原酶消化法分离胃癌组织中的胃CAFs及胃正常黏膜... 目的从胃癌组织中分离胃癌相关成纤维细胞(CAFs)及胃正常成纤维细胞(NFs),并鉴定其功能。方法3例胃癌患者,均行胃癌切除术,术中保留胃癌组织及胃正常黏膜组织。采用组织贴壁块法及胶原酶消化法分离胃癌组织中的胃CAFs及胃正常黏膜组织中的胃NFs。原代培养胃CAFs、胃NFs,差速贴壁传代法分离并纯化细胞,差速贴壁20 min。倒置显微镜下观察胃CAFs、胃NFs细胞形态,采用免疫细胞化学染色法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、角蛋白18(CK18)、波形蛋白(Vimentin)。取3个来源分离的胃CAFs、胃NFs,分别于细胞贴壁24 h、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d采用MTT法测算细胞光密度(OD)值,绘制细胞生长曲线。结果胃癌CAFs细胞大小不一,呈梭形或星形,排列不规则并呈重叠生长;胃NFs细胞均匀一致,呈长梭形,排列规则。胃CAFs细胞存在α-SMA、Vimentin阳性表达,CK18阴性表达,胃NFs细胞存在Vimentin阳性表达,α-SMA、CK18阴性表达。培养3~6天,各来源胃CAFs细胞OD值均高于胃NFs(P均〈0.05)。结论成功分离胃CAFs、胃NFs。胃CAFs、胃NFs均存在Vimentin表达。胃CAFs增殖能力优于胃NFs。 展开更多
关键词 胃癌 癌相关成纤维细胞 正常成纤维细胞 细胞角蛋白18 波形蛋白 Α-平滑肌肌动蛋白 细胞增殖
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miR-210参与调控间充质干细胞向肿瘤相关成纤维细胞转化 预览
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作者 陈桦 李静 赵春华 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第6期780-786,共7页
目的探讨miR-210是否在乳腺癌细胞诱导人脂肪来源间充质干细胞(h AD-MSCs)向肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)转化中发挥作用。方法 Transwell小室将乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231分别与h AD-MSCs共培养,RT-q PCR检测不同时间点(0、3、6... 目的探讨miR-210是否在乳腺癌细胞诱导人脂肪来源间充质干细胞(h AD-MSCs)向肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)转化中发挥作用。方法 Transwell小室将乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231分别与h AD-MSCs共培养,RT-q PCR检测不同时间点(0、3、6及9 d)收取乳腺癌细胞中miR-210的表达;RT-q PCR检测共培养后h AD-MSCs向CAFs转化及CAFs相关特征标志物平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)和腱生蛋白-c(tenascin-c)的基因表达,用Western blot检测α-SMA和成纤维细胞活化蛋白-α(FAPA)的蛋白表达;慢病毒分别向乳腺癌细胞传导miR-210抑制剂和miR-NC,然后与同比例的MSCs混合注射到裸鼠皮下,动态观察肿瘤的生长情况,4周后分离提取肿瘤组织中的CAFs,RT-q PCR和Western blot检测CAFs中α-SMA、FAPA和波形蛋白(vimentin)的表达。结果与h AD-MSCs共培养后,乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞中miR-210表达都持续上调(P〈0.05)。共培养条件下抑制肿瘤细胞表达miR-210可以抑制MSCs向CAFs转化(P〈0.05)。抑制肿瘤细胞miR-210的表达可以降低肿瘤生长(P〈0.05)。结论 miR-210作为一种重要的信息分子介导了肿瘤微环境中MSCs向CAFs转化。 展开更多
关键词 MIR-210 间充质干细胞 肿瘤相关成纤维细胞 乳腺癌细胞
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Leptin促进肿瘤相关成纤维细胞活化及卵巢癌腹腔播散 预览
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作者 章凡 杨宗元 《实用医学杂志》 北大核心 2018年第18期2994-2999,共6页
目的探索腹水中瘦素(Leptin)对成纤维细胞活化的作用以及对卵巢癌腹腔播散的影响。方法恶性腹水中分离肿瘤相关成纤维细胞并鉴定;Transwell及系膜撕开试验探究其对卵巢癌细胞侵袭能力的影响;ELISA比较良恶性腹水中Leptin表达水平差... 目的探索腹水中瘦素(Leptin)对成纤维细胞活化的作用以及对卵巢癌腹腔播散的影响。方法恶性腹水中分离肿瘤相关成纤维细胞并鉴定;Transwell及系膜撕开试验探究其对卵巢癌细胞侵袭能力的影响;ELISA比较良恶性腹水中Leptin表达水平差异;数据库分析微环境细胞Leptin受体表达情况;免疫荧光、Western blot及胶原回缩试验探究Leptin对成纤维细胞活化的影响;SKOV3原位移植模型探索Leptin对成纤维细胞活化及腹腔播散的影响。结果腹水中肿瘤相关成纤维细胞高表达α-SMA;其显著增加卵巢癌细胞体外侵袭能力;Leptin在良恶性腹水中表达分别为(132.1±15.6)pg/mL、(576.4±60.4)pg/mL;成纤维细胞高表达Leptin受体;Leptin重组蛋白显著增加成纤维细胞活化;移植瘤模型中IgG/Leptin封闭组活化成纤维细胞比例分别为(24.6±3.5)%、(8.5±1.6)%;腹腔种植灶数目分别为(20±3)、(7±2)个;总的转移灶重量分别为(2±0.5)、(0.5±0.1)g。结论卵巢癌腹水中Leptin维持成纤维细胞的活化,可考虑作为遏制卵巢癌腹腔播散的治疗靶点。 展开更多
关键词 卵巢癌 腹水 肿瘤相关成纤维细胞 LEPTIN 腹腔播散
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肿瘤相关成纤维细胞在肿瘤化疗耐药中的研究进展 预览
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作者 张海洋 王慧雅 +1 位作者 林丹 巴一 《肿瘤综合治疗电子杂志》 2018年第4期27-30,共4页
肿瘤微环境与肿瘤的发展、转移及耐药等息息相关。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)在肿瘤微环境的基质细胞中占有较高的比例,可以通过调控多种肿瘤相关信号通路,分泌多种生长因子、细胞因子等方式促进肿瘤的发... 肿瘤微环境与肿瘤的发展、转移及耐药等息息相关。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)在肿瘤微环境的基质细胞中占有较高的比例,可以通过调控多种肿瘤相关信号通路,分泌多种生长因子、细胞因子等方式促进肿瘤的发生发展,介导肿瘤耐药的形成。本文论述了目前CAFs与肿瘤细胞之间可能涉及的信号通路等作用方式,为肿瘤化疗耐药提供解决思路,为提高肿瘤治疗疗效提供可能的新靶点。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 肿瘤 化疗耐药 肿瘤微环境
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