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鹦鹉热衣原体巨噬细胞感染增强因子对宿主细胞产生前炎症细胞因子和凋亡的影响
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作者 曾心靛 张婉琪 +6 位作者 符玺宗 周鹏 周朴帆 唐婷 陈曦 胡春生 陈丽丽 《实用预防医学》 CAS 2019年第2期129-133,共5页
目的研究鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)巨噬细胞感染增强因子(microphage infectivity potentiator,Mip)在诱导人单核细胞THP-1产生前炎症细胞因子和对HeLa细胞凋亡的作用。方法用不同浓度的Cps Mip重组蛋白作用THP-1细胞,ELIS... 目的研究鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)巨噬细胞感染增强因子(microphage infectivity potentiator,Mip)在诱导人单核细胞THP-1产生前炎症细胞因子和对HeLa细胞凋亡的作用。方法用不同浓度的Cps Mip重组蛋白作用THP-1细胞,ELISA检测前炎症细胞因子IL-8和TNF-α的表达量;用荧光染色法和流式细胞术分析重组Cps Mip对HeLa细胞凋亡的作用。结果重组Cps Mip能以时间、剂量依赖方式诱导THP-1细胞分泌前炎症细胞因子IL-8和TNF-α;不同Cps Mip蛋白浓度实验组刺激THP-1细胞产生的前炎症细胞因子IL-8和TNF-α水平显著高于PBS对照组(P<0. 05),当Cps Mip为16μg/ml时,所产生的前炎症细胞因子IL-8和TNF-α的量最高,分别为105. 01 pg/ml和50. 52 pg/ml。荧光染色法和流式细胞术检测细胞凋亡率,发现Cps Mip对星形孢菌素(staurosporine,STS)处理的HeLa细胞有一定的抑凋亡作用,在20μg/ml Cps Mip刺激后的细胞凋亡率比未刺激组下降了4. 48%(P<0. 01)。结论 Cps Mip蛋白能诱导THP-1细胞表达并分泌前炎症细胞因子IL-8和TNF-α;Cps Mip具有一定抑制HeLa细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 CPS MIP IL-8 TNF-α 凋亡
鹦鹉热衣原体噬菌体Chp1衣壳蛋白VP1的原核表达及多克隆抗体制备
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作者 李琪 王秋平 +2 位作者 周鹏 陈丽丽 柏琴琴 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期975-978,983共5页
目的原核表达并纯化鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)噬菌体Chp1衣壳蛋白VP1的重组蛋白rVP11-190,并制备多克隆抗体。方法采用Clustal Omega在线软件对6株衣原体噬菌体VP1蛋白的氨基酸序列进行多重比对,确定Chp1VP1蛋白的保守区... 目的原核表达并纯化鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)噬菌体Chp1衣壳蛋白VP1的重组蛋白rVP11-190,并制备多克隆抗体。方法采用Clustal Omega在线软件对6株衣原体噬菌体VP1蛋白的氨基酸序列进行多重比对,确定Chp1VP1蛋白的保守区和特异区,并用DNAStar软件预测抗原表位。选择VP11-190与pET28a(+)载体连接构建原核表达载体pET28a-VP11-190,转化至E.coli BL21(DE3)中诱导表达,采用Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白;用纯化的重组蛋白免疫ICR小鼠,制备免疫血清,ELISA法检测其抗rVP11-190的效价。结果构建的原核表达载体pET28(a)-VP11-190经IPTG诱导高效表达了相对分子质量约为30×10^3的重组蛋白。用该蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体血清,ELISA法测定免疫小鼠血清抗体效价为1∶12 800。结论成功原核表达并纯化了噬菌体Chp1衣壳蛋白VP11-190的重组蛋白,制备的鼠抗VP11-190多克隆抗体血清效价及特异性良好,为进一步分离鉴定鹦鹉热衣原体的噬菌体奠定了基础。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 噬菌体Chp1 VP1蛋白 原核表达 多克隆抗体
基于CMV启动子表达鹦鹉热衣原体PmpD-N蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建 预览
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作者 刘杉杉 孙伟 +5 位作者 张稳 贾长青 罗杰 沈易华 郁建生 何诚 《动物医学进展》 北大核心 2018年第7期13-18,共6页
为构建表达鹦鹉热衣原体多型外膜蛋白D的N端(PmpD-N)蛋白重组火鸡疱疹病毒(HVT),以鹦鹉热衣原体CB7株DNA为模板,通过PCR扩增pmpD-N基因,构建带有巨细胞病毒(CMV)启动子的真核表达盒,采用细菌人工染色体技术构建HVT重组子,转染细胞获得HV... 为构建表达鹦鹉热衣原体多型外膜蛋白D的N端(PmpD-N)蛋白重组火鸡疱疹病毒(HVT),以鹦鹉热衣原体CB7株DNA为模板,通过PCR扩增pmpD-N基因,构建带有巨细胞病毒(CMV)启动子的真核表达盒,采用细菌人工染色体技术构建HVT重组子,转染细胞获得HVT重组病毒,并在体外评价该重组病毒的相关特性。结果表明,转染细胞后成功获得HVT重组病毒。通过Westernblot和IFA分析表明,重组病毒表达了PmpD-N蛋白。Confocal分析表明,PmpD-N蛋白分布在细胞的胞核、胞浆和细胞表面。HVT重组病毒的复制特性和野生型HVT一致。HVT重组病毒能够激活巨噬细胞促炎性细胞因子IL-6和NO的产生。该试验成功构建了含有CMV启动子,能够表达PmpD-N蛋白的HVT重组病毒,为下一步进行动物试验和分析该病毒的免疫效力奠定了基础。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 多型外膜蛋白D的N端 火鸡疱疹病毒 细菌人工染色体技术 巨细胞病毒启动子
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鹦鹉热衣原体Mip基因原核表达载体的构建及多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 胡春生 符玺宗 +6 位作者 周鹏 柏琴琴 曾心靛 周朴帆 刘子卿 张程 陈丽丽 《实用预防医学》 CAS 2017年第3期280-283,共4页
目的 克隆鹦鹉热衣原体巨噬细胞感染增强蛋白(Microphage infectivity potentiator,Mip)基因,构建原核重组质粒,诱导表达重组蛋白,并免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定了基础。方法 提取鹦鹉热衣原体6BC基因组DNA... 目的 克隆鹦鹉热衣原体巨噬细胞感染增强蛋白(Microphage infectivity potentiator,Mip)基因,构建原核重组质粒,诱导表达重组蛋白,并免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定了基础。方法 提取鹦鹉热衣原体6BC基因组DNA,PCR扩增Mip基因,克隆至pET-30a(+),构建原核表达载体pET-30a(+)-Cps Mip。PCR、酶切及测序鉴定后,IPTG诱导pET-30a(+)-Cps Mip在E.coli BL21中表达目的蛋白。融合蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,ELISA检测小鼠血清中抗Mip抗体的效价。结果 PCR扩增得到大小约为768 bp左右的Mip目的片段;经PCR、酶切及测序鉴定,证明构建的原核重组质粒中插入的片段为Cps Mip基因,测序结果经BLAST分析,与Genbank上登录序列完全一致。经IPTG诱导,重组工程菌表达一相对分子量(Mr)约为34 kD的目的蛋白;ELISA 检测免疫小鼠血清效价为1:128 000。结论 成功构建了鹦鹉热衣原体Mip基因原核表达载体,并表达了相应可溶性蛋白,制备了高效价的鼠抗Mip多克隆抗体。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 MIP基因 免疫原性 多克隆抗体
LIGHT在小鼠鹦鹉热衣原体呼吸道感染中的作用
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作者 胡春生 徐莎 +5 位作者 曾心靛 周朴帆 刘子卿 张程 汤晓妍 陈丽丽 《实用预防医学》 CAS 2017年第7期794-796,807共4页
目的探讨LIGHT分子在鹦鹉热衣原体(Chlamydiapsittaci,Cps)呼吸道感染过程中的作用。方法C57BL/6J野生型(Wildtype,WT)和LIGHT基因敲除(Knockout,KO)小鼠经鼻内接种4.5×105IFUCps,每天观察记录小鼠的进食、活动、体重... 目的探讨LIGHT分子在鹦鹉热衣原体(Chlamydiapsittaci,Cps)呼吸道感染过程中的作用。方法C57BL/6J野生型(Wildtype,WT)和LIGHT基因敲除(Knockout,KO)小鼠经鼻内接种4.5×105IFUCps,每天观察记录小鼠的进食、活动、体重变化及生存情况。感染后第4、9、14d分批处死小鼠,分离肺组织,检测肺组织中Cps载量、病理损伤程度。结果与wT小鼠相比,LIGHTKO小鼠出现更严重的呼吸道感染症状,死亡率更高,肺组织匀浆中Cps载量更高且带菌时间延长。肺部病理损伤程度也显著高于WT小鼠。结论LIGHT基因缺失可促进Cps呼吸道感染。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 LIGHT 呼吸道感染
IFN-γ抗鹦鹉热衣原体急性感染保护作用研究 预览 被引量:1
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作者 唐国芳 陈丽丽 +3 位作者 刘良专 王川 卢兰芬 吴移谋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期98-103,共6页
目的探讨IFN-γ对鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)的抗感染作用,为进一步阐明机体抗衣原体免疫机制提供参考数据。方法不同浓度的重组人IFN-γ(5ng/mL、25ng/mL和50ng/mL)作用于感染Cps 6BC的HeLa细胞,48h后计数包涵体数量,... 目的探讨IFN-γ对鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)的抗感染作用,为进一步阐明机体抗衣原体免疫机制提供参考数据。方法不同浓度的重组人IFN-γ(5ng/mL、25ng/mL和50ng/mL)作用于感染Cps 6BC的HeLa细胞,48h后计数包涵体数量,并观察包涵体形态的改变。2×10~6 IFUs Cps 6BC滴鼻感染C57BL/6J小鼠,于感染前、后24h腹腔内注射10μg重组鼠IFN-γ,观察小鼠体重、活动状态、生存率等一般指标,分别于感染后5d和10d处死小鼠,取肝、肺组织进行HE染色检测其病理变化;并取感染后5d的肺组织,匀浆,计数其中Cps包涵体数量。结果感染48h后,Cps 6BC在5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL重组人IFN-γ处理的HeLa细胞中包涵体数量低于对照组(包涵体数分别为(23.8±5.1)×10~6,(10±3.58)×10~6,(8.0±2.22)×10~6,(43.3±11.05)×10~6,衣原体包涵体形状不规则,体积变小。小鼠实验显示,腹腔注射IFN-γ可明显提高Cps 6BC感染小鼠生存率,并减轻急性临床表现及脏器病变。结论 IFN-γ可发挥早期抗Cps感染的保护作用。 展开更多
关键词 干扰素-Γ 鹦鹉热衣原体 急性感染 免疫保护
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吉林省鸽子鹦鹉热衣原体的分子流行病学调查和基因型分布研究(英文) 预览 被引量:1
7
作者 姚秋霞 张晓轩 +4 位作者 陈凯 马剑刚 郑文斌 许小琴 朱兴全 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期104-109,共6页
目的 2015年3-5月调查吉林省长春市和吉林市肉鸽与信鸽中鹦鹉热衣原体的流行情况及基因型分布。方法本研究共采集鸽子粪便样本399份,其中长春市样本282份,吉林市样本117份。利用PCR技术进行鹦鹉热衣原体ompA基因扩增、测序以及基因型分... 目的 2015年3-5月调查吉林省长春市和吉林市肉鸽与信鸽中鹦鹉热衣原体的流行情况及基因型分布。方法本研究共采集鸽子粪便样本399份,其中长春市样本282份,吉林市样本117份。利用PCR技术进行鹦鹉热衣原体ompA基因扩增、测序以及基因型分析。结果本实验结果显示:鹦鹉热衣原体的感染率为5.01%(21/399),其中吉林市鹦鹉热衣原体的感染率(9.40%)明显高于长春市的感染率(3.19%)。此外,品种也是与衣原体感染相关的主要风险因素,肉鸽的感染率为7.49%,而信鸽的感染率为0。ompA基因的序列分析显示,这些鹦鹉热衣原体都属于B型。结论综上所述,我国吉林省肉鸽具有较高的B型鹦鹉热衣原体流行,给人类的健康带来了潜在的威胁。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 鸽子 基因型 吉林省
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一起山羊流产衣原体感染的诊断 预览
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作者 吴浩阳 黄加利 +3 位作者 徐莹 孙裴 付明哲 许信刚 《动物医学进展》 北大核心 2017年第12期133-136,共4页
陕西省某山羊养殖场发生了一起山羊流产病,经流行病学调查,临床症状和病理剖检观察进行初步诊断;利用布鲁菌虎红平板凝集试验、衣原体间接血凝试剂盒对10份流产母羊血清检测;对病料进行细菌学检测;依据GenBank收录的山羊流产性衣原体基... 陕西省某山羊养殖场发生了一起山羊流产病,经流行病学调查,临床症状和病理剖检观察进行初步诊断;利用布鲁菌虎红平板凝集试验、衣原体间接血凝试剂盒对10份流产母羊血清检测;对病料进行细菌学检测;依据GenBank收录的山羊流产性衣原体基因组设计1对特异性引物,通过PCR方法从病料中扩增衣原体特异性片段。结果表明,根据临床症状和病理变化初步怀疑为布鲁菌和鹦鹉热亲衣原体感染;10份血清检测结果为布鲁菌病血清全部阴性,衣原体感染血清全部为阳性;细菌学检测结果为阴性;PCR结果获得523bp基因片段,测序结果与鹦鹉热亲衣原体100%相似。依据流行病学调查,临床症状和病理剖检观察,病原学和血清学诊断,最终确诊该病为鹦鹉热亲衣原体引起的山羊地方流行性流产。 展开更多
关键词 山羊流产 鹦鹉热亲衣原体 诊断
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Development of a Novel PmpD-N ELISA for Chlamydia psittaci Infection 预览
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作者 LIU Shan Shan CHU Jun +3 位作者 ZHANG Qiang SUN Wei ZHANG Tian Yuan HE Cheng 《生物医学与环境科学:英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第5期315-322,共8页
Objective Chlamydia psittaci is an avian respiratory pathogen and zoonotic agent. The wide prevalence of C. psittaci poses a threat to the poultry industry and its employees. However, few commercial kits are available... Objective Chlamydia psittaci is an avian respiratory pathogen and zoonotic agent. The wide prevalence of C. psittaci poses a threat to the poultry industry and its employees. However, few commercial kits are available for detecting avian antibodies excluding the in-house ELISA kit. In this study, we developed a novel ELISA kit for detecting antibodies against C. psittaci based on the N-terminal fragment of polymorphic outer membrane protein D(Pmp D-N) as the coating antigen. Methods The antigen concentrations, primary antibody, and cut-off value were determined and optimized. The ELISA, designated Pmp D-N ELISA, was assessed for sensitivity, specificity, and concordance using sera samples from 48 experimentally infected and 168 uninfected SPF chickens. Results The sensitivity and specificity of Pmp D-N ELISA were 97.9%, 100%, respectively, while the concordance was 98.1% as compared to that of MOMP-ELISA. No cross-reaction with positive sera for other avian pathogens was found. Using Pmp D-N ELISA, 799/836 clinical samples were positive, including 93.0% and 98.1% positivity in layers and broilers, respectively. Conclusion These data indicate that indirect ELISA with Pmp D-N as the antigen candidate is a promising approach for the surveillance of C. psittaci infection. 展开更多
关键词 ELISA方法 鹦鹉热衣原体 衣原体感染 酶联免疫试剂盒 ELISA试剂盒 禽流感抗体 间接ELISA 阳性血清
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云南省昆明市动物园和宠物市场中鸟类鹦鹉热衣原体的流行病学调查及其基因型分布研究
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作者 Yue FENG Yue-mei FENG +3 位作者 Zhong-hua ZHANG Shao-xiong WU Du-bo ZHONG Chen-jian LIU 《浙江大学学报:B卷英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期311-316,共6页
目的:调查云南省昆明市动物园和宠物市场的鹦形目鸟类中鹦鹉热衣原体的流行情况。创新点:首次在云南地区开展鹦形目鸟类中鹦鹉热衣原体的流行病学调查,发现该地区鹦形目鸟类中具有较高的鹦鹉热衣原体感染率。方法:本研究共采集8种... 目的:调查云南省昆明市动物园和宠物市场的鹦形目鸟类中鹦鹉热衣原体的流行情况。创新点:首次在云南地区开展鹦形目鸟类中鹦鹉热衣原体的流行病学调查,发现该地区鹦形目鸟类中具有较高的鹦鹉热衣原体感染率。方法:本研究共采集8种鹦形日鸟类的新鲜粪便样本136份,其中动物园样本60份,宠物市场样本76份。首先,利用高灵敏和高特异性的TaqManMGB探针荧光定量聚合酶链反应(qPCR)方法检测粪便样品中鹦鹉热衣原体的感染率,然后针对阳性样品,利用PCR技术进行鹦鹉热衣原体OmpA基因扩增、纯化、测序以及基因型分析。结论:本实验结果显示:鹦鹉热衣原体的感染率为19.9%(27/136),其中宠物市场鸟类中鹦鹉热衣原体的感染率(26.3%;20/76)明显高于动物园(11.7%:7/60)(P=0.034);金刚鹦鹉中感染率最高,达41.2%(7/17)。同缘关系进化树分析表明,这些鹦鹉热衣原体都属于易于由鸟向人跨物种传播的A型。综上所述,昆明地区鹦形目鸟类中具有较高的鹦鹉热衣原体流行,给饲养人员和观鸟者的健康带来了潜在的威胁。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 基因型 OmpA基因 流行病调查 云南
鹦鹉热衣原体的B598_0590基因编码包涵体膜蛋白 预览
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作者 李鹏 何君 +4 位作者 朱虹 李岩伟 于永慧 端青 宋立华 《生物技术通讯》 CAS 2016年第1期17-20,共4页
目的:鹦鹉热衣原体的B598_0590基因与沙眼衣原体的毒力基因CT135同源,本研究旨在分析该基因的表达和定位。方法:生物信息学方法分析B598_0590基因的进化地位,比较B598_0590蛋白和沙眼衣原体毒力蛋白CT135的氨基酸疏水特征;重组表达、... 目的:鹦鹉热衣原体的B598_0590基因与沙眼衣原体的毒力基因CT135同源,本研究旨在分析该基因的表达和定位。方法:生物信息学方法分析B598_0590基因的进化地位,比较B598_0590蛋白和沙眼衣原体毒力蛋白CT135的氨基酸疏水特征;重组表达、纯化鹦鹉热衣原体的B598_0590蛋白,免疫小鼠制备抗血清;共聚焦免疫荧光观察鹦鹉衣原体在正常培养条件和使用Lpx C抑制剂时B598_0590基因的表达和定位。结果:衣原体属内12个种的基因组均含有CT135同源基因,它们编码的蛋白质有相似的疏水特征;B598_0590与CT135的氨基酸同源性为21%;B598_0590的免疫荧光染色特征与包涵体膜蛋白Inc A相似,浓染包涵体膜;Lpx C抑制剂可抑制网状体的分裂、包涵体的生长及网状体向原体转化,包涵体膜蛋白的染色呈现典型的空泡结构。结论:Lpx C抑制剂可用于鉴定未知的鹦鹉热衣原体包涵体膜蛋白;鹦鹉热衣原体的B598_0590基因编码此前尚未鉴定的包涵体膜蛋白。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 包涵体膜蛋白 蛋白定位 CT135 B598_0590
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肉鸡鹦鹉热衣原体的分离鉴定及基因分型
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作者 欧阳萍 陈俊杰 +4 位作者 孙茂 贺常亮 舒刚 殷中琼 尹立子 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期46-51,共6页
为了解肉鸡鹦鹉热衣原体感染流行情况并对其进行基因型分型,随机采集45日龄肉鸡的肺和脾,采用BGM(buffulo green monkey)细胞培养法进行病原分离培养,通过DNA微点阵列确定分离株的种属和基因型。结果显示,其中39.56%(36/91)的脾和45... 为了解肉鸡鹦鹉热衣原体感染流行情况并对其进行基因型分型,随机采集45日龄肉鸡的肺和脾,采用BGM(buffulo green monkey)细胞培养法进行病原分离培养,通过DNA微点阵列确定分离株的种属和基因型。结果显示,其中39.56%(36/91)的脾和45.39%(69/152)的肺样品的BGM细胞培养结果为阳性,鸡场感染率高达90%(9/10);通过种属DNA微点阵列成功鉴定确定72.46%(50/69)的肺分离株为鹦鹉热衣原体。基因型DNA微点阵列结果表明,鹦鹉热衣原体分离株的基因型为B型和D型。结论:所调查的鸡场鹦鹉热衣原体感染率高,流行的基因型主要为基因型B型和D型。本研究首次报道了采用细胞培养的方法从肉鸡组织器官中分离得到鹦鹉热衣原体,并用DNA微点阵列技术对其进行了基因分型,为肉鸡鹦鹉热衣原体病的流行病学调查提供了方法和手段。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 分离 鉴定 基因型 肉鸡
多重PCR检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体 预览 被引量:4
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作者 彭武丽 季新成 +3 位作者 于学辉 史茜 王科珂 李娜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期123-128,共6页
为了建立同步检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体感染的多重PCR方法,根据GenBank上具有属间特异性的布鲁菌.Bp26基因、鹦鹉热衣原体23S rRNA基因和贝纳氏柯克斯氏体IS1111a基因,利用Primer premier 5.0软件各设计1对特异... 为了建立同步检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体感染的多重PCR方法,根据GenBank上具有属间特异性的布鲁菌.Bp26基因、鹦鹉热衣原体23S rRNA基因和贝纳氏柯克斯氏体IS1111a基因,利用Primer premier 5.0软件各设计1对特异性引物。通过优化PCR反应体系和扩增条件,建立了能够同时检测奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体的多重PCR方法。该方法具有较好的特异性和可重复性,对3种基因单重PCR检测敏感性均达到3.1×10~2拷贝·反应~-1,对3种病原基因同步检测的敏感性能达到3.1×10~3拷贝·反应~-1。利用该方法对采自不同流产牛的抗凝全血、血清、流产胎儿及奶液等172份临床样品进行检测,检测到布鲁菌感染阳性样品53份,鹦鹉热衣原体感染阳性样品2份,贝纳氏柯克斯氏体感染阳性样品10份,且检测到布鲁菌和鹦鹉衣原体混合感染阳性样品2份,布鲁菌和贝纳氏柯克斯氏体混合感染阳性样品2份,尚未检测到3种病原混合感染的阳性样品。结果表明,建立的多重PCR方法可以用来对奶牛布鲁菌、鹦鹉热衣原体和贝纳氏柯克斯氏体进行同步、快速、灵敏的检测。 展开更多
关键词 布鲁菌 鹦鹉热衣原体 贝纳氏柯克斯氏体 多重PCR 共扩增
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禽鹦鹉热衣原体实验室诊断技术的研究进展
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作者 韩娥 张强 +4 位作者 褚军 赵鹏 李佳 文鹏程 何诚 《实验动物科学》 2014年第5期49-55,60共8页
鹦鹉热衣原体是一种重要的人兽共患病病原,由于临床上缺少准确、快速、敏感的诊断方法和诊断试剂盒,严重影响了该病原的确诊。因此,它对家禽、高危人群造成的危害易被忽视。本文就近年来对禽鹦鹉热衣原体实验室诊断技术的研究进展作一综... 鹦鹉热衣原体是一种重要的人兽共患病病原,由于临床上缺少准确、快速、敏感的诊断方法和诊断试剂盒,严重影响了该病原的确诊。因此,它对家禽、高危人群造成的危害易被忽视。本文就近年来对禽鹦鹉热衣原体实验室诊断技术的研究进展作一综述,包括病原的抗原诊断、抗体诊断和分子诊断技术,为禽鹦鹉热衣原体的确诊和流行病学调查提供技术支持。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 抗原 抗体 诊断
鹦鹉热衣原体PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 唐泰山 王建忠 +5 位作者 陈国强 马雪丽 姚火春 张常印 姜焱 王凯民 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第9期26-30,共5页
针对16S-23S rRNA和主要外膜蛋白(MOMP)基因序列,分别设计引物,并建立了2种TaqMan荧光PCR、2种常规PCR和2种衣原体科通用PCR方法.经条件优化后,建立的6种PCR方法均具有良好的特异性,其中建立的2种荧光PCR分别能检测出7拷贝和2拷贝的... 针对16S-23S rRNA和主要外膜蛋白(MOMP)基因序列,分别设计引物,并建立了2种TaqMan荧光PCR、2种常规PCR和2种衣原体科通用PCR方法.经条件优化后,建立的6种PCR方法均具有良好的特异性,其中建立的2种荧光PCR分别能检测出7拷贝和2拷贝的目标双链DNA,其灵敏度明显优于常规PC R;建立的2种衣原体通用PCR,其扩增的目标片段中包含的可变区能有效区分鹦鹉热衣原体和其他衣原体.本试验建立的多种PCR方法敏感特异,具有良好的应用前景. 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体
贵州省山羊布鲁氏杆菌病衣原体病蓝舌病的血清学调查研究 预览 被引量:12
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作者 龙冲冲 颜艾 +5 位作者 周碧君 王开功 程振涛 江楠 尹传宝 文明 《贵州畜牧兽医》 2011年第1期 1-2,共2页
为了解贵州省山羊3种流产疫病流行情况,分别从贵州省4个地区共采集194份山羊血清,采用虎红平板凝集试验法(RBT)对194份血清进行布鲁氏杆菌病抗体检测,平均阳性率为0%;采用间接血凝试验法(IHA)对194份山羊血清进行衣原体病抗体检测,... 为了解贵州省山羊3种流产疫病流行情况,分别从贵州省4个地区共采集194份山羊血清,采用虎红平板凝集试验法(RBT)对194份血清进行布鲁氏杆菌病抗体检测,平均阳性率为0%;采用间接血凝试验法(IHA)对194份山羊血清进行衣原体病抗体检测,平均阳性率为5.7%;采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)对178份山羊血清进行蓝舌病抗体检测,平均阳性率为39.9%。调查显示蓝舌病感染率较高,需要进一步加强对该病的防控措施。 展开更多
关键词 山羊 布鲁氏杆菌 衣原体 蓝舌病 血清学调查
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奶牛流产鹦鹉热衣原体ompA基因的克隆与原核表达 预览 被引量:5
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作者 宋竹青 邱昌庆 +6 位作者 周继章 曹小安 蔺国珍 郑福英 宫晓炜 王光华 魏彦明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期 140-143,共4页
目的表达奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因,探索其作为诊断抗原的可能性。方法采用套式PCR方法扩增出了奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因完整片段,此扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达... 目的表达奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因,探索其作为诊断抗原的可能性。方法采用套式PCR方法扩增出了奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因完整片段,此扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用SDS-PAGE和Western—blot检测重组目的蛋白的表达结果。结果重组蛋白经奶牛衣原体阳性血清鉴定正确。结论ompA基因在原核表达系统中得到正确表达。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 ompA基因 克隆 原核表达 奶牛
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眼眶淋巴瘤患者组织标本中鹦鹉热衣原体的DNA检测 预览 被引量:1
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作者 熊炜 魏欣 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期 415-417,共3页
目的:检测眼眶淋巴瘤患者组织标本中鹦鹉热衣原体DNA,探讨鹦鹉热衣原体感染和眼眶淋巴瘤发病的相关性。方法:收集36例眼眶淋巴瘤患者的组织标本,以良性淋巴结病患者及眼外伤患者组织作为对照,采用PCR检测鹦鹉热衣原体DNA。结果:眼眶... 目的:检测眼眶淋巴瘤患者组织标本中鹦鹉热衣原体DNA,探讨鹦鹉热衣原体感染和眼眶淋巴瘤发病的相关性。方法:收集36例眼眶淋巴瘤患者的组织标本,以良性淋巴结病患者及眼外伤患者组织作为对照,采用PCR检测鹦鹉热衣原体DNA。结果:眼眶淋巴瘤、良性淋巴结病及眼外伤患者组织的鹦鹉热衣原体DNA阳性率分别为47.2%、5.0%、0.0%(χ2=24.578,P=0.0001)。而ⅠA期眼眶淋巴瘤组织中DNA的阳性率为52.0%,ⅡA期为36.4%(χ2=0.749,P=0.387)。全部病例的5、8年生存率分别为90.1%、78.5%,鹦鹉热衣原体DNA阳性组和阴性组术后生存相当(χ2=0.163,P=0.687)。结论:眼眶淋巴瘤发病可能和鹦鹉热衣原体感染有关。暂未发现鹦鹉热衣原体感染和疾病的分期及预后有关。 展开更多
关键词 眼眶淋巴瘤 鹦鹉热衣原体 PCR 病因学 预后
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入境肉种鸡检出衣原体阳性及其处理 预览
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作者 金钺 苗丽 +3 位作者 李平 王亚宾 张红英 陈丽颖 《中国动物检疫》 CAS 2009年第6期 47-49,共3页
目的随着加入世界贸易组织,我国海关检疫压力增大,为了维护国家主权和国际声誉,加强出入境检验检疫势在必行。衣原体病是一种重要的人畜共患病,也给养禽业带来巨大的经济损失,必须给予足够的重视,鹦鹉热衣原体对多种动物宿主有广... 目的随着加入世界贸易组织,我国海关检疫压力增大,为了维护国家主权和国际声誉,加强出入境检验检疫势在必行。衣原体病是一种重要的人畜共患病,也给养禽业带来巨大的经济损失,必须给予足够的重视,鹦鹉热衣原体对多种动物宿主有广泛的寄生性引起不同动物的多症候群疾病,是世界动物卫生组织动物名录疾病。方法对入境的一批肉种鸡进行抽样检验,按照中华人民共和国出入境检验检疫行业标准用间接血凝检测鹦鹉热衣原体病,做出试验报告。结果经检测出现阳性,肉鸡携带有衣原体病毒。结论根据中华人民共和国进出境动植物检疫法第二章进境检疫第十六条检出二类传染病、寄生虫病的动物,退回或者扑杀,同群其他动物在隔离场或者其他指定地点隔离观察。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 肉鸡 间接血凝试验
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动物衣原体病诊断方法及疫苗研究进展 预览 被引量:3
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作者 李忠军 《动物医学进展》 CSCD 2007年第8期 76-79,共4页
文章叙述了鹦鹉热衣原体的特性以及感染的宿主范围;国外通过过氧化物酶-抗过氧化物酶法对鹦鹉热衣原体在鸟体内的分布进行定位;为提高诊断的准确性,建立了单克隆抗体技术以及PCR诊断技术。国内通过对羊衣原体和猪衣原体的分离,建立了间... 文章叙述了鹦鹉热衣原体的特性以及感染的宿主范围;国外通过过氧化物酶-抗过氧化物酶法对鹦鹉热衣原体在鸟体内的分布进行定位;为提高诊断的准确性,建立了单克隆抗体技术以及PCR诊断技术。国内通过对羊衣原体和猪衣原体的分离,建立了间接血凝试验(IHA),并进行了大面积的推广应用。同时为提高诊断的准确性,ELISA诊断方法以及PCR诊断方法相应被建立。国外对于鹦鹉热衣原体弱毒疫苗、灭活疫苗以及基因工程亚单位疫苗进行了详细的研究。我国在20世纪已完成对鹦鹉热衣原体灭活疫苗的研究,但对于基因工程疫苗的研究尚处于早期阶段。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 诊断方法 疫苗
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