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DAPI染色法在流式细胞术中去除死细胞影响的探讨
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作者 许雅苹 郑晓辉 +2 位作者 房纯正 翁乐斌 黄黎月 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第9期1660-1664,1674共6页
目的:探索利用DAPI染色法在流式细胞检测过程中去除死细胞,消除死细胞对流式结果的影响。方法:建立原位肝癌小鼠模型,流式检测其中死细胞对脾脏中骨髓来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)结果的影响,并以碘化丙啶(pro... 目的:探索利用DAPI染色法在流式细胞检测过程中去除死细胞,消除死细胞对流式结果的影响。方法:建立原位肝癌小鼠模型,流式检测其中死细胞对脾脏中骨髓来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)结果的影响,并以碘化丙啶(propidiumiodide,PI)为对照,探索不同DAPI浓度、不同染色时间对死细胞比例的影响。结果:流式细胞术中去除死细胞影响时DAPI染色浓度低于1 g/m L时,其染色结果影响不大,浓度大于1 g/m L,死细胞比例明显升高;当DAPI使用浓度为0.2 g/m L时,在30钟内死细胞染色结果与PI相比差别无统计学差异,当染色时间大于30 min时,死细胞的比例显著升高。结论:DAPI染色法应用于流式细胞术中去除死细胞是一种可靠的检测方法,且简单易行,推荐使用方法为0.2 g/m L,染色时间1-5 min。 展开更多
关键词 DAPI 流式细胞术 死细胞
黑曲霉超临界萃取物抑制链格孢作用机制的初步研究 预览
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作者 张素 袁洪威 +3 位作者 李祝 肖洋 吉玉玉 唐婧红 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期57-63,共7页
本试验对黑曲霉菌丝体超临界萃取物(SE)抑制链格孢的机制进行了初步研究。采用超临界萃取从黑曲霉菌丝体中获得样品SE,使用气相色谱-质谱(GC-MS)对其萃取物进行分离鉴定,并通过细胞膜渗透性测定、核酸和总蛋白含量测定、4′,6-二脒基-2... 本试验对黑曲霉菌丝体超临界萃取物(SE)抑制链格孢的机制进行了初步研究。采用超临界萃取从黑曲霉菌丝体中获得样品SE,使用气相色谱-质谱(GC-MS)对其萃取物进行分离鉴定,并通过细胞膜渗透性测定、核酸和总蛋白含量测定、4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染色法、活性氧(ROS)含量测定、呼吸代谢途径等方法对SE的抑菌机制进行研究;电导率及核酸、蛋白结果显示,SE能影响链格孢细胞膜的完整性,SE处理菌体4.5 h,电导率比阴性对照增加了37.2%,胞外核酸蛋白含量显著增加。DAPI染色结果显示,DAPI可以和链格孢内的核酸结合,经SE作用30 min,SE可引起细胞核染色质异常弥散。ROS试验结果显示,SE可以激发菌体产生过多的活性氧,SE作用链格孢40 min时ROS含量比阴性对照增加了79.67%。呼吸代谢试验结果显示,SE能抑制三羧酸循环(TCA)中的琥珀酸脱氢酶的活性,其抑制率为35.4%。SE具有较强的抑菌活性,其抑菌机制是通过影响细胞膜的正常功能、损伤细胞结构和抑制真菌的呼吸代谢等方面实现的。 展开更多
关键词 黑曲霉 超临界萃取 链格孢 抑菌机制 琥珀酸脱氢酶 DAPI
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荧光示踪技术对土壤中诱变菌的生长研究 预览
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作者 王婷 孙红文 毛洪钧 《中国环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 2017年第1期328-335,共8页
采用荧光染料DAPI(4’,6-Diamidino-2-Phenylindole)对外源微生物Bacillussubtilis38(B38)的DNA分子进行标记,利用荧光示踪技术对外源微生物的生长繁殖进行有效监测.通过筛选DAPI工作液的使用浓度与菌悬液的稀释比例,得出采用0.1μg/mL... 采用荧光染料DAPI(4’,6-Diamidino-2-Phenylindole)对外源微生物Bacillussubtilis38(B38)的DNA分子进行标记,利用荧光示踪技术对外源微生物的生长繁殖进行有效监测.通过筛选DAPI工作液的使用浓度与菌悬液的稀释比例,得出采用0.1μg/mL浓度的DAPI对稀释106倍的菌悬液进行染色,荧光信号强度适宜,菌体分散度良好,可实现准确计数.采用上述染色条件,对60d内土壤B38菌体数量的变化进行阶段性监测.结果发现,接种后菌体浓度显著增加,平衡后菌体浓度达到(1.05±0.01)×1010cells/mL,与初期施加量相比,增长量达到3个数量级.以上结果表明,采用DAPI染料对外源微生物进行荧光示踪计数,为监测外源微生物的生长繁殖状态提供了一种简便、有效的方法. 展开更多
关键词 荧光标记 荧光计数 DAPI 细菌 土壤
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活体染色显微技术和绿色荧光蛋白在本科实验教学中的应用
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作者 冯金林 王津 韩榕 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第7期926-930,共5页
激光扫描共聚焦显微镜的原理和使用是本科生细胞生物学实验教学中的重要内容。目前,在细胞生物学实验教学中常使用绿色新鲜的植物叶片作为实验材料,在激光扫描共聚焦显微镜下对叶绿体的自发荧光进行观察。叶绿体的自发荧光信号强而且范... 激光扫描共聚焦显微镜的原理和使用是本科生细胞生物学实验教学中的重要内容。目前,在细胞生物学实验教学中常使用绿色新鲜的植物叶片作为实验材料,在激光扫描共聚焦显微镜下对叶绿体的自发荧光进行观察。叶绿体的自发荧光信号强而且范围广,使学生难以清晰地理解特异性的荧光信号。该文通过对转p35S::Naa10-GFP基因拟南芥幼苗的根尖进行活体染色[碘化丙啶(propidium iodide,PI)和4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色],在不同的激发光下,收集相应的荧光信号,通过计算机辅助成像,获得不同颜色叠加的特异荧光信号图像。该实验设计简单可行,获得的图像清晰且便于观察,能够使初学者直观并且深刻理解激光扫描共聚焦显微镜的原理和使用方法,适合在高校细胞生物学实验教学中推广,同时也为研究其他蛋白质亚细胞定位提供技术参考。 展开更多
关键词 激光扫描共聚焦显微镜 拟南芥 绿色荧光蛋白 PI DAPI
多聚磷酸盐:菌体内多功能调控子和环境压力守护者
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作者 马芮 苏莉 +1 位作者 宋宇昊 王莹莹 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2017年第7期1736-1746,共11页
多聚磷酸盐(polyP)是由几个到上百个磷酸基团组成并由高能磷酸酐键连接的链状无机化合物,广泛地存在于所有生命体中。研究表明,polyP在不适宜的生存条件下会在菌体内聚集,使菌对环境压力有极强的耐受性,它与其相关的酶PPK、PPX、p... 多聚磷酸盐(polyP)是由几个到上百个磷酸基团组成并由高能磷酸酐键连接的链状无机化合物,广泛地存在于所有生命体中。研究表明,polyP在不适宜的生存条件下会在菌体内聚集,使菌对环境压力有极强的耐受性,它与其相关的酶PPK、PPX、pppGpp等一起作出应激反应;在寡营养环境下,polyP作为能量和磷源库,和RpoS、Lon蛋白及。因子等一起参与一系列饥饿压力应答,这种存活机制与寡营养菌的生活方式类似。这些反应得益于polyP链状的灵活性和高荷电性,但是其具体的调控机理仍很少为人所知。本文阐述了以4',6-二脒基-2.苯基吲哚(4',6-Diamidino-2-phenylindole,DAPI)为基础的荧光染色方法进行菌体内polyP的定性(荧光或电子显微镜)和定量(荧光分光光度计),重点归纳分析了以polyP为核心的关于细菌适应恶劣生存环境的代替机制。 展开更多
关键词 多聚磷酸盐 4' 6-二脒基-2-苯基吲哚 压力反应 调控 寡营养
肿瘤坏死因子α诱导大鼠软骨细胞凋亡模型的建立及鉴定 预览 被引量:3
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作者 陈后煌 邵翔 +2 位作者 李俐 吴明霞 李西海 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第4期527-531,共5页
背景:肿瘤坏死因子α是诱导骨关节炎软骨细胞凋亡的主要细胞因子,对骨关节炎的病理进程具有重要调节作用。目的:比较不同质量浓度肿瘤坏死因子α诱导大鼠软骨细胞凋亡模型,为进一步探讨药物对软骨细胞凋亡的调控作用提供理论支持。方... 背景:肿瘤坏死因子α是诱导骨关节炎软骨细胞凋亡的主要细胞因子,对骨关节炎的病理进程具有重要调节作用。目的:比较不同质量浓度肿瘤坏死因子α诱导大鼠软骨细胞凋亡模型,为进一步探讨药物对软骨细胞凋亡的调控作用提供理论支持。方法:清洁级4周龄SD大鼠,采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞,并用不同质量浓度的肿瘤坏死因子α(0,10,20,30,40μg/L)诱导建立软骨细胞的凋亡模型,倒置相差显微镜观察软骨细胞的形态结构,Ⅱ型胶原免疫组化鉴定软骨细胞,MTT检测软骨细胞的活性,DAPI检测软骨细胞的凋亡情况。结果与结论:①体外培养软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫组化染色可见胞浆呈棕黄色,为阳性细胞;②软骨细胞凋亡率,干预48 h肿瘤坏死因子α10,20,30μg/L明显高于0μg/L(P〈0.01),肿瘤坏死因子α40μg/L明显高于10μg/L(P〈0.01);③软骨细胞活性,干预48 h肿瘤坏死因子α10,20,40μg/L明显低于0μg/L(P〈0.01),肿瘤坏死因子α20μg/L明显低于10μg/L(P〈0.05),肿瘤坏死因子α40μg/L明显低于10μg/L(P〈0.01)、20μg/L(P〈0.05)。④结果说明,20μg/L肿瘤坏死因子α能成功建立炎症介导软骨细胞凋亡模型。 展开更多
关键词 软骨细胞 肿瘤坏死因子Α 凋亡模型 炎症 组织工程 组织构建 MTT DAPI Ⅱ型胶原鉴定 国家自然科学基金
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麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在颅骨缺损大鼠体内迁移的影响 预览 被引量:1
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作者 侯费祎 谢兴文 +2 位作者 李慎松 邵宏斌 张莲 《中国组织工程研究》 北大核心 2017年第13期2043-2048,共6页
背景:骨髓间充质干细胞是多向分化干细胞,在骨折愈合和中有着重要作用。如何促进其在体内迁移,进而促进骨缺损的修复,有着重要研究意义。目的:研究不同浓度麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在体内迁移的影响,探讨其促进骨折愈合的机制... 背景:骨髓间充质干细胞是多向分化干细胞,在骨折愈合和中有着重要作用。如何促进其在体内迁移,进而促进骨缺损的修复,有着重要研究意义。目的:研究不同浓度麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在体内迁移的影响,探讨其促进骨折愈合的机制及其引经理论初探。方法:建立大鼠颅骨缺损的大鼠模型;贴壁筛选法提取干细胞,取第3代细胞,利用DAPI进行标记,然后尾静脉回植入颅骨缺损的大鼠体内。分别以0,42,84,168μL/kg麝香酮灌胃1次。结果与结论:与高剂量麝香酮组和空白组相比,低、中剂量麝香酮组骨缺损部分的骨髓间充质干细胞数量增加,干细胞因子和Fractalkine的表达水平明显增加。提示中低剂量麝香酮具有促进外源性干细胞在体内的迁移作用。 展开更多
关键词 干细胞 移植 骨髓间充质干细胞 麝香酮 颅骨缺损 DAPI 细胞迁移 干细胞因子 FRACTALKINE 国家自然科学基金
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授粉对烟草花柱引导组织结构的影响 预览 被引量:1
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作者 陈妍 王玲丽 刘文哲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期486-492,共7页
花柱内引导组织是花粉管生长时的必需结构,对花粉管的生长具有支持、营养、引导生长等重要作用。为了研究授粉对花柱引导组织结构的影响,该研究对烟草开花后不授粉及授粉1~4d内的花柱引导组织结构动态进行了观察比较。研究发现:未授粉... 花柱内引导组织是花粉管生长时的必需结构,对花粉管的生长具有支持、营养、引导生长等重要作用。为了研究授粉对花柱引导组织结构的影响,该研究对烟草开花后不授粉及授粉1~4d内的花柱引导组织结构动态进行了观察比较。研究发现:未授粉花柱内的引导组织的变化是一个类似于衰老的死亡过程,授粉后花柱内引导组织细胞发生剧烈变化,细胞快速死亡,与未授粉花柱的引导组织的变化完全不同,它们可能是两种完全不同的调控方式。 展开更多
关键词 烟草 授粉及不授粉 花柱引导组织 结构 DAPI
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冬虫夏草、蛹虫草菌丝隔膜和细胞核荧光染色 被引量:1
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作者 胡晓棣 李熠 +1 位作者 任蜀豫 姚一建 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1099-1105,共7页
冬虫夏草和蛹虫草作为重要的药用真菌,得到广泛的重视,迄今已有大量的研究报道。然而,作为细胞学研究的基础处理方法,其菌丝隔膜和细胞核染色却缺乏必要的研究。荧光染色是一种程序简便、快速灵敏的染色方法。本研究选用DAPI、PI、Calco... 冬虫夏草和蛹虫草作为重要的药用真菌,得到广泛的重视,迄今已有大量的研究报道。然而,作为细胞学研究的基础处理方法,其菌丝隔膜和细胞核染色却缺乏必要的研究。荧光染色是一种程序简便、快速灵敏的染色方法。本研究选用DAPI、PI、Calcoflour White和刚果红等4种染料,对冬虫夏草、蛹虫草菌丝的隔膜和细胞核进行单独与组合染色实验,通过显微观察比较得出较好的染色方法。结果表明DAPI对冬虫夏草和蛹虫草菌丝的细胞核染色效果都较好,而Calcoflour White对两者的细胞壁染色效果较好且隔膜清晰。DAPI与Calcoflour White两者进行冬虫夏草菌丝组合染色的效果为最佳,但在蛹虫草菌丝染色中效果不太稳定。对蛹虫草菌丝较好的组合染色是DAPI与刚果红的组合,但其染色结果需要在激光共聚焦显微镜下观察。 展开更多
关键词 荧光染料 4’ 6-二脒基-2-苯基吲哚 碘化丙啶 荧光增白剂 刚果红
Nerve growth factor promotes in vitro proliferation of neural stem cells from tree shrews 预览
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作者 Liu-lin Xiong Zhi-wei Chen Ting-hua Wang 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期591-596,共6页
Neural stem cells promote neuronal regeneration and repair of brain tissue after injury,but have limited resources and proliferative ability in vivo.We hypothesized that nerve growth factor would promote in vitro prol... Neural stem cells promote neuronal regeneration and repair of brain tissue after injury,but have limited resources and proliferative ability in vivo.We hypothesized that nerve growth factor would promote in vitro proliferation of neural stem cells derived from the tree shrews,a primate-like mammal that has been proposed as an alternative to primates in biomedical translational research.We cultured neural stem cells from the hippocampus of tree shrews at embryonic day 38,and added nerve growth factor(100 μg/L) to the culture medium.Neural stem cells from the hippocampus of tree shrews cultured without nerve growth factor were used as controls.After 3 days,fluorescence microscopy after DAPI and nestin staining revealed that the number of neurospheres and DAPI/nestin-positive cells was markedly greater in the nerve growth factor-treated cells than in control cells.These findings demonstrate that nerve growth factor promotes the proliferation of neural stem cells derived from tree shrews. 展开更多
关键词 神经生长因子 神经干细胞 体外增殖 树鼩 灵长类动物 NESTIN NESTIN DAPI
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DAPI染色法在流式细胞术中检测BHK-21细胞周期的探讨 预览 被引量:1
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作者 俞宗佑 杨孝朴 《安徽农业科学》 CAS 2015年第23期149-150,共2页
[目的]为规模化细胞培养的检测奠定基础。[方法]采用DAPI标记BHK-21细胞,探索简便易行的DNA检测技术,检测细胞周期中各期的DNA含量。[结果]DAPI标记法是一种可靠的DNA检测方法,且简单易行。[结论]利用DAPI标记法能够准确进行细胞周期检测。
关键词 DAPI染色法 细胞周期 流式细胞技术
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长江口及邻近海域表层海水细菌多样性及群落结构 预览 被引量:5
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作者 刘晓辉 王健鑫 +4 位作者 王帅兵 樊英萍 俞凯成 蒋然 刘明华 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1531-1541,共11页
从长江口及邻近海域10个站点采集表层海水,通过DAPI染色计数和克隆文库构建的方法,对细菌的多样性及群落结构进行初步研究。DAPI染色计数结果显示长江口及邻近海域表层海水中细菌丰度总体较高,生物量变化较大,从1.16×10^5(A04站... 从长江口及邻近海域10个站点采集表层海水,通过DAPI染色计数和克隆文库构建的方法,对细菌的多样性及群落结构进行初步研究。DAPI染色计数结果显示长江口及邻近海域表层海水中细菌丰度总体较高,生物量变化较大,从1.16×10^5(A04站点)到1.48×10^6 cells/m L(B03站点);总体趋势从长江口向外海增加。细菌克隆文库的系统发育分析表明:细菌序列以变形菌门为主(占总文库的60.61%),其中α-变形菌纲是绝对优势类群(50.62%);其次是拟杆菌门(15.18%)、放线菌门(14.79%)和蓝细菌门(4.61%),还有少量厚壁菌门、绿弯菌门、酸杆菌门、浮霉菌门、纤维杆菌门、疣微菌门等;另外柔膜菌门和SAR类群也有发现。文库多样性分析结果显示长江口及邻近海域部分站点表层海水中细菌多样性显著,与研究区海域水产养殖活动有关,并受到区域洋流和海洋化学环境(如低氧带)的影响。 展开更多
关键词 长江口 细菌 多样性 DAPI 16S RDNA
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Assesment of Frequency-Magnitude of Extreme Rainfall Events-Case Study of the MeKong River Delta 预览
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作者 Pham Hai An Tran Anh Tu +1 位作者 Tran Dinh Lan Nguyen Ngoc Tien 《环境科学与工程:B》 2015年第3期161-168,共8页
关键词 降雨量 三角洲 湄公河 事件 DAPI 幅度 检测 案例
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SPIO、DAPI双重标记猕猴骨髓间充质干细胞:对细胞活性及增殖的影响 预览 被引量:3
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作者 宋巧巧 周慧良 潘兴华 《中国组织工程研究》 北大核心 2015年第36期5741-5745,共5页
背景:传统的细胞移植示踪方法均需要在体外状态下进行组织学切片鉴定和分析,这显然限制了干细胞移植进入临床应用,因此,探索无创的、可多次重复应用的活体示踪方法已成为迫切亟待解决的问题。目的:观察SPIO和DAPI双标记猕猴骨髓间充... 背景:传统的细胞移植示踪方法均需要在体外状态下进行组织学切片鉴定和分析,这显然限制了干细胞移植进入临床应用,因此,探索无创的、可多次重复应用的活体示踪方法已成为迫切亟待解决的问题。目的:观察SPIO和DAPI双标记猕猴骨髓间充质干细胞的效果及对干细胞存活、增殖的影响。方法:全骨髓贴壁法分离培养猕猴骨髓间充质干细胞,并采用流式细胞术对骨髓间充质干细胞进行鉴定。用SPIO和DAPI双标记骨髓间充质干细胞,通过荧光显微镜观察DAPI标记阳性率,普鲁士蓝染色和透射电镜鉴定SPIO标记阳性率,MTT检测标记细胞的活性、增殖能力。结果与结论:采用全骨髓贴壁法成功获得高纯度猕猴骨髓间充质干细胞,纯度达95.1%。SPIO和DAPI成功标记骨髓间充质干细胞,标记阳性率达95%-98%,且对干细胞的活性、增殖无影响。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 细胞标记 骨髓间充质干细胞 猕猴 SPIO DAPI 国家自然科学基金
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新疆小叶白蜡丛枝病植原体的鉴定及16S rRNA基因序列分析
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作者 李成亮 都业娟 +2 位作者 石宝萍 刘娟娟 向本春 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期601-606,共6页
【目的】对新疆小叶白蜡丛枝病植原体进行检测,通过其16S rRNA基因分析确定其分类地位。【方法】利用苯胺蓝和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色,在荧光显微镜下观察新疆小叶白蜡嫩茎横切片;采用植原体16S rRNA基因的通用引物对P... 【目的】对新疆小叶白蜡丛枝病植原体进行检测,通过其16S rRNA基因分析确定其分类地位。【方法】利用苯胺蓝和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色,在荧光显微镜下观察新疆小叶白蜡嫩茎横切片;采用植原体16S rRNA基因的通用引物对P1/P7和R16F2n/R16R2进行直接和巢式PCR扩增,对得到的16S rRNA基因的序列进行RFLP和构建系统进化树分析。【结果】表现丛枝病症状的新疆小叶白蜡中存在植原体,暂命名为Fraxinus sogdianaBunge witches’broom phytoplasma(Fraxinus sogdianaBunge WB);其16S rRNA基因的序列GenBank登录号为KF061042,RFLP图谱与16Sr V-B亚组的枣疯病植原体相同,系统进化地位与枣疯病菌株AB052876相同。【结论】新疆小叶白蜡丛枝病植原体为16Sr V-B亚组成员。 展开更多
关键词 新疆小叶白蜡 植原体 苯胺蓝 DAPI 16S rRNA RFLP 系统进化分析
Hoechst33342与DAPI标记细胞核对胞内活性氧检测效果的比较 被引量:1
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作者 周玉环 刘树迎 +4 位作者 平苏宁 王晶晶 陈大堤 黄锦桃 李朝红 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期75-78,共4页
目的探讨Hoechst33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响。方法静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10min,加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA,再分别加入Hoechst33342和DAPI不同荧光染料进行核... 目的探讨Hoechst33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响。方法静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10min,加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA,再分别加入Hoechst33342和DAPI不同荧光染料进行核标记。荧光显微镜下观察细胞核被标记的数目与细胞内活性氧的荧光水平。结果Hoechst33342染料标记5min后即可见细胞核被标记上,随着时间的延长被标记的核数目并不发生改变;而与之明显不同的是,DAPI染料标记5min时,只有几个细胞核被标记上,但随着时间的延长被标记的核数目越来越多。Hoechst33342标记后细胞内活性氧的荧光强度并不随时间的延长发生变化,而DAPI标记后细胞内活性氧绿色荧光的细胞数就越少,DAPI标记的细胞核数与显示活性氧绿色荧光的细胞数呈反比。这些结果提示,DAPI染料在标记细胞核时破坏了活性氧在细胞内的储存,干扰了实验结果。结论检测细胞内活性氧时,应使用Hoechst33342核标记染料而不能用DAPI。 展开更多
关键词 活性氧 血管平滑肌细胞 Hoechst 33342 DAPI
Steedman’s wax包埋切片DAPI染色法证实铝诱导花生根尖细胞程序性死亡 预览 被引量:1
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作者 邓伦武 黄文静 +4 位作者 何海旺 何虎翼 李创珍 韦善清 何龙飞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1353-1357,共5页
【目的】检验Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是否适用于观察花生根尖细胞核形态。【方法】分别采取100μmol/L AlCl3处理不同时间(0、4、8、12 h)后两个花生品种(铝敏感型中花2号和耐铝型99-1507)的根尖,经过Steedman’s wax包... 【目的】检验Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是否适用于观察花生根尖细胞核形态。【方法】分别采取100μmol/L AlCl3处理不同时间(0、4、8、12 h)后两个花生品种(铝敏感型中花2号和耐铝型99-1507)的根尖,经过Steedman’s wax包埋切片等一系列过程,利用荧光染料DAPI染色观察细胞核形态变化。【结果】100μmol/L AlCl3可引起花生根尖细胞核形态发生改变,核质浓缩、核边缘化、呈新月状等,具有明显的PCD特征。花生根尖细胞在铝胁迫下发生PCD,PCD程度与花生耐铝性呈负相关,与处理时间呈正相关。【结论】Steedman’swax包埋切片DAPI染色法是一种快速、高效的适用于观察花生根尖细胞核形态的方法。 展开更多
关键词 花生 铝胁迫 细胞程序性死亡 Steedman’s wax包埋切片 DAPI染色
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优雅蝈螽精子形成过程中核的形态结构变化观察 被引量:1
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作者 王昕 常岩林 +1 位作者 赵卓 郭明申 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1162-1170,共9页
【目的】螽斯精子结构复杂,具有特征性的箭头状顶体,是研究昆虫精子形成的理想材料。为了研究螽斯精子形成过程中的动态变化机制,特别是细胞核的凝集机制和箭头状顶体的发生机制,本研究对优雅蝈螽Gampsocleis gratiosa精细胞和精子的细... 【目的】螽斯精子结构复杂,具有特征性的箭头状顶体,是研究昆虫精子形成的理想材料。为了研究螽斯精子形成过程中的动态变化机制,特别是细胞核的凝集机制和箭头状顶体的发生机制,本研究对优雅蝈螽Gampsocleis gratiosa精细胞和精子的细胞核进行了观察。【方法】选择发育良好的优雅蝈螽成虫精巢为研究材料,利用透射电镜技术、普通光学显微镜和荧光显微镜技术,制作光镜切片和电镜切片进行观察。【结果】根据其形态结构变化特征,将优雅蝈螽精子形成过程中的细胞核分为4个阶段:圆形核、叶形核、柱状核和成熟阶段。我们还通过常规HE染色,结合DNA特异性荧光探针DAPI,证明了圆形核时期,精细胞内具有两个明显的球状结构,一个为细胞核,另一个是原顶体;精子成熟阶段,精子尾部排出的细胞质微滴中含有DNA。【结论】优雅蝈螽精子形成过程中,精细胞的细胞核经历了显著的形态变化,精细胞核的形态变化与细胞骨架微管相关,细胞核塑形伴随着染色质的重组。本研究为进一步阐明直翅目昆虫精子形成的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 直翅目 优雅蝈螽 细胞核 原顶体 超微结构 HE染色 DAPI 精子形成
甲状腺非典型腺瘤中DAPI核染色、Ki-67表达及意义 预览 被引量:1
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作者 邢益祥 孟刚 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1117-1121,共5页
目的探讨4’,6-二脒基-2·苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)细胞核染色、Ki-67在甲状腺非典型腺瘤(a-typical thyroid adenoma,A’rA)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVision两步法和免疫荧光染色法... 目的探讨4’,6-二脒基-2·苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)细胞核染色、Ki-67在甲状腺非典型腺瘤(a-typical thyroid adenoma,A’rA)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVision两步法和免疫荧光染色法分别检测ATA、甲状腺滤泡癌(follicular thyroid carcinoma,FC)中Ki-67增殖指数及DAPI核染色情况。结果DAlai在低、高核级ATA组织中的阳性率分别为12.50%(2/16)、16.13%(5/31),两组相比差异无统计学意义(χ2=0.01,P〉0.05);其在对照组Fc中的阳性率为85.71%(6/7),两组相比差异有统计学意义(χ2=13.17,P〈0.01);Ki-67在低、高核级ATA组织中的阳性率分别为6,25%(1/16)、6.45%(2/31),二者相比差异无统计学意义(χ2=0.36,P〉0.05);而在对照组FC中的阳性率为85.71%(6/7),二者相比差异有统计学意义(χ2=22.19,P〈0.01);Ki-67、DAPI表达与ATA患者年龄、结节数量、肿块大小无关。结论联合检测Ki-67和DAPI可能对ATA与FC的鉴别诊断有一定价值。Ki-67、DAPI与ATA核级别、患者年龄、肿块大小和结节数量无关。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 非典型腺瘤 KI-67 DAPI 免疫组织化学 免疫荧光染色
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宋代大辟研究——从宋代死刑的执行率角度考察 预览 被引量:2
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作者 杨高凡 《保定学院学报》 2014年第1期14-19,共6页
宋代每年判决的大辟案件较多,但最后实施真刑的比例大约只占十分之一,其原因在于宋朝君臣尊崇儒家仁政思想、受“无讼”思想的长期影响、死刑复核制度健全、频繁赦宥天下。死刑案件执行率低是宋代推行仁政、法制健全的表现,但死刑执... 宋代每年判决的大辟案件较多,但最后实施真刑的比例大约只占十分之一,其原因在于宋朝君臣尊崇儒家仁政思想、受“无讼”思想的长期影响、死刑复核制度健全、频繁赦宥天下。死刑案件执行率低是宋代推行仁政、法制健全的表现,但死刑执行率低,容易导致缺乏权威性和威慑力。 展开更多
关键词 宋代 大辟 死刑 仁政思想 执行率
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