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葛根抗氧化肽的分离及清除自由基活性研究 预览 被引量:4
1
作者 赵艳景 张岩 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期112-115,共4页
目的:分离纯化葛根抗氧化肽并对其进行体外清除自由基活性的研究。方法:以野生葛根为实验材料,经30%的乙醇浸提、透析、冷冻干燥,进一步采用DEAE阴离子交换层析,反相高效液相色谱的方法,对葛根抗氧化肽进行纯化,对不同组分进行... 目的:分离纯化葛根抗氧化肽并对其进行体外清除自由基活性的研究。方法:以野生葛根为实验材料,经30%的乙醇浸提、透析、冷冻干燥,进一步采用DEAE阴离子交换层析,反相高效液相色谱的方法,对葛根抗氧化肽进行纯化,对不同组分进行还原能力的测定,还原能力最强的命名为PE1。对PE1进行茚三酮反应和分子质量测定。采用邻苯三酚自氧化法、DPPH法、Fenton反应法检测PE1体外对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、羟自由基的清除作用。结果:反相高效液相色谱检测PE1纯度,显示为单一峰,PE1与茚三酮反应呈阳性,分子质量约为746D,PE1在体外可以有效清除以上3种自由基。在质量浓度为0.652mg/mL时,羟自由基清除率可达到80.01%;在5mg/mL质量浓度条件下,对超氧阴离子自由基的清除率高达97.35%;在3.5mg/mL质量浓度条件下,对DPPH自由基的清除率达到75.02%,其IC50为2.83mg/mL。结论:PE1具有较强的清除自由基活性。 展开更多
关键词 葛根 DEAE层析 抗氧化肽 自由基
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人和BALB/c小鼠对梭子蟹过敏组分的比较及主要过敏原的分离纯化
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作者 毛露甜 杨华胜 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第10期1042-1045,共4页
目的比较人和BALB/c小鼠对梭子蟹过敏的组分差异,评价用小鼠构建过敏模型对研究人类过敏症的可靠性,并对主要过敏原进行分离纯化。方法制备梭子蟹蛋白浸液,经皮下注射建立小鼠过敏模型,获得特异的小鼠IgE(sIgE)血清,同时收集蟹过敏患... 目的比较人和BALB/c小鼠对梭子蟹过敏的组分差异,评价用小鼠构建过敏模型对研究人类过敏症的可靠性,并对主要过敏原进行分离纯化。方法制备梭子蟹蛋白浸液,经皮下注射建立小鼠过敏模型,获得特异的小鼠IgE(sIgE)血清,同时收集蟹过敏患者血清,采用Western blot法鉴定蟹的过敏组分,通过硫酸铵分段盐析和DEAE离子交换层析对主要过敏组分进行分离纯化。结果用梭子蟹蛋白浸液成功建立了BALB/c小鼠过敏模型,并获得了高效价的sIgE血清。梭子蟹中有一相对分子质量为89 000的蛋白组分为人和小鼠共有的主要过敏原,通过硫酸铵分段盐析法和DEAE离子交换层析法分离到了该组分。结论小鼠和人对梭子蟹过敏的组分基本一致,提示小鼠过敏模型可成为人类过敏症研究的可靠动物模型,纯化单一的过敏原组分有望提高过敏症诊断和治疗的特异性。 展开更多
关键词 梭子蟹 过敏原 特异性IGE DEAE离子交换层析 BALB/C小鼠
人C型溶菌酶发酵与分离纯化工艺的研究 预览 被引量:1
3
作者 王林涛 姚笛 《安徽农业科学》 CAS 2014年第31期10836-10838,共3页
[目的]研究毕赤酵母菌株(Pichia GS115)表达人C型溶菌酶(H-LYZ)的发酵与分离纯化的工艺。[方法]探讨酵母生长规律,研究不同菌体浓度、不同诱导时间对蛋白产量的影响,并且探讨不同pH条件对DEAE-Sepharose FF和CM-Sepharose FF层析分... [目的]研究毕赤酵母菌株(Pichia GS115)表达人C型溶菌酶(H-LYZ)的发酵与分离纯化的工艺。[方法]探讨酵母生长规律,研究不同菌体浓度、不同诱导时间对蛋白产量的影响,并且探讨不同pH条件对DEAE-Sepharose FF和CM-Sepharose FF层析分离纯化目标蛋白的影响。[结果]毕赤酵母菌株表达H-LYZ的最佳发酵条件为:发酵24 h用浓度1%甲醇诱导,以后每12 h用浓度1%甲醇诱导,共6次,在此条件下可获得高产量目标蛋白。DEAE-Sepharose FF和CM-Sepharose FF分离纯化目标蛋白的最佳pH分别为6.65和6.50。[结论]该研究可为人C型溶菌酶的工艺化生产提供理论指导。 展开更多
关键词 人C型溶菌酶 毕赤酵母 发酵 DEAE与CM层析
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超滤/DEAE离子交换层析法分离纯化IgY 预览 被引量:3
4
作者 方希修 管军军 +2 位作者 严新义 周新民 乐国伟 《中国家禽》 北大核心 2007年第4期 25-27,共3页
应用平板式膜超滤技术与DEAE离子交换层析法对卵黄免疫球蛋白(IgY)进行分离纯化。首先,卵黄液经过缓冲液稀释分离;然后,用平板式膜组件对其超滤,并且分析了各种因素对其的影响,确定分子截留量为100ku,操作压力差为0.12MPa、进... 应用平板式膜超滤技术与DEAE离子交换层析法对卵黄免疫球蛋白(IgY)进行分离纯化。首先,卵黄液经过缓冲液稀释分离;然后,用平板式膜组件对其超滤,并且分析了各种因素对其的影响,确定分子截留量为100ku,操作压力差为0.12MPa、进料温度为30℃.pH5.2,截留液抗体回收率达到91.89%,纯度为86%。经DEAE离子交换层析得到高纯度的IgY。 展开更多
关键词 卵黄免疫球蛋白 超滤 DEAE离子交换层析
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牛乳中主要过敏原组分的分离纯化及鉴定 预览 被引量:9
5
作者 毛露甜 向军俭 张在军 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期 305-308,共4页
目的:分离纯化并鉴定牛乳中引起过敏反应的主要致敏组分。方泫:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS.PAGE)分析了脱脂乳和乳清的蛋白组分,用饱和硫酸铵分段盐析-DEAE离子交换柱层析纯化过敏原蛋白,脱脂乳和乳清蛋白皮下注射Balb/c小鼠... 目的:分离纯化并鉴定牛乳中引起过敏反应的主要致敏组分。方泫:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS.PAGE)分析了脱脂乳和乳清的蛋白组分,用饱和硫酸铵分段盐析-DEAE离子交换柱层析纯化过敏原蛋白,脱脂乳和乳清蛋白皮下注射Balb/c小鼠获得高效价特异性IgE抗血清用于免疫印迹分析。结果:免疫印迹分析显示β-乳球蛋白(β-Lg)是引起牛乳过敏的主要过敏原,建立了牛乳过敏小鼠模型。结论:明确了牛乳过敏的主要过敏组分,对牛乳过敏症的诊断治疗以及无过敏原牛乳的制备提供了实验依据。 展开更多
关键词 牛乳 食物过敏原 免疫印迹 DEAE离子交换层析
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河虾中主要过敏原组分鉴定及分离纯化 预览 被引量:8
6
作者 张在军 向军俭 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期 650-651,共2页
目的鉴定并分离纯化河虾中引起过敏反应的主要蛋白组分。方法河虾蛋白浸液皮下注射建立小鼠过敏模型,获得高效价特异性IgE血清用于免疫印迹分析。用饱和硫酸铵分段盐析和DEAE离子交换层析纯化目的蛋白。dot-ELISA及竞争ELISA检测纯化... 目的鉴定并分离纯化河虾中引起过敏反应的主要蛋白组分。方法河虾蛋白浸液皮下注射建立小鼠过敏模型,获得高效价特异性IgE血清用于免疫印迹分析。用饱和硫酸铵分段盐析和DEAE离子交换层析纯化目的蛋白。dot-ELISA及竞争ELISA检测纯化目的蛋白的过敏原活性。结果河虾蛋白浸液皮下注射成功建立了虾过敏小鼠模型。免疫印迹分析显示虾中有一分子量36kD的蛋白组分为主要过敏原。用硫酸铵分级沉淀和DEAE离子交换层析的方法成功分离到目的蛋白。dot-ELISA证明目的蛋白能与特异性IgE反应。竞争ELISA检测纯化目的蛋白与河虾蛋白浸液竞争结合特异性IgE的活性,最大竞争抑制率可达60%。结论本实验成功鉴定并分离到河虾中一分子量为36kD的主要过敏原组分,为过敏原的分析研究提供了一套比较完整的方法。 展开更多
关键词 过敏原 特异性IGE 免疫印迹 DEAE离子交换层析
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降解均三嗪类除草剂的优势菌的特性研究 预览 被引量:4
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作者 李军红 颜慧 +1 位作者 刘宪华 宋文华 《南开大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期 58-61,共4页
从长期受农药污染的土壤中分离得到一株能高效降解均三嗪类除草剂的菌株,命名为FR,对其生理生化及降解特性进行了测定,结果表明,FR对于典型均三嗪化合物扑草净有很好的降解作用,最佳碳源为8g/L的甘油;经DEAE纤维素层析及苯基交联... 从长期受农药污染的土壤中分离得到一株能高效降解均三嗪类除草剂的菌株,命名为FR,对其生理生化及降解特性进行了测定,结果表明,FR对于典型均三嗪化合物扑草净有很好的降解作用,最佳碳源为8g/L的甘油;经DEAE纤维素层析及苯基交联琼脂糖亲合层析纯化后酶活性提高近30倍. 展开更多
关键词 均三嗪类除草剂 优势菌 降解特性 粗酶液 纯化 微生物降解 FR DEAE纤维素层析
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