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内皮祖细胞条件培养基对间充质干细胞向内皮细胞分化的影响 预览
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作者 韩欢欢 郭黎姣 +5 位作者 杨雄峰 周青 姜慧娇 王小艺 陈雪玲 吴向未 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期229-236,共8页
目的探讨体外小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细... 目的探讨体外小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细胞术检测MSCs和EPCs表面标记物,双荧光染色和体外成管实验对EPCs进行功能鉴定。将MSCs分为0%EPCs-CM组(对照组)、25%EPCs-CM组和50%EPCs-CM组。qRT-PCR检测各组CD31、vWF、eNOS的mRNA表达水平。体外成管实验检测各组细胞的体外成管能力;免疫荧光检测各组MSCs CD31、CD34表达情况;对各组上清中的NO进行检测。结果流式细胞术结果显示,第3代MSCs高表达Sca-1,低表达CD34、CD11b;EPCs高表达CD34、CD133和VEGFR2,可吞噬Dil-AC-LDL和结合UEA-1。在基质胶上可形成管腔样结构。qRT-PCR显示3周时50%EPCs-CM组CD31、vWF、eNOS表达(2.28±0.25, 1.76±0.71,8.27±1.65),较对照组显著升高( P <0.05)。50%EPCs-CM组MSCs可体外形成管腔样结构;免疫荧光显示50%EPCs-CM组MSCs CD31和CD34的表达明显高于对照组。对照组细胞与实验组细胞上清液中NO的含量(8.81+3.41,20.93±9.47)μmol/L,差异显著( t =3.96, P <0.05)。结论 EPCs-CM能提高MSCs体外成管能力,并促进MSCs向ECs分化。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 间充质干细胞 条件培养基 分化 内皮细胞
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EPCs移植对缺血再灌注肾损伤大鼠血管内皮生长因子的影响 预览
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作者 周丽娜 王玉新 +1 位作者 武挺 方林 《医学理论与实践》 2019年第2期160-162,159共4页
目的:探讨EPCs移植对缺血再灌注肾损伤大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:雄性SD大鼠22头,随机分为3组:对照组、I/R组、EPCs组,术后1d处死各组大鼠,抽取外周血培养及鉴定内皮祖细胞,抽血检测大鼠的生化指标,采用RT-PCR技术测... 目的:探讨EPCs移植对缺血再灌注肾损伤大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:雄性SD大鼠22头,随机分为3组:对照组、I/R组、EPCs组,术后1d处死各组大鼠,抽取外周血培养及鉴定内皮祖细胞,抽血检测大鼠的生化指标,采用RT-PCR技术测定三组大鼠VEGF mRNA的表达情况,行病理染色观察各组大鼠肾间质血管CD34的表达情况。结果:EPCs移植上调缺血再灌注大鼠VEGF mRNA的表达并改善了该组大鼠的肾功能,减轻了肾间质血管内皮细胞的损伤。结论:EPCs移植减轻大鼠缺血再灌注肾损伤可能与上调VEGF的表达有关。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 内皮祖细胞 缺血再灌注损伤 内皮细胞
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血管内皮祖细胞鉴定及其促血管新生机制的研究进展 预览
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作者 潘天岳 刘浩 +1 位作者 符伟国 董智慧 《中国临床医学》 2019年第4期635-640,共6页
血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)既往被认为在出生后血管新生中发挥主要作用。1997年Asahara等从外周血分离出表达CD34抗原的单个核细胞,即血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)。EPCs是一类具有促血管生成能力的干... 血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)既往被认为在出生后血管新生中发挥主要作用。1997年Asahara等从外周血分离出表达CD34抗原的单个核细胞,即血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)。EPCs是一类具有促血管生成能力的干细胞总称,尚未发现特异性免疫表型,故主要根据具有形成血管的功能鉴定。目前一般认为,EPCs来源于骨髓和外周血管壁,其中能分化为ECs者被称为内皮集落形成细胞(endothelial colony forming cells,ECFCs)。当组织缺血或损伤时,来自骨髓的EPCs被组织释放的损伤信号动员后进行迁移和归巢。活化的EPCs通过旁分泌作用招募更多的局部ECFCs和ECs来形成微血管,进而促进组织修复。因此,对EPCs的深入研究有助于临床上治疗性血管新生相关研究的进行和方法的发展。 展开更多
关键词 血管内皮祖细胞 内皮集落形成细胞 治疗性血管新生
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内皮祖细胞与糖尿病血管再生障碍的研究进展 预览
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作者 郭梓(综述) 莫朝晖(审校) 《临床与病理杂志》 2019年第7期1548-1554,共7页
糖尿病内皮功能障碍和新生血管受损,与糖尿病心血管并发症发生密切相关.内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类骨髓来源的细胞,其在机体受损后的内皮化过程和血管修复中发挥重要作用,不仅可以将自身整合到新形成的毛细... 糖尿病内皮功能障碍和新生血管受损,与糖尿病心血管并发症发生密切相关.内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类骨髓来源的细胞,其在机体受损后的内皮化过程和血管修复中发挥重要作用,不仅可以将自身整合到新形成的毛细血管中,还可以旁分泌促血管生成因子发挥作用.糖尿病患者EPCs数目减少、功能受损与外周动脉粥样硬化之间联系紧密,对糖尿病大血管病变的严重程度具有指示作用,改善EPCs的功能可以促进糖尿病下肢缺血模型的血流恢复.因此,EPCs有望成为糖尿病大血管病变的治疗靶点. 展开更多
关键词 糖尿病大血管病变 内皮祖细胞 内皮克隆形成细胞 血管新生
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瓜蒌皮对急性心肌缺血大鼠内皮祖细胞的动员作用及机制研究
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作者 李鑫飞 伏瑶 +2 位作者 周继栋 胡超群 赵启韬 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1210-1214,共5页
目的:从促进骨髓内皮祖细胞(EPC)动员的角度,研究瓜蒌皮发挥急性心肌缺血(AMI)保护作用的机制。方法:Wistar大鼠分为对照组、模型组、瓜蒌皮组,每组再分7亚组(n=8)。各亚组分别于AMI后1~7d处死。比较AMI后7d内,各组大鼠外周血EPC含量、... 目的:从促进骨髓内皮祖细胞(EPC)动员的角度,研究瓜蒌皮发挥急性心肌缺血(AMI)保护作用的机制。方法:Wistar大鼠分为对照组、模型组、瓜蒌皮组,每组再分7亚组(n=8)。各亚组分别于AMI后1~7d处死。比较AMI后7d内,各组大鼠外周血EPC含量、心肌及血浆中血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、一氧化氮(NO)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平变化。结果:模型组大鼠CEPC浓度AMI后前3d急剧升高,5~6d明显下降;其VEGF心肌及血浆水平分别于第3、5天达到峰值,然后开始显著下降;eNOS、MMP-9、NO则分别于第4、3、5天达到顶峰后开始显著下降。而瓜蒌皮组大鼠AMI后,其CEPC浓度第5天以后显著高于模型组(P<0.05,P<0.01);VEGF心肌及血浆水平分别于第3、4天达到峰值后开始缓慢下降,分别于第3、6、7天,3、4、5、7天显著高于同时期模型组(P<0.05,P<0.01);eNOS心肌及血浆水平分别于第4、3天达到峰值后开始下降,分别于第1、3、5、6天,2、3、5、6、7显著高于同时期模型组(P<0.05,P<0.01);MMP-9心肌及血浆水平均于第4天达到顶峰后开始下降,从第4天起显著高于同时期模型组(P<0.05,P<0.01);NO血浆水平第4天达到峰值后开始下降,第3、4、6天均显著高于同时期模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:瓜蒌皮可能通过上调VEGF等的表达,促进骨髓EPC的动员,从而发挥AMI保护作用。 展开更多
关键词 瓜蒌皮 心肌缺血 内皮祖细胞 血管内皮生长因子 一氧化氮
当归补血汤促进血管新生作用的研究进展
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作者 金永志 李梦帆 +2 位作者 黄荣 黄毅 曾光 《中医药导报》 2019年第13期109-111,117共4页
归纳总结当归补血汤促进血管新生作用的研究进展。当归补血汤可以通过多种途径影响与血管新生相关的基因表达;当归补血汤可提高缺血组织血清和组织液中的低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vas... 归纳总结当归补血汤促进血管新生作用的研究进展。当归补血汤可以通过多种途径影响与血管新生相关的基因表达;当归补血汤可提高缺血组织血清和组织液中的低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的浓度,进一步调节内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的功能,达到促进血管新生的效果。 展开更多
关键词 当归补血汤 血管内皮生长因子 血管内皮祖细胞 血管新生 研究进展
VEGF165质粒转染对骨髓内皮祖细胞增殖能力的影响
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作者 杨钰兴 肖明朝 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2019年第1期63-66,共4页
目的探讨脂质体介导pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染骨髓血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对EPCs增殖的影响。方法体外分离、培养EPCs、免疫组织化学及细胞流式仪鉴定EPCs,转染VEGF165后,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR... 目的探讨脂质体介导pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染骨髓血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)对EPCs增殖的影响。方法体外分离、培养EPCs、免疫组织化学及细胞流式仪鉴定EPCs,转染VEGF165后,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内皮祖细胞中VEGF165mRNA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测EPCs培养上清液中VEGF蛋白水平,噻唑蓝(MTT)检测VEGF165质粒转染后对EPCs的影响。结果EPCs表达CD34、CD133及KDR细胞表面标志,PCR后凝胶电泳显示pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染组在576bp处可见有明显条带,pcDNA3.1(+)空质粒转染组和未转染组可见微弱的电泳带。ELISA检测结果表明pcDNA3.1(+)/VEGF165质粒转染组VEGF165水平较其他两组高,MTT显示VEGF165质粒转染可促进EPCs增殖。结论EPCs可成功转染VEGF165基因,并促进EPCs增殖,为治疗勃起功能障碍提供实验依据。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 血管内皮生长因子 转染
黄连素对高血压前期病人内皮祖细胞内皮修复能力的影响 预览
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作者 苏晨 吴芳 +5 位作者 刘星 孙佳盼 张建宁 梁嘉文 陶军 张小宇 《中西医结合心脑血管病杂志》 2019年第21期3268-3272,共5页
目的探讨黄连素对高血压前期病人外周血内皮祖细胞(EPCs)内皮修复能力的影响及可能的机制。方法招募高血压前期病人10例,抽取外周血30 mL,分离培养EPCs。培养7 d后体外分别用不同浓度的黄连素(2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L)预处理EP... 目的探讨黄连素对高血压前期病人外周血内皮祖细胞(EPCs)内皮修复能力的影响及可能的机制。方法招募高血压前期病人10例,抽取外周血30 mL,分离培养EPCs。培养7 d后体外分别用不同浓度的黄连素(2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L)预处理EPCs,观察EPCs体外迁移、黏附功能。通过建立裸鼠颈动脉损伤模型,观察有无黄连素(5μmol/L)体外预处理对高血压前期病人EPCs在体再内皮化能力的影响。Western-Blot检测黄连素预处理对EPCs表面趋化因子4(CXCR4)蛋白表达情况。结果不同浓度的黄连素预处理可增加高血压前期病人外周血EPCs的体外迁移、黏附功能,以5μmol/L最为显著(P<0.05)。与对照组比较,5μmol/L的黄连素预处理显著增加高血压前期病人EPCs的在体再内皮化能力(P<0.05)。Western-Blot结果显示,不同浓度的黄连素处理增加EPCs表面的CXCR4蛋白表达,以5μmol/L最显著(P<0.05)。结论黄连素改善高血压前期病人EPCs的内皮修复能力,并可能与CXCR4有关。 展开更多
关键词 高血压前期 黄连素 内皮修复 内皮祖细胞 表面趋化因子4
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滤泡调节性T细胞促进修复糖尿病损伤颈动脉内皮的作用及机制研究
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作者 熊雯 初红霞 +2 位作者 张宪党 丁文宇 张海清 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期701-706,共6页
目的 探讨滤泡调节性T细胞(Tfr细胞)促进修复糖尿病损伤颈动脉内皮的作用及机制.方法 构建糖尿病小鼠模型,构建小鼠颈动脉铁丝损伤模型.分为对照组(Con)、糖尿病组(DM)和Tfr细胞组(Tfr).流式细胞学检测Tfr细胞比例,ELISA法检测上清中血... 目的 探讨滤泡调节性T细胞(Tfr细胞)促进修复糖尿病损伤颈动脉内皮的作用及机制.方法 构建糖尿病小鼠模型,构建小鼠颈动脉铁丝损伤模型.分为对照组(Con)、糖尿病组(DM)和Tfr细胞组(Tfr).流式细胞学检测Tfr细胞比例,ELISA法检测上清中血管内皮生长因子(VEGF)、白介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的浓度.HE染色和CD31免疫组织化学检测内皮化情况,流式细胞学检测外周血中内皮祖细胞(EPC)比例.结果 Con组外周血Tfr细胞的比例高于DM组(t=3.122,P=0.0108).Con组上清中VEGF、IL-10和TGF-β的浓度高于DM组(P<0.05或P<0.01).Tfr组移植48 h后,CD31阳性内皮化比例约为60%.Con组外周血EPC比例与DM及Tfr组比较(1.070%vs 0.288%vs 1.993%),差异有统计学意义(P<0.01).结论 糖尿病小鼠体内Tfr细胞数量和功能降低,Tfr细胞可通过诱导EPC动员,以促进糖尿病损伤颈动脉内皮的修复. 展开更多
关键词 滤泡调节性T细胞 糖尿病 内皮化 内皮祖细胞
调节性T细胞促进球囊损伤颈动脉内皮化的作用及机制
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作者 陈磊 杨勇 +1 位作者 孟祥云 秦立军 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期570-575,共6页
目的探讨调节性T细胞(Treg细胞)促进球囊损伤颈动脉内皮化的作用及机制。方法使用Treg细胞分选试剂盒分选大鼠脾脏Treg细胞;构建大鼠颈动脉损伤模型;模型制作成功后分为对照组(尾静脉注射相同体积的生理盐水)、血管内皮生长因子(VEGF)组... 目的探讨调节性T细胞(Treg细胞)促进球囊损伤颈动脉内皮化的作用及机制。方法使用Treg细胞分选试剂盒分选大鼠脾脏Treg细胞;构建大鼠颈动脉损伤模型;模型制作成功后分为对照组(尾静脉注射相同体积的生理盐水)、血管内皮生长因子(VEGF)组(尾静脉注射VEGF, 20μmol/kg)和Treg细胞组(尾静脉注射1×10~5个Treg细胞)。HE染色检测内皮化情况;ELISA和免疫组织化学法检测血清中白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;流式细胞术检测单核细胞、T细胞和内皮祖细胞(EPC)的比例。结果组织学染色结果显示,对照组未见内皮细胞层的形成,Treg细胞组可见较多内皮细胞覆盖在颈动脉内层;免疫组织化学结果显示,对照组与Treg细胞组IL-10、TGF-β、IL-1β和TNF-α蛋白表达差异均有统计学意义(t=8.252,P<0.01;t=3.254,P<0.05;t=6.237,P<0.01;t=7.529,P<0.01)。ELISA结果显示,对照组IL-10、TGF-β、IL-1β和TNF-α的含量分别为(17.38±2.595)μg/L、(4.750±1.549)μg/L、(11.65±1.908)μg/L和(1.163±0.3333)μg/L;Treg细胞组的含量分别为(58.43±6.060)μg/L、(14.17±2.250)μg/L、(1.550±0.3819)μg/L和(0.2100±0.06938)μg/L,差异有显著性(t=6.170,P<0.01;t=3.558,P<0.01;t=5.191,P<0.01;t=2.800,P<0.05);流式细胞术的结果显示,对照组CD34+VEGFR-2+EPC比例为(0.2838±0.01975)%,Treg细胞组为(0.5667±0.05993)%,差异有显著性(t=4.483,P<0.01);IL-10阻断组EPC比例为(0.4807±0.03067)%,相对于Treg细胞组,差异不具有统计学意义(t=1.278,P>0.05);TGF-β阻断组EPC比例为(0.3082±0.02291)%,相对于Treg细胞组,差异有显著性(t=4.029,P<0.01)。结论 Treg细胞通过诱导EPC动员,促进球囊损伤颈动脉的快速内皮化。 展开更多
关键词 调节性T细胞 内皮祖细胞 心脑血管疾病 内皮化 免疫组织化学 大鼠
三维联合培养牙髓细胞和血管内皮祖细胞促进成牙本质向/成骨向分化
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作者 陈婷 侯晋 +3 位作者 李心竹 宋词 张雪洋 吴补领 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第16期3028-3032,3054共6页
目的:探讨三维联合培养牙髓细胞(dental pulp cells, DPCs)和血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)对成牙本质向/成骨向分化的影响。方法:取单独培养DPCs及联合培养的DPCs和EPCs进行三维培养后成牙本质向/成骨向诱导,使... 目的:探讨三维联合培养牙髓细胞(dental pulp cells, DPCs)和血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)对成牙本质向/成骨向分化的影响。方法:取单独培养DPCs及联合培养的DPCs和EPCs进行三维培养后成牙本质向/成骨向诱导,使用茜素红染色及半定量分析、RT-PCR和细胞免疫荧光检测成牙本质向/成骨向分化能力。采用SPSS 23.0统计软件对数据进行统计学分析。结果:茜素红染色显示联合培养组和单独培养组之间未见显著差异。RT-PCR和细胞免疫荧光显示成牙本质向/成骨向相关基因m RNAs和蛋白表达水平联合培养组显著高于单独培养组。结论:三维联合培养的DPCs和EPCs促进成牙本质向/成骨向分化,为牙髓再生提供可能实验依据。 展开更多
关键词 牙髓细胞 血管内皮祖细胞 三维联合培养 成牙本质向/成骨向分化
赖氨酸特异性的去甲基化酶3A对内皮祖细胞功能的影响 预览
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作者 柳小佩 张博方 陈静 《中国心血管杂志》 2019年第4期352-357,共6页
目的探讨赖氨酸特异性的去甲基化酶3A(KDM3A)对内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、管形成能力及分泌促血管生成细胞因子功能的影响。方法从同基因型成年雄性SD大鼠的后肢长骨中分离出骨髓单核细胞,EGM-2培养基诱导形成EPCs,将EPCs按完全随机... 目的探讨赖氨酸特异性的去甲基化酶3A(KDM3A)对内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、管形成能力及分泌促血管生成细胞因子功能的影响。方法从同基因型成年雄性SD大鼠的后肢长骨中分离出骨髓单核细胞,EGM-2培养基诱导形成EPCs,将EPCs按完全随机设计的方法分为3组:空白组、Ad-GFP转染对照组和Ad-KDM3A转染处理组。分别用CCK-8、Transwell检测EPCs的增殖和迁移能力,基质胶检测EPCs的管形成能力。免疫印记法检测KDM3A蛋白的表达及EPCs分泌血管内皮生长因子(VEGF)和基质细胞衍生因子1(SDF-1)蛋白表达量,同时检测调控分泌机制相关的丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、p-Akt蛋白的表达。结果与Ad-GFP转染对照组比较,Ad-KDM3A转染处理组下调KDM3A的表达可显著增强EPCs的增殖能力(1.393±0.058比1.031±0.059)、迁移能力(1.89±0.12比1.21±0.11)和管形成功能(1.552±0.109比1.027±0.038),同时EPCs合成和分泌的促血管生成细胞因子VEGF(0.738±0.029比0.153±0.003)和SDF-1(0.333±0.013比0.163±0.005)增多。与Ad-GFP转染对照组比较,Ad-KDM3A转染处理组下调KDM3A可使Akt蛋白表达增加(0.553±0.005比0.169±0.001)。结论下调KDM3A蛋白的表达可增强EPCs的增殖、迁移、管形成能力及分泌促血管生成细胞因子的功能,这可能与增加Akt蛋白表达有关。 展开更多
关键词 赖氨酸特异性的去甲基化酶3A 内皮祖细胞 细胞增殖 细胞迁移 管形成
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活血化瘀中药促内皮祖细胞血管修复和新生研究进展 预览
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作者 黄明艳 刘超 王阶 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2019年第7期141-144,共4页
血管修复和血管新生是治疗心血管疾病的有效途径,内皮祖细胞在这一过程中起着关键作用。活血化瘀中药对心血管疾病有显著疗效,是目前中医学和中西医结合学科基础研究和临床试验的热点研究领域。本文通过综述活血化瘀中药单体、有效成分... 血管修复和血管新生是治疗心血管疾病的有效途径,内皮祖细胞在这一过程中起着关键作用。活血化瘀中药对心血管疾病有显著疗效,是目前中医学和中西医结合学科基础研究和临床试验的热点研究领域。本文通过综述活血化瘀中药单体、有效成分和复方对内皮祖细胞动员、增殖、迁移、分化、黏附及分泌细胞因子等功能的影响,探讨活血化瘀中药对血管修复和血管新生的作用机制,为其在心血管疾病方面的研究及应用提供参考。 展开更多
关键词 活血化瘀 内皮祖细胞 血管修复 血管新生 心血管疾病 综述
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黄精对衰老大鼠内皮祖细胞DNA损伤检测点ATM/ATR通路的影响
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作者 秦臻 韦正新 许键炜 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期529-534,共6页
目的观察黄精对衰老大鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)体外传代培养过程中细胞周期及DNA损伤检测点毛细血管共济失调突变基因(Ataxia-telangiectasia mutated gene,ATM)/ATM与Rad3相关蛋白激酶(ATM and Rad3-related k... 目的观察黄精对衰老大鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)体外传代培养过程中细胞周期及DNA损伤检测点毛细血管共济失调突变基因(Ataxia-telangiectasia mutated gene,ATM)/ATM与Rad3相关蛋白激酶(ATM and Rad3-related kinase,ATR)通路的影响。方法分离培养衰老大鼠骨髓EPCs并鉴定,将培养至第2代的EPCs分为4组,分别用黄精含药血清和空白对照血清继续培养至第4、6、8代,流式细胞仪检测细胞周期,RT-PCR和Western-Blot法检测细胞ATM、ATR、检测点激酶1(check point 1,Chk1)、检测点激酶2(check point 2,Chk2)mRNA及其蛋白的表达。结果 EPCs在体外传代培养过程中其细胞周期在G1期增多,在S期减少,细胞表达ATM、ATR、Chk1、Chk2 mRNA及蛋白水平显著升高(P <0.05),经黄精干预后,EPCs在传代培养中其细胞周期在G1期减少,在S期增多,细胞表达ATM、ATR、Chk1、Chk2 mRNA及蛋白显著降低(P <0.05)。结论黄精可通过抑制DNA损伤检测点ATM/ATR通路的活化来调节EPCs的细胞周期,干预EPCs的老化进程。 展开更多
关键词 黄精 内皮祖细胞 细胞衰老 细胞周期 DNA损伤检测点 毛细血管共济失调突变基因 ATM与Rad3相关蛋白激酶
瑞舒伐他汀减轻脂多糖诱导的人晚期内皮祖细胞损伤 预览
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作者 王美惠 毕徐堃 傅国胜 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第6期769-775,共7页
目的观察瑞舒伐他汀对脂多糖(LPS)诱导的人外周血晚期内皮祖细胞(LOCs)损伤的影响,探讨其可能的机制。方法密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞并培养获得LOCs。实验分为对照组、LPS诱导组以及不同浓度瑞舒伐他汀和LPS共处理组。用CC... 目的观察瑞舒伐他汀对脂多糖(LPS)诱导的人外周血晚期内皮祖细胞(LOCs)损伤的影响,探讨其可能的机制。方法密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞并培养获得LOCs。实验分为对照组、LPS诱导组以及不同浓度瑞舒伐他汀和LPS共处理组。用CCK-8法检测细胞活力;比色法检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)的含量及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性;流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;ELISA试剂盒检测细胞培养液中IL-6、IL-8水平;Westernblot检测Toll样受体4(TLR4)蛋白表达;转录因子活性检测试剂盒检测NFκBp65转录活性。结果瑞舒伐他汀能有效抑制LPS作用下LOCs活力损失(P<0.05),降低细胞培养液中MDA含量及LDH活性(P<0.05),增加SOD活性(P<0.05),抑制LPS引起的ROS水平增高(P<0.01),降低炎性因子IL-6、IL-8的表达水平(P<0.01),并显著抑制LPS诱导的TLR4蛋白表达(P<0.05)和NFκBp65的转录活性(P<0.01)。结论瑞舒伐他汀能提升LPS作用下LOCs的细胞活力,减少LPS诱导的ROS生成和氧化损伤,并减少炎性因子IL-6、IL-8的表达,其抗损伤机制可能与TLR4/NFκBp65信号通路有关。 展开更多
关键词 瑞舒伐他汀 内皮祖细胞 氧化应激 脂多糖
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内皮祖细胞外泌体中与血管生成相关的miRNAs生物信息学分析
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作者 熊武 孙安梦 +6 位作者 皇毅 全文娟 游凤姣 杨旭龙 兰宏伟 苏红辉 周建大 《中国医师杂志》 CAS 2019年第4期499-502,共4页
目的用生物信息学方法筛选内皮祖细胞(EPCs)外泌体miRNA用于调节血管生成的医学科学研究。方法从现有数据库中筛选人内皮祖细胞外泌体miRNAs,同时筛选与血管生成相关miRNAs,取两组miRNAs的交集,从而获得内皮祖细胞外泌体中与血管生成相... 目的用生物信息学方法筛选内皮祖细胞(EPCs)外泌体miRNA用于调节血管生成的医学科学研究。方法从现有数据库中筛选人内皮祖细胞外泌体miRNAs,同时筛选与血管生成相关miRNAs,取两组miRNAs的交集,从而获得内皮祖细胞外泌体中与血管生成相关的候选miRNAs分子。结果通过实验数据分析和文献筛选获得的内皮祖细胞外泌体miRNAs分别为160个和50个,与血管生成相关miRNAs分子约600个;分别取频次较高的前20个,最终获得9个在内皮祖细胞外泌体中可能高表达且与血管生成相关的miRNAs:miR-126、miR-21、miR-221、miR-92a、miR-199a、miR-210、miR-214、miR-155、miR-146a。结论基于数据分析和文献筛选的生物信息学可简单而可靠地筛选目标miRNA进行后续研究,有较高推广应用价值。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 外泌体 微RNAS 新生血管化 生理性 生物信息学
内皮祖细胞与急性缺血性卒中
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作者 吴勇强 任丽娜 郭庚 《国际脑血管病杂志》 2019年第4期303-308,共6页
内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是血管内皮细胞的前体细胞,参与多种生物学代谢过程。文章对EPCs在急性缺血性卒中中的作用进行了综述。
关键词 卒中 脑缺血 内皮祖细胞
内皮祖细胞经缓激肽预适应后移植对急性心肌梗死的治疗作用 预览
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作者 黄磊 任明明 +3 位作者 欧阳春 叶小强 吴永前 韩振 《交通医学》 2019年第4期343-347,共5页
目的:观察内皮祖细胞(EPCs)经缓激肽预适应后移植对急性心肌梗死的治疗作用。方法:(1)体外实验:分离培养人脐带血EPCs,分为EPCs组和缓激肽预适应EPCs组,比较两组细胞增殖、凋亡及细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的含量。(2)体... 目的:观察内皮祖细胞(EPCs)经缓激肽预适应后移植对急性心肌梗死的治疗作用。方法:(1)体外实验:分离培养人脐带血EPCs,分为EPCs组和缓激肽预适应EPCs组,比较两组细胞增殖、凋亡及细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的含量。(2)体内实验:取BALB/c nude雄性裸鼠32只,随机分为模型对照组、假手术组、单纯EPCs治疗组和缓激肽预适应EPCs治疗组,比较各组小鼠的心肌梗死面积和心肌新生血管密度。结果:(1)缓激肽预适应EPCs组的细胞增殖能力(A490为0.342±0.050)显著高于EPCs组(0.285±0.060),Hoechst阳性细胞比[(31.39±2.28)%]显著低于EPCs组[(35.23±2.65)%],细胞培养上清液中VEGF含量[(118.76±17.12)pg/mL]显著高于EPCs组[(102.38±15.27) pg/mL],差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)缓激肽预适应EPCs治疗组小鼠的心肌梗死面积[(25.17±2.42)%]显著低于单纯EPCs治疗组[(32.94±3.64)%],而心肌微血管密度(54.82±4.79)/HPF(400×)明显高于单纯EPCs组(42.75±3.45),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:缓激肽预处理能明显促进EPCs增殖,降低细胞凋亡,缓激肽预适应EPCs移植能明显减少小鼠心肌梗死面积并促进心肌血管的新生。 展开更多
关键词 心肌梗死 缓激肽 内皮祖细胞 预适应 治疗效果
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卵巢早衰患者血浆中miRNA-503的作用及对内皮祖细胞的影响 预览
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作者 仝慧杰 刘丽丽 +2 位作者 范志刚 李阳 冯晓娟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第17期2765-2769,2774共6页
目的探讨卵巢早衰患者血浆中微小RNA-503(miRNA-503)的作用及对内皮祖细胞(endo-thelial progenitor cells,EPCs)的影响。方法收集2016年1月至2018年12月我院收治的24例卵巢早衰患者作为卵巢早衰组,选择24例无卵巢早衰的健康女性作为对... 目的探讨卵巢早衰患者血浆中微小RNA-503(miRNA-503)的作用及对内皮祖细胞(endo-thelial progenitor cells,EPCs)的影响。方法收集2016年1月至2018年12月我院收治的24例卵巢早衰患者作为卵巢早衰组,选择24例无卵巢早衰的健康女性作为对照组。实时荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定血浆中miRNA-503含量;流式细胞术检测外周血中EPCs数量;彩色多普勒超声检测卵巢动脉血流动力学指标,包括收缩期峰值流速(PSV)、舒张末期流速(EDV)、阻力指数(RI)、搏动指数(PI)。细胞学实验分为4组:正常对照组(A组)、卵巢早衰组(B组)、miRNA-503 inhibitor NC组(C组)、miRNA-503 inhibi-tor组(D组)。转染72 h后,qRT-PCR测定miRNA-503表达;qRT-PCR和蛋白质免疫印迹测定胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF-1R)mRNA和蛋白质表达;比较细胞增殖和黏附能力。结果与对照组比较,卵巢早衰组血浆中miRNA-503含量升高,EPCs数量降低,两者呈负相关(P<0.05)。miRNA-503表达水平与PSV和EDV呈负相关,与RI和PI呈正相关(P<0.05)。miRNA-503表达水平B组、C组高于A组,且D组低于B、C组(P<0.05)。与A组比较,B、C、D组的IGF-1R mRNA和蛋白质表达、增殖和黏附水平均降低,且D组高于B、C组(P<0.05)。结论卵巢早衰患者血浆中miRNA-503高表达,与EPCs数量减少及卵巢动脉血流动力学减退相关。miRNA-503在卵巢早衰EPCs中高表达,miRNA-503 inhibitor转染后可增强EPCs增殖和黏附能力,可能与IGR-1R表达上调有关。 展开更多
关键词 卵巢早衰 miRNA-503 内皮祖细胞 血流动力学参数 胰岛素样生长因子1受体
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体育运动对冠心病患者内皮祖细胞血管内皮损伤修复能力的改善作用研究 预览
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作者 胡厚如 董兵 +3 位作者 何江 余冰波 张小宇 夏文豪 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2019年第2期72-78,共7页
目的探讨体育运动对冠心病(CHD)患者内皮祖细胞(EPCs)内皮损伤修复能力的影响及其可能的机制。方法选取广州中山大学第一附属医院收治的68 例符合冠心病临床诊断标准的受试者作为研究对象,随机分为对照组和实验组。实验组和对照组均进... 目的探讨体育运动对冠心病(CHD)患者内皮祖细胞(EPCs)内皮损伤修复能力的影响及其可能的机制。方法选取广州中山大学第一附属医院收治的68 例符合冠心病临床诊断标准的受试者作为研究对象,随机分为对照组和实验组。实验组和对照组均进行常规药物治疗,同时实验组参与3 个月踏车运动试验(每周3 次,30 min/次,MET 为4.5),对照组不进行运动干预。通过Boyden 改良小室法和观察荧光标记的EPCs(CM-DiI-EPCs)黏附到内皮细胞单层数量来分别检测EPCs 的迁移能力和黏附能力;利用裸鼠颈动脉内皮损伤模型,肱动脉血流介导的血管舒张功能(FMD)和肱-踝动脉脉搏波传导速度(PWV),分别研究EPCs 在体内皮损伤修复能力、血管内皮功能和动脉硬度。统计学采用单因素方差和Pearson 法相关性分析。结果 3 个月的体育锻炼后,实验组受试者外周血EPCs 体外的迁移(运动后:52.5±8.9;运动前:30.6±5.4;t = 3.767,P = 0.013)、黏附能力明显提高(运动后:48.2±7.6;运动前:30.5±4.8;t =4.311,P < 0.001),移植后裸鼠颈动脉内皮损伤在体的内皮化面积增大(运动后:55.2﹪±9.1﹪;运动前:35.9﹪± 4.9﹪;t = 5.315,P = 0.012);内皮功能FMD 改善(运动前:5.9﹪± 2.1﹪;运动后:8.1﹪± 2.6 ﹪;t = 3.253,P < 0.001);动脉弹性PWV 下降[运动前:( 1618±160.2)cm/s;运动后:( 1456±125)cm/s;t = 2.781,P = 0.014];Pearson 相关分析结果显示,升高的 FMD、下降的PWV 分别与增加的EPCs 再内皮化面积呈正相关,而对照组以上指标无明显改变。结论体育运动明显改善冠心病患者血管内皮功能,提高动脉弹性,部分机制可能与循环EPCs 介导的内皮损伤修复能力增强相关。 展开更多
关键词 冠心病 内皮祖细胞 损伤修复 血管功能 体育运动
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