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口蹄疫病毒A-O型多表位二价融合抗原的构建及其在小鼠模型中的免疫学功能
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作者 雷垚 邵军军 +2 位作者 赵付荣 常惠芸 张永光 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期135-143,共9页
为了研制广谱高效的新型口蹄疫病毒(FMDV) A-O型重组多表位二价疫苗,以结核分支杆菌热休克蛋白70(mHSP70)的C端肽结合区作为多表位免疫原的载体蛋白,将A型和O型FMDV代表性毒株VP1上的B细胞表位以及非结构蛋白3A上的T细胞表位基因进行串... 为了研制广谱高效的新型口蹄疫病毒(FMDV) A-O型重组多表位二价疫苗,以结核分支杆菌热休克蛋白70(mHSP70)的C端肽结合区作为多表位免疫原的载体蛋白,将A型和O型FMDV代表性毒株VP1上的B细胞表位以及非结构蛋白3A上的T细胞表位基因进行串联合成后与mHSP70的肽结合区编码基因相连接,构建重组质粒pAO-HSP,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。重组蛋白经过纯化和鉴定后免疫BALB/c小鼠,检测相应的体液免疫应答和细胞免疫应答。结果显示:重组蛋白pAO-HSP在BL21(DE3)中能够以可溶性形式表达,纯化后经Western blot检测能够与感染了A型和O型FMDV猪的阳性血清发生特异性反应,并能够刺激小鼠产生抗A-O型FMDV特异性抗体。免疫后小鼠的脾淋巴细胞在A型、O型灭活FMDV刺激后,均出现显著的增殖现象,同时可以产生相关的Th1或Th2型细胞因子。本研究成功构建重组抗原pAO-HSP,并在小鼠模型中初步显示出了良好的免疫效果,为新型FMDV A-O型多表位二价疫苗的研发奠定基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 表位疫苗 mHSP70 载体蛋白 小鼠模型
病毒样颗粒作为口蹄疫病毒抗原表位载体的研究进展 预览
2
作者 李茜 代军飞 +5 位作者 王俊 丁耀忠 马炳 刘永生 张永光 张杰 《江西农业学报》 CAS 2019年第6期95-101,共7页
病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)不含有病毒核酸,不具有自我复制的能力,但拥有与完整病毒粒子相似的空间结构和免疫原性,可以作为口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)抗原表位的载体,将其展示在它的表面。主要介绍了... 病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)不含有病毒核酸,不具有自我复制的能力,但拥有与完整病毒粒子相似的空间结构和免疫原性,可以作为口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)抗原表位的载体,将其展示在它的表面。主要介绍了作为FMDV抗原表位的VLPs载体:FMDV-VLPs、HBc-VLPs、PCV2-VLPs和PPV-VLPs,并阐述了VLPs在几种表达系统中的组装现状,以期为今后有关FMD的VLPs研究提供参考。 展开更多
关键词 病毒样颗粒 口蹄疫病毒 抗原表位 疫苗
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MPLA对口蹄疫O型灭活疫苗的免疫增强效应 预览
3
作者 赵波 房永祥 +4 位作者 贾怀杰 陈国华 何小兵 杨孝朴 景志忠 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1-9,共9页
【目的】探讨单磷酰脂质A(monophosphoryl lipid A,MPLA)对口蹄疫(food and mouth disease,FMD)O型灭活疫苗的免疫增强效应,提高口蹄疫灭活疫苗的免疫效果.【方法】通过检测MPLA刺激脾脏细胞的增殖情况和刺激DC后成熟及吞噬能力的大小,... 【目的】探讨单磷酰脂质A(monophosphoryl lipid A,MPLA)对口蹄疫(food and mouth disease,FMD)O型灭活疫苗的免疫增强效应,提高口蹄疫灭活疫苗的免疫效果.【方法】通过检测MPLA刺激脾脏细胞的增殖情况和刺激DC后成熟及吞噬能力的大小,对MPLA的体外免疫刺激效应进行评价;将MPLA与ISA 206和灭活FMDVO型抗原配制疫苗后免疫小鼠,通过检测抗体水平、T细胞亚群、抗原特异性淋巴细胞增殖及浆细胞的比例,评价MPLA对口蹄疫O型灭活疫苗的免疫增强作用.【结果】MPLA体外可刺激B淋巴细胞增殖,上调DC表面共刺激分子的表达,使其吞噬能力减弱;制备疫苗免疫小鼠,血清抗体水平检测发现,MPLA组在7、14 d时抗体水平显著高于ISA 206组,且其抗原特异性的B淋巴细胞增殖,外周血中CD19+CD27+CD38+浆细胞的比例也显著高于ISA 206组.【结论】MPLA通过促进B淋巴细胞的增殖与活化增加了抗体的产生,增强了小鼠对口蹄疫疫苗的免疫应答能力,证实MPLA是口蹄疫疫苗的良好候选免疫佐剂. 展开更多
关键词 MPLA 口蹄疫 免疫 疫苗佐剂
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三种大肠杆菌表达的口蹄疫病毒A型多表位蛋白对猪的免疫原性比较
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作者 曹轶梅 王兴凯 +5 位作者 王省 李坤 付元芳 李冬 卢曾军 刘在新 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期711-718,共8页
【目的】研制猪口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)A型多表位蛋白疫苗,为猪FMDV A型的防控提供安全有效的疫苗。【方法】根据前期试验结果及国内外FMDVA型流行病学信息,设计并合成了3种多表位免疫原基因A10、IA10和FA10。... 【目的】研制猪口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)A型多表位蛋白疫苗,为猪FMDV A型的防控提供安全有效的疫苗。【方法】根据前期试验结果及国内外FMDVA型流行病学信息,设计并合成了3种多表位免疫原基因A10、IA10和FA10。在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白纯化复性后,制苗免疫猪。分别于免疫前和免疫后14和28d采血分离血清,用液相阻断ELISA(LPB-ELISA)方法检测血清IgG抗体滴度。免疫28d后用FMDV强毒攻毒,以评估免疫保护效果。【结果】SDS-PAGE和Western blotting结果证实A10、IA10和FA10三种蛋白均获得表达,分子量分别为35、57和64 kDa,与预测蛋白大小一致,且能被FMDV感染阳性血清所识别。LPB-ELISA结果表明,A10+201免疫组IgG滴度低于灭活疫苗组,但高于其他免疫组。攻毒后A10+201免疫组和灭活疫苗免疫组全部猪(5/5)获得保护,IA10+201和FA10+201免疫组80%(4/5)猪保护,A10和FA10免疫组只有20%(1/5)猪保护,而PBS+201组所有猪均未保护。【结论】A10+201免疫保护效果较好,可作为候选疫苗进行进一步评价。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 A型 多表位蛋白疫苗
塞内卡病毒和口蹄疫病毒二重实时荧光RT-PCR鉴别检测方法的建立
5
作者 谢彩华 闫若潜 +9 位作者 班付国 王东方 赵雪丽 赵兴绪 闫志玲 王翠 刘影 王淑娟 马震原 王华俊 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2298-2304,共7页
为了建立一种快速、敏感、特异的能够鉴别诊断口蹄疫病毒(FMDV)和塞内卡病毒(SVV)二重实时荧光RTPCR方法,根据FMDV及SVV的保守基因序列,设计了2套特异性引物和不同荧光素标记的MGB探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了F... 为了建立一种快速、敏感、特异的能够鉴别诊断口蹄疫病毒(FMDV)和塞内卡病毒(SVV)二重实时荧光RTPCR方法,根据FMDV及SVV的保守基因序列,设计了2套特异性引物和不同荧光素标记的MGB探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了FMDV和SVV二重实时荧光RT-PCR检测方法,并对二重实时荧光RT-PCR检测方法进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对98份疑似FMDV和SVV感染的临床样品进行了检测。结果显示,成功建立的FMDV及SVV二重实时荧光RT-PCR检测方法,模板在101~107拷贝/μL有很好的线性关系;对pGEM-T/FMDV和pGEM-T/SVV重组质粒出现阳性扩增信号,但对正常细胞培养物对照和其他7种病原对照未扩增出特异性曲线,方法特异性较好;最低检测模板浓度为10拷贝/μL;自98份疑似FMDV和SVV感染样品中检出9份FMDV阳性,10份SVV阳性,2份FMDV和SVV双阳性,并且和克隆测序结果一致。本研究建立的FMDV及SVV二重实时荧光RT-PCR检测方法,可用于FMDV和SVV的快速鉴别检测,为FMDV和SVV的鉴别诊断提供特异、敏感和高通量的方法。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 塞内卡病毒 二重实时荧光RT-PCR
兔抗O型口蹄疫VLPs酶标抗体的制备及初步应用 预览
6
作者 贺佳慧 白满元 +3 位作者 郭慧琛 孙世琪 张小丽 马小军 《动物医学进展》 北大核心 2019年第1期20-24,共5页
为制备兔抗O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的酶标抗体,进一步建立O型口蹄疫病毒的ELISA检测方法,通过原核表达、体外纯化和组装O型口蹄疫VLPs,免疫家兔制备兔抗O型口蹄疫VLPs 高免血清,并采用亲和层析法纯化IgG,改良过碘酸钠法制备兔抗O型... 为制备兔抗O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的酶标抗体,进一步建立O型口蹄疫病毒的ELISA检测方法,通过原核表达、体外纯化和组装O型口蹄疫VLPs,免疫家兔制备兔抗O型口蹄疫VLPs 高免血清,并采用亲和层析法纯化IgG,改良过碘酸钠法制备兔抗O型口蹄疫VLPs的酶标抗体(rabbit anti-type O foot-and-mouth disease IgG-HRP)。结果显示,兔抗O型口蹄疫VLPs 高免血清效价达1∶4 096,纯化后的IgG纯度达90%,效价达1∶512 000。表明获得了高纯度的兔抗O型口蹄疫VLP的酶标抗体,可用于O型口蹄疫的ELISA检测。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 病毒样颗粒 IgG纯化 酶标抗体
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口蹄疫疫苗最新研究进展 预览 被引量:1
7
作者 何随彬 金盈宇 +4 位作者 龚志亮 金耀忠 姜法铭 曹杰 叶承荣 《上海畜牧兽医通讯》 2019年第2期30-32,35共4页
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物疫病,可感染猪、牛、羊等多种主要家畜,造成巨大经济损失,引发严重的负面社会影响。世界动物卫生组织将其列在A类动物疫病名单之首,我国政府将其排... 口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性和可快速远距离传播的动物疫病,可感染猪、牛、羊等多种主要家畜,造成巨大经济损失,引发严重的负面社会影响。世界动物卫生组织将其列在A类动物疫病名单之首,我国政府将其排在一类动物传染病首位,这充分显示了国内外对该病的重视程度。预防和控制牲畜口蹄疫是各级政府所面临的紧迫而严峻的课题,目前疫苗免疫仍是预防该病的主要措施之一。本文通过对国内外口蹄疫疫苗的研究情况进行归纳总结,为今后口蹄疫新型疫苗的设计开发提供新的思路和参考。 展开更多
关键词 口蹄疫 FMD FMDV 新型疫苗
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Insertion site of FLAG on foot-and-mouth disease virus VP1 G-H loop affects immunogenicity of FLAG 预览
8
作者 ZHU Yuan-yuan ZOU Xing-qi +5 位作者 BAO Hui-fang SUN PU MA Xue-qing LIU Zai-xin FAN Hong-jie ZHAO Qi-zu 《农业科学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第7期1655-1666,共12页
关键词 病毒 旗帜 地点 疾病 VP1 FMDV 循环 BALB/C
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TPL2促进口蹄疫病毒在BHK-21细胞复制 预览
9
作者 魏南南 徐守兴 +4 位作者 史喜娟 卢炳州 张克山 郑海学 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1204-1211,共8页
为研究肿瘤进行性位点2(TPL2)在仓鼠肾细胞(BHK-21)中对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响,使用FMDV感染BHK-21细胞,通过qRT-PCR技术检测FMDV感染对内源性TPL2转录水平的影响;根据GenBank公布的TPL2基因序列(NM007746.2)设计构建TPL2... 为研究肿瘤进行性位点2(TPL2)在仓鼠肾细胞(BHK-21)中对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响,使用FMDV感染BHK-21细胞,通过qRT-PCR技术检测FMDV感染对内源性TPL2转录水平的影响;根据GenBank公布的TPL2基因序列(NM007746.2)设计构建TPL2的真核表达质粒以及设计并合成宿主TPL2的RNAi序列,利用脂质体方法转染BHK-21细胞,通过qRT-PCR和Western blotting技术分析TPL2在BHK-21细胞过表达和干扰对FMDV复制的影响。结果表明,FMDV感染BHK-21细胞后,TPL2转录水平显著上调;过表达TPL2能够促进FMDV在BHK-21细胞中复制,而下调表达内源性TPL2后FMDV的复制受到抑制,表明TPL2促进FMDV在BHK-21细胞中进行复制,本结果进一步拓展了我们对FMDV与天然免疫机制之间关系的认识,同时为TPL2的相关研究积累了科学资料。 展开更多
关键词 TPL2 口蹄疫病毒 FMDV BHK-21细胞 天然免疫 复制
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非致病大肠杆菌鞭毛与O型FMDV结构蛋白VP1嵌合体的免疫效力评估
10
作者 葛东红 孙小涵 +3 位作者 郭芸芸 张碧成 王警 张雪寒 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第12期96-99,共4页
为探讨以非致病性大肠杆菌鞭毛蛋白为载体展示口蹄疫病毒(FMDV) VP1蛋白嵌合体(Fn-VP1-Fc)的免疫效力为目的,筛选2月龄FMDV阴性仔猪,颈部肌肉注射,分别于免疫前、免疫后第14、28和60天采集血清,用液相阻断ELISA (LPB-ELISA)测定IgG滴度... 为探讨以非致病性大肠杆菌鞭毛蛋白为载体展示口蹄疫病毒(FMDV) VP1蛋白嵌合体(Fn-VP1-Fc)的免疫效力为目的,筛选2月龄FMDV阴性仔猪,颈部肌肉注射,分别于免疫前、免疫后第14、28和60天采集血清,用液相阻断ELISA (LPB-ELISA)测定IgG滴度。分别于免疫前和免疫后第28天,采集鼻腔拭子和肛拭子,间接ELISA测定IgA滴度。结果显示,疫苗接种第14天,免疫Fn-VP1-Fc疫苗产生了可以检测到的FMDV特异性抗体;第28和60天,FMDV特异性抗体持续升高;第60天,产生了可以检测到的特异性IgA,部分猪只滴度可达1∶160,而对照疫苗未检测到IgA。结果表明,Fn-VP1-Fc嵌合免疫原不仅能促进FMDV全身特异性抗体产生,也在一定程度上促进局部IgA分泌。 展开更多
关键词 大肠杆菌鞭毛 口蹄疫病毒 VP1 免疫原性
A/O型FMDV多抗原表位融合基因植物表达载体构建及转化柱花草的研究 预览
11
作者 肖旭倩 胡正龙 +3 位作者 沈文涛 言普 王冬梅 周鹏 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1565-1570,共6页
【目的】获得含有A/O型FMDV多抗原表位融合基因4种不同组合的转基因柱花草植株。【方法】用限制性内切酶XbaI和SacI双酶切4个中间载体和质粒pBI121,回收连接后获得4个重组植物表达载体(pBI-xsB/xsT/xsBT/xsBTT)及相应农杆菌工程菌株,利... 【目的】获得含有A/O型FMDV多抗原表位融合基因4种不同组合的转基因柱花草植株。【方法】用限制性内切酶XbaI和SacI双酶切4个中间载体和质粒pBI121,回收连接后获得4个重组植物表达载体(pBI-xsB/xsT/xsBT/xsBTT)及相应农杆菌工程菌株,利用农杆菌介导法转化热研2号柱花草(Stylosanthe sguianensis cv.ReyanⅡ)子叶叶盘。采用卡那霉素筛选,特异引物和转基因检测引物进行PCR及RT-PCR检测不同组合多抗原表位融合基因的转录情况。【结果】获得36株抗性转化株,经PCR检测有16株为阳性,RT-PCR检测后有11株为阳性,表明4种组合多抗原表位融合基因在转基因植株中获得转录。【结论】此研究为进一步揭示同型与异型FMDV之间多抗原表位基因不同融合方式的免疫原性和免疫效果奠定了研究基础。 展开更多
关键词 蹄疫病毒 多抗原表位融合基因 农杆菌介导法 柱花草 遗传转化
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口蹄疫病毒细胞培养技术研究进展 预览 被引量:5
12
作者 李顺琴 杨君敬 +1 位作者 何诚 王贺民 《动物医学进展》 北大核心 2018年第1期90-94,共5页
口蹄疫病毒可以在原代细胞和传代细胞上增殖,传统培养采用贴壁培养方式,随着微载体技术、无血清培养基研制和悬浮培养技术的发展,无血清培养法和生物反应器自动化设施提高了口蹄疫病毒含量,降低了生产成本,但直接影响了动物免疫保护效... 口蹄疫病毒可以在原代细胞和传代细胞上增殖,传统培养采用贴壁培养方式,随着微载体技术、无血清培养基研制和悬浮培养技术的发展,无血清培养法和生物反应器自动化设施提高了口蹄疫病毒含量,降低了生产成本,但直接影响了动物免疫保护效力。随着基因编辑技术的发展,病毒种子毒、细胞株和细胞微环境研究突飞猛进,这为口蹄疫疫苗制备提供了新的技术支撑。论文介绍了口蹄疫病毒在原代细胞、传代细胞的增殖方式和营养特点,以及贴壁培养和悬浮培养的优缺点,为口蹄疫疫苗的研发和生产提供技术参考。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 原代细胞 传代细胞 贴壁培养 悬浮培养
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常规PCR法扩增口蹄疫病毒基因组5’端序列的探索 预览
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作者 朱研 苗书魁 +6 位作者 马文戈 李金娜 魏玉荣 汪萍 魏婕 米晓云 黄炯 《新疆农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第3期572-580,共9页
【目的】扩增口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)基因组5’端序列,为获得基因组全长准备基础。【方法】将FMDV O/Akesu/58 CE39A株液氮冻存基因组RNA反转录三次,对cDNA的5’端序列进行扩增、克隆、测序。【结果】以cDNA1与c... 【目的】扩增口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)基因组5’端序列,为获得基因组全长准备基础。【方法】将FMDV O/Akesu/58 CE39A株液氮冻存基因组RNA反转录三次,对cDNA的5’端序列进行扩增、克隆、测序。【结果】以cDNA1与cDNA3为模板,用LA Taq DNA polymerase、EX Taq DNA polymerase、PrimeSTAR HS DNA polymerase及3对引物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均未扩增出5’端目的片段;以cDNA2为模板,用LA Taq DNA polymerase为扩增酶,两对引物Ⅰ、Ⅱ均能扩增出5’端目的片段,且所测得的序列长度787 bp、797 bp与参考序列核苷酸同源性分别为86.2%和86.3%。【结论】常规PCR法扩增5’端序列较其它技术具有价格便宜、操作简便等优点,但扩增成功率偏低。试验共进行了72次PCR,成功率为6/72,说明FMDV 5’端序列的扩增难度大,应合理设计反转录引物和扩增引物。为许多RNA病毒反向遗传学研究提供了更多的选择。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 常规PCR 5’端序列 基因扩增
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口蹄疫病毒通用型和A型二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立 预览
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作者 谢彩华 班付国 +7 位作者 闫若潜 王东方 张煜 刘梅芬 赵雪丽 马震原 王华俊 王淑娟 《中国动物检疫》 CAS 2018年第12期70-74,共5页
为建立一种快速、敏感、特异的口蹄疫病毒(Foot-and-mouthdiseasevirus,FMDV)分型鉴别诊断实时荧光RT-PCR(Fluorescence quantitative,FQ-PCR)检测方法,根据O、A、AsiaⅠ三种血清型FMDV保守基因序列,设计能够检测到FMDV的特异性通用检... 为建立一种快速、敏感、特异的口蹄疫病毒(Foot-and-mouthdiseasevirus,FMDV)分型鉴别诊断实时荧光RT-PCR(Fluorescence quantitative,FQ-PCR)检测方法,根据O、A、AsiaⅠ三种血清型FMDV保守基因序列,设计能够检测到FMDV的特异性通用检测引物和A型检测引物,以及不同荧光素标记的MGB探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立了FMDV通用型和A型二重实时荧光RT-PCR检测方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法,对123份疑似FMDV感染的临床样品进行了检测。结果显示,建立的FMDV通用型、A型二重实时荧光RT-PCR检测方法在101~107拷贝/μL模板范围内有很好的线性关系;对pGEM-T/FMDV-T和pGEM-T/FMDV-A重组质粒出现阳性扩增信号,但对正常细胞培养物对照和其他7种病原对照未扩增出特异性曲线;自123份疑似FMDV感染样品中,检出10份FMDV-T阳性,6份FMDV-T/FMDV-A双阳性并且与基因测序结果一致。结果表明,本研究建立的FMDV通用型、A型二重实时荧光RT-PCR检测方法重复性好、敏感性高、特异性强,最低检测模板浓度为10拷贝/μL,可用于FMDV的快速分型检测,为FMDV的早期检测及临床诊断提供了新方法。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 二重实时荧光RT-PCR 检测方法
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新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖对口蹄疫疫苗免疫小鼠的佐剂效应 预览 被引量:4
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作者 巴雪丽 张爱莲 +3 位作者 黄炯 曹辉 赵兵 王丹阳 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1535-1542,共8页
探讨新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖(wild Cistanche deserticola Y.C.Ma crude polysaccharides,WCDCP)对口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)疫苗免疫小鼠的佐剂效应及安全性。用不同剂量的WCDCP分别配伍FMDV灭活抗原及FMD疫苗,皮... 探讨新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖(wild Cistanche deserticola Y.C.Ma crude polysaccharides,WCDCP)对口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)疫苗免疫小鼠的佐剂效应及安全性。用不同剂量的WCDCP分别配伍FMDV灭活抗原及FMD疫苗,皮下注射ICR小鼠,免疫两次。ELISA法检测血清中IgG、IgG1及IgG2a抗体水平;流式细胞术检测淋巴结中CD4+CD44+和CD8+CD44+ T细胞表达情况。结果表明,中、高2个剂量的WCDCP均能显著增强FMDV灭活抗原特异性IgG的抗体水平(P〈0.01);中剂量的WCDCP显著增强了FMD疫苗特异性IgG及其IgG1、IgG2a抗体水平(P〈0.05),而且具有长效性;WCDCP中剂量可以显著提高淋巴结中CD4+CD44+和CD8+CD44+ T细胞的表达水平(P〈0.05);WCDCP对小鼠的生长没有影响。总之,WCDCP可以长期增强FMD疫苗特异性抗体水平,显著增强T细胞免疫反应,对小鼠的生长无副作用。因此,WCDCP可以作为FMD疫苗的一种安全候选佐剂。 展开更多
关键词 新疆野生荒漠肉苁蓉 粗多糖 FMDV T细胞
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三种感染动物阳性血清与口蹄疫病毒重组非结构蛋白的反应原性 预览
16
作者 孙学强 邵卫星 +5 位作者 张如民 南文龙 张兴进 宫枫举 张秀娟 刘爽 《中国动物检疫》 CAS 2017年第7期92-95,107共5页
本试验通过生物信息学技术比对分析GenBank中口蹄疫病毒(A型、O型和亚洲1型)非结构蛋白的保守序列,根据大肠杆菌密码子偏好性,优化合成了非结构蛋白基因,经过测序和转化,筛选到能够表达重组非结构蛋白的阳性重组菌株。经过Western... 本试验通过生物信息学技术比对分析GenBank中口蹄疫病毒(A型、O型和亚洲1型)非结构蛋白的保守序列,根据大肠杆菌密码子偏好性,优化合成了非结构蛋白基因,经过测序和转化,筛选到能够表达重组非结构蛋白的阳性重组菌株。经过Western-blot试验,证明表达的重组非结构蛋白能分别与口蹄疫病毒感染的牛、羊和猪阳性血清发生特异性反应。该重组蛋白待进一步验证后,可用于口蹄疫病毒感染动物的鉴别检测试剂盒研究。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 感染血清 重组非结构蛋白 反应原性
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FMDV细胞表面受体研究概述 预览
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作者 王燕琴 朱建勇 智宇 《现代农业》 2017年第12期88-91,共4页
FMDV通过不同途径进入细胞,这个过程从病毒附着在细胞表面的受体开始。FMDV进入细胞的主要途径是通过网格蛋白介导的内吞途径结合整合素;在酸化的内吞囊泡内囊泡中病毒衣壳迅速分解,使产生的病毒RNA基因组释放。FMDV还可以使用硫酸乙酰... FMDV通过不同途径进入细胞,这个过程从病毒附着在细胞表面的受体开始。FMDV进入细胞的主要途径是通过网格蛋白介导的内吞途径结合整合素;在酸化的内吞囊泡内囊泡中病毒衣壳迅速分解,使产生的病毒RNA基因组释放。FMDV还可以使用硫酸乙酰肝素进入细胞。病毒通过细胞膜穴样内陷介导的内吞途径进入细胞。一旦病毒进入胞内体,胞内体中的低pH值将引起病毒基因组的脱衣壳,随后穿过胞内体膜进入细胞质。已经有许多整合素被确认为是FMDV的受体。本文将主要综述近年来FMDV受体的研究进展,并阐明这些受体在感染中的作用。 展开更多
关键词 FMDV 整合素 病毒复制
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非致病性大肠杆菌鞭毛蛋白对O型口蹄疫病毒的佐剂效果 预览 被引量:3
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作者 孙小涵 张碧成 +2 位作者 张强 何孔旺 张雪寒 《中国农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第9期1714-1722,共9页
【目的】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)的传染性强,传播广,给世界经济和社会发展带来巨大危害,目前疫苗接种仍是主要而有效的防控手段。以增强口蹄疫疫苗免疫效力为目的,基于国内外对鞭毛蛋白佐剂的深入了解与研究,对非致病性... 【目的】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)的传染性强,传播广,给世界经济和社会发展带来巨大危害,目前疫苗接种仍是主要而有效的防控手段。以增强口蹄疫疫苗免疫效力为目的,基于国内外对鞭毛蛋白佐剂的深入了解与研究,对非致病性大肠杆菌鞭毛进行修饰,研究鞭毛蛋白(flagellin,F)以及有无LTMT佐剂不同重组鞭毛蛋白对口蹄疫病毒(foot and mouth disease virse,FMDV)的佐剂作用。【方法】通过体外表达获得pCold-F0、pCold-F0-LTMT、pCold-F0NC、pCold-F0NC-LTMT 4种不同重组鞭毛蛋白,用间接ELISA方法检测pCold-F0-LTMT和pCold-F0NC-LTMT蛋白的生物学活性,按照5μg/只小鼠蛋白量与FMDV灭活抗原混合制备疫苗,同时设置添加或者不添加ISA 206佐剂组,皮下接种Balb/c小鼠,共免疫2次,每次间隔2周。分别于免疫前和免疫后14、21、28、35和45 d采血并采集小鼠粪便,45 d后取小肠后段,采用阻断ELISA方法检测血清IgG抗体滴度,用间接ELISA方法检测小鼠粪便和肠洗液中特异的分泌性IgA(secretory IgA,SIgA)抗体滴度,以评估免疫效力。【结果】SDS-PAGE和Western blot分析表明,4种不同重组鞭毛蛋白成功表达。并用GM l-ELISA方法验证了pCold-F0-LTMT和pCold-F0NC-LTMT的生物学活性,融合蛋白F0-LTMT和F0NC-LTMT保留了与GM l结合能力。动物试验结果表明,疫苗经皮下注射接种后,单独口蹄疫抗原组没有产生明显的抗体水平,而鞭毛蛋白佐剂组比单独的口蹄疫抗原组,IgG滴度高,并且产生sIgA抗体滴度更早、更高。此外,LTMT与鞭毛蛋白协同作用能刺激小鼠机体产生更高的IgG和sIgA。在试验中,当鞭毛蛋白与ISA 206佐剂联合使用时,血清中IgG滴度大幅增高,且抗体持续期延长。口蹄疫抗原与ISA 206佐剂和F0NC-LTMT混合使用效果最佳,显示对FMDV的最好保护。【结论】数据表明,黏膜佐剂F0-LTMT发挥双重佐剂活性,皮下注射可显著提高FMDV全身特异性IgG� 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 非致病性大肠杆菌 鞭毛蛋白 佐剂
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浅谈口蹄疫的流行特征及防治措施 预览 被引量:1
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作者 吴新权 周建东 +1 位作者 季晶晶 张泉 《山东畜牧兽医》 2017年第5期19-21,共3页
口蹄疫(foot-and-mouthdisease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-andmouthdisease Virus,FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触传染性并可快速远距离传播的动物疫病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病,我国规定为一类动... 口蹄疫(foot-and-mouthdisease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-andmouthdisease Virus,FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触传染性并可快速远距离传播的动物疫病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病,我国规定为一类动物疫病。其主要感染偶蹄兽,患病动物的口、舌、唇、蹄、乳房等部位发生水疱,破溃形成烂斑。中国口蹄疫疫情流行呈现非季节性,有多个毒株共同流行。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 一类动物疫病 偶蹄兽 患病动物 接触传染性 FMDV 烂斑 口蹄疫疫苗 母源抗体 猪口蹄疫
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不同血清型的口蹄疫病毒的特征 预览 被引量:1
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作者 王乐 《吉林畜牧兽医》 2017年第2期45-46,共2页
不同血清型的口蹄疫病毒的整个基因组的核苷酸序列平均有86%的同源性,但VP1编码区变异性最大,只有约5096~70%的同源性。血清型O、A、C和亚洲1型口蹄疫病毒在VP1编码序列上的变异性更大,同源性最高只能达到15%。因此,0型口蹄疫... 不同血清型的口蹄疫病毒的整个基因组的核苷酸序列平均有86%的同源性,但VP1编码区变异性最大,只有约5096~70%的同源性。血清型O、A、C和亚洲1型口蹄疫病毒在VP1编码序列上的变异性更大,同源性最高只能达到15%。因此,0型口蹄疫病毒以VP1编码序列的不同为基础,将世界各地的FMDV分为八个,在基因和地理上不同的基因型称为拓扑型。这八型分别是中东、 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 血清型 特征 编码序列 核苷酸序列 同源性 VP1 FMDV
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