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转基因玉米品系GA21拷贝数百分含量与质量百分含量关系研究 被引量:2
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作者 潘广 程颖慧 +4 位作者 黄新 章桂明 向才玉 陈枝楠 凌杏园 《植物检疫》 北大核心 2016年第6期49-54,共6页
转基因成分含量一般以质量百分含量表示,而转基因成分定量检测只能检测内、外源基因的拷贝数,并以外源和内源基因拷贝数百分比值表示其含量。由于玉米、大米等种子含有三倍体的胚乳,导致样品中转基因成分质量百分含量并不等于其拷贝数... 转基因成分含量一般以质量百分含量表示,而转基因成分定量检测只能检测内、外源基因的拷贝数,并以外源和内源基因拷贝数百分比值表示其含量。由于玉米、大米等种子含有三倍体的胚乳,导致样品中转基因成分质量百分含量并不等于其拷贝数百分比值。为深入探究两者之间的关系,本文首先建立了转基因玉米品系GA21二重数字PCR检测方法,并在此基础上,测定了品系GA21 5种不同质量百分含量标准参考物质的外源和内源基因拷贝数百分比。结果表明,该品系不同质量百分含量与其拷贝数百分比值存在线性相关,线性方程为:y=0.2464x+0.1458,两者相关系数达0.9951。本研究提供了一种可将样品拷贝数百分比值直接转化为质量百分含量的新方法,该方法适用于玉米、大米等含胚乳种子及其产品转基因质量百分含量的检测。 展开更多
关键词 二重数字PCR 转基因玉米 质量百分含量 拷贝数比值 定量检测
转Bt-pta-bar基因玉米侧翼序列分析及特异性检测方法研究 被引量:1
2
作者 董立明 于维 +2 位作者 李葱葱 张明 李飞武 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期30-34,共5页
采用染色体步移技术(Genome Walking)分离转Bt-pta-bar基因玉米JL937的插入位点侧翼序列,获得了615 bp的5’端边界序列。据此序列设计特异性引物,建立了JL937玉米的特异性定性PCR检测方法,可特异性地从JL937玉米中扩增出221 bp的产物... 采用染色体步移技术(Genome Walking)分离转Bt-pta-bar基因玉米JL937的插入位点侧翼序列,获得了615 bp的5’端边界序列。据此序列设计特异性引物,建立了JL937玉米的特异性定性PCR检测方法,可特异性地从JL937玉米中扩增出221 bp的产物。此方法具有特异性强、稳定性好的特点,适用于JL937玉米的定性检测。 展开更多
关键词 转基因玉米 染色体步移技术 侧翼序列 定性PCR
转基因玉米Mir162品系的实时PCR及可视芯片检测方法研究 被引量:4
3
作者 邓婷婷 黄文胜 +2 位作者 吴亚君 韩建勋 陈颖 《植物检疫》 北大核心 2012年第5期14-18,共5页
本研究以转基因玉米品系Mir162的性状基因vip3a为靶标,建立了实时荧光PCR和可视芯片检测方法。结果表明两种方法都能特异性检测玉米Mir162品系,其中实时荧光PCR检测的相对灵敏度可达0.001%,可视芯片检测灵敏度达0.01%。本研究建立的方... 本研究以转基因玉米品系Mir162的性状基因vip3a为靶标,建立了实时荧光PCR和可视芯片检测方法。结果表明两种方法都能特异性检测玉米Mir162品系,其中实时荧光PCR检测的相对灵敏度可达0.001%,可视芯片检测灵敏度达0.01%。本研究建立的方法可用于进境转基因玉米中Mir162品系的检测。 展开更多
关键词 转基因玉米 Mir162 实时PCR 可视芯片检测
转基因玉米MON810基体标准物质Q—PCR量值协同实验研究 预览 被引量:1
4
作者 傅博强 臧超 +7 位作者 宋贵文 孟亚男 王晶 董莲华 余笑波 李亮 隋志伟 杨立桃 《计量学报》 CSCD 北大核心 2011年第B12期 114-118,共5页
针对3种不同转基因含量水平的转基因玉米MON810基体标准物质,组织7家实验室对其量值采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法进行了协同实验研究,并对Q-PCR得到的参考值进行了不确定度分析。经过加权平均,转基因玉米MONS10A、B、C3个水平... 针对3种不同转基因含量水平的转基因玉米MON810基体标准物质,组织7家实验室对其量值采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法进行了协同实验研究,并对Q-PCR得到的参考值进行了不确定度分析。经过加权平均,转基因玉米MONS10A、B、C3个水平的基体标准物质转基因含量的Q—PCR方法参考值分别为0.51%±0.10%、1.1%±0.2%、4.7%±0.7%(k=2)。 展开更多
关键词 计量学 转基因玉米 MON810 基体标准物质 实时荧光定量PCR 协同实验
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转基因玉米LAMP检测体系的建立及应用 预览 被引量:12
5
作者 兰青阔 王永 +3 位作者 赵新 朱珠 景海春 程奕 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期 49-52,共4页
以转基因抗虫和耐除草剂玉米Bt11为研究材料,建立Bt11环状等温扩增快速检测技术方法。利用一种具有链置换活性的BstDNA聚合酶,针对Bt11中玉米基因组与外源基因结合处序列,设计4条特异引物,并对反应温度、时间、灵敏度、结果判断方法等... 以转基因抗虫和耐除草剂玉米Bt11为研究材料,建立Bt11环状等温扩增快速检测技术方法。利用一种具有链置换活性的BstDNA聚合酶,针对Bt11中玉米基因组与外源基因结合处序列,设计4条特异引物,并对反应温度、时间、灵敏度、结果判断方法等参数进行初步探索。结果显示,LAMP检测方法最适反应温度及反应时间分别为65℃和60min,其灵敏度为常规定性PCR的20倍。LAMP技术检测转基因玉米品系Bt11具有特异性高、快速、简便等优点,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 转基因玉米 环状等温扩增 检测
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利用复合PCR结合DNA芯片的方法进行快速转基因事件检测 预览 被引量:4
6
作者 肖一争 唐咏 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2007年第4期 101-107,共7页
以我国批准进口用作加工原料的6种转基因玉米为材料,根据其外源基因、载体构建及插入位点,应用6对特异性引物及35S、NOS引物,设计并优化了复合PCR反应体系,对其进行转基因成分检测.同时尝试利用复合PCR与DNA芯片相结合,对不同转基因玉... 以我国批准进口用作加工原料的6种转基因玉米为材料,根据其外源基因、载体构建及插入位点,应用6对特异性引物及35S、NOS引物,设计并优化了复合PCR反应体系,对其进行转基因成分检测.同时尝试利用复合PCR与DNA芯片相结合,对不同转基因玉米混合样品进行检测,探索建立转基因事件快速检测和确认方法. 展开更多
关键词 转基因玉米 复合PCR DNA芯片
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转大豆DNA玉米的氮钾含量测定 预览
7
作者 杜娟 《山西农业大学学报:自然科学版》 CAS 2007年第2期 149-152,共4页
以发育正常的诱变玉米(26DC),对照材料(26CK)为试验材料研究了玉米穗位叶和籽粒在不同生育期的氮钾含量。结果表明,转大豆DNA玉米的氮含量、钾含量均与转化前有显著差异,同等施肥条件下,DC乳熟期籽粒中氮含量高于CK19.7%,DC... 以发育正常的诱变玉米(26DC),对照材料(26CK)为试验材料研究了玉米穗位叶和籽粒在不同生育期的氮钾含量。结果表明,转大豆DNA玉米的氮含量、钾含量均与转化前有显著差异,同等施肥条件下,DC乳熟期籽粒中氮含量高于CK19.7%,DC穗位叶的钾含量在前四期平均高于CK19.4%,DC籽粒腊熟期钾含量高于CK同期50%,对氮素的代谢有良好的促进作用。 展开更多
关键词 转基因玉米 氮含量 钾含量
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转基因油料作物 预览 被引量:7
8
作者 覃文 朱水芳 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期 48-52,共5页
随着生物技术的不断发展,在常见的油料作物中,已经有油菜籽、大豆、玉米和棉籽4种转基因油料作物.介绍这4种商品化转基因油料作物被改变的性状、转入的外源基因以及各国批准食用的时间,为检验和监督管理提供依据.
关键词 油料作物 转基因油菜籽 转基因大豆 转基因玉米 转基因棉籽 性状 外源基因 监督管理 检验
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农杆菌介导法转GM-CSF基因玉米研究初报 预览 被引量:1
9
作者 王云翠 邓德祥 +4 位作者 姚泉洪 蒋守华 张勇 王益军 范惠琴 《分子植物育种》 CAS CSCD 2003年第5期 677-681,共5页
利用农杆菌介导法将GM-CSF转化玉米自交系B73、J7-3及杂交种B73×A188幼胚,获得了B73、B73×A188的潮霉素抗性植株,经PCR、PCR-Southern blotting检测,外源基因均已转入玉米基因组中.
关键词 GM-CSF基因 玉米 转基因 农杆菌介导 潮霉素 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 细胞因子多肽药物 基因工程药物
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转基因食品安全性检验的核酸检测技术研究 预览 被引量:33
10
作者 邓平建 赵锦 +3 位作者 刘建军 房师松 何雅青 黄自然 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期 37-40,共4页
以国际市场上转基因食品的主流产品转基因大豆及玉米和我国生产的转基因辣椒为材料,以PCR方法为基础,研究适用于转基因食品安全性检验的核酸检测技术.针对抗除草剂(孟山都公司)GM-大豆,转Bt-176玉米(Novartis/Ciba-Geigy公司)及转抗菌... 以国际市场上转基因食品的主流产品转基因大豆及玉米和我国生产的转基因辣椒为材料,以PCR方法为基础,研究适用于转基因食品安全性检验的核酸检测技术.针对抗除草剂(孟山都公司)GM-大豆,转Bt-176玉米(Novartis/Ciba-Geigy公司)及转抗菌肽辣椒(华农)产品的插入基因及调控序列设计不同引物进行PCR检测.建立了转基因大豆、玉米、辣椒的鉴别和相关标记基因、目的基因检测的技术,该方法简便快速,检测结果与标准及申报材料相符. 展开更多
关键词 转基因大豆 转基因玉米 转基因辣椒 核酸检测 聚合酶链反应
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MDA技术在转基因检测中的研究与应用
11
作者 马晓娇 李亮 +1 位作者 宛煜嵩 金芜军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期2207-2214,共8页
PCR技术是转基因植物及其产品检测的主要方法,但是因为其对模板纯度和质量有较高要求,对于低质量模板难以获得稳定的检测结果。本研究利用MDA技术可将低至10 copies的微量DNA样品扩增至可用PCR方法稳定检出;进一步利用MDA技术对转基因... PCR技术是转基因植物及其产品检测的主要方法,但是因为其对模板纯度和质量有较高要求,对于低质量模板难以获得稳定的检测结果。本研究利用MDA技术可将低至10 copies的微量DNA样品扩增至可用PCR方法稳定检出;进一步利用MDA技术对转基因玉米有证标准物质Bt11粉末的单颗粒痕量样品释出DNA进行扩增,结合PCR扩增检测,玉米粉末颗粒中内源参照基因的检出率达到70%以上,转基因特异性序列检出与内源参照基因检出的比值,与标准物质标称值基本相符,为建立基于MDA技术转基因植物及其产品粉末颗粒等痕量样品检测方法奠定了基础,同时也为加工产品中复合性状转基因作物的检测提供了潜在的解决方案。 展开更多
关键词 MDA 非转基因玉米 Bt11 转基因玉米 检测
转cry1Ie基因抗虫玉米对根际微生物群落碳代谢的影响
12
作者 梁晋刚 辛龙涛 +2 位作者 栾颖 宋新元 张正光 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期104-110,共7页
转基因作物对土壤生态系统的影响日益引起人们的广泛关注。采用Biolog ECO微平板对转基因抗虫玉米IE09S034及其对应的受体玉米根际微生物群落碳代谢功能进行了比较研究。结果表明,转基因抗虫玉米IE09S034对根际微生物碳代谢功能无显著... 转基因作物对土壤生态系统的影响日益引起人们的广泛关注。采用Biolog ECO微平板对转基因抗虫玉米IE09S034及其对应的受体玉米根际微生物群落碳代谢功能进行了比较研究。结果表明,转基因抗虫玉米IE09S034对根际微生物碳代谢功能无显著性影响,且发现年份和生育期是引起根际微生物碳代谢情况变化的主要因素。本文为转基因抗虫玉米IE09S034的环境安全性评估提供了新的依据。 展开更多
关键词 转基因抗虫玉米 BIOLOG ECO微平板 根际微生物 功能多样性
A Real-time Fluorescent Quantitative PCR Method for Detection of Genetically Modified Maize MON88017 预览
13
作者 Jun SONG Dong WANG 《亚洲农业研究:英文版》 2017年第9期53-58,共6页
In order to improve the standardized technical system of quantitative analyses for genetically modified organisms( GMOs) and protect China’s bio-safety and reduce ecological risk,we establish a quantitative detection... In order to improve the standardized technical system of quantitative analyses for genetically modified organisms( GMOs) and protect China’s bio-safety and reduce ecological risk,we establish a quantitative detection method for the genetically modified( GM) maize MON88017 using real-time fluorescent quantitative PCR. Meanwhile,the method is evaluated by several methodological indicators such as specificity,sensitivity,accuracy and uncertainty of measurement. The results show that the method has strong specificity in analysis of genetically modified maize MON88017. The mean value(1. 54%) repeatedly measured for 29 times with the relative deviation of 2. 7% was close to the real value(1. 50%) and the variation coefficient of the measured value was 0. 1. The tested recovery rate is 100% and the uncertainty of measurement is 0. 096. 5 copies of the MON88017 molecular fragment can be detected at 97. 5% confidence level. Consequently,the quantitative detection method established in this paper for the GM maize MON88017 has fairly high specificity,accuracy and sensitivity and this technology established in this paper can provide good technical support for the safety supervision of genetically modified organisms in China. 展开更多
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Applicability of Cytoplasmic Male Sterility (CMS) as a Reliable Biological Confinement Method for the Cultivation of Genetically Modified Maize in Germany 预览
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作者 Heidrun Biickmann Alexandra Hiisken Joachim Schiemann 《农业科学与技术:A》 2013年第5期385-403,共19页
关键词 细胞质雄性不育 转基因玉米 CMS 生物 德国 适用性 玉米杂交种 栽培
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转基因玉米质粒分子国家标准样品的构建 被引量:1
15
作者 郑秋月 曹际娟 +1 位作者 徐君怡 赵昕 《标准科学》 2012年第12期48-51,共4页
本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定... 本文研制转基因玉米常见的4个品系:BT11、MON810、NK603和T25质粒分子国家标准样品。研究重点包括目标序列和内标准基因序列的选择和扩增、标准样品定值和分析等。均匀性和稳定性结果表明,所研制的转基因玉米4个品系标准样品均匀稳定。采用PicoGreenDNA分子荧光定量方法定值标准样品。多家单位合作定值,确定标准样品的标准值及其不确定度。所研制的转基因玉米质粒分子标准样品获得了国家标准样品证书,适用于转基因产品的定量和定性测定。 展开更多
关键词 转基因玉米BT11品系 转基因玉米MON810品系 转基因玉米NK603品系 转基因玉米T25品系 质粒分子国家标准样品
转基因玉米TC1507基体标准物质协同实验及不确定度评定 预览 被引量:1
16
作者 臧超 傅博强 +7 位作者 宋贵文 孟亚男 王晶 董莲华 余笑波 隋志伟 李亮 杨立桃 《计量学报》 CSCD 北大核心 2011年第B12期 110-113,共4页
7家实验室共同采用实时荧光定量PCR方法,对转基因玉米TC1507基体标准物质A、B、c3种含量水平的量值,进行了协同实验研究,并对得到的参考值进行了不确定度分析。实时荧光定量PCR方法协同实验结果表明,转基因玉米TC1507基体标准物质... 7家实验室共同采用实时荧光定量PCR方法,对转基因玉米TC1507基体标准物质A、B、c3种含量水平的量值,进行了协同实验研究,并对得到的参考值进行了不确定度分析。实时荧光定量PCR方法协同实验结果表明,转基因玉米TC1507基体标准物质转基因含量的参考值分别为0.41%±0.22%、1.1%±0.4%、4.5%±1.2%(k=2)。 展开更多
关键词 计量学 转基因玉米TC1507 基体标准物质 实时荧光定量PCR 协同实验
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用实时荧光PCR方法鉴定转基因玉米T14/T25 预览 被引量:12
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作者 曹际娟 覃文 +1 位作者 朱水芳 曹远银 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期 689-694,共6页
以实时荧光PCR技术鉴定商业化种植的转基因玉米T14/T25品系.根据转基因玉米T14/T25转入的外源基因质粒图谱,设计转基因引物和探针进行PCR和实时荧光PCR检测,建立了转基因玉米品系鉴定的实时荧光PCR方法.实验结果表明,用Taq Man探针可检... 以实时荧光PCR技术鉴定商业化种植的转基因玉米T14/T25品系.根据转基因玉米T14/T25转入的外源基因质粒图谱,设计转基因引物和探针进行PCR和实时荧光PCR检测,建立了转基因玉米品系鉴定的实时荧光PCR方法.实验结果表明,用Taq Man探针可检测到T14/T25产生的荧光信号,而对其他玉米品系则检测不到荧光信号,为转基因产品的鉴定检测提供了新方法. 展开更多
关键词 实时荧光PCR T14/T25转基因玉米 鉴定
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实时荧光PCR定量检测加工产品中转基因玉米Mon810成分 预览 被引量:7
18
作者 覃文 曹际娟 朱水芳 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期 132-134,共3页
采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法.实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成分... 采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法.实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成分.某些检测样品不仅检出转基因玉米Mon810成分,还同时检出其它转基因玉米品系或其它转基因品种.本研究实验建立的转基因玉米Mon810品系鉴定检测方法,即可以用于加工产品中转基因成分的定量检测(检测低限为0.1%),也可以用于定性检测,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法. 展开更多
关键词 转基因玉米 实时荧光PCR技术 定量检测 食品 饲料 Mon810成分
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PCR对转基因玉米MON810的鉴定检测 预览 被引量:10
19
作者 曹际娟 曹远银 《玉米科学》 CAS CSCD 2003年第1期 19-21,共3页
本研究成功建立了商业化种植的转基因玉米MON810的筛选检测和品种鉴定的PCR方法.该方法根据玉米自身IVR基因作为内源特异参照基因扩增226 bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增CaMV35S启动子基因195 bp片段,可以对MO... 本研究成功建立了商业化种植的转基因玉米MON810的筛选检测和品种鉴定的PCR方法.该方法根据玉米自身IVR基因作为内源特异参照基因扩增226 bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增CaMV35S启动子基因195 bp片段,可以对MON810转基因玉米进行筛选检测;此外,根据MON810品种设计的特异性鉴定检测引物,可扩增Maize genome/CaMV35S基因170 bp片段和HSP/CryIA(b)基因194bp片段,具有很强的品种特异性,达到了对MON810转基因玉米的品种鉴定目的.PCR反应循环参数是94℃2 min;94℃40sec,55℃60sec,72℃60sec,35次循环;之后72℃延伸5 min. 展开更多
关键词 PCR 转基因玉米 MON810 鉴定检测 筛选检测 品种鉴定
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商业化种植的六种基因改良玉米品系的鉴定检测方法 预览 被引量:5
20
作者 曹际娟 覃文 +3 位作者 朱水芳 徐宝梁 陈明生 曹远银 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第1期 23-29,共7页
以PCR方法鉴定检测六种商业化种植的基因改良玉米(genetically modified maize,简称GM-玉米).针对Mon810(Monsanto公司)、Bt11(Novartis公司)、Event 176(Novartis公司)、CBH-351(AgrEvo公司)、T14/T25Liberty(AgrEvo公司)及GA21(Monsa... 以PCR方法鉴定检测六种商业化种植的基因改良玉米(genetically modified maize,简称GM-玉米).针对Mon810(Monsanto公司)、Bt11(Novartis公司)、Event 176(Novartis公司)、CBH-351(AgrEvo公司)、T14/T25Liberty(AgrEvo公司)及GA21(Monsanto公司)GM-玉米转入的外源基因质粒图谱,设计具有品系特异性的引物进行PCR检测,建立了GM-玉米品系鉴定检测的方法. 展开更多
关键词 基因改良玉米品系 品系鉴定 商业化种植 PCR方法 检测
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