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雌二醇和白藜芦醇二聚体对颏舌肌成肌细胞HIF-1α的作用及机制
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作者 李远远 郝彤 +1 位作者 卢芸 刘月华 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期354-359,共6页
目的 :研究雌二醇(17β-estrodial,E2)和白藜芦醇二聚体(resveratrol dimer,RD)对低氧诱导因子1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)的作用及其分子生物学机制。方法 :提取小鼠颏舌肌成肌细胞,构建ERα敲降的成肌细胞(KD... 目的 :研究雌二醇(17β-estrodial,E2)和白藜芦醇二聚体(resveratrol dimer,RD)对低氧诱导因子1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)的作用及其分子生物学机制。方法 :提取小鼠颏舌肌成肌细胞,构建ERα敲降的成肌细胞(KD组)低氧模型,将成肌细胞(NS组)和KD组细胞分别低氧、低氧+E2、低氧+RD或低氧++E2+LY294002处理24 h,利用Western免疫印迹方法检测信号分子T-Akt和P-Akt的表达,q RT-PCR和Western免疫印迹检测HIF-lα的表达水平。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:低氧环境下成肌细胞HIF-1α的表达显著高于常氧(P〈0.05),E2或RD处理后,HIF-1α的表达水平显著低于低氧组(P〈0.05);ERα敲降后,低氧也促进HIF-1α的表达(P〈0.05),但是E2或RD+低氧处理组成肌细胞HIF-1α的表达与低氧相比无显著差异(P〉0.05),Western免疫印迹结果与RT-PCR结果趋势一致。PI3K/Akt通路抑制剂与E2共培养则促进HIF-1α的表达(P〈0.05)。结论:ERα在E2或RD对小鼠颏舌肌成肌细胞HIF-1α的抑制中起主导作用,其下游PI3K/Akt信号通路在该抑制效应中也发挥重要作用。 展开更多
关键词 成肌细胞 白藜芦醇二聚体 雌激素受体Α 低氧诱导因子1Α PI3K/AKT
大鼠颏舌肌成肌细胞的分离和鉴定 预览
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作者 丁王辉 陈小燕 +1 位作者 李文 施洁珺 《口腔医学》 CAS 2015年第7期521-524,共4页
目的建立大鼠颏舌肌成肌细胞体外培养方法,观察成肌细胞生物学特性。方法取新生3 d内SD大鼠,机械法分离颏舌肌组织,应用胶原酶、胰蛋白酶两步消化法获得成肌细胞,差速贴壁法纯化细胞,细胞计数法绘制生长曲线,α-sarcomeric actin免疫细... 目的建立大鼠颏舌肌成肌细胞体外培养方法,观察成肌细胞生物学特性。方法取新生3 d内SD大鼠,机械法分离颏舌肌组织,应用胶原酶、胰蛋白酶两步消化法获得成肌细胞,差速贴壁法纯化细胞,细胞计数法绘制生长曲线,α-sarcomeric actin免疫细胞化学鉴定细胞来源。结果成功获得大鼠颏舌肌成肌细胞,超过90%的细胞α-sarcomeric actin染色阳性,证明其为骨骼肌细胞来源。体外培养的成肌细胞呈现良好的增殖和分化能力,在生长培养基中细胞的倍增时间为4~5d,高密度时细胞相互接触融合形成肌管。结论消化法与差速贴壁法结合能够获得足量、纯净的颏舌肌成肌细胞,所得细胞增殖力强,能表达骨骼肌特异性蛋白。 展开更多
关键词 颏舌肌 成肌细胞 酶消化法 差速贴壁法 肌管
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低氧对大鼠颏舌肌成肌细胞分化的影响
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作者 周健 刘月华 《临床口腔医学杂志》 2012年第2期 83-86,共4页
目的:通过观测低氧环境对体外培养大鼠颏舌肌成肌细胞分化及低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响,探讨低氧引起颏舌肌损伤的机制以及HIF-1α在其中的作用。方法:根据环境氧浓度不同,将体外培养的原代大鼠颏舌肌成肌细胞分为正常氧... 目的:通过观测低氧环境对体外培养大鼠颏舌肌成肌细胞分化及低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响,探讨低氧引起颏舌肌损伤的机制以及HIF-1α在其中的作用。方法:根据环境氧浓度不同,将体外培养的原代大鼠颏舌肌成肌细胞分为正常氧浓度组(NC)(21%)和低氧组(HG)(1%),分别诱导分化0 d、1 d、3 d、6 d。采用RT-PCR及Western blotting检测生肌调节因子(MyoD)、肌源性决定因子(myogenin)、肌球蛋白重链(MHC)以及HIF-1α的mRNA及蛋白表达;倒置显微镜下观察成肌细胞分化的形态变化。结果:在颏舌肌成肌细胞分化过程中,两种氧状态下HIF-1αmRNA表达均没有显著变化(P〉0.05),但蛋白表达逐渐上调;低氧对MyoD、myogenin、MHC的mRNA(P〈0.05)和蛋白表达有显著的抑制作用,致肌管形成延迟;低氧使HIF-1αmRNA(P〈0.05)和蛋白显著上调。结论:低氧环境可能是通过上调HIF-1α表达抑制大鼠颏舌肌成肌细胞的分化,从而抑制颏舌肌损伤的修复。 展开更多
关键词 颏舌肌 成肌细胞 分化 低氧 低氧诱导因子1Α
雌激素对颏舌肌成肌细胞钙离子水平影响的实验研究 预览 被引量:3
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作者 郭涛 刘文佳 +1 位作者 余晓玲 丁寅 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2013年第8期695-698,703共5页
目的:探讨不同浓度雌激素对颏舌肌成肌细胞胞内钙离子浓度的影响。方法:体外培养大鼠颏舌肌成肌细胞,缓冲液孵育颏舌肌成肌细胞使其处于正常与微酸环境下,激光共聚焦显微镜观察不同浓度雌激素作用下成肌细胞胞内钙离子的变化。结果:... 目的:探讨不同浓度雌激素对颏舌肌成肌细胞胞内钙离子浓度的影响。方法:体外培养大鼠颏舌肌成肌细胞,缓冲液孵育颏舌肌成肌细胞使其处于正常与微酸环境下,激光共聚焦显微镜观察不同浓度雌激素作用下成肌细胞胞内钙离子的变化。结果:正常环境下,不同浓度雌激素对颏舌肌成肌细胞胞内钙离子影响不大。在微酸环境下,雌激素能够迅速下调成肌细胞胞浆钙离子强度,并在低水平重新形成新的平衡。结论:在一定条件下,雌激素能够下调颏舌肌成肌细胞胞内钙离子水平,维持肌细胞活性,从而减少肌肉的疲劳与损伤。这可能是雌激素对OSAHS起保护作用的原因之一。 展开更多
关键词 雌激素 颏舌肌成肌细胞 钙离子 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合症
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