目前全球约有2.57亿慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者,是当前最为突出的公共卫生问题之一.HBV感染的肝细胞内稳定存在的共价闭合环状DNA(cccDNA)是造成HBV感染持续、抗病毒治疗停药后病毒反弹的重要原因.现有Anti-HBV药...目前全球约有2.57亿慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者,是当前最为突出的公共卫生问题之一.HBV感染的肝细胞内稳定存在的共价闭合环状DNA(cccDNA)是造成HBV感染持续、抗病毒治疗停药后病毒反弹的重要原因.现有Anti-HBV药物难以有效清除或直接抑制肝内cccDNA是慢性乙肝难以治愈的关键瓶颈.缺乏简单易行的cccDNA定量检测方法,影响了靶向cccDNA的Anti-HBV新药研发进展,也阻碍了这一指标在慢性乙肝患者临床管理实践中的应用.Southern blot被认为是目前cccDNA实验室检测的"金标准",但其操作复杂且灵敏度低,不适合于高通量药物筛选及临床应用.基于PCR的cccDNA检测方法相对操作简单、检测灵敏度更高,但其可靠性仍有待考验.本文系统整理分析了cccDNA样品提取和测定方法的研究现状与进展,希望通过综合比较不同cccDNA检测技术的性能和特点,为cccDNA相关基础研究、药物发展与临床研究提供方法学参考.展开更多
目的研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染孕妇人工流产术后HBV DNA定量与其自身肠道微生物的相关性。方法选取2016年2月至2018年2月深圳市龙岗区第三人民医院诊治的50例孕早期HBV感染孕妇作为研究对象。将这50例孕妇设为试验组...目的研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染孕妇人工流产术后HBV DNA定量与其自身肠道微生物的相关性。方法选取2016年2月至2018年2月深圳市龙岗区第三人民医院诊治的50例孕早期HBV感染孕妇作为研究对象。将这50例孕妇设为试验组,同期进行孕检的孕早期无HBV感染孕妇50例作为对照组。两组孕妇均接受人工流产术,分别进行胚胎组织的制备以及孕妇肠道排粪物的获取,通过荧光定量PCR检测两组胚胎HBV DNA定量,比较两组孕妇肠道微生物(主要囊括粪肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌、白色念珠菌)计数水平,并作相关性分析。结果试验组的胚胎HBV DNA检出率为66.00%,高于对照组的0.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。试验组的粪肠球菌、白色念珠菌计数均高于对照组,而双歧杆菌、乳酸杆菌计数均低于对照组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。经Pearson相关性分析可得:HBV感染孕妇的HBV DNA定量与其肠道内粪肠球菌、白色念珠菌计数呈正相关,差异具有统计学意义(r=0.683、0.619;P=0.000、0.000),与双歧杆菌、乳酸杆菌计数呈负相关,差异具有统计学意义(r=-0.607、-0.603;P=0.000、0.000)。结论孕妇的HBV感染与其肠道微生物的平衡状态密切相关,值得临床重视。展开更多
文摘目前全球约有2.57亿慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者,是当前最为突出的公共卫生问题之一.HBV感染的肝细胞内稳定存在的共价闭合环状DNA(cccDNA)是造成HBV感染持续、抗病毒治疗停药后病毒反弹的重要原因.现有Anti-HBV药物难以有效清除或直接抑制肝内cccDNA是慢性乙肝难以治愈的关键瓶颈.缺乏简单易行的cccDNA定量检测方法,影响了靶向cccDNA的Anti-HBV新药研发进展,也阻碍了这一指标在慢性乙肝患者临床管理实践中的应用.Southern blot被认为是目前cccDNA实验室检测的"金标准",但其操作复杂且灵敏度低,不适合于高通量药物筛选及临床应用.基于PCR的cccDNA检测方法相对操作简单、检测灵敏度更高,但其可靠性仍有待考验.本文系统整理分析了cccDNA样品提取和测定方法的研究现状与进展,希望通过综合比较不同cccDNA检测技术的性能和特点,为cccDNA相关基础研究、药物发展与临床研究提供方法学参考.