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Effects of Hypoxia on the Growth and Development of the Fetal Ovine Hepatocytes in Primary Culture 预览
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作者 CAO Li WANG Juan +4 位作者 BO Le LI Da Wei YIN Na ZHOU An Wen MAO Cai Ping 《生物医学与环境科学:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第8期592-601,共10页
Objective To investigate the development and characterizations of the hepatocytes isolated from fetal ovine and to determine the effect of hypoxia on their growth and metabolism.Methods Fresh hepatocytes were isolated... Objective To investigate the development and characterizations of the hepatocytes isolated from fetal ovine and to determine the effect of hypoxia on their growth and metabolism.Methods Fresh hepatocytes were isolated from the liver of fetal ovine at late gestation, cultured in specific media, and exposed to normoxia(21% O2) or hypoxia(2% O2).The cellular characteristics and population purity were identified by immunocytochemistry and flow cytometry(FCM).The effects of hypoxia on cell cycle and apoptosis of the hepatocytes were evaluated by FCM, whereas the cellular ultrastructure changes were examined with a transmission electron microscope.Results The cell purity of hepatocytes was over 95%.Under hypoxia exposure, the hepatocytes showed a gradual increase in proportion at the S phase and in proliferative index, followed with a compatible increase in apoptosis and progressively decreased cell viability.Additionally, the organelles of the hepatocytes demonstrated dramatic changes, including swelling of mitochondria, disorder in cristae arrangement, expansion of endoplasmic reticulum, and a large number of circular lipid droplets emerging in the cytoplasm.Conclusion Fetal ovine hepatocytes could be primarily cultured in a short-term culture system with a high purity of over 95% and with their preserved original characteristics.Hypoxia could induce changes in ultrastructural and inhibit the proliferation of cultured fetal ovine hepatocytes through apoptotic mechanisms. 展开更多
关键词 Cell CYCLE FETAL OVINE HEPATOCYTES HEPATOCYTES structure HYPOXIA PRIMARY culture
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Characteristics of β-oxidative and reductive metabolism on the acyl side chain of cinnamic acid and its analogues in rats
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作者 Kai-jing Zhao Yang Chen +11 位作者 Shi-jin Hong Yi-ting Yang Jiong Xu Han-yu Yang Liang Zhu Ming Liu Qiu-shi Xie Xian-ge Tang Ting-ting Yang Ya-qian Zhou Li Liu Xiao-dong Liu 《中国药理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第8期1106-1118,共13页
Cinnamic acid and its analogues (pyragrel and ozagrel) undergo chain-shortened (β-oxidative) and reductive metabolism on acyl side chain. In this study, we characterized the β-oxidative and reductive metabolism on a... Cinnamic acid and its analogues (pyragrel and ozagrel) undergo chain-shortened (β-oxidative) and reductive metabolism on acyl side chain. In this study, we characterized the β-oxidative and reductive metabolism on acyl side chain of cinnamic acid and its analogues using primary rat hepatocytes, hepatic mitochondrial, and microsomal systems. A compartmental model including parent compounds and metabolites was developed to characterize in vivo β-oxidative and reductive metabolism following an intravenous dose of parent compounds to rats. The ?tted total in vivo clearance values were further compared with the in vitro values predicted by the well-stirred model. We showed that hepatic microsomal CYP450s did not catalyze β-oxidative or reductive metabolism of the three compounds. Similar to β-oxidation of fatty acids,β-oxidative metabolism on their acyl side chain occurred mainly in mitochondria, which was highly dependent on ATP, CoA and NAD+. Fatty acids and NADH inhibited the β-oxidative metabolism. Reductive metabolism occurred in both mitochondria and microsomes. Reduction in mitochondria was ATP-, CoA-, and NAD(P)H-dependent and reversible, which was suppressed by enoyl reductase inhibitor triclosan. Reduction in microsomes was ATP-, CoA-, and NADPH-dependent but little affected by triclosan. Both plasma concentrations of β-oxidative metabolites and reductive metabolites were successfully ?tted using the compartmental model. The estimated total in vivo clearance values were consistent with those predicted from hepatocytes and organelles, implicating signi?cance of in vitro kinetics. These ?ndings demonstrate the roles of hepatic mitochondria and microsomes in β-oxidative and reductive metabolism on acyl side chain of cinnamic acid and its analogues along with their metabolic characteristics. 展开更多
关键词 ANTIPLATELET DRUG cinnamic acid pyragrel OZAGREL DRUG METABOLISM hepatocytes mitochondria MICROSOMES pharmacokinetics in vitro-in vivo correlation
组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸肝细胞毒性相关作用机制研究 预览
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作者 那存乌力吉 达嘎呼 《实用药物与临床》 CAS 2019年第4期364-368,共5页
目的研究丙戊酸肝细胞毒性相关机制。方法使用人肝癌细胞系HepG2,VPA、TSA处理,检测细胞活性、凋亡情况、线粒体膜电位、PI3K/AKT/mTOR通路活性、Bcl-2、Bax凋亡通路和自噬激活情况。结果5mmol/L、10mmol/L VPA处理24h,细胞活性明显降... 目的研究丙戊酸肝细胞毒性相关机制。方法使用人肝癌细胞系HepG2,VPA、TSA处理,检测细胞活性、凋亡情况、线粒体膜电位、PI3K/AKT/mTOR通路活性、Bcl-2、Bax凋亡通路和自噬激活情况。结果5mmol/L、10mmol/L VPA处理24h,细胞活性明显降低;5μmol/L TSA处理24h,细胞活性明显降低。因此选用10mmol/L VPA、5μmol/L TSA。10mmol/L VPA处理24h或5μmol/L TSA处理24h,细胞凋亡率显著升高,细胞线粒体膜电位降低,细胞PI3K/AKT/mTOR通路活性降低,细胞Bcl-2活性降低,Bax活性升高,cleaved-caspase-3比例升高,细胞LC3Ⅱ表达增加,p62表达降低,VPA的作用强于TSA。结论PI3K/Akt/mTOR通路抑制以及线粒体异常引起的凋亡在VPA相关肝毒性中发挥重要作用,而且VPA的肝毒性也与其HDAC抑制剂活性具有一定关联。 展开更多
关键词 丙戊酸 肝细胞 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 毒性
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脐带间充质干细胞通过旁分泌机制维持原代小鼠肝细胞的体外生长 预览
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作者 吴源泉 吴建华 +1 位作者 王梁 林洋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4031-4036,共6页
背景:肝细胞移植对于晚期肝功能衰竭患者是一种非常有效的替代治疗方法,体外条件下扩增培养肝细胞具有非常重要的临床意义。目的:体外实验探讨人脐带间充质干细胞对原代小鼠肝细胞功能的调控作用。方法:实验分3组:①人脐带间充质干细胞... 背景:肝细胞移植对于晚期肝功能衰竭患者是一种非常有效的替代治疗方法,体外条件下扩增培养肝细胞具有非常重要的临床意义。目的:体外实验探讨人脐带间充质干细胞对原代小鼠肝细胞功能的调控作用。方法:实验分3组:①人脐带间充质干细胞与原代小鼠肝细胞非接触共培养(非接触共培养组);②人脐带间充质干细胞培养液上清与原代小鼠肝细胞共培养(上清组);③原代小鼠肝细胞用含体积分数为10%胎牛血清的低糖DMEM培养(常规培养组)。培养48,72,96 h,采用MTT法检测3组肝细胞增殖情况,吲哚菁绿检测肝细胞相关功能,ELISA法检测白蛋白及尿素分泌情况,RT-PCR检测肝细胞相关基因表达。该研究的实施符合喀什地区第一人民医院的相关伦理要求(伦理批件号:01号)。结果与结论:①与常规培养组相比,培养48,72,96 h时非接触共培养组和上清组都可以显著促进小鼠肝细胞增殖,差异有显著性意义(P <0.05);②与常规培养组相比,培养96 h时非接触共培养组和上清组都可以维持小鼠肝细胞的摄取功能活性,差异有显著性意义(P <0.05);③与常规培养组相比,在48 h和96 h时非接触共培养组和上清组小鼠肝细胞分泌白蛋白及尿素水平显著升高,差异有显著性意义(P <0.05);④与常规培养组相比,非接触共培养组和上清组HGF、b FGF以及ALB mRNA表达显著升高,差异有显著性意义(P <0.05);但细胞色素基因CYP2B9的表达在3组细胞内差异无显著性意义(P> 0.05);⑤结果表明,脐带间充质干细胞可通过旁分泌机制在体外维持原代小鼠肝细胞功能,并促进其增殖,是体外条件下人工扩增肝细胞的一种新的应用策略。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 肝细胞 共培养 旁分泌 肝细胞生长因子 肝功能 新疆维吾尔自治区自然科学基金
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乙草胺对大鼠肝细胞G蛋白偶联受体介导的胞浆钙离子振荡的调控 预览
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作者 张彬彬 王玖 《湖北农业科学》 2019年第16期104-106,共3页
以大鼠肝细胞为研究对象,研究乙草胺对大鼠肝细胞G蛋白偶联受体介导胞浆钙振荡的调控。结果表明,单独乙草胺刺激不引发胞浆钙离子振荡,乙草胺和PE同时作用对肾上腺素能受体有抑制作用且具有明显的量效反应关系。
关键词 乙草胺 肾上腺素能受体 钙振荡 肝细胞
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血清细胞骨架蛋白4检测对肝细胞癌的诊断价值 预览
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作者 朱锦舟 张慧娴 +2 位作者 奚黎婷 许春芳 吴爱荣 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第17期84-87,共4页
目的探讨检测血清细胞骨架蛋白4(CKAP4)水平对识别肝细胞癌(HCC)患者的临床价值。方法选取2013 年1 月—2017 年12 月苏州大学附属第一医院HCC 患者88 例为HCC 组,同期选取肝硬化患者91 例、慢性乙型肝炎患者87 例、门诊体检部健康体检... 目的探讨检测血清细胞骨架蛋白4(CKAP4)水平对识别肝细胞癌(HCC)患者的临床价值。方法选取2013 年1 月—2017 年12 月苏州大学附属第一医院HCC 患者88 例为HCC 组,同期选取肝硬化患者91 例、慢性乙型肝炎患者87 例、门诊体检部健康体检者81 例作为3 个对照组。血清CKAP4 水平检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。受试者操作特征(ROC)曲线用于评价蛋白对HCC 的识别能力。结果 HCC 患者的血清CKAP4 水平高于肝硬化患者、慢性乙肝患者及健康体检者(P <0.05)。CKAP4 的Cut-off 值为261.1 pg/ml,判断HCC 的ROC 下面积(AUC)为0.843(95% CI :0.799,0.888),敏感性为0.761,特异性为0.737。CKAP4与甲胎蛋白(AFP)比较,差异无统计学意义(P >0.05)。CKAP4 判断早期HCC 的AUC 为0.865(95% CI :0.814,0.915),敏感性为0.784,特异性为0.737,结果优于AFP(P <0.05)。结论 CKAP4 可成为HCC 诊断的血清肿瘤标志物。 展开更多
关键词 肝细胞 细胞骨架蛋白4 甲胎蛋白类 受试者操作特征曲线 肿瘤标志物
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脾内两种途径肝细胞移植治疗急性肝衰竭大鼠的效果评价 预览
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作者 冯渊 李德卫 杨均均 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1422-1427,共6页
背景:肝细胞移植在治疗代谢性疾病和急性肝衰竭的动物实验中取得了一定成功,然而肝细胞移植的临床疗效却并没有动物实验理想。造成实验模型与临床疗效的差异可能与肝细胞移植途径有一定关系。目的:探讨经颈动脉途径脾动脉插管注射与脾... 背景:肝细胞移植在治疗代谢性疾病和急性肝衰竭的动物实验中取得了一定成功,然而肝细胞移植的临床疗效却并没有动物实验理想。造成实验模型与临床疗效的差异可能与肝细胞移植途径有一定关系。目的:探讨经颈动脉途径脾动脉插管注射与脾脏直接注射两种方法行肝细胞移植治疗急性肝衰竭大鼠的疗效,得出更加优化的移植方法。方法:在Seglen改良两步法的基础上稍加改进分离培养肝细胞。采用D-氨基半乳糖诱导大鼠(重庆医科大学实验动物中心提供)急性肝衰竭24 h后,65只大鼠经颈动脉途径脾动脉插管,60只插管成功后随机分为3组:脾脏直接注射组(n=20)大鼠经脾脏直接注射约2×107个肝细胞、脾动脉注射0.4 mL Hank’s液;脾动脉注射组(n=20)大鼠经脾脏直接注射0.4 mL Hank’s液、脾动脉注射2×107个肝细胞;模型对照组(n=20)经脾脏直接注射0.4 mL Hank’s液、脾动脉注射0.4 mL Hank’s液。移植后14 d内观察各组大鼠的生存率及肝功能变化;移植后7 d,荧光显微镜观察经脾动脉移植肝细胞的体内分布情况,苏木精-伊红染色观察移植肝细胞在脾内的分布和增殖情况;移植后14 d,免疫荧光染色观察白蛋白合成情况。结果与结论:①大鼠肝细胞分离存活率达80%-90%;②3组大鼠生存率的比较差异有显著性意义,脾脏直接注射组14 d存活率显著高于脾动脉注射组,脾动脉注射组14 d存活率高于模型对照组;③脾脏直接注射组、脾动脉注射组大鼠肝功能均明显改善,尤其以脾脏直接注射组最为显著;④CFDA-SE荧光标记的肝细胞经脾动脉移植7 d后,受体大鼠脾脏和肝脏可以看到散在绿色荧光分布;⑤移植14 d后,脾脏直接注射组、脾动脉注射组脾脏内有肝细胞白蛋白绿色荧光信号;⑥移植7 d后,脾脏直接注射组、脾动脉注射组肝细胞在脾脏红髓中簇集在一起并定植下来;⑦结果表明,经大鼠颈动脉途径� 展开更多
关键词 急性肝衰竭 肝细胞移植 脾动脉插管 脾动脉注射 脾内直接注射 肝功能衰竭 急性 肝细胞 脾动脉 组织工程
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如何优化肝细胞DNA提取实验教学的研究与探讨 预览
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作者 谢丽霞 张小惠 +2 位作者 龙雅怡 郭娇娟 翁闪凡 《国际医药卫生导报》 2019年第1期45-47,共3页
目的 研究和探讨优化肝细胞DNA提取实验教学的有效做法。方法 采用抽提-浓盐法提取肝细胞中的DNA;用SDS处理肝匀浆后再用氯仿-异戊醇抽提除去蛋白质,加入乙醇脱水析出DNA。结果 肝细胞DNA提取可选用猪肝代替传统习惯兔肝,最佳条件猪肝... 目的 研究和探讨优化肝细胞DNA提取实验教学的有效做法。方法 采用抽提-浓盐法提取肝细胞中的DNA;用SDS处理肝匀浆后再用氯仿-异戊醇抽提除去蛋白质,加入乙醇脱水析出DNA。结果 肝细胞DNA提取可选用猪肝代替传统习惯兔肝,最佳条件猪肝匀浆量为7 ml,新鲜猪肝匀浆搅拌时间为20 min,DNA脱水所用乙醇为75%乙醇。结论 采用上述单因素条件对猪肝细胞DNA进行提取,提取率较高,成本低,实验教学效果好。 展开更多
关键词 肝细胞 DNA提取 影响因素
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内质网应激诱导的自噬对肝细胞凋亡的影响 预览
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作者 郑璐 韩冰 +7 位作者 汤雷 田甜 蔡爽 余蕾 马子华 杨婷 杨勤 谢汝佳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期332-339,共8页
目的:观察二硫苏糖醇(DTT)诱导人正常肝细胞LO2发生内质网应激的过程中自噬相关指标表达的变化及其对细胞凋亡的影响。方法:采用2.0mmol/LDTT处理LO2细胞0、6、12和24h,诱导细胞发生内质网应激;real-timePCR及Western blot检测葡萄糖调... 目的:观察二硫苏糖醇(DTT)诱导人正常肝细胞LO2发生内质网应激的过程中自噬相关指标表达的变化及其对细胞凋亡的影响。方法:采用2.0mmol/LDTT处理LO2细胞0、6、12和24h,诱导细胞发生内质网应激;real-timePCR及Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、自噬相关基因12(Atg12)、自噬相关基因5(Atg5)和微管相关蛋白1轻链3(LC3)mRNA及蛋白水平的变化;流式细胞术检测细胞凋亡情况;透射电镜观察自噬小体的产生情况。采用400nmol/L的雷帕霉素预处理LO2细胞1h,再给予2.0mmol/L的DTT处理24h,观察雷帕霉素预处理对细胞凋亡的影响。结果:2.0mmol/LDTT处理LO2细胞6、12和24h后,细胞中GRP78、PERK、ATF4、CHOP、Atg12、Atg5和LC3的mRNA及蛋白水平较0h组显著上调(P<0.05);同时LC3Ⅱ/LC3Ⅰ也较0h组显著增高(P<0.05);透射电镜检测发现,DTT处理6、12和24h后,细胞中均可见自噬小体的产生;流式细胞术检测发现,DTT处理细胞6、12和24h后,细胞凋亡较0h组显著增加;而经自噬诱导剂雷帕霉素预处理后,DTT诱导的细胞凋亡显著下降(P<0.05)。结论:内质网应激可诱导自噬的发生,而雷帕霉素预处理可在一定程度上减轻内质网应激诱导的LO2细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝细胞 内质网应激 细胞凋亡 自噬 雷帕霉素
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High mobility group box-1 release from H2O2-injured hepatocytes due to sirt1 functional inhibition 预览
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作者 Ting-Jie Ye Yan-Lin Lu +2 位作者 Xiao-Feng Yan Xu-Dong Hu Xiao-Ling Wang 《世界胃肠病学杂志:英文版》 SCIE CAS 2019年第36期5434-5450,共17页
BACKGROUND High mobility group box-1 (HMGB1), recognized as a representative of damageassociated molecular patterns, is released during cell injury/death, triggering the inflammatory response and ultimately resulting ... BACKGROUND High mobility group box-1 (HMGB1), recognized as a representative of damageassociated molecular patterns, is released during cell injury/death, triggering the inflammatory response and ultimately resulting in tissue damage. Dozens of studies have shown that HMGB1 is involved in certain diseases, but the details on how injured hepatocytes release HMGB1 need to be elicited. AIM To reveal HMGB1 release mechanism in hepatocytes undergoing oxidative stress. METHODS C57BL6/J male mice were fed a high-fat diet for 12 wk plus a single binge of ethanol to induce severe steatohepatitis. Hepatocytes treated with H2O2 were used to establish an in vitro model. Serum alanine aminotransferase, liver H2O2 content and catalase activity, lactate dehydrogenase and 8-hydroxy-2- deoxyguanosine content, nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) levels, and Sirtuin 1 (Sirt1) activity were detected by spectrophotometry. HMGB1 release was measured by enzyme linked immunosorbent assay. HMGB1 translocation was observed by immunohistochemistry/immunofluorescence or Western blot. Relative mRNA levels were assayed by qPCR and protein expression was detected by Western blot. Acetylated HMGB1 and poly(ADP-ribose)polymerase 1 (Parp1) were analyzed by Immunoprecipitation. RESULTS When hepatocytes were damaged, HMGB1 translocated from the nucleus to the cytoplasm because of its hyperacetylation and was passively released outside both in vivo and in vitro. After treatment with Sirt1-siRNA or Sirt1 inhibitor (EX527), the hyperacetylated HMGB1 in hepatocytes increased, and Sirt1 activity inhibited by H2O2 could be reversed by Parp1 inhibitor (DIQ). Parp1 and Sirt1 are two NAD+-dependent enzymes which play major roles in the decision of a cell to live or die in the context of stress . We showed that NAD+ depletion attributed to Parp1 activation after DNA damage was caused by oxidative stress in hepatocytes and resulted in Sirt1 activity inhibition. On the contrary, Sirt1 suppressed Parp1 by negatively regulating its gene expression and deace 展开更多
关键词 Sirtuin1 Poly ADP-RIBOSE POLYMERASE 1 High MOBILITY group box-1 HEPATOCYTES Hydrogen PEROXIDE
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雷公藤甲素衍生物雷腾舒的体外代谢研究
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作者 徐叶 杜江波 +4 位作者 冯慧瑾 左建平 许红涛 李援朝 钟大放 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1484-1492,共9页
本课题的目的是研究雷公藤甲素衍生物雷腾舒的体外代谢特征。将雷腾舒分别与人、猴、犬、大鼠或小鼠的肝细胞一起孵育,共鉴定出4个代谢物,分别为环氧水解开环代谢物(M1)、谷胱甘肽结合代谢物(M2)和单氧化并谷胱甘肽结合代谢物(M3-1和M3... 本课题的目的是研究雷公藤甲素衍生物雷腾舒的体外代谢特征。将雷腾舒分别与人、猴、犬、大鼠或小鼠的肝细胞一起孵育,共鉴定出4个代谢物,分别为环氧水解开环代谢物(M1)、谷胱甘肽结合代谢物(M2)和单氧化并谷胱甘肽结合代谢物(M3-1和M3-2)。在人或大鼠肝微粒体孵育体系中,共鉴定出7个代谢物,分别为脱氢代谢物(M4)和单氧化代谢物(M5-1~M5-6)。通过化学半合成和大鼠原代肝细胞孵育的方法获得代谢物的对照品,并与以上代谢物相比对,确认了5个代谢物的结构,分别为12,13-环氧水解开环代谢物M1、12-谷胱甘肽结合代谢物M2、(16S)-单羟基化代谢物M5-1、(2R)-单羟基化代谢物M5-4和(19R)-单羟基化代谢物M5-5。体外活性评价显示,仅(2R)-羟基化代谢物表现出弱的免疫抑制活性,其活性不足母体药物的十分之一,同时毒性也显著降低。提示雷腾舒可能在体内经历代谢失活和减毒。 展开更多
关键词 雷腾舒 药物代谢 代谢物鉴定 肝细胞 肝微粒体
诱导多功能干细胞来源肝样细胞体内抗肝纤维化 预览
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作者 程钢 黄邓高 梁颖 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1384-1389,共6页
背景:诱导多功能干细胞具有与胚胎干细胞相似的自我更新、增殖及分化能力,无来源限制,又不存在伦理问题,有望成为治疗肝病的细胞来源。目的:观察诱导多功能干细胞来源肝样细胞体内移植对肝纤维化的改善作用。方法:采用三步法将诱导多功... 背景:诱导多功能干细胞具有与胚胎干细胞相似的自我更新、增殖及分化能力,无来源限制,又不存在伦理问题,有望成为治疗肝病的细胞来源。目的:观察诱导多功能干细胞来源肝样细胞体内移植对肝纤维化的改善作用。方法:采用三步法将诱导多功能干细胞诱导分化为肝样细胞,采用糖原染色、LDL摄取实验、免疫组织化学法检测诱导分化细胞合成糖原能力、摄取LDL能力和甲胎蛋白、白蛋白、CK18蛋白表达。取成年雄性SD大鼠45只(由中南大学湘雅医学院附属海口医院医学实验动物中心提供),随机分为3组,分别为正常对照组、模型组、细胞移植组,每组15只。模型组、细胞移植组以腹腔注射四氯化碳方法建立肝纤维化模型,造模后第3天,细胞移植组尾静脉注射0.5 mL诱导分化21 d的肝样细胞,细胞浓度为2×109 L-1。细胞移植后4周,取静脉血与肝组织标本,分析肝功能及肝纤维化指标变化与肝病理改变。结果与结论:①诱导分化21 d后,人诱导多能干细胞克隆团已经松散,以类圆形或多角形为主,呈铺路石样分布并密集排列,糖原染色可见细胞胞浆内有大量聚集的粉红色糖原,具备摄取LDL的能力,免疫组织化学法观察甲胎蛋白、白蛋白与CK18呈阳性表达;②细胞移植后4周,与正常组比较,模型组白蛋白水平显著降低(P<0.05),直接胆红素、间接胆红素、谷草转氨酶、谷丙转氨酶及Ⅳ型胶原、血清透明质酸酶、血清Ⅲ型前胶原水平均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,细胞移植组白蛋白水平显著升高(P<0.05),直接胆红素、间接胆红素、谷草转氨酶、谷丙转氨酶及Ⅳ型胶原、血清透明质酸酶、血清Ⅲ型前胶原水平均显著降低(P<0.05);③细胞移植后4周,细胞移植组炎性细胞浸润、肝细胞变性与坏死程度较模型组均有不同程度的改善;④结果表明,诱导多功能干细胞来源的肝样细胞对大鼠肝纤维� 展开更多
关键词 肝纤维化 诱导多功能干细胞 干细胞来源肝样细胞 细胞移植 海南省自然科学基金 肝硬化 肝细胞 组织工程
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蓝莓花色苷提取物干预人肝癌细胞对葡萄糖消耗的作用研究 预览
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作者 张森 吴莹 张久亮 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2019年第4期36-43,278共9页
探究蓝莓花色苷提取物对胰岛素抵抗的人肝癌细胞HepG2细胞对葡萄糖消耗的干预作用。利用MTT实验筛选得到3个品种蓝莓花色苷提取物的最适作用浓度;筛选胰岛素和葡萄糖诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗的最佳浓度;以MTT矫正细胞数量,用葡萄糖... 探究蓝莓花色苷提取物对胰岛素抵抗的人肝癌细胞HepG2细胞对葡萄糖消耗的干预作用。利用MTT实验筛选得到3个品种蓝莓花色苷提取物的最适作用浓度;筛选胰岛素和葡萄糖诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗的最佳浓度;以MTT矫正细胞数量,用葡萄糖氧化酶法检测细胞培养基中葡萄糖的变化来研究蓝莓花色苷提取物的对细胞胰岛素抵抗的干预作用。北陆花色苷提取物在低于200μg/mL的浓度时,灿烂和园蓝花色苷提取物在低于100μg/mL的浓度时,对HepG2细胞活力无明显影响;以诱导剂胰岛素的浓度为1×10^-8mol/L,孵育24h作为诱导条件,其模型效果较佳、对细胞活力改变小且稳定性好;3个品种的蓝莓花色苷提取物在7.8125~31.25μg/mL浓度时,可不同程度促进正常HepG2细胞和胰岛素抵抗的HepG2细胞对葡萄糖的消耗量,且与剂量成正比关系,在31.25μg/mL达到促进最大值,与模型组比较均有极显著差异,糖消耗量分别增加了60%、65%和88%。三个品种的蓝莓花色苷提取物均能较好的预防和改善胰岛素抵抗HepG2细胞对葡萄糖的利用。 展开更多
关键词 蓝莓 花色苷 肝细胞 糖消耗 胰岛素抵抗
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长链非编码RNA肝癌高表达转录本促进人骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化 预览
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作者 李梦 周云 +2 位作者 禹亚彬 王超群 巩玉森 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4656-4661,共6页
背景:骨髓间充质干细胞在体外可以被诱导分化为肝样细胞,但是细胞功能不成熟。研究表明,长链非编码RNA可以影响间充质干细胞的分化,但是关于长链非编码RNA肝癌高表达转录本是否能够参与骨髓间充质干细胞向肝细胞分化还未有报道。目的:... 背景:骨髓间充质干细胞在体外可以被诱导分化为肝样细胞,但是细胞功能不成熟。研究表明,长链非编码RNA可以影响间充质干细胞的分化,但是关于长链非编码RNA肝癌高表达转录本是否能够参与骨髓间充质干细胞向肝细胞分化还未有报道。目的:探讨长链非编码RNA肝癌高表达转录本在人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化中的作用。方法:体外添加细胞因子诱导人骨髓间充质干细胞(购自上海中科院细胞库)向肝样细胞分化,诱导4周后倒置显微镜观察细胞的形态学变化,免疫荧光技术检测肝细胞特异性蛋白的表达,qRT-PCR检测分化过程中肝癌高表达转录本的表达;然后通过慢病毒转染构建稳定表达肝癌高表达转录本的人骨髓间充质干细胞株,以转染阴性对照病毒作为对照组,两组同时添加细胞因子进行肝向细胞诱导分化,qRT-PCR、Western blot检测过表达组与对照组肝细胞特异性基因、蛋白表达的差异。结果与结论:①人骨髓间充质干细胞在体外添加细胞因子下可以成功被诱导分化为肝样细胞,在分化过程中肝癌高表达转录本的表达逐渐增高;②过表达肝癌高表达转录本后促进了人骨髓间充质干细胞诱导分化后肝细胞特异性基因及蛋白的表达;③结果表明,肝癌高表达转录本在人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化中发挥着至关重要的作用,将为细胞治疗肝脏疾病奠定坚实的理论基础。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 肝癌高表达转录本 骨髓间充质干细胞 肝细胞 细胞分化 肝细胞特异性基因
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水飞蓟宾联合壳脂胶囊治疗非酒精性脂肪肝病患者的临床分析 预览
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作者 王吉彦 《泰山医学院学报》 CAS 2019年第6期433-434,共2页
目的探讨水飞蓟宾联合壳脂胶囊治疗非酒精性脂肪肝病(NAFLD)患者的临床疗效,以便为临床医学的发展提供相应的理论与实践依据。方法将93例NAFLD患者按整群随机化将其分成三组,对照组行水飞蓟宾治疗,实验组行壳脂胶囊治疗,联合组行水飞蓟... 目的探讨水飞蓟宾联合壳脂胶囊治疗非酒精性脂肪肝病(NAFLD)患者的临床疗效,以便为临床医学的发展提供相应的理论与实践依据。方法将93例NAFLD患者按整群随机化将其分成三组,对照组行水飞蓟宾治疗,实验组行壳脂胶囊治疗,联合组行水飞蓟宾联合壳脂胶囊治疗,比较三组患者的临床部疗效。结果联合组各项生化指标与临床疗效与实验组和对照组相比有差异(P<0.05),实验组与对照组各项生化指标与临床疗效相比无明显差异(P>0.05)。结论在NAFLD治疗中,水飞蓟宾联合壳脂胶囊治疗效果极佳,有良好的临床引用价值。 展开更多
关键词 水飞蓟宾 壳脂胶囊 非酒精性脂肪肝病 肝细胞
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长期有氧运动对2型糖尿病大鼠抗氧化能力和肝细胞凋亡的影响 预览
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作者 宋海霞 《四川体育科学》 2019年第3期32-35,共4页
本研究旨在探讨长期低强度有氧运动干预对糖尿病大鼠氧化应激和肝细胞凋亡的影响。本研究利用100只大鼠,购买回大鼠后进行一段时间的适应性喂养饲养,选取75只大鼠制造糖尿病模型大鼠,另外25只正常饲养。造模成功后,将模型大鼠随机分为... 本研究旨在探讨长期低强度有氧运动干预对糖尿病大鼠氧化应激和肝细胞凋亡的影响。本研究利用100只大鼠,购买回大鼠后进行一段时间的适应性喂养饲养,选取75只大鼠制造糖尿病模型大鼠,另外25只正常饲养。造模成功后,将模型大鼠随机分为模型对照组(M组)、高强度运动组(HM组)、中强度运动组(MM组)、正常饲养大鼠为正常对照组(C组),经行为期20周的跑步干预、跑步干预结束,次日经行尾部取血,运动结束后1日进行力竭性运动后采血,检测大鼠肌酸激酶(ck)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧歧化酶(SOD)、肝细胞积分光密度值(IOD)。本研究发现,M组、MM组、HM组FINS浓度显著高于C组,p<0.05,MM组和HM组FINS浓度显著低于M组,p<0.05。M组、MM组、HM组FBG浓度显著高于C组,p<0.05,MM组和HM组FBG浓度显著低于M组,p<0.05。M组、MM组、HM组HOMA-IR显著高于C组,p<0.05,MM组和HM组HOMA-IR显著低于M组,p<0.05。MM组在FBG、HOMA-IR指标上显著低于HM组,p>0.05。C组IOD值显著低于M组、MM组、HM组,p<0.05;M组IOD值显著低于MM组,p<0.05;HM组IOD值显著高于MM组,p<0.05。CK和LDH方面,C组、M组显著高于MM和HM组,p<0.05;HM组显著低于MM组,p<0.05。MDA、SOD、GPx方面,C组、M组显著高于MM和HM组,p<0.05;MM组和HM组组间并无显著性差异,p>0.05。本研究认为,长期规律运动能够帮助糖尿病大鼠控制血糖,缓解胰岛素抵抗,增加机体内抗氧化酶数量,增强抗氧化能力。高强度运动会导致肝细胞凋亡增加,但是高强度运动对抗氧化能力的增强最有效。 展开更多
关键词 糖尿病 跑步 肝细胞 凋亡 氧化 氧化运动 肝细胞凋亡
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树突状细胞分泌的外泌体对心肌梗死后肝细胞血脂代谢的影响 预览
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作者 白英楠 李智行 +11 位作者 张亚琦 高微 邵文琦 王晓燕 刘海波 张真中 钱三立 李冰玉 李卓权 邹云增 钱菊英 葛均波 《中国临床医学》 2019年第3期445-449,共5页
目的:探讨树突状细胞(DCs)所分泌的外泌体(DEXs)对心肌梗死(MI)后肝细胞血脂谱的影响及可能的作用机制。方法:用正常心肌细胞或梗死心肌细胞的上清液刺激小鼠DCs,将DCs分泌的DEXs分别命名为Control-DEX和MI-DEX。用两组DEXs处理肝细胞,... 目的:探讨树突状细胞(DCs)所分泌的外泌体(DEXs)对心肌梗死(MI)后肝细胞血脂谱的影响及可能的作用机制。方法:用正常心肌细胞或梗死心肌细胞的上清液刺激小鼠DCs,将DCs分泌的DEXs分别命名为Control-DEX和MI-DEX。用两组DEXs处理肝细胞,酶标测量仪测定肝细胞中脂质的合成和分泌情况。进一步通过蛋白质印迹和实时荧光定量PCR检测肝细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-甾醇调节元件结合蛋白(SREBP)通路相关分子的表达。结果:MI-DEX干预肝细胞后,胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高,mTOR-SREBP通路相关分子表达量增加(P<0.05)。使用SREBP抑制剂后,胆固醇的合成和分泌功能随着mTOR-SREBP表达量的降低而下降(P<0.05)。结论:MI-DEX可通过干扰肝细胞中的mTOR-SREBP途径,在MI后肝细胞的血脂代谢中发挥重要作用。 展开更多
关键词 心肌梗死 树突状细胞 外泌体 血脂异常 mTOR-SREBP途径 肝细胞
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棕榈酸对肝细胞自噬和凋亡的影响 预览
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作者 杜卉 张扬 +6 位作者 孟祥健 吕康甲 吴晓莉 王李卓 邢春燕 何春玲 高家林 《皖南医学院学报》 CAS 2019年第1期5-8,共4页
目的:探究棕榈酸对肝细胞内自噬和凋亡途径的影响。方法:不同浓度棕榈酸处理肝细胞并检测自噬相关蛋白的改变;CCK-8法检测不同浓度棕榈酸对肝细胞活性的影响;棕榈酸培养细胞不同时间,观察细胞数量和形态的改变;棕榈酸培养细胞8h后用DAP... 目的:探究棕榈酸对肝细胞内自噬和凋亡途径的影响。方法:不同浓度棕榈酸处理肝细胞并检测自噬相关蛋白的改变;CCK-8法检测不同浓度棕榈酸对肝细胞活性的影响;棕榈酸培养细胞不同时间,观察细胞数量和形态的改变;棕榈酸培养细胞8h后用DAPI染色观察细胞核形态。结果:棕榈酸使自噬相关蛋白表达增加,但并不表现为剂量依赖性;随着棕榈酸浓度的增加,细胞活力下降;随着棕榈酸作用时间的增加,细胞数量减少;和对照组相比,棕榈酸处理组细胞核致密浓染。结论:棕榈酸能够引起肝细胞凋亡,细胞活力下降,同时通过Erk1/2通路引起肝细胞自噬增强。 展开更多
关键词 自噬 凋亡 棕榈酸 ERK1/2信号通路 肝细胞
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一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法 预览
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作者 张秀莉 郭红云 +3 位作者 张永东 王涛 梁涛 苏海翔 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第9期1469-1472,共4页
目的:寻找一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法。方法:在Seglen两步胶原酶灌注法的基础上加以改进,按门静脉灌注法分离培养大鼠肝细胞,重复10次分离肝细胞实验,观察各项指标结果。采用胰酶、Ⅳ型胶原酶经门静脉灌注,大鼠肝脏肝门部结... 目的:寻找一种简易高效的大鼠原代肝细胞分离方法。方法:在Seglen两步胶原酶灌注法的基础上加以改进,按门静脉灌注法分离培养大鼠肝细胞,重复10次分离肝细胞实验,观察各项指标结果。采用胰酶、Ⅳ型胶原酶经门静脉灌注,大鼠肝脏肝门部结构、肝上及肝下腔静脉封闭保留胶原酶消化分离获取肝细胞,经80目和200目的筛网依次过滤细胞后,细胞悬液分别以1000、500、300r/min离心各5min以纯化肝细胞,以台盼蓝排染法测定细胞活性,HE染色鉴定肝细胞纯度。结果:平均每只成年Wistar雄性大鼠可以获得(1.53±0.31)×10^8个肝细胞,平均获得肝细胞活率可达到94.63%,平均获得肝细胞纯度为96.7%。结论:本实验介绍的方法简便易行,且肝细胞产量较高,活力好,纯度高,适宜在一般条件的实验室推广和应用。 展开更多
关键词 肝细胞 原代培养 胶原酶 胰酶
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高脂肪饮食暴露对雌性大鼠子代糖脂代谢和卵巢功能的影响
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作者 古兰·托合提木拉提 叶尔努尔·吐苏甫汗 +2 位作者 马玉兰 陈继英 玛依努尔·尼亚孜 《中国医师杂志》 CAS 2019年第9期1308-1311,共4页
目的 探讨高脂肪饮食对Sprague Dawley(SD)大鼠雌性后代糖脂代谢和卵巢功能的影响。方法 将雌雄大鼠按照2∶1的比例合笼交配,收集交配成功的孕鼠,随机分为普通饲料组(对照组)和高脂高糖饲料组(观察组),选择雌性仔鼠作为研究对象,待其进... 目的 探讨高脂肪饮食对Sprague Dawley(SD)大鼠雌性后代糖脂代谢和卵巢功能的影响。方法 将雌雄大鼠按照2∶1的比例合笼交配,收集交配成功的孕鼠,随机分为普通饲料组(对照组)和高脂高糖饲料组(观察组),选择雌性仔鼠作为研究对象,待其进入性成熟阶段,腹主动脉取血,应用全自动生化分析仪与酶联免疫吸附试剂盒测定血清中相关因子的含量,应用苏木精-伊红染色法(HE)直接观察肝脏组织与脂肪细胞的分布和数量,以及卵巢细胞内卵泡的数量与结构。结果 与对照组相比,观察组的血糖、血脂、体重、脂肪质量及脂肪系数均显著升高(P <0. 05);卵巢内雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)及黄体生成素(LH)的分泌显著减少(P <0. 05)。HE染色结果显示,与对照组仔鼠相比,观察组仔鼠肝细胞细胞质内出现脂肪空泡、肝细胞排列间隙增加及脂肪细胞数目增多、脂肪滴直径增大;观察组仔鼠卵巢中始基卵泡与初级卵泡的数量呈增多趋势,卵泡直径减小。结论 高脂肪饮食易引起糖脂代谢异常,推测其可能通过雌性子代腹部及臀部脂肪堆积,造成卵巢被脂肪包围,直接导致其功能障碍。 展开更多
关键词 膳食 高脂 肝细胞 脂肪组织 卵泡 大鼠
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