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芜湖地区猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病抗体水平监测与分析 预览 被引量:1
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作者 张海燕 季慕寅 +3 位作者 张冬冬 王巨龙 朱广双 杨艳丽 《安徽科技学院学报》 2019年第1期5-10,共6页
目的:为评估芜湖地区猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病免疫效果,对2013~2016年这3种疫病血清抗体水平进行监测,为芜湖地区综合防控相关疫病提供基础依据。方法:对芜湖地区部分规模猪场和散养户进行血清学调查,共采集血清样品1038份,使... 目的:为评估芜湖地区猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病免疫效果,对2013~2016年这3种疫病血清抗体水平进行监测,为芜湖地区综合防控相关疫病提供基础依据。方法:对芜湖地区部分规模猪场和散养户进行血清学调查,共采集血清样品1038份,使用间接ELISA(酶联免疫吸附试验)进行监测。结果:(1)猪瘟血清抗体平均阳性率为91.9%,芜湖四区四县中血清抗体阳性率最高的为弋江区,最低为南陵县,规模养殖户的血清抗体阳性率略低于散养户。(2)猪口蹄疫血清抗体平均阳性率为83.9%,芜湖四区四县中血清抗体阳性率最高的为三山区,最低为繁昌县,规模养殖户血清抗体平均阳性率高于散养户。(3)高致病性猪蓝耳病血清抗体平均阳性率为65.1%,低于国家免疫要求,需加强针对性免疫措施。结论:监测结果表明,猪瘟、猪口蹄疫血清抗体水平符合国家要求,高致病性猪蓝耳病血清抗体水平低于国家要求。 展开更多
关键词 猪瘟 猪口蹄疫 高致病性猪蓝耳病 抗体水平
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪外周血细胞的动态变化 预览 被引量:1
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作者 孙广力 蔡雪辉 +2 位作者 郑世民 刘永刚 孙刚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第7期 13-15,共3页
目的是通过检测HP-PRRS仔猪外周血细胞数量,探讨HP-PRRSV致病机制。方法是以HuN4株感染60日龄长白仔猪,应用分子生物学技术、全自动血液分析仪,对感染PRRSV仔猪外周血病毒载量、血细胞数量进行检测。结果显示PRRSV感染仔猪外周血病毒载... 目的是通过检测HP-PRRS仔猪外周血细胞数量,探讨HP-PRRSV致病机制。方法是以HuN4株感染60日龄长白仔猪,应用分子生物学技术、全自动血液分析仪,对感染PRRSV仔猪外周血病毒载量、血细胞数量进行检测。结果显示PRRSV感染仔猪外周血病毒载量超过103copies/mL,WBC显著下降(P〈0.05),RBC、HGB、HCT表现出周期性减少和增多(P〈0.05),PLT显著下降(P〈0.05);相关性分析表明,PRRSV载量对数值与WBC、PLT呈现中度负相关(0.40〈r〈0.69),与HGB、MCH存在低度负相关(0.20〈r〈0.39)。表明HP-PRRS仔猪外周血细胞改变可能与PRRSV持续感染、免疫抑制、局部和全身血液循环障碍密切相关。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征 血细胞
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高致病性猪蓝耳病病原核酸的RT-PCR检测 预览 被引量:4
3
作者 王文亮 汪德生 史开志 《贵州畜牧兽医》 2009年第1期 5-6,共2页
对高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV)Nsp2基因缺失变异特征,设计特异性引物,建立RT—PCR方法,对疑似高致病性猪蓝耳病病例进行病原核酸检测,并对扩增所得片段进行克隆测序,通过序列分析以验证RT—PCR扩增的特异性。结果表明:发病猪... 对高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV)Nsp2基因缺失变异特征,设计特异性引物,建立RT—PCR方法,对疑似高致病性猪蓝耳病病例进行病原核酸检测,并对扩增所得片段进行克隆测序,通过序列分析以验证RT—PCR扩增的特异性。结果表明:发病猪为高致病性猪蓝耳病病毒感染,建立的RT-PCR方法能够鉴别诊断经典猪蓝耳病和高致病性猪蓝耳病感染。 展开更多
关键词 高致病性猪蓝耳病 NSP2基因 RT—PCR 诊断
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒F株的分离鉴定
4
作者 王宝杰 蔡兰芬 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第8期27-31,共5页
2012年2月,潍坊某猪场疑似发生高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)。病猪主要表现为呼吸困难,耳朵发绀,皮肤有弥漫性出血点;剖检发现淋巴结、肺脏出血严重。从病死仔猪脾、肺、淋巴结和脑组织中分离得到病毒。将该毒株在Marc-145细胞... 2012年2月,潍坊某猪场疑似发生高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)。病猪主要表现为呼吸困难,耳朵发绀,皮肤有弥漫性出血点;剖检发现淋巴结、肺脏出血严重。从病死仔猪脾、肺、淋巴结和脑组织中分离得到病毒。将该毒株在Marc-145细胞上盲传3代出现典型细胞病变,F3代病毒滴度为106.5TCID50/mL。RT-PCR检测结果显示,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性。用F3代毒株进行动物回归试验,结果符合高致病性PRRSV致病特征。上述结果证明该猪场发生的传染病为高致病性PRRS,并且利用Marc-145细胞成功分离到高致病性PRRSV,命名为F株。本研究为高致病性PRRSV致病特点及其疫苗研制提供物质基础。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征 病毒 分离 鉴定
高致病性猪繁殖与呼吸综合征减毒疫苗在仔猪体内的抗体消长规律 预览 被引量:1
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作者 单玉平 李锋 +2 位作者 王益军 周庆雨 张明敬 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第3期75-77,共3页
本文比较了不同日龄和母源抗体水平的仔猪接种高致病性猪繁殖与呼吸综合征减毒疫苗(JXA1-R株)后的抗体平均值、抗体阳性率和变异系数等指标。结果表明,对于母源抗体水平和整齐度不高的猪群,15日龄和30日龄接种减毒疫苗的免疫效果相似... 本文比较了不同日龄和母源抗体水平的仔猪接种高致病性猪繁殖与呼吸综合征减毒疫苗(JXA1-R株)后的抗体平均值、抗体阳性率和变异系数等指标。结果表明,对于母源抗体水平和整齐度不高的猪群,15日龄和30日龄接种减毒疫苗的免疫效果相似;对于母源抗体水平和整齐度较高的猪群,采用30日龄进行减毒疫苗接种可以产生较好的效果。本研究结果为制定适合连云港地区的高致病性猪繁殖与呼吸综合征免疫程序提供了依据。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 减毒疫苗 抗体
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重组猪α干扰素-白细胞介素-2复合蛋白在猪体内抗高致病性PRRSV活性的研究 被引量:4
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作者 刘淑敏 闫若潜 +5 位作者 吴志明 李桂喜 王东方 刘梅芬 安春霞 赵明军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期855-860,共6页
为了评价猪α干扰素-白细胞介素-2重组复合蛋白(rPoIFN-α-linker-PoIL-2)在猪体内抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP PRRSV)的效果,采用重组猪α干扰素(rPoIFN-α)-重组猪白细胞介素-2(rPoIL-2)等量混合物、单一rPoIFN-α... 为了评价猪α干扰素-白细胞介素-2重组复合蛋白(rPoIFN-α-linker-PoIL-2)在猪体内抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP PRRSV)的效果,采用重组猪α干扰素(rPoIFN-α)-重组猪白细胞介素-2(rPoIL-2)等量混合物、单一rPoIFN-α蛋白、单一rPoIL-2蛋白、rPoIFN-α-linker-PoIL-2复合蛋白等以注射方式进行HP PRRSV的攻毒保护试验,通过分析试验猪体温变化、HP PRRS典型症状维持时间、死亡率、月增重率、病毒血症维持时间等指标,采用RT-PCR和间接ELISA检测攻毒后带毒及抗体产生情况,以评价这些制剂对攻毒猪的保护效果。结果显示,rPoIFN-α-linker-PoIL-2蛋白、rPoIFN-α-rPoIL-2蛋白等量混合物、rPoIFN-α蛋白均可有效抑制HP PRRSV在猪体内的增殖和持续性感染,明显降低发病猪体温,缩短HP PRRS典型症状维持时间,减缓发病症状,降低死亡率;rPoIFN-α-linker-PoIL-2蛋白对HP PRRSV的抑制作用优于单一rPoIFN-α蛋白,稍优于rPoIFN-α-rPoIL-2蛋白等量混合物,显著优于单一rPoIL-2蛋白。上述结果为进一步选取以rPoIFN-α-linker-PoIL-2复合蛋白为主要成分的猪基因工程复合抗病毒制剂研究奠定了基础。 展开更多
关键词 重组猪α干扰素-白细胞介素-2复合蛋白 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗病毒活性
高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒野毒株持续性感染细胞模型的建立 预览 被引量:2
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作者 王小敏 李燕华 +4 位作者 蔺涛 刘闰夏 何孔旺 童光志 袁世山 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期150-156,共7页
旨为建立高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)野毒株持续性感染细胞模型。通过将HP-PRRSV野毒株JX143感染Marc-145细胞,感染的细胞经连续传代35代,建立了稳定的PRRSV持续感染的细胞模型,获得了JX143-Marc-145-P35细胞株。应用RT... 旨为建立高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)野毒株持续性感染细胞模型。通过将HP-PRRSV野毒株JX143感染Marc-145细胞,感染的细胞经连续传代35代,建立了稳定的PRRSV持续感染的细胞模型,获得了JX143-Marc-145-P35细胞株。应用RT-PCR、免疫荧光、空斑形态分析等技术跟踪观察了JX143-Marc145细胞株连续传代过程中病毒在细胞内的存在和生物学特性的变化。为了进一步分析病毒持续性感染过程中基因的特征性变化,通过RT-PCR扩增出JX143-Marc145-P35的全基因,并进行测序和序列分析。结果表明,在细胞模型建立的过程中,细胞病变(Cytopathic effect,CPE)的产生经历了从慢到快又到慢的过程,RT-PCR检测和免疫荧光证实JX143-Marc-145细胞中PRRSV持续稳定存在,表现出病毒持续感染的基本特征。该细胞与正常的Marc145细胞相比,细胞周期无显著差异,但JX143-Marc-145-P35的空斑形态与亲本病毒JX143相比略大。通过序列比较分析,JX143-Marc-145-P35v与亲本猪JX143的同源性为99.4%,存在38个非同义突变,其中,31个位于非结构蛋白,7个位于结构蛋白。试验成功建立了稳定的PRRSV持续性感染细胞模型,细胞周期与正常细胞无显著差异,但病毒在持续性感染过程中无论是基因还是表型都发生了变异,且在体外持续性感染建立的过程中,对于氨基酸突变的选择压力很可能施加于病毒的非结构蛋白和主要糖蛋白。该模型的建立对深入研究病毒与细胞间的相互作用,尤其是PRRSV持续性感染的机制具有重要意义。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 持续性感染 细胞模型
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CD_4~+ T细胞表位优势区的鉴定 预览
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作者 方剑玉 郑其升 +5 位作者 郭小参 侯凤香 王琳 陶红梅 侯继波 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期107-112,共6页
采用RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)临床分离株的M基因(525 bp),通过设计4对引物,把M蛋白分成4段K1(78-112)、K2(98-131)、K3(118-153)、K4(139-174),分别扩增相应基因M1、K1、K2、K3和K4,连接pET-32a(... 采用RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)临床分离株的M基因(525 bp),通过设计4对引物,把M蛋白分成4段K1(78-112)、K2(98-131)、K3(118-153)、K4(139-174),分别扩增相应基因M1、K1、K2、K3和K4,连接pET-32a(+)表达载体,经鉴定后转化Escherichia coliBL21,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blot检测结果显示,分别在相对分子质量30.8×103和24.4×103位置出现目的条带,重组蛋白均可与阳性血清发生特异反应。将蛋白M1免疫BALB/c小鼠,于第三次免2周后从小鼠脾脏分离淋巴细胞,分别用K1、K2、K3、K4蛋白进行体外刺激。流式细胞仪检测分泌IFN-γ细胞因子的T细胞的频率,K1蛋白刺激组显著高于其他组和对照组(P≤0.01)。结论:M1蛋白K1(78-112)段为T细胞表位优势区。 展开更多
关键词 高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白 T细胞表位 表位优势区
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猪α干扰素的原核表达及抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒活性测定 预览 被引量:9
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作者 闫若潜 赵雪丽 +2 位作者 赵明军 盛敏 吴志明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期 570-574,共5页
为了研究高效广谱的基因工程抗病毒制剂,本研究采用PCR技术自猪肝脏总DNA中扩增、克隆猪α干扰素(PoIFN-α)成熟肽基因并亚克隆入pQE30载体进行原核表达,对表达的融合重组猪α干扰素(rPoIFN-α)蛋白通过尿素变性、低浓度蛋白复性液... 为了研究高效广谱的基因工程抗病毒制剂,本研究采用PCR技术自猪肝脏总DNA中扩增、克隆猪α干扰素(PoIFN-α)成熟肽基因并亚克隆入pQE30载体进行原核表达,对表达的融合重组猪α干扰素(rPoIFN-α)蛋白通过尿素变性、低浓度蛋白复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,采用细胞病变抑制法分别测定rPoIFN-α蛋白在PK15细胞上抗水泡性口炎病毒(VSV)增殖活性及在Marc-145细胞上抑制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的增殖活性,以分别评价rPoIFN-α的活性单位及其体外抑制高致病性PRRSV增殖所需的最低浓度。结果表明,克隆的PoIFN-α成熟肽基因全长501bp,编码166个氨基酸;表达的rPoIFN-α蛋白分子量大小20.7ku左右,与预期大小相一致;经纯化后的蛋白纯度在95%以上;纯化的rPoIFN-α蛋白在PK15细胞上抗VSV病毒活性单位为1.4482×10^4IU/mL(5.2×10^6IU/mg),在Marc-145细胞上能完全抑制高致病性PRRSV增殖所需的rPoIFN-α蛋白最低有效剂量为640U/mL(2.3×10^4U/mg)。这些研究结果为新型基因工程抗病毒制剂的开发以及用于高致病性PRRSV性疾病的预防和治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪Α干扰素 表达 纯化 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗病毒活性
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