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暴马丁香花粉萌发适宜培养基的筛选 预览
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作者 魏佳祺 赵爽 +1 位作者 张新超 齐国辉 《林业与生态科学》 2019年第2期190-195,共6页
为了探明影响暴马丁香花粉萌发的因素,筛选适宜花粉萌发的培养基,以暴马丁香新鲜花粉为试材,采用离体培养方法,通过正交设计L16(45)研究培养基中不同浓度的蔗糖、硼酸、氯化钙及pH值4个因素对暴马丁香花粉萌发的影响。结果表明:4个因素... 为了探明影响暴马丁香花粉萌发的因素,筛选适宜花粉萌发的培养基,以暴马丁香新鲜花粉为试材,采用离体培养方法,通过正交设计L16(45)研究培养基中不同浓度的蔗糖、硼酸、氯化钙及pH值4个因素对暴马丁香花粉萌发的影响。结果表明:4个因素对暴马丁香花粉萌发影响的主次关系依次为硼酸、氯化钙、蔗糖和pH值,适宜的蔗糖浓度为100~150g/L,此时的发芽率平均为23.1%~26.6%;适宜的硼酸浓度为0.65g/L,此时的发芽率平均为33.4%;适宜的氯化钙浓度为0.15g/L,此时的发芽率平均为27.5%;适宜的pH值为5,此时的发芽率平均为26.8%。暴马丁香花粉萌发的最适培养基成分组合为蔗糖浓度150g/L、硼酸浓度0.65g/L、氯化钙浓度0.15g/L、pH值5,在此培养基下花粉发芽率达到53.94%。 展开更多
关键词 暴马丁香 花粉萌发 离体培养 培养基
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体外法研究五株酵母菌对牛瘤胃代谢的复合效应 预览
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作者 赵亚军 裴彩霞 +2 位作者 刘强 钞瑞敏 陈婧 《山西农业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期106-112,共7页
[目的]本文旨在研究高精料条件下,产朊假丝酵母(Candida utilis,I)、酿酒酵母A(Saccharomyces cerevisiae A,Ⅱ)、酿酒酵母B(Saccharomyces cerevisiae B,Ⅲ)、酿酒酵母C(Saccharomyces cerevisiae C,Ⅳ)和热带假丝酵母(Candida tropica... [目的]本文旨在研究高精料条件下,产朊假丝酵母(Candida utilis,I)、酿酒酵母A(Saccharomyces cerevisiae A,Ⅱ)、酿酒酵母B(Saccharomyces cerevisiae B,Ⅲ)、酿酒酵母C(Saccharomyces cerevisiae C,Ⅳ)和热带假丝酵母(Candida tropicalis,V)等5株酵母菌及其不同组合对牛瘤胃代谢影响,确定酵母菌之间的复合效应并筛选出优良的酵母菌组合。[方法]通过体外发酵技术,研究并分析5株酵母菌及其组合在添加量为1×108 CFU·30mL-1活菌数发酵液时,对牛瘤胃微生物体外发酵参数的影响。[结果]试验结果显示,不同酵母菌对瘤胃发酵的影响不同。在维持瘤胃内环境稳态方面,Ⅱ与Ⅳ和V存在复合效应,Ⅱ+Ⅳ、Ⅱ+Ⅴ组合较各单一菌株均可显著提高发酵液pH值(P<0.05),降低发酵液总产气量(P<0.05);Ⅲ和Ⅳ、Ⅳ和V在降低氨氮(NH3-N)浓度方面存在复合效应。在调节瘤胃发酵模式方面,Ⅱ、Ⅲ和V以及Ⅱ、Ⅳ和V之间存在复合效应,乙酸比例及乙丙比均显著低于组内各单一及2株组合菌,丙酸比例均显著高于组内各单一及2株组合菌(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ在戊酸形成方面存在复合效应,戊酸比例极显著高于组内各单一及2株组合菌(P<0.01)。[结论]在高精料条件下,Ⅱ+Ⅳ、Ⅱ+Ⅴ、Ⅲ+Ⅳ、Ⅳ+Ⅴ、I+Ⅲ+Ⅳ、Ⅱ+Ⅲ+Ⅴ、Ⅱ+Ⅳ+Ⅴ菌株组合间存在复合效应。其中,Ⅱ+Ⅳ、Ⅱ+Ⅴ组合在维持瘤胃pH值、稳定瘤胃内环境方面效果显著,是该条件下较为优良的酵母组合。 展开更多
关键词 体外法 瘤胃发酵 酵母 复合效应
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依折麦布与瑞舒伐他汀对平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1 mRNA表达的影响
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作者 李佳 申晓彧 《中国医师杂志》 CAS 2019年第4期513-515,520共4页
目的研究依折麦布联合瑞舒伐他汀对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1(Caveolin-1)mRNA表达的影响。方法将大鼠胸主动脉VSMCs分为9个组,分别为空白对照组、泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3、10、30μmol... 目的研究依折麦布联合瑞舒伐他汀对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的平滑肌源性泡沫细胞小凹蛋白-1(Caveolin-1)mRNA表达的影响。方法将大鼠胸主动脉VSMCs分为9个组,分别为空白对照组、泡沫细胞组、不同浓度的依折麦布组(3、10、30μmol/L)、不同浓度的瑞舒伐他汀组(0.1、1.0、5.0μmol/L)、联合组(依折麦布30μmol/L+瑞舒伐他汀5.0μmol/L),油红O染色鉴定泡沫细胞模型,real-time PCR检测各组细胞Caveolin-1 mRNA表达。结果与空白对照组相比,泡沫细胞组Caveolin-1 mRNA表达降低[(0. 248 7±0. 042 0) vs (1. 004 1±0. 017 1)],差异有统计学意义(P<0.05);与泡沫细胞组相比,不同浓度的依折麦布组[(0.371 3±0.025 2)、(0.489 8±0. 027 9)、(0. 726 1±0. 029 1)]及瑞舒伐他汀组[(0. 460 2±0. 022 8)、(0. 623 7±0.028 8)、(0.751 8±0.043 1)]Caveolin-1 mRNA表达增加,各组间差异有统计学意义(P <0.05),且呈一定浓度依赖性(P<0. 05);且联合组(0. 937 6±0. 029 7)与单药组比较,Caveolin-1 mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论依折麦布及瑞舒伐他汀均促进平滑肌源性泡沫细胞中胆固醇的逆向转运(RCT),此过程可能通过上调Caveolin-1 mRNA的表达实现;且两者联合此作用更显著。 展开更多
关键词 依折麦布 瑞舒伐他汀钙 平滑 血管 窖蛋白1 体外研究
长链非编码RNA AL136359.1通过上调AKR1B10的表达对胆管癌细胞增殖和迁移的影响
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作者 蔡民 许浏 +1 位作者 沈兰 张杰 《中国医师杂志》 CAS 2019年第4期532-535,共4页
目的检测AL136359.1在胆管癌组织及细胞中的表达改变,分析其对胆管癌细胞增殖和迁移的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测8例胆管癌组织和4种胆管癌细胞株(QBC939、RBE、HCCC-9810和TFK-1)中AL136359.1的表达。在表达最低的胆管... 目的检测AL136359.1在胆管癌组织及细胞中的表达改变,分析其对胆管癌细胞增殖和迁移的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测8例胆管癌组织和4种胆管癌细胞株(QBC939、RBE、HCCC-9810和TFK-1)中AL136359.1的表达。在表达最低的胆管癌细胞株转染携带AL136359. 1的质粒增加AL136359. 1的表达,qRT-PCR验证转染效率。qRT-PCR和Western blot检测醛酮还原酶1B10(AKR1B10)mRNA和蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell迁移实验检测AL136359. 1高表达对胆管癌细胞增殖能力和迁移能力的影响。结果 AL136359. 1在胆管癌组织的表达(0. 41±0. 05)明显低于癌旁组织(2. 94±0. 44,P<0. 01),在胆管癌细胞株的表达明显低于人正常胆管上皮细胞(P<0. 01),在QBC939细胞的表达最低(P <0. 01)。AL136359. 1高表达可引起AKR1B10 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01)。AL136359. 1高表达可明显抑制胆管癌细胞的增殖能力和迁移能力(P <0.01)。结论 AL136359.1在胆管癌组织和细胞株中表达减少,AL136359. 1高表达可上调AKR1B10基因的表达,参与抑制胆管癌QBC939细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 RNA 长链非编码 细胞增殖 细胞迁移 体外研究
金丝草化学成分及其体外抗HBV活性 预览
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作者 王慧娜 尹志峰 +2 位作者 尹鑫 李洪波 赵桂琴 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1308-1312,共5页
目的研究金丝草Pogonatherum crinitum(Thunb.) Kunth的化学成分及其体外抗HBV活性。方法金丝草70%乙醇提取物正丁醇部位采用大孔树脂、硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。H... 目的研究金丝草Pogonatherum crinitum(Thunb.) Kunth的化学成分及其体外抗HBV活性。方法金丝草70%乙醇提取物正丁醇部位采用大孔树脂、硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。HepG2.2.15细胞模型检测体外抗HBV活性。结果从中分离得到8个化合物,分别鉴定为5-羟基-4′-甲氧基黄酮-7-O-芸香糖苷(1)、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基呫吨酮(2)、芹菜素-7-O-β-D-(6″-E-p-香豆酰基)-葡萄糖苷(3)、大豆素-7,4′-二-O-葡萄糖苷(4)、5,7,3′-三羟基-4′-甲氧基黄酮-3-O-芸香糖苷(5)、N-乙酰苯丙氨酸(6)、焦谷氨酸甲酯(7)、杜鹃花酸(8)。化合物6对HepG2.2.15细胞分泌表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg)有一定的抑制作用,IC50分别为55.5、69.5μg/mL。结论所有化合物均为首次从金发草属植物中分离得到。化合物6有一定的体外抗HBV活性。 展开更多
关键词 金丝草 化学成分 分离鉴定 生物活性 体外
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电场对体外培养软骨细胞的影响 预览
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作者 刘小利 袁小燕 《中国医药指南》 2019年第16期286-287,共2页
软骨细胞的增殖和分化对软骨缺损的修复有重要作用,电刺激软骨细胞可影响软骨细胞增殖、分化、迁移等过程。为了明确电刺激对软骨细胞行为的影响,探讨了对外加电场刺激体外培养软骨细胞的作用方式、作用结果以及作用机制。
关键词 电场 软骨细胞 电刺激 体外培养
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蒙药蓝盆花中化学成分的体外抗癌活性研究 预览
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作者 王国英 韩盟帝 +3 位作者 马飞祥 王媛媛 李春燕 薛培凤 《北方药学》 2019年第1期151-153,共3页
采用MTT法评价蒙药蓝盆花中十五种化合物的体外抗癌活性。结果显示,大多数化合物对MDCK、YAC-1、SMMC-7721具有不同程度的抑制作用,且呈剂量依赖性,高剂量50μg·mL^-1时,对MDCK、YAC-1的抑制率高于50%的只有化合物11和16,而对SMMC-... 采用MTT法评价蒙药蓝盆花中十五种化合物的体外抗癌活性。结果显示,大多数化合物对MDCK、YAC-1、SMMC-7721具有不同程度的抑制作用,且呈剂量依赖性,高剂量50μg·mL^-1时,对MDCK、YAC-1的抑制率高于50%的只有化合物11和16,而对SMMC-7721的抑制率高于50%的则有1、2、3、4、6、7、8、9、12、15和16;多数化合物对K562的抑制作用在中等剂量25μg·mL^-1时最强,9、11、15和16的抑制率大于50%;化合物12对MDCK、K562、SMMC-7221的抑制作用无选择性,均居所有化合物之最;化合物6对MDCK、SMMC-7221的抑制率分别为41.18%、99.42%,表现出高选择性。结果表明,化合物1、2、3、4、6、7、8、9、12、15、16为蒙药蓝盆花的体外抗肝癌活性成分群;化合物12、16、6在药材质量控制中应予以关注。 展开更多
关键词 蓝盆花 化学成分 细胞毒活性 体外
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包载共轭亚油酸-紫杉醇的iRGD修饰的含溶血磷脂的温敏脂质体的细胞摄取和抗肿瘤药效(英文)
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作者 郝艳丽 钟婷 +3 位作者 杜若 张华 刘碧林 张烜 《中国药学:英文版》 CAS CSCD 2019年第2期121-133,共13页
在本研究中,我们制备了iRGD,CRGDK/RGPD/EC)修饰、含溶血磷脂的温敏脂质体(LTSL)载体系统用以递送共轭亚油酸-紫杉醇(CLA-PTX),简称iRGD-LTSL-CLA-PTX。在B16-F10黑色素瘤细胞上评估了iRGD-LTSL-CLA-PTX的体外细胞摄取和体外细胞毒性。... 在本研究中,我们制备了iRGD,CRGDK/RGPD/EC)修饰、含溶血磷脂的温敏脂质体(LTSL)载体系统用以递送共轭亚油酸-紫杉醇(CLA-PTX),简称iRGD-LTSL-CLA-PTX。在B16-F10黑色素瘤细胞上评估了iRGD-LTSL-CLA-PTX的体外细胞摄取和体外细胞毒性。在荷B16-F10黑色素瘤的C57BL/6小鼠上评价了iRGD-LTSL-CLA-PTX的体内抗肿瘤作用。细胞摄取实验结果表明,与SSL-CLA-PTX组相比,在42oC分别孵育2、4和6 h, iRGD-LTSL-CLA-PTX给药组中CLA-PTX的细胞摄取分别增加2.05、3.31和4.83倍。体内抗肿瘤效果表明,与CLA-PTX溶液、LTSL-CLA-PTX、LTSL-CLA-PTX(加热条件)和iRGD-LTSL-CLA-PTX相比,iRGD-LTSL-CLA-PTX(加热条件)可显着抑制B16-F10肿瘤的生长(P<0.01)。iRGD-LTSL-CLA-PTX对B16-F10黑素瘤的体外和体内抗肿瘤作用得到证实,这是iRGD和LTSL共同作用的结果。 展开更多
关键词 iRGD 温敏脂质体 CLA-PTX 抗肿瘤 体外 体内
长链非编码RNA LINC01204上调GPC5基因表达对膀胱癌恶性生物学行为的影响
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作者 张建东 李建文 +1 位作者 赵志平 张雁钢 《中国医师杂志》 CAS 2019年第5期700-704,共5页
目的探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、... 目的探讨长链非编码RNA LINC01204对膀胱癌细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)基因表达的上调作用及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测12例膀胱癌组织及癌旁组织、膀胱癌细胞株BIU-87、T24、J82、5637和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中LINC01204的表达量。以表达量最低的膀胱癌细胞为转染对象,用携带LINC01204的慢病毒颗粒转染细胞(观察组)和阴性对照慢病毒颗粒转染细胞(对照组),qRT-PCR检测两组细胞中LINC01204和GPC5 mRNA表达量。Western blot检测两组细胞中GPC5蛋白的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell小室实验分别测定细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果膀胱癌组织中LINC01204表达量(0.773±0.063)明显低于癌旁组织(3.665±0.330),差异有统计学意义(t=8.612,P<0.001)。膀胱癌细胞株BIU-87(0.320±0.034)、T24(0.515±0.056)、J82(0.644±0.039)、5637(0.147±0.018)中LINC01204表达水平均低于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1(1.009±0.077),差异均有统计学意义(t=8.160,P<0.001;t=5.179,P=0.002;t=4.221,P=0.006;t=10.890,P<0.001),5637细胞表达量最低。观察组5637细胞中LINC01204表达量(11.000±1.028)明显高于对照组(1.019±0.119),差异均有统计学意义(t=9.651,P<0.001)。观察组GPC5 mRNA表达量(4.476±0.347)明显高于对照组(1.046±0.163),差异均有统计学意义(t=8.962,P<0.001)。Western blot结果显示,观察组5637细胞中GPC5蛋白表达上调。与对照组相比,观察组转染LINC01204后的5637细胞从第3天(0.686±0.044 vs 0.536±0.026,t=2.943,P=0.026)开始增殖能力明显降低。观察组5637细胞迁移数[(118.300±16.260)个]明显低于对照组[(208.200±22.930)个],差异均有统计学意义(t=3.198,P=0.019)。观察组5637细胞侵袭数[(50.390±5.368)个]明显低于对照组[(97.480±15.350)个],差异均有统计学意义(t=2.896,P=0.028)。结论 LINC01204可上调GPC5基因的表达,抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移� 展开更多
关键词 RNA 长链非编码 磷脂酰肌醇蛋白聚糖类 膀胱肿瘤 细胞增殖 细胞迁移分析 体外研究
冬凌草甲素对肝癌细胞增殖的抑制作用及其对E-cadherin、Vimentin表达的影响 预览
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作者 史国军 叶兴涛 +3 位作者 屠小龙 施航 董晶 陆宁 《中国中医药科技》 CAS 2019年第4期526-529,共4页
目的:观察冬凌草甲素对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖抑制作用并探讨其作用机制。方法:采用不同浓度的冬凌草甲素作用于人肝癌SMMC-7721细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)... 目的:观察冬凌草甲素对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖抑制作用并探讨其作用机制。方法:采用不同浓度的冬凌草甲素作用于人肝癌SMMC-7721细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、波形蛋白(Vimentin)的表达。荧光定量PCR检测上游基因mRNA的表达。结果:MTT法检测结果显示不同浓度的冬凌草甲素可抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性。免疫组化法显示,人肝癌SMMC-7721细胞的E-cad蛋白随冬凌草甲素浓度增加而表达增加,Vimentin蛋白随药物浓度增加而表达下降。荧光定量PCR结果显示,冬凌草甲素可上调人肝癌细胞E-cad上游基因mRNA的表达,抑制Vimentin上游基因mRNA的表达。结论:冬凌草甲素能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,其机制与上调E-cad蛋白及mRNA的表达,降低Vimentin蛋白及mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 肝肿瘤 上皮细胞间充质转化 E-钙黏蛋白 波形蛋白 体外实验
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衢枳壳黄酮组分抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的作用机制研究 预览
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作者 徐霄 汪洋 +2 位作者 王思为 钟松阳 楼丽君 《中国中医药科技》 CAS 2019年第4期529-532,共4页
目的:研究衢枳壳黄酮组分(the flavonoids from Quzhiqiao,TFQ)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264. 7细胞的抗炎作用机制。方法:LPS(1 mg·L^-1)诱导RAW264. 7细胞建立细胞炎症模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓... 目的:研究衢枳壳黄酮组分(the flavonoids from Quzhiqiao,TFQ)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264. 7细胞的抗炎作用机制。方法:LPS(1 mg·L^-1)诱导RAW264. 7细胞建立细胞炎症模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度TFQ对RAW264.7细胞活性的影响,RT-PCR法检测细胞炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β) mRNA表达情况,Western blot法和免疫荧光法分别检测细胞核因子-κB(NF-κB p65)表达情况和入核情况。结果:TFQ在10~100 mg·L^-1时,对RAW264. 7细胞活性无影响。RT-PCR结果表明,TFQ能够降低LPS诱导的RAW264. 7细胞炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β表达,以TFQ 100 mg·L^-1作用显著(P <0. 05);Western blot法和免疫荧光结果表明,TFQ能够显著抑制p65蛋白表达与入核。结论:TFQ具有抑制LPS诱导的RAW264. 7细胞炎症反应的作用,其机制可能与抑制p65活化减少炎性因子表达有关。 展开更多
关键词 衢枳壳 黄酮组分 RAW264.7 炎性因子 NF-κB 体外实验
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苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白对膀胱癌迁移能力的影响及机制研究
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作者 庞昆 陈波 +4 位作者 郝林 史振铎 周荣升 臧光辉 韩从辉 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期184-188,共5页
目的研究苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法采用MTT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的半数抑制浓度(IC50)后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能... 目的研究苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白(MAP30)对膀胱癌迁移能力的影响及机制。方法采用MTT法计算MAP30对人膀胱癌5637和T24细胞的半数抑制浓度(IC50)后,采用此浓度的MAP30通过细胞划痕迁移实验和Transwell细胞迁移实验来评估两种细胞的迁移能力,并用Western blot分别检测两种肿瘤细胞加入MAP30后基质金属蛋白酶(MMPs)和黏附分子N-cadherin等蛋白的表达。结果细胞划痕迁移实验:5637细胞加药组和对照组在8 h和22 h迁移率比较差异均有统计学意义(P<0.05),T24细胞加药组和对照组间8 h迁移率差异无统计学意义(P>0.05),在22 h迁移率差异有统计学意义(P<0.05)。MAP30干预后,人膀胱癌5637细胞和T24细胞中Vimentin、Fibronectin、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin蛋白的表达明显降低。人膀胱癌5637细胞E-Cadherin表达降低,但人膀胱癌T24细胞未检测到目的条带。结论苦瓜Ⅰ型核糖体失活蛋白MAP30通过抑制上皮-间质细胞转化(EMT)途径和抑制MMPs表达,可以有效抑制人膀胱癌5637和T24细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 核糖体失活蛋白质类 1型 膀胱肿瘤 细胞迁移分析 上皮细胞-间质转化 体外研究
阿霉素通过两种方式诱导乳腺癌耐药细胞株的比较研究
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作者 李晓玲 张莉 《中国医师杂志》 CAS 2019年第2期194-196,共3页
目的通过两种不同方式诱导乳腺癌耐药细胞株(MCF-7/ADM),比较两种诱导方式的生物学特性。方法以乳腺癌MCF-7细胞株为亲本细胞,采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法分别诱导乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2;显微镜下观察细... 目的通过两种不同方式诱导乳腺癌耐药细胞株(MCF-7/ADM),比较两种诱导方式的生物学特性。方法以乳腺癌MCF-7细胞株为亲本细胞,采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法分别诱导乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2;显微镜下观察细胞形态,MTT法检测不同浓度ADM对MCF-7、MCF-7/ADM1和MCF-7/ADM2的抑制率,计算耐药指数(RI);绘制生长曲线,计算细胞倍增时间(Td);经不同浓度阿霉素(ADM)冻存后检测RI变化;流式细胞仪检测细胞周期。结果采用低浓度持续递增法和高浓度冲击递增法成功诱导了乳腺癌耐药细胞株,且对紫杉醇和顺铂产生了交叉耐药性;MCF-7/ADM1的RI高于MCF-7/ADM2(P<0.05);三种细胞株Td分别为:24.01、34.04、32.71 h。两种耐药细胞株冻存后RI变化不明显(P>0.05)。与亲本细胞比较,耐药细胞株S、G2/M期细胞减少,G0/G1期细胞增多。结论两种方式均可诱导耐药细胞株,且其耐药性相对稳定,并可对紫杉醇及顺铂产生交叉耐药,但其生物学特性有所差异,有待进一步研究其耐药机制及逆转靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 抗药性 多柔比星 体外研究
鲑鱼降钙素对磨损颗粒诱导后人巨噬细胞RANK/RANKL/OPG骨溶解通路的影响
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作者 冷屹 胡懿郃 +3 位作者 曾敏 汪龙 李明清 谢杰 《中国医师杂志》 CAS 2019年第1期64-68,共5页
目的通过检测经磨损颗粒刺激诱导后的人巨噬细胞在鲑鱼降钙素干预下骨溶解信号通路中核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)的mRNA表达,探讨鲑鱼降钙素对人巨噬细胞骨溶解通路的影响。方法从一例... 目的通过检测经磨损颗粒刺激诱导后的人巨噬细胞在鲑鱼降钙素干预下骨溶解信号通路中核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)的mRNA表达,探讨鲑鱼降钙素对人巨噬细胞骨溶解通路的影响。方法从一例髋关节假体松动患者的髋臼侧假体周围界膜组织中提取聚乙烯磨损颗粒,MTT法测出人巨噬细胞对聚乙烯磨损颗粒(浓度为0.1 mg/ml)的最佳反应细胞浓度并用于实验。用磨损颗粒刺激人的巨噬细胞,并用不同药物浓度的鲑鱼降钙素干预,将磨损颗粒及巨噬细胞随机分成五组,每组六份:A组为对照组;B组为颗粒组;C组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-8mol/L)组;D组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-10mol/L)组;E组为颗粒+鲑鱼降钙素(10^-12 mol/L)组,共同培养48 h后,qPCR方法检测巨噬细胞RANK、RANKL、OPG的mRNA表达。结果(1)RANK表达:颗粒刺激后B组较A组表达升高,鲑鱼降钙素干预后,C、D组RANK表达量下降。(2)RANKL表达:颗粒刺激后B钮表达较A组升高,药物干预后C、D、E组皆明显低于B组。(3)OPG表达:A组表达最高,颗粒刺激后B组表达下降,药物干预后C、D、E组表达有所上升。(4)RANKL/OPG:B组的RANKIJOPG比率最大,药物干预后,C、D、E组比率皆下降。结论(1)磨损颗粒刺激诱导前后的人巨噬细胞有RANK、RANKL、OPG表达;(2)磨损颗粒有诱导巨噬细胞向破骨细胞转化的作用;(3)鲑鱼降钙素干预后,可影响骨溶解通路各因子(RANK/RANKL/OPG)mRNA表达,阻止向破骨细胞转化。 展开更多
关键词 降钙素 巨噬细胞 核因子ΚB受体活化因子 RANK配体 骨保护素 骨质溶解 体外研究
利拉鲁肽对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞与单核细胞黏附的影响及作用机制
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作者 李虎 束庆 +2 位作者 杨贤 罗雪梅 严思敏 《中国医师杂志》 CAS 2019年第6期830-834,839共6页
目的探究利拉鲁肽对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞与单核细胞黏附的抑制作用及其机制。方法以高糖(20 mmol/L)诱导的内皮细胞为实验对象,加入不同浓度利拉鲁肽(0、0. 3、3、30 nmol/L)预孵育不同时间,将荧光染料标记的单核细胞与内皮细胞... 目的探究利拉鲁肽对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞与单核细胞黏附的抑制作用及其机制。方法以高糖(20 mmol/L)诱导的内皮细胞为实验对象,加入不同浓度利拉鲁肽(0、0. 3、3、30 nmol/L)预孵育不同时间,将荧光染料标记的单核细胞与内皮细胞共育1 h,随后用M199培养基洗去未黏附的细胞,并用荧光酶标仪检测内皮细胞和单核细胞的黏附状况;用qRT-PCR和ELISA法分别检测黏附分子VCAM-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达;用Western-blot法检测IκBα含量、磷酸化程度以及NF-κB p65亚基在细胞质和细胞核的分布情况;用GST-IκBα为底物检测IKK激酶活力。结果高糖刺激可显著增加内皮细胞与单核细胞的黏附(P <0. 01);显著增加内皮细胞黏附分子VCAM-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达(P <0. 05,P <0. 01);显著增加IKK激酶活力(P <0. 01)、IκBα的磷酸化(P <0. 01)以及NF-κB p65亚基在细胞核中的分布(P <0. 05),显著降低IκBα含量(P <0. 01)。利拉鲁肽可浓度依赖地抑制高糖刺激所产生的上述作用(P <0. 05,P <0. 01)。结论利拉鲁肽可能通过抑制IKK激酶的活性,阻断IκBα的磷酸化及NF-κB的质核移位,进而抑制内皮细胞黏附分子mRNA和蛋白的表达,从而影响内皮细胞和单核细胞的黏附。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 内皮细胞 单核细胞 细胞黏附 体外研究
ERH基因对人膀胱癌T24和5637细胞迁移、侵袭的影响
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作者 庞昆 李美丽 +5 位作者 陈波 郝林 史振铎 周荣升 臧光辉 韩从辉 《中国医师杂志》 CAS 2019年第6期856-861,共6页
目的研究基本同源物增强子(ERH)对人膀胱癌T24和5637细胞迁移和侵袭作用的影响。方法将人膀胱癌T24和5637细胞的ERH敲除后,采用细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验验证其迁移和侵袭功能变化,Western blot检测... 目的研究基本同源物增强子(ERH)对人膀胱癌T24和5637细胞迁移和侵袭作用的影响。方法将人膀胱癌T24和5637细胞的ERH敲除后,采用细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验验证其迁移和侵袭功能变化,Western blot检测细胞迁移与侵袭相关蛋白的表达,并通过裸鼠尾静脉转移实验验证敲除ERH基因后在体内对膀胱癌细胞转移能力的影响。结果 (1)细胞划痕实验结果显示,敲除ERH基因后的人膀胱癌5637和T24细胞迁移率均明显降低(P <0. 05);(2)Transwell细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验结果显示,敲除ERH基因后的人膀胱癌5637和T24细胞迁移细胞计数和侵袭细胞计数均明显减少(P <0. 05)。(3)Western blot实验结果显示,敲除ERH基因后的人膀胱癌5637细胞和T24细胞中E-Cadherin表达明显升高(P <0. 05),而Fibronectin、Twist、Vimentin、Snail2蛋白的表达明显降低(P <0. 05)。(4)裸鼠尾静脉转移实验显示,与ERH正常组相比,ERH敲除组小鼠肺转移灶明显减少。结论体外和体内实验均提示,ERH基因敲除影响人膀胱癌T24和5637细胞的迁移与侵袭。 展开更多
关键词 转录因子 细胞周期蛋白质类 膀胱肿瘤 细胞迁移分析 体外研究
β-谷甾醇诱导人胃癌细胞自噬与凋亡的作用及机制研究
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作者 孙玉成 刘晓巍 片光哲 《中国医师杂志》 CAS 2019年第6期866-871,共6页
目的从体内外两个方面研究β-谷甾醇诱导胃癌细胞自噬的作用及机制,为β-谷甾醇抗胃癌作用研究提供实验依据。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,设对照组和实验组,对照组仅用磷酸盐缓冲液(PBS)处理,实验组以不同浓度β-谷甾醇处理。四唑... 目的从体内外两个方面研究β-谷甾醇诱导胃癌细胞自噬的作用及机制,为β-谷甾醇抗胃癌作用研究提供实验依据。方法体外培养人胃癌SGC-7901细胞,设对照组和实验组,对照组仅用磷酸盐缓冲液(PBS)处理,实验组以不同浓度β-谷甾醇处理。四唑盐比色法(MTT)检测β-谷甾醇对胃癌细胞的抑制作用,流式细胞术检测β-谷甾醇对胃癌细胞的促凋亡作用,绿色荧光蛋白标记法(GFP)检测β-谷甾醇对胃癌细胞自噬诱导作用,蛋白印迹法(Western-blot)检测信号通道蛋白磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达。用SGC-7901细胞制造胃癌裸鼠模型,经腹胫注射β-谷甾醇,3 d给药1次,共42d,观察移植瘤重量体积变化,免疫组化法检测移植瘤组织LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ表达。结果实验组β-谷甾醇浓度达20μmol/L时可明显抑制SGC-7901细胞活力,促进SGC-7901凋亡,与对照组比较差异有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01);β-谷甾醇诱导SGC-7901细胞发生自噬效应,(20、40、80、160μmol/L)实验组细胞自噬率(19. 32±2. 51、32. 25±3. 18、57. 45±4. 02、78. 93±4. 21)与对照组(7. 28±2. 83)比较,差异有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01);实验组β-谷甾醇下调p-PI3K、p-AKT及mTOR表达,与对照组比较差异有统计学意义(P <0. 05);实验组抑瘤率为(69. 8±3. 6)%,移植瘤的重量和体积明显减轻变小,与对照组比较差异均有统计学意义(P <0. 05);实验组β-谷甾醇上调裸鼠移植瘤细胞LC3-Ⅱ表达,下调LC3-Ⅰ表达,使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ(7. 76±0. 35)升高,与对照组(0. 32±0. 21)比较,差异有统计学意义(t=7. 28,P=0. 008)。结论β-谷甾醇能抑制胃癌细胞增殖并促进其凋亡,其抗癌机制可能与β-谷甾醇通过PI3K/AKT/m TOR通路诱导细胞自噬作用有关。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 胃肿瘤 自噬 细胞凋亡 体外研究
舒他西林对中国常见临床分离细菌体外抗菌活性研究
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作者 钟巍 李耘 +4 位作者 薛峰 郑波 刘健 杨维维 张佳 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期746-749,共4页
目的评价舒他西林对临床常见病原菌的体外抗菌活性。方法用标准琼脂二倍稀释法,对2013年至2015年临床分离711株细菌进行了舒他西林及对照药的最低抑菌浓度(MIC)测定。结果舒他西林抗菌谱与氨苄西林/舒巴坦相同,对肺炎链球菌、粪肠球菌... 目的评价舒他西林对临床常见病原菌的体外抗菌活性。方法用标准琼脂二倍稀释法,对2013年至2015年临床分离711株细菌进行了舒他西林及对照药的最低抑菌浓度(MIC)测定。结果舒他西林抗菌谱与氨苄西林/舒巴坦相同,对肺炎链球菌、粪肠球菌、肠杆菌科细菌、流感嗜血杆菌和鲍曼不动杆菌具有较好的抗菌作用。但对各种细菌体外抗菌活性均较氨苄西林/舒巴坦弱。结论舒他西林为广谱抗菌药物,体外抗菌活性较氨苄西林/舒巴坦弱,对肠道中细菌影响可能小于氨苄西林/舒巴坦。 展开更多
关键词 舒他西林 体外 抗菌活性
黔野生猕猴桃果酱的制备及体外抗氧化性研究 预览
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作者 李吉达 彭婷 +2 位作者 赵玥 周后敏 赵兴 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第3期119-124,共6页
该文旨在制备一款以黔产野生猕猴桃为主要原料的果酱并对果酱在体外的抗氧化功能进行初步的研究。通过单因素试验探讨白砂糖添加量、柠檬酸添加量、增稠剂添加量等工艺参数对黔产野生猕猴桃果酱质量的影响,从而确定黔产野生猕猴桃果酱... 该文旨在制备一款以黔产野生猕猴桃为主要原料的果酱并对果酱在体外的抗氧化功能进行初步的研究。通过单因素试验探讨白砂糖添加量、柠檬酸添加量、增稠剂添加量等工艺参数对黔产野生猕猴桃果酱质量的影响,从而确定黔产野生猕猴桃果酱基本加工工艺。通过设计正交试验,采用加权评分法与感官评价分析确定黔产猕猴桃果酱的最优工艺配比为白砂糖的添加量为50%,黄原胶0.6%+海藻酸钠0.6%,柠檬酸添加量0.5%。采用清除1,1-二苯基苦基苯肼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)法对果酱在体外的抗氧化性进行测定,试验结果表明本试验中黔产野生猕猴桃果酱对DPPH自由基的IC50值为10.898 mg/mL,该果酱在体外具有一定的抗氧化活性。 展开更多
关键词 野生猕猴桃 果酱 制备 抗氧化性 体外
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岩木瓜提取物的内皮保护和抗血小板聚集作用 预览
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作者 刘秀梅 索朗拉姆 +1 位作者 刘晓岩 王银叶 《药学服务与研究》 CAS 2019年第2期102-105,共4页
目的:研究岩木瓜提取物对内皮细胞氧化损伤的保护作用、体外抗氧化活性,以及抑制血小板聚集的作用。方法:将岩木瓜提取物与内皮细胞孵育1 h后,用150μmol/L的H2O2作用4 h诱导细胞损伤。采用MTT法测定细胞存活率。通过一种无细胞氧化反... 目的:研究岩木瓜提取物对内皮细胞氧化损伤的保护作用、体外抗氧化活性,以及抑制血小板聚集的作用。方法:将岩木瓜提取物与内皮细胞孵育1 h后,用150μmol/L的H2O2作用4 h诱导细胞损伤。采用MTT法测定细胞存活率。通过一种无细胞氧化反应研究其抗氧化作用。以二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)、血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)为诱导剂,采用Born比浊法测定各样品对体外血小板聚集的影响。结果:岩木瓜提取物能保护H2O2诱导的内皮细胞氧化损伤,显著降低氧化产物水平,并且对血小板聚集有一定的抑制作用。结论:岩木瓜提取物可能具有内皮细胞保护作用、体外抗氧化作用,以及一定的抑制血小板聚集作用。 展开更多
关键词 岩木瓜提取物 内皮细胞保护 抗氧化活性 抗血小板聚集 体外
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