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地衣芽胞杆菌FLP/FRT基因编辑系统的构建及验证
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作者 李宗文 李由然 +4 位作者 顾正华 丁重阳 张梁 徐沙 石贵阳 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期458-471,共14页
地衣芽胞杆菌有效的基因编辑工具有限,为了拓展和丰富其基因编辑手段,在地衣芽胞杆菌中构建一个抗性标记可重复使用的FLP/FRT基因编辑系统,并通过敲除α-淀粉酶基因amyL、蛋白酶基因aprE及敲入外源透明颤菌血红蛋白基因vgb对该系统进行... 地衣芽胞杆菌有效的基因编辑工具有限,为了拓展和丰富其基因编辑手段,在地衣芽胞杆菌中构建一个抗性标记可重复使用的FLP/FRT基因编辑系统,并通过敲除α-淀粉酶基因amyL、蛋白酶基因aprE及敲入外源透明颤菌血红蛋白基因vgb对该系统进行初步验证。首先以温敏质粒pNZT1为载体分别构建amyL和aprE基因敲除质粒pNZTT-AFKF和pNZTT-EFKF,两个敲除质粒各自包含针对目标基因的同源臂、抗性基因及同向的FRT位点;将敲除质粒转化地衣芽胞杆菌并经过两次同源交换过程实现目标基因的敲除;最后导入一个FLP重组酶表达质粒通过FLP/FRT系统的重组作用介导抗性基因的回收。为进一步验证本系统的实用性及编辑效率,构建了包含透明颤菌血红蛋白编码基因vgb表达盒及基因组丙酮酸甲酸裂解酶编码基因pflB敲除盒的重组质粒pNZTK-PFTF-vgb,并以此进行外源基因vgb在基因组上的定向敲入。结果显示,成功敲除amyL及aprE并回收了抗性标记卡那霉素基因,敲除后淀粉酶活和蛋白酶活分别减少95.3%和80.4%;vgb基因成功整合入基因组pflB位点并回收了抗性标记四环素基因,并利用荧光定量PCR技术检测到vgb的整合表达。文中首次建立了一个适用于地衣芽胞杆菌的、抗性标记可重复使用的FLP/FRT基因编辑系统,并进行了基因敲除及基因敲入验证,为地衣芽胞杆菌遗传改造提供了良好的方法参考。 展开更多
关键词 地衣芽胞杆菌 FLP/FRT 温敏质粒 基因敲除 敲入
某GDI发动机早燃超级爆震控制策略试验研究 预览
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作者 王福志 苏方旭 刘广丰 《小型内燃机与车辆技术》 2019年第2期7-11,26共6页
发动机爆震信号可用于监测发动机普通爆震情况,而通过滤波和窗口调整处理的爆震信号可用于对早燃超级爆震情况进行判断。缸内压力传感器可用于对爆震信号进行标定,采用标定后的爆震信号监测发动机早燃超级爆震,研究喷油和气门正时策略... 发动机爆震信号可用于监测发动机普通爆震情况,而通过滤波和窗口调整处理的爆震信号可用于对早燃超级爆震情况进行判断。缸内压力传感器可用于对爆震信号进行标定,采用标定后的爆震信号监测发动机早燃超级爆震,研究喷油和气门正时策略对早燃超级爆震的影响。研究结果表明,喷油策略对早燃超级爆震和碳烟颗粒排放物的影响规律基本相同。扫气在降低残余废气的同时,可降低早燃超级爆震倾向。在一定范围内,提前第1次喷油时刻,推迟第2次喷油时刻,并适当降低第2次喷油比例,可改善燃油雾化,减少燃油撞壁,同时可利用燃油蒸发吸热降低缸内温度,提高进气充量,减少早燃超级爆震。进气门提前开启,排气门适当滞后关闭,增加扫气效果,并适当加浓混合气,早燃超级爆震敏感性降低。采用爆震传感器监测早燃超级爆震,优化后的策略能在催化器温度不超温的前提下显著降低发动机早燃超级爆震。 展开更多
关键词 早燃 爆震 超级爆震 喷油策略 气门正时策略
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水牛asf1a基因克隆及高效敲除靶位点的筛选
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作者 刘晓华 邓凯 +8 位作者 范威宏 黄永军 杜姗姗 冯万有 潘尔科 卢嘉卡 文冬梅 陆凤花 石德顺 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期568-574,共7页
本研究旨在对水牛anti-silence factor 1a (asf1a)基因进行克隆并行生物信息学分析,并进一步筛选基于CRISPR/Cas9基因编辑系统的高效敲除asf1a基因位点。根据NCBI公布的牛asf1a基因mRNA序列设计特异性引物,以水牛GV期卵母细胞RNA反转录... 本研究旨在对水牛anti-silence factor 1a (asf1a)基因进行克隆并行生物信息学分析,并进一步筛选基于CRISPR/Cas9基因编辑系统的高效敲除asf1a基因位点。根据NCBI公布的牛asf1a基因mRNA序列设计特异性引物,以水牛GV期卵母细胞RNA反转录后的cDNA作为模板,通过PCR技术克隆获得asf1a基因序列片段,利用生物信息学分析方法,对克隆得到的序列进行和相应翻译的蛋白质进行了分析。在克隆得到的水牛asf1a基因序列上筛选3个PAM位点,并根据PAM位点构建3个gRNA载体(g1、g2、g3)以及相应的RGS载体,将pcDNA3.1-h Cas9连同gRNA、RGS 3种质粒按照3∶1∶1比例共转293T细胞,筛选高效的CRISPR/Cas9敲除位点。试验以水牛GV期的卵母细胞RNA作为模板,通过RT-PCR技术克隆获得asf1a基因序列,并据测序结果设计靶向区域筛选高效asf1a基因敲除位点。结果发现,水牛asf1a基因CDS区全长615 bp,编码204个氨基酸;多重序列分析显示,水牛asf1a基因核苷酸序列与黄牛、绵羊、猪、人、小鼠同源性分别达到了99%,98%,97%,96%,93%;蛋白质结构预测分析发现存在ASF1-hist-chap等结构,二级结构含有9个α螺旋、12个β折叠、14个T转角、14个无规则卷曲。系统进化树分析表明,水牛和黄牛亲缘性最接近。根据水牛asf1a设计的敲除载体转染293T和成纤维细胞后,细胞基因组进行T7E1酶切的结果表明,g1位点对水牛成纤维细胞敲除效率最高,达到93.82%,同时,sanger测序表明效率达17/20。本研究成功克隆了水牛asf1a基因和分析了其生物学信息,同时筛选出了asf1a的高效敲除位点,为研究水牛asf1a基因功能奠定基础。 展开更多
关键词 水牛 asf1a 克隆 CRISPR/Cas9 敲除
NtCycB2基因表达对烟草腺毛发生的影响 预览
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作者 孟盈 闫筱筱 +4 位作者 王召军 张洪映 杨欣玲 杨永锋 崔红 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期85-92,98共9页
烟草腺毛是烟草表皮细胞的特化结构,对烟株抗性及烟叶品质具有重要影响。为探索烟草腺毛密度的分子调控途径,本文对烟草B型细胞周期蛋白基因NtCycB2进行了同源克隆和生物信息学分析,并对其表达特性和生物学功能进行研究。结果表明该基... 烟草腺毛是烟草表皮细胞的特化结构,对烟株抗性及烟叶品质具有重要影响。为探索烟草腺毛密度的分子调控途径,本文对烟草B型细胞周期蛋白基因NtCycB2进行了同源克隆和生物信息学分析,并对其表达特性和生物学功能进行研究。结果表明该基因包含333bp的编码区,编码110个氨基酸,该序列在栽培烟草不同类型、不同品种间高度保守,但与SlCycB2和AtCycB2同源性分别为71.05%和52.38%。RT-PCR分析表明NtCycB2在叶面腺毛和花中的表达水平较高,并受到盐、温度、MeJA等逆境信号的诱导;分别利用基因过表达和基因编辑技术获得了NtCycB2过量表达和敲除株系;植株腺毛形态学观察发现NtCycB2过表达植株腺毛密度显著减少,基因敲除植株分泌型腺毛密度显著增加,而非分泌型腺毛变化不大,该研究表明NtCycB2对烟草分泌型腺毛发生具有明显的负调控作用,在烟草腺毛密度分子调控和叶面化学定向改良中具有较大潜力。 展开更多
关键词 烟草 NtCycB2 过表达 基因编辑 腺毛密度
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构建EIF5A2基因敲除Cal27细胞株及功能分析 预览
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作者 刘艳艳 胡晔华 +3 位作者 王凤光 汪育苗 刘娜 袁晓红 《北京口腔医学》 CAS 2019年第1期15-19,共5页
目的运用CRISPR/Cas9技术构建EIF5A2基因敲除Cal27细胞系,观察EIF5A2在口腔鳞状细胞癌增殖与迁移中的作用。方法根据EIF5A2基因结构域,设计2个CRISPR靶向位点,利用pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin构建2个导向RNA(sgRNA)质粒。将sgRNA质粒与... 目的运用CRISPR/Cas9技术构建EIF5A2基因敲除Cal27细胞系,观察EIF5A2在口腔鳞状细胞癌增殖与迁移中的作用。方法根据EIF5A2基因结构域,设计2个CRISPR靶向位点,利用pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin构建2个导向RNA(sgRNA)质粒。将sgRNA质粒与pST1374-NLS-flag-linker-Cas9共转染至Cal27细胞中,用嘌呤霉素和杀稻瘟菌素筛选,并挑取单克隆。将单克隆细胞的DNA进行目的片段扩增,经凝胶电泳及测序鉴定后筛选出大片段敲除细胞株Cal27-2C5及碱基突变株Cal27-2D1。real time PCR及WesternBlot鉴定两株细胞系中EIF5A2的表达情况。用Transwell实验及CCK8分别检测EIF5A2敲除对Cal27细胞的体外迁移能力及体外增殖能力的影响。结果与对照组相比,Cal27-2C5及Cal27-2D1细胞株中EIF5A2在mRNA水平上表达均明显降低。在蛋白水平上,Cal27-2C5及Cal27-2D1细胞株中EIF5A2蛋白均基本不表达。敲除EIF5A2可明显降低Cal27细胞的体外迁移能力,而对Cal27细胞体外增殖能力没有明显影响。结论成功构建EIF5A2基因敲除Cal27细胞株Cal27-2C5和Cal27-2D1,并初步验证EIF5A2可以影响Cal27细胞的体外迁移能力。 展开更多
关键词 EIF5A2 CRISPR/Cas9 口腔鳞状细胞癌 基因敲除 迁移
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TMEM43-S358L mutation enhances NF-κBTGFp signal cascade in arrhythmogenic right ventricular dysplasia/cardiomyopathy
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作者 Guoxing Zheng Changying Jiang +9 位作者 Yulin Li Dandan Yang Youcai Ma Bing Zhang Xuan Li Pei Zhang Xiaoyu Hu Xueqiang Zhao Jie Du Xin Lin 《蛋白质与细胞:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第2期104-119,共16页
Arrhythmogenic right ventricular dysplasia/cardiomyopathy(ARVD/C)is a genetic cardiac muscle disease that accounts for approximately 30%sudden cardiac death in young adults.The Ser358Leu mutation of transmembrane prot... Arrhythmogenic right ventricular dysplasia/cardiomyopathy(ARVD/C)is a genetic cardiac muscle disease that accounts for approximately 30%sudden cardiac death in young adults.The Ser358Leu mutation of transmembrane protein 43(TMEM43)was commonly identified in the patients of highly lethal and fully penetrant ARVD subtype,ARVD5.Here,we generated TMEM43 S358L mouse to explore the underlying mechanism.This mouse strain showed the classic patholo.gies of ARVD patients,including structural abnormalities and cardiac fibrofatty.TMEM43 S358L mutation led to hyper-activated nuclear factor kB(NFkB)activation in heart tissues and primary cardiomy.ocyte cells.Importantly,this hyper activation of NF-κB directly drove the expression of pro-fibrotic gene,transforming growth factor beta(TGFβ),and enhanced downstream signal,indicating that TMEM43 S358L mutation up-regulates NF-κB-TGFβ signal cascade during ARVD cardiac fibrosis.Our study partially reveals the regulatory mechanism of ARVD development. 展开更多
关键词 TMEM43 ARVD NF-ΚB TGFβ FIBROSIS KNOCK-IN mouse
在O2/CO2环境下汽油燃烧特性研究
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作者 姚磊 朱昌吉 刘宇 《工程热物理学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期945-952,共8页
基于定容燃烧可视化光学平台,模拟缸内直喷(GDI)汽油机缸内燃烧环境,研究氧气浓度对汽油在O2/CO2无氮环境下均质燃烧特性以及火焰传播特性的影响。研究结果表明在初始氧气压力一定时,随着氧气浓度的提高(45%~60%),燃料燃烧的峰值压力略... 基于定容燃烧可视化光学平台,模拟缸内直喷(GDI)汽油机缸内燃烧环境,研究氧气浓度对汽油在O2/CO2无氮环境下均质燃烧特性以及火焰传播特性的影响。研究结果表明在初始氧气压力一定时,随着氧气浓度的提高(45%~60%),燃料燃烧的峰值压力略有下降,但是峰值压力时刻明显提前,着火落后期缩短,明显燃烧期缩短了近3.2~3.5倍,最大放热率增加了近2.5倍,压力升高率显著提高,燃烧速度明显加快,燃烧更加剧烈。当初始氧气压力低于0.16MPa时,可以避免爆震发生,随着初始氧气压力和氧气浓度的增加,燃烧爆震强度增加,合理的选择氧气压力和氧气浓度可以有效的抑制爆震。 展开更多
关键词 O2/CO2环境 燃烧 爆震 火焰传播速度
乙醇DI/汽油PFI发动机性能与排放特性 预览
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作者 康瑞 冯登全 +2 位作者 卫海桥 华剑雄 周磊 《内燃机学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期25-31,共7页
基于一台点燃式发动机,对缸内直喷(DI)乙醇和进气道喷射(PFI)汽油的复合喷射方式进行了研究.与传统喷油模式相比,采用乙醇-汽油复合喷射能够提升发动机动力性.随直喷乙醇比例增加,缸内爆发压力升高;受乙醇燃烧速率和缸内冷却效果的综合... 基于一台点燃式发动机,对缸内直喷(DI)乙醇和进气道喷射(PFI)汽油的复合喷射方式进行了研究.与传统喷油模式相比,采用乙醇-汽油复合喷射能够提升发动机动力性.随直喷乙醇比例增加,缸内爆发压力升高;受乙醇燃烧速率和缸内冷却效果的综合影响,着火滞燃期和燃烧持续期先缩短后延长.最佳点火时刻下,单一汽油喷射(PFI和GDI)爆震频次超过10%,,发动机发生轻微爆震,而复合喷射乙醇比例超过20%,可消除爆震;随直喷乙醇比例增加,循环波动系数降低,当量燃油消耗率降低,指示热效率提高,复合喷射相对PFI可提高发动机热效率3.8%;同时,能够有效降低NOx和HC常规气体排放物.通过采用相对较高的缸内直喷乙醇比例,复合喷射能够提高发动机热效率及抑制爆震并降低常规气体排放物. 展开更多
关键词 点燃式发动机 乙醇 爆震 常规气体排放物
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二次喷射对火花辅助压燃燃烧及爆震特性影响的试验研究 预览
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作者 陈锐 董凯 +5 位作者 宫雨 梁俊洁 李岩 卫海桥 周磊 华剑雄 《天津大学学报:自然科学与工程技术版》 CSCD 北大核心 2019年第2期157-165,共9页
火花辅助压燃(SACI)是一种由火焰传播诱导未燃混合气自燃的新型燃烧方式.但SACI爆震现象限制了热效率的进一步提升.针对这一问题,基于一台高压缩比缸内直喷汽油机,首先对SACI燃烧及爆震界定进行了分析;然后开展了二次喷射策略对SACI燃... 火花辅助压燃(SACI)是一种由火焰传播诱导未燃混合气自燃的新型燃烧方式.但SACI爆震现象限制了热效率的进一步提升.针对这一问题,基于一台高压缩比缸内直喷汽油机,首先对SACI燃烧及爆震界定进行了分析;然后开展了二次喷射策略对SACI燃烧及爆震特性影响的试验研究.结果表明:火花点火是SACI燃烧的一个重要环节,点火过于提前会导致SACI爆震的产生.SACI爆震的压力振荡幅值(MAPO)要高于SI爆震且分布更加离散.二次喷射在燃烧室内可以形成不同的燃油浓度分层,对SACI有良好的爆震抑制效果.当采用喷射比例4∶1、一次喷射时刻300°,CABTDC、二次喷射时刻140°,CABTDC时,通过对爆震的抑制获得最优燃烧特性,循环变动系数降低了1.18%,,有效燃油消耗率降低了约3.11%,有效热效率提高了1.05%. 展开更多
关键词 火花辅助压燃 二次喷射 爆震 压力振荡
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点燃式液压自由活塞发动机高增压燃烧过程的试验与仿真研究 预览
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作者 付长来 汪洋 +3 位作者 耿鹤鸣 李智勇 徐帅 甄旭东 《内燃机工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期8-14,共7页
在快速压缩-膨胀机上进行试验,模拟液压自由活塞发动机(hydraulic free piston engine,HFPE)在不同缸内初始压力下的单次燃烧做功过程,并利用OpenFOAM和CONVERGE三维计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)仿真平台进行增压仿... 在快速压缩-膨胀机上进行试验,模拟液压自由活塞发动机(hydraulic free piston engine,HFPE)在不同缸内初始压力下的单次燃烧做功过程,并利用OpenFOAM和CONVERGE三维计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)仿真平台进行增压仿真研究。结果表明:液压自由活塞发动机随着缸内初始压力的增大,相同压缩比下发动机循环周期缩短,活塞在上止点附近停留时间缩短,爆震极限压缩比增大,抗爆能力增强。适当提高缸内初始压力有利于提高指示效率,当缸内初始压力提高至0.15MPa时,发动机指示效率由0.30提高至0.31,但当初始压力达到0.20MPa后,指示效率又降至0.30。针对缸内初始压力进一步增大后出现的效率降低问题,在仿真研究中发现采用多火花塞点火方案,即使在初始压力0.80MPa的条件下也能得到较高的指示效率而不发生爆震。 展开更多
关键词 液压自由活塞发动机 快速压缩-膨胀机 高增压 爆震
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机油元素组分对低速早燃与超级爆震的影响 预览
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作者 吴天宝 范亚东 +1 位作者 李雪松 许敏 《车用发动机》 北大核心 2019年第2期22-27,共6页
随着发动机的逐步强化,发动机低速大负荷工况下爆震倾向增加,而非正常着火的低速早燃现象是超级爆震的必要不充分条件。通过一台增压直喷发动机的台架试验,得出了早燃发生时刻的提前程度与缸压振荡峰峰值和最大缸压之间的关系,阐述了早... 随着发动机的逐步强化,发动机低速大负荷工况下爆震倾向增加,而非正常着火的低速早燃现象是超级爆震的必要不充分条件。通过一台增压直喷发动机的台架试验,得出了早燃发生时刻的提前程度与缸压振荡峰峰值和最大缸压之间的关系,阐述了早燃发生时刻与其发展结果之间的关联;探讨了不同元素组分的机油添加剂对早燃发生频次的影响,重点阐述了机油添加剂中镁元素的作用,同时分析了钙元素对早燃发展为超级爆震发生的次数、概率以及超级爆震强度的影响。 展开更多
关键词 直喷式汽油机 早燃 爆震 机油 元素组分
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某发动机铸铁缸体热负荷分析及优化 预览
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作者 朱三平 钟翔波 《装备制造技术》 2019年第2期85-87,共3页
某发动机把缸体由铸铝切换成铸铁时,发现爆震严重,性能降低。建立了简化的缸体有限元模型,进行了热负荷分析,结果表明缸套内表面顶部缸间部位出现热量积聚现象,是诱发爆震的主要原因。对缸体水套进行了优化设计,并进行了热负荷分析,结... 某发动机把缸体由铸铝切换成铸铁时,发现爆震严重,性能降低。建立了简化的缸体有限元模型,进行了热负荷分析,结果表明缸套内表面顶部缸间部位出现热量积聚现象,是诱发爆震的主要原因。对缸体水套进行了优化设计,并进行了热负荷分析,结果显示最高温度明显降低,缸套内表面上部温度普遍低于200℃,有利于爆震的抑制。根据缸体优化设计方式制造的新状态缸体样件在台架试验中证明爆震得到有效控制,动力油耗接近铸铝缸体的水平。 展开更多
关键词 缸体 热负荷 爆震 有限元
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EGR对Miller-Otto循环汽油机高负荷工况的影响
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作者 徐玉梁 刘洋 +2 位作者 祖炳锋 王振 杜建秋 《机械设计》 CSCD 北大核心 2018年第7期8-13,共6页
高压缩比Miller-Otto循环由于其较高的热效率在汽油机上得到广泛关注,Miller循环基础上采用Otto循环是为保证高负荷工况动力性。而在高压缩比的Otto循环工作区爆震更为突出。文中针对Miller-Otto循环高负荷工况爆震及油耗问题,在不同转... 高压缩比Miller-Otto循环由于其较高的热效率在汽油机上得到广泛关注,Miller循环基础上采用Otto循环是为保证高负荷工况动力性。而在高压缩比的Otto循环工作区爆震更为突出。文中针对Miller-Otto循环高负荷工况爆震及油耗问题,在不同转速的高负荷工况引入EGR进行对比分析,结果表明:EGR一方面对高负荷工况爆震有明显抑制作用,同时高速工况油耗改善较为明显。EGR=14%时4 000 r/min@1 MPa油耗改善11.56%;另一方面抑制高负荷工况爆震的同时能够提高压缩比,由13提高到13.98,进而提高中低负荷工况Miller循环热效率。 展开更多
关键词 EGR Miller-Otto循环 高负荷工况 爆震 油耗 高压缩比
CB1 receptor activation on VgluT2-expressing glutamatergic neurons underlies Δ9-tetrahydrocannabinol(Δ9-THC)-induced aversive effects in mice
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作者 HAN Xiao HE Yi +4 位作者 BI Guo-hua ZHANG Hai-ying SONG Rui LI Jin XI Zheng-xiong 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期715-716,共2页
OBJECTIVE Cannabis can be rewarding or aversive. Cannabis reward is believed to be mediated by activation of cannabinoid CB1 receptors (CB1Rs) on GABAergic neurons that disinhibit dopaminergic neurons in the ventral t... OBJECTIVE Cannabis can be rewarding or aversive. Cannabis reward is believed to be mediated by activation of cannabinoid CB1 receptors (CB1Rs) on GABAergic neurons that disinhibit dopaminergic neurons in the ventral tegmental area (VTA). However, little is known about the mechanisms underlying cannabis aversion in rodents. Our study aimed at dig the mechanisms underlying cannabis aversion. METHODS We first created CB1-floxed mice and then generated conditional CB1-knockout mice (VgluT2-CB1-/- ) in glutamatergic neurons that express vesicular glutamate transporter 2 (VgluT2). We then used immunohistochemistry and RNAscope in situ hybridization assays to examine whether CB1Rs are expressed in VTA GABAergic neurons and glutamatergic neurons. We also used Cre-dependent viral vector to express light-sensitive channelrhodopsin-2 into VTA glutamatergic neurons. Next, conditioned place preference and intracranial self-stimulation (ICSS) maintained by optical activation of VTA glutamatergic neurons were employed to evaluate the effects of Δ9-THC on brain reward function. RESULTS CB1Rs are found not only on VTA GABAergic neurons, but also on VTA glutamatergic neurons that express vesicular glutamate transporter 2 (VgluT2). Photoactivation of VTA glutamatergic neurons produced robust intracranial self-stimulation (ICSS) behavior, which was dose-dependently blocked by DA receptor antagonists, but enhanced by cocaine. In contrast, Δ9- tetrahydrocannabinol (Δ9-THC), the major psychoactive component of cannabis, produced dose-dependent conditioned place aversion and a reduction in the above optical ICSS in VgluT2- cre control mice, but not in VgluT2-CB1-/- mice. CONCLUSION Activation of CB1Rs in VgluT2- expressing glutamate neurons produces aversive effects that might explain why cannabinoid is not rewarding in rodents and might also account for individual differences in the hedonic effects of cannabis in humans. 展开更多
关键词 CANNABIS CANNABINOID receptor type 1 RNAscope conditioned KNOCK-OUT intracrnialself-stimulation
基于非线性小波变换的汽油机爆震强度识别 预览
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作者 李宁 周瑞 《内燃机学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期83-89,共7页
为提高利用振动信号检测汽油机爆震强度的精度,提出了一种基于非线性小波变换的爆震强度识别方法.首先,采用非线性小波变换对振动信号进行分解,提取出爆震特征.然后,在包含爆震特征的小波细节分量上计算一组能够表征爆震强度的时... 为提高利用振动信号检测汽油机爆震强度的精度,提出了一种基于非线性小波变换的爆震强度识别方法.首先,采用非线性小波变换对振动信号进行分解,提取出爆震特征.然后,在包含爆震特征的小波细节分量上计算一组能够表征爆震强度的时域统计特征参数.最后,将这些统计特征参数输入到人工智能分类器进行爆震强度识别.对某汽油机进行了爆震台架试验,并对提出的方法进行了验证.结果表明:非线性小波变换可以清晰地从缸盖振动信号中检测出微弱的爆震冲击特征;同时,采用支持向量机能够获得更优的爆震强度识别精度和泛化性能. 展开更多
关键词 汽油机 爆震 非线性小波变换 支持向量机
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p11对神经细胞自噬的影响及其作用机制
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作者 冯来鹏 郭继强 +2 位作者 杨婷婷 沈颖 王辉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第1期82-88,共7页
该研究主要探讨p11(又称为S100A10)蛋白质对神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)和小鼠海马细胞自噬的影响及其作用机制。该文利用p11过表达质粒pcDNA3.0-p11和p11基因敲低质粒Si-p11分别转染至SH-SY5Y内,24 h后提取其蛋白质和总RNA测其自... 该研究主要探讨p11(又称为S100A10)蛋白质对神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)和小鼠海马细胞自噬的影响及其作用机制。该文利用p11过表达质粒pcDNA3.0-p11和p11基因敲低质粒Si-p11分别转染至SH-SY5Y内,24 h后提取其蛋白质和总RNA测其自噬相关基因的mRNA和蛋白质水平;利用C57BL/6J小鼠腹腔注射丙咪嗪,来上调小鼠海马p11的表达水平,然后提取其海马组织的蛋白质和总RNA测其自噬相关基因的表达情况。该研究结果显示,p11基因过表达对神经细胞自噬发挥下调作用,p11敲低后对自噬发挥上调作用;p11基因敲除小鼠的海马细胞的自噬是上调的,海马细胞p11高表达后自噬是下调的。因此认为,p11对于神经细胞自噬有可能发挥下调作用。 展开更多
关键词 基因敲低 转染 基因敲除 丙咪嗪 C57BL/6J
双离合变速器齿轮敲击的试验研究 预览
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作者 马安康 顾灿松 +1 位作者 袁兆成 王东 《汽车技术》 CSCD 北大核心 2018年第4期15-18,共4页
通过对某款搭载湿式双离合变速器车型车内噪声与变速器近场噪声的分析,确定了易发生变速器齿轮敲击的工况。结合变速器台架试验,提出一种评价变速器齿轮敲击强度的指标,并利用该指标分析了润滑油温、平均扭矩、激励频率对敲击强度的影... 通过对某款搭载湿式双离合变速器车型车内噪声与变速器近场噪声的分析,确定了易发生变速器齿轮敲击的工况。结合变速器台架试验,提出一种评价变速器齿轮敲击强度的指标,并利用该指标分析了润滑油温、平均扭矩、激励频率对敲击强度的影响。最后引入相干分析,通过计算各空套齿轮对变速器壳体振动的贡献量,确定了对变速器齿轮敲击影响程度较大的空套齿轮。 展开更多
关键词 双离合变速器 齿轮 噪声 敲击
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基因组靶向敲入技术在模式动物中的发展与应用:以斑马鱼为例
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作者 韩冰舟 张亚鸽 张博 《生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第9期967-979,共13页
基因组靶向敲入是指将特定的外源核酸序列转入细胞或个体基因组中的特定位点,以实现条件性基因敲除、单碱基或序列替换、细胞或基因标记等多种精确和(或)复杂的基因组靶向修饰。通过长同源臂介导的同源重组(HR)和微同源序列介导的... 基因组靶向敲入是指将特定的外源核酸序列转入细胞或个体基因组中的特定位点,以实现条件性基因敲除、单碱基或序列替换、细胞或基因标记等多种精确和(或)复杂的基因组靶向修饰。通过长同源臂介导的同源重组(HR)和微同源序列介导的同源修复两种途径可实现精确的靶向敲入,非同源末端连接(NHEJ)途径则可介导非精确的靶向敲入,或称靶向插入。一般而言,基于同源序列的精确敲入的效率低于NHEJ诱导的靶向插入。受益于以TALEN、CRISPR/Cas系统为代表的人工核酸内切酶介导的基因组编辑技术的飞速发展,基因组靶向敲入得以在多个物种中越来越广泛地应用,并极大地推动了基因功能与疾病模型研究。不过,在个体水平上,相比于简单的indel突变,基因组靶向敲入仍较难实现,效率仍然偏低。现介绍基因组靶向敲入的基本原理,并以斑马鱼为例,介绍基因组靶向敲入在模式动物中的应用与相关技术的发展历程,并着重强调实验设计与操作的要点,同时对基因组靶向敲入技术的发展进行了展望。 展开更多
关键词 基因组编辑 基因敲入 模式动物 斑马鱼 CRISPR/Cas系统 非同源末端连接 同源重组
汽油机爆震在线检测系统设计与试验 预览
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作者 张志谋 郑圣彬 +3 位作者 陶文辉 杨涛 陈京瑞 石磊 《车用发动机》 北大核心 2018年第4期6-10,16共6页
在嵌入式工控机的控制下,应用NI数据采集卡及LabVIEW软件,完成了对非共振型压电式爆震传感器和光电式转速传感器输出信号的采集及处理,实现了基于机体振动检测的汽油机爆震在线检测。完成了检测系统的软件设计,通过信号采集模块、处理... 在嵌入式工控机的控制下,应用NI数据采集卡及LabVIEW软件,完成了对非共振型压电式爆震传感器和光电式转速传感器输出信号的采集及处理,实现了基于机体振动检测的汽油机爆震在线检测。完成了检测系统的软件设计,通过信号采集模块、处理模块、爆震判别模块和数据保存模块,实现了基于LabVIEW的爆震识别。对某3缸汽油机进行爆震试验,通过分析振动信号,确定了爆震特征频率范围和爆震阈值,并研究了阈值的影响因素。最后进行发动机爆震状况在线检测,试验结果表明本检测系统对发动机爆震的识别是有效的。 展开更多
关键词 汽油机 爆震 在线检测
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汽油机涡轮再冷增压系统设计与试验 预览
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作者 刘江权 马朝臣 周丽 《车辆与动力技术》 2018年第4期11-16,共6页
通过建立涡轮再冷增压汽油机的仿真计算模型,初步获取涡轮再冷增压器的设计参数,完成对涡轮再冷增压器的设计与加工.之后,进行增压器性能试验,试验结果表明,空气涡轮有效效率最高可达50%,压气机效率达到54%.基于试验结果,对涡轮再冷增... 通过建立涡轮再冷增压汽油机的仿真计算模型,初步获取涡轮再冷增压器的设计参数,完成对涡轮再冷增压器的设计与加工.之后,进行增压器性能试验,试验结果表明,空气涡轮有效效率最高可达50%,压气机效率达到54%.基于试验结果,对涡轮再冷增压系统进行仿真验证,仿真结果表明涡轮再冷增压系统可使汽油机获得更低的进气温度,在保证汽油机不爆震的前提下,增大增压系统增压比,增加汽油机进气压力,可有效提高汽油机的升功率. 展开更多
关键词 增压汽油机 涡轮再冷 爆震 升功率
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