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五味子乙素通过抑制TLR4-MyD88信号通路减轻脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞凋亡 预览
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作者 张菁华 朱翔鸿 +5 位作者 叶萤燕 钱倩宇 杨贞 钱颖 李松涛 窦晓兵 《浙江中医药大学学报》 CAS 2019年第10期1119-1123,共5页
[目的]研究五味子乙素(schisandrin B,Sch B)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞损伤的保护作用及其潜在分子机制。[方法]以小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)为研究对象,建立LPS细胞炎症损伤模型,通过比色法测定细胞乳酸脱氢酶... [目的]研究五味子乙素(schisandrin B,Sch B)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞损伤的保护作用及其潜在分子机制。[方法]以小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)为研究对象,建立LPS细胞炎症损伤模型,通过比色法测定细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量、细胞存活率、细胞内炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达,以检测SchB对LPS诱导的炎症的保护作用;荧光定量PCR检测Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)及TNF-α的mRNA表达。[结果]LPS显著诱导RAW 264.7细胞损伤(P<0.05),而SchB能减轻LPS诱导的RAW 264.7细胞损伤,且呈剂量依赖关系(P<0.05)。Sch B能显著下调TNF-α、IL-6的表达(P<0.05),此外SchB能显著抑制TLR4、MyD88及TNF-α的mRNA表达(P<0.05),减轻LPS诱导的细胞炎症反应。[结论]SchB能够显著改善LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应,具有潜在防治非酒精性脂肪肝炎的作用,TLR4-MyD88信号通路参与SchB对细胞损伤的保护作用。 展开更多
关键词 五味子乙素 脂多糖 小鼠巨噬细胞 TLR4 MYD88
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MyD88在骨巨细胞瘤中的表达及其与微血管密度的相关性 预览
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作者 刘文博 李晓菊 《实用癌症杂志》 2019年第10期1603-1606,共4页
目的探讨骨巨细胞瘤的病理学特征与微血管密度(microvessel density,MVD)的相关性。方法采用回顾性总结研究方法,选择骨巨细胞瘤患者101例作为研究对象,取所有患者的瘤组织标本与瘤旁组织标本,免疫组化检测MyD88表达情况,记录MVD值并进... 目的探讨骨巨细胞瘤的病理学特征与微血管密度(microvessel density,MVD)的相关性。方法采用回顾性总结研究方法,选择骨巨细胞瘤患者101例作为研究对象,取所有患者的瘤组织标本与瘤旁组织标本,免疫组化检测MyD88表达情况,记录MVD值并进行相关性分析。结果 MyD88在瘤旁组织中的阳性表达率为9. 9%,在瘤组织中的阳性表达率为66. 3%,对比差异有统计学意义(P <0. 05)。在瘤组织中,MyD88阳性表达与临床分级、分化情况、淋巴结转移、肺转移、肝转移都有显著相关性(P <0. 05)。瘤组织中的CD31-MVD与CD34-MVD值都显著高于瘤旁组织(P <0. 05)。在瘤组织中,直线相关分析显示MyD88的阳性表达率与CD31-MVD、CD34-MVD值都呈显著正相关性(P <0. 05)。结论 MyD88在骨巨细胞瘤中呈现高表达状况,与骨巨细胞瘤的临床病理特征有一定相关性,与MVD有显著相关性。 展开更多
关键词 骨巨细胞瘤 临床病理特征 MYD88 微血管密度
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姜黄素对急性肺损伤小鼠炎症反应的改善作用 预览
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作者 邵奇 王倩梅 +2 位作者 马善波 张伟 郭超 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2349-2353,共5页
目的考察姜黄素对急性肺损伤小鼠炎症反应的改善作用。方法 50只小鼠随机分为对照组、急性肺损伤组、姜黄素干预组(200 mg/kg)、TLR4激动剂组和TLR4抑制剂组,采用腹腔注射脂多糖(5 mg/kg)建立脓毒性休克致急性肺损伤小鼠模型。24 h后, E... 目的考察姜黄素对急性肺损伤小鼠炎症反应的改善作用。方法 50只小鼠随机分为对照组、急性肺损伤组、姜黄素干预组(200 mg/kg)、TLR4激动剂组和TLR4抑制剂组,采用腹腔注射脂多糖(5 mg/kg)建立脓毒性休克致急性肺损伤小鼠模型。24 h后, ELISA检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及肺组织TLR4、MyD88、NF-κB水平,HE染色观察肺组织病理学形态,并计算肺损伤评分。结果与对照组比较,急性肺损伤组小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,肺组织TLR4、MyD88、NF-κB表达,肺组织病理学评分显著升高(P<0.01);与急性肺损伤组比较,姜黄素干预组小鼠上述指标均显著降低(P<0.01);与姜黄素干预组比较,TLR4激动剂组小鼠上述指标均显著升高(P<0.01),而TLR4抑制剂组则显著降低(P<0.01)。结论姜黄素可通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路来改善急性肺损伤小鼠炎症反应。 展开更多
关键词 姜黄素 急性肺损伤 TLR4 MYD88 NF-ΚB
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复方芪芎颗粒对佐剂性关节炎大鼠的抗炎消肿作用及TIR域信号通路影响
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作者 陈利锋 陈建华 +4 位作者 卢绮萍 陈芳 丰瑞兵 杨晨曦 朱诗聪 《中医药导报》 2019年第10期32-36,共5页
目的:探究复方芪芎颗粒对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠滑膜组织的抗炎消肿作用及对TLR4、MyD88及SIGIRR之间信号传导机制的影响。方法:将实验大鼠随机分组并造模,共分为6组,除正常组外,其余5组大鼠予弗氏完全佐剂注射进行... 目的:探究复方芪芎颗粒对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠滑膜组织的抗炎消肿作用及对TLR4、MyD88及SIGIRR之间信号传导机制的影响。方法:将实验大鼠随机分组并造模,共分为6组,除正常组外,其余5组大鼠予弗氏完全佐剂注射进行造模并给予雷公藤苷或不同剂量浓度复方芪芎颗粒药物灌胃,对比造模前、给药前、干预4周后各组大鼠一般情况变化及致炎侧的足趾周径变化,评估大鼠各关节的炎症指数(arthritisindex,AI),检测各组大鼠滑膜组织中TLR4、MyD88及SIGIRR蛋白的表达程度。结果:给药后4周,雷公藤组大鼠足趾周径低于模型组、正常组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。给药后复方芪芎颗粒组大鼠足趾周径下降,高剂量组显著下降。给药4周后,复方芪芎颗粒低、中、高剂量组、雷公藤组大鼠AI均低于模型组(P<0.01);复方芪芎颗粒高、中剂量组大鼠AI均低于复方芪芎颗粒低剂量组与雷公藤组(P<0.05)。复方芪芎颗粒中、高剂量组、雷公藤组大鼠TLR4、MyD88蛋白表达均低于模型组(P<0.01),S IGIRR蛋白表达高于模型组(P<0.01)。复方芪芎颗粒高剂量组大鼠TLR4、MyD88蛋白表达低于雷公藤组(P<0.05),SIGIRR蛋白表达高于雷公藤组(P<0.05)。结论:复方芪芎颗粒对佐剂性关节炎大鼠有抗炎消肿作用,其作用机制与抑制异常激活TLR4、MyD88的表达及上调SIGIRR蛋白的表达相关。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 复方芪芎颗粒 TLR4 MYD88 SIGIRR 信号通路 大鼠
双氢青蒿素对DLCs中TLR7/9-MyD88-IRAKs信号通路的影响
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作者 汪梅姣 温成平 +2 位作者 谢志军 王大维 李海昌 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期3995-3999,共5页
目的:研究双氢青蒿素(DHA)对诱导来源的树突状细胞(DLCs)中TLR7/9-MyD88-IRAKs信号通路的影响。方法:使用佛波酯(PMA)和TNF-α诱导KG-1细胞转化为DLCs,流式细胞术鉴定诱导后的细胞类型并检测DHA对DLCs细胞凋亡的影响。使用Real-time PC... 目的:研究双氢青蒿素(DHA)对诱导来源的树突状细胞(DLCs)中TLR7/9-MyD88-IRAKs信号通路的影响。方法:使用佛波酯(PMA)和TNF-α诱导KG-1细胞转化为DLCs,流式细胞术鉴定诱导后的细胞类型并检测DHA对DLCs细胞凋亡的影响。使用Real-time PCR技术检测相关mRNA表达水平,Western blotting检测相关蛋白的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中IFN-α含量。结果:流式细胞术鉴定结果显示,KG-1细胞经过PMA和TNF-α诱导能转化为DLCs;DHA使DLCs凋亡比例增多。Real-time PCR结果,与Blank组比较,IC组TLR9、MyD88 mRNA表达显著上调(P<0.05,P<0.01);与IC组比较,DHA组TLR7、TLR9、MyD88 mRNA表达显著下调(P<0.01,P<0.05)。Western blotting结果,与Blank组比较,IC组TLR7、p-IRF7、MyD88蛋白表达显著增高(P<0.05,P<0.01);与IC组比较,DHA组TLR7、MyD88、p-IRAK4、p-IRAK1、p-IRF7蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。ELISA实验结果,与Blank组比较,IC组IFN-α表达显著增高(P<0.01);与IC组比较,DHA组IFN-α表达显著降低(P<0.01)。结论:SLE患者内源性IC能够激活DLCs TLR7/9-MyD88-IRAKs信号通路;DHA使DLCs的凋亡率增高,能抑制IC激活的DLCs TLR7/9-MyD88-IRAKs信号通路相关mRNA及蛋白的表达,降低培养上清中IFN-α水平。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 免疫复合物 双氢青蒿素 TLR7 TLR9 MYD88 IFN-Α
肾上腺髓质素对实验性溃疡性结肠炎小鼠作用的研究 预览
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作者 栗静 霍丽娟 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第1期79-83,共5页
目的观察肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)对实验性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的作用,并探讨其可能的作用机制。方法30只清洁级C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组、模型组、AM干预组,每组10只。模型组和AM干预组给予质量浓... 目的观察肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)对实验性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的作用,并探讨其可能的作用机制。方法30只清洁级C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组、模型组、AM干预组,每组10只。模型组和AM干预组给予质量浓度为40 g/L的葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)水溶液自由饮用7 d,建立小鼠急性UC模型。评估模型建立成功后,对照组和模型组给予0.5 ml生理盐水灌肠,AM干预组给予0.5 ml AM灌肠,实验期间观察各组小鼠精神、毛发、饮食、大便性状等变化,记录小鼠体质量改变,对3组小鼠的疾病活动指数(DAI)、肠黏膜及组织学损伤进行评分。HE染色评估小鼠结肠病理变化,Western blotting检测结肠组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白的表达;ELISA检测血清NF-κB、TNF-α、IL-6表达。结果模型组小鼠DAI、肠黏膜及组织学损伤评分均显著高于正常对照组和AM干预组,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常对照组相比,模型组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及炎症因子TNF-α、IL-6的表达均明显增加(P<0.05),给予AM干预后,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及炎症因子TNF-α、IL-6的表达均下调(P<0.05)。结论AM干预能减轻UC小鼠结肠损伤情况,其机制可能是通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,下调TNF-α、IL-6等炎症因子表达从而对UC小鼠发挥治疗作用。 展开更多
关键词 肾上腺髓质素 溃疡性结肠炎 TLR4 MYD88 NF-ΚB
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基于TLR4/MyD88/NF-κB通路探讨乌司他丁减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的作用 预览
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作者 王兮 母前途 冯思嘉 《河北医学》 CAS 2019年第8期1299-1304,共6页
目的:观察乌司他丁对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠保护作用及对TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响.方法:将48只12~15周龄的SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组,模型组尾部静脉注射0.5mL的脂多糖(LPS)(5mg/kg)构建急性肺损伤(ALI)模型,对照组... 目的:观察乌司他丁对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠保护作用及对TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响.方法:将48只12~15周龄的SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组,模型组尾部静脉注射0.5mL的脂多糖(LPS)(5mg/kg)构建急性肺损伤(ALI)模型,对照组给予等体积的生理盐水,地塞米松(DXM)干预组和乌司他丁(UTI)干预组则在LPS注射前24h和10min时分别给予腹腔注射1mL的地塞米松(2mg/kg)和1mLUTI溶液(5mg/kg)进行预处理,对照组和模型组则给予等体积的生理盐水代替.计算10h大鼠体重下降比值和肺组织湿干重比(W/D),采用伊文斯兰方法检测肺血管内皮通透性,苏木精-伊红染色法(HE)染色观察大鼠肺部组织病变,并进行评分,ELISA法检测支气管灌洗液(BALF)中TNF-α、IL-6和IL-1β因子水平,同时显微镜下观察并统计总细胞和嗜中性粒细胞的个数,蛋白免疫印迹检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路中的TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达.结果:和对照组相比,模型组,DXM干预组和UTI干预组大鼠体重明显下降(P<0.05),和模型组相比,DXM干预组和UTI干预组大鼠体重明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05).和对照组相比,模型组大鼠在受到LPS刺激后,W/D比值出现明显升高(P<0.05);与模型组相比,DXM干预组和UTI干预组W/D比值比例明显下降(P<0.05).和对照组相比,模型组BALF中的嗜中性粒细胞和总细胞数量出现明显的增加(P<0.05);和模型组相比,DXM组和UTI组BALF中的嗜中性粒细胞和总细胞数量出现明显的下降(P<0.05).对照组肺组织结构完整,无充血,肺泡腔清晰,间隔内未发现水肿和炎性细胞浸润.和对照组相比,模型组的肺泡腔明显变小,间隔出现增厚,肺泡壁出现充血水肿,且发现了大量的炎性细胞浸润,HE评分明显高于对照组(P<0.05).而DXM组、UTI组和模型组相比,肺组织结构接近于正常,炎性细胞浸润得到缓解,DXM组和UTI组HE评分明显低于模型组,差异具有统计学意义(P 展开更多
关键词 乌司他丁 急性肺损伤 脂多糖 TLR4 MYD88 NF-ΚB
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乌头汤对膝骨关节炎模型大鼠滑膜组织TLR4/NF-κB信号通路的影响 预览
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作者 陈俊 林洁 +2 位作者 赵忠胜 黄艳峰 吴广文 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第27期4381-4386,共6页
背景:前期研究表明乌头汤可有效抑制膝骨关节炎炎症反应,但具体机制尚不明确。目的:观察乌头汤对膝骨关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-κB通路相关调节因子的影响,探讨乌头汤治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:SPF级雄性SD大鼠36只,购自上海斯... 背景:前期研究表明乌头汤可有效抑制膝骨关节炎炎症反应,但具体机制尚不明确。目的:观察乌头汤对膝骨关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-κB通路相关调节因子的影响,探讨乌头汤治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:SPF级雄性SD大鼠36只,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。实验方案经福建中医药大学动物实验伦理委员会批准。大鼠适应性喂养1周后,采用随机数字表法分为空白组、模型组和治疗组。模型组和治疗组均采用改良Hulth法复制双膝膝骨关节炎模型,术后1周空白组和模型组给予生理盐水,按照10 mL/(kg·d)的量进行灌胃;治疗组给予乌头汤,按照4.2 g/(kg·d)的药量进行灌胃。治疗8周后,取大鼠膝关节滑膜组织。ELISA法检测诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6含量变化;Real-time PCR法检测TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κBp65mRNA表达;Westernblot法检测TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达。结果与结论:①ELISA结果显示,与模型组相比,乌头汤可有效抑制诱导型一氧化氮合酶、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达(P<0.01);②Real-timePCR结果表明,乌头汤能抑制TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65 mRNA表达(P <0.01);③Western blot结果与Real-time PCR结果趋势一致,即乌头汤能抑制TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达(P <0.01);④结果提示,乌头汤可通过调控TLR4/NF-κB信号通路,抑制膝骨关节炎滑膜炎症反应,从而起到治疗膝骨关节炎作用。 展开更多
关键词 乌头汤 膝骨关节炎 滑膜炎症 TLR4/NF-κB 信号通路 TLR4 MYD88 诱导型一氧化氮合酶 肿瘤坏死因子α 白细胞介素6
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TLR/MyD88/NF-κB信号通路参与不同疾病作用机制研究进展 预览
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作者 单佳铃 程虹毓 +2 位作者 文乐 钟国跃 朱继孝 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期451-455,共5页
TLR/MyD88/NF-κB信号通路是机体炎症体系中的重要途径,其广泛存在于各种组织细胞中,参与多种疾病的发生与调控,如自身免疫性疾病、炎症性疾病、感染性疾病、过敏性疾病等。Toll样受体(TLR)是一种跨膜蛋白,能够识别多种类型的病原相关... TLR/MyD88/NF-κB信号通路是机体炎症体系中的重要途径,其广泛存在于各种组织细胞中,参与多种疾病的发生与调控,如自身免疫性疾病、炎症性疾病、感染性疾病、过敏性疾病等。Toll样受体(TLR)是一种跨膜蛋白,能够识别多种类型的病原相关分子模式(如脂多糖、尿酸钠晶体、病毒双链RNA等),引起机体炎症免疫应答,而所有的TLR都能激活MyD88依赖性途径,从而活化NF-κB,最终导致炎症介质和细胞因子的释放,起到抗炎免疫调节作用。目前,对TLR/MyD88/NF-κB信号通路的研究较为深入,同时也取得了一定的进展。该文将从TLR/MyD88/NF-κB信号通路在机体中的作用机制入手,对其在不同疾病中的调控作用进行综述。 展开更多
关键词 TLR MYD88 NF-ΚB 信号通路 病理机制 研究进展
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芍药甘草汤含药血清对纤维环细胞MyD88、IκB、NF-κB蛋白表达的影响
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作者 林荣 何坚 董继泉 《亚太传统医药》 2019年第5期12-15,共4页
目的:观察芍药甘草汤含药血清对颈椎间盘纤维环细胞MyD88、IκB、NF-κB蛋白表达的影响。方法:体外培养颈椎间盘纤维环细胞,共4组,分为空白组、模型组(LPS 10ng/mL)、抑制剂组(Triptolide 10μmol/mL干预1h后加入LPS 10ng/mL)、芍药甘... 目的:观察芍药甘草汤含药血清对颈椎间盘纤维环细胞MyD88、IκB、NF-κB蛋白表达的影响。方法:体外培养颈椎间盘纤维环细胞,共4组,分为空白组、模型组(LPS 10ng/mL)、抑制剂组(Triptolide 10μmol/mL干预1h后加入LPS 10ng/mL)、芍药甘草汤组(芍药甘草汤含药血清0.308g/mL+LPS10ng/mL),干预24h。采用Western blot检测颈椎间盘纤维环中MyD88、IκB、NF-κB蛋白表达变化情况。结果:颈椎间盘纤维环细胞中MyD88、NF-κB P65的蛋白表达:模型组明显高于空白组(P<0.05),芍药甘草汤组明显低于模型组(P<0.05);颈椎间盘纤维环细胞IκB的蛋白表达:模型组明显低于空白组(P<0.05),芍药甘草汤组明显高于模型组(P<0.05)。结论:芍药甘草汤可以降低颈椎间盘纤维环细胞MyD88、NF-κB P65的蛋白表达量,同时上调IκB的蛋白表达量。 展开更多
关键词 芍药甘草汤含药血清 纤维环细胞 MYD88 IΚB NF-ΚB
TLR4、MyD88和NF-κB在大肠癌中的表达及意义 预览
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作者 孙振玉 陈学军 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期548-551,共4页
目的探讨Toll样受体(TLR) 4、髓样分化因子(MyD) 88、核因子(NF)-κB在大肠癌中的表达和临床意义。方法应用免疫组织化学PV6000二步法检测70例大肠癌、36例大肠腺瘤和20例癌旁正常黏膜组织中TLR4、MyD88和NF-κB的表达。结果 TLR4、MyD8... 目的探讨Toll样受体(TLR) 4、髓样分化因子(MyD) 88、核因子(NF)-κB在大肠癌中的表达和临床意义。方法应用免疫组织化学PV6000二步法检测70例大肠癌、36例大肠腺瘤和20例癌旁正常黏膜组织中TLR4、MyD88和NF-κB的表达。结果 TLR4、MyD88和NF-κB在大肠癌中阳性表达率分别为64. 3%,74. 3%,70%,在腺瘤中阳性表达率为13. 9%,8. 3%,27. 8%,均显著高于大肠癌癌旁组织中的10%,0. 0%,15. 0%(均P<0. 05)。大肠癌组织中三者的表达存在一定关联性(P<0. 05)。结论 TLR4、MyD88和NF-κB在大肠癌中高表达,与大肠癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关,参与大肠癌的发生发展。 展开更多
关键词 TLR4 MYD88 NF-ΚB 大肠癌
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PM2.5通过TLR4-MyD88通路诱导小鼠脾细胞NF-κB活化机制研究 预览
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作者 宋媛 李飞 +4 位作者 刘磊 焦煜茜 杨红芳 李宏 高社军 《河北医药》 CAS 2019年第10期1445-1449,共5页
目的探索PM2.5对基因敲除小鼠脾细胞NF-kB影响的作用机制。方法野生型(WT)、Toll样受体(TLR)2、TLR4及髓鞘分化因子(MyD)88基因敲除(MyD88-/-)小鼠经气管内PM2.5染毒,每2周1次,共染毒4次,最后一次染毒24h后处死。检测脾细胞活性及细胞... 目的探索PM2.5对基因敲除小鼠脾细胞NF-kB影响的作用机制。方法野生型(WT)、Toll样受体(TLR)2、TLR4及髓鞘分化因子(MyD)88基因敲除(MyD88-/-)小鼠经气管内PM2.5染毒,每2周1次,共染毒4次,最后一次染毒24h后处死。检测脾细胞活性及细胞培养液中细胞因子白细胞介素2(IL-2)及肿瘤坏死因子-2(TNF-α),的表达水平。检测脾细胞NF-κB的活化及表达水平。结果PM2.5染毒后野生型(WT)小鼠脾细胞ATP水平明显升高(P<0.05),在Toll样受体(TLR)2-/-小鼠中也发现PM2.5诱导脾细胞的ATP水平升高(P<0.05),而在TLR4-/-小鼠中未发现PM2.5对脾细胞的影响(P>0.05)。此外,在WT和TLR2-/-小鼠中,PM2.5促进ConA诱导的IL-2及LPS诱导的TNF-α水平的增加(P<0.05),而在TLR4-/-和MyD88-/-小鼠中则没有明显变化(P>0.05)。免疫印迹也显示在WT和TLR2-/-小鼠中PM2.5诱导NF-κB的活化,而在TLR4-/-和MyD88-/-小鼠中NF-κB没有被激活。结论PM2.5通过TLR4-/-和MyD88-/-途径激活脾细胞中NF-κB信号通路引起脾细胞炎性反应。 展开更多
关键词 PM2.5 NF-ΚB TLR4 MYD88 脾细胞
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桑黄多糖对人TLR4信号通路的激活作用研究
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作者 王璐 姚立 +4 位作者 金娅玮 金超英 董宇 寿旦 王一奇 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1178-1182,共5页
目的观察桑黄多糖(polysaccharide from Phellinus igniarius,PPI)对人Toll-样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)通路的激活作用及作用特点。方法采用转染了人TLR4基因、分泌型胚胎碱性磷酸酶报告基因的HEK-BlueTMhTLR4细胞模型,快速评... 目的观察桑黄多糖(polysaccharide from Phellinus igniarius,PPI)对人Toll-样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)通路的激活作用及作用特点。方法采用转染了人TLR4基因、分泌型胚胎碱性磷酸酶报告基因的HEK-BlueTMhTLR4细胞模型,快速评价PPI对TLR4通路的激活作用,并用PMA诱导的THP-1细胞模型观察药物对TLR4通路作用的特点;MTT法检测细胞活性;ELISA法检测细胞因子分泌量;RealtimePCR检测细胞mRNA表达水平。结果 PPI作用24h不影响细胞活性,但能剂量依赖性地增加HEK-BlueTM hTLR4细胞分泌型胚胎碱性磷酸酶的表达,并使THP-1细胞TLR4通路相关细胞因子TNF-α,IP-10分泌量增加。TLR4受体阻断剂TAK-242能显著降低PPI诱导的细胞因子分泌量(P<0.01)。Real-time PCR结果显示PPI既可以增加MyD88通路TNF-α、IL-6、IL-12、IL-1β、COX-2等细胞因子的mRNA表达,又可以增加TRIF通路IP-10、IFN-β等细胞因子的mRNA表达。结论 PPI对人TLR4受体具有直接激活作用,能同时激活TLR4下游MyD88和TRIF 2条分支,对TLR4分支通路的激活没有选择性。 展开更多
关键词 桑黄 多糖 TLR4 MYD88 TRIF
氟苯尼考对肉鸡空肠黏膜的完整性及免疫相关基因表达的影响
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作者 吴海萍 郭宇荣 +5 位作者 温爽 申伟祺 程佳 孙耀贵 王文魁 段智变 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2019年第3期410-414,共5页
研究空肠免疫相关指标及绒毛结构的变化在氟苯尼考致肉鸡腹泻中的作用。40羽1日龄肉鸡适应性饲养7 d后,随机分为对照组、氟苯尼考组(饮水添加100 mg·(kg·d)^-1氟苯尼考至35日龄),35日龄检测体重、脾脏与胸腺指数,取空肠组织... 研究空肠免疫相关指标及绒毛结构的变化在氟苯尼考致肉鸡腹泻中的作用。40羽1日龄肉鸡适应性饲养7 d后,随机分为对照组、氟苯尼考组(饮水添加100 mg·(kg·d)^-1氟苯尼考至35日龄),35日龄检测体重、脾脏与胸腺指数,取空肠组织以HE染色,观察组织切片并测量绒毛长度、隐窝深度且计算绒隐比,荧光定量PCR检测空肠TLR4、My D88、NF-κB和TNF-α基因表达量。结果表明,与对照组相比,氟苯尼考组肉鸡空肠绒毛长度、绒隐比极显著下降(P<0.01),隐窝深度极显著升高(P<0.01);体重、脾脏指数与胸腺指数极显著下降(P<0.01);TLR4、My D88、NF-κB与TNF-αm RNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。空肠绒毛结构功能改变及免疫相关指标异常表达参与了氟苯尼考致肉鸡腹泻的发生发展。 展开更多
关键词 肉鸡 氟苯尼考 腹泻 TLR4 MYD88 NF-ΚB TNF-α
尼罗罗非鱼MyD88基因的表达及多克隆抗体制备 预览
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作者 张永德 林勇 +3 位作者 潘传燕 冯鹏霏 陈晓汉 罗洪林 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期595-602,共8页
为体外表达尼罗罗非鱼髓样分化因子(MyD88)蛋白并制备抗该蛋白的多克隆抗体,采用无缝克隆技术将尼罗罗非鱼MyD88基因转入pET-B2m原核表达载体,并转入大肠杆菌B21中诱导表达,将表达的MyD88蛋白经纯化后免疫大耳兔制备多克隆抗体,采用West... 为体外表达尼罗罗非鱼髓样分化因子(MyD88)蛋白并制备抗该蛋白的多克隆抗体,采用无缝克隆技术将尼罗罗非鱼MyD88基因转入pET-B2m原核表达载体,并转入大肠杆菌B21中诱导表达,将表达的MyD88蛋白经纯化后免疫大耳兔制备多克隆抗体,采用Western blot和ELISA检测抗体的特异性和效价。试验结果表明,本研究成功构建了pET-B2m-MyD88原核表达载体,诱导表达获得了48.9 ku的重组蛋白,免疫大耳兔获得效价为1∶2 048 000的抗尼罗罗非鱼MyD88多克隆抗血清。Western blot检测结果显示,该抗体能够特异性的识别原核表达的MyD88蛋白。原核表达体系的建立及多克隆抗体的制备为进一步研究MyD88蛋白在尼罗罗非鱼先天性免疫中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 罗非鱼 MYD88 原核表达 多克隆抗体
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TLR4/MyD88介导的炎症反应在体外培养癫痫海马组织中的作用研究 预览
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作者 叶洁梅 黄国雄 黄媛恒 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2019年第4期300-302,共3页
目的研究在无镁液所致自发性癫痫样放电海马组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、IL-1β和IL-6的表达,探讨TLR4介导的炎症反应在癫痫发病中的作用。方法取新生6~9dSD鼠的海马,体外培养至7d时用无Mg^2+ACSF灌流3h,于造模前... 目的研究在无镁液所致自发性癫痫样放电海马组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、IL-1β和IL-6的表达,探讨TLR4介导的炎症反应在癫痫发病中的作用。方法取新生6~9dSD鼠的海马,体外培养至7d时用无Mg^2+ACSF灌流3h,于造模前和造模后1d、3d、1w,采用real-timePCR检测TLR4、MyD88、IL-1β、IL-6基因,采用Westernblot检测TLR4和信号蛋白MyD88的表达。结果与体外培养条件下正常海马组织相比,无镁细胞外液灌流后的癫痫样放电模型的TLR4、MyD88、IL-1β、IL-6mRNA升高,TLR4和MyD88的蛋白表达升高,并且随时间延长而增强(P<0.001)。结论体外培养无Mg^2+ACSF所致的癫痫样放电海马组织中,可通过TLR4-MyD88信号通路,激活炎症反应,在癫痫的发病机制中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 TLR4 MYD88 癫痫 炎症反应 作用机制
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HMGB1/TLRs/MyD88信号通路与神经病理性痛 预览
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作者 夏阳阳 黄诚 《赣南医学院学报》 2019年第1期87-91,共5页
HMGB1/TLRs/MyD88信号转导通路是生物体内重要的信号通路之一,在免疫功能调节中发挥着重要作用。近年来有研究表明,HMGB1/TLRs/MyD88信号转导通路激活后可诱导和维持不同条件下的痛敏反应,参与神经病理性痛的发生、发展过程。随着在细... HMGB1/TLRs/MyD88信号转导通路是生物体内重要的信号通路之一,在免疫功能调节中发挥着重要作用。近年来有研究表明,HMGB1/TLRs/MyD88信号转导通路激活后可诱导和维持不同条件下的痛敏反应,参与神经病理性痛的发生、发展过程。随着在细胞、分子水平对这一信号通路参与神经病理性痛的机制研究,将为神经病理性痛的临床治疗提供新靶点和理论依据。 展开更多
关键词 MYD88 HMGB1 TLRS 神经病理性痛
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NF-κB信号通路在大鼠肾缺血再灌注损伤致心肌损伤中的作用 预览
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作者 吉芳 伊合山·艾尼瓦尔 +4 位作者 张静静 陈杰 王家慧 刘浩 张冰 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第11期1404-1408,1413共6页
目的通过观察HMGB1-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路及炎性因子白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)及白细胞介素-17(interleukin 17,IL-17)在大鼠肾缺血再灌注及心肌损伤中的表达,以明确大鼠肾缺血再灌... 目的通过观察HMGB1-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路及炎性因子白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)及白细胞介素-17(interleukin 17,IL-17)在大鼠肾缺血再灌注及心肌损伤中的表达,以明确大鼠肾缺血再灌注损伤对远隔器官心肌的影响及其机制。方法16只健康、雄性Wistar大鼠通过随机数字表法分为C组(假手术组)和IR组(肾缺血再灌注组),每组8只。2组大鼠均切除右肾,C组左肾动脉下穿线不结扎,IR组双线结扎左肾动脉,建立肾缺血再灌注损伤模型。缺血45min再灌注4h后静脉采血分离血浆,剖胸留取心脏组织。采用TUNEL法检测2组大鼠心肌细胞凋亡差异;蛋白质免疫印迹法(western blot,WB)检测心肌细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1protein,HMGB1)、Toll-样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)的蛋白表达;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR)技术检测HMGB1、TLR4、MyD88、NF-κB的基因表达;酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血浆肌钙蛋白(TnI)、HMGB1、IL-6、IL-10、IL-17浓度。结果IR组细胞凋亡程度显著高于C组,差异有统计学意义(P<0.05),IR组p-NF-kBp65和TLR4蛋白表达均显著高于C组,差异有统计学意义(P<0.05);IR组MyD88、TLR4、NF-κBp65、HMGB1在心脏组织中的基因表达显著高于C组,差异有统计学意义(P<0.05);IR组血浆中IL-17与Tn-I含量显著高于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠肾缺血再灌注损伤可致远隔心肌组织损伤,这种损伤可能是通过HMGB1-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路及炎性因子IL-17介导。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 HMGB1 TLR4 NF-ΚBP65 MYD88
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高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠TLR-4信号通路的影响
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作者 滑雪 齐有然 田雨英 《解剖科学进展》 2019年第1期98-100,105共4页
目的探讨高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠TLR-4信号通路的影响。方法选取36只7日龄SD新生大鼠,随机分为3组:假手术组(n=12),缺氧缺血性脑损伤组(n=12),高压氧治疗组(n=12)。采用Rice法制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,假手术组大鼠... 目的探讨高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠TLR-4信号通路的影响。方法选取36只7日龄SD新生大鼠,随机分为3组:假手术组(n=12),缺氧缺血性脑损伤组(n=12),高压氧治疗组(n=12)。采用Rice法制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,假手术组大鼠分离左颈总动脉后不结扎直接缝合皮肤,高压氧治疗组大鼠在模型制作成功后,给予高压氧治疗,1 h/d,连续7 d。测定各组大鼠体质量增长率与左/右脑重量比值;应用TUNEL法检测脑组织神经细胞凋亡情况,Western Blot方法与real time PCR方法分别检测各组新生大鼠脑组织TLR-4、MyD88与NF-κB蛋白与mRNA的表达。结果高压氧治疗可使缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的体质量增长率和左/右脑重量比值增加(P<0.05)。与假手术组相比,缺氧缺血性脑损伤组新生大鼠脑组织的神经细胞凋亡数目、Toll样受体-4(TLR-4)、髓样分化因子(MyD88)与核转录因子-κB (NF-κB)蛋白与mRNA的表达均显著升高(P<0.01);与缺氧缺血性脑损伤组相比,高压氧治疗组新生大鼠脑组织的神经细胞凋亡数目、TLR-4、MyD88与NF-κB蛋白与mRNA的表达均显著降低(P<0.01)。结论高压氧减轻缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的脑组织损伤可能与抑制TLR-4信号通路相关。 展开更多
关键词 高压氧 缺氧缺血性脑损伤 TLR-4 MYD88 NF-κB SD新生大鼠
实验性根尖周炎模型大鼠髓样分化因子88的表达 预览
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作者 左美娜 王丽娜 +2 位作者 韩淑娟 董明 牛卫东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第7期1068-1072,共5页
背景:研究发现大鼠牙卵泡中髓样分化因子88有表达,并影响牙齿的萌出和破骨细胞数量。目的:进一步验证髓样分化因子88在大鼠根尖周炎动物模型中的表达。方法:选取6周龄雄性SD大鼠25只,由大连医科大学SPF动物实验中心提供。将大鼠下颌第1... 背景:研究发现大鼠牙卵泡中髓样分化因子88有表达,并影响牙齿的萌出和破骨细胞数量。目的:进一步验证髓样分化因子88在大鼠根尖周炎动物模型中的表达。方法:选取6周龄雄性SD大鼠25只,由大连医科大学SPF动物实验中心提供。将大鼠下颌第1磨牙开髓,建立大鼠实验性根尖周炎模型,并将开髓0周作为对照组;开髓1,2,3,4周作为实验组。开髓后于各时间点随机选取5只大鼠,麻醉后取材,用多聚甲醛固定下颌骨,组织脱钙,制作冷冻切片。分别用苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色观察根尖组织炎症区域的病理变化,并用RT-PCR检测髓样分化因子88在实验性根尖周炎模型中的表达。结果与结论:①苏木精-伊红染色:结果显示实验组的根尖区有炎症浸润,并向周围蔓延扩展,表明成功建立了大鼠实验性根尖周炎动物模型;②免疫组织化学染色:结果显示髓样分化因子88在1,2,3,4周4个时间点根尖周炎症区域中均呈阳性表达,髓样分化因子88阳性细胞的表达量在1-3周明显增加,并在第3周时出现高峰;而在4周时,其表达量降低;仅少量髓样分化因子88阳性细胞出现在正常对照组;③RT-PCR结果显示髓样分化因子88mRNA表达量从1-3周逐渐增高,到第4周下降;④结果说明,在实验性根尖周炎的动物模型中髓样分化因子88有表达,并随时间呈一定的表达趋势,髓样分化因子88可能参与了根尖周炎的发生及根尖牙槽骨的吸收。 展开更多
关键词 根尖周炎 MYD88 根尖周炎动物模型 骨吸收 组织构建 髓样分化因子88 模型 动物 组织工程
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