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固氮酶的研究进展 预览 被引量:5
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作者 徐晔 张金池 +1 位作者 王广林 庄家尧 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期 61-64,共4页
固氮酶将N2还原为NH3的过程是自然界实现氮循环的重要环节。固氮酶是由γ2型二聚体组成的Fe蛋白和α2β2异四聚体组成的MoFe蛋白组成。固氮酶催化的机制包括铁蛋白的氧还循环和钼铁蛋白的氧还循环两部分。Klebsiella pneumoniae的nif基... 固氮酶将N2还原为NH3的过程是自然界实现氮循环的重要环节。固氮酶是由γ2型二聚体组成的Fe蛋白和α2β2异四聚体组成的MoFe蛋白组成。固氮酶催化的机制包括铁蛋白的氧还循环和钼铁蛋白的氧还循环两部分。Klebsiella pneumoniae的nif基因簇由20个基因组成,构成了8个转录单位,总长度24206bp,其操控机制是多水平、多层次的调控过程。同时综述了固氮酶的多样性,目前已经发现的有钼铁固氮酶、钒铁固氮酶、铁铁固氮酶以及在Strpomyces thermoauophicus内存在的与已知的三种固氮酶体系明显不同的固氮体系。 展开更多
关键词 固氮酶 Fe蛋白 MoFe蛋白 nif基因簇
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棕色固氮菌nifE缺失突变株(DJ35)钼铁蛋白的特性 被引量:1
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作者 赵颖 边少敏 +4 位作者 张纯喜 周会娜 王煌平 赵剑峰 黄巨富 《科学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第18期1984-1988,共5页
从棕色固氮菌缺失nifE的突变株DJ35中纯化得到纯度约为80%的MoFe蛋白(ΔnifE Av1).与野生种OP中纯化出的MoFe蛋白(OP Av1)相比, ΔnifE Av1具有与之相同的亚基组成, 并可与OP Av1的抗体发生免疫交叉反应, 但在厌氧天然电泳中的迁移率略... 从棕色固氮菌缺失nifE的突变株DJ35中纯化得到纯度约为80%的MoFe蛋白(ΔnifE Av1).与野生种OP中纯化出的MoFe蛋白(OP Av1)相比, ΔnifE Av1具有与之相同的亚基组成, 并可与OP Av1的抗体发生免疫交叉反应, 但在厌氧天然电泳中的迁移率略大于OP Av1.金属含量测定表明, ΔnifE Av1的Mo和Fe含量均显著下降.ΔnifE Av1单独与OP Fe蛋白互补时不具乙炔还原活性, 但可被从OP Av1中抽提出的FeMo-co体外激活.ΔnifE Av1的圆二色谱450 nm附近区域与OP Av1的相似, 而电子顺磁共振谱中g ≈ 3.7的信号则完全消失, g ≈ 4.3和2.0处的信号也分别下降75%和50%左右.上述结果表明, 从DJ35中纯化出的ΔnifE Av1是一种FeMo-co缺失而P-cluster正常的MoFe蛋白. 展开更多
关键词 棕色固氮菌 AnifE Av1 FeMo-co P—cluster 电子顺磁共振 NIFE 缺失突变株 钼铁蛋白 MoFe蛋白
缺失nifE的棕色固氮菌突变种MoFe蛋白的纯化及体外激活 预览
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作者 赵剑峰 赵颖 +3 位作者 汪志平 吕玉兵 潜中兴 黄巨富 《Acta Botanica Sinica(植物学报:英文版)》 CSCD 2003年第7期815-819,共5页
经DEAE纤维素、Sephacryl S-300和Q-Sepharose柱层析分离纯化,从缺失nifE的棕色固氮菌(Azotobactervinelandii Lipmann)突变种(DJ35)的无细胞粗提物中得到△nifE MoFe蛋白(△nifE Av1).SDS凝胶电泳分析表明,△nifE Av1的亚单位种类和分... 经DEAE纤维素、Sephacryl S-300和Q-Sepharose柱层析分离纯化,从缺失nifE的棕色固氮菌(Azotobactervinelandii Lipmann)突变种(DJ35)的无细胞粗提物中得到△nifE MoFe蛋白(△nifE Av1).SDS凝胶电泳分析表明,△nifE Av1的亚单位种类和分子量分别与棕色固氮菌野生型(OP)MoFe蛋白(Av1)的α和β亚单位相似.当与固氮酶Fe蛋白(Av2)活性互补时,△nifE Av1不具有还原质子的能力,但从OP Av1中抽提的FeMoco却可使其激活.经过量的邻菲啰啉(o-phen)厌氧处理并经Sephadex G-25柱层析分离后,便得到△nifE Av1 .在同时存在Av2和MgATP发生系统的条件下,△nifE Av1 ,而不是△nifE Av1,可为由KMnO4、高柠檬酸铁、Na2S、Na2S2O4和二硫苏糖醇组成的含Mn重组液(RS-Mn)显著激活.但在缺少MgATP或Av2的条件下,RS-Mn则不能激活△nifE Av1 .这就表明,RS-Mn对△nifE Av1 的激活需要o-phen的预先处理及同时存在Av2和MgATP的这二个条件. 展开更多
关键词 NIFE 棕色固氮菌 突变种 MoFe蛋白 纯化 体外激活
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缺失nifZ的棕色固氮菌突变种钼铁蛋白的晶体生长研究 预览
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作者 黄巨富 王耀萍 《植物学报:英文版》 CSCD 2000年第4期 383-387,共5页
在一定的结晶条件下,缺失njfZ的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变 钼铁蛋白将人训结晶出深棕色的短斜四棱柱晶体。PEG8000、MgCl2、NaCl、Tris的浓度及缓冲... 在一定的结晶条件下,缺失njfZ的棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipmann)突变 钼铁蛋白将人训结晶出深棕色的短斜四棱柱晶体。PEG8000、MgCl2、NaCl、Tris的浓度及缓冲液的PH对蛋白的结晶及晶体生长影响的系统研究表明,浓度和PH较低时,不出晶体;随着深度逐渐提高及PH高于8.0,在事财内出现大量小晶体,再提高浓度,便延长时间但出质好、体积大而数少的晶 展开更多
关键词 棕色固氮菌 缺失nifZ突变种 MoFe蛋白 晶体生长
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棕色固氮菌缺失nifZ基因的突变种固氮酶MoFe蛋白的纯化和性质 预览 被引量:1
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作者 钟泽璞 胡长征 《植物学报:英文版》 CSCD 1996年第8期 605-611,共7页
采用52℃下加热6min,后经DEAE-52、SephacrylsS-200和Q-Sepharose等柱层析方法,分离纯化了棕色固菌(Azotobactervinelandii)缺失nifZ基因突变种固氮酶MoFe(... 采用52℃下加热6min,后经DEAE-52、SephacrylsS-200和Q-Sepharose等柱层析方法,分离纯化了棕色固菌(Azotobactervinelandii)缺失nifZ基因突变种固氮酶MoFe(△nifZMoFe)蛋白,其纯度达到电泳纯。 展开更多
关键词 棕色固氮菌 MoFe蛋白 固氮酶
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Characterization of a FeMo cofactor-deficient MoFe protein from a nifE-deleted strain (DJ35) of Azotobacter vinelandii
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作者 ZHAO Ying BIAN Shaomin +4 位作者 ZHANG Chunxi ZHOU Huina WANG Huangping ZHAO Jianfeng HUANG Jufu 《中国科学通报:英文版》 SCIE CAS 2005年第20期2305-2310,共6页
A MoFe protein (ΔnifE Av1) with a purity of ~80% was purified from a nifE-deleted mutant of Azotobacter vinelandii DJ35. Compared with MoFe protein purified from wild-type strain OP (OP Av1), ΔnifE Av1 had the same... A MoFe protein (ΔnifE Av1) with a purity of ~80% was purified from a nifE-deleted mutant of Azotobacter vinelandii DJ35. Compared with MoFe protein purified from wild-type strain OP (OP Av1), ΔnifE Av1 had the same subunits composition, and had immune reaction with antibody to OP Av1, but its relative mobility in anaerobic native polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) was a little larger than that of OP Av1. Metal analysis showed that Mo and Fe contents of ΔnifE Av1 both apparently decreased. When complemented with OP Fe protein, ΔnifE Av1 had no C2H2-reduction activity, but it could be in vitro activated by FeMoco extracted from OP Av1. The circular dichroism (CD) spectrum of ΔnifE Av1 at ~450 nm was similar to that of OP Av1, while the EPR signal at g≈3.7 was absolutely silent, and the signal intensities at g≈4.3 and 2.0 decreased by 75% and 50%, respectively. The results indicated that ΔnifE Av1 purified from DJ35 was a FeMoco-deficient but P-cluster-con- taining MoFe protein. 展开更多
关键词 MoFe蛋白 固氮细菌 纯净度 ERP 厌氧性
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