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两种方法在结核分枝杆菌培养中的比对研究 预览
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作者 吴进凤 王路钦 张治国 《检验医学与临床》 CAS 2019年第16期2326-2328,2331,共4页
目的比较MGIT960系统液体培养法与改良罗氏(L-J)培养法在结核分枝杆菌培养中的效果。方法选择2015年1月至2017年12月到该所就诊的活动性肺结核患者3 685例,对每份病例标本分别进行痰涂片抗酸染色(萋-尼法)镜检、改良罗氏(L-J)培养法和MG... 目的比较MGIT960系统液体培养法与改良罗氏(L-J)培养法在结核分枝杆菌培养中的效果。方法选择2015年1月至2017年12月到该所就诊的活动性肺结核患者3 685例,对每份病例标本分别进行痰涂片抗酸染色(萋-尼法)镜检、改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法,并分别计算抗酸染色镜检与改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性符合率;统计改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性率、污染率及培养时间。结果痰涂片镜检与改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性符合率分别为94.21%(114/121)和82.64%(100/121)。改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法结果符合率为93.70%(3 197/3 412),所需的培养时间分别为28.0(25.0~31.0)d和16.5(14.0~19.0)d。结论MGIT960系统液体培养法阳性率与传统的改良罗氏(L-J)培养法基本一致,报告时间平均缩短至16.5 d,比改良罗氏(L-J)培养法提前10.0 d以上,为临床早诊断、早治疗提供了可靠依据,而且为后续进行的药敏试验提供了菌株。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 抗酸染色 改良罗氏(L-J)培养法 液体培养
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microRNA在结核分枝杆菌抗细胞自噬作用中的研究进展
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作者 张益源 伊正君 付玉荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第1期43-50,共8页
结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)是结核病的致病菌,其感染机体后能在细胞内长期生存并在合适的条件下引发疾病.非氧依赖性杀伤是巨噬细胞清除MTB的重要途径,主要表现为细胞内吞体和溶酶体融合,利用细胞自噬作用清除内部细... 结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)是结核病的致病菌,其感染机体后能在细胞内长期生存并在合适的条件下引发疾病.非氧依赖性杀伤是巨噬细胞清除MTB的重要途径,主要表现为细胞内吞体和溶酶体融合,利用细胞自噬作用清除内部细菌.相应的,MTB可利用多种方式顽强抵抗细胞自噬作用,与细胞共存从而逃避宿主免疫杀伤作用. MicroRNA(miRNA)是一种内源性非编码单链小RNA分子,其能在转录后水平沉默相关基因表达,是介导MTB与炎性细胞许多反应的重要分子.近期研究发现,MTB能够通过诱导巨噬细胞特异表达一些miRNA分子并靶向自噬相关基因,阻碍自噬发生、发展,从而实现MTB的抗细胞自噬作用.本文就miRNA在MTB抗细胞自噬中的作用及机制的研究进展作一综述. 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 巨噬细胞 自噬 MICRORNA
134例耐多药肺结核耐药情况分析 被引量:1
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作者 余旭良 金菊仙 +3 位作者 陆军 徐礼锋 白永凤 祝进 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第9期1114-1116,1119共4页
目的了解2013年-2016年衢州地区耐多药肺结核的耐药情况,为衢州地区耐多药肺结核的治疗与控制提供科学依据。方法对2013年-2016年衢州市各结核定点医院上送的结核菌株采用BACTEC MGIT 320系统进行一线抗结核药物异烟肼(INH)、利福平(... 目的了解2013年-2016年衢州地区耐多药肺结核的耐药情况,为衢州地区耐多药肺结核的治疗与控制提供科学依据。方法对2013年-2016年衢州市各结核定点医院上送的结核菌株采用BACTEC MGIT 320系统进行一线抗结核药物异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)和二线药物卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFX)的耐药性检测。结果 2 328株结核分枝杆菌中分离出耐多药结核菌株134株,耐多药率为5.76%;耐多药结核菌株对SM的耐药率为75.37%,EMB耐药率为18.66%,OFX耐药率为53.73%,KM为11.94%;134株耐多药菌株中,耐药组合以INH+RFP+SM+OFX最为常见,其次是INH+RFP+SM和INH+RFP,初治肺结核的耐药组合排前3位的是INH+RFP+SM+OFX、INH+RFP、INH+RFP+SM,复治肺结核的耐药组合排前3位的是INH+RFP+SM+OFX、INH+RFP+SM、INH+RFP。结论衢州市MDR-TB对一线、二线药物的耐药性相当严重,开展耐多药结核病的免费筛查工作,早期发现耐多药结核病患者,开展耐多药结核病的免费治疗,降低耐多药结核病的产生和流行。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐多药肺结核 耐药率
结核分枝杆菌表型及基因型一致性与患者预后的相关性研究
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作者 郭晶 曾谊 +3 位作者 林霏申 施旭东 胡春梅 张侠 《国际呼吸杂志》 2018年第20期1574-1577,共4页
目的对结核分枝杆菌耐药表型与基因型的一致性进行分析,包括了四种一线抗结核药物(异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素),探讨其一致性是否与疾病预后相关,为临床治疗提供依据=方法选择2009年5月至2015年10月本结核科收治的49例肺结... 目的对结核分枝杆菌耐药表型与基因型的一致性进行分析,包括了四种一线抗结核药物(异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素),探讨其一致性是否与疾病预后相关,为临床治疗提供依据=方法选择2009年5月至2015年10月本结核科收治的49例肺结核患者,按照临床预后分为有效组和无效组,收集患者治疗期间的结核分枝杆菌临床菌株,分别进行结核分枝杆菌药敏试验(表型检测)和聚合酶链式反应(PCR)-反向斑点杂交法快速检测结核分枝杆菌耐药基因(基因型检测)检测。对两种检测方法一致性进行检验.探讨两种检测方法的一致性是否与疾病预后相关。结果按照临床疗效分组提示四种一线抗结核药物(异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素)两种检测一致性无效组低于有效组。相对于其他抗结核药物利福平两种检测一致性差。结论结核杆菌突变位点的稳定性与疾病的预后正相关,相对其他抗结核药物,利福平的稳定性最差。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 药物敏感试验 表型 基因型
Xpert MTB/RIF、荧光染色镜检、改良罗氏培养在肺结核实验室诊断中的应用 预览
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作者 李波 吴进凤 +5 位作者 欧喜超 韩露 张治国 王莉 孙倩 赵雁林 《临床肺科杂志》 2018年第7期1165-1168,共4页
目的评价Xpert MTB/RIF、荧光染色镜检、改良罗氏培养在肺结核实验室诊断中的应用价值。方法收集2015年1月至2016年8月在北京市昌平区结核病防治所门诊1967例初诊被怀疑为肺结核的患者的痰标本,每例患者至少留取两份合格痰标本,实验室... 目的评价Xpert MTB/RIF、荧光染色镜检、改良罗氏培养在肺结核实验室诊断中的应用价值。方法收集2015年1月至2016年8月在北京市昌平区结核病防治所门诊1967例初诊被怀疑为肺结核的患者的痰标本,每例患者至少留取两份合格痰标本,实验室人员对每份痰标本均进行涂片镜检和固体培养,选择其中一份痰进行Xpert MTB/RIF检测;培养阳性菌株完成对硝基苯甲酸(P-nitrobenzoic acid,PNB)初步菌种鉴定,对鉴定为结核分枝杆菌的菌株采用比例法进行利福平药敏试验。结果 720例确诊肺结核患者中,涂片镜检、固体培养和Xpert MTB/RIF检测的灵敏度分别为18.06%(130/720)、26.94%(194/720)和36.25%(261/720)。Xpert MTB/RIF检测诊断肺结核病的灵敏度显著高于涂片镜检(χ~2=60.25,P〈0.01)和固体培养(χ~2=14.42,P〈0.01)。以比例法药敏试验结果为金标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的灵敏度和特异度分别为100%(10/10)和96.97%(160/165)。结论 Xpert MTB/RIF检测灵敏度和特异度较高,可更好的为临床肺结核病早期诊断及指导患者用药提供实验室依据。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 Xpert MTB/RIF 利福平耐药 诊断
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痰标本PCR-反向斑点杂交法对疑似非结核分枝杆菌肺病的诊断价值
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作者 程丽平 张晓岩 沙巍 《中国防痨杂志》 CAS 2018年第8期834-839,共6页
目的 探讨痰PCR-反向斑点杂交法对疑似非结核分枝杆菌(NTM)肺病的诊断价值。方法 搜集2014年1月至2017年10月同济大学附属上海市肺科医院收治的、通过临床症状和影像学检查疑诊为NTM肺病的患者334例,分别取痰液行PCR-反向斑点杂交法... 目的 探讨痰PCR-反向斑点杂交法对疑似非结核分枝杆菌(NTM)肺病的诊断价值。方法 搜集2014年1月至2017年10月同济大学附属上海市肺科医院收治的、通过临床症状和影像学检查疑诊为NTM肺病的患者334例,分别取痰液行PCR-反向斑点杂交法分枝杆菌菌种鉴定基因检测及分枝杆菌传统培养法[对硝基苯甲酸(PNB)、噻吩-2-羧酸肼(TCH)培养基生长试验]检测,最终确诊为NTM肺病患者218例(NTM肺病组)、结核病患者42例(结核病组)、其他肺部疾病患者74例(研究中予以排除)。以最终确诊结果为金标准,对痰PCR-反向斑点杂交法诊断临床疑诊NTM肺病患者的敏感度、特异度、阳性预测值和符合率进行分析。结果 疑诊NTM肺病的334例患者中,培养法分枝杆菌检出率为67.66%(226/334),PCR-反向斑点杂交法分枝杆菌检出率为64.67%(216/334),两种方法分枝杆菌检出率的比较,差异无统计学意义(χ^2=0.67,P=0.231)。确诊的218例NTM肺病患者中,PCR-反向斑点杂交法检出NTM的敏感度为82.57%(180/218),阳性预测值为98.36%(180/183);培养法检出NTM的敏感度为87.61%(191/218),阳性预测值为100.00%(191/191);两种方法检出NTM的敏感度比较,差异无统计学意义(χ^2=1.20,P=0.169)。以42例结核病组患者作为对照,PCR-反向斑点杂交法检测的特异度为78.57%(33/42),诊断结核病的阳性预测值为100.00%(33/33);培养法的特异度为83.33%(35/42),诊断结核病的阳性预测值为100.00%(35/35);两种检测方法特异度的比较,差异无统计学意义(χ^2=0.31,P=0.391)。PCR-反向斑点杂交法在两组患者中的诊断符合率为83.08%(216/260),培养法在两组患者中的诊断符合率为86.92%(226/260),差异无统计学意义(χ^2=1.51,P=0.134)。 结论 以胸部CT检查为诊断基础的疑似NTM肺病患者中,应用PCR-反向斑点杂交法行痰液NTM检测具有较高的敏感度 展开更多
关键词 分枝杆菌 非典型性 结核 诊断 聚合酶链反应 酶联免疫斑点检测
耻垢分枝杆菌与结核分枝杆菌抗原的交叉免疫应答研究
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作者 曹俊 卢锦标 +5 位作者 谢安平 徐苗 王国治 沈小兵 陈保文 郭述良 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期275-280,共6页
目的探讨耻垢分枝杆菌(Mycobacterla smegmatis,MS)与结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)抗原及其免疫原性的交叉情况。方法以低温超声破碎方法提取MS和MTB菌体抗原.通过Westernblot观察菌体抗原与抗血清的交叉免疫应... 目的探讨耻垢分枝杆菌(Mycobacterla smegmatis,MS)与结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)抗原及其免疫原性的交叉情况。方法以低温超声破碎方法提取MS和MTB菌体抗原.通过Westernblot观察菌体抗原与抗血清的交叉免疫应答。将超声破碎的菌体抗原与不完全弗氏佐剂混匀后肌肉注射于小鼠,免疫后7d以ELISPOT技术及流式细胞学技术检测小鼠脾脏淋巴细胞经不同细菌抗原分别刺激后产生的各类细胞因子水平,ELISA技术检测血清中抗体效价水平。结果MS与MTB间存在一些交叉抗原。经两细菌致敏的小鼠均能对不同分枝杆菌抗原产生以细胞免疫为主的免疫应答,CIM^+及CD8^+T淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ水平均较未免疫组明显增高(P〈0.05),对非分枝杆菌属布氏杆菌的对照抗原几乎不产生细胞免疫应答。结论MS与MTB间存在这些共同抗原使MS致敏动物能引起针对结核分枝杆菌特异性免疫应答,为MS用于结核新疫苗佐剂等研究提供科学依据。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耻垢分枝杆菌 交叉抗原 免疫应答
结核感染中IL-23R mRNA表达水平对Th17/IL-17免疫应答的影响
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作者 金鎏 赵德胜 +6 位作者 张衡 张治国 曹树辉 王伟 金俊 张晓楠 苏虹 《中华疾病控制杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期904-908,共5页
目的分析白介素23受体(interleukin 23 receptor,IL-23R)对结核感染中辅助型T细胞17(T helper cell 17,Th17)免疫应答的影响,探讨IL-23R在肺结核(tuberculosis,TB)发病机制中的作用。方法选取2015年5~10月于北京胸科医院住院的21... 目的分析白介素23受体(interleukin 23 receptor,IL-23R)对结核感染中辅助型T细胞17(T helper cell 17,Th17)免疫应答的影响,探讨IL-23R在肺结核(tuberculosis,TB)发病机制中的作用。方法选取2015年5~10月于北京胸科医院住院的21名活动性肺结核病人(active tuberculosis,ATB),2015年5~7月于北京昌平区结防所结核病体检的21名结核潜伏感染者(latent tuberculosis infection,LTBI)和21名健康对照(healthy donor,HD)为研究对象;分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),并做培养;检测PBMCs中IL-23R mRNA表达水平和PBMCs上清中IL-23和IL-17A水平;比较各组IL-23R mRNA表达水平,分析IL-23R表达水平对IL-17A水平的影响。结果 IL-23R mRNA表达水平:ATB组低于LTBI组(Z=-2.528,P=0.011),ATB组高于HD组(Z=-3.849,P〈0.001);IL-17A水平:ATB组低于LTBI组(t=2.238,P=0.031),ATB组高于HD组(t=4.733,P〈0.001);IL-23水平在三组中的差异无统计学意义(F=0.432,P=0.651);在ATB患者中,IL-23R mRNA表达水平与IL-17A水平呈正相关(r_s=0.438,P=0.047)。结论结核分支杆菌感染中,IL-23R的表达水平对Th17细胞介导的免疫应答起到调节作用,可能影响到TB的易感性和感染转归。 展开更多
关键词 结核 RNA 信使 HLA-D抗原 分枝杆菌 结核
肺结核诊断3种检测方法及联用的临床价值研究 预览 被引量:4
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作者 宋红焕 邵燕 +2 位作者 李国莉 陈诚 竺丽梅 《江苏预防医学》 CAS 2017年第4期389-391,共3页
目的评价痰涂片、痰培养和基于恒温扩增技术的结核分枝杆菌复合群核酸检测方法,及方法联用(以下简称"恒温扩增技术")应用于肺结核诊断的临床价值。方法收集确诊的活动性肺结核患者259例及其他呼吸道疾病患者68例痰标本,并同时采用... 目的评价痰涂片、痰培养和基于恒温扩增技术的结核分枝杆菌复合群核酸检测方法,及方法联用(以下简称"恒温扩增技术")应用于肺结核诊断的临床价值。方法收集确诊的活动性肺结核患者259例及其他呼吸道疾病患者68例痰标本,并同时采用痰涂片、痰培养、恒温扩增技术以及痰涂片与痰培养联用、痰涂片与恒温扩增技术联用进行结核分枝杆菌检测,以临床诊断为金标准,对3种检测方法及2种方法联用的检测效果进行评估。结果痰涂片、痰培养、恒温扩增技术及检测方法联用与临床诊断结果一致性分别为0.357、0.266、0.422,阳性检出率分别为57.1%、47.5%、67.6%;痰涂片与痰培养、恒温扩增技术联用与临床诊断结果的一致性分别为0.390、0.569,阳性检出率分别为60.6%、76.1%。恒温扩增技术阳性检出率高于痰涂片和痰培养,痰涂片与恒温扩增技术联用阳性检出率高于痰涂片、痰培养、恒温扩增技术、痰涂片联合痰培养,以上差异均有统计学意义(P值均〈0.05)。结论恒温扩增技术与痰涂片联用检测肺结核分枝杆菌与临床诊断结果一致性、阳性检出率最高,其次为恒温扩增技术。恒温扩增技术与痰涂片法联用,可用于基层结核病实验室肺结核的诊断。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 恒温扩增实时荧光 肺结核鉴定 痰涂片 痰培养 一致性 阳性检出率
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乌鲁木齐市耐多药结核分枝杆菌基因突变特征分析 被引量:2
10
作者 杨建东 陈阳贵 +4 位作者 马丽 张为胜 吐逊古·吾拉英 罗钰洋光 芮宝玲 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期22-25,共4页
目的了解耐四种一线抗结核药物结核分枝杆菌的有关基因突变特征。方法对19例耐多药结核病患者和254例全敏结核病患者痰液标本中分离的结核分枝杆菌进行药物敏感性试验,提取其DNA进行PCR扩增,对扩增产物测序并与标准株H37Rv进行比对。结... 目的了解耐四种一线抗结核药物结核分枝杆菌的有关基因突变特征。方法对19例耐多药结核病患者和254例全敏结核病患者痰液标本中分离的结核分枝杆菌进行药物敏感性试验,提取其DNA进行PCR扩增,对扩增产物测序并与标准株H37Rv进行比对。结果 19株耐多药结核杆菌和254株全敏结核杆菌均未检测到耐异烟肼基因inhA突变;耐多药组突变率最高的为耐异烟肼kat G基因,突变位点为315;耐利福平的突变基因是rpo B,耐药位点为526和531,531位点突变率高于526位点;耐乙胺丁醇的突变基因是emb B,耐药位点为206;耐链霉素的突变基因是rps L和rrs,耐药位点分别为43和1401,rps L基因的突变率高于rrs基因。结论耐多药结核分枝杆菌耐异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素的突变基因分别为kat G、rpo B、emb B、rps L和rrs,这对今后乌鲁木齐市耐多药结核病的快速诊断和控制提供了理论依据。 展开更多
关键词 分枝杆菌 非典型性 基因 突变
猫爪草石油醚提取物抗多药耐药结核菌株活性研究 预览 被引量:1
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作者 熊友谊 杨长水 《安徽科技学院学报》 2017年第2期27-30,共4页
目的:研究猫爪草石油醚提取物对多药耐药结核杆菌的抑制作用。方法:以猫爪草的石油醚提取有效部位,观察药物对多药耐药菌株细胞外、细胞内生长的抑制作用,采用试剂盒测定感染结核菌的巨噬细胞TNF-α的表达水平。结果:猫爪草石油醚提... 目的:研究猫爪草石油醚提取物对多药耐药结核杆菌的抑制作用。方法:以猫爪草的石油醚提取有效部位,观察药物对多药耐药菌株细胞外、细胞内生长的抑制作用,采用试剂盒测定感染结核菌的巨噬细胞TNF-α的表达水平。结果:猫爪草石油醚提取物能够显著抑制多药耐药结核菌株细胞外、细胞内的生长,并增加感染的巨噬细胞TNF-α的表达水平。结论:猫爪草石油醚提取物对多药耐药结核分枝杆菌的生长具有显著的抑制作用。 展开更多
关键词 猫爪草 石油醚提取物 分枝杆菌 结核
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江苏省60株非结核分枝杆菌的耐药性分析 预览 被引量:2
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作者 邵燕 陈诚 +2 位作者 李国莉 宋红焕 李燕 《江苏预防医学》 CAS 2017年第2期141-143,共3页
目的 分析江苏省非结核分枝杆菌(NTM)的耐药水平和流行病学特点,为制定有效的防控措施提供科学依据。方法 采用比例法,对2008年全省结核病耐药基线调查中确诊的60株NTM,进行针对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)和硫酸... 目的 分析江苏省非结核分枝杆菌(NTM)的耐药水平和流行病学特点,为制定有效的防控措施提供科学依据。方法 采用比例法,对2008年全省结核病耐药基线调查中确诊的60株NTM,进行针对异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)和硫酸链霉素(SM)的药敏实验。结果 60株NTM的耐药率为98.33%,耐INH+RFP率为65.00%。对RFP、INH、SM等3种药物同时耐药的5株(占8.33%),对4种药物同时耐药的34株(占56.67%)。初治组耐药率、耐INH+RFP率(95.65%、43.48%)均低于复治组(100.00%、78.38%),差异均具有统计学意义(P值均〈0.05)。结论 江苏省NTM耐药率、耐INH+RFP率水平较高,复治患者是耐药的主要群体,应作为NTM感染防控的重点人群。 展开更多
关键词 非结核分枝杆菌 肺结核 耐药率 药敏试验
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结核分枝杆菌重组融合蛋白TB10.4-Hsp16.3诊断结核病 被引量:1
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作者 谢琳 任琪琪 +3 位作者 郭婧玮 谭云洪 蒋华科 袁仕善 《湖南师范大学学报:医学版》 2016年第2期12-15,共4页
目的 :重组表达结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-hSp16.3,分析其诊断结核病的价值。方法:重组pCr扩增TB10.4-hSp16.3融合基因,克隆至pmd18-T载体,测序鉴定后,亚克隆至原核表达载体peT28a(+),pCr和双酶切鉴定阳性重组子,将重组dna转化e.Coli... 目的 :重组表达结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-hSp16.3,分析其诊断结核病的价值。方法:重组pCr扩增TB10.4-hSp16.3融合基因,克隆至pmd18-T载体,测序鉴定后,亚克隆至原核表达载体peT28a(+),pCr和双酶切鉴定阳性重组子,将重组dna转化e.Coli Bl21,筛选阳性菌株,经ipTg诱导表达融合蛋白TB10.4-hSp16.3,超声裂解菌体,对包涵体进行变性溶解和复性,金属螯合层析纯化,WeSTern bloT分析其免疫学活性,eliSa评价其诊断结核病的价值。结果 :成功获得约750bp的融合基因TB10.4-hSp16.3,构建了融合蛋白的重组表达质粒peTTB10.4-hSp16.3,表达、纯化获得分子量约29kda的融合蛋白,能被结核病患者血清特异识别;其eliSa诊断结核病的灵敏度为89.3%,特异度为90.7%,阳性预测值为90.9%,阴性预测值为89.1%,诊断效率达90.0%。结论 :成功表达可用于结核病诊断的结核分枝杆菌融合蛋白TB10.4-hSp16.3。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 TB10.4-Hsp16.3 表达 结核病
荧光定量PCR技术在骨关节结核石蜡包埋标本检测中的应用价值 预览 被引量:2
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作者 穆晶 赵丹 +2 位作者 刘子臣 车南颖 张海青 《结核病与胸部肿瘤》 2016年第3期199-203,共5页
目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ—PCR)在骨关节结核石蜡包埋标本病理诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法搜集2014年10月至2015年4月首都医科大学附属北京胸科医院病理科诊断... 目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ—PCR)在骨关节结核石蜡包埋标本病理诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法搜集2014年10月至2015年4月首都医科大学附属北京胸科医院病理科诊断形态学符合结核的93例患者的石蜡包埋标本,12例骨肿瘤患者的石蜡包埋标本。所有标本以FQ-PCR技术检测结核分枝杆菌DNA,以抗酸染色法查找抗酸杆菌。以卡方检验分析实验数据,比较FQ-PCR技术与传统抗酸染色法在骨关节结核诊断中的敏感度和特异度;观察不同发病部位与两种技术检测阳性率之间的相关性;以PCR-反向点杂交法对7例结核分枝杆菌DNA阴性而抗酸染色阳性患者进行非结核分枝杆菌检测。结果所有93例骨关节结核标本中FQ-PCR技术检测阳性77例,敏感度82.8%;抗酸染色查到抗酸杆菌64例,敏感度68.8%。FQ-PCR技术检测敏感度明显高于抗酸染色法(χ^2=5.659,P=0.021)。在不同发病部位FQ-PCR技术敏感度均高于抗酸染色法:在脊柱病变FQ-PCR技术和抗酸染色法阳性率分别为84.0%(42/50)和64.0%(32/50)(χ^2=0.009,P=0.609);在外周骨关节病变FQ-PCR技术和抗酸染色法阳性率分别为81.4%(35/43)和74.4%(32/43)(χ^2=12.609,P=0.002)。PCR-反向点杂交法检测确定戈登分枝杆菌1例。结论FQ-PCR技术较抗酸染色法显著提高了结核分枝杆菌阳性检出率,并为进一步检测非结核分枝杆菌做出重要提示,FQ-PCR技术在骨关节结核石蜡包埋标本检测中具有良好的应用价值。 展开更多
关键词 结核 分枝杆菌 结核 骨关节 聚合酶链式反应 抗酸染色
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适用于结核分枝杆菌RNA抽提的实验方法学研究 预览 被引量:2
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作者 俞垭美 王姗姗 +3 位作者 褚丽花 冯宜 葛洪斌 张喆 《临床肺科杂志》 2016年第4期609-612,共4页
目的分枝杆菌的细胞壁结构和成分特殊而复杂,在RNA提取的实验方法学上是否区别于一般的细菌,有待考察。本文使用了异硫氰酸胍提取法与商业化的细菌RNA抽提试剂盒法进行对照,对减活牛型分枝杆菌卡介苗(BCG)进行RNA的抽提,进而确定... 目的分枝杆菌的细胞壁结构和成分特殊而复杂,在RNA提取的实验方法学上是否区别于一般的细菌,有待考察。本文使用了异硫氰酸胍提取法与商业化的细菌RNA抽提试剂盒法进行对照,对减活牛型分枝杆菌卡介苗(BCG)进行RNA的抽提,进而确定了适用于分枝杆菌RNA抽提的最优方法。方法分别用异硫氰酸胍提取法和E.Z.N.ATM BacterialRNA提取试剂盒从一定量的卡介苗细菌培养物中提取RNA,用Nanodrop2000c检测抽提所得的RNA的浓度和纯度。结果用异硫氰酸胍法从1到30nag的BCG中均能提取到大量的RNA,而用E.Z.N.ATM BacterialRNA提取试剂盒几乎未提取到RNA,而且在纯度上前者好于后者。结论异硫氰酸胍的裂解效率远远高于溶菌酶。对于分枝杆菌例如结核分枝杆菌RNA的提取应该使用异硫氰酸胍法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 RNA提取 异硫氰酸胍(GTC)
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江苏省南通市涂阳肺结核患者耐药率及耐药谱分析 被引量:1
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作者 马俊锋 陆峰 +2 位作者 王小平 符剑 张哲 《中国防痨杂志》 CAS 2016年第11期945-950,共6页
目的对南通市涂阳肺结核患者进行5年的耐药性监测,对耐药率和耐药谱进行分析,为制定南通市结核病防控策略提供科学依据。方法2009年10月1日至2014年6月30日,南通市7家结核病定点医疗机构共确诊18256例肺结核患者,对其中2776例痰涂... 目的对南通市涂阳肺结核患者进行5年的耐药性监测,对耐药率和耐药谱进行分析,为制定南通市结核病防控策略提供科学依据。方法2009年10月1日至2014年6月30日,南通市7家结核病定点医疗机构共确诊18256例肺结核患者,对其中2776例痰涂片阳性的初、复治患者进行分枝杆菌培养、菌种鉴定,对培养成功的1893株结核分枝杆菌菌株采用比例法对异烟肼(H)、利福平(R)、乙胺丁醇(E)、链霉素(S)、氧氟沙星(Ofx)和卡那霉素(Kin)等6种抗结核药物进行药物敏感性试验(简称“药敏试验”)。结果南通市结核分枝杆菌的总耐药率、单耐药率、多耐药率、耐多药率分别为21.34%(404/1893)、5.86%(111/1893)、3.17%(60/1893)、12.31%(233/1893);复治患者的总耐药率、单耐药率、多耐药率、耐多药率分别为45.74%(252/551)、8.17%(45/551)、4.54%(25/551)、33.03%(182/551),均高于初治患者[11.33%(152/1342)、4.92%(66/1342)、2.61%(35/1342)、3.80%(51/1342)I,矿值和P值分别为:总耐药率(X^2=275.50,P=O.000)、单耐药率(X^2=7.47,P=0.006)、多耐药率(X^2=4.74,P=0.030)、耐多药率(zX^2=309.22,P=0.000),差异均有统计学意义。对404例耐药患者进行上述6种药物的药敏试验,共有29种耐药谱组合。其中单耐药有6种组合,对单一耐S构成比最高,为40.55%(45/111);其次是单一耐H,占33.33%(37/111)。多耐药有14种组合,以耐H+s构成比最高(41.67%,25/60);其次是耐R+S(13.33%,8/60)。耐多药有10种组合,以耐H+R+S构成比最高(35.62%,83/233);其次是耐H+R(34.76%,81/233)。初、复治涂阳患者中均有耐二线药物的组合;对S耐药的初、复治患者中,顺位分别是第2位(86例)� 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗药性 多种 细菌 药物监测 数据说明 统计 小地区分析
荧光定量PCR技术在骨关节结核石蜡包埋标本检测中的应用价值 被引量:11
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作者 穆晶 赵丹 +2 位作者 刘子臣 车南颖 张海青 《中国防痨杂志》 CAS 2016年第4期277-281,共5页
目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQPCR)在骨关节结核石蜡包埋标本病理诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法搜集2014年10月至2015年4月首都医科大学附属北京胸科医院病理科诊断形... 目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQPCR)在骨关节结核石蜡包埋标本病理诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法搜集2014年10月至2015年4月首都医科大学附属北京胸科医院病理科诊断形态学符合结核的93例患者的石蜡包埋标本,12例骨肿瘤患者的石蜡包埋标本。所有标本以FQ-PCR技术检测结核分枝杆菌DNA,以抗酸染色法查找抗酸杆菌。以卡方检验分析实验数据,比较FQ-PCR技术与传统抗酸染色法在骨关节结核诊断中的敏感度和特异度;观察不同发病部位与两种技术检测阳性率之间的相关性;以PCR-反向点杂交法对7例结核分枝杆菌DNA阴性而抗酸染色阳性患者进行非结核分枝杆菌检测。结果所有93例骨关节结核标本中FQPCR技术检测阳性77例,敏感度82.8%;抗酸染色查到抗酸杆菌64例,敏感度68.8%。FQ-PCR技术检测敏感度明显高于抗酸染色法(X2=5.659,P=0.021)。在不同发病部位FQ-PCR技术敏感度均高于抗酸染色法:在脊柱病变FQ-PCR技术和抗酸染色法阳性率分别为84.0%(42/50)和64.0%(32/50)(X2=0.009,P=0.609);在外周骨关节病变FQ-PCR技术和抗酸染色法阳性率分别为81.4%(35/43)和74.4%(32/43)(X2=12.609,P=0.002)。PCR-反向点杂交法检测确定戈登分枝杆菌1例。结论FQ-PCR技术较抗酸染色法显著提高了结核分枝杆菌阳性检出率,并为进一步检测非结核分枝杆菌做出重要提示,FQ-PCR技术在骨关节结核石蜡包埋标本检测中具有良好的应用价值。 展开更多
关键词 结核 分枝杆菌 结核 骨关节 聚合酶链式反应 抗酸染色
快速生长分枝杆菌肺病94例临床分析 被引量:7
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作者 何司琪 陈品儒 《中国防痨杂志》 CAS 2015年第9期948-952,共5页
目的探讨快速生长分枝杆菌肺病的临床特点、药物敏感性试验(简称“药敏试验”)情况、治疗及其转归。方法回顾性分析94例广州市胸科医院2008年1月至2014年6月确诊为快速生长分枝杆菌肺病的临床资料。结果本组患者中,73.4%(69/94... 目的探讨快速生长分枝杆菌肺病的临床特点、药物敏感性试验(简称“药敏试验”)情况、治疗及其转归。方法回顾性分析94例广州市胸科医院2008年1月至2014年6月确诊为快速生长分枝杆菌肺病的临床资料。结果本组患者中,73.4%(69/94)存在基础肺部疾病,其中60.6%(57/94)为肺结核,41.5%(39/94)为支气管扩张。胸部CT检查显示病灶多侵犯双侧,占75.5%(71/94)。支气管扩张型72例,薄壁空洞40例。共分离出276株菌株,63.4%(175/276)为龟-脓肿分枝杆菌复合群。药敏试验显示阿米卡星、克拉霉素的敏感度最高,分别为87.7%(242/276),80.1%(221/276)。98.9%(93/94)患者治疗后症状缓解。参照药敏试验结果,52.1%(49/94)患者采用3~4种敏感药物经规律治疗6个月后痰菌转阴,但仍有47.9%(45/94)患者的痰菌持续阳性。结论快速生长分枝杆菌肺病临床症状缺乏特异性,胸部CT检查可见病灶多侵犯双侧,薄壁空洞为主,多侵犯上叶,伴双肺散在支气管扩张,阿米卡星、克拉霉素的药物敏感度最高,早期完善菌种鉴定及药敏试验有助于制订该病的诊疗计划。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌 微生物敏感性试验 结核 支气管扩张症
Xpert MTB/RIF试验检测结核分枝杆菌及其耐药性研究 预览 被引量:5
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作者 刘慧梅 颜学兵 《成都医学院学报》 CAS 2015年第4期428-430,434共4页
目的 探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)在检测结核分枝杆菌(M.tubercutosis,MTB)及其利福平耐药性方面的应用价值。方法 收集151例疑似结核患者标本,分别进行液体变色培养基培养、涂片镜检、传统比例法药敏... 目的 探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)在检测结核分枝杆菌(M.tubercutosis,MTB)及其利福平耐药性方面的应用价值。方法 收集151例疑似结核患者标本,分别进行液体变色培养基培养、涂片镜检、传统比例法药敏试验以及Xpert MTB/RIF试验检测,分析Xpert MTB/RIF试验检测MTB及其耐药性的敏感度和特异度。结果 以液体变色培养基培养试验作为金标准,Xpert MTB/RIF试验检测MTB的敏感度和特异度分别为75.8%(25/33)和79.7%(94/118),两者一致性好(K=0.472)。以传统比例法药敏试验为金标准,Xpert MTB/RIF试验检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为80.0%(4/5)和89.3%(25/28),两者一致性好(K=0.595)。结论 Xpert MTB/RIF试验检测MTB及其耐药性具有较高的灵敏度和特异度。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 利福平耐药 敏感度 特异度 利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术
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荧光PCR技术检测痰液中结核分枝杆菌的研究 被引量:2
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作者 李良杰 林小玲 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第21期3636-3637,共2页
目的评估荧光PCR技术检测痰液中是否含有结核分枝杆菌的检测效能。方法 156例结核患者痰标本分别作荧光PCR技术和痰涂片检查,检验荧光PCR技术的阳性检出率;158例结核患者痰标本分别作荧光PCR技术和固体培养检查,以固体培养检查结果为金... 目的评估荧光PCR技术检测痰液中是否含有结核分枝杆菌的检测效能。方法 156例结核患者痰标本分别作荧光PCR技术和痰涂片检查,检验荧光PCR技术的阳性检出率;158例结核患者痰标本分别作荧光PCR技术和固体培养检查,以固体培养检查结果为金标准,检验荧光PCR技术的敏感度和特异度。结果在和痰涂片检查中,荧光PCR技术阳性检出率为50.64%,明显高于涂片染色法(37.82%),差异有统计学意义(P〈0.05);在和固体培养检查中,荧光PCR技术的敏感度为93.42%(71/76),特异度为90.24%(74/82)。结论荧光PCR技术具有较高的敏感度和特异度,在快速检测结核分枝杆菌时具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 荧光PCR技术 敏感度 特异度
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