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胰岛素样生长因子-1对血管平滑肌细胞增殖的影响 预览
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作者 李飞虹 尚茹茹 +3 位作者 吕淑萍 张锦 来春林 刘晓红 《中国药物与临床》 CAS 2017年第3期334-337,共4页
目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法 用脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7极化为M1型巨噬细胞,制备炎症模型即条件培养基(CM),未加LPS诱导组为对照组即非条件培养基(nCM)。体外培养VSM... 目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法 用脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7极化为M1型巨噬细胞,制备炎症模型即条件培养基(CM),未加LPS诱导组为对照组即非条件培养基(nCM)。体外培养VSMC分为5组,分别予nCM、CM、CM+IGF-1 60 ng/ml、CM+IGF-190 ng/ml、CM+IGF-1 120 ng/ml干预,用噻唑蓝(MTT)法检测各组吸光度(A)值,以A值反应各组VSMC的数量。结果 巨噬细胞RAW264.7在LPS 0 ng/ml、10 ng/ml、100 ng/ml、1μg/ml、10μg/ml浓度刺激下各组上清液中IL-6的浓度分别是(6.75±0.12)pg/ml、(7.82±1.53)pg/ml、(44.09±1.58)pg/ml、(155.71±23.93)pg/ml、(436.59±3.15)pg/ml,差异有统计学意义(P〈0.01);VSMC在5组不同干预下各组A值分别是(0.53±0.07)、(0.26±0.06)、(0.30±0.10)、(0.62±0.09)、(0.55±0.05),差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 M1型巨噬细胞可抑制VSMC增殖,但IGF-1可拮抗M1型巨噬细胞对VSMC增殖的抑制作用,本实验中IGF-1促进VSMC增殖的最适浓度为90 ng/ml。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子Ⅰ 肌细胞平滑肌 细胞增殖 动脉粥样硬化
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二十二碳六烯酸通过活化T细胞核因子1调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化
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作者 谢其非 陈蕊 +7 位作者 卢毅 严金川 刘朔 李梅 宋娟 邵晨 王中群 刘培晶 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期148-153,共6页
目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型转化的分子机制。方法采用组织贴块法培养大鼠PASMC。将PASMC分为常氧组、低氧组(1%O2、94%N2、5%CO2,低氧刺激12 h)、低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+... 目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)调控低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型转化的分子机制。方法采用组织贴块法培养大鼠PASMC。将PASMC分为常氧组、低氧组(1%O2、94%N2、5%CO2,低氧刺激12 h)、低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)组(给予DHA处理后低氧孵育12 h),低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)+过表达NFATc1组(细胞转染过表达NFATc1载体24 h,然后再给予DHA及低氧刺激12 h)及低氧(1%O2、94%N2、5%CO2)+DHA(10 μmol/L)+敲低NFATc1组(细胞转染NFATc1小干扰RNA 24 h,然后再给予DHA及低氧刺激12 h)。使用三气培养箱制造低氧环境加以干预。分别采用实时定量PCR和Western blot法检测各组细胞的NFATc1mRNA和蛋白表达水平,分别采用免疫荧光染色、Western blot和实时定量PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,采用实时定量PCR法检测平滑肌肌动蛋白相关蛋白22(SM22)mRNA表达水平,采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)法检测PASMC增殖情况。 结果低氧刺激12 h,低氧组大鼠PASMC NFATc1的mRNA及蛋白表达水平均明显高于常氧组(P均〈0.05),而低氧+DHA组则均明显低于低氧组(P〈0.05)。转染NFATc1过表达病毒及小干扰RNA 24 h后,低氧刺激大鼠PASMC 12 h,低氧组大鼠PASMC α-SMA阳性的细胞数、α-SMA蛋白及mRNA以及SM22 mRNA表达水平均明显低于常氧组(P均〈0.05),低氧+DHA组则高于低氧组(P〈0.05),低氧+DHA+过表达NFATc1组则明显低于低氧+DHA组(P〈0.05),而低氧+DHA+敲低NFATc1组又明显高于低氧+DHA+过表达NFATc1组(P〈0.05)。低氧组大鼠PASMC增殖率明显高于常氧组(P〈0.05),低氧+DHA组则明显低于低氧组(P〈0.05),低氧+DHA+过表达NFATc1组则明显高于低氧+DHA组(P〈0.05),而低氧+DHA+敲低NFATc1组又明显低于低氧+DHA+过表达NFATc1组� 展开更多
关键词 肺动脉 肌细胞 平滑肌 二十二碳六烯酸类
瘦素通过PI3K/Akt通路对大鼠气道平滑肌细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 刘文静 朱述阳 +4 位作者 陈玉玲 吴瑕 倪文静 陈云峰 赵玲 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期915-918,共4页
目的观察瘦素对大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)蛋白激酶-B(Akt)、磷酸化蛋白激酶-B(Pho-Akt)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酰蛋白酶.3(caspase-3)的表达及细胞凋亡的影响,探讨瘦素影响... 目的观察瘦素对大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)蛋白激酶-B(Akt)、磷酸化蛋白激酶-B(Pho-Akt)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酰蛋白酶.3(caspase-3)的表达及细胞凋亡的影响,探讨瘦素影响ASMC凋亡的可能机制。方法体外培养大鼠ASMC,按随机数字表法分为空白对照组、瘦素50μg/L组(Lep50组)、瘦素100μg/L组(Lep100组)、瘦素200μg/L组(Lep200组)及瘦素200μg/L+LY294002组[1-磷脂酰肌醇3.激酶(P13K)抑制剂组]。各组均孵育24h后用Annexin-V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡率,WesternblotOn,0定Akt、Pho-Akt、Bcl-2、Bax和caspase-3的蛋白表达情况。结果Lep50组、Lep100组、Lep200组的细胞凋亡率分别为(3.97±0.39)%、(1.88±0.72)%和(0.77±0.11)%,均低于空白对照组的(7.38±0.49)%(F=89.57,P〈0.05),且各组细胞凋亡率与瘦素浓度呈负相关(r=-0.711,P〈0.05);P13K抑制剂组凋亡率为(3.29±0.36)%,高于Lep200组(F=89.57,P〈0.01)。Westernblot结果显示随着瘦素浓度的升高Bel-2表达增加,且与浓度呈正相关(r=0.939,P〈0.05),Bax和easpase-3表达下降,与瘦素浓度成负相关(r值分别为-0.908和-0.961,均P〈0.05),Bcl-2/Bax比值增加(F=20.56,P〈0.05),Pho-Akt表达上调,且与瘦素浓度呈正相关(r=0.958,P〈0.05);P13K抑制剂组较Lep200组Pho-Akt、Bcl-2表达下降(F值分别为32.93和19.48,均P〈0.05),Bax和caspase-3表达升高(F值分别为10.10和29.86,均P〈0.05),Bcl-2/Bax比值下降(F=20.56,P〈0.05)。结论瘦素可以抑制ASMC的凋亡,其机制可能与激活P13K/Akt通路有关。 展开更多
关键词 瘦素 肌细胞 平滑肌 细胞凋亡 1-磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B
白细胞介素13及变异体刺激呼吸道平滑肌后差异蛋白分析
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作者 姜晓峰 郭晓英 +4 位作者 梁红艳 杜雪飞 辛瑜 薛丽 傅松滨 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期 437-440,共4页
目的应用双向电泳及质谱技术对野生型及变异型白细胞介素13(IL-13)刺激后的ASMC总蛋白进行差异比较研究,借此分析差异表达蛋白与支气管哮喘的关系,为哮喘的治疗提供新的靶标。方法用固相pH双向电泳分离,分别给予野生型IL-13及变异... 目的应用双向电泳及质谱技术对野生型及变异型白细胞介素13(IL-13)刺激后的ASMC总蛋白进行差异比较研究,借此分析差异表达蛋白与支气管哮喘的关系,为哮喘的治疗提供新的靶标。方法用固相pH双向电泳分离,分别给予野生型IL-13及变异型IL-13刺激的ASMC总蛋白组成分,找出异常IL-13处理后与野生型IL-13处理后有明显差别的蛋白斑点,用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF)进行鉴定部分差异蛋白质。结果获得了分辨率高,重复性好的电泳图谱,在野生型IL-13刺激组和变异型IL-13刺激组分别平均有(840±21)个和(892±17)个蛋白点(n=3)被检测,匹配的点数为(685±19)个,选取5个未匹配点做质谱分析,鉴定其中3个分别为stathmin1,Ribosomalproteinpo,NADHdehydrogenase。结论本研究结果显示不同处理组的ASMC总蛋白表达存在差异,这些差异蛋白有可能为阐明野生型IL-13及其变异体引发哮喘机制提供新的实验证据。 展开更多
关键词 白细胞介素13 肌细胞 平滑肌 电泳 光质分析 质量
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