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模拟微重力环境下核因子κB信号通路调节MC3T3-E1细胞成骨分化的实验研究
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作者 韩标 张扬 +3 位作者 李昊 韦淑萍 李瑞欣 张西正 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期421-427,共7页
本文旨在研究微重力环境对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响,并进一步探讨微重力环境下核因子κB(NF-κB)信号通路对成骨细胞零重力的响应机制。将MC3T3-E1细胞分别进行正常培养(CON)和模拟微重力培养(SMG),培养期满后观察成骨性相关分子表... 本文旨在研究微重力环境对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响,并进一步探讨微重力环境下核因子κB(NF-κB)信号通路对成骨细胞零重力的响应机制。将MC3T3-E1细胞分别进行正常培养(CON)和模拟微重力培养(SMG),培养期满后观察成骨性相关分子表达变化以及NF-κB信号通路变化情况。结果显示,在微重力条件下,碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、一型胶原(CoL-Ⅰ)的基因和蛋白水平表达下调;与此同时,NF-κB信号抑制子α(IκB-α)下调,p65表达显著上调,且二者磷酸化水平升高,细胞培养液中IL-6含量增多。研究表明,微重力环境下NF-κB信号通路可激活并调控成骨细胞分化。 展开更多
关键词 模拟微重力 成骨细胞 核因子ΚB信号通路 骨形态发生蛋白 成骨分化
电针刺激后大鼠血清对成骨细胞OPG、RANKL mRNA及其蛋白表达的影响 预览
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作者 金俊健 《上海针灸杂志》 2019年第7期798-802,共5页
目的观察电针刺激去卵巢骨质疏松症模型大鼠的血清对体外培养成骨细胞的骨形成因子骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和骨吸收因子(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)mRNA表达及其蛋白浓度的影响。方法将45只雌性S... 目的观察电针刺激去卵巢骨质疏松症模型大鼠的血清对体外培养成骨细胞的骨形成因子骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和骨吸收因子(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)mRNA表达及其蛋白浓度的影响。方法将45只雌性SD大鼠,随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、电针刺激组(C组),每组15只。除A组外,B组、C组均切除双侧卵巢。造模成功后,C组给予电针刺激,B组正常饲养,A组不做任何处理,常规正常饲养。12周后,采用水合氯醛麻醉各组大鼠,心脏采血,经过处理后加到体外培养的大鼠成骨细胞培养液中。采用碱性磷酸酶(ALP)检测成骨细胞活性,RT-qPCR法检测大鼠血清对OPG、RANKL mRNA表达的影响,ELISA法检测大鼠血清对OPG、RANKL蛋白浓度的影响。结果各组大鼠血清处理成骨细胞后,与A组比较,B组ALP的活性明显降低(P<0.05),C组电刺激后成骨细胞内ALP的活性明显增加(P<0.05)。与B组比较,A组及C组OPG mRNA表达及其蛋白浓度表达明显降低(P<0.05);与A组比较,C组OPG mRNA表达及其蛋白浓度均明显降低(P<0.05)。与B组比较,C组及A组RANKL mRNA表达及其蛋白浓度表达明显降低(P<0.05);与A组比较,C组RANKL mRNA及蛋白浓度明显降低(P<0.05)。C组大鼠骨密度明显高于B组(P<0.05)。结论电刺激后的大鼠血清可以提升ALP、OPG水平,降低RANKL水平,其治疗骨质疏松症的机制可能与此有关。 展开更多
关键词 针刺疗法 电针 骨质疏松 成骨细胞 骨保护素 骨吸收因子 大鼠
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姜黄素调控脂多糖诱导成骨细胞线粒体功能改变及凋亡研究
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作者 李广悦 尹东青 +2 位作者 徐凌 丁慧芬 许芸 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期581-587,共7页
目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和姜黄素(curcumin,Cur)对成骨细胞线粒体功能活性改变及凋亡的影响。方法:体外培养小鼠原代成骨细胞,并将细胞分为 4 组:无任何处理的对照组(N 组);10 μmol/L 姜黄素预处理 2 h,使用正常培养... 目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和姜黄素(curcumin,Cur)对成骨细胞线粒体功能活性改变及凋亡的影响。方法:体外培养小鼠原代成骨细胞,并将细胞分为 4 组:无任何处理的对照组(N 组);10 μmol/L 姜黄素预处理 2 h,使用正常培养基培养 24 h 组(Cur 组);用 1 mg/L LPS 处理 24 h 组(LPS 组);用 10 μmol/L 姜黄素预处理 2 h,然后再用 1 mg/L LPS 处理成骨细胞 24 h 组(Cur +LPS 组)。利用线粒体荧光探针测量线粒体活性氧的产生,检测线粒体氧化呼吸链酶活性、线粒体膜电位、细胞内 ATP 的合成及细胞凋亡情况。结果:在经过 1 mg/L LPS 刺激后,小鼠成骨细胞线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成为对照组的 2.59 倍;与对照组相比,LPS 组氧化呼吸链酶Ⅰ活性降低 21%,氧化呼吸链酶Ⅲ活性降低 26%,氧化呼吸链酶Ⅳ活性降低 28%;线粒体细胞膜电位降低 32%,ATP 合成量为(0.79±0.06)μmol/mg 蛋白,细胞凋亡数目增加 3.2 倍;而Cur+LPS 组较 LPS 组相比,小鼠成骨细胞内 ROS 水平降低(1.48±0.21 vs. 2.59±0.32,P=0.003),氧化呼吸链酶Ⅰ活性升高(0.98±0.02 vs. 0.79±0.03,P=0.000),氧化呼吸链酶Ⅲ活性升高(0.93±0.03 vs. 0.74±0.03,P=0.004),氧化呼吸链酶Ⅳ活性升高(0.92±0.05 vs. 0.72±0.02,P=0.009),线粒体膜电位增加(0.91±0.04 vs. 0.68±0.04,P=0.002),ATP 合成量增加(1.53±0.05vs. 0.79±0.06,P=0.000),细胞凋亡数目减少(1.67±0.42 vs. 5.33±0.80,P=0.002)。结论:姜黄素预处理组的成骨细胞线粒体功能得以明显改善,并且细胞凋亡数目明显减少,为姜黄素可能被进一步应用于临床治疗慢性牙周炎提供一定的实验依据。 展开更多
关键词 脂多糖 姜黄素 成骨细胞 线粒体 活性氧 细胞凋亡
硅钙微弧氧化涂层钛基体成骨细胞生物相容性的研究 预览
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作者 邹智群 杨晓宇 《中国当代医药》 2019年第23期8-11,20,F0004共6页
目的探讨不同电压微弧氧化(MAO)处理后含钙硅涂层的钛基体材料成骨细胞的生物相容性。方法纯钛材料进行MAO后(MAO-200V,MAO-300V,MAO-400V)处理制成不同的含钙硅涂层钛材料作为实验组(实验组B、实验组C、实验组D),纯钛作为对照组,每组... 目的探讨不同电压微弧氧化(MAO)处理后含钙硅涂层的钛基体材料成骨细胞的生物相容性。方法纯钛材料进行MAO后(MAO-200V,MAO-300V,MAO-400V)处理制成不同的含钙硅涂层钛材料作为实验组(实验组B、实验组C、实验组D),纯钛作为对照组,每组各15个试件。采用MC3-T3细胞系在实验组和对照组材料上进行培养,用扫描电镜观察细胞的形态,观察细胞在实验组和对照组材料表面的附着和增值情况。结果实验组在应用不同电压处理前后电解液中的钙、磷浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在早期(0.5、1h)时,实验组B、实验组C、实验组D的细胞黏附率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2h后实验组B、实验组C、实验组D的细胞黏附率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),各实验组的细胞黏附率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。随着培养时间的延长,实验组细胞材料表面的OD值均增加(P<0.05);培养1、4d时,对照组与实验组的OD值比较,差异无统计学意义(P>0.05);当细胞培养至7、10d时,实验组的OD值均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在不同电压MAO处理后含钙硅涂层的钛材料表面成骨细胞早期附着、形态变化和增殖优于纯钛,具有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 微弧氧化 成骨细胞 表面处理 生物相容性
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有氧运动对2型糖尿病大鼠骨代谢的影响 预览
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作者 张玲莉 林小晶 +3 位作者 郭健民 吴伟 付绍婷 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2019年第3期254-260,共7页
目的 观察有氧运动对2型糖尿病大鼠骨表型的影响。方法 以50只6周龄雄性SD大鼠为研究对象,通过给大鼠喂饲高脂高糖饲料、注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,经过跑台运动后分为正常对照(control,C)组、糖尿病对照(diabetes mellitus,DM)组... 目的 观察有氧运动对2型糖尿病大鼠骨表型的影响。方法 以50只6周龄雄性SD大鼠为研究对象,通过给大鼠喂饲高脂高糖饲料、注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,经过跑台运动后分为正常对照(control,C)组、糖尿病对照(diabetes mellitus,DM)组和糖尿病运动(diabetes mellitus with exercise,EDM)组。后micro-CT检测大鼠股骨骨密度和骨微含量,real-time PCR定量检测大鼠胫骨成骨、成脂、破骨相关基因的表达量。结果 建模成功后DM组、EDM组大鼠的体质量显著低于C组( P <0.05),第1周到第4周DM组和EDM组大鼠的体质量较之于C组均显著偏低( P <0.01),第3周EDM组大鼠体质量低于DM组( P <0.05)。C组、DM组和EDM组大鼠左腿股骨骨密度无差异;EDM组大鼠股骨骨小梁相对体积(trabecular volume,BV/TV)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)都显著低于C组( P <0.05)。DM组Runx2 mRNA表达低于C组( P <0.05);EDM组碱性磷酸酶(alkaline Phosphatase,ALP)mRNA表达高于C组和DM组( P <0.05),Osterix mRNA表达高于C组( P <0.05)且显著高于DM组( P <0.01),RANKL mRNA表达低于C组( P <0.05)。各组大鼠胫骨中CEBP、Ctsk、OPG、RANK mRNA表达均未出现差异。结论 4周的跑台运动可以促进2型糖尿病大鼠骨形成、有效地抑制骨吸收和脂肪形成,但并没有明显反映在骨量上。 展开更多
关键词 有氧运动 糖尿病 骨密度 成骨细胞 破骨细胞
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7-甲氧基-4 ’-羟基异黄酮促进大鼠成骨细胞成骨性分化的作用机制 预览
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作者 宋明甲 文益民 +2 位作者 吴晓燕 柴晓亮 周建 《医药导报》 CAS 北大核心 2019年第6期730-734,共5页
目的 探讨7-甲氧基-4’-羟基异黄酮(MHIF)促进成骨细胞成熟矿化是否与NO/cGMP/sGC信号通路相关。方法 检测成骨细胞经不同浓度(0,10-4,10-5,10-6,10-7,10-8mol·L^-1)MHIF处理后骨钙素和碱性磷酸酶确定最适药物浓度。使用一氧化合... 目的 探讨7-甲氧基-4’-羟基异黄酮(MHIF)促进成骨细胞成熟矿化是否与NO/cGMP/sGC信号通路相关。方法 检测成骨细胞经不同浓度(0,10-4,10-5,10-6,10-7,10-8mol·L^-1)MHIF处理后骨钙素和碱性磷酸酶确定最适药物浓度。使用一氧化合成酶阻断剂N-单甲基-L-精氨酸(L-NMA)处理成骨细胞,观察MHIF对骨钙素和碱性磷酸酶影响,一氧化氮(NO)和3-5-环鸟苷-磷酸(cGMP)的含量;应用蛋白质印迹检测细胞中蛋白可溶性的鸟氨酸环化酶和蛋白激酶G的表达水平。结果 经10-6mol·L^-1MHIF处理后成骨细胞中碱性磷酸酶活性和骨钙素的含量升高,预先使用L-NMA处理成骨细胞后,MHIF提高成骨细胞中碱性磷酸酶活性和骨钙素含量的作用受到抑制,MHIF提高一氧化氮合酶(NOS)、NO、cGMP、sGC和PKG表达均受到抑制。结论 MHIF可通过NO/cGMP/sGC信号通路促进体外培养成骨细胞成熟与矿化。 展开更多
关键词 7-甲氧基-4’-羟基异黄酮 成骨细胞 骨钙素 N-单甲基-L-精氨酸
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维甲酸诱发C57小鼠骨质疏松模型的形态学和骨密度变化 预览
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作者 周圆媛 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第17期4312-4314,共3页
目的 探讨维甲酸诱发C57小鼠骨质疏松模型的形态学和骨密度变化。方法 3月龄SPF级野生型C57小鼠为随机分为两组各50只,骨质疏松组每天给予0.9%维甲酸(90 ml/kg)灌胃,对照组每天给予0.9%氯化钠注射液( 90 ml/kg )灌胃,共21 d。电子天平... 目的 探讨维甲酸诱发C57小鼠骨质疏松模型的形态学和骨密度变化。方法 3月龄SPF级野生型C57小鼠为随机分为两组各50只,骨质疏松组每天给予0.9%维甲酸(90 ml/kg)灌胃,对照组每天给予0.9%氯化钠注射液( 90 ml/kg )灌胃,共21 d。电子天平称量小鼠双侧股骨和胫骨(已剔除肌肉和软组织)湿重,应用Micro-CT对骨组织进行形态学观察;使用Inveon Research Work Place软件分析小鼠骨小梁相关参数。结果 骨质疏松组小鼠体重较对照组明显降低( P <0.05),骨质疏松组小鼠股骨和胫骨湿重较对照组明显降低( P <0.05)。对照组小鼠的骨小梁走向大致相同,粗细均匀,形态规则,排列紧密有序,有一定厚度;骨质疏松组小鼠的骨小梁厚度变薄,数量变少,小梁间走向不一致,有断裂,分离度大,形态不规则,连接疏松,网状结构消失。与对照组比较,骨质疏松组小鼠的骨密度和骨矿含量明显降低( P <0.05)。结论 维甲酸诱导法可建立3月龄的SPF级野生型C57小鼠骨质疏松模型,该模型小鼠的形态学及骨密度相关参数均有明显改变。 展开更多
关键词 骨质疏松 维甲酸 成骨细胞 破骨细胞 MICRO-CT
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泼尼松龙通过抑制TAK1诱导成骨细胞凋亡的实验研究 预览
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作者 左斌 邹凯 +1 位作者 车彪 喻忠斌 《疑难病杂志》 CAS 2019年第6期610-615,649共7页
目的观察泼尼松龙通过抑制转化生长因子β激活激酶1(TAK1)表达对成骨细胞凋亡的影响。方法 2017年2月-2017年7月于长江航运总医院实验室进行实验,将M3T3-E1成骨细胞经原代培养后传代培养,将细胞分为3组,A组(正常组)、B组(阴性转染+泼尼... 目的观察泼尼松龙通过抑制转化生长因子β激活激酶1(TAK1)表达对成骨细胞凋亡的影响。方法 2017年2月-2017年7月于长江航运总医院实验室进行实验,将M3T3-E1成骨细胞经原代培养后传代培养,将细胞分为3组,A组(正常组)、B组(阴性转染+泼尼松龙处理组)、C组(TAK1 siRNA转染+泼尼松龙处理组),采用碱性磷酸酶(ALP)染色和钙结节染色评估成骨细胞分化能力的变化;采用免疫印迹法(Western blot)检测细胞内磷酸化(p)-TAK1、TAK1、磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)、JNK蛋白表达;MTT法检测M3T3-E1细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期以及细胞凋亡变化。结果与A组比较,B、C组细胞逐渐发生破裂,细胞数量逐渐减少,细胞内钙结节数量逐渐减少;B组细胞出现破碎、形态发生改变,C组破碎细胞数量明显增加。p-TAK1、p-JNK蛋白表达量A组>B组> C组(F/P=51.624/0. 000、21. 163/0. 000);A、B、C 3组细胞抑制率均随着时间的延长,细胞增值率呈现逐渐上升的趋势,其中48 h受抑制更显著。在12 h时,A组细胞抑制率明显高于B组和C组(q=5. 093、5. 821,P均<0. 05),在24 h、48 h、72 h时,细胞抑制率A组> B组> C组(F/P=74. 880/0. 000、117. 081/0. 000、116. 019/0. 000);3组处于G2期细胞比例C组> B组> A组(F/P=21.254/0. 000),处于S期细胞比例C组<A组<B组(F/P=10.222/0.000);细胞凋亡率C组>B组>A组(F/P=362.449/0.000)。结论沉默TAK1表达后能够增强泼尼松龙诱导成骨细胞凋亡的作用,可能与JNK信号通路相关。 展开更多
关键词 转化生长因子β激活激酶1 泼尼松龙 成骨细胞 细胞凋亡
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模拟失重条件下Wnt/β-catenin信号通路调节成骨细胞功能的研究进展 预览
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作者 张丽君 王可 +5 位作者 王艺璇 胡泽兵 李高志 石菲 曹新生 张舒 《解放军医学院学报》 CAS 2019年第3期290-292,297共4页
Wnt/β-catenin信号通路在成骨细胞分化早期发挥促进作用,分化末期发挥抑制作用,并且在失重环境下调节成骨细胞的发育,参与失重导致的骨丢失调控,表现为在失重条件下,成骨细胞的Wnt/β-catenin信号通路的激活受抑,进而影响了成骨细胞的... Wnt/β-catenin信号通路在成骨细胞分化早期发挥促进作用,分化末期发挥抑制作用,并且在失重环境下调节成骨细胞的发育,参与失重导致的骨丢失调控,表现为在失重条件下,成骨细胞的Wnt/β-catenin信号通路的激活受抑,进而影响了成骨细胞的增殖分化。本文就Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞的发育及其在失重条件下对成骨细胞功能影响的研究进展做以下综述。 展开更多
关键词 WNT/Β-CATENIN信号通路 成骨细胞 失重
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成骨细胞分泌的新型厌食因子:脂质运载蛋白2 预览
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作者 刘媛 李世昌 徐帅 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期184-190,共7页
骨骼作为一种全新的内分泌器官,通过自分泌、旁分泌或远距分泌活性因子参与糖脂代谢、骨代谢、细胞增殖及认知等生命活动。最新研究发现,成骨细胞分泌脂质运载蛋白2(lipocalin-2,LCN2)穿过血脑屏障,参与下丘脑LCN2-黑素皮质素受体-4(mel... 骨骼作为一种全新的内分泌器官,通过自分泌、旁分泌或远距分泌活性因子参与糖脂代谢、骨代谢、细胞增殖及认知等生命活动。最新研究发现,成骨细胞分泌脂质运载蛋白2(lipocalin-2,LCN2)穿过血脑屏障,参与下丘脑LCN2-黑素皮质素受体-4(melanocortin receptor-4,MC4R)-环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)食欲调控通道以抑制食欲,进而影响能量代谢,但其作用机制尚未明确。既往研究发现,LCN2可在许多组织中表达,参与炎症、免疫调节、肿瘤及心血管疾病等多种生理病理活动。本文主要以LCN2相关文献为理论基础,整理归纳成骨细胞分泌LCN2的功能及作用机制,为肥胖症机制提供新的视角。 展开更多
关键词 成骨细胞 骨内分泌 厌食 脂质运载蛋白2
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3D打印三维多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽支架材料的生物相容性 预览
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作者 楼毅 张志文 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第34期5497-5502,共6页
背景:人工骨的研制已成为骨组织工程的热点,临床实践证明单一性质的骨材料不能很好地满足临床需要,这使得复合支架材料的研制及应用受到了关注。目的:3D打印制备三维多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料,表征其生物相容性。方法:利用3D... 背景:人工骨的研制已成为骨组织工程的热点,临床实践证明单一性质的骨材料不能很好地满足临床需要,这使得复合支架材料的研制及应用受到了关注。目的:3D打印制备三维多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料,表征其生物相容性。方法:利用3D打印技术制备多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽复合支架材料,表征材料的组成成分、微观结构、力学强度。利用倒置显微镜与CCK-8实验检测多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料对成骨细胞的毒性;利用扫描电镜观察成骨细胞在多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料上的生长及黏附情况;利用急性毒性实验、肌肉植入实验与骨缺损植入实验检验多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料的生物相容性。实验方案经解放军第二军医大学伦理委员会批准。结果与结论:①多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料主要由碳酸钙、生物多肽组成,抗压强度达到10 MP以上,孔隙率达85%以上,孔径为50-100μm;②成骨细胞在多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料浸提液中生长良好,细胞活性强,多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料浸提液的细胞毒性为1级;③成骨细胞可在多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料表面黏附、增殖;④多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料可在体内降解,未引发动物全身毒性反应,无肌肉刺激反应,可促进骨缺损的修复;⑤结果表明,多孔海洋贝壳/鹿瓜多肽生物支架材料具有良好的力学性能、三维空间结构、细胞相容性与组织相容性。 展开更多
关键词 3D打印 海洋贝壳 鹿瓜多肽 骨修复材料 生物相容性 骨缺损 成骨细胞 骨诱导
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钛银合金及其表面纳米管化的生物相容性
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作者 崔璀 赵鑫 张杭州 《解剖科学进展》 2019年第3期249-251,共3页
目的分析纳米钛银合金纳米管复合物的生物相容性。方法首先采用熔融法制备钛银合金(3%的银含量),然后通过阳极氧化技术在钛银合金表面制备纳米管。采用扫描电镜实验方法观察复合物的表面形貌。采用钛银合金及钛银合金纳米管和商业钛金... 目的分析纳米钛银合金纳米管复合物的生物相容性。方法首先采用熔融法制备钛银合金(3%的银含量),然后通过阳极氧化技术在钛银合金表面制备纳米管。采用扫描电镜实验方法观察复合物的表面形貌。采用钛银合金及钛银合金纳米管和商业钛金属分别与成骨细胞共同培养方法,扫描电镜下观察细胞在支架上的黏附、增殖及凋亡。采用细胞毒性实验(MTT)实验方法检测金属的相容性。结果通过改变阳极氧化条件能制备不同表面形貌的钛银合金纳米管,将钛银合金及钛银合金纳米管和商业钛金属分别与成骨细胞共同培养3天后,倒置显微镜观察金属材料周围的成骨细胞生长情况,发现钛银合金纳米管及钛银合金周围细胞增殖与商业钛金属无明显差异。同时通过扫面电镜观察细胞在金属材料上的生长增殖情况,细胞在钛银合金纳米管上生长良好,可见大量细胞伪足附着于其上。同时通过细胞毒性实验(MTT),发现钛银合金纳米管及钛银合金与商业钛金属之间无明显差异。结论钛银合金纳米管具有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 纳米涂层金属材料 生物相容性 钛银合金纳米管 成骨细胞
ACEI对糖皮质激素处理的成骨细胞局部RAS的影响 预览
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作者 朱伟东 杨佩 +5 位作者 刘晓辉 蒋武强 董军 吴昊 王春生 王坤正 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期549-553,568共6页
目的利用地塞米松处理小鼠成骨细胞(MC3T3-E1),观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor, ACEI)对激素处理的成骨细胞局部肾素-血管紧张素系统(renin angiotensin system, RAS)的调节作用。方法首先采用不... 目的利用地塞米松处理小鼠成骨细胞(MC3T3-E1),观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor, ACEI)对激素处理的成骨细胞局部肾素-血管紧张素系统(renin angiotensin system, RAS)的调节作用。方法首先采用不同浓度(10-10~10-5mol/L)和作用时间(3、6、12、24、48 h)的地塞米松干预成骨细胞,利用实时定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)及Western blot测定RAS各主要组分肾素、ACE、血管紧张素受体Ⅰ(angiotensin receptor 1, AT1R)、血管紧张素受体Ⅱ(angiotensin receptor 2, AT2R)的mRNA和蛋白表达,确定地塞米松对成骨细胞RAS作用的最适浓度和时间。选择地塞米松最适作用浓度(10-5mol/L)和时间(24 h)以及糖皮质激素受体阻滞剂(米非司酮10-5mol/L)、ACEI(卡托普利10-11mol/L)干预细胞,设立6组分别为:对照组、地塞米松组、米非司酮组、卡托普利组、地塞米松+米非司酮组、地塞米松+卡托普利组;分别应用qRT-PCR和ELISA及Western blot测定各组RAS主要组分(肾素、ACE、AT1R、AT2R)的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,糖皮质激素应用后成骨细胞内RAS(肾素、ACE、AT1R、AT2R)的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05);使用糖皮质激素受体阻滞剂米非司酮与ACEI卡托普利后均可使上述改变受到抑制(P<0.05)。结论糖皮质激素能够激活成骨细胞局部RAS,ACEI卡托普利可抑制上述变化。 展开更多
关键词 激素性骨坏死 地塞米松 肾素-血管紧张素系统(RAS) 血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI) 成骨细胞
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氯化锂联合淫羊藿苷对成骨细胞增殖分化的影响 预览
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作者 付殷 孙贵才 +1 位作者 欧阳玉龙 温浙旭 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1221-1225,共5页
目的研究氯化锂(LiCl)与淫羊藿(ICA)苷联合应用对成骨细胞增殖、分化的影响,为LiCl与ICA联合应用提高成骨细胞矿化能力提供研究基础。方法采用酶消化法和茜素红染色法鉴定并获得大量细胞为成骨细胞,随机分为4组即空白组、ICA组(80nmol/L... 目的研究氯化锂(LiCl)与淫羊藿(ICA)苷联合应用对成骨细胞增殖、分化的影响,为LiCl与ICA联合应用提高成骨细胞矿化能力提供研究基础。方法采用酶消化法和茜素红染色法鉴定并获得大量细胞为成骨细胞,随机分为4组即空白组、ICA组(80nmol/L),LiCl(5nmol/L),ICA(80nmol/L)+LiCl(5nmol/L)组,诱导21d后采用茜素红法及碱性磷酸酶活性测定各组成骨细胞矿化能力及活性。采用CCK-8和Westernblot法测定各组对体外成骨细胞增殖活性及成骨细胞中p-GSK3β,β-catenin水平。结果倒置显微镜下观察细胞多为单核、多边形及梭形,局部有细胞密集的细胞团,茜素红染色将钙化结节染成橘红色;LiCl及ICA单独作用于成骨细胞时,都可以明显促进成骨细胞的增殖,增加ALP活性及矿化能力,同时明显促进p-GSK3β、β-catenin蛋白的表达;但是LiCl与ICA联合应用能够明显促进成骨细胞的增殖,并且在分子水平能够明显抑制p-GSK3β、β-catenin的表达,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论LiCl与ICA联合应用可以通过wnt信号通路促进成骨细胞的增殖、分化。 展开更多
关键词 氯化锂 淫羊藿苷 成骨细胞 WNT信号通路
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Mechanical Sensitive Molecule MACF1 Promotes Osteoblast Differentiation
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作者 Lifang Hu Chong Yin +5 位作者 Zixiang Wu Zizhang Huang Peihong Su Yan Zhang Zhihao Chen Airong Qian 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第A01期71-72,共2页
The decreased osteoblast differentiation associated with reduced bone formation is one main cause of microgravityinduced bone loss.Our previous studies have demonstrated that microtubule actin crosslinking factor 1(MA... The decreased osteoblast differentiation associated with reduced bone formation is one main cause of microgravityinduced bone loss.Our previous studies have demonstrated that microtubule actin crosslinking factor 1(MACF1)is downregulated in association with the decreased osteoblast differentiation and bone formation under simulated microgravity conditions.These findings suggest that MACF1 is sensitive to mechanical condition and may be critical for osteoblast differentiation and bone formation.To verify this hypothesis,current study investigates the role and mechanism of MACF1 in regulatingosteoblast differentiation by adopting MACF1 knockdown(MACF1-KD)osteoblasts.The results showed that MACF1 knockdown suppressed mineralized nodules formation,alkaline phosphatase(ALP)activity,osteogenic gene expression andβ-catenin signaling transduction.Moreover,we used RNA sequencing(RNA-seq)and chromatin immunoprecipitation sequencing(ChIP-seq)to investigate further mechanism.Interestingly,we found that MACF1 sequesterd repressors of osteoblast differentiation in cytoplasm.In conclusion,MACF1 is sensitive to mechanical condition and plays key role in activatingβ-catenin signaling transduction and sequestering repressors of osteoblast differentiation,which further promotes osteoblast differentiation. 展开更多
关键词 MACF1 OSTEOBLAST cell DIFFERENTIATION β-catenin SIGNALING
桃红四物汤逆转斑马鱼模型糖皮质激素性骨质疏松的研究
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作者 赵蓉 蒋俊 +4 位作者 肖世长 谭朝林 王福元 徐希明 夏海建 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期313-320,共8页
本文研究桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction, THSWD)对糖皮质激素性骨质疏松的治疗作用及其机制。精密称量THSWD中9种有效成分的标准品,配制标准品储备液,稀释得到一系列浓度的标准液,建立标准曲线。按复方比例称取THSWD各成分,提取... 本文研究桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction, THSWD)对糖皮质激素性骨质疏松的治疗作用及其机制。精密称量THSWD中9种有效成分的标准品,配制标准品储备液,稀释得到一系列浓度的标准液,建立标准曲线。按复方比例称取THSWD各成分,提取,通过高效液相色谱法测定其中9种有效成分的含量。自然交配得到斑马鱼胚胎。孵化后,用空白E3培养基培养至受精后3天(3 days post fertilization, 3DPF),分为对照组(空白E3培养基)、泼尼松龙组(25μmol·L-1 prednisolone, PNSL)、依替膦酸二钠组[15μmol·L-1 disodium ethydronate (DE)和25μmol·L-1 PNSL]、THSWD组(0.1、1.0或10.0μg·mL-1 THSWD和25μmol·L-1 PNSL),每组15只幼鱼。继续培养至10 DPF,将斑马鱼麻醉处死,用茜素红S (alizarin red S, ARS)染色,在显微镜下观察其骨骼的染色情况;对斑马鱼的骨矿化面积和累积光密度进行定量分析;用实时PCR定量检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP)、I型胶原蛋白(type I)、人类相关转录因子2 (runt-related transcription factor 2, RUNX-2)、血清骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b (TRACP)和骨钙素(osteocalcin, OCN)基因的表达;用电感耦合等离子体质谱法测定斑马鱼体内的矿物含量。结果显示,在THSWD的水提液中, 9种有效成分的浓度顺序为:没食子酸>羟基红花黄色素A>绿原酸>洋川芎内酯H>阿魏酸>咖啡酸、洋川芎内酯Ⅰ>香豆酸>苯甲酸。与对照组相比,用25μmol·L-1泼尼松龙处理斑马鱼可显著降低其矿化骨面积和累积光密度, AKP、type I、RUNX-2、OPG、OCN基因的表达也有显著性降低,斑马鱼的Ca、P、K、Mg、Zn和Fe水平分别降低了2.8、2.4、13.8、6.6、8.0和8.8倍;与泼尼松龙组相比,经THSWD干预治疗后,斑马鱼的骨矿化面积和累积光密度值有显著性地升高,且呈剂量依赖性,相关基因的表达也有明显增加,斑马鱼Ca、P、K、Mg、Zn和Fe水平均显著高于泼尼松龙组� 展开更多
关键词 桃红四物汤 骨质疏松 斑马鱼 糖皮质激素 成骨细胞
骨骼系统中糖代谢机制的运动干预研究 预览
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作者 陈泷 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1185-1191,共7页
成骨细胞的骨形成功能和破骨细胞的骨吸收功能构成了骨重塑结构,其平衡过程是骨稳态的重要因素。然而,这种平衡可能会因为骨内稳态失衡而受到破坏,了解骨骼中葡萄糖代谢的作用和调节机制,可为进一步揭示成骨细胞和破骨细胞的分化过程提... 成骨细胞的骨形成功能和破骨细胞的骨吸收功能构成了骨重塑结构,其平衡过程是骨稳态的重要因素。然而,这种平衡可能会因为骨内稳态失衡而受到破坏,了解骨骼中葡萄糖代谢的作用和调节机制,可为进一步揭示成骨细胞和破骨细胞的分化过程提供更宽阔的视角。文献表明,PTH、胰岛素、IGFs、Wnt信号通路均会对成骨细胞中的糖酵解过程产生作用。破骨细胞中的糖酵解和氧化磷酸化过程,会引起RANKL水平激增,进而维持骨稳态。此外,确定糖代谢与成骨细胞和破骨细胞的生长因子及转录因子之间的联系,为运动干预提供媒介,将有助于阐明运动调节糖代谢与骨代谢的共同机制,为新型治疗方法开辟新的途径。 展开更多
关键词 成骨细胞 破骨细胞 葡萄糖代谢 能量 运动
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巴桑母酥油丸抑制高浓度小鼠血清对MC3T3-E1细胞的毒性作用 预览
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作者 张灵莉 黄晓芹 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2019年第12期212-213,共2页
目的初步研究巴桑母酥油丸在小鼠血清对细胞毒副作用及成骨细胞增殖方面的影响。方法 80只小鼠随机分为药物组和生理盐水组,分别灌胃巴桑母酥油丸1.5 g·kg-1·d-1和等体积生理盐水×14d制备含药/生理盐水血清,加入小鼠成... 目的初步研究巴桑母酥油丸在小鼠血清对细胞毒副作用及成骨细胞增殖方面的影响。方法 80只小鼠随机分为药物组和生理盐水组,分别灌胃巴桑母酥油丸1.5 g·kg-1·d-1和等体积生理盐水×14d制备含药/生理盐水血清,加入小鼠成骨细胞株MC3T3-E1培养体系(浓度1,5,10,20%),CCK法检测24h、48h、72h细胞增殖情况。结果与空白组比较,24h时,药物组5、10%浓度具有极显著促细胞增殖作用(P<0.01);48h、72h时,生理盐水组1、5%浓度及药物组各浓度均具有极显著促细胞增殖作用(P<0.01),且48h时生理盐水组10%浓度也具有显著促细胞增殖作用(P<0.05)。与相同浓度生理盐水血清组比较,24h时,药物组5、10、20%浓度及48h、72h时10、20%浓度均具有极显著促细胞增殖作用(P<0.01)。结论巴桑母酥油丸能缓解小鼠血清对成骨细胞的毒副作用并促进其增殖。 展开更多
关键词 巴桑母酥油丸 小鼠血清 增殖 成骨细胞
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香烟烟雾提取物对人颌骨来源成骨细胞矿化能力的影响 预览
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作者 张志宏 李钧 +1 位作者 王丁 庄润涛 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第4期468-472,共5页
目的 观察香烟烟雾提取物对人颌骨来源成骨细胞体外矿化能力的影响。方法 成骨细胞来源于首都医科大学附属北京口腔医院和民航总医院口腔科,选择30位进行牙种植的健康志愿者,并进行分离培养。准备香烟烟雾提取物(cigarette smoke extrac... 目的 观察香烟烟雾提取物对人颌骨来源成骨细胞体外矿化能力的影响。方法 成骨细胞来源于首都医科大学附属北京口腔医院和民航总医院口腔科,选择30位进行牙种植的健康志愿者,并进行分离培养。准备香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE),并在实验中按照提取物的终浓度分为低浓度(0.5%)CSE组和和高浓度CSE(3%)组,同时设立无香烟烟雾提取物组为阴性对照组。分别用MTT法检测三组细胞的增殖能力,碱性磷酸酶染色法检测人颌骨来源成骨细胞的体外矿化能力,RT-PCR检测各组ALP、BSP和COL-1的表达情况。结果 与对照组比较,低浓度CSE组颌骨来源成骨细胞增殖和矿化能力差异无统计学意义(P>0.05),同时ALP、COL-1和BSP的表达差异无统计学意义(P>0.05);高浓度CSE组颌骨来源成骨细胞的增殖能力、矿化能力均低于对照组和低浓度CSE组(P<0.05),同时ALP、COL-1和BSP表达低于对照组与低浓度组(P<0.05)。结论 CSE能够影响成骨细胞矿物质支架的形成和矿物质的沉积,使新骨生成的数量和质量都降低,并降低了成骨细胞细胞外基质的钙化程度,从而影响种植体的骨结合。 展开更多
关键词 成骨细胞 烟雾提取物 增殖 矿化能力 种植体
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骨髓间充质干细胞来源的外泌体对成骨细胞增殖和分化的影响 预览
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作者 陈燕 姜胜军 彭友俭 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第4期401-404,共4页
目的:探讨骨髓间充质干细胞来源的外泌体对成骨细胞增殖和分化的影响。方法:体外分离培养骨髓间充质干细胞,超速离心法收集外泌体,并对成骨细胞进行刺激,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测骨髓间充质干细胞来源的外泌体... 目的:探讨骨髓间充质干细胞来源的外泌体对成骨细胞增殖和分化的影响。方法:体外分离培养骨髓间充质干细胞,超速离心法收集外泌体,并对成骨细胞进行刺激,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测骨髓间充质干细胞来源的外泌体对成骨细胞增殖的影响,碱性磷酸酶活性检测及茜素红染色观察骨髓间充质干细胞来源的外泌体对成骨细胞矿化的影响,利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测成骨相关基因的表达。结果:骨髓间充质干细胞来源的外泌体促进成骨细胞的增殖,上调成骨相关基因的表达,提升碱性磷酸酶活性及促进钙化结节的形成。结论:骨髓间充质干细胞来源的外泌体能够促进成骨细胞的增殖和分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 外泌体 成骨细胞 增殖 分化
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