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五味子乙素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用 预览
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作者 刘聪 孙伟静 +7 位作者 李宁 高佳琪 于泽鹏 敬舒 王春梅 孙靖辉 陈建光 李贺 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第19期201-206,共6页
目的:观察五味子乙素(schisandrin B,SCB)对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用。方法:ICR小鼠随机分为4 组,即正常对照组(灌胃蒸馏水,皮下注射生理盐水)、衰老模型组(灌胃蒸馏水,皮下注射220 mg/kg D-半乳糖)、SCB... 目的:观察五味子乙素(schisandrin B,SCB)对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的改善作用。方法:ICR小鼠随机分为4 组,即正常对照组(灌胃蒸馏水,皮下注射生理盐水)、衰老模型组(灌胃蒸馏水,皮下注射220 mg/kg D-半乳糖)、SCB(M)组(灌胃20 mg/kg SCB,皮下注射D-半乳糖220 mg/kg)、SCB(C)组(灌胃20 mg/kg SCB,皮下注射生理盐水),连续给药7 周。通过避暗实验及Morris水迷宫实验观察SCB对小鼠学习记忆能力的影响;通过WST-1法检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力;通过硫代巴比妥酸法检测小鼠脑组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;通过实时定量聚合酶链式反应及Western blot法,检测小鼠脑组织中p19、p53、p21基因表达情况。结果:SCB能够明显改善D-半乳糖诱导的脑衰老小鼠的学习记忆能力,提高脑衰老小鼠脑组织中SOD活力,降低MDA水平,明显降低脑组织中的p19、p53、p21基因的表达水平。结论:SCB能够改善D-半乳糖诱导的小鼠脑衰老,该作用可能与其提高小鼠抗氧化能力及下调小鼠脑组织中p19、p53、p21基因表达水平有关。 展开更多
关键词 五味子乙素 改善老年记忆障碍 p19基因 p53基因 P21基因
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dsP21-625通过激活P21基因表达抑制前列腺癌细胞的增殖 被引量:1
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作者 王勇 郭永连 +3 位作者 陈琳 李国灏 应诚诚 程薇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期35-39,共5页
目的:探讨人工合成小分子双链RNA-625(double-stranded RNA-625,ds P21-625)对前列腺癌细胞P21基因的激活作用及对细胞增殖的影响。方法:将人工合成的ds P21-625(ds P21-625组)和ds Ctrl质粒(ds Ctrl组)分别转染至前列腺癌细胞... 目的:探讨人工合成小分子双链RNA-625(double-stranded RNA-625,ds P21-625)对前列腺癌细胞P21基因的激活作用及对细胞增殖的影响。方法:将人工合成的ds P21-625(ds P21-625组)和ds Ctrl质粒(ds Ctrl组)分别转染至前列腺癌细胞株PC-3和DU-145。用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测转染后各组前列腺癌细胞中P21、细胞周期素E(Cyclin E)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)m RNA及蛋白的表达水平,流式细胞术、MTT实验和克隆形成实验分别检测细胞周期分布、细胞增殖和克隆形成能力。结果:与ds Ctrl组比较,ds P21-625组PC-3和DU-145细胞中P21 m RNA水平升高(均P〈0.01),Cyclin E和CDK2 m RNA表达水平下调(均P〈0.01);ds P21-625组PC-3和DU-145细胞中P21蛋白表达上调(均P〈0.01),Cyclin E和CDK2蛋白表达下调(均P〈0.01);ds P21-625组细胞S期和G2/M期的细胞比例减少(均P〈0.05),G0/G1期的细胞比例增加(均P〈0.01);ds P21-625组细胞增殖活力降低(均P〈0.05)、克隆形成数减少(均P〈0.05)。结论:ds P21-625上调前列腺癌细胞中P21 m RNA及蛋白的表达,下调Cyclin E和CDK2 m RNA及蛋白的表达,抑制前列腺癌细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 前列腺癌 PC-3细胞 dsP21-625 RNA激活 P21基因 增殖
水蛭素对人鼻咽癌细胞增殖的影响及机制 预览
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作者 陶义丰 黄玲莎 +4 位作者 刘冬华 劳明 黄浩 黄文成 谢娟 《山东医药》 2018年第33期43-46,共4页
目的探讨水蛭素对人鼻咽癌细胞(CNE2)增殖的影响及机制。方法 取对数生长期的CNE2细胞随机分为对照组与水蛭素组。对照组常规培养,水蛭素组加入不同浓度的水蛭素进行培养。倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法测算CNE2细胞生长抑制率... 目的探讨水蛭素对人鼻咽癌细胞(CNE2)增殖的影响及机制。方法 取对数生长期的CNE2细胞随机分为对照组与水蛭素组。对照组常规培养,水蛭素组加入不同浓度的水蛭素进行培养。倒置显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法测算CNE2细胞生长抑制率,计算不同时间点半抑制浓度(IC 50);实时荧光定量PCR检测CNE2细胞内Bax、p21 mRNA表达。结果 不同浓度不同时间点水蛭素组生长抑制率均高于对照组,水蛭素组各浓度各时间点生长抑制率比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。药物作用24、48、72 h的IC 50分别为(8.28±2.1)、(5.11±0.7)、(4.83±0.5)ATU/mL,48、72 h时间点IC 50比24 h高(P均<0.05)。与对照组比较,5、8 ATU/mL水蛭素组Bax、p21 mRNA相对表达量高(P均<0.05),8 ATU/mL水蛭素组最高(P均<0.05)。结论 水蛭素可明显抑制CNE2细胞增殖,该作用可能与水蛭素上调Bax、p21 mRNA表达有关。 展开更多
关键词 水蛭素 鼻咽肿瘤 CNE2细胞 BAX基因 P21基因
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马立克病病毒致瘤蛋白Meq转录调节鸡p21基因的表达
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作者 鲍晨沂 连雪 +3 位作者 杨莎莎 张旭 JUNG Yong-Sam 钱莺娟 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第5期84-88,共5页
为研究马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV)致瘤蛋白Meq对细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21表达的调节作用,采用RTPCR、Western blot方法检测Meq蛋白表达在鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblasts,CEF)中对p21 mRNA和... 为研究马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV)致瘤蛋白Meq对细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21表达的调节作用,采用RTPCR、Western blot方法检测Meq蛋白表达在鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblasts,CEF)中对p21 mRNA和蛋白水平的影响。然后,构建p21启动子的荧光素酶报告载体,检测Meq蛋白对p21的启动子活性的影响。最后,分别用MDV Md5强毒株和CVI988/Rispens疫苗毒株感染CEF细胞,利用Western blot检测MDV感染后p21蛋白水平的变化。结果:过表达Meq上调p21的mRNA和蛋白表达水平,Meq能够激活p21基因启动子活性,MDV感染细胞中p21蛋白的表达水平也有明显升高。这些发现为了解Meq在MDV感染中的作用机理奠定了基础。 展开更多
关键词 MDV Meq致瘤蛋白 P21基因
高海拔地区藏族妇女P21Ser31Arg多态性及与宫颈癌遗传易感性的相关性研究
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作者 张晓兰 李海萍 +2 位作者 金艳霞 成华 琪美格 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第11期2167-2170,2175共5页
目的:研究高海拔地区藏族妇女宫颈组织中P21Ser31Arg的多态性,并分析其与宫颈癌遗传易感性的相关性。方法:选择2015年7月~2016年6月收治的200例宫颈癌患者、100例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者、100例宫颈炎患者及100例正常宫颈患者... 目的:研究高海拔地区藏族妇女宫颈组织中P21Ser31Arg的多态性,并分析其与宫颈癌遗传易感性的相关性。方法:选择2015年7月~2016年6月收治的200例宫颈癌患者、100例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者、100例宫颈炎患者及100例正常宫颈患者为研究对象,采用限制性酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法检测各组患者宫颈组织中P21Ser31Arg三种基因型Ser/Ser、Ser/Arg及Arg/Arg的分布情况并比较其构成差异,进一步分析其多态性与宫颈癌患者年龄、癌症分型及分化程度的相关性。结果:四组患者宫颈组织中均检测到三种基因型,Ser/Arg、Ser/Ser及Arg/Arg三种基因型的构成比分别为53.38%、34.88%及11.75%。四组患者宫颈组织中P21Ser31Arg的三种基因型分布整体比较及各组两两比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。200例宫颈癌患者中,不同年龄组及不同分型组患者的P21Ser31Arg基因型分布比较,差异无统计学意义(P〉0.05);而不同分化程度组浸润性鳞癌患者的三种基因型分布比较,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:未发现P21Ser31Arg多态性与高海拔地区藏族妇女宫颈癌的遗传易感性有关,而可能与宫颈癌患者的分化程度相关。 展开更多
关键词 P21基因 多态性 宫颈癌 易感性 藏族
砷及其代谢产物对P21基因表达的影响
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作者 陈江容 张若冰 +3 位作者 张媛 胡娟 周梅 何越峰 《职业与健康》 CAS 2018年第23期3213-3216,共4页
目的探讨砷及砷化物对人肺腺癌细胞系A549细胞、云南宣威肺腺癌细胞XWLC-05细胞、人乳腺癌细胞MDAMB-231细胞中的P21基因表达的影响。方法以亚砷酸钠、一甲基砷酸(MMA)、二甲基砷酸(DMA)处理A549细胞、XWLC-05细胞、MDA-MB-231细胞并以... 目的探讨砷及砷化物对人肺腺癌细胞系A549细胞、云南宣威肺腺癌细胞XWLC-05细胞、人乳腺癌细胞MDAMB-231细胞中的P21基因表达的影响。方法以亚砷酸钠、一甲基砷酸(MMA)、二甲基砷酸(DMA)处理A549细胞、XWLC-05细胞、MDA-MB-231细胞并以荧光定量聚合酶链式反应(qRTPCR)法检测P21mRNA的表达;以不同浓度的亚砷酸钠处理A549细胞、XWLC-05细胞、MDA-MB-231细胞并以qRTPCR法检测P21基因mRNA的表达。结果亚砷酸钠可诱导P21基因mRNA的表达,MMA、DMA不能诱导细胞中P21基因mRNA的表达;不同的亚砷酸浓度处理的细胞,可影响细胞中P21基因mRNA的表达。结论砷可影响细胞中P21基因的表达,并且与剂量存在一定的关系。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 一甲基砷酸 二甲基砷酸 P21基因
FHIT基因和p21基因异常表达与外阴癌和外阴尖锐湿疣的关系
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作者 张峰 王玉玲 李俊杰 《临床医学》 CAS 2018年第1期39-40,共2页
目的探讨FHIT基因和p21基因的异常表达与外阴癌、外阴尖锐湿疣及正常外阴组织的关系。方法选取病理科存档的石蜡标本,其中外阴鳞癌38例,外阴尖锐湿疣52例,正常外阴组织16例。采用免疫组化(SP)法检测外阴癌、尖锐湿疣和正常组织组中FHI... 目的探讨FHIT基因和p21基因的异常表达与外阴癌、外阴尖锐湿疣及正常外阴组织的关系。方法选取病理科存档的石蜡标本,其中外阴鳞癌38例,外阴尖锐湿疣52例,正常外阴组织16例。采用免疫组化(SP)法检测外阴癌、尖锐湿疣和正常组织组中FHIT基因和p21基因的表达情况。结果 FHIT基因在外阴癌、外阴尖锐湿疣、正常外阴组织中的阳性表达率比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。p21基因表达阳性表达率正常外阴组织为68.75%),外阴癌为68.42%,外阴尖锐湿疣为19.23%;p21基因在外阴尖锐湿疣中的阳性表达率低于外阴癌与正常外阴组织,差异有统计学意义(P〈0.05);正常外阴组织与外阴癌中p21基因阳性表达率比较,差异未见统计学意义(P〉0.05)。结论 FHIT基因和p21基因的异常表达与外阴鳞癌、外阴尖锐湿疣的发生发展有相关性,外阴尖锐湿疣可能为外阴癌的癌前病变。FHIT基因与p21基因的异常表达未见明显相关性。 展开更多
关键词 FHIT基因 P21基因 外阴癌 外阴尖锐湿疣
重组溶瘤腺病毒rAd-CMV-E1A的构建及其对人鼻咽癌细胞放射增敏的研究 预览
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作者 汪茜 朱苹 +4 位作者 吴丽芳 陈建武 洪金省 应学明 赵建华 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第16期2545-2551,共7页
目的:构建腺病毒rAd-CMV-E1A,将其作用于人鼻咽癌CNE-1细胞,验证目的基因E1A是否具有放射增敏作用及其作用机制.方法:使用“两步转化法”,完成质粒pAd-pShuttle-CMV-E1A的构建,将其包装成腺病毒rAd-CMV-E1A;以相同的方法构建腺病毒rAd... 目的:构建腺病毒rAd-CMV-E1A,将其作用于人鼻咽癌CNE-1细胞,验证目的基因E1A是否具有放射增敏作用及其作用机制.方法:使用“两步转化法”,完成质粒pAd-pShuttle-CMV-E1A的构建,将其包装成腺病毒rAd-CMV-E1A;以相同的方法构建腺病毒rAd-CMV.使用噬菌斑法测定滴度.将病毒作用于CNE-1细胞,使用RT-PCR、实时荧光定量PCR检测E1A、p53、p21基因表达情况;联合X射线照射细胞,采用MTT比色法、细胞克隆形成实验、Annexin V-FITC/PI双染检测目的基因功能.结果:成功构建腺病毒rAd-CMV-E1A及腺病毒rAd-CMV,测得病毒滴度分别为1×10^10pfu/ml.被转染目的基因E1A的CNE-1细胞能稳定转录E1A基因,会使p53基因转录增加,抑制p21基因转录.在2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy剂量下细胞生长抑制率rAd-CMV-E1A组高于rAd-CMV组(P<0.05);0 Gy下rAd-CMV-E1A组高于rAd-CMV组(P>0.05).射线+rAd-CMV-E1A组凋亡率最高(P<0.05).相同放射剂量下rAd-CMV-E1A组细胞存活分数低于rAd-CMV组、PBS组(P<0.05);放射增敏比:rAd-CMV-E1A组高于rAd-CMV组.结论:成功构建腺病毒rAd-CMV-E1A及腺病毒rAd-CMV,目的基因E1A在CNE-1细胞中能稳定转录,并增加靶细胞对X射线的敏感性,其机制可能是通过诱导下游p53基因高转录、抑制p21基因转录. 展开更多
关键词 腺病毒E1A基因 鼻咽癌细胞 p53基因 P21基因 放射增敏
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沉默INK4基因座中反义非编码RNA对人宫颈癌细胞株HeLa增殖的影响及其机制 预览
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作者 梅奇华 杨鸿雁 +3 位作者 时黔宇 李琼 王卓 赵鸿 《山东医药》 北大核心 2017年第35期12-14,共3页
目的观察沉默INK4基因座中反义非编码RNA(ANRILA)对人宫颈癌细胞株He La增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期He La细胞分为观察组和对照组,分别ANRIL-siRNA、对照siRNA乱序。转染24、48 h时采用CCK-8法观察两组细胞增殖情况(... 目的观察沉默INK4基因座中反义非编码RNA(ANRILA)对人宫颈癌细胞株He La增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期He La细胞分为观察组和对照组,分别ANRIL-siRNA、对照siRNA乱序。转染24、48 h时采用CCK-8法观察两组细胞增殖情况(结果以OD450表示)。转染48 h时采用荧光定量PCR法检测两组细胞ANRIL、p21、周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)mRNA相对表达量,采用CHIP实验观察两组细胞p21基因H3K27位点三甲基化状态。结果转染24 h观察组、对照组OD450分别为0.55±0.08、0.84±0.11,转染72 h观察组、对照组OD450分别为1.21±0.12、1.82±0.14。转染24、72 h观察组OD450均低于对照组(P〈0.05)。转染48 h观察组ANRIL及CDK6、CDK2 mRNA相对表达量低于对照组(P均〈0.05),p21 mRNA相对表达量高于对照组(P均〈0.05)。转染48 h两组细胞p21基因H3K27位点三甲基化水平观察组、对照组分别为1.19±0.08、5.62±0.21,观察组低于对照组(P〈0.05)。结论沉默ANRIL可抑制宫颈癌He La细胞的增殖。其机制是沉默ANRIL可以降低宫颈癌He La细胞p21基因H3K27位点三甲基化水平,促进p21mRNA表达,抑制CDK6、CDK2 mRNA表达,从而抑制宫颈癌He La细胞增殖。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 宫颈癌 长链非编码RNA INK4基因座中反义非编码RNA 细胞增殖 p21基因 周期蛋白依赖性激酶 甲基化
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探讨p53、p21、MDM2基因和细胞凋亡在子宫内膜异位症发生与发展中的作用 预览
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作者 朱迎萍 《重庆医学》 北大核心 2017年第A02期292-293,共2页
目的研究能调控细胞周期3种癌基因p53、p21与MDM2对子宫内膜异位症疾病的产生与发展变化的影响。方法采用随机数字表法选取2014年3月至2016年3月该院收治的经病理学方法确诊的40例子宫内膜正常女性及40例子宫内膜异位症女性,分别设置... 目的研究能调控细胞周期3种癌基因p53、p21与MDM2对子宫内膜异位症疾病的产生与发展变化的影响。方法采用随机数字表法选取2014年3月至2016年3月该院收治的经病理学方法确诊的40例子宫内膜正常女性及40例子宫内膜异位症女性,分别设置为正常组与异位组,两组研究对象均使用免疫组织化学染色技术对3种癌基因p53、p21、MDM2的表达状况进行检测,然后分析3种癌基因的表达与细胞凋亡的相关性。结果异位组患者p53、p21蛋白表达率均明显低于正常组,MDM2蛋白表达率明显高于正常组,差异均有统计学意义(P〈O.05)。p53与p21呈显著正相关(P〈O.01),p53与MDM2呈显著性负相关(P〈0.01)。结论在正常的子宫内膜细胞中会有周期性的细胞凋亡,而这种周期性会在子宫内膜异位症患者的异位内膜细胞中消失。p53、p21基因在子宫内膜异位症的产生与发展中相互协同,而P53与MDM2则相互抑制与制约。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 P53基因 P21基因 MDM2基因 细胞凋亡
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亚砷酸钠致小鼠乳腺癌作用机制研究
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作者 董雪 曹阳 +2 位作者 李婷 苗晨曦 阎琪 《长春中医药大学学报》 2017年第6期880-882,共3页
目的研究亚砷酸钠(Na As O2)对小鼠乳腺上皮细胞(NMu MG)的影响,为砷致乳腺癌机制提供理论依据。方法以小鼠乳腺上皮细胞为模型,研究亚砷酸钠对乳腺上皮细胞形态的影响;经流式细胞仪检测亚砷酸钠对小鼠乳腺上皮细胞凋亡的影响;实时... 目的研究亚砷酸钠(Na As O2)对小鼠乳腺上皮细胞(NMu MG)的影响,为砷致乳腺癌机制提供理论依据。方法以小鼠乳腺上皮细胞为模型,研究亚砷酸钠对乳腺上皮细胞形态的影响;经流式细胞仪检测亚砷酸钠对小鼠乳腺上皮细胞凋亡的影响;实时定量RT-PCR检测细胞周期基因P21 m RNAs表达水平。结果 Na As O2对NMu MG具有毒性效应,在一定浓度范围内,随Na As O2浓度升高,细胞形态明显改变,凋亡明显增多,且呈剂量-效应关系;细胞增殖的抑制基因P21 m RNA水平增高了18.12倍。结论亚砷酸钠可能通过上调P21基因的表达来抑制NMu MG增殖,可能是砷中毒引起乳腺癌的发生机制之一。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 增殖 P21基因 乳腺癌
微小核糖核酸miR-370-5p对前列腺癌细胞增殖影响的研究 预览
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作者 李森茂 胡嘏 +2 位作者 余虓 王少刚 叶章群 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2017年第5期289-293,共5页
目的探讨微小核糖核酸miR-370-5p对前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞增殖的影响。方法将前列腺癌细胞系PC3和DU145分为2组:阴性对照组-转染随机序列(dsControl);实验组-转染miR-370-5p或miR-370-5p+siP21。实时荧光定量聚合酶链反应(q... 目的探讨微小核糖核酸miR-370-5p对前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞增殖的影响。方法将前列腺癌细胞系PC3和DU145分为2组:阴性对照组-转染随机序列(dsControl);实验组-转染miR-370-5p或miR-370-5p+siP21。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测各组细胞中p21mRNA的表达及前列腺癌细胞系中miR-370-5p的基础表达情况;蛋白质印迹法检测p21蛋白的表达;集落形成实验检测各组单个细胞克隆增殖情况;细胞增殖实验检测转染后各组细胞的增殖能力。结果与正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)比较,前列腺癌细胞系PC3和DU145中miR-370-5p表达下降;与阴性对照组相比,实验组PC3和DU145细胞中p21mRNA的相对表达量分别提高了(2.457±0.392)倍和(1.844±0.295)倍。实验组PC3和DU145细胞中p21蛋白的相对表达分别为(0.52±0.09)和(0.63±0.14),阴性对照组为(0.18±0.06)和(0.24±0.05),两组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。阴性对照组和实验组中PC3和DU145细胞的集落形成数目分别为(0.281±0.024)、(0.084±0.016)、(0.293±0.017)和(0.310±0.041)、(0.088±0.019)、(0.300±0.032),实验组在转染miR-370-5p后,细胞集落形成数目均较阴性对照组少;而在miR-370-5p+siP21共转染后,与转染miR-370-5p组相比较,PC3和DU145细胞集落形成数目均显著恢复,差异均有统计学意义(P〈0.05)。细胞增殖实验结果显示,实验组转染miR-370-5p后,PC3和DU145细胞在48、72、96h的存活情况(用吸光度OD值表示)分别为(0.395±0.040)、(0.691±0.042)、(0.874±0.045)和(0.437±0.044)、(0.700±0.051)、(0.875±0.052),与阴性对照组相比,实验组细胞增殖能力明显下降(P〈0.05);miR-370-5p+siP21共转染后48、72、96h,PC3和DU145细胞的OD值分别为(0.675±0.041)、(1.072±0.124)、(1.323±0.136)和(0.633±0.106)、(1.072±0.167)、(1.337±0.102),与转染miR-370-5p比较,� 展开更多
关键词 微小RNA 前列腺癌 P21基因 细胞增殖
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微小核糖核酸miR3619-5p对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 李森茂 胡嘏 +3 位作者 余虓 徐华 王少刚 叶章群 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期211-215,共5页
目的 探讨微小核糖核酸miR-3619-5p对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞增殖的影响.方法 2015年10月至2016年3月对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞分别分为3组:阴性对照组转染随机序列dsControl,阳性对照组转染dsP21-322,实验组转染miR-3619-5p.实时荧... 目的 探讨微小核糖核酸miR-3619-5p对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞增殖的影响.方法 2015年10月至2016年3月对膀胱癌细胞系EJ和T24细胞分别分为3组:阴性对照组转染随机序列dsControl,阳性对照组转染dsP21-322,实验组转染miR-3619-5p.实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测3组细胞p21、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)以及细胞周期依赖性激酶(CDK4、CDK6)mRNA的表达;蛋白质印迹法检测p21、CyclinD1、CDK4及CDK6蛋白的表达;流式细胞术测定3组的细胞周期分布;集落形成实验检测单个细胞克隆增殖情况;细胞增殖实验检测转染后各组细胞的增殖能力.结果 qPCR结果显示,阴性对照组EJ和T24细胞中p21、CyclinD1、CDK4、CDK6 mRNA的相对表达量△Ct分别为(11.4±1.3)和(12.8±1.6)、(5.8±1.2)和(6.2±1.2)、(4.1±0.8)和(7.8±1.2)、(9.7±1.1)和(10.8±1.2),实验组分别为(9.5±0.9)和(8.7±0.8)、(7.1±0.9)和(7.6±0.8)、(5.6±0.9)和(9.1±0.9)、(10.9±0.9)和(12.0±0.8),两组比较差异均有统计学意义(均P <0.05).蛋白质印迹法检测结果显示,实验组EJ和T24细胞中p21、CyclinD1、CDK4、CDK6蛋白相对表达量分别为(0.92 ±0.27)、(0.16±0.05)、(0.51±0.14)、(0.13±0.04)和(0.78±0.24)、(0.15±0.06)、(0.63±0.18)、(0.23±0.11);阴性对照组分别为(0.23±0.05)、(0.42±0.08)、(1.13 ±0.14)、(0.52±0.11)和(0.14 ±0.04)、(0.85±0.13)、(0.62±0.14)、(0.57±0.12),两组比较差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞术检测结果显示,实验组EJ和T24细胞中G0/G1期细胞比例分别为(56.64±1.10)%和(62.33±0.98)%,阳性对照组分别为(65.07±0.94)%和(70.46±1.56)%,阴性对照组分别为(46.48±1.03)%和(65.07±0.94)%,实验组和阳性对照组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).细胞集落形成实验结果显示 展开更多
关键词 微小核糖核酸 膀胱肿瘤 P21基因 核糖核酸激活
骨髓间充质干细胞尾静脉注射治疗大鼠肝损伤的效果及机制 预览
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作者 王志红 林芸 +3 位作者 陈为民 魏天南 林玲 苏婉婷 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第3期42-44,共3页
目的观察骨髓间充质干细胞尾静脉注射治疗大鼠肝损伤的效果,并探讨其机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组和治疗组大鼠用连续4个月皮下注射D-半乳糖的方法成功制备大鼠肝损伤模型。治疗组大鼠造模... 目的观察骨髓间充质干细胞尾静脉注射治疗大鼠肝损伤的效果,并探讨其机制。方法将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组和治疗组大鼠用连续4个月皮下注射D-半乳糖的方法成功制备大鼠肝损伤模型。治疗组大鼠造模成功后尾静脉注射3×10^6个用绿色荧光蛋白标记的间充质干细胞,对照组注射同等剂量的生理盐水。3 d后检测各组大鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酸转氨酶(ALT)。处死各组大鼠,取肝组织制备冰冻切片,荧光显微镜下观察间充质干细胞分布,行HE染色观察肝组织病理结构;取肝组织制成匀浆,用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD),用硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA),采用实时定量PCR法检测肝组织中的p53、p21 mRNA。结果治疗组大鼠注射骨髓间充质干细胞后3 d,荧光显微镜下可见带绿色荧光的骨髓间充质干细胞散在于肝脏内。光镜下观察,对照组大鼠肝细胞形态及结构正常,肝小叶结构正常;模型组大鼠肝组织水肿,细胞边缘不完整,肝索排列紊乱,肝小叶结构不清;与模型组比较,治疗组大鼠肝细胞形态较规则,肝小叶结构清晰,病理损伤减轻。与对照组相比,模型组大鼠肝组织中SOD水平降低,MDA水平升高,p53、p21 mRNA表达上调,血清ALT、AST水平升高(P均〈0.05)。与模型组相比,治疗组大鼠肝组织中SOD水平升高,MDA水平降低,p53、p21 mRNA表达下调,血清ALT、AST水平降低(P均〈0.05)。结论骨髓间充质干细胞静注能起到治疗D-半乳糖诱导的大鼠肝损伤的效果,其机制可能与下调大鼠肝组织中p53、p21 mRNA表达及减轻肝组织氧化应激水平有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 肝损伤 超氧化物歧化酶 丙二醛 P53基因 P21基因 氧化应激反应
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蝎毒对Hela细胞p21基因表达的影响 预览 被引量:2
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作者 史怡雪 李秦晋 +2 位作者 符文卉 魏宝阳 王智 《经济动物学报》 CAS 2016年第3期163-167,共5页
采用RT-PCR和Western-blot方法分别检测蝎毒对Hela细胞p21基因的mRNA和蛋白表达,研究蝎毒抗癌作用的分子机理。结果表明:经不同质量浓度(50,100,200μg/mL)蝎毒处理的与未经蝎毒处理的Hela细胞p21基因在mRNA水平表达相近,而在蛋... 采用RT-PCR和Western-blot方法分别检测蝎毒对Hela细胞p21基因的mRNA和蛋白表达,研究蝎毒抗癌作用的分子机理。结果表明:经不同质量浓度(50,100,200μg/mL)蝎毒处理的与未经蝎毒处理的Hela细胞p21基因在mRNA水平表达相近,而在蛋白表达水平上,经蝎毒处理的与未经蝎毒处理的细胞相比,p21基因表达均有明显增强,并以经100μg/mL蝎毒处理的Hela细胞p21基因的蛋白表达增强最为明显,由此证明蝎毒抑制Hela细胞增殖的机理可能是增强了p21基因的蛋白表达。 展开更多
关键词 蝎毒 HELA细胞 P21基因 基因表达 MRNA水平 蛋白水平
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氟化钠对人原代成骨细胞p21基因组蛋白乙酰化及表达的影响 被引量:2
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作者 游同钊 廖玉丹 +3 位作者 严威敏 于春 罗鹏 潘雪莉 《环境与职业医学》 CSCD 北大核心 2016年第6期536-541,共6页
[目的]观察氟化钠对人原代成骨细胞p21基因组蛋白乙酰化水平、m RNA转录及蛋白表达的影响,为阐释氟骨症发生分子机制提供依据。[方法]以0、125、250、500、1 000μmol/L氟化钠处理人原代成骨细胞72 h,定量染色质免疫共沉淀技术检测p21... [目的]观察氟化钠对人原代成骨细胞p21基因组蛋白乙酰化水平、m RNA转录及蛋白表达的影响,为阐释氟骨症发生分子机制提供依据。[方法]以0、125、250、500、1 000μmol/L氟化钠处理人原代成骨细胞72 h,定量染色质免疫共沉淀技术检测p21基因转录调控区Ch IP1区域及编码区Ch IP2区域组蛋白乙酰化水平,实时荧光定量PCR法检测p21基因m RNA转录水平,免疫印迹法检测P21蛋白表达。[结果]氟化钠处理的0、125、250、500、1 000μmol/L浓度组中,p21基因转录调控区Ch IP1区域组蛋白H3K9乙酰化水平分别为1.998±0.085、1.644±0.162、1.381±0.069、1.280±0.129、1.040±0.270,差异有统计学意义(F=15.757,P〈0.05);组蛋白H3K14乙酰化水平分别为1.344±0.068、1.248±0.070、1.140±0.090、1.040±0.116、0.770±0.059,差异有统计学意义(F=21.284,P〈0.05);组蛋白H4K16乙酰化水平分别为1.330±0.084、1.251±0.085、1.087±0.044、0.854±0.070、0.788±0.051,差异有统计学意义(F=36.429,P〈0.05)。不同浓度染氟组中,编码区Ch IP2区域组蛋白H3K9、H3K14、H4K16乙酰化水平差异均无统计学意义(F=0.084、0.206、0.500,均P〉0.05)。p21基因m RNA转录水平分别为2.65±0.35、1.93±0.48、0.88±0.17、0.82±0.09、0.67±0.16,差异有统计学意义(F=3.90,P〈0.05);P21蛋白表达水平分别为1.62±0.06、1.02±0.08、0.84±0.07、0.26±0.05、0.07±0.03,差异亦有统计学意义(F=281.58,P〈0.05)。[结论]氟可致人原代成骨细胞p21基因转录调控区组蛋白乙酰化水平降低,抑制p21基因m RNA转录及蛋白表达,可能是氟致人成骨细胞增殖活跃的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 人成骨细胞 P21基因 组蛋白乙酰化
肿瘤抑制基因与衰老的研究进展 被引量:4
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作者 牛育鸿 董靖 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1549-1554,共6页
衰老是生物界普遍存在的一种自然现象,是多因素错综复杂的过程。衰老相关基因研究成为近年来的热点,目前已发现与细胞衰老过程密切相关的基因包括细胞周期调控基因、端粒酶调控基因、生长抑制基因以及核酸、蛋白质合成与修复基因等。此... 衰老是生物界普遍存在的一种自然现象,是多因素错综复杂的过程。衰老相关基因研究成为近年来的热点,目前已发现与细胞衰老过程密切相关的基因包括细胞周期调控基因、端粒酶调控基因、生长抑制基因以及核酸、蛋白质合成与修复基因等。此外,部分反式作用转录因子包括肿瘤抑制基因(P16,P53,P21)、沉默信息调节因子家族、增殖细胞核抗原等的活性变化与衰老也高度有关。P16、P53和P21基因参与肿瘤发生、发展的周期调控,其表达使肿瘤细胞发生不可逆的凋亡,若缺失或突变与肿瘤的发生高相关。同时,作为细胞增生过程中的负调控因子,P16、P53和P21基因表达调控细胞周期进程和细胞凋亡过程,若缺失或突变会使细胞分裂复制、细胞内和细胞间的运输及通讯功能丧失,最后将导致细胞衰老、死亡或被其它细胞清除。本文就P16、P53、P21基因与衰老的相关研究进展作一综述。 展开更多
关键词 衰老 P16基因 P53基因 P21基因 细胞
恒河猴P21基因在COS-7细胞中沉默位点的验证 预览
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作者 李雨函 苏静芬 +2 位作者 张晨 石亮 刘云波 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期297-300,共4页
目的在细胞水平筛选恒河猴P21基因的有效沉默靶点。方法检测COS-7中P21基因的表达水平;设计shRNA并构建P21-RNA干扰慢病毒载体FUGW-TDT-P21shRNA转染COS-7细胞,通过real-time PCR检测沉默效率,并以Western blot在蛋白水平进行验证。结... 目的在细胞水平筛选恒河猴P21基因的有效沉默靶点。方法检测COS-7中P21基因的表达水平;设计shRNA并构建P21-RNA干扰慢病毒载体FUGW-TDT-P21shRNA转染COS-7细胞,通过real-time PCR检测沉默效率,并以Western blot在蛋白水平进行验证。结果筛选到四个有效的靶位,分别位于P21 mRNA的541-561、542-562、215-239、624-648 bp。四个靶位点在mRNA水平的沉默效率分别为(91.82±3.21)%、(82.47±2.48)%、(81.31±2.69)%和(87.35±4.59)%。相应的蛋白表达量为(11.97±0.70)%、(20.22±0.65)%、(23.21±0.63)%和(14.42±0.86)%。结论在细胞水平筛选得到四个有效的P21基因沉默靶点,可用于恒河猴基因沉默研究。 展开更多
关键词 基因沉默 P21基因 恒河猴
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榄香烯抑制p21基因表达逆转肺癌化疗耐药的实验研究 被引量:5
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作者 张永军 张爱琴 +3 位作者 包文龙 史华 姜志明 顾丹琳 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第12期2957-2960,I0029共5页
目的:研究榄香烯逆转肺癌化疗耐药的作用,及其对P21基因表达的影响。方法:体内研究:榄香烯、多柔比星及两者联合预处理小鼠5 d后,检测各组小鼠血中P21基因表达情况;复制Lewis肺癌小鼠模型,观察肿瘤直径长至1 cm所耐时间;然后分别予... 目的:研究榄香烯逆转肺癌化疗耐药的作用,及其对P21基因表达的影响。方法:体内研究:榄香烯、多柔比星及两者联合预处理小鼠5 d后,检测各组小鼠血中P21基因表达情况;复制Lewis肺癌小鼠模型,观察肿瘤直径长至1 cm所耐时间;然后分别予榄香烯、多柔比星及两者联合用药10 d,称瘤重,并检测肿瘤组织中P21基因表达情况。体外研究:采用榄香烯、多柔比星及二者联合预处理的小鼠血清培养A549肺癌细胞,48 h后检测各组细胞的增殖情况。结果:榄香烯联合多柔比星预处理组小鼠血清中P21基因表达水平与二者单用预处理组及正常组无统计学差异;二者联合预处理组小鼠血清培养A549肺腺癌细胞的增殖速度小于二者单用组;榄香烯联合多柔比星的抑瘤率明显高于二者单用,且二者联用组小鼠肿瘤组织中P21基因表达水平低于多柔比星组,但高于榄香烯组。结论:榄香烯具有逆转肺癌化疗耐药的作用,这一作用的可能机理与其抑制P21基因表达相关。 展开更多
关键词 榄香烯 肺癌 多药耐药 P21基因
转染p21基因对宫颈癌Hela细胞转移的影响 被引量:4
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作者 李志杰 张卓然 +2 位作者 胡春杰 朱莉 韩世愈 《中国临床研究》 CAS 2015年第3期283-285,289共4页
目的探讨p21基因转染对宫颈癌细胞系Hela细胞迁移和侵袭的影响。方法Lipofectamine2000脂质体介导将pcDNA3.1(+)-p21转染宫颈癌Hela细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞的p21mRNA的表达。根据转染的不同实验分为空白组、空载体转... 目的探讨p21基因转染对宫颈癌细胞系Hela细胞迁移和侵袭的影响。方法Lipofectamine2000脂质体介导将pcDNA3.1(+)-p21转染宫颈癌Hela细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞的p21mRNA的表达。根据转染的不同实验分为空白组、空载体转染组及p21转染组。细胞迁移和侵袭的测定分别采用细胞划痕实验与Transwell小室实验。结果RT-PCR发现空白组与空载体转染组细胞的p21基因mRNA无表达,p21转染组细胞p21mRNA高表达;3组细胞0h划痕宽度差异无统计学意义(P〉0.05),48h后p21转染组的划痕宽度明显变窄,小于空白组及空载体转染组(P均〈0.05),空白组及空载体转染组划痕宽度比较无统计学差异(P〉0.05)。Tran-swell小室实验结果表明,48h后p21转染组的穿透细胞数明显少于空白组及空载体转染组(P均〈0.05),空白组及空载体转染组穿透细胞数比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论p21能够明显的抑制宫颈癌细胞的迁移与侵袭。 展开更多
关键词 宫颈癌 HELA细胞 P21基因 转染 迁移 侵袭
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