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尿石素A对糖尿病小鼠心肌细胞自噬的影响 预览
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作者 朱小艳 周友 +3 位作者 岑慧裕 黄雅焱 高智敏 吴晓倩 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期810-815,共6页
目的 探讨尿石素A(urolithin A,UA)对糖尿病小鼠心肌细胞自噬的影响。方法 葡萄糖(5.5、20、33、47 mmol·L -1 )及不同浓度的UA刺激乳鼠心肌细胞48 h,MTT比色法检测细胞存活率,Western blot法检测细胞内自噬蛋白LC3、p62的表达水... 目的 探讨尿石素A(urolithin A,UA)对糖尿病小鼠心肌细胞自噬的影响。方法 葡萄糖(5.5、20、33、47 mmol·L -1 )及不同浓度的UA刺激乳鼠心肌细胞48 h,MTT比色法检测细胞存活率,Western blot法检测细胞内自噬蛋白LC3、p62的表达水平。健康♂ C57BL/6小鼠连续6 d腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)制备糖尿病小鼠模型,灌胃给予UA连续治疗10周,超声检测心功能指标,Masson染色观察心肌病理切片。结果 33 mmol·L -1 高糖刺激心肌细胞48 h后,细胞存活率下降,自噬蛋白p62、LC3 Ⅱ、LC3 Ⅱ/Ⅰ比值增加( P <0.05),给予UA后,上述蛋白表达水平下降。与正常组比较,糖尿病组心功能显示E/A峰比值下降( P <0.05),Masson结果显示胶原纤维的表达升高,UA干预后E/A峰比值增加( P <0.05),心肌胶原纤维的表达降低。结论 UA可通过影响心肌细胞内自噬,发挥保护糖尿病心肌病的作用。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 自噬 尿石素A 高糖 P62 LC3
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p62、OPTN在宫颈癌中的表达及其与HPV的相关性 预览
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作者 翟淑娟 潘景 +3 位作者 孙春意 刘洋 杨莹莹 周红林 《昆明医科大学学报》 CAS 2019年第4期82-85,共4页
目的 研究自噬相关蛋白p62、OPTN是否参与宫颈癌的发生及其与HPV感染的相关性。方法 比较p62、OPTN在正常对照组、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ、宫颈癌中的表达;分析p62、OPTN表达与HPV感染的关系。结果(1)p62、OPTN蛋白mRNA在对照组、CINⅠ、CINⅡ... 目的 研究自噬相关蛋白p62、OPTN是否参与宫颈癌的发生及其与HPV感染的相关性。方法 比较p62、OPTN在正常对照组、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ、宫颈癌中的表达;分析p62、OPTN表达与HPV感染的关系。结果(1)p62、OPTN蛋白mRNA在对照组、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ中的表达与宫颈癌组差异有统计学意义(P<0.05);(2)随着宫颈病变加重,p62表达量呈上升趋势,OPTN表达量呈下降趋势;(3)在宫颈癌中p62、OPTN表达量具有相关性(r =-0.426,P = 0.024);(4)正常宫颈组织HPV感染组和未感染组之间p62、OPTN表达量差异无统计学意义。结论(1)自噬参与宫颈癌的发生,宫颈癌中自噬活性减弱;(2)p62在宫颈癌中高表达,OPTN在宫颈癌中低表达;(3)宫颈癌中p62、OPTN表达量呈负相关;(4)正常宫颈组织中HPV是否感染与p62、OPTN表达量无关。 展开更多
关键词 宫颈癌 自噬基因 P62 OPTN
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Beclin1、p62在结肠癌组织中的表达及与其预后的关系 预览
3
作者 杨振方 《实用癌症杂志》 2019年第5期727-729,共3页
目的探讨结肠癌组织中Beclin1、p62的表达及其与预后关系。方法收集55例手术切除的结肠癌石蜡包埋标本,采用免疫组化链霉亲和素过氧化物酶法测定结肠癌组织和癌旁正常黏膜组织中Beclin1、p62的表达水平,分析Beclin1、p62的表达水平与患... 目的探讨结肠癌组织中Beclin1、p62的表达及其与预后关系。方法收集55例手术切除的结肠癌石蜡包埋标本,采用免疫组化链霉亲和素过氧化物酶法测定结肠癌组织和癌旁正常黏膜组织中Beclin1、p62的表达水平,分析Beclin1、p62的表达水平与患者预后的关系。结果结肠癌组织中Beclin1、p62阳性表达率显著低于癌旁正常黏膜组织,差异具有统计学意义(P<0.05);Beclin1表达与生存期呈显著正相关(P<0.05);p62表达与生存期呈显著负相关(P<0.05);Beclin1、p62是结肠癌患者独立的生存预后因素(P<0.05)。结论Beclin1、p62表达与结肠癌患者预后密切相关。 展开更多
关键词 结肠癌 BECLIN1 P62 自噬 预后
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自噬在肾间质纤维化小鼠中的表达趋势 预览
4
作者 陈薪薪 陈宇 +2 位作者 郑尘非 周莹 陈朝生 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第3期260-265,共6页
目的:观察肾间质纤维化单侧输尿管梗阻模型(UUO)术后不同时间点自噬的表达趋势。方法:32只清洁级健康雄性ICR小鼠随机分组:假手术(Sham)组、UUO模型(UUO)组,分别在UUO术后3、7、14 d处死小鼠,假手术组7 d处死,每组小鼠8只。留取血清检... 目的:观察肾间质纤维化单侧输尿管梗阻模型(UUO)术后不同时间点自噬的表达趋势。方法:32只清洁级健康雄性ICR小鼠随机分组:假手术(Sham)组、UUO模型(UUO)组,分别在UUO术后3、7、14 d处死小鼠,假手术组7 d处死,每组小鼠8只。留取血清检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾组织行HE和Masson染色,观察光镜病理结果,电镜超微结构观察自噬体的形成,Westernblot检测肾组织LC3蛋白和P62蛋白的表达。结果:UUO术后梗阻侧肾脏皮质变薄,小管萎缩,间质纤维化,单个核细胞浸润,肾小球无明显病变,病理变化以UUO术后14 d最突出。与Sham组相比,LC3-Ⅱ蛋白含量从3 d开始逐渐增高,7 d时达峰值,14 d时下降;而P62与LC3-Ⅱ相反,3 d开始下降,7 d达最低值,14 d又逐渐恢复,表明自噬在7 d这个时间点表达最显著。电镜显示UUO术后7 d出现自噬小体和吞噬泡现象。结论:UUO术后自噬的表达有一定的时间依赖性,在7 d时表达最显著,自噬与病理严重程度不平行。 展开更多
关键词 UUO 自噬 LC3-Ⅱ P62
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脓毒症小鼠肝细胞自噬与LC3及P62表达的实验研究
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作者 沈美佳 孙力超 张国强 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期467-472,共6页
目的探究盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)建立的脓毒症小鼠模型肝细胞自噬的发生情况及不同时间点自噬相关蛋白的表达规律。方法50只6~8周龄清洁级雄性ICR小鼠按照随机数字表法随机分为5组:CLP 3 h组,CLP 6 h组,CLP 1... 目的探究盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)建立的脓毒症小鼠模型肝细胞自噬的发生情况及不同时间点自噬相关蛋白的表达规律。方法50只6~8周龄清洁级雄性ICR小鼠按照随机数字表法随机分为5组:CLP 3 h组,CLP 6 h组,CLP 12 h组,CLP 24 h组和对照组,于术后相应时间点取材。生化法检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST);ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的表达量;HE染色观察肝组织炎症情况;电镜观察肝组织自噬体和自噬溶酶体的超微结构;免疫印迹法检测肝组织自噬蛋白LC3(微管相关蛋白轻链3)和P62的表达量;免疫荧光观察自噬体的位置和数量。采用SPSS 21.0进行统计学分析,两组间比较采用两独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果CLP术后ALT和AST明显升高,均在12 h到达高峰,分别为(137.8±11.94)U/L和(475.3±57.34)U/L;IL-6的表达量在6 h到达高峰(2589.63±27.96)pg/ml;TNF-α在3 h到达高峰(320.21±8.9)pg/ml;HE染色观察到肝库普弗细胞活化,单个粒细胞浸润;电镜观察到自噬体,自噬溶酶体形成;与对照组相比,免疫印迹法显示LC3Ⅱ/Ⅰ比值在先升高后降低,6 h达到高峰(t=13.35,P<0.05),P62蛋白含量先降低后升高,在6 h达到最低(t=66.11,P<0.05),与LC3Ⅱ/Ⅰ趋势正好相反;免疫荧光结果显示LC3荧光强度于6 h达到高峰(t=12.52,P=0.05)。结论盲肠结扎穿孔法建立脓毒症小鼠模型肝脏发生了自噬现象,且自噬先增强后减弱,自噬体形成在6 h达高峰。 展开更多
关键词 脓毒症 盲肠结扎穿孔法 肝损伤 自噬 LC3 P62 炎症因子 小鼠
红景天苷对大鼠脑出血后神经功能的影响 预览
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作者 高丽丽 吴成翰 蔡伟武 《中国卫生标准管理》 2019年第2期118-121,共4页
目的通过研究红景天苷对大鼠脑出血后自噬相关蛋白的影响,探讨红景天苷对大鼠脑出血后神经功能的影响。方法将120只清洁级SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、假手术组、红景天苷组、红景天苷+3-MA组、红景天苷+雷... 目的通过研究红景天苷对大鼠脑出血后自噬相关蛋白的影响,探讨红景天苷对大鼠脑出血后神经功能的影响。方法将120只清洁级SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、假手术组、红景天苷组、红景天苷+3-MA组、红景天苷+雷帕组,采用Bederson评分法对各组大鼠进行神经功能评分;采用蛋白免疫印迹法检测大鼠脑出血后自噬相关蛋白LC3I、Beclin 1、Cathepsin D、P62的表达。结果各组大鼠治疗后的Bederson评分相比,红景天苷干预各组均低于模型对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),其中红景天苷+雷帕组评分最低,红景天苷组次之,红景天苷+3-MA组评分最高;脑出血大鼠模型的自噬相关蛋白LC3I、Beclin 1、Cathepsin D、P62对比,红景天苷干预各组均表达均低于模型对照组、假手术组及正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),其中红景天苷+雷帕组表达最低,红景天苷组次之,红景天苷+3-MA组表达最高。结论红景天苷在大鼠脑出血后具有改善神经功能的作用,其机制可能与调节细胞自噬有关。 展开更多
关键词 红景天苷 自噬 脑出血 神经保护 LC3I BECLIN 1 CATHEPSIN D P62
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肝细胞癌组织自噬相关蛋白Beclin1和LC3B及p62表达临床意义
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作者 吴玲红 李红 +4 位作者 国娇 曾洁 廖芝玲 邓伟 黄天壬 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期539-544,共6页
目的细胞自噬是普遍存在于真核生物中一种保守的细胞应激反应,其活性失调在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展中起着重要作用。本研究通过检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3B和p62在HCC组织和其远癌组织表达差异及临床意义... 目的细胞自噬是普遍存在于真核生物中一种保守的细胞应激反应,其活性失调在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展中起着重要作用。本研究通过检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3B和p62在HCC组织和其远癌组织表达差异及临床意义,进一步揭示自噬活性对HCC发生发展的影响。方法收集广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科2015-08-01-2016-12-30因HCC手术切除的患者56例为研究对象,对应远癌组织为非癌组织(距手术切缘>2cm的组织并经病理确诊),采用免疫组织化学法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3B和p62表达及其与临床病理特征的关系。结果癌组织中Beclin-1蛋白表达为0.049±0.026,低于远癌组织的0.069±0.034,t=3.400,P=0.001;癌组织LC3B蛋白表达为0.048±0.019,低于远癌组织的0.062±0.026,t=3.130,P=0.030;而癌组织p62蛋白表达量为0.073±0.033,高于远癌组织的0.062±0.026,t=2.370,P=0.021;Beclin-1蛋白表达与肿瘤大小有关联,F=3.747,P=0.030;LC3B蛋白表达与BCLC分期(A/B)有关联,t=5.960,P<0.001;p62蛋白表达与Edmondson分级(F=4.270,P=0.019)、癌栓存在情况有关联(t=2.459,P=0.017);与其他临床病理特征差异均无统计学意义,P>0.05;远癌组织中,Beclin-1和LC3B表达呈正相关,r=0.416,P=0.001;Beclin-1和p62表达呈正相关,r=0.361,P=0.006。结论 HCC组织Beclin1和LC3B蛋白表达下调与p62表达上调,提示细胞自噬活性降低,这可能与HCC发生发展有关。 展开更多
关键词 自噬 BECLIN1 LC3B P62 肝细胞癌
基于p62-NRF2通路探讨黄芪甲苷对白血病耐药细胞株化疗敏感性的影响
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作者 杨小娟 康意 +2 位作者 刘志强 王晓玲 汪涛 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期771-774,共4页
目的基于p62-NRF2通路探讨黄芪甲苷(AST)对白血病耐药细胞株化疗敏感性的影响机制。方法复制白血病细胞模型,cck-8法测L1210、L1210/DDP细胞株对DDP的敏感性;将L1210/DDP细胞随机分成5组,即L1210组、L1210/DPP组、给药1组(L1210/DDP+8μ... 目的基于p62-NRF2通路探讨黄芪甲苷(AST)对白血病耐药细胞株化疗敏感性的影响机制。方法复制白血病细胞模型,cck-8法测L1210、L1210/DDP细胞株对DDP的敏感性;将L1210/DDP细胞随机分成5组,即L1210组、L1210/DPP组、给药1组(L1210/DDP+8μg/ml DDP)、给药2组(L1210/DDP+8μg/ml DDP+100μg/ml AST)、给药3组(L1210/DDP+8μg/ml DDP+70μg/ml verapamil组),评价AST对L1210/DDP耐药性的逆转作用;流式细胞仪检测各组细胞周期、凋亡率变化,DCFH-DA荧光探针检测各组细胞内ROS变化;real time RT-PCR检测p62-NRF2通路各节点基因的表达变化。结果L1210/DDP细胞对DDP的敏感性明显弱于L1210细胞,相对耐药指数为2.56;100μg/ml AST作用24h后,相对逆转倍数为13.67,70μg/ml verapamil的相对逆转倍数为20.46;与L1210组相比,含L1210/DDP各组内ROS水平低(P<0.05);与L1210/DDP组相比,给药2、3组肿瘤细胞G1期阻滞,S期缩短,细胞增殖受到抑制(P<0.05);给药各组细胞p62、NRF2基因mRNA表达下调,除给药1组外,细胞HO-1基因mRNA表达均下调,而各给药组细胞cyclinD、Caspase3 mRNA表达均上调,但无统计学意义。结论AST具有增强L1210/DDP细胞株对DDP敏感性,逆转L1210/DDP细胞株耐药的功效,其机制可能通过调控p62-NRF2通路及其靶基因的表达有关。 展开更多
关键词 P62 NRF2 黄芪甲苷 肿瘤耐药
自噬蛋白Parkin和P62在结直肠癌中的表达
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作者 王晓林 邓建松 冯茂辉 《中国临床研究》 CAS 2019年第5期577-580,585共5页
目的观察自噬蛋白Parkin和P62在人结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法收集2012年至2015年武汉大学中南医院手术切除的50例结直肠癌标本及50例癌旁正常结肠组织,用免疫组化SP法检测标本中Parkin蛋白和P62蛋白的表达... 目的观察自噬蛋白Parkin和P62在人结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法收集2012年至2015年武汉大学中南医院手术切除的50例结直肠癌标本及50例癌旁正常结肠组织,用免疫组化SP法检测标本中Parkin蛋白和P62蛋白的表达,分析其表达差异及与临床病理特征之间的关系。结果免疫组化法检测Parkin蛋白和P62蛋白均主要表达于细胞浆。Parkin蛋白在结直肠癌中的阳性表达率为36.0%,在癌旁正常组织中的阳性表达率为72.0%,差异有统计学意义(χ^2=13.043,P=0.000)。P62蛋白在结直肠癌中的阳性表达率为70.0%,在癌旁正常组织中的阳性表达率为42.0%,差异有统计学意义(χ^2=7.955,P=0.005)。Parkin蛋白在组织高分化中阳性表达率高于低分化(P<0.05);P62蛋白在临床分期Ⅲ/Ⅳ期中阳性表达率高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.05)。Spearman相关分析显示,P62蛋白的表达与Parkin蛋白的表达无相关性(r=0.09,P>0.05)。结论肿瘤细胞自噬活性的提高可能参与人结直肠癌的发展,Parkin蛋白和P62蛋白表达可能是肿瘤细胞发生、进展的潜在标志物。临床病理检测Parkin蛋白和P62蛋白的表达,对判断患者预后及结直肠癌分子靶向治疗有潜在的临床意义。 展开更多
关键词 结直肠癌 Parkin蛋白 P62蛋白 细胞自噬 免疫组化 组织分化 临床分期
扶正化瘀胶囊对气虚血瘀型肝纤维化模型大鼠细胞自噬基因LC3Ⅱ和p62的干预作用 预览
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作者 徐渴阳 苏晓倩 包剑锋 《浙江中西医结合杂志》 2019年第4期281-284,I0003共5页
目的探讨扶正化瘀胶囊对气虚血瘀肝纤维化模型大鼠细胞自噬基因LC3Ⅱ和p62mRNA、蛋白表达水平的干预作用。方法 40只SD大鼠根据随机数字表法分正常组、肝纤维化组、气虚血瘀肝纤维化组和扶正化瘀治疗组,每组10只。肝纤维化组、气虚血瘀... 目的探讨扶正化瘀胶囊对气虚血瘀肝纤维化模型大鼠细胞自噬基因LC3Ⅱ和p62mRNA、蛋白表达水平的干预作用。方法 40只SD大鼠根据随机数字表法分正常组、肝纤维化组、气虚血瘀肝纤维化组和扶正化瘀治疗组,每组10只。肝纤维化组、气虚血瘀肝纤维化组、扶正化瘀治疗组大鼠采用四氯化碳(CCl4)与橄榄油按4:6比例配40%油剂,按0.3mL/100g剂量,皮下注射制备模型,气虚血瘀型肝纤维化组大鼠在肝纤维化模型制备的基础上加用游泳疲劳试验制备气虚血瘀型肝纤维化模型。正常组、肝纤维化组、肝纤维化气虚血瘀组大鼠给予生理盐水2mL灌胃,1天1次,连续4周。扶正化瘀治疗组大鼠给予扶正化瘀胶囊混悬液,按0.5g/kg体质量灌胃,1天1次,连续4周。实验结束后处死大鼠摘取肝脏,测定肝重、肝湿重,天狼星红染色后评价肝脏纤维化程度,采用qPCR、Western blot测定肝组织LC3Ⅱ、p62 mRNA和蛋白表达水平。结果扶正化瘀治疗组大鼠体质量(375.80±24.36)g、肝湿重(11.31±1.13)g,高于气虚血瘀肝纤维化组(356.10±20.45)g、(10.34±1.13)g,P<0.05;天狼星红染色显示,气虚血瘀肝纤维化组大鼠肝纤维化程度最重,扶正化瘀治疗后显著改善;气虚血瘀肝纤维化组Ishak评分(5.80±0.80)分最高,扶正化瘀治疗组(2.70±0.90)分显著下降(P<0.05)。气虚血瘀肝纤维化组LC3ⅡmRNA(1.44±0.01)及蛋白(3.01±0.57)表达最高,扶正化瘀治疗组LC3ⅡmRNA(1.20±0.01)、蛋白(2.04±0.30)均显著下降(P<0.05);气虚血瘀肝纤维化组p62 mRNA(0.95±0.05)、蛋白(0.19±0.12)表达最低,扶正化瘀治疗组p62 mRNA(1.12±0.01)、蛋白(0.67±0.32)显著升高(P<0.05)。结论气虚血瘀型肝纤维化模型大鼠较单纯肝纤维化模型大鼠LC3Ⅱ表达量明显增加,自噬底物p62消耗明显,扶正化瘀胶囊可以显著抑制LC3Ⅱ/p62表达。 展开更多
关键词 大鼠 肝纤维化 细胞自噬 气虚血瘀 LC3Ⅱ P62 扶正化瘀胶囊
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p62和Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义 预览
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作者 程新宇 周成美 +1 位作者 孙洁 王翠芳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期1857-1859,共3页
目的探讨p62和Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达及其意义。方法选取乳腺浸润性导管癌标本79例作为实验组,随机选取20例距肿瘤组织5 cm以上的正常乳腺组织作为对照组,采用免疫组织化学SP法检测两组中p62和Ki-67的表达水平,分析二者和乳... 目的探讨p62和Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达及其意义。方法选取乳腺浸润性导管癌标本79例作为实验组,随机选取20例距肿瘤组织5 cm以上的正常乳腺组织作为对照组,采用免疫组织化学SP法检测两组中p62和Ki-67的表达水平,分析二者和乳腺浸润性导管癌临床病理学参数的关系。结果实验组p62和Ki-67阳性表达率分别为58.2%(46/79)、51.9%(41/79),明显高于对照组10.0%(2/20)、5.0%(1/20),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组中p62阳性表达与组织学分级及淋巴结转移相关(P<0.05),而与患者发病年龄、肿瘤大小无关;实验组中Ki-67阳性表达与组织学分级相关(P<0.01),而与患者发病年龄、肿瘤大小及淋巴结是否转移无关;P62与Ki-67在乳腺癌中表达呈正相关(P<0.05)。结论乳腺浸润性导管癌组织中p62和Ki-67蛋白阳性表达增高且正相关,提示两者可能与乳腺癌恶性程度分级及侵袭力有关,两者联合检测有可能成为判断乳腺癌预后的重要指标。 展开更多
关键词 乳腺浸润性导管癌 P62 KI-67
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Autophagy:novel insights into therapeutic target of electroacupuncture against cerebral ischemia/reperfusion injury 预览
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作者 Ya-Guang Huang Wei Tao +3 位作者 Song-Bai Yang Jin-Feng Wang Zhi-Gang Mei Zhi-Tao Feng 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期954-961,共8页
Electroacupuncture is known as an effective adjuvant therapy in ischemic cerebrovascular disease.However,its underlying mechanisms remain unclear.Studies suggest that autophagy,which is essential for cell survival and... Electroacupuncture is known as an effective adjuvant therapy in ischemic cerebrovascular disease.However,its underlying mechanisms remain unclear.Studies suggest that autophagy,which is essential for cell survival and cell death,is involved in cerebral ischemia reperfusion injury and might be modulate by electroacupuncture therapy in key ways.This paper aims to provide novel insights into a therapeutic target of electroacupuncture against cerebral ischemia/reperfusion injury from the perspective of autophagy.Here we review recent studies on electroacupuncture regulation of autophagy-related markers such as UNC-51-like kinase-1 complex,Beclin1,microtubule-associated protein-1 light chain 3,p62,and autophagosomes for treating cerebral ischemia/reperfusion injury.The results of these studies show that electroacupuncture may affect the initiation of autophagy,vesicle nucleation,expansion and maturation of autophagosomes,as well as fusion and degradation of autophagolysosomes.Moreover,studies indicate that electroacupuncture probably modulates autophagy by activating the mammalian target of the rapamycin signaling pathway.This review thus indicates that autophagy is a therapeutic target of electroacupuncture treatment against ischemic cerebrovascular diseases. 展开更多
关键词 nerve REGENERATION AUTOPHAGY ELECTROACUPUNCTURE cerebral ISCHEMIA/REPERFUSION injury mTOR LC3 Beclin1 P62 NEUROPROTECTION neural REGENERATION
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自噬受体蛋白p62与Keap1-Nrf2信号通路在肿瘤中的研究进展 预览
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作者 高丹丹 陈丽军 续薇 《临床检验杂志》 CAS 2019年第5期377-379,共3页
自噬和Keap1-Nrf2信号通路是抵抗细胞代谢和氧化应激的两个主要细胞防御机制。该两个机制通过p62-Keap1-Nrf2通路中自噬受体蛋白p62/SQSTM1的磷酸化相关联。p62-Keap1-Nrf2通路在正常细胞中起保护作用,然而,该通路也诱导肿瘤发生,并且... 自噬和Keap1-Nrf2信号通路是抵抗细胞代谢和氧化应激的两个主要细胞防御机制。该两个机制通过p62-Keap1-Nrf2通路中自噬受体蛋白p62/SQSTM1的磷酸化相关联。p62-Keap1-Nrf2通路在正常细胞中起保护作用,然而,该通路也诱导肿瘤发生,并且通过由Nrf2激活介导的代谢改变促进肿瘤细胞的生长和耐药。该文就p62与Keap1-Nrf2信号通路在肿瘤中的研究进展作一综述,以期为临床疾病诊治带来新视角。 展开更多
关键词 自噬 P62 KEAP1 NRF2
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功能验证P62基因在胰腺癌转移过程中的作用 预览
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作者 田文嘉 林香春 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期900-902,共3页
目的探讨功能验证P62基因在胰腺癌转移过程中的作用。方法构建人P62基因小干扰RNA(siRNA),转染人胰腺癌As PC-1胰腺癌细胞系,观察细胞增殖、细胞迁移能力的变化,分析P62基因对人胰腺癌As PC-1细胞系生长、增殖、迁移能力的影响。结果si-... 目的探讨功能验证P62基因在胰腺癌转移过程中的作用。方法构建人P62基因小干扰RNA(siRNA),转染人胰腺癌As PC-1胰腺癌细胞系,观察细胞增殖、细胞迁移能力的变化,分析P62基因对人胰腺癌As PC-1细胞系生长、增殖、迁移能力的影响。结果si-P62组P62 mRNA表达水平及12、24、36、48 h细胞A值均显著低于NC组(均P<0.05)。结论干扰P62之后,As PC-1细胞的生长、增殖能力明显受抑制,P62基因在胰腺癌的转移过程中起关键作用。 展开更多
关键词 胰腺癌 P62 小干扰RNA
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疏风活血方通过自噬途径对体外培养的鼠B16黑素瘤细胞黑素代谢起调节作用 预览
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作者 耿忆薇 王亚兰 +2 位作者 邓蓉 傅楷历 邓燕 《南方医科大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期630-634,共5页
目的观察自噬在疏风活血方对体外培养的鼠B16黑素瘤细胞增殖及黑素合成中的作用。方法体外培养鼠B16细胞,设立空白对照组(C组),0.12、0.25、0.49、0.98、1.96 mg/m L疏风活血方组(S组),自噬诱导剂雷帕霉素组(R组),自噬诱导+疏风... 目的观察自噬在疏风活血方对体外培养的鼠B16黑素瘤细胞增殖及黑素合成中的作用。方法体外培养鼠B16细胞,设立空白对照组(C组),0.12、0.25、0.49、0.98、1.96 mg/m L疏风活血方组(S组),自噬诱导剂雷帕霉素组(R组),自噬诱导+疏风活血方组(RS组),采用MTT法测定各组对B16细胞增殖的影响,酶标仪检测法测定各组酪氨酸酶活性及黑素含量,Western blot法测定自噬相关蛋白P62、p-m TOR、LC3B、Beclin1含量,比较分析结果。结果与C组相比,S组及RS组对B16细胞增殖均起浓度依赖的抑制作用(P〈0.05);对酪氨酸酶活性及黑素合成有促进作用(P〈0.05);0.98 mg/m L疏风活血方组(R0.98)、自噬诱导+0.98 mg/m L疏风活血方组(RS0.98)、50 nmol/L自噬诱导剂雷帕霉素组(Rap50)均能上调自噬相关蛋白LC3B-II、Beclin1,下调P62、p-m TOR含量。结论疏风活血方能通过激活自噬途径对体外培养的鼠B16黑素瘤细胞黑素代谢起调节作用,对其细胞增殖有抑制作用;对酪氨酸酶活性及黑素合成起促进作用。 展开更多
关键词 自噬 B16 黑素合成 酪氨酸酶活性 LC3B Beclin1 P62 P-MTOR
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KISS-1基因表达物对骨肉瘤细胞凋亡和自噬调控机制的研究 预览 被引量:1
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作者 刘晓强 吴华明 +1 位作者 谢惠 姚熙 《中外医疗》 2018年第10期7-10,共4页
目的该研究就KISS-1基因表达物在骨肉瘤细胞中的凋亡和自噬作用进行比较分析,探讨KISS-1基因表达对骨肉瘤细胞凋亡和自噬的调控机制。方法于2016年4月—2017年1月在该院细胞实验室分别向K7M2骨肉瘤细胞培养中分别加入KISS1蛋白Kp(Kissp... 目的该研究就KISS-1基因表达物在骨肉瘤细胞中的凋亡和自噬作用进行比较分析,探讨KISS-1基因表达对骨肉瘤细胞凋亡和自噬的调控机制。方法于2016年4月—2017年1月在该院细胞实验室分别向K7M2骨肉瘤细胞培养中分别加入KISS1蛋白Kp(Kisspeptin)或抗Kp蛋白,将其对应分为Kp组和抗Kp蛋白组,并分别与普通培养的K7M2细胞形成的控制组进行比较,待细胞培养24,48、72、96 h后,每组各时间点选取6孔对数生长期的细胞纳入实验观察,MTT观察细胞增殖情况,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用RT-PCR检测细胞培养72 h后凋亡标记物(P53、Cyt C)及自噬标记物(P62、Beclin1)的m RNA表达水平。结果细胞培养96 h后,对照组细胞增殖率均数百分比由(0.660±0.075)%变为(1.330±0.214)%,Anti-Kp组细胞增殖率均数百分比由(0.677±0.093)%变为(1.465±0.194)%,而Kp组细胞增殖率均数百分比由(0.530±0.083)%变为(0.328±0.044)%,凋亡率均数百分比由(24.53±3.65)%变为(39.75±8.32)%。Anti-Kp组增殖率显著高于对照组(P〈0.05)。细胞接种培养72 h后,对照组的P53和Cyt C的m RNA表达水平均数为(0.213±0.045)和(0.220±0.046),Kp组P53和Cyt C的m RNA表达量均数为(0.393±0.107)和(0.509±0.145)。同时,P62和Beclin1在控制组的m RNA表达量均数为(0.169±0.055)和(0.120±0.043),而在Kp组P62和Beclin1m RNA表达量均数为(0.426±0.120)和(0.357±0.103)。P62和Beclin1的m RNA表达水平在Kp组最高,Anti-Kp组最低,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 KISS-1基因表达物具有促进细胞凋亡和自噬来控制骨肉瘤细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 KISS-1 骨肉瘤 P53 CYTC P62 BECLIN1
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PI3KC3/Beclin1复合物对染矽尘NR8383细胞自噬的调控作用
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作者 王路遥 李宁 +7 位作者 宋瑞瑞 张晓雪 万斌斌 李小明 李清钊 沈福海 蒋守芳 金玉兰 《环境与职业医学》 CSCD 北大核心 2018年第9期801-808,共8页
[目的]探讨P13KC3/Beclin1复合物在染矽尘大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)自噬中的调控作用。[方法]常规培养NR8383细胞,随机分为4组:对照组,矽尘组,3-MA组和3-MA干预组,分别孵育1、3、6、12、20h后收集样品。采用蛋白免疫印迹方法检... [目的]探讨P13KC3/Beclin1复合物在染矽尘大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)自噬中的调控作用。[方法]常规培养NR8383细胞,随机分为4组:对照组,矽尘组,3-MA组和3-MA干预组,分别孵育1、3、6、12、20h后收集样品。采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标记蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬底物蛋白p62以及自噬相关蛋白Beclin1、P13KC3;采用激光扫描共聚焦显微镜观察孵育不同时间的自噬免疫荧光表达情况;采用免疫共沉淀检测Beclin1复合物表达。[结果]免疫荧光结果显示,矽尘组LC3点状聚集绿色荧光亮斑随时间先增强后减弱,在6h时荧光最强,且各时间点较对照组和3-MA干预组荧光亮斑增强;3-MA干预组LC3荧光标记绿色亮斑先增强后减弱,弱于矽尘组,但强于对照组。加入溶酶体抑制剂二磷酸氯喹后,各组LC3绿色荧光信号随时间均呈现增强的趋势。Westernblot结果显示,矽尘组LC3-II/LC3-I值呈先增加后减少趋势,且在各个时间点均高于对照组(P〈0.05);在LC3-II/LC3-I值达最高的6h时间点,矽尘组的值是对照组的248%,是3-MA组的372%。3-MA干预组LC3-II/LC3-I值也呈先增加后减少趋势;除1h时间点外,余各时间点均低于矽尘组,但高于对照组(P〈0.05);在LC3-II/LC3-I值达最高的6h时间点,3-MA干预组的值是矽尘组的90%,是对照组的223%。Beclin1、P13KC3蛋白表达趋势与LC3-II/LC3-I值一致,p62蛋白表达趋势与LC3-II/LC3-I值相反。免疫共沉淀显示,矽尘组Beclin1与P13K结合增加,3-MA干预后两者结合减少。[结论]矽尘诱导NR8383细胞的自噬活动随时间发生不同程度的改变,3-MA可下调矽尘诱导的NR8383细胞自噬活动,推测P13KC3/Beclin1信号通路参与矽尘诱导肺泡巨噬细胞的自噬过程。 展开更多
关键词 自噬 NR8383细胞 Beelin1 Ⅲ型P13K P62
苦参碱可能通过自噬抑制肺癌A549细胞的增殖 预览 被引量:2
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作者 方彪彪 张淑君 +1 位作者 刘佳 成秉林 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第12期1811-1815,共5页
目的:探究苦参碱对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其对自噬的影响.方法:体外培养肺癌A549细胞,分别用不同浓度的苦参碱处理后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率;倒置显微镜下观察不同浓度苦参碱时A549细胞的形态变化;采... 目的:探究苦参碱对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其对自噬的影响.方法:体外培养肺癌A549细胞,分别用不同浓度的苦参碱处理后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率;倒置显微镜下观察不同浓度苦参碱时A549细胞的形态变化;采用细胞克隆实验检测不同浓度的苦参碱对A549细胞的增殖抑制程度;Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、p62及LC3A/B的表达水平;透射电镜下观察经苦参碱处理后A549细胞内自噬泡的变化.结果:苦参碱对肺癌A549细胞有明显的抑制作用,并且呈剂量依赖性;倒置显微镜下发现经苦参碱处理后肺癌A549细胞皱缩、变小、胞内可见大小不一的颗粒状物质;随着苦参碱浓度的增加,肺癌A549细胞形成的克隆集落逐渐变小、变少;Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、p62及LC3A/B的水平均随着苦参碱浓度的增加而增加,并呈剂量依赖性;透射电镜下观察到苦参碱处理的肺癌A549细胞内自噬空泡明显增加,并且可观察到吞噬线粒体的自噬泡.结论:苦参碱可抑制肺癌A549细胞的增殖,并能诱导细胞内自噬的发生及损伤自噬降解通路,因此我们推测苦参碱可能通过自噬造成细胞内物质和能量的循环紊乱从而抑制肺癌A549细胞的增殖. 展开更多
关键词 苦参碱 肺癌 自噬 BECLIN1 P62 LC3A/B
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胰腺癌患者自噬标记蛋白Beclin-1和P62的表达及其相关性 预览
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作者 朱晓东 张春丽 《实用癌症杂志》 2018年第11期1770-1772,1776共4页
目的 分析不同来源胰腺组织中自噬标记蛋白Beclin-1和P62含量的差异及其相关性。方法 选取60例胰腺癌临床确诊患者、60例胰腺炎确诊患者和60例健康居民作为研究对象,应用免疫组织化学法检测胰腺组织中自噬相关蛋白Beclin-1和P62的含量差... 目的 分析不同来源胰腺组织中自噬标记蛋白Beclin-1和P62含量的差异及其相关性。方法 选取60例胰腺癌临床确诊患者、60例胰腺炎确诊患者和60例健康居民作为研究对象,应用免疫组织化学法检测胰腺组织中自噬相关蛋白Beclin-1和P62的含量差异,并分析不同病情的胰腺癌患者病理组织中Beclin-1和P62表达含量的差异,同时对2种标记物进行相关性分析。[HTH〗结果 4组不同来源胰腺组织中Beclin-1蛋白(F=1013.51,P=0.00),P62(F=355.72,P=0.00)含量的差异具有统计学意义;且两两比较发现,Beclin-1蛋白和P62含量的差异均显著(均有P<0.05)。不同病情(肿瘤大小、分化程度、病变部位、TNM分期、周围组织侵犯情况)胰腺癌患者病理组织中Beclin-1和P62表达含量的差异也显著(P均<0.05);胰腺癌患者病理组织进行免疫组化分析,阳性物质中Beclin-1的平均积分光密度(252130.47±20147.33),P62表达强度评分(5.13±1.46),两者呈显著相关(Pearso n=0.87,P=0.00)。结论 Beclin-1和P62与胰腺癌的发生发展密切相关,且Beclin-1和P62呈显著相关性,不同病情胰腺癌患者亦存在差异性表达。 展开更多
关键词 胰腺癌 自噬标记蛋白 BECLIN-1 P62
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LC-3和P62在非小细胞肺癌中的表达及其临床特征分析
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作者 王璁 李永文 +6 位作者 李颖 宫颢 张洪兵 袁茵 李伟婷 刘红雨 陈军 《中国肺癌杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期445-450,共6页
背景与目的 LC-3和P62是参与自噬过程的两个重要蛋白,在许多恶性肿瘤中高表达并与预后有关。本研究的目的在于探讨自噬标记物LC-3、P62蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床特征。方法应用免疫组化法检测66例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中L... 背景与目的 LC-3和P62是参与自噬过程的两个重要蛋白,在许多恶性肿瘤中高表达并与预后有关。本研究的目的在于探讨自噬标记物LC-3、P62蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床特征。方法应用免疫组化法检测66例非小细胞肺癌患者肿瘤组织中LC-3和P62的表达情况,分析其表达状态与临床特征的关系。结果 LC-3在非小细胞肺癌组织中阳性表达率为40.9%(27/66),P62在非小细胞肺癌组织中阳性表达率为65.2%(43/66)。LC-3的阳性表达与患者的病理类型及转移情况明显相关(P〈0.05);而P62的阳性表达与患者的病理类型,临床分期及淋巴结转移明显相关(P〈0.05)。LC-3和P62的阳性表达与患者的性别、年龄和吸烟史无明显相关性(P〉0.05)。LC-3与P62在非小细胞肺癌组织中的表达呈负相关性(rs=-0.065,P〈0.001)。Kaplan-Meier分析显示LC-3蛋白阳性表达的患者5年生存率明显高于阴性表达的患者(P〈0.05),而P62蛋白的阳性表达确与患者的生存率无显著相关性。结论 LC-3和P62在非小细胞肺癌组织中呈现异常表达,提示自噬参与了非小细胞肺癌的发生及发展过程。 展开更多
关键词 LC-3 P62 自噬 非小细胞肺癌 免疫组织化学
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