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参附注射液对内毒素休克模型大鼠肺组织炎症的改善作用及抗炎机制研究 预览
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作者 刘霞 艾飞 +8 位作者 褚春薇 陈向云 郭俊峰 杨毅 梅丽艳 苗纪飞 温泉 叶森 黎晖 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第11期1492-1497,共6页
目的:研究参附注射液对内毒素休克模型大鼠肺组织炎症的改善作用及其抗炎机制。方法:将48 只大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(阳性对照,1 mg/kg)和参附注射液低、中、高剂量组(5、10、15 mL/kg),每组8只。除正常组外,其余各组... 目的:研究参附注射液对内毒素休克模型大鼠肺组织炎症的改善作用及其抗炎机制。方法:将48 只大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(阳性对照,1 mg/kg)和参附注射液低、中、高剂量组(5、10、15 mL/kg),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)复制内毒素休克模型,造模后各组大鼠腹腔注射给药1次。给药24 h 后,苏木精-伊红(HE)染色后观察大鼠肺组织病理学变化并进行病理学评分;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肺组织中核转录因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白P65、P50 mRNA的表达水平;Western blot法测定肺组织中P65、P50 蛋白的表达水平,并检测肺组织细胞核和细胞浆中P65蛋白的表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺泡间隔增厚,血管明显充血,肺间质大量中性粒细胞浸润;肺组织病理学评分和P65、P50 mRNA及蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01 或P<0.001),细胞核、细胞浆中P65 蛋白和血浆中TNF-α水平均显著升高(P<0.001)。与模型组比较,地塞米松组和参附注射液中、高剂量组大鼠肺泡结构完整,无明显出血,炎性细胞浸润程度明显改善;肺组织病理学评分和P65、P50 mRNA及蛋白的表达水平以及血浆中TNF-α水平均显著降低(P<0.05 或P<0.01 或P<0.001),地塞米松组和参附注射液低、中剂量组大鼠肺组织细胞核、细胞浆中P65 蛋白表达水平均显著降低(P<0.05 或P<0.01 或P<0.001)。结论:参附注射液可通过降低肺组织中P65、P50 mRNA及蛋白的表达水平及血浆中TNF-α的水平,改善内毒素休克模型大鼠肺组织的炎症反应。 展开更多
关键词 参附注射液 急性肺损伤 内毒素休克 核转录因子ΚB P65 P50 大鼠
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鸡毒支原体GroEL蛋白通过NF-κB信号通路诱导DF-1细胞释放IL-1β的研究 预览
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作者 张琳 陈莹 +5 位作者 朱可蒙 赵雅芝 潘巧 郝文君 于颖 辛九庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期223-228,共6页
鸡毒支原体(MG)脂质相关膜蛋白(LAMPs)在刺激宿主细胞天然免疫中起重要作用,GroEL蛋白是本实验室前期利用质谱鉴定筛选出的LAMPS中的关键组分。为研究GroEL蛋白诱导宿主细胞炎性反应的信号通路,本研究通过原核表达系统表达出MG的GroEL蛋... 鸡毒支原体(MG)脂质相关膜蛋白(LAMPs)在刺激宿主细胞天然免疫中起重要作用,GroEL蛋白是本实验室前期利用质谱鉴定筛选出的LAMPS中的关键组分。为研究GroEL蛋白诱导宿主细胞炎性反应的信号通路,本研究通过原核表达系统表达出MG的GroEL蛋白,利用激光共聚焦试验、荧光定量PCR和western blot方法分别检测GroEL蛋白的粘附特性、p65入核、磷酸化水平及IL-1β分泌情况。激光共聚焦试验结果显示,GroEL蛋白能够黏附于DF-1细胞表面并刺激DF-1细胞中p65从胞浆转入细胞核;western blot检测显示GroEL蛋白能够激活NF-κB信号通路促进p65磷酸化水平提高;荧光定量PCR检测显示GroEL蛋白能够促进IL-1β释放,当NF-κB信号通路被抑制后,IL-1β的释放显著下降(p<0.01)。本研究结果表明MG GroEL蛋白能够粘附于宿主细胞表面并通过激活NF-κB信号通路诱导宿主细胞IL-1β的释放,从而在炎症反应中发挥作用。本研究为深入研究MG致病机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 GroEL蛋白 IL-1Β P65 NF-ΚB
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肺癌组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的表达情况及与临床特征的关系 预览
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作者 高芸菲 杨婧 孔曼 《癌症进展》 2019年第5期575-577,602共4页
目的探究肺癌组织中P65、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、波形蛋白(vimentin)的表达情况及与肺癌患者临床特征的关系。方法选取60例肺癌患者的肺癌组织及对应的癌旁组织,采用免疫组织化学法检测肺癌组织和癌旁组织中P65、CYFRA... 目的探究肺癌组织中P65、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、波形蛋白(vimentin)的表达情况及与肺癌患者临床特征的关系。方法选取60例肺癌患者的肺癌组织及对应的癌旁组织,采用免疫组织化学法检测肺癌组织和癌旁组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的表达情况,并对其与肺癌患者临床特征的关系进行分析。结果肺癌组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的阳性表达率均明显高于癌旁组织(P﹤0.01);临床分期为Ⅲ~Ⅳ期肺癌患者肺癌组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的阳性表达率均明显高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期的患者(P﹤0.01)。有淋巴结转移的肺癌患者肺癌组织中P65和vimentin蛋白的阳性表达率均高于无淋巴结转移的患者(P﹤0.05);不同淋巴结转移情况肺癌患者肺癌组织中CYFRA21-1蛋白的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论肺癌患者肺癌组织中P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的阳性表达率较癌旁组织增高,P65、CYFRA21-1、vimentin蛋白的表达与肺癌患者的临床分期和淋巴结转移情况有一定关联。 展开更多
关键词 肺癌 核因子-κB P65 细胞角质蛋白19片段抗原21-1 波形蛋白 侵袭转移
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Rnd3通过对p65的泛素化调节诱导胶质瘤细胞凋亡
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作者 李晓斌 李云涛 +6 位作者 苏忠周 蒋姝亭 袁凡恩 谈胤求 刘宝辉 张红波 陈谦学 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期477-480,共4页
目的探讨Rnd3在胶质瘤细胞凋亡中的作用及机制。方法通过Myc-Rnd3真核表达质粒转染,以Myc真核表达质粒转染作为对照,调控胶质瘤细胞株U251中Rnd3的表达;采用流式细胞术检测转染后U251细胞凋亡率;用Western blot技术检测细胞内Rnd3、p65... 目的探讨Rnd3在胶质瘤细胞凋亡中的作用及机制。方法通过Myc-Rnd3真核表达质粒转染,以Myc真核表达质粒转染作为对照,调控胶质瘤细胞株U251中Rnd3的表达;采用流式细胞术检测转染后U251细胞凋亡率;用Western blot技术检测细胞内Rnd3、p65、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)以及裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)的表达;以Flag真核表达质粒转染作为对照,通过Flag-p65真核表达质粒转染恢复p65表达后,用Western blot技术检测其下游bcl-2以及cleaved-Caspase-3蛋白的表达;Myc-Rnd3转染后,用MG-132抑制蛋白泛素化,检测细胞内p65蛋白表达。结果经真核表达质粒转染后,Myc-Rnd3组细胞Rnd3蛋白表达量较Myc组显著提高(P<0.05);Myc-Rnd3组细胞凋亡由U251-Myc组7.28%(5.36±0.1、1.92±0.12)增加至U251-Myc-Rnd3组的19.93%(13.51±0.32、6.42±0.21),细胞凋亡率明显高于Myc组,差异有统计学意义(P<0.05);与U251-Myc组比较,U251-Myc-Rnd3组p65蛋白表达量降低,高表达的Rnd3使p65表达下调,进而引起bcl-2下调和cleaved-Caspase-3上调,差异有统计学意义(P<0.05);逆转p65蛋白功能后(p65^+,Rnd3^-)组较(p65^-,Rnd3^-)组p65表达量升高(P<0.05),bcl-2表达量升高(P<0.05),cleaved-Caspase-3表达量降低(P<0.05);(p65^+,Rnd3^+)组较(p65^+,Rnd3^-)组p65表达量差异无统计学意义;(p65^-,Rnd3^+)组较(p65^-,Rnd3^-)Rnd3表达量升高(P<0.05),p65表达量降低(P<0.05),bcl-2表达量降低(P<0.05),cleaved-Caspase-3表达量升高(P<0.05);MG-132抑制细胞内蛋白泛素化途径结果显示,随着Rnd3蛋白表达量升高,p65蛋白表达量依次降低;而在MG-132处理组,随着Rnd3蛋白表达量升高,p65蛋白表达量差异无统计学意义。结论Rnd3可能通过促进p65泛素化诱导U251胶质瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 Rnd3 P65 胶质瘤 泛素化
慢病毒介导PTEN-Long过表达抑制人脑胶质瘤U251细胞裸鼠移植瘤的生长 预览
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作者 耿连婷 李春晖 +3 位作者 单小松 郑亚北 曾昭穆 郑克彬 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第11期1743-1748,共6页
背景:第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosohatase and tensin homolgue deleted on chromosome 10,PTEN)的翻译变体(PTEN-Long)是新发现的一种肿瘤抑制基因,与多种肿瘤的发展密切相关。目的:探讨PTEN-Long对人脑胶质瘤U25... 背景:第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosohatase and tensin homolgue deleted on chromosome 10,PTEN)的翻译变体(PTEN-Long)是新发现的一种肿瘤抑制基因,与多种肿瘤的发展密切相关。目的:探讨PTEN-Long对人脑胶质瘤U251细胞裸鼠异体移植瘤生长的抑制作用及相关分子机制。方法:①人脑胶质瘤细胞U251购自国家实验细胞资源共享服务平台北京总部,实验将未感染慢病毒的U251为对照组,感染LV-EGFP的U251为空载组,感染LV-PTEN-Long-EGFP的U251为过表达组,用荧光显微镜、Western blot检测转染效率;②实验将购自北京华阜康生物科技股份有限公司的BALB/c-nu雄性裸鼠随机分为3组,将3组细胞分别接种于裸鼠背部皮下,观察裸鼠一般状况及肿瘤生长趋势,分析各组裸鼠皮下肿瘤的体积及质量变化,免疫组织化学染色法检测肿瘤中PTEN-Long,p-Akt及NF-κB p65蛋白表达变化情况。结果与结论:①一般状况:PTEN-Long过表达后可抑制裸鼠皮下胶质瘤细胞的增殖,与对照组及空载组相比,过表达组裸鼠肿瘤体积及质量减少(P<0.01);②免疫组织化学染色显示:与对照组及空载组相比,过表达组PTEN-Long表达量增加(P<0.05),p-Akt及NF-κB p65表达量降低(P<0.05);③结果显示:PTEN-Long可抑制人脑胶质瘤U251细胞裸鼠异体移植瘤的生长,机制可能与下调PI3K-AKT-NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 U251细胞 慢病毒 PTEN-Long p-Akt NF-κB p65 裸鼠 动物模型 皮下接种 神经胶质瘤 模型 动物 慢病毒感染 组织工程
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黄芪、水蛭及其配方含药血清对脂多糖诱导增生的大鼠GMCs中NF-κB p65、MMP-2 mRNA表达的影响 预览
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作者 顾叶云 赵宝玲 +1 位作者 徐蕾 任现志 《江苏中医药》 CAS 2019年第5期78-81,共4页
目的:观察黄芪、水蛭及其配方含药血清对脂多糖(LPS)诱导增生大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)表达核转录因子p65(NF-κB p65)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(MMP-2)的影响,探索益气化瘀药物及其配方含药血清治疗系膜增生性肾小球肾炎的可能机制。方... 目的:观察黄芪、水蛭及其配方含药血清对脂多糖(LPS)诱导增生大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)表达核转录因子p65(NF-κB p65)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(MMP-2)的影响,探索益气化瘀药物及其配方含药血清治疗系膜增生性肾小球肾炎的可能机制。方法:LPS诱导大鼠GMCs(HBEH)增殖,分别采用黄芪高剂量血清、水蛭高剂量血清、黄芪高剂量水蛭高剂量血清、黄芪低剂量水蛭高剂量血清进行干预,24h后收集细胞,用CCK-8法观察含药血清对GMCs增殖的影响,Real time PCR法测定NF-κB p65、MMP-2因子的表达变化。结果:LPS诱导系膜细胞增殖后,NF-κB p65mRNA表达较正常组明显升高(P<0.01),表达量达到正常细胞的2.07倍,各含药血清组NF-κB p65mRNA表达量与LPS组比较均显著下降(P<0.01)。LPS诱导GMCs增殖后,MMP-2 mRNA表达较正常组明显升高(P<0.01),表达量达到正常细胞的2.0倍,而各含药血清组MMP-2 mRNA表达量与LPS组比较均显著下降(P<0.01)。上述指标各含药血清组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芪、水蛭及其配方含药血清能够通过影响NF-κB65、MMP-2的表达减少GMCs的增殖及细胞外基质的沉积,益气化瘀含药血清的应用有利于缓解系膜增生性肾小球肾炎的进展。 展开更多
关键词 黄芪 水蛭 肾小球系膜细胞 NF-ΚB P65 MMP-2 含药血清 大鼠 实验研究
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AKT1、p65和MMP9在乳腺癌中的表达及意义 预览
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作者 赵娜 吴晓飞 +4 位作者 陶雅君 邵禹昕 姚轶群 张殿龙 曹铭谦 《全科口腔医学杂志(电子版)》 2019年第5期123-124,127共3页
目的探讨AKT1、p65、MMP9在乳腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测AKT1、p65和MMP9在74例经手术切除的乳腺癌组织中的表达。分析癌组织AKT1、p65和MMP9的表达与患者临床病理参数的关系。结果在74例乳腺癌组织中AKT1的高... 目的探讨AKT1、p65、MMP9在乳腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测AKT1、p65和MMP9在74例经手术切除的乳腺癌组织中的表达。分析癌组织AKT1、p65和MMP9的表达与患者临床病理参数的关系。结果在74例乳腺癌组织中AKT1的高表达率为73%(54/74),p65的高表达率为51%(38/74),MMP9的高表达率为29%(22/74)。三者的表达均彼此相关且三者的表达均与TNM分期和组织学分级明显相关,差异有统计学意义(P<0.05),而与患者年龄、淋巴结转移等均无关;差异无统计学意义(P>0.05)。结论AKT1、p65、MMP9在乳腺癌浸润进展过程中发挥重要作用,以AKT1、p65、MMP9为靶蛋白抑制乳腺癌的恶性进展可能具有相对重要的临床病理意义。 展开更多
关键词 乳腺癌 AKT1 P65 MMP9
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龙血通络胶囊对氧化低密度脂蛋白损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用
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作者 王红梅 周建明 +5 位作者 吕耀中 周军 王振中 黄文哲 屠鹏飞 萧伟 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期1241-1246,共6页
该文为观察龙血通络胶囊对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)致人脐静脉内皮细胞(EAhy.926细胞)损伤的保护作用。采用氧化低密度脂蛋白(100mg·L^-1)损伤建立体外人脐静脉内皮细胞损伤模型方法,MTT法检测龙血通络胶囊对正常细胞生... 该文为观察龙血通络胶囊对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)致人脐静脉内皮细胞(EAhy.926细胞)损伤的保护作用。采用氧化低密度脂蛋白(100mg·L^-1)损伤建立体外人脐静脉内皮细胞损伤模型方法,MTT法检测龙血通络胶囊对正常细胞生长影响及对损伤细胞的保护作用,酶联免疫吸附法检测龙血通络胶囊对内皮细胞损伤后乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响,蛋白质印迹(WB)法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1),血管细胞黏附分子-1(VCAM-1),p65,p-p65,IKB,p-IKB的表达水平。结果显示,与正常对照组比较,OX-LDL损伤后EAhy.926细胞活力显著降低,细胞LDH漏出量增加(P〈0.01),NO含量、SOD活力均显著降低(P〈0.0l,P〈0.05),细胞中MDA含量升高(P〈0.05),ICAM-1,VCAM-1,p-p65/r,65,p-IKB/IKB等蛋白的表达量均显著升高(P〈0.01);与模型对照组比较,龙血通络胶囊(1,2mg·L^-1)对正常细胞生长无显著影响,可促进OX-LDL损伤的血管内皮细胞增殖(P〈0.05,P〈0.01),降低胞内MDA含量、减少细胞LDH释放量(P〈0.05),提高SOD活力及NO含量(P〈0.0l,P〈0.05);可降低ICAM-1,VCAM-1,p-p65/p65,p-IKB/IKB的表达(P〈0.01)。结果提示龙血通络胶囊对OX-LDL所致的人脐静脉内皮细胞损伤具有明显的保护作用,说明龙血通络胶囊对动脉粥样硬化具有一定治疗作用。 展开更多
关键词 龙血通络胶囊 人脐静脉内皮细胞 氧化低密度脂蛋白 MDA SOD LDH NO ICAM-1 VCAM-1 P65 p-p65 IKB p-IKB
重离子辐照对人舌鳞癌CAL27细胞的生物学效应及其分子机制 预览
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作者 刘娅丽 王志强 +3 位作者 马丽娟 王若宇 杨兰 冯正虎 《肿瘤防治研究》 CSCD 2018年第8期523-527,共5页
目的研究重离子12C6+离子辐照对人舌鳞癌CAL27细胞的生物学效应以及分子机制。方法应用不同剂量重离子束(12C6+)对体外培养的人舌癌CAL27细胞进行辐照,采用MTT、Transwell、流式细胞术、划痕实验、克隆实验观察重离子束(12C6+)对... 目的研究重离子12C6+离子辐照对人舌鳞癌CAL27细胞的生物学效应以及分子机制。方法应用不同剂量重离子束(12C6+)对体外培养的人舌癌CAL27细胞进行辐照,采用MTT、Transwell、流式细胞术、划痕实验、克隆实验观察重离子束(12C6+)对CAL27细胞迁移和侵袭、凋亡和周期的影响,Western blot法观察重离子束(12C6+)对CAL27细胞增殖的影响。结果 (1)重离子辐照对CAL27细胞的增殖抑制作用与剂量-时间成正相关;(2)和空白对照组比较,在相同时间点,不同剂量的重离子束(12C6+)对细胞中P53、P65和VEGF的表达影响明显,随着重离子束(12C6+)辐照剂量增大,细胞中P53、P65和VEGF的表达明显降低(P〈0.05)。结论重离子辐照能抑制CAL27细胞的增殖,且具有剂量和时间效应。 展开更多
关键词 重离子 舌鳞状细胞癌 P53 P65 VEGF
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P65、P50及IκBα表达与卵巢癌化疗耐药性的相关性研究 预览
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作者 张婷婷 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第21期2689-2691,共3页
目的探讨P65、P50及IκBα表达与卵巢癌化疗耐药性的相关性。方法选取2016年1月至2017年1月该院的100例卵巢癌患者的手术切除标本作为研究对象,同时选取同期该院健康卵巢组织100例作为对照。采用免疫组织化学法检测P65、P50和IκBα蛋... 目的探讨P65、P50及IκBα表达与卵巢癌化疗耐药性的相关性。方法选取2016年1月至2017年1月该院的100例卵巢癌患者的手术切除标本作为研究对象,同时选取同期该院健康卵巢组织100例作为对照。采用免疫组织化学法检测P65、P50和IκBα蛋白水平。分析P65、P50和IκBα蛋白水平与卵巢癌化疗耐药性的关系。结果卵巢癌患者组织中P65蛋白表达阳性率(66.00%)、P50蛋白表达阳性率(68.00%)、IκBα蛋白表达阳性率(62.00%)高于健康卵巢组(P<0.05)。P65蛋白表达与卵巢癌临床分期密切相关(P<0.05);P50蛋白表达与卵巢癌的肿瘤大小密切相关(P<0.05);IκBα蛋白表达与卵巢癌的病理分级密切相关(P<0.05)。化疗敏感组P65阳性表达率(68.18%)、P50阳性表达率(69.12%)和IκBα阳性表达率(67.74%)高于化疗耐药组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论P65、P50及IκBα表达表达水平与卵巢癌化疗耐药相关,P65、P50及IκBα有望成为判断卵巢癌化疗疗效的指标。 展开更多
关键词 P65 P50 IΚBΑ 卵巢癌 化疗耐药性
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核转录因子-κB(p65)在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中变化的研究
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作者 马月 高利萍 +3 位作者 肖康 王晶 董小平 石琦 《疾病监测》 CAS 2018年第1期32-36,共5页
目的 研究NF-κB(p65)在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中的变化。方法 通过蛋白质免疫印迹法及免疫组织化学的方法 检测p65在139A感染的脑组织均浆中的含量变化。利用免疫荧光方法 检测p65在神经元及胶质细胞中的分布情况。结果 在139... 目的 研究NF-κB(p65)在羊瘙痒因子139A感染小鼠脑组织中的变化。方法 通过蛋白质免疫印迹法及免疫组织化学的方法 检测p65在139A感染的脑组织均浆中的含量变化。利用免疫荧光方法 检测p65在神经元及胶质细胞中的分布情况。结果 在139A感染终末期小鼠脑组织均浆中,p65含量下降,差异有统计学意义。对感染不同时间点的动态分析结果 显示,p65含量呈先升高随后逐渐降低趋势。免疫组织化学显示,139A感染终末期小鼠大脑皮层p65含量明显下降。免疫组织荧光显示在正常和139A感染终末期小鼠脑组织中,p65与神经元细胞存在共定位现象。结论 NF-κB(p65)在小鼠中枢神经系统中主要分布于神经元细胞,在139A感染的小鼠终末期脑组织中,p65总量明显下降,提示在139A感染的小鼠脑组织中,NF-κB(p65)出现了变化,在疾病进程中发挥一定作用。 展开更多
关键词 核转录因子-ΚB P65 羊瘙痒因子
原儿茶酸对金黄色葡萄球菌性肺炎模型小鼠的保护作用及相关机制研究 预览 被引量:1
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作者 饶春晖 陆淼炯 杨燕 《浙江中西医结合杂志》 2018年第11期911-915,987共6页
目的 研究原儿茶酸(PA)对金黄色葡萄球菌(SA)性肺炎模型小鼠的保护作用,并探讨其相关机制。方法 动物实验:36只C57BL/6雌鼠随机分为对照组、SA模型组和原儿茶酸预处理组,每组12只,构建SA肺炎模型小鼠。细胞实验:RAW264.7细胞分组... 目的 研究原儿茶酸(PA)对金黄色葡萄球菌(SA)性肺炎模型小鼠的保护作用,并探讨其相关机制。方法 动物实验:36只C57BL/6雌鼠随机分为对照组、SA模型组和原儿茶酸预处理组,每组12只,构建SA肺炎模型小鼠。细胞实验:RAW264.7细胞分组方法同前,构建体外巨噬细胞RAW264.7感染模型。二者均于模型构建前1h行PA预处理。采用HE检测各组小鼠肺组织病理变化,Western Blot检测RAW264.7细胞P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和磷酸化(p)-P38MAPK、胞外信号调节激酶(ERK MAPK)和p-ERK MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK MAPK)和p-JNK MAPK、核转录因子-κB P65(P65)和p-P65蛋白表达情况,采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达水平。结果 动物实验:与模型组比较,PA预处理可减轻SA肺炎,减轻肺组织病理改变,显著降低肺组织和肺泡灌洗液TNF-α和IL-6表达水平(P均〈0.05)。细胞实验:与模型组比较,PA预处理可显著降低细胞上清液和细胞TNF-α和IL-6表达水平(P均〈0.05),并且抑制P65蛋白的活化,但对其它MAPK相关蛋白表达无影响。结论 原儿茶酸对SA肺炎模型小鼠具有保护作用,作用机制可能与抑制P65炎症信号通路的活化、降低TNF-α、IL-6表达有关。 展开更多
关键词 小鼠 RAW264.7细胞 原儿茶酸 金黄色葡萄球菌 肺炎 P65蛋白
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壮医药线点灸联合甲氨蝶呤对佐剂关节炎大鼠NF-κB/IκB信号通路的影响 预览
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作者 蒋耀平 肖敬 +4 位作者 赵先锋 谢议凤 蒙继勇 刘江 张国峰 《中医药学报》 CAS 2018年第5期18-24,共7页
目的:从分子生物学角度探究壮医药线点灸联合甲氨蝶呤对佐剂关节炎大鼠NF-κB/IκB信号通路的影响,为壮医药线点灸联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎(RA)提供理论依据。方法:建立佐剂关节炎大鼠模型,并分为正常对照组(NC)、关节炎... 目的:从分子生物学角度探究壮医药线点灸联合甲氨蝶呤对佐剂关节炎大鼠NF-κB/IκB信号通路的影响,为壮医药线点灸联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎(RA)提供理论依据。方法:建立佐剂关节炎大鼠模型,并分为正常对照组(NC)、关节炎模型组(RA)、甲氨蝶呤组(MTX)和壮医药线点灸联合甲氨蝶呤组(CT)。观察并评估大鼠关节炎指数;ELISA法检测各组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量;qPCR和Western blotting法检测滑膜组织中P65、I-kBα、TNF-α、IL-1β和COX-2的表达。结果:与RA组相比,MTX组和CT组均能显著降低关节炎指数(P〈0. 05),且CT组显著低于MTX组(P〈0. 05);与RA组相比,MTX组和CT组大鼠血清中TNF-α和IL-1β含量均显著下降(P〈0. 05),其中CT组下降更为显著(P〈0. 05 VS MTX);MTX组和CT组大鼠关节滑膜组织中P65、TNF-α、IL-1β和COX-2的mRNA和蛋白表达显著下调(P〈0. 05 VS RA),I-kBα显著上调(P〈0. 05 VS RA),且MTX组和CT组相比差异亦具有显著性差异(P〈0. 05)。结论:壮医药线点灸联合甲氨蝶呤干预能够显著改善大鼠关节炎症状,且其作用机制可能是通过调控NF-κB/IκB信号通路,从而抑制炎症因子释放和环氧化酶的表达来实现的。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 壮医药线点灸 NF-ΚB/IΚB TNF-α IL-1Β P65 COX2
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产前冷应激对妊娠母鼠肝脏HSP70和P65的影响
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作者 李文杰 连帅 +5 位作者 李悦 张宇辰 王立鹏 臧树成 袁建彬 杨焕民 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1952-1955,共4页
将20只SPF级妊娠Wister母鼠随机分为常温对照组和冷应激组,每组10只。对照组妊娠母鼠妊娠期全程在(22±2)℃的环境中饲养,冷应激组母鼠在产前7d置于(4±0.1)℃人工智能气候室中饲养,分别冷刺激3d和7d。麻醉后采集各时间点... 将20只SPF级妊娠Wister母鼠随机分为常温对照组和冷应激组,每组10只。对照组妊娠母鼠妊娠期全程在(22±2)℃的环境中饲养,冷应激组母鼠在产前7d置于(4±0.1)℃人工智能气候室中饲养,分别冷刺激3d和7d。麻醉后采集各时间点(每个时间点5只妊娠母鼠)肝脏组织样本,常温对照组在相同时间点采集肝脏组织样本。采用Westen blot方法检测肝脏中HSP70、P65蛋白的表达量。结果显示:冷应激组妊娠母鼠肝脏中HSP70和P65蛋白表达量均高于常温对照组,且差异均有统计学意义(P〈0.05)。结果表明:产前冷应激使妊娠母鼠肝脏中HSP70、P65蛋白表达量升高,推测这有可能促使肝脏中炎症反应的发生。 展开更多
关键词 大鼠肝脏 产前冷应激 Westen BLOT HSP70 P65
RelA翻译后修饰对核因子κB活性的调控作用 预览
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作者 孙鸽 夏献民 《临床与病理杂志》 2018年第4期843-852,共10页
转录因子NF-κB是由5种蛋白质分子组成的同源或异源二聚体,在多种生物过程中发挥重要的调节作用,如免疫应答、细胞发育、细胞凋亡、肿瘤发生等。作为NF-κB的一种蛋白质亚基,RelA具有多种翻译后修饰作用,包括磷酸化、乙酰化、甲基... 转录因子NF-κB是由5种蛋白质分子组成的同源或异源二聚体,在多种生物过程中发挥重要的调节作用,如免疫应答、细胞发育、细胞凋亡、肿瘤发生等。作为NF-κB的一种蛋白质亚基,RelA具有多种翻译后修饰作用,包括磷酸化、乙酰化、甲基化和泛素化等,这些翻译后修饰在不同细胞中应答不同的胞外刺激,进而调节NF-κB的活性和功能,其作用形式不同,且同一修饰因环境差异能产生不同的影响;此外,不同修饰间还存在复杂的交互关系,有时相互拮抗,有时相互协同。NF-κB对人类健康具有重要作用,理解这些翻译后修饰不仅可加深对整个NF-κB通路调控的认识,还能帮助临床找到相关疾病的合适治疗靶点及诊断标志。 展开更多
关键词 RELA P65 翻译后修饰 核因子ΚB 转录调控
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血红素氧合酶-1通过NF-κB信号通路抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡 被引量:1
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作者 张雪梅 江维 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期561-568,共8页
目的探讨血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的作用及机制。 方法 采用免疫组化和Western blot检测正常(LVF组,标本来源于年轻的椎体骨折行手术治疗的患者)及退变(IDD组,标本来源于椎间盘退变... 目的探讨血红素氧合酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的作用及机制。 方法 采用免疫组化和Western blot检测正常(LVF组,标本来源于年轻的椎体骨折行手术治疗的患者)及退变(IDD组,标本来源于椎间盘退变性疾病行手术治疗的患者)人椎间盘髓核组织中HO-1和磷酸化的P65(p-P65)的表达差异;体外培养退变髓核细胞,通过IL-1β处理增加髓核细胞凋亡,再用载HO-1质粒的慢病毒及小干扰RNA处理髓核细胞后检测凋亡的变化;通过P65抑制剂PDTC抑制p-P65表达后检测髓核细胞凋亡的变化。 结果免疫组化结果显示,HO-1在IDD组中的阳性表达率为(18.58±0.59)%,明显低于LVF组(58.26±2.48)%(P〈0.05),而p-P65在IDD组中的阳性表达率为(40.27±2.03)%,明显高于LVF组(19.75±1.98)%(P〈0.05)。IL-1β能增加退变髓核细胞的凋亡,同时引起p-P65表达增加,HO-1-siRNA抑制HO-1表达后可以进一步提高髓核细胞凋亡率(P〈0.05),而过表达HO-1处理细胞后能够降低IL-1β引起的凋亡增加,同时降低pP65表达(P〈0.05)。使用P65抑制剂PDTC抑制髓核细胞P65信号通路后,髓核细胞凋亡率明显降低,此时沉默HO-1不能增加髓核细胞凋亡。 结论 HO-1能够通过NF-κB通路抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡。 展开更多
关键词 血红素氧合酶-1 核转录因子kappa B P65 髓核 凋亡
急性溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中SHP2的表达及其作用探讨 预览
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作者 谭婉燕 杨旭辉 《山东医药》 2018年第38期35-38,共4页
目的观察急性溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中含C-Src同源序列的蛋白质酪氨酸磷酸酶2(SHP2)的表达,探讨SHP2在UC病程中的作用。方法将30只小鼠随机分成正常组、模型组、SHP2组各10只。模型组和SHP2组饮用4%DSS制作急性UC模型,正常组饮... 目的观察急性溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中含C-Src同源序列的蛋白质酪氨酸磷酸酶2(SHP2)的表达,探讨SHP2在UC病程中的作用。方法将30只小鼠随机分成正常组、模型组、SHP2组各10只。模型组和SHP2组饮用4%DSS制作急性UC模型,正常组饮用高压过的饮用水。造模第1天,正常组、模型组、SHP2组分别注射腺病毒稀释液、腺病毒空载体、腺病毒SHP2突变载体。每天记录小鼠体质量、腹泻及便血情况,使用疾病活动指数(DAI)评分量表评价肠道临床炎症严重程度。饲养至20 d处死小鼠,取结肠组织,采用HE染色观察组织形态学变化,进行组织学评分,采用阿尔新蓝染色法检测杯状细胞数量。收集小鼠心脏血,ELISA法检测血清炎性因子COX-2、IL-6、TNF-α水平。取结肠组织,Western blotting法检测结肠组织中SHP2、p-P65、p-STAT3表达水平,免疫组化染色法检测Ki67表达水平。结果与正常组比较,模型组DAI评分、结肠组织病理学评分均升高,杯状细胞数量减少,血清COX-2、IL-6、TNF-α水平及结肠组织中p-P65、p-STAT3、Ki67表达水平均升高(P均<0.05或<0.01);与模型组比较,SHP2组DAI评分、结肠组织病理学评分均降低,杯状细胞数量增加,血清COX-2、IL-6、TNF-α水平及结肠组织中p-P65、p-STAT3、Ki67表达水平均降低(P<0.05或<0.01)。结论急性UC小鼠结肠组织中SHP2表达升高;SHP2可能是通过介导NF-κB/STAT3信号通路的激活,调节炎性因子COX-2、IL-6、TNF-α释放,导致黏膜损伤,促进UC的发生。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 含C-Src同源序列的蛋白质酪氨酸磷酸酶2 P65蛋白 信号传导与转录活化因子3 小鼠
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白头翁素对E.coli诱导断乳腹泻仔兔肠道组织病理变化、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达的影响
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作者 杜冬华 利凯 +3 位作者 周静 梁淑珍 王鹏 刘春凌 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1201-1206,共6页
为了探讨白头翁素(anemonin)在仔免大肠杆菌性腹泻中的作用及其对核因子NF-κB p65 表达的影响,试验将200只30日龄健康新西兰兔随机分为4组,大肠杆菌感染致腹泻(E.coli)组、E.coli+anemonin干预组、生理盐水(NS)组和NS+anem... 为了探讨白头翁素(anemonin)在仔免大肠杆菌性腹泻中的作用及其对核因子NF-κB p65 表达的影响,试验将200只30日龄健康新西兰兔随机分为4组,大肠杆菌感染致腹泻(E.coli)组、E.coli+anemonin干预组、生理盐水(NS)组和NS+anemonin对照组。观察各组仔兔临床症状,作为仔免是否发病的指标,同时统计各组仔兔体质量变化及存活时间,观察肠道组织病理学变化,并用实时荧光定量RT—PCR和Western blot方法分别检测肠道组织内NF-κB p65 基因及其蛋白表达量。结果显示,E.coli组仔兔表现精神沉郁,食欲减退或废绝,排出水样或胶冻样稀粪,脱水,且体质量下降明显;剖检发现肠黏膜充血,水肿;组织学变化显示肠黏膜绒毛排列紊乱,萎缩、断裂、脱落、间隙增宽、空泡化等。而与E.coli组相比,E.coli+anemonin干预组仔免症状则较轻,死亡率明显降低(P〈0.05),感染仔兔存活时间明显延长(P〈0.05);Western blot和qRT—PCR结果显示,anemonin干预可使仔兔肠道组织NF-κB p65 mRNA及其蛋白表达量极显著减弱(P〈0.01),干预后14d恢复至正常表达水平。以上结果表明,E.coil感染诱导仔兔腹泻导致肠损伤过程中可激活NF-κB p65 mRNA及其蛋白表达,这可能是导致仔兔肠损伤的重要因素,而其抑制剂anemonin在干预E.coli致仔兔腹泻引起的肠损伤方面有重要作用。 展开更多
关键词 NF-ΚB P65 信号通路 白头翁素 腹泻 断乳仔兔
大肠癌组织P-糖蛋白、核转录因子κB p65表达及意义 预览
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作者 杜梦楠 程玉 +2 位作者 袁亚男 严晓丽 郑纪宁 《山东医药》 2018年第24期55-57,共3页
目的探讨P-糖蛋白(P-gp)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)在大肠癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组化SP法检测69例份大肠癌患者癌组织(均为腺癌)及其癌旁正常组织(41例份)P-gp、NF-κB p65表达。分析P-gp、NF-κB p65阳性表达与患者... 目的探讨P-糖蛋白(P-gp)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)在大肠癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组化SP法检测69例份大肠癌患者癌组织(均为腺癌)及其癌旁正常组织(41例份)P-gp、NF-κB p65表达。分析P-gp、NF-κB p65阳性表达与患者临床病理参数的关系及P-gp、NF-κB p65表达的相关性。结果 大肠癌组织及其癌旁正常组织P-gp阳性表达率分别为89.9%(62/69)、24.4%(10/41),NF-κB p65阳性表达率分别为84.1%(58/69)、19.5%(8/41);两种组织比较P均<0.05。大肠癌组织P-gp阳性表达与肿瘤分化程度、浸润深度相关(P均<0.05),NF-κB p65阳性表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移相关(P均<0.05)。大肠癌组织P-gp表达和NF-κB p65表达呈正相关(r=0.490,P<0.05)。结论 P-gp、NF-κB p65可促进大肠癌的发生及发展,二者起协同作用。 展开更多
关键词 大肠癌 P-糖蛋白 核转录因子ΚB P65
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血脂康对OX-LDL诱导巨噬细胞组织因子(TF)表达的影响及相关机制 预览
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作者 杨亚兵 刘梅林 《中西医结合心血管病杂志(电子版)》 2018年第19期76-78,共3页
目的观察血脂康(红曲)对OX-LDL诱导巨噬细胞MDA含量、SOD活性、组织因子表达及P65表达和转位的影响及相关机制。方法体外培养巨噬细胞RAW264.7,分别加入ox-LDL、ox-LDL+洛伐他汀(10μmol/ml)、ox-LDL+血脂康(25μg/ml)、ox-LDL+血脂康(5... 目的观察血脂康(红曲)对OX-LDL诱导巨噬细胞MDA含量、SOD活性、组织因子表达及P65表达和转位的影响及相关机制。方法体外培养巨噬细胞RAW264.7,分别加入ox-LDL、ox-LDL+洛伐他汀(10μmol/ml)、ox-LDL+血脂康(25μg/ml)、ox-LDL+血脂康(50μg/ml)和ox-LDL+血脂康(100μg/ml)孵育48 h。TBA法和黄嘌呤氧化酶法检测细胞培养上清中的MDA含量和SOD活性。Western blot检测巨噬细胞RAW264.7组织因子(TF)表达水平。免疫荧光法检测巨噬细胞AW264.7 P65表达以及转位。结果与对照组相比,ox-LDL组SOD活性降低,MDA水平、TF表达及P65细胞核转位明显增多;与ox-LDL组相比,血脂康组SOD活性显著增加,MDA水平、TF表达及P65细胞核转位明显减少,并呈剂量依赖性。与洛伐他汀组相比,高剂量组血脂康SOD活性改善作用更显著,MDA水平、TF表达及P65细胞核转位的抑制作用更明显。结论血脂康可使RAW264.7的SOD活性增加,MDA水平、TF表达及P65细胞核转位减少;与洛伐他汀相比,血脂康抑制氧化应激、下调组织因子和抑制P65转位的作用更明显;血脂康比洛伐他汀具有更强的抗动脉粥样硬化作用。 展开更多
关键词 血脂康 巨噬细胞RAW264.7 氧化应激 组织因子 P65
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