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基于PI3K/Akt信号通路探讨电针对膝骨关节炎模型大鼠软骨细胞凋亡的影响 预览
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作者 张媛媛 蒋昕钰 +1 位作者 李西海 吴明霞 《康复学报》 CSCD 2019年第4期30-36,共7页
目的:基于PI3K/Akt信号通路探讨电针内、外膝眼对膝骨关节炎模型大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法:选择体质量(200±20) g的8周龄雄性SD大鼠50只,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、实验1组、实验2组、实验3组。适应性饲养2周后,... 目的:基于PI3K/Akt信号通路探讨电针内、外膝眼对膝骨关节炎模型大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法:选择体质量(200±20) g的8周龄雄性SD大鼠50只,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、实验1组、实验2组、实验3组。适应性饲养2周后,假手术组于关节内侧切口,逐层分离肌肉、韧带,暴露关节腔后缝合,其余4组采用改良Hulth法复制膝骨关节炎大鼠模型。假手术组与模型组不予电针干预;实验1组取双侧内、外膝眼直刺3~5 mm,连接电针15 min;实验2组取双侧内、外膝眼直刺3~5 mm,连接电针30min;实验3组取非经非穴向上斜刺3~5 mm,连接电针15 min。3个实验组均每日1次,每周5次,共干预12周。电针参数:选用疏密波模式,其中疏波2 Hz,密波10 Hz;脉冲宽度≤1 ms;输出电压≤10 V;耐受度以局部肌肉开始轻微抖动,大鼠不挣扎为度。干预12周后,取大鼠关节软骨组织和滑膜,采用苏木素-伊红染色及甲苯胺蓝染色法,光镜下观察关节软骨组织形态学改变,改良Mankin’s评分标准评价软骨退变程度;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测滑膜白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;采用实时荧光定量PCR与蛋白质印迹法(Western blot)检测PI3K、Akt、Bcl-2、Bax的基因和蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠软骨形态结构紊乱,软骨细胞数量明显减少,基质失染,潮线扭曲且不完整;Mankin’s评分明显升高(P<0.01);滑膜中IL-1β、TNF-α含量明显升高(P<0.01);PI3K、Akt、Bcl-2的基因与蛋白表达均明显降低(P<0.01),Bax的基因和蛋白表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,实验1组、实验2组大鼠软骨形态结构较整齐,软骨细胞数量增多,基质染色加深,潮线较完整;Mankin’s评分明显降低(P<0.01);滑膜中IL-1β、TNF-α含量明显降低(P<0.01);PI3K、Akt、Bcl-2的基因与蛋白表达明显升高(P<0.01),Bax的基因和蛋白表达明显降低(P<0.01)。实验3� 展开更多
关键词 膝骨关节炎 电针 软骨细胞 PI3K AKT 凋亡 PI3K/AKT信号通路
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新型PI3Kα抑制剂的设计、合成与抗肿瘤活性评价 预览
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作者 葛慧 周学文 王小波 《湖北科技学院学报:医学版》 2019年第4期281-286,共6页
目的合成新型PI3Kα抑制剂,并测试其抗肿瘤活性。方法以先导化合物Med-4作为起始化合物,设计一类含吡啶并噻唑类结构的PI3Kα抑制剂候选化合物。以3-氨基-6-溴-2,4-二氯吡啶为起始原料,合成目标化合物,并对其进行肿瘤细胞抑制活性和体... 目的合成新型PI3Kα抑制剂,并测试其抗肿瘤活性。方法以先导化合物Med-4作为起始化合物,设计一类含吡啶并噻唑类结构的PI3Kα抑制剂候选化合物。以3-氨基-6-溴-2,4-二氯吡啶为起始原料,合成目标化合物,并对其进行肿瘤细胞抑制活性和体外酶抑制活性研究。结果合成了6种新型化合物,其中化合物1-(4-(2-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉)-7-吗啉噻唑[5,4-b]吡啶-5-基)苯基)-3-乙基脲与1-环丙基-3-(4-(2-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉)-7-吗啉噻唑[5,4-b]吡啶-5-基)苯基)脲对MCF7细胞系的抑制活性分别达到2.78μmol/L和1.46μmol/L,对PI3Kα的酶抑制活性则达到了50.4nmol/L和37.4nmol/L,均高于先导化合物Med-4的活性值。结论部分目标化合物抗肿瘤活性良好,可在此基础上对其结构作进一步修饰,以期设计并制备出更高活性的PI3Kα抑制剂。 展开更多
关键词 PI3K PI3Kα抑制剂 抗肿瘤活性 吗啉环
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TGF-β1调控肺泡上皮细胞PI3K亚基构成变化的研究 预览
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作者 董年 宋晨剑 +1 位作者 董莉 陈成水 《浙江医学》 CAS 2019年第3期242-245,250共5页
目的探讨肺泡上皮细胞(AECs)中PI3K亚基的表达情况和TGF-β1是否可以调控PI3K亚基的构成变化。方法采用实时定量PCR法检测AECs中PI3K亚基mRNA的表达情况,予5ng/mlTGF-茁1刺激A549细胞0、3、6、12、24和48h不同时间点,实时定量PCR法检测P... 目的探讨肺泡上皮细胞(AECs)中PI3K亚基的表达情况和TGF-β1是否可以调控PI3K亚基的构成变化。方法采用实时定量PCR法检测AECs中PI3K亚基mRNA的表达情况,予5ng/mlTGF-茁1刺激A549细胞0、3、6、12、24和48h不同时间点,实时定量PCR法检测PI3K亚基mRNA的表达变化,Western blot法检测PIK3CD蛋白表达水平。结果AECs中Ⅰ型PI3K催化亚基以表达PIK3CA、PIK3CB和PIK3CD为主,Ⅰ型PI3K调节亚基以表达PIK3R1、PIK3R2和PIK3R3为主,Ⅱ型PI3K亚基和Ⅲ型PI3K亚基以表达PIK3R4、PIK3C3、PIK3C2A和PIK3C2B为主。TGF-β1刺激可以调控Ⅰ型PI3K催化亚基中的PIK3CD mRNA和蛋白的表达呈时间依赖性升高。结论AECs中Ⅰ型PI3K亚基、Ⅱ型PI3K亚基和Ⅲ型PI3K亚基均有不同程度表达,TGF-β1经调控PIK3CD的表达导致Ⅰ型PI3K催化亚基的构成变化。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 PI3K 肺泡上皮细胞 PIK3CD
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连翘苷经PI3K/Akt信号通路干预肾细胞癌的机制研究
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作者 吴林斌 吴元肇 +2 位作者 李晓丹 陈立 黄来剑 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2377-2382,共6页
目的探讨连翘苷抑制人肾细胞腺癌786-0细胞生长、迁移及侵袭的作用机制。方法体外培养786-0细胞,在其中加入不同浓度连翘苷进行干预。MTT法检测细胞生存活力,AO/EB法检测细胞凋亡,划痕实验与Transwell实验分别考察细胞迁移、侵袭能力。W... 目的探讨连翘苷抑制人肾细胞腺癌786-0细胞生长、迁移及侵袭的作用机制。方法体外培养786-0细胞,在其中加入不同浓度连翘苷进行干预。MTT法检测细胞生存活力,AO/EB法检测细胞凋亡,划痕实验与Transwell实验分别考察细胞迁移、侵袭能力。Western blotting法检测细胞内PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、FOXO3a、p-FOXO3a、p21、p27、Fasl、Bim、MMP-2及MMP-9蛋白表达情况。结果连翘苷可有效抑制肾癌细胞生长、促进凋亡,干扰细胞周期,上调p21、p27、Fasl及Bim表达水平,与对照组比较差异明显(P<0.05、0.01);与对照组比较,不同浓度连翘苷可明显抑制肾癌细胞迁移与侵袭,减少MMP-2、MMP-9合成(P<0.05、0.01);同时连翘苷能明显抑制PI3K、Akt、FOXO3a磷酸化(P<0.05、0.01),且呈浓度依赖性。结论连翘苷可通过PI3K/Akt信号通路调控786-0细胞凋亡与细胞周期、抑制肾癌细胞生长;同时连翘苷经PI3K/Akt通路可有效削弱肾癌细胞迁移与侵袭能力。 展开更多
关键词 连翘苷 肾细胞癌 PI3K AKT FOXO3A
六味地黄颗粒对肾阴虚高龄不孕患者IVF结局及卵巢颗粒细胞的影响
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作者 吴海萃 张建伟 +3 位作者 冯帅 薛明玥 张楠 侯森 《山东中医杂志》 2019年第6期523-529,共7页
目的:观察六味地黄颗粒对肾阴虚不孕患者体外受精(IVF)结局及卵巢颗粒细胞PI3K、pAkt和FoxO3a的影响。方法:66例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的高龄(≥35岁)肾阴虚不孕患者,随机分为治疗组和安慰剂组,每组33例。两组患者除接受相... 目的:观察六味地黄颗粒对肾阴虚不孕患者体外受精(IVF)结局及卵巢颗粒细胞PI3K、pAkt和FoxO3a的影响。方法:66例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的高龄(≥35岁)肾阴虚不孕患者,随机分为治疗组和安慰剂组,每组33例。两组患者除接受相同的促排卵方案治疗外,治疗组与安慰剂组分别在IVF前接受六味地黄颗粒或安慰剂治疗3个月经周期,评估肾阴虚证候积分的变化,并观察获卵数、2PN受精率、成胚率和临床妊娠率。在取卵日收集卵泡液,提取颗粒细胞,观察颗粒细胞凋亡率,并通过qRT-PCR和Western Blot技术检测颗粒细胞中的PI3K、pAkt和FoxO3a的mRNA及蛋白表达水平。结果:治疗组肾阴虚证候评分从(14.82±1.16)分下降至(7.87±1.32)分,而安慰剂组变化不明显,两组评分比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者卵巢颗粒细胞凋亡率与安慰剂组相比,明显降低(P<0.05)。治疗组的成胚率和临床妊娠率(57.35%和46.63%)均优于安慰剂组(48.48%和24.24%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组之间的获卵数没有差异。与安慰剂组相比,2PN受精率变化没有统计学意义。与安慰剂组相比,治疗组PI3K和pAkt的mRNA和蛋白表达水平明显升高,FoxO3a表达下降。结论:对于接受IVF-ET的高龄肾阴虚证不孕患者,补肾中药可以缓解临床肾阴虚症状,提高成胚率及临床妊娠率,其机制可能与通过调节颗粒细胞中PI3K、pAkt和FoxO3a的表达来改善卵母细胞发育微环境、抑制颗粒细胞凋亡及提高卵母细胞质量有关。 展开更多
关键词 六味地黄颗粒 高龄不孕 肾阴虚 PI3K PAKT FOXO3A 体外受精-胚胎移植
消肿止痛合剂对大鼠膝骨性关节炎软骨中PI3K/Akt信号通路影响的实验研究
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作者 敬胜伟 刘涛 +3 位作者 宋渊 李莉 皱文文 刘盘来 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期40-42,共3页
目的观察消肿止痛合剂对大鼠膝骨性关节炎软骨中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白和丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)蛋白、天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达的影响及其作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为4组:观察组(消肿止痛合剂组)、对照组(... 目的观察消肿止痛合剂对大鼠膝骨性关节炎软骨中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白和丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)蛋白、天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达的影响及其作用机制。方法将80只SD大鼠随机分为4组:观察组(消肿止痛合剂组)、对照组(硫酸氨基葡萄糖片组)、模型组、假手术组,每组20只。除假手术外,其余三组通过改良Hulth法行膝骨关节炎造模。药物连续干预8周后,取各组大鼠膝关节软骨,采用ELISA方法检测血清中TNF-α、IL-1β、iNOS水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组软骨中PI3K、AKT、Caspase-3mRNA的表达情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测各组软骨细胞中PI3K、AKT、Caspase-3蛋白的表达。结果消肿止痛合剂可显著减低KOA大鼠血清TNF-α、IL-1β、iNOS水平,显著下调PI3K、AKT、Caspase-3基因及蛋白表达。结论消肿止痛合剂对KOA关节软骨损伤的保护可能与PI3K/AKT信号通路相关。 展开更多
关键词 消肿止痛合剂 膝骨性关节炎 PI3K AKT Caspase-3
基于PI3K/Akt信号通路探讨抗纤抑癌方干预肝癌前病变的作用机制 预览
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作者 李莹 叶永安 +2 位作者 李志国 张露丹 杨先照 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2019年第3期240-243,I0004共5页
目的:研究抗纤抑癌方对肝癌前病变大鼠PI3K/Akt信号通路的影响。方法:雄性Wistar大鼠85只,随机分为正常组、模型组、抗纤抑癌低、中、高剂量组及鳖甲软肝组。采用二乙基亚硝胺腹腔注射制备肝癌前病变模型,抗纤抑癌方进行干预,复方鳖甲... 目的:研究抗纤抑癌方对肝癌前病变大鼠PI3K/Akt信号通路的影响。方法:雄性Wistar大鼠85只,随机分为正常组、模型组、抗纤抑癌低、中、高剂量组及鳖甲软肝组。采用二乙基亚硝胺腹腔注射制备肝癌前病变模型,抗纤抑癌方进行干预,复方鳖甲软肝片作为对照;采用免疫组化法检测GST-Pi的表达,实时荧光定量PCR及Western blot法检测PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达。结果:与模型组相比,抗纤抑癌高剂量组GST-Pi阳性表达面积明显减少,染色减轻,MOD值显著降低(P<0.05);与模型组相比,抗纤抑癌低、中、高剂量组及鳖甲软肝组PI3K、Akt mRNA的表达均显著降低(P<0.01),抗纤抑癌低、中、高剂量组PI3K、p-PI3K蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05),抗纤抑癌中、高剂量组p-Akt蛋白表达显著降低(P<0.01);与鳖甲软肝组相比,抗纤抑癌高剂量组PI3K mRNA及p-PI3K蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论:抗纤抑癌方可通过调控PI3K/Akt信号抑制肝癌前病变。 展开更多
关键词 抗纤抑癌方 肝癌前病变 PI3K AKT GST-PI
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黄龙汤联合美罗培南对CLP模型大鼠PI3K/Akt/NF-κB信号通路调控作用
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作者 赵妍 姜树民 +1 位作者 陈岩 隋吉峰 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第7期1754-1758,I0030,I0031共7页
目的:探讨中药黄龙汤对CLP大鼠调控PI3K/Akt/NF-κB通路途径的抗炎作用机制。方法:SD大鼠70只,采用盲肠结扎穿孔术复制CPL大鼠模型,分别给予美罗培南、黄龙汤+美罗培南干预3 d。采用ELISA法检测各组大鼠血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-... 目的:探讨中药黄龙汤对CLP大鼠调控PI3K/Akt/NF-κB通路途径的抗炎作用机制。方法:SD大鼠70只,采用盲肠结扎穿孔术复制CPL大鼠模型,分别给予美罗培南、黄龙汤+美罗培南干预3 d。采用ELISA法检测各组大鼠血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8含量;Western-blot法检测回肠组织中PI3K、Akt、NF-κB表达水平。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8含量显著升高,回肠组织中TLR4、Myd88、NF-κB表达水平显著上调;与模型对照组比较,西药组和黄龙汤联合西药组大鼠血清IL-1β、TNF-α含量显著降低,回肠组织中PI3K、Akt、NF-κB表达水平显著下调;与西药组比较,黄龙汤联合西药组大鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8含量及回肠组织中PI3K、Akt、NF-κB表达水平显著下调,有统计学意义。结论:黄龙汤联合西药美罗培南对CPL模型大鼠具有抗炎作用,能够显著抑制血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8的表达,该作用可能是通过调控回肠组织中PI3K/Akt/NF-κB信号通路活化实现的。 展开更多
关键词 盲肠结扎穿孔 黄龙汤 PI3K Akt NF-ΚB 美罗培南
MicroRNA-34a在脂多糖诱导急性呼吸窘迫综合征中的表达及作用机制
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作者 陈怡 周发春 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期752-758,共7页
目的:探讨microRNA-34a(miR-34a)在脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)中表达的意义及作用机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为5组:对照组,腹腔注射10 mg/kg LPS 3、6、1... 目的:探讨microRNA-34a(miR-34a)在脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)中表达的意义及作用机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为5组:对照组,腹腔注射10 mg/kg LPS 3、6、12、24 h组,人肺泡Ⅱ型上皮细胞株(A549)分为5组:对照组,10μg/mL LPS刺激3、6、12、24 h组。在A549细胞中转染miR-34a inhibitor,24 h后加入10μg/mL LPS,再刺激24 h。测定肺湿/干重值,观察肺组织病理学改变,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测肺组织及细胞miR-34a表达,ELISA检测肺组织及细胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)浓度,Western blot检测细胞磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的蛋白表达。结果:实验组肺湿/干重值较对照组明显升高。苏木素-伊红(HE)染色显示实验组肺组织肺泡间隔增厚,肺泡腔内有粉红色水肿液,肺间质炎性细胞浸润及出血。miR-34a表达在实验组的各个时间点较对照组升高,TNF-α、IL-1β浓度在实验组的各个时间点较对照组升高,miR-34a表达与TNF-α、IL-1β浓度呈正相关。PI3K、p-AKT蛋白表达在实验组的各个时间点较对照组升高。转染miR-34a inhibitor能够明显下调LPS作用于A549细胞后TNF-α、IL-1β浓度及PI3K、p-AKT蛋白表达。结论:miR-34a可能通过抑制PI3K/AKT通路减轻LPS诱导的肺组织损伤,为ARDS的治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 microRNA-34a 急性呼吸窘迫综合征 脂多糖 PI3K AKT
HBx过表达对肝癌HepG2细胞AKT、PI3K表达的影响 预览 被引量:1
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作者 张斌 丁慎华 +2 位作者 徐春江 许智玲 朱薇珊 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第2期159-162,共4页
目的研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对肝癌细胞增殖的影响,并探索HBx过表达对肝癌细胞PI3K/AKT表达的影响。方法构建过表达HBx的肝癌HepG2细胞,测定其荧光素酶的表达,采用MTT法研究肝癌细胞增殖情况,采用Westernblotting法对各组细胞PI3K及... 目的研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对肝癌细胞增殖的影响,并探索HBx过表达对肝癌细胞PI3K/AKT表达的影响。方法构建过表达HBx的肝癌HepG2细胞,测定其荧光素酶的表达,采用MTT法研究肝癌细胞增殖情况,采用Westernblotting法对各组细胞PI3K及AKT的表达情况进行研究。结果成功构建了过表达HBx的肝癌HepG2细胞,HBx有促进肝癌细胞增殖的作用,进一步研究发现,过表达HBx有上调肝癌细胞PI3K及AKT表达的作用。结论HBx有促进肝癌细胞增殖作用,其机制可能与上调PI3K/AKT表达有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞 PI3K AKT HBX 机制
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Btk/NF-κB信号通路在视神经脊髓炎谱系疾病中变化及意义 预览
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作者 王炜 王素欢 +4 位作者 李世平 侯慧清 杨静 吴冰洁 董梅 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2019年第8期692-696,共5页
目的检测NMOSD急性期患者单个核细胞(PBMCs)的BTK/NF-κB信号通路中BTK、NF-κB、PI3K、IKK mRNA水平,探讨BTK、NF-κB、PI3K、IKK在NMOSD患者急性期变化及可能作用;探讨NMOSD患者血清AQP4-Ab阳性与否、抗体水平与脊髓MRI受累节段数的... 目的检测NMOSD急性期患者单个核细胞(PBMCs)的BTK/NF-κB信号通路中BTK、NF-κB、PI3K、IKK mRNA水平,探讨BTK、NF-κB、PI3K、IKK在NMOSD患者急性期变化及可能作用;探讨NMOSD患者血清AQP4-Ab阳性与否、抗体水平与脊髓MRI受累节段数的相关性。方法选取2018年1月-2019年1月就诊于河北医科大学第二医院神经内科NMOSD急性期患者33例为实验组,性别、年龄相匹配的33例健康人为对照组。入组的NMOSD患者进行EDSS评分、脊髓MRI检查、血AQP4-Ab测定。留取外周血,分离PBMCs,采用RT-PCR法检测PBMCs中BTK、NF-κB、PI3K、IKK水平,将其与健康人比较。结果 NMOSD组BTK/NF-κB信号通路中Btk、NF-κB、PI3K、IKK mRNA水平均较对照组明显升高,差异有统计学意义;NMOSD急性期患者AQP4-Ab阳性者较AQP4-Ab阴性者脊髓受累节段数多,差异有统计学意义;AQP4-Ab抗体滴度与脊髓受累节段数无线性相关关系。结论BTK/NF-κB信号通路中4项激酶在NMOSD急性期增高,在调控B细胞分化时异常激活,可能参与了疾病发生;NMOSD患者急性期脊髓受累节段数可能与血AQP4-Ab阳性相关,滴度并不能预测脊髓受累节段数。 展开更多
关键词 视神经脊髓炎谱系疾病 BTK NF-κB PI3K IKK AQP4-Ab
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PI3K和Akt在心血管疾病中的作用 预览
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作者 李贞燕 陈敏 +3 位作者 戴日蕾 朱文婷 朱坤 曹春梅 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第8期1200-1204,共5页
PI3K-Akt信号通路在细胞增殖和代谢中发挥了重要作用,并且PI3K-Akt信号通路在心脏保护机制——缺血预适应和缺血后适应中发挥重要作用。本文通过分析PI3K分子和Akt分子以及PI3K-Akt信号通路对心脏和血管生理性和病理性的影响,旨在了解... PI3K-Akt信号通路在细胞增殖和代谢中发挥了重要作用,并且PI3K-Akt信号通路在心脏保护机制——缺血预适应和缺血后适应中发挥重要作用。本文通过分析PI3K分子和Akt分子以及PI3K-Akt信号通路对心脏和血管生理性和病理性的影响,旨在了解其在心血管疾病中的作用。 展开更多
关键词 PI3K AKT 急性心肌梗死 心血管疾病
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叶黄素通过PI3K/AKT信号通路调控胃癌干细胞增殖与凋亡 预览
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作者 杜锐玲 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4593-4598,共6页
背景:叶黄素可抑制多种肿瘤细胞的增殖并促进凋亡,但其对胃癌干细胞增殖与凋亡的影响及机制尚未见相关报道。目的:观察叶黄素对胃癌干细胞增殖与凋亡的影响,探讨其可能机制。方法:体外培养人胃癌细胞株SGC-7901获得胃癌干细胞,流式细胞... 背景:叶黄素可抑制多种肿瘤细胞的增殖并促进凋亡,但其对胃癌干细胞增殖与凋亡的影响及机制尚未见相关报道。目的:观察叶黄素对胃癌干细胞增殖与凋亡的影响,探讨其可能机制。方法:体外培养人胃癌细胞株SGC-7901获得胃癌干细胞,流式细胞术鉴定细胞表面标志物CD44、CD24。用0,20,40,80,160mmol/L叶黄素分别处理人胃癌干细胞24,48,72h,CCK-8法检测细胞增殖活性,确定最佳作用浓度和作用时间。然后,将人胃癌干细胞分为4组:对照组、80mmol/L叶黄素组、胰岛素样生长因子1组、叶黄素+胰岛素样生长因子1组,分别干预细胞48h,流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR检测PI3K和Akt mRNA的表达,Western blot检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达。结果与结论:①体外培养人胃癌SGC7901细胞获得的胃癌干细胞表达CD44和CD24;②80和160mmol/L叶黄素作用48h对人胃癌干细胞增殖活力的抑制作用优于其他作用浓度和时间(P<0.05),叶黄素作用48h的IC50为91.58mmol/L,选取80mmol/L叶黄素作用48h进行后续实验;③胰岛素样生长因子1组细胞增殖活力高于其他3组,叶黄素组细胞增殖活力低于其他3组,差异有显著性意义(P<0.05);④叶黄素组细胞凋亡率高于其他3组,胰岛素样生长因子1组细胞凋亡率低于其他3组,差异有显著性意义(P<0.05);⑤叶黄素组PI3K和Akt mRNA的表达低于其他3组,胰岛素样生长因子1组PI3K和Akt mRNA的表达高于其他3组,差异有显著性意义(P<0.05);⑥叶黄素组p-PI3K和p-Akt蛋白的表达低于对照组和胰岛素样生长因子1组,胰岛素样生长因子1组p-PI3K和p-Akt蛋白表达高于其他3组,差异有显著性意义(P<0.05);⑦结果提示,叶黄素通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制人胃癌干细胞增殖和诱导凋亡。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 胃癌干细胞 叶黄素 信号通路 PI3K AKT 细胞增殖 细胞凋亡
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脉冲电磁场促进成骨细胞成熟分化依赖于初级纤毛-PI3K/AKT途径 预览
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作者 任茜 周建 +1 位作者 王鸣刚 陈克明 《北京大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期245-251,共7页
目的:研究脉冲电磁场(pulse electromagnetic fields, PEMF)促进大鼠成骨细胞成熟分化是否与初级纤毛和PI3K/AKT途径相关,探讨PEMF促进骨形成的作用机制。方法:用酶解法获取新生SD大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts, ROB), 50... 目的:研究脉冲电磁场(pulse electromagnetic fields, PEMF)促进大鼠成骨细胞成熟分化是否与初级纤毛和PI3K/AKT途径相关,探讨PEMF促进骨形成的作用机制。方法:用酶解法获取新生SD大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts, ROB), 50 Hz、0.6 mT PEMF处理0、0.5、1、1.5和2 h后检测磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase, PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)蛋白表达量及初级纤毛长度和发生率的变化情况;用LY294002阻断PI3K/AKT信号途径,观察PEMF促进ROB成骨性分化是否受到影响;以RNAi法干扰IFT88的基因表达以抑制初级纤毛发生,观察PEMF激活的PI3K/AKT信号途径及ROB的成骨性分化是否受到影响。成骨性分化指标包括碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性,real-time PCR法和Western blot法检测的成骨性相关基因BMP-2、COL-1和OSX的基因表达量,以及钙化结节数量等。结果:经PEMF处理0、0.5、1、1.5、2 h后,ROB的PI3K、AKT蛋白表达量升高( P <0.01),初级纤毛变长;其中PI3K在0.5 h时蛋白表达量达到最高,随着PEMF处理时间增加,蛋白表达量降低;AKT在0.5 h和1.5 h时蛋白表达量较高。用PI3K阻断剂LY294002阻断PI3K/AKT信号途径后,PEMF不再能提高成骨细胞中ALP 活性和成骨性相关基因BMP-2、COL-1、OSX的基因表达量,但在阻断前PEMF能增加ROB中ALP活性和成骨性相关基因的表达;RNAi干扰初级纤毛发生后,PEMF不再能增加PI3K的蛋白表达量,说明初级纤毛干扰后,PEMF不能激活PI3K/AKT信号途径;其次,PEMF提高ALP活性的作用消失,也不能提高BMP-2、COL-1和OSX的基因表达量,其增加ROB钙化结节形成能力的作用也消失,说明初级纤毛干扰后,PEMF促进成骨细胞成熟矿化的能力消失。结论: PEMF通过成骨细胞表面的初级纤毛激活了PI3K/AKT信号途径,进而发挥了骨形成活性的促进作用。 展开更多
关键词 脉冲电磁场 成骨细胞 RNA干扰 PI3K
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Epac信号分子在纤维化疾病中作用的研究进展 预览
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作者 杜佳佳 孙妩弋 +2 位作者 彭文婷 孙家昌 魏伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期756-760,共5页
由cAMP激活的交换蛋白分子(exchange protein activated by cAMP, Epac)是近年来新发现的鸟嘌呤核苷酸交换因子,参与一系列cAMP介导的信号通路。纤维化疾病是临床上常见的一类疾病,是在正常生理学(如衰老)或不同致病因素持续刺激下,使... 由cAMP激活的交换蛋白分子(exchange protein activated by cAMP, Epac)是近年来新发现的鸟嘌呤核苷酸交换因子,参与一系列cAMP介导的信号通路。纤维化疾病是临床上常见的一类疾病,是在正常生理学(如衰老)或不同致病因素持续刺激下,使得细胞外基质过度沉积的结果。有研究表明,Epac在纤维化疾病中发挥重要作用,因此,该文对Epac在纤维化疾病中的作用进行综述,以促进对于Epac相关机制及药物的研究与开发。 展开更多
关键词 CAMP Epac RAP 纤维化 PI3K MAPK
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PI3K及C-Raf的表达与胎儿生长受限关系的研究 预览
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作者 林小琦 梁卫桃 莫丽芳 《临床医学工程》 2019年第8期1055-1056,共2页
目的探讨胎儿生长受限(FGR)孕妇血清中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(C-Raf)的变化与FGR的关系。方法选取2016年8月至2017年7月在东莞市第三人民医院分娩的80例FGR孕妇为FGR组,同期80例健康孕妇为对照组,采用酶联免疫... 目的探讨胎儿生长受限(FGR)孕妇血清中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(C-Raf)的变化与FGR的关系。方法选取2016年8月至2017年7月在东莞市第三人民医院分娩的80例FGR孕妇为FGR组,同期80例健康孕妇为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测孕妇的血清PI3K和C-Raf水平。结果单因素分析结果显示,FGR组的胎儿体质量及总蛋白含量低于对照组,血清PI3K、C-Raf水平均显著低于对照组(P<0.05);多因素分析结果显示,C-Raf(OR=0.990,P=0.000)、总蛋白含量(OR=0.785,P=0.012)是FGR的独立危险因素。结论C-Raf表达的改变可能会导致FGR的发生,C-Raf可作为血清标志物预测FGR的发生。 展开更多
关键词 胎儿生长受限 PI3K C-RAF
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乳腺癌中KRT1和PI3K的表达及其临床意义 预览
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作者 陈磊 王弦 +1 位作者 黄山 吴强 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期826-828,共3页
目的探讨KRT1和PI3K在乳腺癌组织中的表达和意义,分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化PV6000法检测50例乳腺癌及其癌旁正常组织中KRT1及PI3K的表达,分析两者的表达与临床病理特征及其相关性。结果KRT1及PI3K在乳... 目的探讨KRT1和PI3K在乳腺癌组织中的表达和意义,分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化PV6000法检测50例乳腺癌及其癌旁正常组织中KRT1及PI3K的表达,分析两者的表达与临床病理特征及其相关性。结果KRT1及PI3K在乳腺癌组织中阳性率明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);两者的表达呈负相关(r=-0.343,P<0.05);KRT1的表达与乳腺癌患者ER、PR状态、术后2年是否复发有关;PI3K的表达与乳腺癌患者ER状态、术后2年是否复发有关(P均<0.05)。结论乳腺癌中KRT1和PI3K的异常表达共同影响患者的预后,有望成为乳腺癌的潜在生物学标志物。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 KRT1 PI3K 激素受体 PI3K/AKT信号通路
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成纤维细胞生长因子21对缺氧复氧心肌细胞的保护作用及机制研究 预览
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作者 许卫攀 吴勇波 +2 位作者 张凯 陈志强 蔡振璇 《西部医学》 2019年第3期343-347,352共6页
目的探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)对缺氧复氧(H/R)心肌细胞的保护作用及对PI3K/AKT通路的影响。方法重组腺病毒载体Ad-FGF21诱导原代心肌细胞过表达FGF21。腺病毒转染心肌细胞后构建H/R损伤模型(3h缺氧联合3h复氧)。实验分为对照组(... 目的探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)对缺氧复氧(H/R)心肌细胞的保护作用及对PI3K/AKT通路的影响。方法重组腺病毒载体Ad-FGF21诱导原代心肌细胞过表达FGF21。腺病毒转染心肌细胞后构建H/R损伤模型(3h缺氧联合3h复氧)。实验分为对照组(Con组)、H/R组、H/R+Ad-GFP组、H/R+Ad-FGF21组4组。心肌细胞存活率评估细胞损伤程度;SOD/MDA检测联合DHE荧光染色评估氧化应激反应(ROS);流式细胞术评估细胞凋亡;Westernblot检测相关蛋白水平。在机制探讨实验中给予PI3K/AKT抑制剂(LY294002)进行干预。结果与Con组相比,H/R损伤后FGF21蛋白表达显著下调,并伴随心肌细胞活性降低、ROS与凋亡反应激活。腺病毒介导的心肌细胞过表达FGF21能够明显抑制H/R损伤,表现为细胞活力、ROS与凋亡反应均有不同程度改善。FGF21心肌细胞过表达能够增加PI3K/AKT磷酸化水平,而抑制PI3K/AKT通路后FGF21过表达介导的细胞保护功能被逆转。结论FGF21主要通过PI3K/AKT依赖性途径改善心肌细胞H/R损伤。 展开更多
关键词 FGF21 缺氧复氧 凋亡 氧化应激 PI3K AKT
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健脾解毒中药对肝癌HepG2细胞增殖及PI3K、AKT表达的影响 预览
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作者 张斌 徐春江 +3 位作者 查芳芳 丁慎华 朱薇珊 钱雪梅 《中医药学报》 CAS 2019年第3期23-26,共4页
目的:研究肝癌细胞PI3K/AKT表达机制及健脾解毒中药对其干预作用。方法:培养肝癌HepG2细胞,使用不同剂量浓度的健脾解毒中药药物血清对其进行干预,采用MTT法及流式细胞仪研究细胞增殖及凋亡情况,采用Western blot法对各组细胞PI3K及AKT... 目的:研究肝癌细胞PI3K/AKT表达机制及健脾解毒中药对其干预作用。方法:培养肝癌HepG2细胞,使用不同剂量浓度的健脾解毒中药药物血清对其进行干预,采用MTT法及流式细胞仪研究细胞增殖及凋亡情况,采用Western blot法对各组细胞PI3K及AKT的蛋白表达情况进行比较。结果:不同剂量浓度组中药药物血清对肝癌细胞干预后均有抑制肝癌细胞增殖及促进凋亡的作用,尤其是中高剂量组更加明显。进一步研究发现,中药药物血清干预后有下调肝癌HepG2细胞PI3K及AKT的表达作用。结论:PI3K/AKT表达上调与肝癌发病有关,同时健脾解毒中药有抑制肝癌细胞增殖作用,部分与下调PI3K/AKT表达有关,对其机制值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 肝癌细胞 PI3K AKT 健脾解毒中药 机制
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成纤维细胞生长因子2通过AKT和ERK信号促进肾癌细胞增殖 预览
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作者 何岩 刘沛 +3 位作者 韩广业 李泽宇 吴春磊 李建昌 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2019年第3期227-232,共6页
目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF2)对肾癌细胞增殖的影响。方法 2017年3月至2018年4月搜集肾癌组织及癌旁组织,并以肾癌细胞系ACHN和786-O为研究对象,分为两组不同处理:对照组(转染si-NC)和实验组(转染si-FGF2)。实时荧光定量聚合酶链... 目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF2)对肾癌细胞增殖的影响。方法 2017年3月至2018年4月搜集肾癌组织及癌旁组织,并以肾癌细胞系ACHN和786-O为研究对象,分为两组不同处理:对照组(转染si-NC)和实验组(转染si-FGF2)。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测肾癌组织、肾癌细胞系及各不同处理组细胞中FGF2mRNA的表达情况;细胞增殖MTS实验检测转染后各组细胞的增殖能力;细胞集落形成实验检测各组中单个细胞克隆增殖情况;蛋白质印迹法检测FGF2蛋白、AKT蛋白、p-AKT蛋白、ERK蛋白和p-ERK蛋白的表达改变情况。结果 qPCR结果显示,与癌旁组织相比较,肾癌组织中FGF2信使RNA表达明显升高,两组分别为0.960±0.139和1.872±0.463,同时免疫组化结果表明肾癌组织中FGF2呈较高表达;与正常肾小管上皮细胞系HK-2细胞相比较,人肾癌细胞系ACHN、786-O、Caki-1细胞中FGF2mRNA及蛋白的表达明显升高。细胞增殖实验结果显示,实验组在第2天、3天、4天时细胞的存活情况(用吸光度A表示)ACHN分别为0.466±0.027、0.636±0.058、0.740±0.062,786-O分别为0.457±0.025、0.616±0.057、0.792±0.051,与对照组相比,实验组中细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。细胞集落形成实验结果显示,在对照组和实验组中的集落形成数目ACHN分别为0.348±0.034、0.101±0.009,786-O细胞分别为0.311±0.038、0.093±0.001,实验组细胞集落形成数目均较对照组少,差异有统计学意义(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示:实验组和对照组中FGF2蛋白的相对表达分别为0.21±0.05和0.08±0.02,AKT蛋白的相对表达分别为0.38±0.09和0.42±0.12,p-AKT蛋白的相对表达分别为0.09±0.02和0.15±0.04,ERK蛋白的相对表达分别为0.38±0.06和0.48±0.08,p-ERK蛋白的相对表达分别为0.08±0.02和0.05±0.01,两组差异均有显著性统计学意义(P<0.05)。结论 FGF2可能通过PI3K-AKT信号通路调节肾癌细胞增殖。 展开更多
关键词 FGF2 肾癌 PI3K AKT 增殖
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