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中华鳖GnRH1基因cDNA克隆及表达特征 预览
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作者 申慧 张英萍 +4 位作者 王利华 沙航 王咏星 邹桂伟 梁宏伟 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第4期16-21,共6页
为了解GnRH基因在中华鳖(Pelodiscus sinensis)性腺和胚胎发育过程中的表达特征,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从中华鳖全脑中获得与生长生殖调控密切相关的GnRH1基因全长cDNA,并运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测GnRH1在成鳖不... 为了解GnRH基因在中华鳖(Pelodiscus sinensis)性腺和胚胎发育过程中的表达特征,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从中华鳖全脑中获得与生长生殖调控密切相关的GnRH1基因全长cDNA,并运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测GnRH1在成鳖不同组织和胚胎发育时期的表达水平。结果显示:中华鳖GnRH1基因cDNA全长546 bp,其中5′非编码区(5′UTR)99 bp,3′非编码区(3′UTR)168 bp,开放阅读框(ORF)279 bp,编码92个氨基酸,分子质量为10.23 ku,理论等电点pI为5.65,具有N端信号肽(1~23 aa)、核心十肽区域(24~33 aa)、断裂位点GKR(34~36 aa)及相关肽区域(37~92 aa),符合GnRH蛋白典型结构特征。系统进化树结果显示,中华鳖GnRH1基因和绿海龟(Chelonia mydas)、墨西哥箱龟(Terrapene carolina mexicana)及西部锦龟(Chrysemys picta bellii)GnRH1基因聚为一支。qRT-PCR结果表明,GnRH1基因在中华鳖雌雄个体的8个组织中均有表达,在脑和性腺组织中高表达,且具有性别差异,雄性中华鳖中的表达显著高于雌性(P<0.05);在10个胚胎发育时期均表达,且随发育时间的后移,表达量显著增加,在第16期达到峰值。GnRH1基因可能在中华鳖生长及性腺分化中具有重要作用。 展开更多
关键词 中华鳖(Pelodiscus sinensis) 促性腺激素释放激素 基因克隆 基因表达
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中华鳖NR5a2基因的克隆与表达分析 预览
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作者 张超 马晓 +4 位作者 刘倩 吴利敏 刘慧芬 李学军 王璐明 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第4期29-34,共6页
为了解NR5a2在中华鳖(Pelodiscus sinensis)性腺分化过程中的作用,通过RACE技术克隆获得中华鳖NR5a2 cDNA。结果显示:该基因序列全长为2 674 bp,开放阅读框为1 608 bp,编码535个氨基酸,5′非编码区长度为40 bp,3′非编码区长度为1 026 b... 为了解NR5a2在中华鳖(Pelodiscus sinensis)性腺分化过程中的作用,通过RACE技术克隆获得中华鳖NR5a2 cDNA。结果显示:该基因序列全长为2 674 bp,开放阅读框为1 608 bp,编码535个氨基酸,5′非编码区长度为40 bp,3′非编码区长度为1 026 bp。生物信息学分析表明该基因编码的蛋白质分子质量为60.5 ku,等电点为8.57,具有保守的ZnF-C4结构域和HOLI结构域。氨基酸多重序列比对分析表明中华鳖NR5a2基因与西部锦龟(Chrysemys picta bellii)的相似性最高,其次是原鸡(Gallus gallus)。系统进化分析表明中华鳖NR5a2与西部锦龟的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明NR5a2在中华鳖不同组织中均有表达,且卵巢组织中的表达量显著高于精巢组织。31.5℃孵化条件下,不同发育时期的中华鳖胚胎组织中发现NR5a2基因在17期时表达量达到最高,随后显著下降。结果表明NR5a2可能参与中华鳖的性别分化。 展开更多
关键词 中华鳖(Pelodiscus sinensis) NR5a2 性腺分化 基因克隆 组织表达
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磁场和基质对中华鳖孵化性比和孵化率的影响 预览
3
作者 刘飞 李戈锐 +6 位作者 张家瑜 徐倩 杨福忠 李明 史习刚 谢春华 席在星 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第3期96-101,共6页
采用铁氧永磁体静磁场、矿物基质处理,初步探讨磁场效应对中华鳖孵化率和雌性占比的影响。孵化于夏季室内自然条件下的实验结果显示,磁感应强度为1.2mT的静磁场(N极或S极)处理导致中华鳖的孵化率为49.8%~51.0%,显著低于对照组的80.1%~81... 采用铁氧永磁体静磁场、矿物基质处理,初步探讨磁场效应对中华鳖孵化率和雌性占比的影响。孵化于夏季室内自然条件下的实验结果显示,磁感应强度为1.2mT的静磁场(N极或S极)处理导致中华鳖的孵化率为49.8%~51.0%,显著低于对照组的80.1%~81.5%;孵化后雌性占比为68.3%~69.5%,显著高于对照组的56.8%~58.5%,呈现雌性化诱导现象。蛭石基质中孵化率为90.4%,高于土壤对照组的82.1%;但是其雌性占比为48.2%,低于土壤对照组的56.6%。通过性腺外部形态和组织切片特征进行雌雄鉴定,解剖后雌性个体有明显白色线状输卵管,而雄性输精管不可见;组织切片中,卵巢中可见发育成型的初级卵泡,精巢中曲细精管处于形成早期。结果表明,静磁场处理可出现中华鳖孵化后雌性化诱导现象,但孵化率降低;蛭石基质中孵化可以提高中华鳖孵化率,土壤介质中孵化有更高的雌性占比。 展开更多
关键词 中华鳖(Pelodiscus sinensis) 孵化率 孵化性比 磁场 基质 雌性化
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复方中草药对中华鳖营养免疫及抗氧化功能的影响 预览
4
作者 吴斌 方春林 +4 位作者 张志红 贺刚 王伟萍 王庆萍 邓宏奎 《中国饲料》 北大核心 2019年第17期89-92,共4页
为研究复方中草药对中华鳖营养免疫及抗氧化功能的影响,试验在水温27~29℃时,将体质量25~35g的中华鳖(Pelodiscus sinensis)幼鳖饲养在池底铺10cm细沙的1.0m×0.8m×0.8m水泥池中,分别投喂添加0%(对照组)、1%、3%和5%复方中草药... 为研究复方中草药对中华鳖营养免疫及抗氧化功能的影响,试验在水温27~29℃时,将体质量25~35g的中华鳖(Pelodiscus sinensis)幼鳖饲养在池底铺10cm细沙的1.0m×0.8m×0.8m水泥池中,分别投喂添加0%(对照组)、1%、3%和5%复方中草药(芹菜籽粉∶葡萄籽粉∶薏仁粉=1:1:1)的饲料。养殖60d后主要测定幼鳖血液中的抗氧化指标。结果表明:1%、3%、5%中草药组血清谷胱甘肽活性(GSH-Px)均显著高于对照组,剂量效应规律较为明显。5%中草药组血清总抗氧化能力(T-AOC)显著高于对照组。1%中草药组血清过氧化氢酶(CAT)活性显著高于对照组,剂量效应规律不明显。1%、3%和5%中草药组血清丙二醛(MDA)含量均显著低于对照组。3%和5%中草药组幼鳖血清尿素氮(BUN)水平显著低于对照组,表明中草药可提高中华鳖幼鳖蛋白质利用效率。综上所述,从中华鳖幼鳖血清T-AOC活性、MDA含量以及BUN水平等指标来看,结合经济性原则,该复方中草药添加量以3%较为适宜。另外,该复方中草药对于中华鳖幼鳖整个机体的免疫状态的影响规律不明显,其改善中华鳖抵抗力的内在机制还有待深入研究。 展开更多
关键词 复方中草药 中华鳖 营养 免疫 抗氧化
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中华鳖boule基因在生殖细胞中的表达分析
5
作者 刘晓莉 唐舟凯 +5 位作者 张飘逸 朱新平 储张杰 李伟 吴栩灵 徐红艳 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期66-75,共10页
boule基因为DAZ基因家族成员之一,是动物生殖细胞特异表达基因。在哺乳动物中,boule基因的缺失会引起精子生成障碍而导致雄性不育。在无脊椎动物秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)中,boule基因同源物的缺失会引起其卵子发生障碍而导致... boule基因为DAZ基因家族成员之一,是动物生殖细胞特异表达基因。在哺乳动物中,boule基因的缺失会引起精子生成障碍而导致雄性不育。在无脊椎动物秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)中,boule基因同源物的缺失会引起其卵子发生障碍而导致雌性不育。龟鳖动物是最古老的爬行类,是从无羊膜卵到羊膜卵动物飞跃的过渡物种。相比于哺乳类及一些无脊椎动物,目前关于龟鳖动物生殖细胞发育模式的研究还非常有限。因此,本文以中华鳖(Pelodiscus sinensis)为研究对象,以期揭示boule基因对龟鳖动物生殖细胞发育分化的调控作用。首先,利用特异引物克隆获得中华鳖boule基因的cDNA序列,共1 005 bp,其中,3′端非编码区57 bp,开放阅读框948 bp,共编码315个氨基酸。氨基酸序列多重比对分析显示,中华鳖与绿海龟(Chelonia mydas)同源性最高,达92%,与小鼠(Mus musculus)的同源性达83%,与果蝇(Drosophila melanogaster)的同源性达53%,与青鳉(Oryzias latipes)的同源性达42%。反转录实时定量PCR(RT-qPCR)分析结果显示,中华鳖boulem RNA主要在性腺组织精巢和卵巢中表达,而在其他体细胞组织中几乎检测不到表达。原位杂交结果显示,中华鳖boule m RNA在两性生殖细胞中特异表达,且在不同分化时期的生殖细胞中呈动态表达。在精巢中,boule m RNA在初级精母细胞中表达最强,在精原细胞和次级精母细胞中表达较弱,在精子细胞和精子中难以检测到表达信号;在卵巢中,boule mRNA在初级卵母细胞中表达信号最强且信号在初级卵母细胞胞质中均匀分布,生殖细胞发育进入卵母细胞生长期后,信号开始聚集在核周胞质,随着卵母细胞的成熟,信号逐渐变弱。本研究结果表明,boule基因可能在中华鳖两性生殖细胞的减数分裂过程中均具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 中华鳖 boule 生殖细胞 精子发生 卵子发生
中华鳖dct基因克隆及表达分析 预览
6
作者 刘文婷 许鹏 +2 位作者 张娜 管越强 张耀红 《河北大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第6期619-628,共10页
为了阐明中华鳖酪氨酸酶家族成员dct基因的结构与表达特征,根据Ensembl数据库的中华 鳖dct基因序列设计引物,运用RT-PCR技术进行开放阅读框(openingreadingframe,ORF)克隆,并进行 生物信息学分析,进而采用实时荧光定量PCR(quantitativer... 为了阐明中华鳖酪氨酸酶家族成员dct基因的结构与表达特征,根据Ensembl数据库的中华 鳖dct基因序列设计引物,运用RT-PCR技术进行开放阅读框(openingreadingframe,ORF)克隆,并进行 生物信息学分析,进而采用实时荧光定量PCR(quantitativereal-timePCR,q-PCR)技术检测正常体色和黄 色中华鳖肺、肾脏、裙边和肌肉组织的mRNA表达水平.结果显示中华鳖dct基因ORF区全长1578bp,编 码525个氨基酸,2种体色鳖dct基因序列完全一致;氨基酸序列分析得C末端无L-亮氨酸基序;N末端含 有1个信号肽结构域;预测蛋白(成熟肽)分子质量为56.449ku,理论等电点为6.67,不稳定指数为38.71,表 明DCT蛋白是酸性稳定蛋白;预测DCT蛋白为亲水性蛋白;含有跨膜结构域、类表皮生长因子结构域、层 粘连蛋白型类表皮生长因子结构域和2个铜离子结合结构域.系统发育树分析显示,在dct基因进化过程 中,中华鳖与绿海龟和锦龟的亲缘关系较近.q-PCR结果表明:dct基因在同一个体各组织中均有表达,肺组 织中相对表达量最高,且极显著高于其他3种组织;黄色中华鳖肺、肾脏和裙边组织dct表达水平与正常体 色鳖的相应组织均存在显著性差异.结果表明,中华鳖体色变异与dct基因突变无关,但dct基因表达改变 可能对体色变异起了一定的作用. 展开更多
关键词 中华鳖 dct基因 克隆 生物信息学 Q-PCR
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中华鳖白细胞介素21基因cDNA克隆及生物信息学分析 预览
7
作者 范勇 王兰 张左兵 《生物技术通讯》 CAS 2019年第2期194-200,共7页
目的:从中华鳖脾脏、肝脏、肠道构建的SMARTer cDNA文库中克隆中华鳖白细胞介素21(IL-21)基因的cDNA。方法:采用cDNA末端快速扩增(RACE)法克隆中华鳖IL-21基因cDNA序列,并利用生物学软件进行生物信息学分析。结果:中华鳖IL-21cDNA长874... 目的:从中华鳖脾脏、肝脏、肠道构建的SMARTer cDNA文库中克隆中华鳖白细胞介素21(IL-21)基因的cDNA。方法:采用cDNA末端快速扩增(RACE)法克隆中华鳖IL-21基因cDNA序列,并利用生物学软件进行生物信息学分析。结果:中华鳖IL-21cDNA长874bp,其编码产物包含135个氨基酸残基,二级结构主要包括α螺旋、延伸链、无规则卷曲和β转角,三级结构包括信号肽和IL-15结构域。系统进化分析表明其与鸟类首先聚类,其次为哺乳类。以人IL-21为模型,构建了中华鳖IL-21的3D结构模型。结论:从生物信息学分析可知我们所获序列为中华鳖IL-21cDNA,为深入研究中华鳖IL-21及相关通路奠定了基础。 展开更多
关键词 中华鳖 白细胞介素21 CDNA末端快速扩增
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中华鳖GHSR基因SNPs的筛选及生长性状的关联分析
8
作者 李纯 陈辰 +3 位作者 赵建 洪孝友 李伟 朱新平 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期14-18,共5页
为探究GHSR基因多态性对中华鳖(Pelodiscus sinensis)生长相关性状的影响,采用直接测序法在GHSR基因5’侧翼和3’侧翼上筛选SNPs位点,共检测到5个单核苷酸多态性位点:A335T、G397T、A527G、A13482C和T13526A。随机选取同批繁殖的1冬龄20... 为探究GHSR基因多态性对中华鳖(Pelodiscus sinensis)生长相关性状的影响,采用直接测序法在GHSR基因5’侧翼和3’侧翼上筛选SNPs位点,共检测到5个单核苷酸多态性位点:A335T、G397T、A527G、A13482C和T13526A。随机选取同批繁殖的1冬龄200只中华鳖用直接测序法进行SNPs位点的分型,并分析与生长性状的相关性。检测结果显示,所有SNP位点均符合Hardy-Weinberg平衡状态(p>0.05)。方差分析显示,A336T位点的AT、TT基因型的体重、背甲长、背甲宽和裙边宽4项生长数据均显著高于AA基因型。A13482C位点的AC基因型的体重、背甲长、背甲宽和裙边宽4项数据均显著高于AA基因型(p<0.05)。研究表明,本实验在GHSR基因上获得的这些SNP位点可能影响着中华鳖的生长性状或与之紧密连锁,可为中华鳖分子辅助育种提供助力与参考。 展开更多
关键词 中华鳖 GHSR SNP 生长相关
中华鳖IRF4基因克隆及免疫功能研究 预览
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作者 付建平 陈丹婷 +1 位作者 赵昕 刘毅 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期368-374,共7页
干扰素调节因子IRF4基因仅表达于免疫相关细胞,在先天性免疫和特异性免疫中发挥重要作用。本研究根据中华鳖高通量测序预测的IRF4基因序列(GenBank登录号:XM_014581444),设计特异性引物扩增片段验证其编码区;通过荧光定量检测IRF4基因... 干扰素调节因子IRF4基因仅表达于免疫相关细胞,在先天性免疫和特异性免疫中发挥重要作用。本研究根据中华鳖高通量测序预测的IRF4基因序列(GenBank登录号:XM_014581444),设计特异性引物扩增片段验证其编码区;通过荧光定量检测IRF4基因在健康中华鳖中组织表达情况以及脂多糖、聚肌胞苷酸诱导后在外周血淋巴细胞中的表达情况;构建真核表达载体p3xflag-IRF4,检测过表达IRF4基因后细胞对中华鳖虹彩病毒的敏感性,以及对干扰素启动子、NF-κB启动子的活性。试验结果显示,IRF4基因编码区和GenBank中序列完全相同,其推测的氨基酸序列含有1个DNA结合结构域和1个IRF相关结构域;荧光定量结果分析显示,IRF4基因表达于所检测的组织和器官,其中在血液、肝、脾中表达较高,脂多糖和聚肌胞苷酸均能诱导外周血淋巴细胞中IRF4基因的表达;过表达IRF4基因后降低细胞对中华鳖虹彩病毒的敏感性,过表达IRF4基因能显著诱导干扰素启动子活性,抑制NF-κB启动子活性。上述结果为更深入研究中华鳖IRF4参与机体免疫应答提供基础。 展开更多
关键词 中华鳖 干扰素调节因子IRF4基因 干扰素 NF-ΚB
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螺旋藻对中华鳖生长和体组成及血清生化指标的影响 预览
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作者 何玲 王佩 +2 位作者 罗来婷 李潇 王晓清 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期536-540,559共6页
将初始体质量(37.44±0.18)g的试验用中华鳖分为4组,每组设3个重复,每个重复40只,分别用不添加(对照)或分别添加5%、8%、10%的螺旋藻所制成的饲料连续投喂12周,研究螺旋藻对中华鳖生长、体组成及血清生化指标的影响。结果显示:添加8... 将初始体质量(37.44±0.18)g的试验用中华鳖分为4组,每组设3个重复,每个重复40只,分别用不添加(对照)或分别添加5%、8%、10%的螺旋藻所制成的饲料连续投喂12周,研究螺旋藻对中华鳖生长、体组成及血清生化指标的影响。结果显示:添加8%螺旋藻的中华鳖的成活率、体质量增长率和特定生长率均显著高于其他处理的(P<0.05),其他各处理间的差异无统计学意义(P>0.05);添加8%螺旋藻的中华鳖的粗脂肪、总氨酸、必需氨基酸和鲜味氨基酸含量最高;与对照相比,饲料中添加了螺旋藻的中华鳖的粗蛋白含量均上升,添加5%螺旋藻的中华鳖血清中总蛋白和白蛋白含量均为最高,且白蛋白含量显著高于对照(P<0.05);饲料中添加螺旋藻,中华鳖血清中甘油三酯含量无显著变化(P>0.05),谷丙转氨酶活性显著降低(P<0.05),随添加量的增加,总胆固醇含量逐渐降低。可见,饲料中添加适量的螺旋藻可提高中华鳖的体质量增长率、成活率和特定生长率,提高营养水平和风味,螺旋藻添加量为8%时,促生长效果最好,肌肉中的氨基酸含量最高,能提高中华鳖的粗蛋白和粗脂肪含量,降低粗灰分含量和血清的总胆固醇和甘油三酯含量,有利于中华鳖体内蛋白沉积,改善中华鳖的品质,有利于降低血脂;螺旋藻添加量为5%时,中华鳖血清的总蛋白和白蛋白含量最高,谷丙转氨酶活性最低,有助于改善肝功能。本研究条件下,中华鳖饲料中螺旋藻适宜添加量为5%~8%。 展开更多
关键词 中华鳖 螺旋藻 添加量 体组成 氨基酸 血清生化指标
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血根碱对中华鳖生长和体组成及血清指标的影响 预览
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作者 罗来婷 王佩 +4 位作者 王晓清 李潇 陈贞年 钟蕾 何玲 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期184-188,共5页
将480只中华鳖分为4组,每组3个重复,分别投喂对照(对照)或分别添加含50、100、150mg/kg的血根碱制剂的试验饲料,试验期75d,研究血根碱对中华鳖生长、体成分和血清指标的影响。结果表明:饲料中血根碱添加量为50、100mg/kg的中华鳖的成活... 将480只中华鳖分为4组,每组3个重复,分别投喂对照(对照)或分别添加含50、100、150mg/kg的血根碱制剂的试验饲料,试验期75d,研究血根碱对中华鳖生长、体成分和血清指标的影响。结果表明:饲料中血根碱添加量为50、100mg/kg的中华鳖的成活率显著高于添加量为150mg/kg和对照的;添加量为50、100mg/kg的中华鳖的饲料系数显著低于对照的;添加量为50mg/kg的中华鳖的肌肉中鲜味氨基酸总量比对照的提高1.7mg/g,但差异无统计学意义;随着饲料中血根碱的添加量增加,中华鳖体组成中粗蛋白的占比呈先增加后降低的趋势,添加量为50mg/kg的中华鳖体组成中粗蛋白的占比显著高于添加量为150mg/kg和对照的;随着饲料中血根碱的添加量增加,中华鳖血清中的葡萄糖含量呈先降低后升高的趋势,添加量为50、100mg/kg的中华鳖血清中葡萄糖含量显著低于添加量为150mg/kg和对照的;添加量为50mg/kg的中华鳖血清中碱性磷酸酶活性显著高于对照的,谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于其他处理;添加量为50、100mg/kg的中华鳖血清中谷草转氨酶活性显著低于对照的。可见,在本试验条件下,基础饲料中添加50~100mg/kg血根碱较为适宜。 展开更多
关键词 中华鳖 血根碱 生长性能 体组成 氨基酸 血清生化指标
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中华鳖MyoD1基因SNP鉴定及其与生长性状的关联分析 预览
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作者 黄龙 吴本丽 +5 位作者 何吉祥 陈静 宋光同 汪翔 张烨 武松 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期76-81,共6页
为了研究生肌决定因子1(MyoD1)基因多态性与中华鳖生长性状的相关性,采用直接测序法在MyoD1基因上共检测到6个SNP位点(T-49G、A-38G、C91T、A187T、C880T和T1522A),其中C880T位于外显子上,属于错义突变。对从同批繁殖、同块稻田养殖的2... 为了研究生肌决定因子1(MyoD1)基因多态性与中华鳖生长性状的相关性,采用直接测序法在MyoD1基因上共检测到6个SNP位点(T-49G、A-38G、C91T、A187T、C880T和T1522A),其中C880T位于外显子上,属于错义突变。对从同批繁殖、同块稻田养殖的2冬龄中华鳖群体中随机选取的178只个体中各位点的基因型进行检测。结果显示,所有位点在中华鳖群体中的平均有效等位基因数、平均观测杂合度和平均期望杂合度分别为1.6365、0.3493和0.3754,除A187T位点外,其余5个位点的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg定律。采用一般线性模型分析各位点与中华鳖生长性状之间的相关性,研究发现,T-49G位点GG基因型个体的背甲宽显著大于TT基因型,A-38G位点AG基因型个体的背甲宽显著大于AA基因型,A187T位点TT基因型个体的体高显著大于AA基因型,T1522A位点AA基因型个体的体质量显著大于TT、TA基因型,其余位点不同基因型个体间的生长性状均不存在显著差异。T-49G、A-38G、A187T和T1522A位点与生长性状显著相关,可作为中华鳖分子标记辅助育种的候选标记。 展开更多
关键词 中华鳖 生肌决定因子1基因 单核苷酸多态性标记 生长性状 关联分析
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中华鳖器官组织对养殖环境中镉的富集 预览
13
作者 刘伶俐 黄向荣 +3 位作者 黄华伟 李小玲 何志刚 李传武 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期412-419,共8页
以中华鳖为试验对象,在养殖土壤中分别添加5、50和100 mg/kg的镉,以不加镉为对照,研究养殖环境中镉含量变化对中华鳖不同器官组织对镉的富集的影响,试验周期为75 d.结果表明:养殖水体、底泥及中华鳖器官组织中镉蓄积量以镉添加100 mg/k... 以中华鳖为试验对象,在养殖土壤中分别添加5、50和100 mg/kg的镉,以不加镉为对照,研究养殖环境中镉含量变化对中华鳖不同器官组织对镉的富集的影响,试验周期为75 d.结果表明:养殖水体、底泥及中华鳖器官组织中镉蓄积量以镉添加100 mg/kg的为最多,且与对照组及添加5 mg/kg组的差异具有统计学意义,存在"剂量-效应"关系;中华鳖器官组织对镉富集量从高到低依次为肝脏、肠道、裙边、肌肉,可食肌肉、裙边的镉含量均低于国家食品限量卫生标准;相关性分析显示,不同镉试验组及试验第0~30天在养殖环境及各组织间的镉含量均呈显著正相关,存在"时间-效应"关系,而养殖环境与被测组织的镉含量相关性不显著,甚至对照组的底泥和裙边与肝脏间、50 mg/kg组的水体与肝脏和肠道间、100 mg/kg组的水体与肝脏间均呈负相关;随着环境中镉的迁移转化及器官组织的消除代谢,试验第45天的水体和肠道分别与肌肉和裙边间,试验第60天的肠道与各养殖环境因素和各器官组织间、肌肉与水体和裙边及肝脏间,试验第75天的水体和裙边分别与肠道和肝脏间、肠道与底泥和肌肉间的相关性均不显著. 展开更多
关键词 中华鳖 富集 迁移 转化 代谢
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中华鳖dazl基因克隆及在生殖细胞中的表达 预览 被引量:1
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作者 唐舟凯 张飘逸 +4 位作者 储张杰 朱新平 李伟 吴栩灵 徐红艳 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期400-409,共10页
为探索龟鳖类生殖细胞的发育分化机制,实验通过特异性引物克隆了中华鳖dazl基因的cDNA片段,长1007bp,其中包括5′端非编码区197bp,3′端非编码区33bp,开放阅读框777bp,编码258个氨基酸。氨基酸序列比对显示其与西部锦龟Dazl同源性最高,... 为探索龟鳖类生殖细胞的发育分化机制,实验通过特异性引物克隆了中华鳖dazl基因的cDNA片段,长1007bp,其中包括5′端非编码区197bp,3′端非编码区33bp,开放阅读框777bp,编码258个氨基酸。氨基酸序列比对显示其与西部锦龟Dazl同源性最高,达96%;与小鼠Dazl同源性达75%。荧光定量PCR分析结果显示,中华鳖dazl mRNA主要在精巢和卵巢中表达,在体细胞组织中仅检测到微量表达。冰冻切片原位杂交结果显示,中华鳖dazl mRNA在生殖细胞中特异表达,且在不同时期的生殖细胞中呈动态表达模式。在精巢中,中华鳖dazl mRNA在初级和次级精母细胞中表达最强,在精原干细胞中表达水平次之,在精子细胞中未检测到信号;在卵巢中,中华鳖dazlmRNA信号在初级卵母细胞胞质中均匀分布且在最早期的初级卵母细胞中信号最强,随着卵母细胞的增大,信号逐渐聚集并逐渐减弱。研究表明,dazl基因可能对中华鳖两性生殖细胞的发生具有重要的调控作用。 展开更多
关键词 中华鳖 DAZL 生殖细胞 精子发生 卵子发生
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饲料蛋白质和脂肪水平对中华鳖生长性能、肌肉质构指标及肝脏相关基因表达的影响 预览 被引量:3
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作者 吴凡 陆星 +6 位作者 文华 田娟 刘伟 蒋明 杨长庚 喻丽娟 梁宏伟 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2018年第1期47-54,共8页
为研究饲料蛋白质和脂肪水平对中华鳖(Pelodiscus sinensis)的生长性能、肌肉质构指标及肝脏相关基因表达的影响,实验采用双因素3×2因子试验设计,制成蛋白质水平分别为40%、45%和50%,脂肪水平分别为6%和9%的6组试验饲料,饲喂均重为... 为研究饲料蛋白质和脂肪水平对中华鳖(Pelodiscus sinensis)的生长性能、肌肉质构指标及肝脏相关基因表达的影响,实验采用双因素3×2因子试验设计,制成蛋白质水平分别为40%、45%和50%,脂肪水平分别为6%和9%的6组试验饲料,饲喂均重为(293.11±7.84)g的中华鳖,8周后测定相关指标。结果显示:饲料蛋白质和脂肪水平对中华鳖存活率无显著影响,但对增重率、特定生长率、饲料系数和肝体比均有显著影响。随着饲料蛋白质水平的升高,增重率和特定生长率均显著升高,45%和50%蛋白组增重率和特定生长率显著高于40%组,45%组饲料系数显著低于40%组,50%组的肝体比显著高于40%组。饲料脂肪含量对中华鳖生长性能无显著影响,9%脂肪组的肝体比显著高于6%组。饲料蛋白质和脂肪水平对肌肉水分和粗灰分含量无显著影响,肌肉蛋白质含量随着饲料蛋白质水平的增加先显著升高,然后在45%时达到稳定水平。肌肉脂肪含量随着饲料脂肪水平增加显著升高。饲料蛋白质和脂肪水平对中华鳖四肢肌肉的回复性、弹性和凝聚性无显著影响,硬度、黏性和咀嚼性随着饲料蛋白质水平升高而显著升高,随着脂肪水平升高而显著下降。肝脏igf-I基因mRNA表达水平随着饲料蛋白质水平的升高而显著升高,9%脂肪组的肝脏igf-I和lpl基因mRNA表达水平显著高于6%组。综合中华鳖生长性能及营养品质的试验结果,温室养殖条件下,中华鳖饲料适宜的蛋白质和脂肪水平分别为45%和6%。 展开更多
关键词 中华鳖(Pelodiscus sinensis) 蛋白质 脂肪 生长性能 质构指标
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中华鳖fut2基因的克隆及其组织表达模式分析 预览 被引量:1
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作者 邢潇 宋如昕 《山西农业科学》 2018年第6期889-893,共5页
中华鳖(Pelodiscus sinensis)的α-(1,2)岩藻糖基转移酶2(fucosyltransferase 2,FUT2)基因可以合成岩藻糖,岩藻糖作为一种糖类,能够为肠道某些细菌提供能量,在维持肠道微生物的内稳态中发挥着调控作用。利用RACE技术首次获得了中... 中华鳖(Pelodiscus sinensis)的α-(1,2)岩藻糖基转移酶2(fucosyltransferase 2,FUT2)基因可以合成岩藻糖,岩藻糖作为一种糖类,能够为肠道某些细菌提供能量,在维持肠道微生物的内稳态中发挥着调控作用。利用RACE技术首次获得了中华鳖fut2基因的c DNA全长序列,进而预测和分析fut2基因的蛋白质序列及其功能区域,同时对其在10个组织中的表达水平进行检测与分析。结果显示,该序列全长1 918 bp,其中,5'非编码区(5'-UTR)380 bp,3'非编码区(3'-UTR)518 bp,开放阅读框(ORF)长度为1 020 bp,编码339个氨基酸残基;FUT2蛋白为脂溶性蛋白,不存在信号肽。系统进化树分析结果显示,中华鳖fut2基因与西部锦龟和绿毛龟的亲缘关系相对较近,与人和小鼠等亲缘关系相对较远。荧光定量PCR结果显示,中华鳖fut2基因在所检测的组织都表达,其中,在肌肉、心脏中表达量较高,在回肠、直肠中表达量相对较高。研究结果可为进一步了解fut2基因功能提供理论依据。 展开更多
关键词 中华鳖 岩藻糖基转移酶2(FUT2) 生物信息学分析 组织表达分析
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温度对中华鳖血浆皮质酮水平、免疫生化指标及抑菌效果的影响 被引量:1
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作者 申思仙 史燕 +2 位作者 李伟 陈辰 朱新平 《生态学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期2754-2760,共7页
对正常生长状态下3种月龄(12、18、24月龄)的中华鳖血浆皮质酮(corticosterone,CORT)进行了测定,并以(28±2)℃为恒温对照组,研究变温(10、20、33℃)对同一年龄段中华鳖血浆CORT水平、免疫生化指标以及抑菌效果的影响。结... 对正常生长状态下3种月龄(12、18、24月龄)的中华鳖血浆皮质酮(corticosterone,CORT)进行了测定,并以(28±2)℃为恒温对照组,研究变温(10、20、33℃)对同一年龄段中华鳖血浆CORT水平、免疫生化指标以及抑菌效果的影响。结果表明:12月龄与24月龄个体间血浆CORT水平有显著性差异(P〈0.05);各温度处理组中华鳖血浆CORT含量随时间呈先升后降的变化趋势,其中10℃和20℃组的CORT水平在4和6 h时与对照组有显著性差异(P〈0.05);各温度处理组酶活性和蛋白含量随时间的增加先升后降,但与对照组无显著性差异(P〉0.05);血浆抑菌效果与血浆CORT水平呈负相关。实验表明,温度骤变会促使中华鳖产生应激反应,并使机体血浆内的CORT水平增加,免疫生化发生改变,抑菌效果下降,从而降低机体的免疫力。 展开更多
关键词 中华鳖 温度 皮质酮 生化指标 抑菌
茭白田套养中华鳖多级种养模式的作用与功能评价 预览
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作者 邢阿宝 崔海峰 +2 位作者 俞晓平 张雅芬 叶子弘 《核农学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期1031-1039,共9页
为改善茭田生态环境,进一步完善茭白田间种养结合模式的技术和理论体系,本研究通过在茭白-中华鳖种养结合模式中引入活体饵料,筛选优化茭田套养中华鳖的多级种养结合模式。结果表明,中华鳖对活体饵料的取食偏好性差异明显,中华鳖对泥鳅... 为改善茭田生态环境,进一步完善茭白田间种养结合模式的技术和理论体系,本研究通过在茭白-中华鳖种养结合模式中引入活体饵料,筛选优化茭田套养中华鳖的多级种养结合模式。结果表明,中华鳖对活体饵料的取食偏好性差异明显,中华鳖对泥鳅和白条鱼的取食量较高(每天平均取食量分别为5.0 g和5.6 g),少量取食克氏螯虾(2.0 g)和螺蛳(0.4 g);组合饲喂时中华鳖对各饵料的取食总量高于单一饲喂,中华鳖个体生长率较好,表明活体饵料组合饲喂有利于中华鳖的生长发育。茭白-中华鳖多级种养田间调查发现,多级种养组合茭白田间虫害有所减少,捕食性昆虫数量增加;茭白-中华鳖-白条鱼组合的茭白经济性状表现较好,其中净茭率为69.5%,显著高于其他试验组合;而茭白-中华鳖-白条鱼-螺蛳模式更有利于中华鳖体重和甲背增长,说明多级种养结合有助于提高茭白经济性状和中华鳖产量;此外,多级种养结合中的茭白与中华鳖品质检测均达到国家绿色食品标准。本研究为构建茭白田套养中华鳖的多级种养结合模式,实现田间茭白与中华鳖的绿色高效安全生产提供了理论依据。 展开更多
关键词 中华鳖 茭白 活体饵料 取食量及偏好性 多级种养结合
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胚胎期草甘膦铵盐暴露对中华鳖幼体的表型与生理表现的影响 预览
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作者 叶梦婷 傅诗雨 +3 位作者 岑绮雯 吴琼 胡英超 陆洪良 《生态毒理学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期190-199,共10页
草甘膦是全球范围内生产与使用量最大的除草剂。虽然草甘膦制剂被分于低毒等级,但是许多研究显示其对动物的生理、行为表达具有广泛的干扰作用。本研究将中华鳖胚胎暴露于不同浓度的草甘膦铵盐溶液以评估草甘膦除草剂对其胚胎发育及孵... 草甘膦是全球范围内生产与使用量最大的除草剂。虽然草甘膦制剂被分于低毒等级,但是许多研究显示其对动物的生理、行为表达具有广泛的干扰作用。本研究将中华鳖胚胎暴露于不同浓度的草甘膦铵盐溶液以评估草甘膦除草剂对其胚胎发育及孵出幼体表型及生理表现的影响。结果显示:一定浓度范围(5-5 000 mg·L^-1)内,草甘膦铵盐对中华鳖胚胎发育速率、孵出幼体大小、游泳能力、肝脏甘油三酯含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量以及热激蛋白70 mRNA相对表达量无显著影响。结果表明:一定浓度范围草甘膦除草剂暴露对中华鳖胚胎发育的影响较小,不改变孵出幼体的表型及其生理表现。 展开更多
关键词 草甘膦 中华鳖 超氧化物歧化酶活性 丙二醛含量 热激蛋白70表达水平
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基于微卫星的中华鳖(Pelodiscus sinensis)选育世代遗传多样性监测 被引量:1
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作者 程珂 陈辰 +1 位作者 史燕 朱新平 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2018年第9期3774-3781,共8页
本研究利用微卫星技术,对选育的中华鳖F3、F4、F5代群体的遗传多样性进行了监测,并与日本鳖群体进行了比较。结果显示,在筛选的15个微卫星位点中,4个群体共218个个体共检测到等位基因数138个,平均等位基因数(Na)为7.2-8.4,平均观测杂... 本研究利用微卫星技术,对选育的中华鳖F3、F4、F5代群体的遗传多样性进行了监测,并与日本鳖群体进行了比较。结果显示,在筛选的15个微卫星位点中,4个群体共218个个体共检测到等位基因数138个,平均等位基因数(Na)为7.2-8.4,平均观测杂合度(Ho)为0.512 3-0.626 5,平均期望杂合度(He)为0.574 9-0.646 1,平均多态信息含量(PIC)为0.534 6-0.604 9,表明这些中华鳖群体有较丰富的遗传多样性。中华鳖选育群体F3、F4、F5代及日本鳖群体的遗传多样性参数Na分别为8.400、7.733、7.200、7.200,Ho分别为0.626 5、0.527 4、0.478 7、0.512,He分别为0.646 1、0.639 8、0.642 0、0.574 9,PIC分别为0.604 9、0.598 2、0.594 9、0.534 6,显示中华鳖群体随着选育进程,遗传多样性逐渐下降,但仍然比日本鳖群体高,还可以进行进一步的选育。中华鳖选育群体在聚类分析中聚为一支,而日本鳖群体单独聚为一支,这说明人工选育对生物进化与地理分化的历史局面没有产生影响。 展开更多
关键词 中华鳖 选育 微卫星 遗传多样性
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