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云南省边境地区景洪市疟疾媒介调查
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作者 杨锐 郑宇婷 +6 位作者 杨晓羽 董利民 林祖锐 周耀武 曾旭灿 李鸿斌 姜进勇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期406-410,416共6页
目的了解云南省边境地区景洪市疟疾重要传播媒介的按蚊种类、生态习性及其疟原虫子抱子感染情况。方法于2015年在景洪市选取1个历史上疟疾流行高发村曼辉龙村为调查点,6-10月每月捕蚊3d。在调査点东、西、南、北、中5个方位各选择1户人... 目的了解云南省边境地区景洪市疟疾重要传播媒介的按蚊种类、生态习性及其疟原虫子抱子感染情况。方法于2015年在景洪市选取1个历史上疟疾流行高发村曼辉龙村为调查点,6-10月每月捕蚊3d。在调査点东、西、南、北、中5个方位各选择1户人房和畜房,采用灯诱法通宵捕捉按蚊,调查按蚊种群密度;多重PCR检测按蚊胃血,观察其嗜血习性。选择村内和村外各1处采用帐诱法捕捉按蚊,观察按蚊夜间活动规律;采用巢式PCR检测按蚊疟原虫子抱子感染情况。结果共捕获1286只按蚊,属13种,其中中华按蚊936只(占72.8%),微小按蚊188只(占14.6%),为当地按蚊优势蚊种。按蚊的捕获来源地主要为畜房,占85.6%(1101只)。125份中华按蚊胃血多重PCR检测结果显示,人血指数为0,猪血指数为100。中华按蚊村内叮人率为0.6只/(人·h),村外的叮人率为0.2只/(人·h),夜间活动高峰期为20:00-22:00。101只微小按蚊、517只中华按蚊和40只多斑按蚊巢式PCR检测,均未发现疟原虫子抱子感染。结论景洪市按蚊媒介种群以中华按蚊为主,其次为微小按蚊。中华按蚊以嗜家畜血为主。捕获的按蚊中未检测到疟原虫子孢子感染。 展开更多
关键词 疟疾 媒介 按蚊 种群 疟原虫子孢子 生态习性 云南省景洪市
荧光定量PCR用于按蚊体内疟原虫子孢子检测的研究 被引量:2
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作者 刘耀宝 周华云 +7 位作者 汪圣强 李菊林 朱韩武 朱国鼎 顾亚萍 王伟明 曹俊 高琪 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2012年第4期445-449,共5页
目的建立一种用于按蚊体内疟原虫子孢子定量检测和虫种鉴别的荧光定量PCR方法。方法采用针对4种人体疟原虫18S rRNA基因属特异性保守区的1对引物,以疟原虫18S rRNA基因重组质粒与按蚊DNA的混合物为模板,进行反应体系和反应条件优化,验... 目的建立一种用于按蚊体内疟原虫子孢子定量检测和虫种鉴别的荧光定量PCR方法。方法采用针对4种人体疟原虫18S rRNA基因属特异性保守区的1对引物,以疟原虫18S rRNA基因重组质粒与按蚊DNA的混合物为模板,进行反应体系和反应条件优化,验证方法的特异性,并通过熔解曲线分析进行虫种鉴别。应用阴性按蚊DNA稀释的间日疟原虫18S rRNA基因重组质粒为模板制作标准曲线,并分别以质粒DNA和实验室子孢子感染阳性的按蚊DNA为模板分析建立的荧光定量PCR方法的敏感性。在反应体系中加入不同部位、不同用量按蚊DNA,以探讨按蚊DNA对检测效果的影响。结果该方法对按蚊、人血DNA均无扩增,对4种疟原虫DNA均有特异性扩增且扩增产物的熔解温度(Tm)易于区分,三日疟原虫、恶性疟原虫、卵形疟原虫和间日疟原虫的Tm值分别为71.0、72.7、73.9℃和75.9℃。标准曲线中循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的相关性(相关系数r=-0.99)。最低可以检出含50拷贝的质粒DNA或32倍稀释的子孢子阳性按蚊DNA样本。按蚊DNA对荧光定量PCR反应具有抑制作用。荧光定量PCR的Ct值在实验内和实验间均具有良好的重现性。结论新建立的SYBR Green I染料荧光定量PCR方法具有较高的敏感性和特异性,可用于按蚊体内疟原虫子孢子的检测,并可同时对4种人体疟原虫进行鉴别。 展开更多
关键词 荧光定量PCR 按蚊 疟原虫子孢子 虫种鉴别
肝细胞膜子孢子抗原受体的分离及特性的初探:β型抗独特型单克隆抗体... 预览
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作者 王若冰 朱锡华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期 93-95,共3页
本文通过标记抗原的活体分布试验证明,抗独特型单克隆抗体D3作为抗原的内影像对肝细胞有一定的亲和性,以D3探针制备的D3-Sepharose 4B亲和柱自大鼠肝细胞膜蛋白中分离纯化出分子量为31Kd的子孢子抗原受体。该受体蛋白能封闭子孢子入侵... 本文通过标记抗原的活体分布试验证明,抗独特型单克隆抗体D3作为抗原的内影像对肝细胞有一定的亲和性,以D3探针制备的D3-Sepharose 4B亲和柱自大鼠肝细胞膜蛋白中分离纯化出分子量为31Kd的子孢子抗原受体。该受体蛋白能封闭子孢子入侵肝细胞,使其失去对宿主的感染力。提示抗原受体在抗虫免疫中有着不可忽视的作用,有理论和应用研究的价值,值得进一步探讨。 展开更多
关键词 子孢子 抗原受体 单克隆抗体
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单克隆抗体对疟原虫子孢子感染鼠的保护作用 预览
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作者 王若冰 朱锡华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期 79-82,78,共5页
本研究通过一系列体内、外中和试验表明抗疟原虫子孢子单克隆抗体MS1—5均是保护性抗体,其抗虫机制为(1)抑制子孢子侵入肝细胞,经MS1作用后的子孢子能大量聚集在肝脏,但失去入侵肝细胞的能力。(2)中和子孢子感染力,使其失去引起宿主血... 本研究通过一系列体内、外中和试验表明抗疟原虫子孢子单克隆抗体MS1—5均是保护性抗体,其抗虫机制为(1)抑制子孢子侵入肝细胞,经MS1作用后的子孢子能大量聚集在肝脏,但失去入侵肝细胞的能力。(2)中和子孢子感染力,使其失去引起宿主血液感染的能力,抗体的被动转移能使受者获得抗感染力,受保护的程度取决于子孢子的接种量及循环抗体的浓度。(3)循环抗体对子孢子的中和抑制是有限的,杂交瘤移梢鼠具有较高活性的保护性循环抗体,能完全抵抗2×10~3个子孢子的感染,但只有部分(47%)免疫鼠能抵抗10~4个子孢子的攻击。提示虫体负荷一旦超出抗体的中和能力就能逃避免疫,引起宿主的感染与发病。 展开更多
关键词 子孢子 疟原虫 单克隆抗体 保护性
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约氏疟原虫子孢子入侵wistar大鼠肝内的扫描电镜观察 预览 被引量:3
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作者 黄复生 王兴相 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1996年第1期 1-3,共3页
在约氏疟原虫子孢子接种大鼠10-30min后,通过大鼠的肝脏冷冻断裂,对其断裂面进行扫描电镜观察。结果显示:在接种后10min就可见较多子孢子被枯否氏细胞捕获,有些子孢子正侵入肝细胞,子孢子与肝细胞膜接触时,膜内凹,... 在约氏疟原虫子孢子接种大鼠10-30min后,通过大鼠的肝脏冷冻断裂,对其断裂面进行扫描电镜观察。结果显示:在接种后10min就可见较多子孢子被枯否氏细胞捕获,有些子孢子正侵入肝细胞,子孢子与肝细胞膜接触时,膜内凹,随着侵入继续,内凹加深,部分子孢子可直接与肝细胞膜接触。 展开更多
关键词 疟原虫 约氏疟原虫 子孢子 扫描电镜
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主动入侵的疟原虫子孢子通过CSP蛋白诱导DC成熟 被引量:2
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作者 彭小红 徐文岳 +2 位作者 付雍 丁艳 黄复生 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期294-298,共5页
目的观察约氏疟原虫子孢子能否诱导DC成熟,并探讨其机制。方法GM-CSF常规诱导小鼠骨髓前体细胞,获得足量的DC,然后,解剖按蚊唾液腺子孢子与DC共培养,分别于2、4和24 h后,荧光显微镜下观察子孢子与DC的相互关系,同时采用流式细胞分析技... 目的观察约氏疟原虫子孢子能否诱导DC成熟,并探讨其机制。方法GM-CSF常规诱导小鼠骨髓前体细胞,获得足量的DC,然后,解剖按蚊唾液腺子孢子与DC共培养,分别于2、4和24 h后,荧光显微镜下观察子孢子与DC的相互关系,同时采用流式细胞分析技术检测DC表面的MHC-Ⅱ类分子、CD80和CD86共刺激分子的表达情况,最后转染重组pFLAG-CMV8-CSP质粒后24 h,检测DC表面的共刺激分子的表达情况。结果在共培养后2h,子孢子便逐渐向DC迁移甚至黏附于DC表面;4 h后部分子孢子便进入DC且仍然保持子孢子的弯月形形态;24 h后DC内的部分子孢子逐渐变圆,类似肝期裂殖体的形态。流式检测发现共培养2 h后对DC共刺激分子表达无明显影响,而共培养4 h和24 h后DC共刺激分子的表达均上调。转染pFLAG-CMV8-CSP重组质粒至DC中后同样能诱导DC的共刺激分子的表达上调。结论在体外共培养的情况下,大部分子孢子可以主动侵入DC而少部分可以被DC吞噬,主动入侵DC的子孢子可能是通过其表面的CSP由纳虫空泡进入胞浆内后诱导DC成熟。 展开更多
关键词 约氏疟原虫子孢子 DC细胞 红前期 环子孢子蛋白
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