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胶孢炭疽菌泛素结合酶基因CgUBC2的RNAi突变体获得与功能分析
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作者 苏初连 康浩 +3 位作者 杨石有 蒲金基 夏杨 张贺 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期125-131,共7页
为了研究胶孢炭疽菌泛素结合酶基因CgUBC2的功能以及与致病相关基因间的关联性。利用RNAi技术构建沉默载体pSilent-1:CgUBC2,通过PEG介导法获得突变体菌株,实时荧光定量PCR法分析其侵染寄主过程中的差异表达,以及与PG、ECH、LIP、PKS、... 为了研究胶孢炭疽菌泛素结合酶基因CgUBC2的功能以及与致病相关基因间的关联性。利用RNAi技术构建沉默载体pSilent-1:CgUBC2,通过PEG介导法获得突变体菌株,实时荧光定量PCR法分析其侵染寄主过程中的差异表达,以及与PG、ECH、LIP、PKS、HMT、Sin3P、NRPS 7个致病相关基因的关联性。通过特异性引物检测鉴定、表达量分析,获得CgUBC2的RNAi突变体为pSilent-1:CgUBC2-1和pSilent-1:CgUBC2-2,侵染过程中突变体菌株CgUBC2基因表达量、7个致病相关基因的表达量显著低于野生型菌株。成功获得胶孢炭疽菌泛素结合酶基因CgUBC2的RNAi沉默突变体,CgUBC2参与侵染寄主的过程、正向调控7个致病相关基因和致病力。 展开更多
关键词 胶孢炭疽菌 泛素结合酶基因CgUBC2 RNAi突变体
水稻RNAi突变体库的创制和筛选 预览 被引量:1
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作者 谢洪科 韩小霞 +5 位作者 李丁 彭选明 邹朝晖 杨振 王磊 李祺 《广东农业科学》 2015年第7期1-4,F0002共5页
通过转化水稻hpRNA农杆菌文库至粳稻品种台北309,获得143株转基因植株.随机选取36株T0代转基因植株进行检测,其GUS阳性率为77.78%,且其中35份PCR阳性材料的插入片段均与粳稻日本晴的mRNA有较高匹配.对61份T1代突变体进行筛选,获得33份... 通过转化水稻hpRNA农杆菌文库至粳稻品种台北309,获得143株转基因植株.随机选取36株T0代转基因植株进行检测,其GUS阳性率为77.78%,且其中35份PCR阳性材料的插入片段均与粳稻日本晴的mRNA有较高匹配.对61份T1代突变体进行筛选,获得33份有突变表型的材料.初步获得1份类病斑突变体,序列分析表明其可能干扰基因的编码产物为RAL6-种子过敏蛋白RA5/RA14/RA17的前体,属于淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂家族,该类基因在植物自然防御系统中扮演重要较色. 展开更多
关键词 水稻 RNAi突变体库 表型筛选 类病斑突变体
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