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中间球海胆乳酸脱氢酶基因克隆及其对海水酸化的响应 预览
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作者 崔东遥 任丽媛 +4 位作者 邢冬飞 孙景贤 李莹莹 常亚青 湛垚垚 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1423-1437,共15页
为明确中间球海胆乳酸脱氢酶(LDH)基因序列及表达特征,研究其对海水酸化胁迫的响应,实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中间球海胆LDH基因(命名为SiLDH)的全长cDNA,并且比较了海水酸化胁迫下,中间球海胆不同组织SiLDH基因表达及总... 为明确中间球海胆乳酸脱氢酶(LDH)基因序列及表达特征,研究其对海水酸化胁迫的响应,实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中间球海胆LDH基因(命名为SiLDH)的全长cDNA,并且比较了海水酸化胁迫下,中间球海胆不同组织SiLDH基因表达及总LDH活性的变化情况。结果显示:①SiLDH基因的cDNA全长为1 499 bp,包含133 bp的5′非编码区,349 bp的3′非编码区和1 017 bp编码338个氨基酸的开放阅读框(ORF)。SiLDH编码蛋白的相对分子量为36.40 ku,理论等电点为6.55,属于无信号肽的非跨膜、温和疏水蛋白。②生物信息学分析显示,SiLDH蛋白序列与紫球海胆LDH X4蛋白序列一致性最高(90.88%)。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)发现,SiLDH基因在检测的4种组织中均有表达,相对表达量从高到低为性腺>管足>肠>体腔液;总LDH活性检测显示,中间球海胆总LDH活性从高到低为性腺>管足>体腔液>肠;④海水酸化处理60 d后发现,与自然海水组(pH 8.06±0.01)相比,SiLDH基因在中间球海胆性腺、管足和肠道中呈现总体降低趋势,在体腔液中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势;总LDH活性在性腺、管足和体腔液中呈现随海水pH降低而降低的趋势,在肠道中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势。研究表明,中间球海胆面对海水酸化时可能通过调节SiLDH基因的表达和LDH活性来缓解海水酸化带来的负面影响。 展开更多
关键词 中间球海胆 乳酸脱氢酶 海水酸化 基因克隆 基因表达 酶活性
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中间球海胆smad2/3基因克隆、组织表达及其脂多糖刺激响应 预览
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作者 柳林 张宝警 +5 位作者 李莹莹 姜惠婷 刘丽 刘印 常亚青 湛垚垚 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期345-354,共10页
为明确中间球海胆Strongylocentrotus intermedius smad2/3基因(命名为Si-smad2/3)信息,初步研究了该基因的序列特征、组织表达模式及脂多糖对其表达的影响,采用RACE技术克隆获得了成体中间球海胆Si-smad2/3基因的全长cDNA序列。结果表... 为明确中间球海胆Strongylocentrotus intermedius smad2/3基因(命名为Si-smad2/3)信息,初步研究了该基因的序列特征、组织表达模式及脂多糖对其表达的影响,采用RACE技术克隆获得了成体中间球海胆Si-smad2/3基因的全长cDNA序列。结果表明:Si-smad2/3基因的cDNA全长为2146 bp,共编码446个氨基酸;生物信息学分析发现,Si-smad2/3基因所编码的蛋白相对分子质量为50 300,等电点为6.93,属于亲水性非跨膜蛋白;通过与9种已公布物种的smad2/3蛋白氨基酸序列进行多重序列比对和系统进化分析发现,中间球海胆Si-smad2/3蛋白的氨基酸序列与其他真核生物smad2/3蛋白序列具有较高的相似性,与紫球海胆Strongylocentrotus purpuratus smad2/3蛋白的一致性高达96%,符合中间球海胆的分类和进化地位;实时定量PCR(qRT-PCR)检测结果显示,Si-smad2/3基因在中间球海胆不同组织中均有表达,其相对表达量从高到低为体腔细胞>管足>性腺>围口膜>肠>齿间肌;利用脂多糖(LPS,0.1 mg/mL)对中间球海胆进行免疫刺激发现,与对照组相比,LPS刺激后Si-smad2/3基因在中间球海胆体腔细胞、管足和围口膜中均呈先升高后降低的表达趋势,其中,Si-smad2/3基因在中间球海胆体腔细胞中的相对表达量在LPS刺激9 h时达到峰值,管足中表达量在LPS刺激6 h时达到峰值,而围口膜中的表达量在LPS刺激72 h时达到峰值。研究表明,Si-smad2/3可能参与中间球海胆的免疫应答过程且免疫响应具有组织特异性。 展开更多
关键词 中间球海胆 smad2/3基因 克隆 表达模式 生物功能
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3种多芳环烃在海胆体内的富集动力学研究 预览
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作者 魏海峰 田山川 刘长发 《大连海洋大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期743-748,共6页
为研究多芳环烃(PAHs)在虾夷马粪海胆Strongylocentrotus intermedius体内的富集动力学,系统认识其动力学参数特征,应用半静态双箱动力学模型拟合虾夷马粪海胆(壳直径2.0cm±0.3cm)对3,4-苯并[a]芘、9,10-二甲基蒽、3-甲基菲3种PAH... 为研究多芳环烃(PAHs)在虾夷马粪海胆Strongylocentrotus intermedius体内的富集动力学,系统认识其动力学参数特征,应用半静态双箱动力学模型拟合虾夷马粪海胆(壳直径2.0cm±0.3cm)对3,4-苯并[a]芘、9,10-二甲基蒽、3-甲基菲3种PAHs的生物富集过程,通过非线性拟合获得海胆对3种多环芳烃的吸收速率常数(K1)、释放速率常数(K2)、生物富集因子(BCF),以及平衡状态下海胆体内3种多环芳烃的含量(Cmax)、生物学半衰期(t1/2)等动力学参数。结果表明:海胆对3,4-苯并[a]芘富集动力学参数K1、K2、BCF、Cmax、t1/2的平均值分别为59.1、0.152、136.5、11.788μg/g和6.36d;海胆对9,10-二甲基蒽富集动力学参数K1,K2、BCF、Cmax、t1/2的平均值分别为12.3、0.228、54.05、4.383μg/g和6.32d;海胆对3-甲基菲富集动力学参数K1、K2、BCF、Cmax、t1/2的平均值分别为18.16、0.113、88.1、12.407μg/g和7.6d;在5μg/L浓度条件下,海胆对3种多环芳烃的富集能力进行比较,依次为3,4-苯并[a]芘(14d BCF=220)>3-甲基菲(14d BCF=128.4)>9,10-二甲基蒽(14d BCF=84.0)。研究表明,海胆对浓度为1、5、20μg/L的3,4-苯并[a]芘、浓度为5、100μg/L的3-甲基菲、浓度为5、10、50μg/L的9,10-二甲基蒽的生物富集过程均符合双箱动力学模型。 展开更多
关键词 海胆 3-甲基菲 9 10-二甲基蒽 3 4-苯并[a]芘 生物富集 多芳环烃
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中间球海胆繁殖前后性腺中脂类和脂肪酸含量变化 预览 被引量:1
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作者 李磊 杨丹 +4 位作者 亓守冰 左然涛 王姮 丁君 常亚青 《大连海洋大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期423-429,共7页
为研究中间球海胆Strongylocentrotus intermedius繁殖前后性腺中脂类和脂肪酸含量的变化,采用毛细管气相色谱法对排精/卵前后的中间球海胆性腺中脂类和脂肪酸组成进行了分析比较。结果表明:中间球海胆排精/卵前,雌、雄个体在性腺指数... 为研究中间球海胆Strongylocentrotus intermedius繁殖前后性腺中脂类和脂肪酸含量的变化,采用毛细管气相色谱法对排精/卵前后的中间球海胆性腺中脂类和脂肪酸组成进行了分析比较。结果表明:中间球海胆排精/卵前,雌、雄个体在性腺指数和性腺含水率上无显著性差异(P>0.05),雌性个体性腺中脂类含量显著高于雄性个体(P<0.05);排精/卵前后,海胆性腺中磷脂含量均较高,是海胆脂类的重要组分,排精/卵后,海胆性腺中游离脂肪酸和甘油三酯显著下降(P<0.05),胆固醇在雌性性腺中出现了显著升高(P<0.05);雌、雄海胆性腺中脂肪酸组成种类基本相同,共检测到24种脂肪酸,其中C 20∶4(n-6)和C 20∶5(n-3)是主要的不饱和脂肪酸组分,排精/卵后,雄性个体性腺中C 18∶1(n-9)含量显著升高(P<0.05),雌性个体C 18∶0含量显著升高(P<0.05)。本研究结果可为海胆亲本营养繁殖学的研究提供基础数据和理论依据。 展开更多
关键词 中间球海胆 性腺 脂类 脂肪酸
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饲料中花生四烯酸对中间球海胆存活、生长和肠道菌群组成的影响 预览
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作者 李广 李世顺 +4 位作者 李敏 吕德亮 丁君 常亚青 左然涛 《中国渔业质量与标准》 2018年第3期42-51,共10页
以中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)为研究对象,探讨饲料中不同水平(0.0、0.5%、1.0%和2.0%饲料干物质)的花生四烯酸(arachidonic acid,ARA)对其存活、生长和肠道菌群组成的影响。饲料中添加或不添加ARA饲喂56 d后统... 以中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)为研究对象,探讨饲料中不同水平(0.0、0.5%、1.0%和2.0%饲料干物质)的花生四烯酸(arachidonic acid,ARA)对其存活、生长和肠道菌群组成的影响。饲料中添加或不添加ARA饲喂56 d后统计12个网笼海胆的存活数量及体重变化,随后每个网笼随机选取10只海胆,无菌收集肠道内容物进行高通量测序分析肠道菌群组成。结果表明:饲料中不同含量水平的ARA对海胆的成活率无显著影响(P〉0.05),但随着饲料中ARA添加量的升高,海胆的增重率先升后降。当饲料中添加1.0%ARA时,海胆增重率最高,且显著高于空白组和0.5%添加组(P〈0.05),但与2.0%添加组差异不显著(P〉0.05)。高通测序发现:肠道菌群的多样性和门水平的丰度差异不显著(P〉0.05),但属水平的丰度差异显著(P〈0.05)。各饲料处理组海胆肠道中变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)的丰度均较高;随着饲料中ARA水平的升高,海胆肠道中变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)有升高的趋势(P〉0.05),弧菌属(Vibrio)和(Lutibacter)的丰度显著升高(P〈0.05);而厚壁菌门(Firmicutes)和软壁菌门(Tenericutes)则下降,但不显著(P〉0.05);芽孢杆菌属(Bacillus)和(Candidatus Hepatoplasma)的丰度显著降低(P〈0.05)。因此,尽管饲料中添加ARA不影响中间球海胆的成活率,但饲料中添加1.0%~2.0%ARA较低添加量能够显著提高海胆的生长速率,且添加不同水平的ARA均显著影响了海胆肠道菌群组成,这不仅有助于明确ARA添加对中间球海胆存活、生长和肠道菌群组成的影响,也为开发适合海胆的微生态制剂提供了理论依据。 展开更多
关键词 花生四烯酸 中间球海胆 生长 菌群组成 成活率
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Cu^2+对中间球海胆生长、免疫及性腺发育的影响 预览
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作者 李敏 吴反修 +2 位作者 吕德亮 左然涛 常亚青 《水产学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期854-862,共9页
为探讨铜离子(Cu^2+)对中间球海胆生长和性腺发育的影响及调控机制,在室内水槽(200 L)中进行为期60 d的浸泡实验。实验设置测试组(0.02 mg/L Cu^2+)和对照组(自然海水),每个处理设置3个重复,每个水槽养殖20只海胆(13.58±... 为探讨铜离子(Cu^2+)对中间球海胆生长和性腺发育的影响及调控机制,在室内水槽(200 L)中进行为期60 d的浸泡实验。实验设置测试组(0.02 mg/L Cu^2+)和对照组(自然海水),每个处理设置3个重复,每个水槽养殖20只海胆(13.58±0.79)g。实验中期和末期分别测定海胆增重率(WGR)、性腺指数(GI)、抗氧化酶活性和主要卵黄蛋白基因(MYP)表达量。结果显示,30 d时,测试组的WGR和GI与对照组差异不显著,而60 d时测试组的WGR和GI显著低于对照组;60 d时,测试组海胆体腔液中过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽巯基转移酶(GST)活性均显著低于30 d时的对应值,而丙二醛(MDA)含量较30 d时有所升高;60 d时,测试组抗氧化能力总体高于对照组,其中体腔液中CAT活性显著高于对照组。2次取样中,测试组性腺中MYP基因的表达量均显著低于对照组,而测试组消化道中MYP基因的表达量却显著高于对照组。60 d时,测试组海胆体腔细胞中总蛋白含量显著高于对照组,而体腔液上清液中总蛋白含量在测试组和对照组之间差异不显著。研究表明,铜离子能够引起氧化应激,降低海胆的增重率和性腺指数,这可能是通过抑制性腺MYP表达量及阻碍MYP从消化道向性腺正常转运所致。 展开更多
关键词 中间球海胆 增重率 性腺指数 抗氧化酶 主要卵黄蛋白
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中间球海胆与马粪海胆杂交家系早期生长比较和亲本配合力估计 预览
7
作者 张伟杰 韩奋杰 +8 位作者 陈顺 刘奎 周秘 王宝锋 王中 刘明泰 湛垚垚 经晨晨 常亚青 《中国水产科学》 CSCD 北大核心 2017年第5期1035-1044,共10页
为比较中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)与马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)杂交家系间的生长差异,评估杂交家系亲本在体重上的配合力,构建了种间杂交家系共42个。采用动物模型、约束性最大似然法(REML)和最佳线... 为比较中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)与马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)杂交家系间的生长差异,评估杂交家系亲本在体重上的配合力,构建了种间杂交家系共42个。采用动物模型、约束性最大似然法(REML)和最佳线性无偏预测(BLUP)等方法估计了杂交海胆250、295和340日龄体重的育种值,以及各亲本的一般配合力(GCA)和各亲本组合的特殊配合力(SCA)。采用方差分析方法,比较了体重表型值和育种值在杂交家系间的差异。结果表明,3个生长阶段杂交家系间体重的表型值和育种值差异均达到极显著水平(P〈0.01),体重育种值在家系间的差异大于表型值,在50%家系留种率下,育种值选择和表型值选择的家系相同率介于88.89%~94.44%,育种值选择具有0.93%~4.83%的选择效率优势;250、295和340日龄各父本的一般配合力分别介于–0.22~0.33,–0.31~0.41和–0.29~0.31,各母本的一般配合力分别介于–0.24~0.33,–0.31~0.41和–0.28~0.28,各父母本组合的特殊配合力分别介于–0.07~0.09,–0.10~0.13和–0.32~0.32,M5、M6和M17等父本的一般配合力始终较高,F9、F11和F19等母本的一般配合力始终较高,M5F9和M6F11等杂交组合的特殊配合力始终较高。 展开更多
关键词 中间球海胆 马粪海胆 杂交 家系 生长 配合力
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两种海水酸化模式对中间球海胆早期发育及存活的影响 预览 被引量:1
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作者 孙景贤 刘敏博 +6 位作者 李家祥 杨梦羽 胡婉彬 常亚青 黄显雅 段立柱 湛垚垚 《水产科学》 CSCD 北大核心 2017年第4期429-435,共7页
采用二氧化碳法和强酸法模拟海水酸化效应,研究两种海水酸化模式对中间球海胆早期发育及存活的影响。试验结果显示,两种海水酸化模式均能降低中间球海胆胚胎的上浮率和四腕浮游幼体的存活率;显微观察得知,两种海水酸化模式下,中间球海... 采用二氧化碳法和强酸法模拟海水酸化效应,研究两种海水酸化模式对中间球海胆早期发育及存活的影响。试验结果显示,两种海水酸化模式均能降低中间球海胆胚胎的上浮率和四腕浮游幼体的存活率;显微观察得知,两种海水酸化模式下,中间球海胆四腕浮游幼体均出现对称性缺失和骨针外露现象,且对称性缺失程度随海水pH的降低而升高;扫描电镜观察发现,两种海水酸化模式下,中间球海胆四腕浮游幼体骨针的表面及横截面均有溶蚀痕迹,且溶蚀程度随海水pH的降低而加剧。结果提示,海水酸化可通过降低胚胎上浮率、浮游幼体存活率以及破坏幼体对称性和骨针结构影响中间球海胆的早期发育及存活。 展开更多
关键词 海水酸化 中间球海胆 早期发育 存活 骨针
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中间球海胆幼体及稚海胆生长性状的遗传参数估计 预览 被引量:3
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作者 韩奋杰 张伟杰 +4 位作者 秦宇博 陈顺 周秘 陈小慧 常亚青 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期145-149,共5页
为估计中间球海胆Strongylocentrotus intermedius幼体及稚海胆生长性状的遗传参数,采用巢式不平衡设计方法建立了44个中间球海胆全同胞家系,并测量了各家系海胆四腕幼体、六腕幼体和八腕幼体等各期浮游幼体的体长以及受精后30 d的稚海... 为估计中间球海胆Strongylocentrotus intermedius幼体及稚海胆生长性状的遗传参数,采用巢式不平衡设计方法建立了44个中间球海胆全同胞家系,并测量了各家系海胆四腕幼体、六腕幼体和八腕幼体等各期浮游幼体的体长以及受精后30 d的稚海胆壳径,采用动物模型和约束性最大似然法(REML)估计了中间球海胆幼体和稚海胆生长性状的遗传参数。结果表明:中间球海胆四腕幼体和八腕幼体体长的遗传力分别为0.705±0.373和0.538±0.444,为高度遗传力,六腕幼体体长和稚海胆壳径的遗传力均接近于0,为低度遗传力;各阶段幼体体长和稚海胆壳径的共同环境效应为0.048~0.352;各阶段幼体体长间遗传相关为正相关(0.300~0.518),各阶段幼体体长与稚海胆壳径间的遗传相关为负相关(-0.152~-0.435)。本研究结果可为制定中间球海胆的早期选择和间接选择选育方案提供参考依据。 展开更多
关键词 中间球海胆 幼体 稚海胆 生长性状 遗传参数
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雌二醇对中间球海胆生长、性腺发育及胆固醇代谢的影响 预览 被引量:2
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作者 吕德亮 李敏 +2 位作者 吴反修 左然涛 常亚青 《大连海洋大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期501-508,共8页
为探讨雌二醇(estradiol)对体质量为(13.58±0.79)g的中间球海胆Strongylocentrotus intermedius性腺发育的调控机制,在室内水槽(200 L)中进行为期60 d的注射试验。试验分对照组、雌二醇(5μg/m L)注射组和他莫昔芬(tamoxi... 为探讨雌二醇(estradiol)对体质量为(13.58±0.79)g的中间球海胆Strongylocentrotus intermedius性腺发育的调控机制,在室内水槽(200 L)中进行为期60 d的注射试验。试验分对照组、雌二醇(5μg/m L)注射组和他莫昔芬(tamoxifen)(25μg/m L)注射组,每3 d注射1次,并于第30天和第60天时两次取样测定海胆增重率(WGR)、性腺指数(GSI)、性类固醇激素含量和胆固醇合成相关基因的表达量。结果表明:注射雌二醇或他莫昔芬并未显著影响海胆的生长速率,却显著影响试验末期海胆的性腺指数,雌二醇组海胆性腺指数显著高于对照组和他莫昔芬组(P〈0.05);试验结束时,雌二醇组和他莫昔芬组海胆体腔液中雌二醇含量和性腺中胆固醇含量均显著高于对照组(P〈0.05),雌二醇组海胆性腺中雌二醇含量最高,显著高于对照组和他莫昔芬组(P〈0.05);雌二醇组海胆性腺和消化道中主要卵黄蛋白(MYP)基因均高于对照组,但均未有显著性差异(P〉0.05);雌二醇组和他莫昔芬组海胆性腺和消化道中性类固醇激素合成关键基因CYP17和胆固醇合成关键基因CYP51表达量均显著高于对照组(P〈0.05);他莫昔芬组海胆性腺中CYP17和CYP51基因表达量均低于雌二醇组(P〉0.05)。研究表明,注射雌二醇显著提高了中间球海胆性腺指数、体内雌二醇含量和雌二醇合成相关基因的表达量,这可能是雌二醇促进海胆性腺发育的调控机制。 展开更多
关键词 中间球海胆 类固醇激素 基因表达 性腺发育
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中间球海胆消化酶和抗氧化酶活力的研究 预览 被引量:1
11
作者 左然涛 侯受权 +1 位作者 李广 常亚青 《饲料工业》 北大核心 2016年第22期26-29,共4页
为了分析中间球海胆的食性及基本生理特性,研究以中间球海胆幼胆为研究对象,测定了养殖条件下摄食海带海胆消化道中消化酶种类、活力及体腔液中抗氧化酶的活力。结果显示:①中间球海胆消化道中具有胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶,其活力... 为了分析中间球海胆的食性及基本生理特性,研究以中间球海胆幼胆为研究对象,测定了养殖条件下摄食海带海胆消化道中消化酶种类、活力及体腔液中抗氧化酶的活力。结果显示:①中间球海胆消化道中具有胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶,其活力分别为(7.72±0.92)、(17.71±1.37)U/mgpro和(1.98±0.31)U/mgpro.②体腔液中超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化力(AOC)和过氧化氢酶(CAT)活力分别为(20.36±0.62)、(2.29±0.44)、(8.08±2.02)U/ml。结果表明:中间球海胆对蛋白质、淀粉和脂肪具有较强消化能力且具有较强抗氧化能力,这为中间球海胆专用配合饲料的开发提供了理论依据,同时有助于通过营养手段调控其抗应激能力。 展开更多
关键词 中间球海胆 胃蛋白酶 淀粉酶 脂肪酶 超氧化物歧化酶 总抗氧化力 过氧化氢酶
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Isolation of Immune-Relating 185/333-1 Gene from Sea Urchin (Strongylocentrotus intermedius) and Its Expression Analysis 预览
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作者 WANG Yinan DING Jun +2 位作者 LIU Yang LIU Xuewei CHANG Yaqing 《中国海洋大学学报:英文版》 SCIE CAS 2016年第1期163-170,共8页
The 185/333 gene family involved in the immune response of sea urchin.One 185/333 c DNA was isolated from Strongylocentrotus intermedius,and named as Si185/333-1.Its full-length c DNA was 1246 bp in length with a 906 ... The 185/333 gene family involved in the immune response of sea urchin.One 185/333 c DNA was isolated from Strongylocentrotus intermedius,and named as Si185/333-1.Its full-length c DNA was 1246 bp in length with a 906 bp open reading frame encoding a protein of 301 aa.The molecular weight of the deduced protein was approximately 33.1 k D with an estimated PI of p H 6.26.Si185/333-1 had high identities(70%–86%) to most of Sp185/333.An extraordinary identity of 92% was found between Si185/333-1 and Sp185/333 C5 alpha(ABR22474).Moderate identities(63%–64%) were displayed between Si185/333-1 and He185/333.Si185/333-1 had similar structure to Sp185/333.A signal-peptide,a gly-rich region and a his-rich region were found in its secondary structure.RGD motif was found in gly-rich region at position 116–118aa.There was no transmembrane region in Si185/333-1.The element pattern of Si185/333-1 is different from any available pattern that identified in Sp185/333.Si185/333-1 clustered together with pattern C Sp185/333 in phylogenetic tree.The Si185/333-1 m RNA could be detected in tissues including peristomial membrane,coelomocytes,muscle of Aristotles lantern,gut and tube feet,with the highest expression level detected in peristomial membrane and a relatively low expression in ovary and testis.The temporal expression of Si185/333-1 in peristomial membrane and coelomocytes were up-regulated after bacterial,β-D-glucan and ds RNA challenges,reaching the maximum at 12 h post-stimulation.The up-regulation was more obvious in coelomocytes,and bacterial challenge triggered the highest response.These results proved that 185/333-1 gene was involved in the immune defense of S.intermedius,while more studies were necessary for its function in S.intermedius immunity. 展开更多
关键词 中间球海胆 免疫相关基因 表达分析 全长CDNA 分离 体腔细胞 二级结构 细胞检测
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饲料脂肪水平对中间球海胆幼胆生长、消化酶和热胁迫后抗氧化酶活力的影响 预览 被引量:5
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作者 侯受权 左然涛 +4 位作者 常亚青 李广 宋坚 张伟杰 赵冲 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期538-543,共6页
为了确定中间球海胆Strongylocentrotus intermedius幼胆饲料中适宜的脂肪水平,采用摄食生长试验探讨了饲料中脂肪水平(3%、6%、9%、12%和15%)对海胆幼胆存活、生长、消化酶和热胁迫后抗氧化酶活力的影响,试验共进行96 d。结果表明:... 为了确定中间球海胆Strongylocentrotus intermedius幼胆饲料中适宜的脂肪水平,采用摄食生长试验探讨了饲料中脂肪水平(3%、6%、9%、12%和15%)对海胆幼胆存活、生长、消化酶和热胁迫后抗氧化酶活力的影响,试验共进行96 d。结果表明:试验结束时,6%饲料脂肪水平组海胆增重率最高,显著高于15%脂肪组(P〈0.05);随着饲料脂肪水平的升高,中间球海胆消化道中脂肪酶活力显著升高(P〈0.05),淀粉酶活力显著下降(P〈0.05),胃蛋白酶活力有下降趋势(P〉0.05);饲料脂肪水平显著影响热胁迫后海胆体腔液中抗氧化酶活力,其中热胁迫2 h后,12%脂肪组超氧化物歧化酶(SOD)活力最高,显著高于15%脂肪组(P〈0.05);热胁迫6 h后,海胆体腔液过氧化氢酶(CAT)活力最高值出现在6%脂肪组,且高于12%和15%脂肪组。研究表明,6%饲料脂肪水平时中间球海胆幼胆的生长速率最快,6%~12%饲料脂肪水平能够显著提高热胁迫后海胆的抗氧化能力。 展开更多
关键词 中间球海胆 饲料脂肪水平 消化酶 抗氧化酶
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中间球海胆(♀)与光棘球海胆(♂)种间杂交及自繁后代生长与表型特征比较 预览 被引量:1
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作者 亓守冰 张伟杰 +4 位作者 常亚青 田晓飞 王海峰 赵帅 经晨晨 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期461-466,共6页
为了解中间球海胆Strongylocentrotus intermedius ( Si)与光棘球海胆Strongylocentrotus nudus ( Sn)杂交后代的杂种优势及表型特征,以同期培育的中间球海胆(♀)与光棘球海胆(♂)种间杂交子一代( Si♀&#215; Sn♂)幼胆及自... 为了解中间球海胆Strongylocentrotus intermedius ( Si)与光棘球海胆Strongylocentrotus nudus ( Sn)杂交后代的杂种优势及表型特征,以同期培育的中间球海胆(♀)与光棘球海胆(♂)种间杂交子一代( Si♀&#215; Sn♂)幼胆及自繁子一代幼胆为研究对象,对3种海胆的成活率、生长表现(生长速度和表型变异)和表型特征(管足色素细胞数量、骨片形状、棘刺的颜色和长度)进行了比较。结果表明:经过90 d的养殖,中间球海胆和光棘球海胆的最终成活率均为100%,杂交海胆为97%,但3种海胆间无显著性差异( P〉0.05);在0~60 d的养殖范围内,杂交海胆具有最快的特定生长率(4.00%/d),且显著高于中间球海胆(2.91%/d)和光棘球海胆(3.15%/d)(P〈0.05),而后两者之间无显著性差异(P〉0.05),60~90 d时,3种海胆的特定生长率之间均无显著性差异( P〈0.05);试验结束时,杂交海胆体质量的变异系数(76.12%)显著高于光棘球海胆(63.81%)和中间球海胆(52.05%)(P〈0.05),表明种间杂交显著增加了后代的遗传变异;光棘球海胆管足中色素细胞数量最多,中间球海胆最少,杂交海胆的色素细胞数量介于父母本之间;杂交海胆棘刺为浅紫色,介于中间球海胆的白色和紫海胆的深紫色之间,而棘长较父母本细短;与棘色和管足颜色不同,杂交海胆骨片两端的突起产生了新的变异。研究表明,在幼胆期杂交海胆的表型特征明显区别于父母本,具有更快的生长速度和更高的变异水平,具有较高的育种价值。 展开更多
关键词 中间球海胆 光棘球海胆 种间杂交 生长 变异 表型特征
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Cu(Ⅱ)对海胆免疫相关酶活性的影响及其在壳中蓄积量的研究 预览 被引量:3
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作者 丁文君 丁君 孟凌峰 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期165-169,共5页
为研究环境中Cu(Ⅱ)对经济棘皮动物的生理影响,以5月龄和15月龄中间球海胆Strongylocentrotus intermdius为试验材料,根据国家海水水质标准(GB3097—1997)中对Cu(Ⅱ)浓度的限定值设置试验浓度,测定中间球海胆的24 h半致死浓度(24... 为研究环境中Cu(Ⅱ)对经济棘皮动物的生理影响,以5月龄和15月龄中间球海胆Strongylocentrotus intermdius为试验材料,根据国家海水水质标准(GB3097—1997)中对Cu(Ⅱ)浓度的限定值设置试验浓度,测定中间球海胆的24 h半致死浓度(24 h LC50)、体腔液中免疫相关酶活性、丙二醛(MDA)含量和壳中Cu(Ⅱ)蓄积量。结果表明:随着Cu(Ⅱ)浓度的升高海胆死亡率明显增加,Cu(Ⅱ)对中间球海胆的24 h LC50为0.247 mg/L;0.012 mg/L浓度组Cu(Ⅱ)对海胆体腔液中超氧化物歧化酶(SOD)活性表现为诱导—抑制效应,其他浓度组Cu(Ⅱ)对SOD活性均表现为抑制效应,随着Cu(Ⅱ)浓度的升高SOD活性呈先升高再下降的趋势;Cu(Ⅱ)对各浓度组内CAT活性表现为诱导—抑制效应,30 d时各浓度组CAT活性均降到最低且显著低于对照组(P〈0.05);随着Cu(Ⅱ)浓度的升高海胆体腔液中过氧化物酶(POD)活性表现为升高趋势,30 d时各浓度组POD活性均达到最高且显著高于对照组(P〈0.05);0.012 mg/L浓度组Cu(Ⅱ)对海胆体腔液中溶菌酶(LZM)活性表现为诱导—抑制效应,其他浓度组内Cu(Ⅱ)对LZM活性表现为诱导效应;各浓度组内Cu(Ⅱ)对海胆体腔液中丙二醛(MDA)含量均表现为诱导—抑制效应;中间球海胆壳对Cu(Ⅱ)的蓄积量随着处理时间的延长逐渐升高。本研究结果可为环境中Cu(Ⅱ)对海胆的生理影响研究及利用海洋生物方法检测海洋中Cu(Ⅱ)污染的情况提供参考。 展开更多
关键词 海胆 Cu(Ⅱ) 免疫相关酶 半致死浓度 丙二醛 蓄积量
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饵料、家系及二者交互作用对中间球海胆生长、摄食与变异的影响 预览 被引量:3
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作者 王海峰 赵帅 +4 位作者 张伟杰 经晨晨 左然涛 侯受权 常亚青 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1186-1194,共9页
为研究饵料、家系及二者交互作用对中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)生长、摄食及变异的影响,利用两种饵料—裙带菜(Undaria pinnitafida)和配合饲料,对6个中间球海胆全同胞家系进行了60 d投喂,实验结束时测量了实验海... 为研究饵料、家系及二者交互作用对中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)生长、摄食及变异的影响,利用两种饵料—裙带菜(Undaria pinnitafida)和配合饲料,对6个中间球海胆全同胞家系进行了60 d投喂,实验结束时测量了实验海胆的终末体重(FBW)和总摄食量,并计算了体重特定生长率(SGR)、饵料系数(FCR)和体重变异系数的变化(ΔCV),利用双因素及单因素方差分析的方法,检验了饵料、家系及二者交互作用对FBW、SGR、FCR及ΔCV的影响。结果表明,饵料与家系的交互作用对FBW和ΔCV无显著影响,摄食裙带菜的海胆较摄食配合饲料的海胆在终末体重(FBW)和整齐度(ΔCV)上表现出极显著的优势(P〈0.01),不同家系间海胆的FBW和ΔCV也有显著差异(P〈0.05)。饵料与家系的交互作用对体重SGR和FCR均有极显著影响(P〈0.01),在各家系内,裙带菜投喂下海胆体重SGR均极显著优于配合饲料投喂(P〈0.01);饵料系数(FCR)均极显著高于配合饲料投喂(P〈0.01);对于每种饵料,不同家系间SGR也均具有显著差异(P〈0.05),FCR亦是如此。两种饵料下家系SGR排位基本一致,说明家系与饵料在SGR上的交互作用是由于不同饵料下家系对SGR的影响程度有差异造成的,而家系FCR排位出现了较大变化则说明FCR受到交互作用的影响是由于不同饵料对不同家系的投喂效果不同造成的。本研究结果表明,家系选择可用于对中间球海胆生长、饵料系数和整齐度的遗传改良,饵料对这些性状的表现有显著的影响,对饵料系数进行家系选育时应注意家系与饵料的交互作用问题。 展开更多
关键词 中间球海胆 家系 饵料 交互作用 生长 摄食 变异
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高温诱导对中间球海胆hsp70基因和hsp90基因的表达研究 预览 被引量:1
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作者 白雪秋 庞震国 +3 位作者 张伟杰 常亚青 高银雪 丁君 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1034-1039,共6页
以中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)作为实验对象,研究其在高温胁迫条件下热休克蛋白基因中hsp70基因和hsp90基因(以下简称hsp70和hsp90)的响应。采用荧光实时定量PCR技术,检测hsp70和hsp90在40枚中间球海胆的不同组织... 以中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)作为实验对象,研究其在高温胁迫条件下热休克蛋白基因中hsp70基因和hsp90基因(以下简称hsp70和hsp90)的响应。采用荧光实时定量PCR技术,检测hsp70和hsp90在40枚中间球海胆的不同组织(管足、体腔细胞、肠、性腺和口器)中的相对表达量,以及在海胆耐热家系和对照家系(共240枚)的管足组织中的相对表达量。结果显示:(1)中间球海胆的各组织中均有hsp70和hsp90基因的表达,且对温度急剧变化均有应答。高温诱导过程中,海胆管足、体腔细胞和肠组织中hsp70和hsp90基因的相对表达量经过6h(29°C)达到最大值且显著高于其初始值(P〈0.05);性腺中hsp70和hsp90基因的相对表达量分别经过12h(24°C)和24h(22°C)达到最大值;口器中两个基因的相对表达量都经过12h达到最大值。(2)高温诱导过程中,hsp70和hsp90基因在海胆体腔细胞和管足中的表达趋势相似,且表达量在各时间点的相对差异不显著(P〉0.05)。(3)高温诱导过程中,hsp70基因在海胆耐热家系和对照家系中的表达趋势均为先升高后降低,且耐热家系和对照家系间各时间点的相对表达量没有显著差异(P〉0.05);hsp90基因的表达量随温度的变化呈现先升高后降低的趋势,诱导12h时在2个耐热家系中的相对表达量显著高于2个对照家系(P〈0.05)。结果表明,温度变化会显著影响中间球海胆hsp90基因的表达,hsp90基因可作为中间球海胆耐热品系选育的候选指示因子。 展开更多
关键词 中间球海胆 HSP70 HSP90 温度 实时荧光定量PCR
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中间球海胆与紫海胆种间杂交的受精、孵化和幼体发育研究 预览 被引量:2
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作者 经晨晨 张伟杰 +6 位作者 宋坚 亓守冰 周秘 赵帅 王海峰 马里 常亚青 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期620-626,共7页
为探明中间球海胆Strongylocentrotus intermedius(Si)与紫海胆Anthocidaris crassispina(Ac)种间杂交的受精、孵化和幼体发育规律,对中间球海胆和紫海胆进行种间杂交,检测了不同水温和精子种类对海胆受精卵卵径、受精率和孵化率的... 为探明中间球海胆Strongylocentrotus intermedius(Si)与紫海胆Anthocidaris crassispina(Ac)种间杂交的受精、孵化和幼体发育规律,对中间球海胆和紫海胆进行种间杂交,检测了不同水温和精子种类对海胆受精卵卵径、受精率和孵化率的影响,并对自繁和杂交海胆幼体发育时间和体长进行了测定和比较。结果表明:受精前中间球海胆卵径(86.64μm±4.21μm)极显著小于紫海胆(95.62μm±3.80μm)(P〈0.01);在21℃和24℃下,自交组Si♀×Si♂受精卵卵径显著或极显著大于杂交组Si♀×Ac♂(P〈0.05或P〈0.01),而杂交组Ac♀×Si♂和自交组Ac♀×Ac♂受精卵卵径则不受水温(24℃和26℃)的影响;相同温度下,种间杂交受精率均极显著低于自繁受精率(P〈0.01),Si♀×Si♂组(或Si♀×Ac♂组)受精率在21℃和24℃下无显著性差异(P〉0.05),而杂交组Ac♀×Si♂在26℃下的受精率极显著高于24℃下(分别为38.91%±8.25%和0.79%±1.11%)(P〈0.01);杂交组Si♀×Ac♂在21℃下的孵化率(87.96%±4.18%)极显著低于自交组Si♀×Si♂(99.64%±0.81%)(P〈0.01),而在24℃下,这两组海胆均不能孵化,杂交组Ac♀×Si♂在24℃下的孵化率(9.32%±4.33%)极显著低于自交组Ac♀×Ac♂(100%)(P〈0.01),而在26℃下则不能孵化;Ac♀×Ac♂组和Ac♀×Si♂组在24℃下经5 d即可发育至八腕幼体,Si♀×Ac♂组在21℃下经9 d发育至八腕幼体,Si♀×Si♂在21℃下经12 d发育至八腕幼体。研究表明,杂交组Si♀×Ac♂适宜在24℃下受精,21℃下孵化,而杂交组Ac♀×Si♂则适宜在26℃下受精,24℃下孵化,杂交组Ac♀×Si♂可能更具备高温耐受能力,可作为耐高温品种培育的重点材料进行进一步研究。 展开更多
关键词 中间球海胆 紫海胆 杂交 受精 孵化
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海胆共附生菌DNC2的鉴定及其发酵条件优化 预览
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作者 李振 张付云 +2 位作者 李伟 赵宇 卢航 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2015年第1期146-150,共5页
为对海胆共附生菌DNC2进行开发利用,对该菌株进行形态、生理生化以及16SrDNA序列测定,并以抑菌活性为考察指标,对其发酵条件进行优化。结果表明:海胆共附生菌DNC2属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);用牛肉膏为0.3%,蛋白胨为0.6%,... 为对海胆共附生菌DNC2进行开发利用,对该菌株进行形态、生理生化以及16SrDNA序列测定,并以抑菌活性为考察指标,对其发酵条件进行优化。结果表明:海胆共附生菌DNC2属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);用牛肉膏为0.3%,蛋白胨为0.6%,初始pH值9.0的培养基,35℃发酵5d时抑菌活性最优,且该条件的菌株发酵液对8种真菌指示菌抑菌效果良好,抑制率分别为苹果粉红92%,玉米早疫、番茄灰霉89%,辣椒青枯88%,毛霉菌81%,西瓜枯萎73%,棉花枯萎72%,串珠镰刀菌52%。 展开更多
关键词 海胆 共附芽孢杆菌 鉴定 抑菌活性 发酵条件
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温度对海刺猬(Glyptocidariscrenularis)和中间球海胆(Strongylocentrotusintermedius)遮蔽行为的影响 预览 被引量:1
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作者 赵冲 罗世滨 +2 位作者 周海森 田晓飞 常亚青 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期84-90,522共7页
本文以贝壳作为遮蔽材料,研究不同温度水平和温度变化下海刺猬(Glyptocidaris crenularis)和中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)的遮蔽行为。温度实验结果表明:海刺猬在5°C条件下具有遮蔽行为的个体数以及利用的贝壳数显... 本文以贝壳作为遮蔽材料,研究不同温度水平和温度变化下海刺猬(Glyptocidaris crenularis)和中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)的遮蔽行为。温度实验结果表明:海刺猬在5°C条件下具有遮蔽行为的个体数以及利用的贝壳数显著少于15°C和25°C两组(P【0.05),而后两组没有显著差异(P】0.05);中间球海胆在25°C下具有遮蔽行为的个体数以及利用的贝壳数要显著少于15°C和5°C两组(P【0.05),而后两组没有显著差异(P】0.05)。温度变化的结果表明:5°C→20°C组海刺猬遮蔽行为所利用的贝壳数最少(P【0.05),另外两组没有显著差异(P】0.05);25°C→20°C组中间球海胆遮蔽行为所利用的贝壳数最少(P【0.05),另外两组差异不显著(P】0.05)。本研究为海胆行为生态学提供了新的思路和信息。 展开更多
关键词 中间球海胆 海刺猬 遮蔽能力 温度变化 显著差异 不同温度 行为学 个体数 贝壳 温度条件
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