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固本防哮饮对小鼠哮喘缓解期TLR4及TLR7的调节作用
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作者 卓月 袁雪晶 纪建建 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期57-63,共7页
目的:观察固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠模型Toll-样受体(TLR) 4,TLR7,核转录因子-κB p65(NF-κB p65),NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的调节作用,探讨固本防哮饮治疗哮喘缓解期的机制。方法:呼吸道合胞病毒(RSV)联合鸡卵蛋白(OVA)对3周龄BAL... 目的:观察固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠模型Toll-样受体(TLR) 4,TLR7,核转录因子-κB p65(NF-κB p65),NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的调节作用,探讨固本防哮饮治疗哮喘缓解期的机制。方法:呼吸道合胞病毒(RSV)联合鸡卵蛋白(OVA)对3周龄BALB/c小鼠制备哮喘缓解期模型,将60只小鼠分为空白组、模型组、地塞米松组(0. 001 g·kg-1)以及固本防哮饮低、中、高剂量(6. 5,13,26 g·kg-1)组,分别进行干预,共给药28 d,每天1次。给药结束后处死小鼠,苏木素-伊红(HE)染色观察哮喘小鼠肺组织病理形态学变化,并对肺部炎症情况进行评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肺组织TLR4,TLR7,IκBα及肺组织细胞核内NF-κB p65蛋白表达水平;免疫荧光共聚焦观察NF-κB p65在细胞核表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠肺组织有明显炎症细胞浸润及支气管狭窄(P <0. 01),同时小鼠肺组织细胞核内NF-κB p65分布显著增多(P <0. 01),表达明显增高(P <0. 05),TLR4,TLR7,IκBα蛋白表达明显降低(P <0. 05);与模型组比较,固本防哮饮各剂量组能显著缓解小鼠肺组织炎症浸润(P <0. 01),降低肺组织核蛋白NF-κB p65的表达(P <0. 01),核蛋白NF-κB p65入核情况减轻(P <0. 01),同时显著增加TLR4,TLR7,IκBα蛋白的表达(P <0. 01)。结论:固本防哮饮能够缓解气道炎症,并且可能是通过调节TLR4,TLR7,NF-κB p65,IκBα实现其治疗作用。 展开更多
关键词 固本防哮饮 玉屏风散 哮喘缓解期 Toll-样受体(TLR) 4 TLR7
TLR7激动剂咪喹莫特对MRL/lpr狼疮小鼠RORγt^+Th17细胞的影响
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作者 沈春秀 段相国 +4 位作者 孙鹏 兰亚如 吴丽华 王琦 苏春霞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期385-391,共7页
目的初步探讨TLR7激动剂咪喹莫特干预RORγt^+Th17细胞治疗MRL/lpr狼疮小鼠的免疫机理。方法将16周Balb/c正常小鼠和16周MRL/lpr狼疮小鼠随机分为生理盐水组、0.05 mg/kg咪喹莫特组、1 mg/kg地塞米组,每组5只,腹腔注射给药,1次/d,连续4... 目的初步探讨TLR7激动剂咪喹莫特干预RORγt^+Th17细胞治疗MRL/lpr狼疮小鼠的免疫机理。方法将16周Balb/c正常小鼠和16周MRL/lpr狼疮小鼠随机分为生理盐水组、0.05 mg/kg咪喹莫特组、1 mg/kg地塞米组,每组5只,腹腔注射给药,1次/d,连续4周;采用流式细胞术检测小鼠脾脏中Th17(CD4^+IL-17A^+)细胞的比例和转录因子RORγt(RORγt^+Th17细胞)的表达水平,并分析细胞因子IL-17A(CD4^+IL-17A^+)和转录因子RORγt的相关性。结果 Balb/c正常小鼠中,咪喹莫特能降低脾脏中Th17细胞的比例(P<0.05),对Th17细胞转录因子RORγt的表达有下调趋势,但无统计学差异(P=0.616);MRL/lpr狼疮小鼠中,咪喹莫特能明显下调小鼠脾脏中Th17细胞的比例(P<0.01)和转录因子RORγt的表达(P<0.01);细胞因子IL-17A和转录因子RORγt呈显著的正相关性(r=0.911,P<0.000 1)。结论 TLR7激动剂咪喹莫特下调MRL/lpr狼疮小鼠脾脏中Th17细胞与转录因子RORγt的表达,降低IL-17的分泌,减缓SLE的发生,为咪喹莫特有望成为治疗SLE的药物提供了新的实验数据。 展开更多
关键词 TLR7 咪喹莫特 系统性红斑狼疮 TH17细胞 IL-17A RORΓT
TLR7在1型糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用研究
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作者 黄亚医 黄婷 +2 位作者 赵博 汪华新 肖业达 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第3期411-415,405共6页
目的:探讨Toll样受体7(TLR7)介导的My D88/NF-κB信号通路在1型糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为3组(n=6),糖尿病假手术组(DS),糖尿病缺血再灌注组(DIR),糖尿病缺血再灌注+氯喹预处理组(DIR+CQ)。采用腹腔... 目的:探讨Toll样受体7(TLR7)介导的My D88/NF-κB信号通路在1型糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为3组(n=6),糖尿病假手术组(DS),糖尿病缺血再灌注组(DIR),糖尿病缺血再灌注+氯喹预处理组(DIR+CQ)。采用腹腔注射链尿佐菌素65 mg/kg建立糖尿病模型,TLR7抑制剂氯喹预处理于糖尿病模型成功后第3周0.5%氯喹40 mg/kg进行腹腔注射,连续给药7天。于第四周采用双侧肾蒂夹闭25 min,再灌注48 h建立肾缺血再灌注损伤模型。取大鼠肾脏HE染色观察大鼠病理学结果,血标本测定血尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)水平,ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测TLR7,My D88和NF-κB蛋白表达。结果:与DS组相比,DIR组肾小管肿胀,间质水肿,刷状缘丢失,空泡变性坏死,Paller评分升高(P<0.01)。与DIR组相比,氯喹预处理可以改善肾损伤(P=0.017);与DS组相比,DIR组BUN,Scr,IL-6,TNF-α,细胞调亡指数(Apoptosis%),TLR7,My D88,NF-κB增高(P<0.05);与DIR组相比,DIR+CQ组BUN,Scr,IL-6,TNF-α,Apoptosis%,TLR7,My D88,NF-κB降低(P<0.05)。结论:TLR7介导的My D88/NF-κB信号通路参与糖尿病肾缺血再灌注损伤,氯喹通过抑制TLR7表达,阻断My D88/NF-κB信号通路,降低炎症反应,从而减轻1型糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 TLR7 糖尿病 肾缺血再灌注损伤
加味防己黄芪汤对原发性肾病综合征微炎状态及Toll样受体相关蛋白的影响 预览
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作者 宋菊 《陕西中医》 2019年第4期478-480,共3页
目的:观察加味防己黄芪汤对脾肾阳虚型原发性肾病综合征的临床疗效及对相关指标的影响。方法:随机选取脾肾阳虚型原发性肾病综合征患者100例,随机分为观察组和对照组各50例,其中对照组予西医常规治疗,观察组在此基础上给予加味防己黄芪... 目的:观察加味防己黄芪汤对脾肾阳虚型原发性肾病综合征的临床疗效及对相关指标的影响。方法:随机选取脾肾阳虚型原发性肾病综合征患者100例,随机分为观察组和对照组各50例,其中对照组予西医常规治疗,观察组在此基础上给予加味防己黄芪汤口服治疗,分别观察治疗前、后两组临床症状、生化指标(24h尿蛋白、Alb、CHOL)、炎性指标(hs-CRP、IL-8)、凝血状态(PT、PLT)及Toll样受体相关蛋白(TLR4和TLR7)的变化。结果:①观察组总有效率为84.00%,而对照组总有效率为66.00%,两组总有效率具有统计学意义(P<0.05)。②治疗24h尿蛋白和CHOL均明显减少(P<0.05),而Alb显著升高(P<0.05),其中观察组24h尿蛋白和CHOL的下降程度及Alb的提高程度均优于对照组(P<0.05)。③治疗后两组Hs-CRP和IL-8均明显下调(P<0.05),观察组Hs-CRP和IL-8的下调程度优于对照组(P<0.05)。④治疗后两组PT均明显增加(P<0.05),观察组PT的增加程度优于对照组(P<0.05),而PLT治疗后两组均减小(P<0.05),然两组各自PLT的减小程度未见明显差异(P>0.05)。⑤治疗后两组TLR4和TLR7均明显降低(P<0.05),观察组TLR4和TLR7降低程度优于对照组(P<0.05)。结论:在成人原发性肾病综合征的治疗中,加味防己黄芪汤能有效缓解其临床症状提高疗效,其疗效机制可能与改善患者微炎状态、凝血状态和Toll样受体相关蛋白有关。 展开更多
关键词 加味防己黄芪汤 原发性肾病综合征 肾功能 微炎状态 TLR4 TLR7 PT PLT
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变应性鼻炎患者血液嗜酸性粒细胞富集群中TLR2、TLR4、TLR7和TLR9的变化及其相关性 预览
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作者 张晓文 张慧云 +2 位作者 王维 湛萌萌 何韶衡 《西安交通大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第4期537-541,572共6页
目的探讨变应性鼻炎(AR)患者血液嗜酸性粒细胞富集群中TLR2、TLR4、TLR7和TLR9的变化及其相关性,探索其在AR中的发病机制。方法收集健康人和AR患者的外周静脉血,用蒿草花粉、尘螨和梧桐花粉过敏原提取液刺激,流式细胞术检测刺激前后... 目的探讨变应性鼻炎(AR)患者血液嗜酸性粒细胞富集群中TLR2、TLR4、TLR7和TLR9的变化及其相关性,探索其在AR中的发病机制。方法收集健康人和AR患者的外周静脉血,用蒿草花粉、尘螨和梧桐花粉过敏原提取液刺激,流式细胞术检测刺激前后嗜酸性粒细胞富集群中TLR2、TLR4、TLR7和TLR9的表达,SPSS软件分析TLR2^+、TLR4^+、TLR7^+和TLR9^+嗜酸性粒细胞的相关性。结果与健康组比较,AR患者未经过敏原刺激时嗜酸性粒细胞富集群中TLR2^+细胞的比例降低4%,TLR4^+细胞的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)升高20%,TLR7^+细胞的比例升高4.8倍。蒿草花粉过敏原提取液诱导AR患者TLR2^+嗜酸性粒细胞的比例升高7.8%。此外,AR患者血液TLR2^+和TLR4^+、TLR2^+和TLR7^+、TLR7^+和TLR9^+的嗜酸性粒细胞均呈中度相关(Pearson相关系数分别为r=-0.670,P〈0.01;r=-0.430,P〈0.05;r=0.446,P〈0.05)。而健康人嗜酸性粒细胞富集群中TLR2、TLR4、TLR7和TLR9的变化在过敏原刺激前后差异均无统计学意义。结论嗜酸性粒细胞源的TLR2、TLR4和TLR7可能在AR中起重要作用,TLR2、TLR4和TLR7可能是治疗AR的潜在靶点。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 嗜酸性粒细胞 TLR2 TLR4 TLR7 TLR9
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麻黄汤体外抗甲型H1N1流感病毒作用及机制研究
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作者 魏文扬 万海同 +2 位作者 虞立 卢亦愚 何昱 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第3期563-570,共8页
为探讨麻黄汤体外抗甲型H1N1流感病毒的作用及可能机制,该研究以感染甲型H1N1流感病毒的狗肾(MDCK)细胞为载体,细胞病变(CPE)法测定甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株(A/PR8/34)对MDCK细胞的半数细胞培养物感染剂量(TCID(50));采用... 为探讨麻黄汤体外抗甲型H1N1流感病毒的作用及可能机制,该研究以感染甲型H1N1流感病毒的狗肾(MDCK)细胞为载体,细胞病变(CPE)法测定甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株(A/PR8/34)对MDCK细胞的半数细胞培养物感染剂量(TCID(50));采用阻断流感病毒侵入宿主细胞和抗流感病毒生物合成2种不同方式给药,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定麻黄汤体外抗甲型H1N1流感病毒的有效率(ER)、半数抑制浓度(EC(50))和治疗指数(TI);并且通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测技术,分别在给药后24,48 h,考察麻黄汤对感染甲型H1N1流感病毒的MDCK细胞中病毒载量以及TLR4,TLR7,My D88,TRAF6 mRNA表达的影响。实验结果显示,甲型H1N1流感病毒对MDCK细胞的TCID50为1×10^-4.32/mL;2种给药方式抗流感病毒的EC50分别为4.92,1.59 g·L^-1,TI分别为12.53,38.78,并且当质量浓度为5.00 g·L^-1时,麻黄汤抗流感病毒的ER分别为50.21%和98.41%,说明麻黄汤可以阻断流感病毒侵入宿主细胞,并可显著抑制流感病毒在细胞内的生物合成;同时,相比于病毒组,给药后24,48 h麻黄汤各剂量组的病毒载量表达均显著降低,高、中剂量组显著下调了细胞中TLR4,TLR7,My D88,TRAF6 mRNA的表达水平,从而表明麻黄汤发挥抗流感病毒的作用机制,可能与其抑制细胞内流感病毒的复制以及TLR4和TLR7信号通路中的相关基因有关。 展开更多
关键词 麻黄汤 MDCK细胞 甲型H1N1流感病毒 病毒载量 TLR4 TLR7
TLR7、TLR9激动剂对人外周血B细胞作用的研究
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作者 龚若兰 吴静 陈同辛 《现代免疫学》 CSCD 北大核心 2018年第3期228-236,共9页
人B淋巴细胞被TLR7、TLR9配体刺激后,可被激活进行克隆性增殖,促进其行使免疫功能。本研究使用TLR7、TLR9激动剂刺激健康人PBMC。使用流式细胞术,用荧光素标记的CD19筛选出B细胞后,CFSE法测定B细胞增殖情况,Annexin V测定B细胞凋亡情况... 人B淋巴细胞被TLR7、TLR9配体刺激后,可被激活进行克隆性增殖,促进其行使免疫功能。本研究使用TLR7、TLR9激动剂刺激健康人PBMC。使用流式细胞术,用荧光素标记的CD19筛选出B细胞后,CFSE法测定B细胞增殖情况,Annexin V测定B细胞凋亡情况,并且测定B细胞表面CD80、CD86、CD40、HLA-DR表达和B细胞IgG、IgM分泌情况。结果表明,TLR7、TLR9激动剂能显著刺激B细胞增殖、表面CD80、CD86、CD40和HLA-DR的表达上调以及刺激B细胞分泌IgM。不仅如此,TLR9激动剂还能降低B细胞早期凋亡并且刺激IgG分泌增加,而TLR7激动剂在上述方面作用却不显著。TLR9信号通路在刺激B细胞增殖、降低其早期凋亡、刺激其CD80上调以及IgG分泌方面显著强于TLR7。课题组需要进一步研究以探寻TLR9与TLR7在人B细胞内受体表达和信号转导通路的区别,为TLR通路缺陷相关疾病的发病机制和治疗研究提供理论依据。 展开更多
关键词 TLR7 TLR9 B淋巴细胞 免疫功能
口蹄疫灭活病毒配合枯草芽孢杆菌对提高牛呼吸道先天免疫力的研究 预览
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作者 李乙江 张泉鹏 +11 位作者 苗海生 段体祥 张应国 杨柱昌 李世钰 冯德正 陈德寿 雷锦文 高花英 鲍晓伟 李作生 杨倩 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期934-939,共6页
本研究采用O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽孢杆菌喷鼻气雾免疫健康牛,并设单独使用枯草芽孢杆菌组、灭活病毒、常规疫苗免疫组和空白对照组,评价O型口蹄疫灭活病毒配合免疫增强剂枯草芽孢杆菌通过喷鼻气雾免疫健康牛对其呼吸道先天免疫... 本研究采用O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽孢杆菌喷鼻气雾免疫健康牛,并设单独使用枯草芽孢杆菌组、灭活病毒、常规疫苗免疫组和空白对照组,评价O型口蹄疫灭活病毒配合免疫增强剂枯草芽孢杆菌通过喷鼻气雾免疫健康牛对其呼吸道先天免疫力的影响。通过免疫组织化学染色显示,免疫后灭活病毒配合免疫增强剂试验组牛鼻黏膜与肺内支气管黏膜中TLR7的表达和CD3+淋巴细胞呈极显著增多(p〈0.01);而常规口蹄疫灭活苗对其TLR7的表达和CD3+淋巴细胞数量的影响不显著(p〉0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组相比,灭活病毒配合免疫增强剂试验组牛呼吸道组织中IL-12水平呈极显著增加(p〈0.01),IL-4和IL-10水平无明显差异(p〉0.05);而常规口蹄疫灭活苗对牛呼吸道组织中IL-4、IL-10和IL-12的影响不明显(p〉0.05)。表明O型口蹄疫灭活病毒配合枯草芽孢杆菌能够提高牛呼吸道先天免疫力。本研究为研发口蹄疫灭活病毒的鼻腔疫苗提供重要的试验数据和参考。 展开更多
关键词 O型口蹄疫灭活病毒 枯草芽孢杆菌 鼻腔免疫 呼吸道黏膜 TLR7 CD3^+淋巴细胞 细胞因子
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TLR7激活上调细胞周期蛋白表达促进Hela细胞增殖 预览
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作者 刘莉 李磊 +3 位作者 顾亚男 周宏 罗欣 张胜权 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第2期167-170,共4页
目的 探讨Toll样受体7(TLR7)信号通路激活对人宫颈癌Hela细胞周期蛋白表达及对细胞增殖的影响。方法使用不同浓度的Gardiquimod经过不同的时间刺激Hela细胞,采用MTS比色法分析其对Hela细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测同一浓度的TLR... 目的 探讨Toll样受体7(TLR7)信号通路激活对人宫颈癌Hela细胞周期蛋白表达及对细胞增殖的影响。方法使用不同浓度的Gardiquimod经过不同的时间刺激Hela细胞,采用MTS比色法分析其对Hela细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测同一浓度的TLR7激动剂Gardiquimod经过不同的时间刺激Hela细胞后对Hela细胞周期的影响;Western blot分析Gardiquimod经过不同的时间刺激Hela细胞后对细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E表达水平的影响。结果 TLR7的激活促进Hela细胞增殖,并呈时间和浓度依赖性;Gardiquimod可时间依赖性增加细胞周期在S期的比例;Cyclin B1、Cyclin E的表达水平随着Gardiquimod作用时间的增加而增加。结论 TLR7激动剂Gardiquimod可能通过上调细胞周期蛋白Cyclin B1、Cyclin E表达水平,进而促进Hela细胞增殖。 展开更多
关键词 TLR7 HELA细胞 Gardiquimod 细胞周期蛋白 细胞增殖
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雷公藤甲素对TLR7激动剂Resiquimod诱导RAW264.7巨噬细胞自噬的影响
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作者 吴艮艮 时乐 +1 位作者 沈星星 梁涛 《免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期880-885,共6页
目的 考察TLR7激动剂Resiquimod(R848)能否诱导RAW264.7细胞自噬以及雷公藤甲素对R848诱导的自噬的影响。方法 用0.01、0.1、1μg/ml的TLR7激动剂R848诱导RAW264.7细胞12、24、36 h,Western blot检测自噬蛋白LC3II/I、P62、Beclin1和A... 目的 考察TLR7激动剂Resiquimod(R848)能否诱导RAW264.7细胞自噬以及雷公藤甲素对R848诱导的自噬的影响。方法 用0.01、0.1、1μg/ml的TLR7激动剂R848诱导RAW264.7细胞12、24、36 h,Western blot检测自噬蛋白LC3II/I、P62、Beclin1和Atg5表达情况;RAW264.7细胞采用0.1μg/ml R848处理24 h诱导自噬后,给予5 ng/ml、10 ng/ml雷公藤甲素12、24 h对自噬相关蛋白LC3II/I、P62及通路蛋白AKT检测。结果 RAW264.7细胞采用0.1μg/ml R848处理24 h后自噬相关蛋白LC3II/I、P62、Beclin1和Atg5表达显著升高;加入不同质量浓度的TP后,LC3II/I、P62显著表达减少,通路蛋白AKT表达升高。结论TLR7激动剂R848能够诱导RAW264.7细胞自噬,而TP能够抑制R848诱导的自噬,并且该作用可能与PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 TLR7 系统性红斑狼疮 自噬 雷公藤甲素
康乐黄鸡TLR7基因多态性及血清INF-γ水平相关性研究
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作者 王文浩 胡琳玉 +2 位作者 彭秋玲 赖人豪 程钰 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第17期89-91,97,236共5页
为了研究康乐黄鸡TLR7基因多态性以及其与血清γ干扰素(INF-γ)浓度的相关性,试验对300只康乐黄鸡进行翅静脉采血,采用SDS法提取基因组DNA,用PCR法对康乐黄鸡TLR7基因进行扩增和测序,检测其外显子区域的单核苷酸多态性(SNPs),分析... 为了研究康乐黄鸡TLR7基因多态性以及其与血清γ干扰素(INF-γ)浓度的相关性,试验对300只康乐黄鸡进行翅静脉采血,采用SDS法提取基因组DNA,用PCR法对康乐黄鸡TLR7基因进行扩增和测序,检测其外显子区域的单核苷酸多态性(SNPs),分析康乐黄鸡群体遗传变异情况;同时测定所有试验鸡血清中INF-γ浓度,探索TLR7基因外显子突变对血清中INF-γ浓度的影响。结果表明:提取出的康乐鸡TLRT基因组DNA完整;PCR产物电泳条带清晰,片段大小为190-250 bp,其中TLR7的第二个外显子有一个SNP位点(G-A);测序结果经比对相似率为98%,结果准确;上述SNP突变后的纯合子血清INF-γ浓度显著下降(P〈0.05)。说明该SNP位点可以作为影响康乐黄鸡免疫指标INF-γ的一个重要的候选突变位点。 展开更多
关键词 康乐黄鸡 TLR7 SNP INF-γ浓度 关联分析
DEN2感染对小鼠髓源性树突状细胞膜表面分子TLR4、TLR7表达的影响
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作者 张海燕 左丽 +1 位作者 尹科 曾雯 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期508-513,共6页
目的探讨登革病毒2型(DEN2)感染对小鼠髓源性树突状细胞表面分子TLR4、TLR7表达影响。方法BALB/C乳鼠脑内接种及C6/36细胞增殖病毒,RT.PCR鉴定病毒核酸;rmGM.CSF和rmIL-4联合诱导鼠源性DC;直接免疫荧光法观察DEN2感染DC;流式... 目的探讨登革病毒2型(DEN2)感染对小鼠髓源性树突状细胞表面分子TLR4、TLR7表达影响。方法BALB/C乳鼠脑内接种及C6/36细胞增殖病毒,RT.PCR鉴定病毒核酸;rmGM.CSF和rmIL-4联合诱导鼠源性DC;直接免疫荧光法观察DEN2感染DC;流式细胞术检测DC被DEN2感染后膜表面分子CD11C、CD86、I-A/I.E类分子表达的动态变化;RT—PCR动态检测DEN2感染DC后DEN2RNA、TLR4和TLR7mRNA水平表达的变化。结果IL_4和GM.CSF诱导小鼠骨髓来源DC的纯度可达到70%;DEN2能够感染小鼠骨髓来源DC;与阴性对照组相比,接种病毒组[1×104半数组织培养感染剂量(TCID50)]的DC膜表面分子CD86、I-A/I.E的百分率差异无统计学意义。与阴性对照组相比,接种病毒组(1×105 TCID50)的DCs膜表面分子CD86、I-A/I—E的百分率差异均有统计学意义.但各组百分率的变化并未随着时间的延长呈现出明显的上升或下降的趋势;随着病毒剂量的增加,DC膜表面分子CD86、I-A/I—E的百分率呈现出上升的趋势;与阴性对照组比较,RT.PCR证明各组病毒mRNA水平随着病毒剂量的增大而逐渐升高。与阴性对照组比较,RT—PCR检测各组被DEN2感染的DCTLR4、TLR7mRNA随着病毒剂量的增加,呈现下调的趋势。结论DEN2可促进DC的成熟;DEN2感染DC后,TLR4、TLR7mRNA水平随病毒mRNA水平的增加而降低,提示TLR4、TLR7与病毒感染密切相关,在DEN致病中发挥了一定的作用和功能。 展开更多
关键词 DEN2 树突状细胞 TLR4 TLR7
Rab7基因沉默对巨噬细胞中R848激活的细胞因子及MAPK信号通路影响 预览
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作者 邹凯 云小乐 +4 位作者 康鸿斌 王雪 张晓慧 谢基明 王玉珍 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期967-970,共4页
目的:本实验阐述了Rab7对Raw264.7巨噬细胞中R848激活TLR7(Toll like receptor-7)所产生的细胞因子的影响,并探讨Rab7对MAPK信号转导的影响。方法:使用Rab7刺激silence-Rab7-Raw264.7细胞,检测R848激活TLR7后产生的TNF-α、IL-6、I... 目的:本实验阐述了Rab7对Raw264.7巨噬细胞中R848激活TLR7(Toll like receptor-7)所产生的细胞因子的影响,并探讨Rab7对MAPK信号转导的影响。方法:使用Rab7刺激silence-Rab7-Raw264.7细胞,检测R848激活TLR7后产生的TNF-α、IL-6、IFN-α、IFN-β与IP-10,通过Western blot检测MAPK的磷酸化水平,分析Rab7对MAPK的信号转导的作用。结果:Rab7对TLR7激活后细胞因子的产生具有抑制作用,Rab7对MAPK信号通路具有抑制作用。结论:本实验结果进一步说明Rab7是TLR7信号转导通路的负向调控因子,并且参与到MAPK信号通路中。 展开更多
关键词 Rab7 TLR7 RAW264.7细胞 MAPK
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咪喹莫特(imiquimod)联合树突状细胞降低荷黑素瘤小鼠调节性T细胞并增强抗肿瘤效果
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作者 任书荣 王秋波 +3 位作者 张艳丽 路翠秀 李平 李玉美 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期145-150,共6页
目的观察联合应用Toll样受体7(TLR7)激动剂咪喹莫特(imiquimod)和负载肿瘤相关抗原的树突状细胞(DC)疫苗对荷黑素瘤小鼠的治疗作用并探讨相关机制。方法培养表达卵白蛋白的B16黑素瘤(B16-OVA)细胞,注射入C57BL/6小鼠皮下制备荷... 目的观察联合应用Toll样受体7(TLR7)激动剂咪喹莫特(imiquimod)和负载肿瘤相关抗原的树突状细胞(DC)疫苗对荷黑素瘤小鼠的治疗作用并探讨相关机制。方法培养表达卵白蛋白的B16黑素瘤(B16-OVA)细胞,注射入C57BL/6小鼠皮下制备荷瘤小鼠模型。含重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-CSF)和重组小鼠白细胞介素4(rm IL-4)的培养液扩增培养骨髓来源的DC,加入OVA过夜孵育制备负载OVA的DC疫苗(OVA-DC)。荷瘤小鼠分别采用PBS、咪喹莫特局部涂抹、OVA-DC皮内注射、咪喹莫特联合OVA-DC进行治疗,数字游标卡尺测量小鼠皮下肿瘤的生长情况。流式细胞术检测荷瘤小鼠外周血CD4^+FOXP3^+调节性T细胞(Treg)的比例。采用上述方案免疫小鼠后,用CCK-8法检测小鼠脾脏淋巴细胞对B16-OVA细胞的杀伤效应。结果与单纯咪喹莫特、OVA-DC治疗组及PBS对照组相比,咪喹莫特联合OVA-DC治疗组荷瘤小鼠黑素瘤体积较小,荷瘤小鼠CD4^+细胞中FOXP3^+Treg比例明显降低。咪喹莫特联合OVA-DC免疫小鼠脾脏淋巴细胞杀伤B16-OVA肿瘤细胞能力较其他组明显增强。结论咪喹莫特联合负载抗原的DC疫苗可诱导荷瘤机体CD4^+FOXP3^+Treg比例降低并增强抗肿瘤效果。 展开更多
关键词 Toll样受体7(TLR7) 咪喹莫特(imiquimod) 树突状细胞 肿瘤免疫治疗 调节性T细胞
TLR 7在乳腺癌中的研究进展 预览 被引量:1
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作者 王芳 蔡丰丰 余自成 《转化医学电子杂志》 2017年第9期59-61,共3页
近年来随着乳腺癌的分子生物学的发展,分子靶向新型治疗方式备受关注.Toll样受体(TLRs)是先天性免疫识别的主要受体,可以起到先天性免疫,直接杀死肿瘤细胞或者激活适应性免疫系统的作用.而TLR 7与乳腺癌的发病密切相关.本文将综述TLR... 近年来随着乳腺癌的分子生物学的发展,分子靶向新型治疗方式备受关注.Toll样受体(TLRs)是先天性免疫识别的主要受体,可以起到先天性免疫,直接杀死肿瘤细胞或者激活适应性免疫系统的作用.而TLR 7与乳腺癌的发病密切相关.本文将综述TLRs在乳腺癌发生与发展中的作用机制,重点阐述TLR 7在乳腺癌研究领域的现状,为进一步探明乳腺癌发病的分子机制及临床治疗提供新思路. 展开更多
关键词 TLRS TLR 7 乳腺癌
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Toll样受体7作为新靶点在过敏性及自身免疫性疾病中的研究进展 被引量:1
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作者 张伟迅 朱俊萍 何秋水 《国际免疫学杂志》 CAS 2017年第2期210-215,共6页
Toll样受体(Toll—like receptors,TLRs)属于模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)家族,通过迅速识别入侵微生物病原相关分子模式(pathogen—associated molecular patterns,PAMP)激活下游信号传导途径,引发机... Toll样受体(Toll—like receptors,TLRs)属于模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)家族,通过迅速识别入侵微生物病原相关分子模式(pathogen—associated molecular patterns,PAMP)激活下游信号传导途径,引发机体的免疫反应,是连接固有免疫与适应性免疫的桥梁。目前在人类发现10种不同TLRs,分别命名为TLR1-TLR10。近年的研究显示,TLR7与过敏性疾病、自身免疫性疾病一过敏性哮喘、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)等有密切的联系。TLR7的激活状态影响上述疾病的发生、发展和预后。这些证据预示TLR7可能作为潜在靶点为哮喘和SLE的治疗提供新的方向。 展开更多
关键词 TOLL样受体7 过敏性哮喘 系统性红斑狼疮 免疫治疗
尖锐湿疣患者皮损中TLR7/9相关信号通路蛋白的表达 被引量:3
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作者 朱小霞 周强 +2 位作者 程浩 韩睿 朱红明 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期26-29,共4页
目的探讨TLR7/9及其信号通路在尖锐湿疣(condylomaacuminatum,CA)免疫发病机制中的可能作用。方法采用免疫组织化学sP法检测23例CA患者皮损TLR7/TLR9、IRF7和IRAK1的表达和分布情况,以13例边缘带正常皮肤的CA患者为对照,分别比... 目的探讨TLR7/9及其信号通路在尖锐湿疣(condylomaacuminatum,CA)免疫发病机制中的可能作用。方法采用免疫组织化学sP法检测23例CA患者皮损TLR7/TLR9、IRF7和IRAK1的表达和分布情况,以13例边缘带正常皮肤的CA患者为对照,分别比较分析23例CA皮损与其中13例CA皮损边缘正常皮肤,以及13例CA皮损与其边缘正常皮肤中TLR7/TLR9、IRF7和IRAK1表达密度和阳性率的差异。结果TLR9在表皮角质形成细胞和真皮乳头层部分单核样细胞胞浆内表达;TLR7、IRF7、IRAK1表达阳性细胞主要位于真皮乳头层,均为胞浆表达。尖锐湿疣患者皮损真皮乳头层TLR9表达阳性细胞密度和阳性率均比边缘正常皮肤明显增高(P〈0.05);TLR7、IRF7、IRAK1表达阳性细胞密度和阳性率与边缘正常皮肤无显著性差异(P〉0.05)。结论尖锐湿疣患者皮损中TLR9的表达水平上调,而TLR7、IRF7、IRAK1的表达水平未见明显改变。推测:尽管尖锐湿疣皮损TLR9的表达上调,但TLR7/9下游通路未被有效激活。故而未能激活抗HPV免疫反应,进而HPV病毒清除困难,并可能与临床上尖锐湿疣的易复发或迁延不愈有关。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 TLR7 TLR9 IRF7 IRAK1 乳头状瘤病毒
Activation of TLR7 increases CCND3 expression via the downregulation of miR-15b in B cells of systemic lupus erythematosus
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作者 Deshan Ren Fei Liu +5 位作者 Guanjun Dong Ming You Jianjian Ji Yahong Huang Yayi Hou Hongye Fan 《中国免疫学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第6期764-775,共12页
全身的豺狼座 erythematosus (SLE ) 是 B 房间 hyperreactivity 描绘的自体免疫的疾病。像使用费的受体 7 (TLR7 ) 表明小径反常地在 SLE B 房间被激活。CyclinD3 (CCND3 ) 在 B 房间增长,开发,和区别起一个重要作用。尽管以前的研... 全身的豺狼座 erythematosus (SLE ) 是 B 房间 hyperreactivity 描绘的自体免疫的疾病。像使用费的受体 7 (TLR7 ) 表明小径反常地在 SLE B 房间被激活。CyclinD3 (CCND3 ) 在 B 房间增长,开发,和区别起一个重要作用。尽管以前的研究为自发的幼芽的中心的发展集中了于 TLR7 的 B 房间内在的角色,在 SLE B 房间的 CCND3 上的 TLR7 的影响仍然不是清楚的。这里,我们使用了介绍薄片的 B 房间并且发现 CCND3 与 SLE 有关并且显著地在 SLE B 房间提高了。而且,我们决定 CCND3 的表示水平更高,当 miR-15b 与正常题目相比在从 SLE 病人和 B6.MRL-Faslpr/J 豺狼座老鼠的 B 房间是显著地更低的时。而且,我们证明 TLR7 的激活戏剧性地增加了 CCND3 表示,但是显著地减少了在在 vitro 的 B 房间的 miR-15b 并且我们鉴别 CCND3 是 miR-15b 的一个直接目标。为了推进,证实我们的结果,我们由谈论地对待 C57BL/6 (B6 ) 建立了另一个豺狼座模型有为 8 个星期的 TLR-7 收缩筋 imiquimod (IMQ ) 的老鼠根据以前描述的协议。Expectedly,有 IMQ 的热门治疗显著地也增加了 CCND3 并且减少在 B6 老鼠的 B 房间的 miR-15b。一起拿,我们的结果鉴别 TLR7 的激活在 B cells&#x0003B 经由 miR-15b 的 downregulation 增加了 CCND3 表示;因此,这些调查结果建议那外来的导致因素的 CCND3 表情可以在 SLE 贡献 B 房间的反常。 展开更多
关键词 CCND3 miR-15b TLR7
TOLL样受体7基因rs2897827多态性影响汉族女性中风风痰瘀阻证的发生风险 被引量:2
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作者 古联 周金英 +5 位作者 陈清 谢娟娟 严雁 梁宝云 谭金晶 唐农 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期4219-4222,共4页
目的:研究TLR7基因rs2897827多态性与中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证的易感性的关联。方法:纳入595例中风患者(风痰瘀阻证311例、气虚血瘀证284例)、605例对照者,采用实时荧光定量PCR技术检测TLR7基因表达水平,以此分析中风中医证型与T... 目的:研究TLR7基因rs2897827多态性与中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证的易感性的关联。方法:纳入595例中风患者(风痰瘀阻证311例、气虚血瘀证284例)、605例对照者,采用实时荧光定量PCR技术检测TLR7基因表达水平,以此分析中风中医证型与TLR7基因表达水平的关系。采用Sequenom Mass ARRAY中通量分型方法进行基因分型。结果:1中风风痰瘀阻证和气虚血瘀证的TLR7 m RNA显著高于对照组(P〈0.05,P〈0.01)。2TLR7基因rs2897827多态性与女性中风风痰瘀阻证的发生风险显著关联(加性模型:OR=2.08,95%CI[1.12,3.89],P=0.021;等位模型:OR=1.98,95%CI[1.09,3.62],P=0.023)。结论:TLR7基因rs2897827多态性可能影响汉族女性中风风痰瘀阻证的发生。 展开更多
关键词 中风 中医证型 TOLL样受体7 单核苷酸多态性 信使核糖核酸
TLR7激动剂Gardiquimod上调BxPC-3细胞中IL-15 mRNA表达 预览
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作者 王芳 金锐 +3 位作者 李磊 程丰伟 罗欣 张胜权 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第1期1-4,共4页
目的:研究TLR7在胰腺癌BxPC-3细胞中表达,并探讨TLR7激动剂激活TLR7后细胞因子白介素15( IL-15)的表达。方法通过 Western blot 和 Real-time PCR 分析TLR7在细胞内的表达水平;BxPC-3细胞经过不同时间点Gardiquimod(3μg/ml)的处... 目的:研究TLR7在胰腺癌BxPC-3细胞中表达,并探讨TLR7激动剂激活TLR7后细胞因子白介素15( IL-15)的表达。方法通过 Western blot 和 Real-time PCR 分析TLR7在细胞内的表达水平;BxPC-3细胞经过不同时间点Gardiquimod(3μg/ml)的处理后,Real-time PCR 分析 TLR7激活后 IL-15 mRNA 水平表达变化;Western blot 分析Gardiquimod刺激细胞后,磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶( PI3K-AKT)信号通路的变化。结果 Western blot和 Real-time PCR结果显示:与外周血单核细胞( PBMC)相比, TLR7在 BxPC-3中弱表达;Real-time PCR分析显示:Gardiquimod处理细胞后能刺激细胞中IL-15的表达;TLR7激动剂能够激活 PI3K-AKT信号通路。结论 Gardiquimod激活TLR7后能够上调 IL-15的表达,并且其激活与 PI3K-AKT信号途径相关。 展开更多
关键词 TLR7 Gardiquimod IL-15 PI3K-AKT BXPC-3
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