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硫氧还蛋白生物学功能与人类疾病的关系 预览
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作者 刘楠 黄荣 李晓晶 《当代医学》 2019年第17期189-192,共4页
硫氧还蛋白(Trx)是一种广泛存在于生物体内的,活性基团为-Cys-Gly-Pro-Cys-具有氧化还原活性二硫醇的12-kDa蛋白,它可通过其活性中心可逆性地催化多种氧化还原反应。研究表明,硫氧还蛋白在人体内许多生理生化反应中,如氧化损伤,代谢功... 硫氧还蛋白(Trx)是一种广泛存在于生物体内的,活性基团为-Cys-Gly-Pro-Cys-具有氧化还原活性二硫醇的12-kDa蛋白,它可通过其活性中心可逆性地催化多种氧化还原反应。研究表明,硫氧还蛋白在人体内许多生理生化反应中,如氧化损伤,代谢功能障碍,化学物质,感染,炎症,照射或缺氧、缺血再灌注等方面都具有不可或缺的作用。研究表明,在应对病毒性肺炎,急性肺损伤,胃损伤,皮炎等炎性疾病时,Trx是具有一定作用的。同时,Trx也可以作为靶点在很多疾病的预防和治疗中起到一定的作用。本文将着重讨论Trx的生物学活性及其在相关疾病防治方面最新的进展。 展开更多
关键词 硫氧还蛋白 氧化应激 疾病
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叶绿体硫氧还蛋白系统的调节机制
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作者 秦童 黄震 康振辉 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期119-132,共14页
硫氧还蛋白(Trx)属于巯基-二硫键氧化还原酶家族,通过作用于底物蛋白侧链2个半胱氨酸残基之间的二硫键(还原、异构和转移)来调控胞内蛋白的结构和功能。叶绿体Trx系统包括Trx及Trx类似蛋白、铁氧还蛋白(Fd)依赖的硫氧还蛋白还原酶(FTR)... 硫氧还蛋白(Trx)属于巯基-二硫键氧化还原酶家族,通过作用于底物蛋白侧链2个半胱氨酸残基之间的二硫键(还原、异构和转移)来调控胞内蛋白的结构和功能。叶绿体Trx系统包括Trx及Trx类似蛋白、铁氧还蛋白(Fd)依赖的硫氧还蛋白还原酶(FTR)和还原型烟酰腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)依赖的硫氧还蛋白还原酶C (NTRC)。除了基质蛋白酶类活性变化及叶绿体蛋白的转运受Trx系统调控之外,在叶绿体中还存在1条跨类囊体膜的还原势传递途径,把基质Trx的还原势经跨膜转运蛋白介导,最终传递给类囊体腔蛋白。FTR和NTRC共同作用维持叶绿体的氧化还原平衡。该文对叶绿体硫氧还蛋白系统的调节机制进行了综述,同时讨论了叶绿体硫氧还蛋白系统对维持植物光合效率的重要意义。 展开更多
关键词 叶绿体 二硫键 光合效率 氧化还原 硫氧还蛋白
房颤发生、发展中hs-CRP、TRX、SOD 的变化情况 预览
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作者 张艳军 赵灵 楚磊 《中国卫生标准管理》 2019年第8期32-34,共3页
目的探究房颤发生、发展中超氧化物歧化酶(SOD)、硫氧还蛋白(TRX)、高敏C 反应蛋白(hs-CRP)量的变化和房颤的发病机制。方法选择2017 年5 月—2018 年4 月本院就诊100 例房颤者,按房颤发作持续时间分组,分为持续组(n =54)、阵发组(n =4... 目的探究房颤发生、发展中超氧化物歧化酶(SOD)、硫氧还蛋白(TRX)、高敏C 反应蛋白(hs-CRP)量的变化和房颤的发病机制。方法选择2017 年5 月—2018 年4 月本院就诊100 例房颤者,按房颤发作持续时间分组,分为持续组(n =54)、阵发组(n =46),同时取50例体检健康者为对照组,检查各组SOD、TRX、hs-CRP 表达及左心室内径(LVID)情况,比较各组指标表达、LVID 值差异。结果持续组LVID、TRX、hs-CRP 高于其他两组,SOD 水平低于其他两组,差异有统计学意义(P < 0.05);阵发组LVID、TRX、hs-CRP 指标高于对照组,SOD 水平低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)。结论氧化应激及炎性反应在房颤患者左心房的结构重构发病、进展中起到关键性作用。 展开更多
关键词 房颤 左心室重构 超氧化物歧化酶 硫氧还蛋白 高敏C反应蛋白
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硫氧还蛋白-1对皮瓣缺血再灌注早期不同组织层次损伤的影响
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作者 高斌 任惠文 +3 位作者 尹健 孙敬岩 范金财 殷竹鸣 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期489-496,共8页
目的研究缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)皮瓣不同组织层次中硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)的含量和损伤程度的差异,探讨Trx-1对特定层次的保护作用和机制。方法(1)2013年6月至2014年12月,对中国医学科学院整形外科医院收治... 目的研究缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)皮瓣不同组织层次中硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)的含量和损伤程度的差异,探讨Trx-1对特定层次的保护作用和机制。方法(1)2013年6月至2014年12月,对中国医学科学院整形外科医院收治的10例行腹壁下动脉穿支皮瓣乳房再造的女性患者进行组织标本采集,包括游离皮瓣组织(IR组,n=10)和正常皮肤组织(对照组,n=10),患者年龄(47.4±3.8)岁。(2)将20只雄性ICR小鼠采用随机数字表法分为IR皮瓣模型组和对照组,每组10只,采集2组皮瓣组织。对临床采集的组织和小鼠皮瓣组织,采用免疫组化染色和TUNEL染色检测和分析不同组织层次Trx-1表达水平以及细胞凋亡指数。(3)构建人永生化角质形成细胞(HaCaT)缺氧-复氧模型,采用蛋白质印迹法验证Trx-1对表皮细胞缺氧-复氧损伤的保护作用和机制。应用SPSS 20.0对实验结果进行分析,对定量资料2组间的比较采用配对t检验或t′检验;对蛋白表达量的组间比较进行方差分析和两两比较q检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果临床组织标本表皮基底层和真皮乳头层Trx-1阳性细胞率对照组为70.71%±6.38%,IR组为24.19%±2.23%(t=27.54,P<0.001);小鼠皮瓣组织对照组为76.59%±4.88%,IR组为19.83%±2.34%(t=34.71,P<0.001)。临床组织标本细胞凋亡指数对照组为1.32%±1.52%,IR组为43.71%±3.17%(t=38.23,P<0.001);小鼠皮瓣组织对照组为0.86%±1.15%,IR组为41.14%±4.21%(t=36.96,P<0.001)。其他组织层次Trx-1的表达和细胞凋亡水平的差异无统计学意义(P>0.05)。在HaCaT细胞缺氧-复氧损伤模型中,Trx-1含量较对照组明显下降(P<0.01),ASK-1、p-p38和c-PARP的表达量显著上调(P<0.01)。外源性Trx-1预处理能够显著提升缺氧-复氧细胞中的Trx-1含量(P<0.01),并显著降低p-p38和c-PARP的表达水平(P<0.01)。结论表皮基底层和真皮乳头层是皮瓣缺血再灌注早期损伤的主要组织层次,补充该层次Trx-1 展开更多
关键词 外科皮瓣 游离皮瓣 缺血再灌注损伤 硫氧还蛋白 细胞凋亡 表皮基底层 真皮乳头层
2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者氧化应激、炎性因子和硫氧还蛋白水平的检测价值 预览
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作者 黄召武 《华夏医学》 CAS 2019年第1期7-9,共3页
目的:探讨2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者氧化应激、炎症因子和硫氧还蛋白水平检测价值。方法:回顾性分析我院患者的临床资料,设2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者40例作为干预组,并将同期非酒精性脂肪肝患者40例作为对照组,比较两组... 目的:探讨2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者氧化应激、炎症因子和硫氧还蛋白水平检测价值。方法:回顾性分析我院患者的临床资料,设2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者40例作为干预组,并将同期非酒精性脂肪肝患者40例作为对照组,比较两组患者氧化应激指标、炎性因子及硫氧还蛋白水平。结果:干预组患者CAT、SOD水平低于常规组,GSH高于常规组(P<0.05)。干预组患者TNF-α、CRP、IL-6水平均高于常规组(P<0.05)。干预组患者硫氧还蛋白水平显著低于常规组(P<0.05)。结论:2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者具有明显氧化应激损伤及炎症反应,同时硫氧还蛋白水平显著升高。 展开更多
关键词 2型糖尿病 非酒精性脂肪肝 氧化应激 炎性因子 硫氧还蛋白
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小麦TaTrxh9基因的序列特征及其对渗透胁迫的响应 预览
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作者 李梦园 樊亚栋 +3 位作者 张新宁 姜玉梅 孟凡荣 李永春 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期896-903,共8页
硫氧还蛋白是一类广泛存在于植物中的低分子量氧化还原蛋白,在植物生长发育调控和逆境响应过程中发挥重要的调控功能。以小麦(TriticumaestivumL.)品种‘中国春’和‘洛旱2号’为材料,采用RT-RCR方法克隆了小麦硫氧还蛋白基因TaTrxh9,... 硫氧还蛋白是一类广泛存在于植物中的低分子量氧化还原蛋白,在植物生长发育调控和逆境响应过程中发挥重要的调控功能。以小麦(TriticumaestivumL.)品种‘中国春’和‘洛旱2号’为材料,采用RT-RCR方法克隆了小麦硫氧还蛋白基因TaTrxh9,通过生物信息学方法分析了其染色体定位及序列特征,并利用qRT-PCR技术分析了该基因对渗透胁迫的响应模式。结果显示:(1)成功克隆到小麦TaTrxh9基因,序列分析发现TaTrxh9基因位于第1染色体群的短臂上,并将其3个部分同源基因命名为TaTrxh9-1AS、TaTrxh9-1BS和TaTrxh9-1DS。(2)TaTrxh9基因包含4个内含子,且在内含子区域3个部分同源基因间序列差异较大;3个部分同源基因的编码区序列一致性在98%以上,均编码131个氨基酸,且蛋白序列完全相同;TaTrxh9蛋白包含1个Trx-family保守域和CXXC氧化还原活性位点,三维结构预测分析显示该蛋白可形成典型的硫氧还蛋白空间结构,包括由4个α螺旋组成的外围框架和由5个反向平行的β折叠组成的中心轴。(3)qRT-PCR分析显示,TaTrxh9基因受干旱胁迫诱导在叶片中下调表达,而在根系中呈先上调后下调的表达模式;盐胁迫过程中,TaTrxh9基因在叶片中无显著响应,在根系中也仅出现短暂的诱导表达现象;在ABA处理过程中,TaTrxh9基因表达模式与其对干旱胁迫的响应模式类似。研究推测,TaTrxh9基因对干旱胁迫的响应过程可能与ABA介导的基因表达调控有关。 展开更多
关键词 小麦 硫氧还蛋白 基因克隆 渗透胁迫 表达模式
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硫氧还蛋白促进人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中高效可溶表达 预览
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作者 万爱妮 徐栋生 +3 位作者 蔡燕飞 陈蕴 金坚 李华钟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期50-57,共8页
为实现人胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在大肠杆菌中的高效可溶表达,获得大量具生物活性的IGF-1。应用融合PCR技术构建trx-igf1融合基因,克隆至p ET30a载体。重组载体pET30a-Trx-IGF-1转化大肠杆菌C43(DE3),... 为实现人胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在大肠杆菌中的高效可溶表达,获得大量具生物活性的IGF-1。应用融合PCR技术构建trx-igf1融合基因,克隆至p ET30a载体。重组载体pET30a-Trx-IGF-1转化大肠杆菌C43(DE3),并进行条件优化大量表达可溶性蛋白Trx-IGF-1。利用His标签纯化表达产物,对纯化蛋白进行Western blot与生物活性分析。构建的pET30a-Trx-IGF-1重组载体转化大肠杆菌C43(DE3)后,在30℃培养条件下1 mmol/L IPTG诱导表达5 h,获得大量以可溶形式表达的融合蛋白Trx-IGF-1;采用Ni离子亲和层析,获得纯度达90%以上的融合蛋白,经Western blot检测具有IGF-1抗原活性。生物学活性检测显示,融合蛋白Trx-IGF-1能明显促进NIH3T3细胞增殖及细胞周期进展。本研究应用的载体蛋白Trx,能实现在大肠杆菌中高效可溶表达具生物活性的IGF-1,为包涵体蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达提供借鉴。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 硫氧还蛋白 大杨杆菌C43(DE3) 可溶 生物活性
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肉鸡Trx1和Trx2蛋白的表达纯化及其抗氧化应激效果评价 预览
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作者 余文兰 胡莲美 +4 位作者 梁柏 吴富旺 杨帆 郭剑英 唐兆新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第2期365-372,共8页
试验旨在对肉鸡Trx1和Trx2蛋白进行表达和纯化,并评价其抗氧化特性。将原核表达载体GgTrx1-pET28a(+)和GgTrx2-nsp-pET28a(+)转入大肠埃希菌中进行蛋白表达;应用镍柱亲和层析的方法对该融合蛋白进行纯化;采用胰岛素还原法对重组肉鸡Trx1... 试验旨在对肉鸡Trx1和Trx2蛋白进行表达和纯化,并评价其抗氧化特性。将原核表达载体GgTrx1-pET28a(+)和GgTrx2-nsp-pET28a(+)转入大肠埃希菌中进行蛋白表达;应用镍柱亲和层析的方法对该融合蛋白进行纯化;采用胰岛素还原法对重组肉鸡Trx1和Trx2蛋白(GgTrx1和GgTrx2)进行活性鉴定;通过细胞体外试验分析比较GgTrx1和GgTrx2对大鼠肝细胞BRL-3A氧化应激保护作用的影响。结果显示,试验成功获得两种重组蛋白:GgTrx1和GgTrx2,最适诱导条件分别为37℃、0.4mmol/L IPTG诱导4h和37℃、1.0mmol/L IPTG诱导4h;纯化的重组蛋白GgTrx1和GgTrx2纯度可达到90%,浓度分别达到4.0和5.0 mg/mL。重组蛋白GgTrx1和GgTrx2均具有较高的还原胰岛素二硫键的能力,并呈现出浓度效应。体外细胞试验发现,重组蛋白GgTrx1和GgTrx2均能显著降低过氧化氢诱导的BRL-3A膜脂过氧化,保护抗氧化酶SOD和CAT活性,且重组蛋白GgTrx2效果更明显。本试验结果表明,重组蛋白GgTrx1和GgTrx2均具有生物学活性和良好的抗氧化应激特性,且线粒体型Trx2为临床治疗氧化应激性疾病提供了更多可能。 展开更多
关键词 硫氧还蛋白 大鼠肝细胞 过氧化氢 原核表达 蛋白纯化
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硫氧还蛋白的研究进展 预览
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作者 张若贤 刘淼 《企业技术开发》 2019年第2期26-28,共3页
氧化压力是导致生物体死亡和衰老的重要因素,为了使体内的氧化还原平衡,生物体已经进化出一系列保护酶的系统来维持生体内氧化还原的平衡。硫氧还蛋白系统,就是其中一个重要的保护氧化酶的系统。文章主要就硫氧还蛋白在昆虫中的研究进... 氧化压力是导致生物体死亡和衰老的重要因素,为了使体内的氧化还原平衡,生物体已经进化出一系列保护酶的系统来维持生体内氧化还原的平衡。硫氧还蛋白系统,就是其中一个重要的保护氧化酶的系统。文章主要就硫氧还蛋白在昆虫中的研究进展进行阐述。为了更好地了解硫氧还蛋白系统的作用机制以及作用效果,本文例举了部分模式昆虫进行进一步说明。 展开更多
关键词 硫氧还蛋白 昆虫 棉铃虫 黄野螟 中华蜜蜂
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硫氧还蛋白(Trx)对糖尿病视网膜病变模型鼠血清补体Clq肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)表达的影响 预览
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作者 杨岚 代海燕 鞠传余 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第3期229-233,共5页
目的探讨硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)模型鼠血清补体Clq肿瘤坏死因子相关蛋白9(complement Clq tumor necrosis factor-related protein 9,CTRP9)表达的影响。方法 24只SPF级雄性SD大鼠分... 目的探讨硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)模型鼠血清补体Clq肿瘤坏死因子相关蛋白9(complement Clq tumor necrosis factor-related protein 9,CTRP9)表达的影响。方法 24只SPF级雄性SD大鼠分为正常对照组(NC组)12只和高脂饮食组12只,NC组以标准大鼠饲料喂养,高脂饮食组以高脂高糖饲料喂养后以一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg·kg^-1 )制造DR模型,造模成功的高脂饮食组大鼠随机分为DR组(6只)和治疗组(6只)。治疗组大鼠每天腹腔注射Trx(50 mg·kg^-1 )持续1周,NC组和DR组大鼠每天给予腹腔注射同等体积的PBS。酶联免疫吸附实验检测血清CTRP9水平,免疫组织化学检测CTRP9蛋白表达水平,同时进行视网膜细胞凋亡指数与活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光强度分析。结果所有高脂饮食组大鼠都造模成功,高脂饮食组大鼠血清中CTRP9含量和免疫组织化学检测CTRP9表达量均低于NC组,治疗组高于DR组(均为 P <0.05)。高脂饮食组大鼠的视网膜荧光强度(67.29±1.94)显著高于NC组(5.39±1.29),治疗组(34.20±5.11)低于DR组(78.11±6.33),差异均有统计学意义(均为 P <0.05)。Western blot结果显示,高脂饮食组大鼠的CTRP9相对表达量低于NC组,治疗组高于DR组;高脂饮食组大鼠的PI3K相对表达量高于NC组,治疗组低于DR组(均为 P < 0.05)。结论 Trx可保护DR大鼠的视网膜细胞免受ROS的损伤,抑制细胞凋亡,促进CTRP9的表达,其机制可能与CTRP9改善PI3K信号通路有关。 展开更多
关键词 硫氧还蛋白 糖尿病视网膜病变 补体Clq肿瘤坏死因子相关蛋白9 细胞凋亡
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舌鳞状细胞癌组织中硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶-1的表达及其意义 预览
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作者 李杨 邢龙 +4 位作者 MOHAMMED H 马小龙 谢富强 冯正虎 车银富 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2018年第2期87-91,共5页
目的:研究硫氧还蛋白(Trx)和硫氧还蛋白还原酶-1(TrxR1)在舌鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集28例舌鳞癌组织和10例癌旁上皮组织,采用免疫组织化学SP三步法检测Trx和TrxR1蛋白在两种组织中的表达水平,并分析其表达与临床病理特... 目的:研究硫氧还蛋白(Trx)和硫氧还蛋白还原酶-1(TrxR1)在舌鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集28例舌鳞癌组织和10例癌旁上皮组织,采用免疫组织化学SP三步法检测Trx和TrxR1蛋白在两种组织中的表达水平,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果:舌鳞状细胞癌组织中的Trx和TrxR1蛋白表达水平明显高于癌旁正常上皮组织,癌组织和癌旁正常组织的Trx IOD值分别为(2.84.34)08和(3.91.00)07(P<0.01),TrxR1 IOD分别为(1.88.29)08和(0.69.32)07(P<0.05);Trx和TrxR1蛋白表达水平在不同肿瘤大小、分化程度组间表达的差异均具有统计学意义(P均<0.05);Trx和TrxR1表达水平之间呈正相关关系(r=0.504,P<0.05),且Trx和TrxR1高表达组与低表达组的生存率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:硫氧还蛋白及其还原酶-1可能为舌鳞状细胞癌的药物治疗靶点和早期诊断、肿瘤筛查的重要临床指标。 展开更多
关键词 舌鳞状细胞癌 硫氧还蛋白 硫氧还蛋白还原酶-1 免疫组织化学
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白桦BpTRX基因和启动子克隆及H2S处理后的表达模式
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作者 王紫晴 黄雅婷 +1 位作者 聂婷婷 范桂枝 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第2期414-422,共9页
目的 研究白桦硫氧还蛋白(Betula platyphylla thioredoxin,BpTRX)基因全长和启动子序列及其编码结构和性质,揭示其在硫化氢(H2S)处理下BpTRX的表达模式。方法 通过PCR手段克隆BpTRX基因,应用染色体步移技术获得BpTRX启动子区序列,... 目的 研究白桦硫氧还蛋白(Betula platyphylla thioredoxin,BpTRX)基因全长和启动子序列及其编码结构和性质,揭示其在硫化氢(H2S)处理下BpTRX的表达模式。方法 通过PCR手段克隆BpTRX基因,应用染色体步移技术获得BpTRX启动子区序列,并对BpTRX基因、启动子及其编码蛋白进行生物信息学分析,构建BpTRX系统进化树。利用实时荧光定量PCR定量分析BpTRX基因在H2S外源胁迫处理下的表达模式。结果 BpTRX基因全长351 bp,编码了由117个氨基酸组成的蛋白。BpTRX基因与蓖麻、大豆、苜蓿和葡萄TRX-H型蛋白亲缘关系紧密。获得的BpTRX启动子区序列为873 bp,包含了转录必备的元件以及大量的胁迫响应和激素响应元件等。结论 获得BpTRX基因的全长和部分启动子序列,BpTRX基因对H2S处理的响应趋势为双峰形式,即先增加后降低、再增加再降低。 展开更多
关键词 白桦 硫氧还蛋白 硫化氢 生物信息学分析 实时荧光定量PCR
2-Cys Peroxiredoxins Participate in the Oxidation of Chloroplast Enzymes in the Dark
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作者 Valle Ojeda Juan Manuel Perez-Ruiz Francisco Javier Cejudo 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第11期1377-1388,共12页
Most redox-regulated chloroplast enzymes are reduced during the day and oxidized during the night.While the reduction mechanism of light-dependent enzymes is well known,the mechanism mediating their oxidation in the d... Most redox-regulated chloroplast enzymes are reduced during the day and oxidized during the night.While the reduction mechanism of light-dependent enzymes is well known,the mechanism mediating their oxidation in the dark remains unknown.The thiol-dependent peroxidases,2-Cys peroxiredoxins (Prxs),play a key role in light-dependent reduction of chloroplast enzymes.Prxs transfer reducing equivalents of thiols to hydrogen peroxide,suggesting the participation of these peroxidases in enzyme oxidation in the dark.Here,we have addressed this issue by analyzing the redox state of well-known redox-regulated chloroplast enzymes in response to darkness in Arabidopsis thaliana mutants deficient in chloroplastlocalized Prxs (2-Cys Prxs A and B,Prx ⅡE,and Prx Q).Mutant plants lacking 2-Cys Prxs A and B,and plants overexpressing NADPH-dependent thioredoxin (Trx) reductase C showed delayed oxidation of chloroplast enzymes in the dark.In contrast,the deficiencies of Prx ⅡE or Prx Q exerted no effect.In vitro assays allowed the reconstitution of the pathway of reducing equivalents from reduced fructose 1,6-bisphosphatase to hydrogen peroxide mediated by Trxs and 2-Cys Prxs.Taken together,these results suggest that 2-Cys Prxs participate in the short-term oxidation of chloroplast enzymes in the dark. 展开更多
关键词 CHLOROPLAST enzyme OXIDATION PEROXIREDOXIN THIOREDOXIN hydrogen peroxide DARKNESS
金雀异黄酮对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用
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作者 贾强 杨锐 +1 位作者 刘小粉 马善峰 《四川大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第5期706-711,共6页
目的 观察金雀异黄酮(genistein,Gen)对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用,并探讨其机制。方法雄性SD大鼠随机分为正常(N)组、糖尿病(D)组、Gen 5mg/kg治疗(L)组和Gen 25mg/kg治疗(H)组,每组8只。采用链脲佐菌素55mg/kg腹腔注射诱... 目的 观察金雀异黄酮(genistein,Gen)对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用,并探讨其机制。方法雄性SD大鼠随机分为正常(N)组、糖尿病(D)组、Gen 5mg/kg治疗(L)组和Gen 25mg/kg治疗(H)组,每组8只。采用链脲佐菌素55mg/kg腹腔注射诱导1型糖尿病大鼠模型。造模成功4周后,L组和H组大鼠开始分别灌胃给予Gen溶液5mg/kg和25mg/kg。干预4周后,测定各组大鼠血流动力学指标和空腹血糖(FBG);通过HE染色和透射电镜下分别观察大鼠心肌病理形态结构和超微结构改变;测定心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和Caspase-3活性;RT-PCR检测心肌组织Bcl-2和Bax mRNA表达;Western blot检测心肌硫氧还蛋白(Trx)、Trx相互作用蛋白(TXNIP)和凋亡信号调节激酶1(ASK1)的蛋白表达。结果 与N组比较,D组FBG、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量和Caspase-3活性增高(P〈0.01),血流动力学指标和GSH含量下降(P〈0.01);心肌病理形态结构和超微结构明显损伤,心肌Bcl-2mRNA和Trx蛋白表达下降(P〈0.01),Bax mRNA、TXNIP和ASK1蛋白表达增高(P〈0.01)。与D组比较,L和H组中,FBG差异无统计学意义,TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量和Caspase-3活性下降(P〈0.05,P〈0.01),血流动力学指标和GSH含量增高(P〈0.05,P〈0.01);心肌病理形态结构和超微结构明显改善;心肌Bcl-2mRNA和Trx蛋白表达增加(P〈0.05,P〈0.01),Bax mRNA、TXNIP和ASK1蛋白表达下降(P〈0.05,P〈0.01)。结论金雀异黄酮对糖尿病大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能与减轻心肌炎症反应,调节Trx系统表达,抑制氧化应激和细胞凋亡相关。 展开更多
关键词 金雀异黄酮 糖尿病 心肌 硫氧还蛋白 氧化应激 细胞凋亡
血管紧张素Ⅱ对新生大鼠心室肌细胞HCN通道的影响机制的探讨
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作者 郑明奇 魏梅 +2 位作者 李永星 熊久兰 刘刚 《中国误诊学杂志》 CAS 2018年第10期433-437,共5页
目的明确血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对新生大鼠心肌细胞超极化激活环核苷酸门控离子通道(HCN)电流的影响及其机制。方法用胶原蛋白酶技术分离新生SD大鼠心室肌获得单一的心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录HCN通道电流(If);提取心肌细胞膜蛋白... 目的明确血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对新生大鼠心肌细胞超极化激活环核苷酸门控离子通道(HCN)电流的影响及其机制。方法用胶原蛋白酶技术分离新生SD大鼠心室肌获得单一的心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录HCN通道电流(If);提取心肌细胞膜蛋白,用Western blot检测HCN蛋白的表达。结果 (1)将心室肌细胞暴露于AngⅡ(100mol/L)20min后,If显著增大(P <0.05);(2)AngⅡ增大If电流可被酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein或PP2显著抑制;增大的通道酪氨酸磷酸化水平也被减小(P <0.05);(3)用硫氧还原蛋白受体阻断剂显著抑制AngⅡ增大的If(P <0.05);(4)If也可被非特异性蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)抑制剂显著增大(P <0.05)。结论 AngⅡ增大If,是通过ROS依赖性的酪氨酸蛋白激酶及其相关的硫氧还原蛋白系统,调控HCN通道的活性和表达。这将为氧化应激引起的细胞损伤和离子通道重构的调控的研究提供一个新的视点,为临床更有效地防治心律失常提供新的理论依据和治疗策略。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ HCN通道电流 C-SRC 硫氧还原蛋白
复方健耳剂干预庆大霉素耳毒性致豚鼠毛细胞损害的实验研究
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作者 宣伟军 黄力毅 +4 位作者 韦瑀龙 陈壮 宣毅 陈思仲 唐俊波 《中国中西医结合杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期731-736,共6页
目的探讨中药复方健耳剂干预豚鼠庆大霉素(gentamycin,GM)耳毒性致外毛细胞损害的作用及可能机制。方法选择杂色成年豚鼠48只,随机分为正常对照组、GM对照组、复方健耳剂+GM组(简称中药+GM组),每组16只,其中正常对照组按常规饲养... 目的探讨中药复方健耳剂干预豚鼠庆大霉素(gentamycin,GM)耳毒性致外毛细胞损害的作用及可能机制。方法选择杂色成年豚鼠48只,随机分为正常对照组、GM对照组、复方健耳剂+GM组(简称中药+GM组),每组16只,其中正常对照组按常规饲养至第11天期满;GM对照组按200 mg/(kg·d)剂量,每天分2次连续注射9天,第11天终止饲养;中药+GM组按3.994 g/(kg·d)剂量(1/2人工灌服,1/2自动饮用),预先服用复方健耳剂10天,然后在继续服用中药同时开始注射每天同等剂量GM,连续9天,第11天终止饲养。所有动物期满取出耳蜗,其中每组10只动物用于全耳蜗基底膜铺片,琥珀酸脱氢酶染色,进行耳蜗毛细胞形态学观察,另外每组6只动物,利用Real-time PCR技术检测耳蜗组织硫氧还蛋白(Trx)-1、Trx-2、凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)mRNA表达量。结果全耳蜗基底膜检查显示,正常对照组各回三排内、外毛细胞形态正常,数量完整,排列有序;GM对照组各回三排外毛细胞损毁严重,绝大部分细胞出现严重崩解不全,或凋亡缩小,第1回比其他各回损害较重(P〈0.01),但内毛细胞仍基本存在;中药+GM组各回三排外毛细胞除少量和散在崩解不全外,大多仍存留可辨,形态如常,内毛细胞仍保持完整,各回外毛细胞损毁状况明显少于GM对照组(P〈0.01)。中药+GM组Trx-1、Trx-2 mRNA表达明显高于GM对照组(P〈0.01),ASK1 mRNA表达则明显低于GM对照组(P〈0.01)。结论一定剂量GM连续使用可造成豚鼠耳蜗外毛细胞严重损害,并以第1回明显,而且以外毛细胞为主要损害靶细胞。复方健耳剂具有防治GM耳毒性外毛细胞损害作用,其机制可能与其调控硫氧还蛋白系统,阻止ASK1依赖的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 豚鼠 庆大霉素 耳毒性 复方健耳剂 硫氧还蛋白 凋亡信号调节激酶 琥珀酸脱氢酶染色
人11β-羟基类固醇脱氢酶基因克隆与表达的实验研究 预览
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作者 胡蒙亮 徐杰 +5 位作者 任航江 韩亭亭 满永 唐蔚青 黎健 李国平 《心肺血管病杂志》 2018年第11期1019-1022,共4页
目的:构建人Ⅰ型11β羟基类固醇脘氢酶(11β-HSD1)原核表达载体并表达目的蛋白,为代谢综合征的研究奠定基础。方法:从HepG2细胞系中提取细胞总RNA,经反转录合成cDNA第一链后再以其为模版,扩增11β-HSD1基因。pET32a原核表达载体和PCR扩... 目的:构建人Ⅰ型11β羟基类固醇脘氢酶(11β-HSD1)原核表达载体并表达目的蛋白,为代谢综合征的研究奠定基础。方法:从HepG2细胞系中提取细胞总RNA,经反转录合成cDNA第一链后再以其为模版,扩增11β-HSD1基因。pET32a原核表达载体和PCR扩增出的产物经过BamHI和XhoI双酶切后,在16℃过夜的条件下用T4DNA连接酶连接上述酶切产物,然后用该产物转化Top10大肠杆菌感受态细胞,挑克隆后进行测序。将克隆成功的11β-HSD1重组质粒转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),分别用不同浓度、不同时间的IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖)诱导其表达,并优化诱导条件。表达的蛋白采用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合考马斯亮蓝染色的方法观察目的基因的表达情况。结果:挑选的克隆经测序证实pET32a-11β-HSD1重组质粒构建成功,11β-HSD1基因与携带有6×His-tag标签和肠激酶识别位点的硫氧还蛋白trxA基因融合,在IPTG浓度为10μM,诱导时间为5小时时,上清中有明显的分子量约为52kDa的重组蛋白产生,且目的蛋白分子量的大小与预期一致。结论:本实验成功构建了人pET32a-11β-HSD1蛋白原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后成功诱导了其融合表达,目的蛋白主要以可溶性蛋白的形式存在于上清中,为进一步研究其结构、功能、制备抗体等奠定了基础。 展开更多
关键词 I型11β羟基类固醇脱氢酶 原核表达 硫氧还蛋白 融合表达
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妊娠期糖尿病患者心律失常发病情况及诊治回顾性分析
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作者 石克威 李学永 +6 位作者 孙毅 刘刚 郑明奇 张建勇 王晓元 常丽锦 舒丽莎 《中国误诊学杂志》 CAS 2018年第2期56-58,共3页
目的回顾分析妊娠期糖尿病患者心律失常的发病及诊治情况,总结诊治经验。方法选取2015年8月至2017年7月于河北北方学院附属第一医院产科门诊规律产检的200例妊娠期糖尿病患者作为观察组,选取200例同期正常孕妇作为对照组,回顾分析两组... 目的回顾分析妊娠期糖尿病患者心律失常的发病及诊治情况,总结诊治经验。方法选取2015年8月至2017年7月于河北北方学院附属第一医院产科门诊规律产检的200例妊娠期糖尿病患者作为观察组,选取200例同期正常孕妇作为对照组,回顾分析两组孕妇心律失常发病及诊治情况。结果妊娠期糖尿病组中发生心律失常40例(20%),其中房性早搏28例,室性早搏12例;正常孕妇组中发生心律失常10例(5%),其中房性早搏7例,室性早搏3例,两组孕妇心律失常发病率比较,差异有统计学意义(χ2=20.571,P=0.000)。两组孕妇中只针对临床症状明显者给予药物处理,根据患者心率情况,给予不同剂量的酒石酸美托洛尔口服,其中妊娠期糖尿病组中接受药物治疗者6例(15%,6/40),临床症状均得到控制,妊娠结束后6名产妇均停药。正常孕妇组中接受药物治疗者1例(10%,1/10),临床症状得到控制,妊娠结束后停药。两组比较差异无统计学意义(χ2=0.166,P=0.684)。结论妊娠期糖尿病患者发生心律失常的发病率较正常孕妇高,但需要临床干预的比例较低,治疗情况无明显差异。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 心律失常 钾通道 硫氧还蛋白质类
单核细胞增多性李斯特菌硫氧还蛋白TrxA调控磷脂酶PlcB研究
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作者 汪渤森 韩笑 +8 位作者 马天天 王航 杭奕 俞慧飞 赵碧波 邱旸 叶美伶 程昌勇 宋厚辉 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期1686-1692,1724共8页
细菌中的硫氧还蛋白A(thioredoxin A,TrxA)能够通过对氧化受损的的二硫键进行修饰进而参与蛋白质的正确折叠。磷脂酶PlcB作为单核细胞增多性李斯特菌(Listeria moncoytogenes)关键的毒力因子在细菌逃逸吞噬体过程中起重要作用,但该... 细菌中的硫氧还蛋白A(thioredoxin A,TrxA)能够通过对氧化受损的的二硫键进行修饰进而参与蛋白质的正确折叠。磷脂酶PlcB作为单核细胞增多性李斯特菌(Listeria moncoytogenes)关键的毒力因子在细菌逃逸吞噬体过程中起重要作用,但该蛋白是否受李斯特菌TrxA的修饰尚无报道。因此,本试验主要从转录和蛋白表达水平以及蛋白活性水平研究李斯特菌硫氧还蛋白TrxA对磷脂酶PlcB的调控关系。结果显示,单增李斯特菌野生株EGD-e缺失trxA基因后,PlcB的转录及蛋白表达水平显著降低,且利用天然启动子回补trxA后能够使PlcB的表达恢复至野生株水平,而组成型启动子回补效率较低,表明TrxA能够严谨调控李斯特菌毒力因子PlcB的表达。体外溶脂试验发现李斯特菌缺失trxA后导致其溶脂能力显著降低,磷脂酶活性检测发现重组PlcB的活性高度依赖TrxA的存在。本研究首次发现并证实李斯特菌PlcB的转录和表达及其磷脂酶活性维持受TrxA的调控,研究结果为深入解析李斯特菌硫氧还蛋白系统在细菌感染宿主过程中的氧化还原修饰机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 硫氧化蛋白A 磷脂酶PlcB 氧化还原 调控修饰
抗肿瘤新药乙烷硒啉对人舌鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响 预览 被引量:1
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作者 邢龙 李杨 +4 位作者 马小龙 MOHAMMED H 黄莹 谢富强 冯正虎 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2018年第4期279-285,共7页
目的:探讨新型有机硒化合物乙烷硒啉(BBSKE)对人舌癌CAL27细胞株生长和增殖的影响。方法:分别采用体外细胞实验MTT、Hoechst 33258免疫荧光染色、Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术、Transwell小室实验检测2、5、10、20μmol/L(含1‰DMSO... 目的:探讨新型有机硒化合物乙烷硒啉(BBSKE)对人舌癌CAL27细胞株生长和增殖的影响。方法:分别采用体外细胞实验MTT、Hoechst 33258免疫荧光染色、Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术、Transwell小室实验检测2、5、10、20μmol/L(含1‰DMSO)的BBSKE对CAL27细胞增殖、细胞周期及迁移的影响,并设置溶剂对照组和正常对照组。结果:5、10、20μmol/L的BBSKE作用CAL27细胞后,其增殖抑制率较对照组明显增加(P<0.01),且随作用时间的延长而增加。Hoechst 33258免疫荧光染色结果显示5、10μmol/L BBSKE组相比对照组细胞出现凋亡形态改变。Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术分析结果显示与对照组相比,2、5、10、20μmol/L BBSKE组CAL27细胞G2/M期比率呈梯度增加(P<0.01),细胞周期被阻滞于G2/M期(P<0.01)。Transwell小室实验结果显示,CAL27细胞的迁移数量在2、5、10、20μmol/L BBSKE组相比对照组明显减少(P<0.01),且迁移细胞数与药物浓度呈反比。结论:BBSKE对CAL27细胞具有增殖抑制作用,其机制可能是通过引起细胞周期阻滞于G2/M期而诱导细胞凋亡,并且抑制细胞迁移,提示BBSKE可作为舌鳞状细胞癌患者化疗治疗的备选药物。 展开更多
关键词 乙烷硒啉 硫氧还蛋白 CAL27细胞 细胞增殖 细胞周期 凋亡 迁移
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