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海洋性弧菌致病机制研究进展
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作者 丁淑妍 侯丽艳 +6 位作者 于成勇 张剑 解洁 黄忠义 曲业敏 李文晓 王明义 《职业与健康》 CAS 2019年第7期984-989,共6页
弧菌是一种革兰阴性菌,广泛分布于自然界的水中。弧菌是引起人类和水生动物细菌性感染的主要病原体之一,人类食用被污染的食物或伤口直接接触被污染的水体环境,会引起腹泻、伤口感染甚至败血症等疾病。随着我国海产品养殖产业的蓬勃发展... 弧菌是一种革兰阴性菌,广泛分布于自然界的水中。弧菌是引起人类和水生动物细菌性感染的主要病原体之一,人类食用被污染的食物或伤口直接接触被污染的水体环境,会引起腹泻、伤口感染甚至败血症等疾病。随着我国海产品养殖产业的蓬勃发展,海洋性致病性弧菌感染所致疾病的发病率越来越高,探索其致病机制刻不容缓。弧菌的致病力与其毒力因子密切相关,主要的毒力因子包括溶血素、铁过载和内、外毒素等。本文主要针对几种常见的海洋性弧菌(创伤弧菌、溶藻弧菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌)进行探讨,分别从其生物学性状、所致疾病及致病因子生物机制3个方面展开综述,以期为海洋性弧菌致病机制和防治提供借鉴和参考。 展开更多
关键词 海洋性弧菌 致病机制 创伤弧菌 溶藻弧菌 霍乱弧菌 副溶血性弧菌
创伤弧菌生物学特性和检测技术研究进展 预览
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作者 王青柏 李良秋 +4 位作者 徐鹏 曾绮文 王东东 王嘉铭 谭雨婷 《安徽农业科学》 CAS 2019年第5期33-36,共4页
创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是一种重要的水产品污染病原,可造成养殖水产品的病害,同时也是一种致命的人类机会致病菌,与全世界大部分食用污染海鲜致死的案例有关。随着全球气温升高,以及食用海鲜产品的人群变多,我国创伤弧菌感染率呈... 创伤弧菌(Vibrio vulnificus)是一种重要的水产品污染病原,可造成养殖水产品的病害,同时也是一种致命的人类机会致病菌,与全世界大部分食用污染海鲜致死的案例有关。随着全球气温升高,以及食用海鲜产品的人群变多,我国创伤弧菌感染率呈现上升趋势。简要综述了创伤弧菌的生物学特性及分子检测的最新进展,为创伤弧菌感染的早期诊断和及时治疗提供参考资料。 展开更多
关键词 创伤弧菌 生物学特性 检测技术
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创伤弧菌针对氨基糖苷类药物的耐药性研究
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作者 刘振波 夏苏苏 +1 位作者 康琳 王景林 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2019年第2期90-92,共3页
目的对浙江省和台湾地区的创伤弧菌进行药敏检测,分析两地创伤弧菌的耐药情况。方法利用实验室保存的45株创伤弧菌,采用纸片琼脂扩散法,针对氨基糖苷类药物阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素开展药敏检测,根据抑菌环直径判断其耐药性。结果... 目的对浙江省和台湾地区的创伤弧菌进行药敏检测,分析两地创伤弧菌的耐药情况。方法利用实验室保存的45株创伤弧菌,采用纸片琼脂扩散法,针对氨基糖苷类药物阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素开展药敏检测,根据抑菌环直径判断其耐药性。结果保存的45株创伤弧菌对3种药物的敏感性差异有统计学意义(P <0.05),敏感性最高的是庆大霉素,平均抑菌环直径24.53mm;其次是阿米卡星,最低的是妥布霉素,平均抑菌环直径16.93 mm。台湾地区和浙江省的创伤弧菌对阿米卡星的敏感性差异无统计学意义(P> 0.05);台湾地区菌株对庆大霉素和妥布霉素的敏感性高于浙江省菌株,差异有统计学意义(P <0.05)。结论创伤弧菌对庆大霉素敏感,台湾和浙江两地的创伤弧菌菌株对氨基糖苷类药物的敏感性有明显差异。 展开更多
关键词 创伤弧菌 氨基糖苷类 耐药性
创伤弧菌浸泡感染对孔雀鱼的影响 预览
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作者 陈秀霞 池洪树 +3 位作者 许斌福 陈晨汐 方冬兰 龚晖 《福建畜牧兽医》 2019年第2期11-14,共4页
为建立创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的感染模型,了解创伤弧菌对孔雀鱼(Poecilia reticulate)的致病力以及创伤弧菌感染对孔雀鱼免疫相关因子表达的影响。将孔雀鱼分为4组,分别以创伤弧菌FZ03-5X浓度为3.3×108、3.3×107、3.3&#... 为建立创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的感染模型,了解创伤弧菌对孔雀鱼(Poecilia reticulate)的致病力以及创伤弧菌感染对孔雀鱼免疫相关因子表达的影响。将孔雀鱼分为4组,分别以创伤弧菌FZ03-5X浓度为3.3×108、3.3×107、3.3×106和0 CFU/mL的菌液浸泡感染5 h,检测感染15 d后3.3×107CFU/mL浸泡组和生理盐水对照组鳃免疫相关因子和凋亡相关因子的表达水平。结果表明,4个浓度组孔雀鱼的死亡率分别为40%、18.33%、13.33%和6.67%。感染15 d后,肿瘤坏死因子(TNF)、Mx因子、与细胞凋亡相关的凋亡因子FAS和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)的表达水平显著高于生理盐水对照组(P<0.05)。试验结果说明,创伤弧菌可通过浸泡的方式使孔雀鱼致病,孔雀鱼因创伤弧菌感染产生的炎症反应可持续15 d。 展开更多
关键词 创伤弧菌 孔雀鱼 浸泡 感染 免疫相关因子
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基于转录组测序探索创伤弧菌MO6-24/O小RNA 预览
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作者 周亚男 李宗城 +3 位作者 张晓彤 胡成进 应晓敏 曹源 《生物技术通讯》 CAS 2019年第3期354-359,共6页
目的:基于转录组测序注释,探索创伤弧菌MO6-24/O小RNA(sRNA)。方法:在海洋培养基2216E中培养创伤弧菌MO6-24/O,收集从对数生长期到静止期不同时间点的细菌,提取细菌RNA,通过富集sRNA以及去除核糖体RNA进行建库和测序,然后将读段匹配到... 目的:基于转录组测序注释,探索创伤弧菌MO6-24/O小RNA(sRNA)。方法:在海洋培养基2216E中培养创伤弧菌MO6-24/O,收集从对数生长期到静止期不同时间点的细菌,提取细菌RNA,通过富集sRNA以及去除核糖体RNA进行建库和测序,然后将读段匹配到创伤弧菌MO6-24/O基因组并进行注释,最后进行验证。结果:发现59个顺式编码sRNA、102个反式编码sRNA,并进行了部分验证。结论:鉴定出创伤弧菌MO6-24/OsRNA。 展开更多
关键词 创伤弧菌 小RNA 转录组测序
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1例手被海鱼刺伤感染创伤弧菌的实验室诊断 预览
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作者 周世娟 《中国当代医药》 2019年第12期197-199,F0004共4页
目的分析本院成功救治的1例创伤弧菌感染病例,为实验室和临床提供经验。方法回顾性分析2017年7月我科鉴定的1株来自手坏死性筋膜炎病例感染创伤弧菌的检验过程,结合其临床资料、病理报告等进行实验室检查。结果患者感染早期水疱液、术... 目的分析本院成功救治的1例创伤弧菌感染病例,为实验室和临床提供经验。方法回顾性分析2017年7月我科鉴定的1株来自手坏死性筋膜炎病例感染创伤弧菌的检验过程,结合其临床资料、病理报告等进行实验室检查。结果患者感染早期水疱液、术中渗出液都培养出创伤弧菌,但血培养阴性。临床根据实验室鉴定与药敏结果,及时调整抗感染药物、积极手术清创,患者感染得到及时控制,经过67d治疗后,患者康复出院。结论感染患者早就诊、实验室早确证病原体、临床早运用有效抗感染药物治疗及手术干预是影响患者预后的关键。 展开更多
关键词 创伤弧菌 坏死性筋膜炎 败血症
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半滑舌鳎源创伤弧菌分离鉴定与药敏试验
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作者 王洪彬 朱利霞 +5 位作者 吴同垒 任海 高桂生 张志强 史秋梅 靳晓敏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期912-918,共7页
为查明引起河北省昌黎县某海水养殖场半滑舌鳎患病及死亡的病原菌,本研究从半滑舌鳎肝、脾、腮、肠道分离纯化得到1株优势菌株,对其进行了理化鉴定和16S rDNA序列分析、致病性试验、毒力基因检测和中西药的药敏试验。结果显示,分离菌为... 为查明引起河北省昌黎县某海水养殖场半滑舌鳎患病及死亡的病原菌,本研究从半滑舌鳎肝、脾、腮、肠道分离纯化得到1株优势菌株,对其进行了理化鉴定和16S rDNA序列分析、致病性试验、毒力基因检测和中西药的药敏试验。结果显示,分离菌为创伤弧菌(V.vulnificus),序列比对显示与创伤弧菌同源性为100%,菌株命名为V.vulnificus QHD-1。动物回归试验证明该菌是半滑舌鳎的病原菌。小鼠半数致死量(LD50)为2.4×106 CFU/mL,携带毒力基因溶细胞素(vvhA)、细胞毒素(rtxA)、铁载体(viuB)、荚膜多糖(wza)等。西药药敏试验结果显示,分离菌株V.vulnificus QHD-1对氟苯尼考等7种药物敏感,对氧氟沙星等5种药物中敏;对头孢拉定、土霉素等6种药物耐药;中药药敏试验结果表明,苏木、诃子、乌梅、五倍子抑抑菌效果较好;最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)均为1.9~7.8 g/L;中药联合抑菌试验结果表明,黄芩和黄柏组合、五倍子和黄芩组合、乌梅和五倍子组合、艾叶和荆芥组合、板蓝根和黄芩组合对创伤弧菌表现协同作用。研究结果证明V.vulnificus QHD-1对鱼和小鼠具有较强的致病性,具有一定的公共卫生危害性;同时药敏试验结果为该地区鱼病的防治提供了依据。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 创伤弧菌 分离鉴定 药敏试验
半滑舌鳎创伤弧菌分离鉴定及其荧光定量PCR方法的建立 预览
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作者 胡秀彩 王英杰 +5 位作者 吕爱军 孙敬锋 王庆奎 廉正义 刘小雪 宋亚娇 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1359-1368,共10页
为确定患病半滑舌鳎的病原,从其体内分离到3株革兰氏阴性菌,将其分别命名为ST-1、ST-3和ST-6,进行细菌理化特性、药敏试验、16S rDNA测序以及组织病理学观察等方面的研究,并建立了外膜蛋白(OMP)基因的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法... 为确定患病半滑舌鳎的病原,从其体内分离到3株革兰氏阴性菌,将其分别命名为ST-1、ST-3和ST-6,进行细菌理化特性、药敏试验、16S rDNA测序以及组织病理学观察等方面的研究,并建立了外膜蛋白(OMP)基因的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。结果显示,3株分离菌株的理化特性符合创伤弧菌特征,16S rDNA与创伤弧菌标准菌株ATCC29307序列相似性达99%以上,系统发育树分析显示,3株分离株与创伤弧菌自然聚为一支,最终鉴定为创伤弧菌;药敏试验显示,3株菌对头孢克肟、头孢哌酮、链霉素、亚胺培南和氟苯尼考等药物高度敏感。人工回归感染试验表明,分离株具有致病性,且半滑舌鳎、斑马鱼的临床症状与自然患病鱼症状相似;组织病理学观察显示,鳃丝上皮细胞增生,鳃小片肿胀黏连、颗粒细胞和黏液细胞增多,肝脏中央静脉淤血,肾脏出血、坏死,肠道黏膜固有层萎缩、黏液细胞增多等。进一步建立OMP基因的荧光定量PCR方法,结果显示,标准曲线的相关系数为0.995,检测下限为1.88×102 CFU/mL。以上结果可为半滑舌鳎弧菌病的致病机理、分子诊断和防治提供科学参考。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 创伤弧菌 组织病理 荧光定量PCR
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创伤弧菌溶细胞素A蛋白疫苗对创伤弧菌感染小鼠的保护作用机制的研究
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作者 黄菲 李昱 +1 位作者 刘晓斐 胡成进 《国际免疫学杂志》 CAS 2018年第1期1-6,共6页
目的观察创伤弧菌溶细胞素A(vibrio vulnificus hemolysinA,VvhA)蛋白免疫对创伤弧菌致死剂量感染小鼠的保护作用,并探讨其可能的免疫保护机制。方法首先表达并纯化VvhA蛋白,然后建立VvhA蛋白免疫BALB/c小鼠动物模型。通过腹腔注... 目的观察创伤弧菌溶细胞素A(vibrio vulnificus hemolysinA,VvhA)蛋白免疫对创伤弧菌致死剂量感染小鼠的保护作用,并探讨其可能的免疫保护机制。方法首先表达并纯化VvhA蛋白,然后建立VvhA蛋白免疫BALB/c小鼠动物模型。通过腹腔注射致死剂量创伤弧菌感染后,连续72h观察小鼠存活率,并进行组织病理学检查以及肝功能指标检测;采用流式细胞术检测VvhA蛋白免疫BALB/c小鼠模后脾脏及腋窝和腹股沟淋巴结滤泡辅助性T细胞(follicular helper Tcells,Tfh)、GCB细胞表达。结果VvhA蛋白免疫组BALB/c小鼠72h生存率达83.3%。对照组BALB/c小鼠72h全部死亡。VvhA蛋白免疫组BALB/c小鼠主要脏器损伤显著减轻。VvhA蛋白免疫后小鼠脾脏、淋巴结Tfh细胞和生发中心(generminal center,GC)B细胞表达显著升高(P〈0.05)。结论VvhA蛋白免疫后能够显著减轻创伤弧菌致死剂量感染引发的过度炎症反应,其免疫保护机制可能是上调了Tfh和GCB细胞的表达。 展开更多
关键词 创伤弧菌 创伤弧菌溶细胞素A 免疫机制 滤泡辅助性T细胞 生发中心B细胞
珠海市海产品中2种致病性弧菌污染状况
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作者 杨春晓 方艳梅 +1 位作者 魏泉德 董莉 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第14期1784-1785,1792共3页
目的 了解珠海市海产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌2种致病性弧菌的污染状况,为评估珠海市海产品弧菌污染水平和制定监督管理制度提供科学依据。方法 根据《广东省食品安全风险监测工作手册》对2012年-2017年珠海市的海产品进行定性检测... 目的 了解珠海市海产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌2种致病性弧菌的污染状况,为评估珠海市海产品弧菌污染水平和制定监督管理制度提供科学依据。方法 根据《广东省食品安全风险监测工作手册》对2012年-2017年珠海市的海产品进行定性检测和定量分析,并将数据进行统计分析。结果 近年来珠海市海产品中副溶血性弧菌检出率为39.19%(154/393),创伤弧菌检出率为19.92%(53/213),两者检出率间差异有统计学意义(X^2=27.32,P〈0.05)。在各类海产品中牡蛎副溶血性弧菌的检出率和创伤弧菌的检出率均高于其他海产品。海产品中副溶血性弧菌、创伤弧菌的污染水平存在季节性差异。应用MPN法对副溶血性弧菌和创伤弧菌进行定量分析发现副溶血性弧菌平均含量(中位数为20 MPN/g)低于创伤弧菌平均含量(中位数为43 MPN/g)。结论 珠海市海产品中副溶血性弧菌和创伤弧菌的污染情况比较严重,应对海产品的污染状况密切关注,以预防食物中毒的出现,减少食品安全事件的发生。 展开更多
关键词 海产品 副溶血性弧菌 创伤弧菌 污染
威海地区两种海洋弧菌多重降落PCR体系的建立与应用 预览
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作者 徐晓军 吴玉龙 《滨州医学院学报》 2018年第2期87-89,93共4页
目的分析威海地区食源性疾病中,海洋性弧菌的检出率,并建立一种可以同时检测创伤弧菌及溶藻弧菌的多重降落PCR反应体系。方法收集怀疑食源性疾病患者粪便标本进行分离培养鉴定并分析,并且针对创伤弧菌的vvhA基因与溶藻弧菌的toxR基因分... 目的分析威海地区食源性疾病中,海洋性弧菌的检出率,并建立一种可以同时检测创伤弧菌及溶藻弧菌的多重降落PCR反应体系。方法收集怀疑食源性疾病患者粪便标本进行分离培养鉴定并分析,并且针对创伤弧菌的vvhA基因与溶藻弧菌的toxR基因分别设计两对特异性引物,应用Primer-BLAST检测引物特异性。应用该引物建立多重降落PCR,并检测93份粪便标本,其结果与细菌培养法进行比较结果。结果威海地区怀疑食源性疾病患者粪便标本中共检出海洋性弧菌45例,以副溶血性弧菌为主,随后为创伤性弧菌和溶藻弧菌。所建立的多重降落PCR对致病菌两种基因(vvhA、toxR)DNA的检测下限分别为104CFU/mL、103CFU/mL;与细菌培养法相比,灵敏度及总灵敏度均达100%,检测vvhA、toxR基因特异性分别为96.47%、95.45%,总特异性达95.95%。结论我们建立的多重降落PCR检测体系可用于由创伤弧菌和溶藻弧菌引起的食源性感染的快速诊断与流行病学调查。 展开更多
关键词 创伤弧菌 溶藻弧菌 PCR 病原性海洋弧菌
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创伤弧菌FrsA蛋白的纯化及生化表征 预览
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作者 鲍玲玲 李至敏 +3 位作者 王小琴 汤亚兰 许文武 李志敏 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第11期130-133,共4页
为确定创伤弧菌FrsA蛋白(VvFrsA)在大肠杆菌中的表达条件及体外纯化步骤,并对其进行生化表征分析。通过分子生物学手段将合成的创伤弧菌的FrsA基因(VvFrsA)连接到pET28a载体上,构建pET28a-VvFrsA原核表达载体。将该载体转化至大肠杆菌BL... 为确定创伤弧菌FrsA蛋白(VvFrsA)在大肠杆菌中的表达条件及体外纯化步骤,并对其进行生化表征分析。通过分子生物学手段将合成的创伤弧菌的FrsA基因(VvFrsA)连接到pET28a载体上,构建pET28a-VvFrsA原核表达载体。将该载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,经IPTG诱导实现了VvFrsA蛋白的可溶性表达。采用Ni-NTA亲和层析法纯化,得到重组VvFrsA蛋白。酶催化活性研究结果显示,VvFrsA具有酯酶功能,可以催化对硝基苯酚脂肪酸酯的水解,并且其最适底物为对硝基苯酚短链脂肪酸酯。综上,利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株成功表达了可溶性VvFrsA蛋白,并且VvFrsA体外具有催化对硝基苯酚脂肪酸酯水解活性。 展开更多
关键词 创伤弧菌 FrsA蛋白 蛋白质纯化 生化表征 酯酶
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2016年北京市海产品中创伤弧菌的污染调查及两种检测方法比较 被引量:2
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作者 王紫薇 汪琦 +9 位作者 赵晓娟 韩笑 刘莉 魏咏新 陈鑫 杨丽莉 曹嘉悦 徐蕾蕊 吕敬章 曾静 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2018年第2期182-186,共5页
目的对北京市市售海产品的创伤弧菌污染情况进行调查,并比较实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)法与VITEK鉴定方法检测结果的一致性。方法采用传统检验方法结合分子生物学方法对在北京市市场随机采集的105份海产品进行创伤弧菌检验,并比... 目的对北京市市售海产品的创伤弧菌污染情况进行调查,并比较实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)法与VITEK鉴定方法检测结果的一致性。方法采用传统检验方法结合分子生物学方法对在北京市市场随机采集的105份海产品进行创伤弧菌检验,并比较了RT-PCR法和VITEK鉴定方法的准确性。结果 105份海产品中,有40份样品检出创伤弧菌,检出率为38.10%;其中,虾类产品检出率高达52.38%(11/21),其次为贝类产品(37.88%,25/66)和鱼类产品(22.22%,4/18)。经rpo B基因测序验证,RT-PCR和VITEK方法的准确率分别为100.00%(40/40)和67.50%(27/40)。结论北京市海产品中存在创伤弧菌的污染,应对海产品中创伤弧菌引起食源性污染的潜在风险进行评估,预防食物中毒的发生。 展开更多
关键词 创伤弧菌 海产品 污染 调查 方法比较 食源性致病菌 实时荧光聚合酶链式反应 VITEK鉴定 北京
舟山市毛蚶中创伤弧菌的污染分布及特征
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作者 陈加贝 王虹玲 +2 位作者 罗红宇 龚红霞 黄丽君 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第10期1184-1187,1192共5页
目的调查研究舟山市毛蚶中创伤弧菌污染状况,以及不同来源分离株之间的相关性。方法采用MPN法监测不同季节养殖场和零售市场毛蚶的污染状况,采用Pulse Net中公布的霍乱弧菌PFGE标准进行分子分型。结果 316份毛蚶样品的创伤弧菌总检出率... 目的调查研究舟山市毛蚶中创伤弧菌污染状况,以及不同来源分离株之间的相关性。方法采用MPN法监测不同季节养殖场和零售市场毛蚶的污染状况,采用Pulse Net中公布的霍乱弧菌PFGE标准进行分子分型。结果 316份毛蚶样品的创伤弧菌总检出率为22.15%,夏季和秋季阳性检出率分别为40.40%和28.21%,明显高于春季的9.33%和冬季的1.56%。养殖场创伤弧菌检出率(23.21%)高于零售市场(20.94%),差异有统计学意义(P〈0.05),且养殖场和零售市场的污染高峰都出现在夏季。41株创伤弧菌有效分离株和4株病源株分子分型后形成44个型别,根据TENOVER原则,其中有4组分离株聚类度较高(〉98%)。结论应在夏秋及秋冬季节分别加强舟山地区养殖环节和零售市场的风险管控,且分离株存在广泛的遗传多样性和一定的遗传稳定性,可为食品风险监测提供相关因素。 展开更多
关键词 创伤弧菌 污染状况 脉冲场凝胶电泳 分子分型
创伤弧菌TF3全基因组包含的CRISPR-Cas系统及MGIVvuTF3基因岛分析
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作者 云龙 罗鹏 +2 位作者 田雨顺 丁雄祺 胡超群 《微生物学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1266-1273,共8页
【目的】分析创伤弧菌(Vibrio vulnificus)全基因组框架序列,挖掘感兴趣的遗传位点,探索其是否具有CRISPR系统及其特征。【方法】在病虾体内分离获得了一株创伤弧菌TF3,通过Illumina Miseq测序得到基因组框架序列。经注释分析发现其... 【目的】分析创伤弧菌(Vibrio vulnificus)全基因组框架序列,挖掘感兴趣的遗传位点,探索其是否具有CRISPR系统及其特征。【方法】在病虾体内分离获得了一株创伤弧菌TF3,通过Illumina Miseq测序得到基因组框架序列。经注释分析发现其基因组中存在一个CRISPR-Cas系统,命名为CRISPR-CasTF3,进一步分析发现CRISPR-CasTF3位于一个基因岛上,将该基因岛命名为MGIVvu TF3。对CRISPR-CasTF3及MGIVvu TF3的特征和来源进行了分析。【结果】CRISPR-CasTF3属于与大肠杆菌类似的Ι-E型CRISPR-Cas系统,CRISPR-CasTF3包括8个cas基因,其排列为cas3-cas8e-cse2-cas6-cas7-cas5-cas1-cas2;具有50个重复序列,每二个重复序列间为一个Spacer序列。MGIVvu TF3具有att L和att R序列,含有位点特异性整合、剪切、转移相关的基因。MGIVvu TF3与霍乱弧菌O395基因组中的一个基因岛MGIVch0395具较高相似性,二者最显著的差别在于Spacer序列完全不同,以及各有几个非保守的预测基因。【结论】MGIVvu TF3及CRISPR-CasTF3极有可能通过基因水平转移获得,并且CRISPR-CasTF3系统可以借助MGIVvu TF3实现水平转移。 展开更多
关键词 CRISPR cas基因 基因岛 创伤弧菌
创伤弧菌致病性及致病机制研究进展 被引量:1
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作者 叶淑瑶 杨保伟 李凤琴 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2018年第2期213-219,共7页
创伤弧菌广泛存在于海水和牡蛎等海产品中,具有很强的细胞毒性和溶血性,被美国疾病预防控制中心(CDC)列为三大致病性弧菌之一。本文就创伤弧菌在食品中的污染状况,人类感染途径及临床表现,致病性、致病机制和检测方法等进行综述,以期... 创伤弧菌广泛存在于海水和牡蛎等海产品中,具有很强的细胞毒性和溶血性,被美国疾病预防控制中心(CDC)列为三大致病性弧菌之一。本文就创伤弧菌在食品中的污染状况,人类感染途径及临床表现,致病性、致病机制和检测方法等进行综述,以期为该菌感染的预防和治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 创伤弧菌 食源性致病菌 污染水平 致病性 致病机制 检测方法
创伤弧菌快速检测法的建立 预览 被引量:1
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作者 徐宸 王鑫 钟江 《安徽农业科学》 CAS 2018年第19期114-116,共3页
[目的]针对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,基于单克隆斑点杂交技术进行改良,建立一种创伤弧菌快速检测方法。[方法]由水产品牡蛎中分离获得一株创伤弧菌FD-1,以其灭活全菌为抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术... [目的]针对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,基于单克隆斑点杂交技术进行改良,建立一种创伤弧菌快速检测方法。[方法]由水产品牡蛎中分离获得一株创伤弧菌FD-1,以其灭活全菌为抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。在此基础上,对传统斑点杂交技术进行优化改进,以化学发光试剂ECL替代传统TMB底物,进一步提高其灵敏度、缩短检测时间和简化操作步骤。[结果]与传统斑点杂交法相比,改良斑点杂交法的检测时间可缩短至2 h,检测限可达1×10~5CFU/m L。[结论]改良斑点杂交法比传统TMB底物斑点杂交法(1×10~7CFU/m L)灵敏度提高了100倍,操作过程简单,在水产品检验和医疗诊断方面具有良好的开发应用前景。 展开更多
关键词 创伤弧菌 杂交瘤技术 单克隆抗体 斑点杂交 ECL
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青蛤(Cyclina sinensis)AP-1基因的克隆及在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)侵染下的表达分析 预览 被引量:1
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作者 丁丹 潘宝平 +2 位作者 王玉梅 侯梓园 闫春财 《海洋与湖沼》 CSCD 北大核心 2018年第1期192-197,共6页
为了探究青蛤(Cyclina sinensis)转录因子(transcription factor gene,AP-1)在病原微生物侵染下的免疫防御应答过程中的潜在作用,本研究采用转录组测序筛选、设计特异性引物并成功克隆得到青蛤AP-1基因的c DNA序列(Gen Bank注册号... 为了探究青蛤(Cyclina sinensis)转录因子(transcription factor gene,AP-1)在病原微生物侵染下的免疫防御应答过程中的潜在作用,本研究采用转录组测序筛选、设计特异性引物并成功克隆得到青蛤AP-1基因的c DNA序列(Gen Bank注册号:KX840340),利用生物信息学在线软件进行了生物信息学分析,结果显示:AP-1基因全长1914bp,结构域全长195bp,编码65个氨基酸,开放阅读框全长825bp,编码274个氨基酸,存在一个保守的b ZIP功能域;是重要的转录因子。运用实时荧光定量PCR(q PCR)的方法分析了Ap-1基因在青蛤5个组织中表达过程变化,结果表明:Ap-1基因在血淋巴、外套膜、肝脏、闭壳肌、腮等组织中广泛表达;在血淋巴中表达量最高,在闭壳肌中次之,然后为鳃和外套膜,在肝脏中表达量最低,约为血淋巴的1/7。另外,我们还分析了鳗弧菌(Vibrio anguillarum)侵染青蛤血淋巴后的变化情况,结果显示:在鳗弧菌侵染后,与对照组相比,青蛤血淋巴中的AP-1表达量明显升高,在24h时Ap-1基因表达量最大,与对照组差异极显著(P〈0.01)。说明Ap-1基因在青蛤的免疫防御反应中具有重要作用,同时也为进一步研究AP-1在病原微生物侵染青蛤过程中的功能和作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 青蛤 转录因子(AP-1) 定量PCR 鳗弧菌 免疫应答
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创伤弧菌溶细胞素特定氨基酸序列分析及其人源化单链抗体筛选
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作者 潘振 吕鹏 +6 位作者 邵淑丽 毕艳梅 孙梅 曲业敏 陈英剑 王明义 胡成进 《现代免疫学》 CSCD 北大核心 2018年第5期360-365,共6页
本研究利用生物信息学方法分析创伤弧菌(vibrio vulnificus, V.vulnificus)溶细胞素的蓖麻毒素结构域内氨基酸序列并合成多肽,筛选人工合成的单链抗体噬菌体文库Tomlinson I+J,为创伤弧菌感染的抗体阻断治疗研究奠定基础。通过对未... 本研究利用生物信息学方法分析创伤弧菌(vibrio vulnificus, V.vulnificus)溶细胞素的蓖麻毒素结构域内氨基酸序列并合成多肽,筛选人工合成的单链抗体噬菌体文库Tomlinson I+J,为创伤弧菌感染的抗体阻断治疗研究奠定基础。通过对未经处理的大容量Tomlinson I+J噬菌体文库进行3轮特异性亲和筛选,从中筛到特异性结合溶细胞素多肽的克隆,命名为scFv-D2,经氨基酸序列分析验证其含有完整的人源化抗体重链和轻链可变区。将scFv-D2克隆转化E.coli HB2151并诱导表达,用ELISA方法检测其可溶性scFv片段与溶细胞素毒性多肽的结合活性。结果显示从Tomlinson I+J文库成功筛选出一株具有结合活性的人源化噬菌体单链抗体,可用于创伤弧菌感染抗体阻断治疗策略的研究。 展开更多
关键词 创伤弧菌 溶细胞素 噬菌体展示 单链抗体
创伤弧菌溶细胞素对小鼠骨髓来源巨噬细胞坏死性凋亡的作用及机制 预览
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作者 帅维正 刘剑飞 +6 位作者 吴成林 刘妍 蒲倩 王欲晓 周丽君 张志成 段蕴铀 《解放军医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期419-423,共5页
目的探讨创伤弧菌溶细胞素(VVc)对永生化小鼠骨髓来源巨噬细胞(i BMDM)坏死性凋亡的作用及机制。方法 i BMDM细胞按照不同浓度的VVc刺激以及是否接受受体相互作用蛋白1(RIP1)特异性抑制剂Nec-1的预处理分为5组:对照组、VVc 2μg... 目的探讨创伤弧菌溶细胞素(VVc)对永生化小鼠骨髓来源巨噬细胞(i BMDM)坏死性凋亡的作用及机制。方法 i BMDM细胞按照不同浓度的VVc刺激以及是否接受受体相互作用蛋白1(RIP1)特异性抑制剂Nec-1的预处理分为5组:对照组、VVc 2μg/ml组、VVc 4μg/ml组、Nec-1+VVc 2μg/ml组和Nec-1+VVc 4μg/ml组。Nec-1各组在VVc处理前1h加入5μmol/L Nec-1,实验中各组在VVc处理2h后收集培养上清及细胞。采用乳酸脱氢酶(LDH)法评价VVc对细胞的毒性情况;采用流式细胞仪检测细胞状态;采用Western blotting检测细胞焦亡和坏死性凋亡相关蛋白GSDMD(gasdermin D protein)和混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)的表达。结果培养基上清内LDH水平随VVc浓度上升而升高,且可被Nec-1预处理所抑制(P〈0.05)。流式细胞检测结果显示,VVc处理后呈Annexin V/PI双标阳性的细胞比例明显增加,使用Nec-1预处理后,该比例明显下降(P〈0.05)。Western blotting检测结果显示,VVc处理组p MLKL水平明显高于对照组和Nec-1+VVc处理组(P〈0.05),各组均未观察到焦亡相关蛋白存在剪切体活性形式。结论 VVc可通过RIP1诱导小鼠骨髓来源巨噬细胞发生坏死性凋亡。 展开更多
关键词 创伤弧菌 溶细胞素 坏死性凋亡 依赖受体相互作用蛋白
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