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抗腹泻益生菌T-70-1胞外产抗菌蛋白发酵条件的优化 被引量:2
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作者 朱永明 李森 +2 位作者 董伟洁 姜军坡 朱宝成 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第13期1-7,共7页
为了提高益生菌T-70-1胞外产抗菌蛋白的产量,试验采用单因素分析法,以抑制大肠杆菌能力为指标,分别考察碳源、氮源、无机盐种类对T-70-1菌株发酵产抗菌蛋白的影响,再结合正交试验法对该菌株胞外产抗菌蛋白的培养基组成和发酵条件进行优... 为了提高益生菌T-70-1胞外产抗菌蛋白的产量,试验采用单因素分析法,以抑制大肠杆菌能力为指标,分别考察碳源、氮源、无机盐种类对T-70-1菌株发酵产抗菌蛋白的影响,再结合正交试验法对该菌株胞外产抗菌蛋白的培养基组成和发酵条件进行优化,利用SPSS软件进行方差分析,确定最佳发酵产抗菌蛋白的条件。结果表明:优化后的发酵条件为葡萄糖2.5%、蛋白胨2.0%、Mg SO40.08%、KCl 0.10%;初始p H值为6.5,种子液按照4%接种量接种于装液量为30 m L/250 m L的锥形瓶中,30℃发酵培养32 h。优化后胞外产抗菌蛋白相应的抑菌圈面积增大至525.5 mm2,较优化前增幅达60.7%。说明通过优化发酵条件获得了菌株T-70-1发酵产抗菌蛋白最佳培养基组成和培养条件,抗菌蛋白产量得到了明显提高。 展开更多
关键词 益生菌 抗菌蛋白 发酵优化 正交试验 SPSS软件 方差分析
响应曲面法优化鸡腿菇菌丝发酵液抗菌蛋白及其抗氧化活性 预览 被引量:3
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作者 秦楠 刘羽 王力宇 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2018年第4期83-90,共8页
以抑菌圈直径为指标,采用单因素试验和响应面法对鸡腿菇菌丝发酵液产抗菌蛋白的发酵条件进行优化。得到最佳发酵条件为:发酵时间5 d,温度24℃,p H 7,接种量5%,摇床转速100 r/min,在此条件下抗菌蛋白的抑菌圈直径达21.14 mm;抗氧化性结... 以抑菌圈直径为指标,采用单因素试验和响应面法对鸡腿菇菌丝发酵液产抗菌蛋白的发酵条件进行优化。得到最佳发酵条件为:发酵时间5 d,温度24℃,p H 7,接种量5%,摇床转速100 r/min,在此条件下抗菌蛋白的抑菌圈直径达21.14 mm;抗氧化性结果表明,鸡腿菇菌丝发酵液抗菌蛋白对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的清除能力相对较弱,而对羟基自由基(·OH)有较强的清除作用,其抗氧化能力随着抗菌蛋白浓度的增加而增强。 展开更多
关键词 鸡腿菇 菌丝发酵液 抗菌蛋白 抗氧化
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松江鲈鱼体表黏液抑菌效果研究 预览 被引量:1
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作者 邱进 潘连德 张帅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期195-200,共6页
以松江鲈鱼(Trachidermus fasciatus)体表黏液作为试验材料,分别用水、酸、有机物3种不同的提取剂对其进行粗提取,采用滤纸片法和二倍稀释法确定其抑菌效果,只有酸的粗提物对所检测的6种病原菌有明显的抑制作用,且抑制作用由大到小的... 以松江鲈鱼(Trachidermus fasciatus)体表黏液作为试验材料,分别用水、酸、有机物3种不同的提取剂对其进行粗提取,采用滤纸片法和二倍稀释法确定其抑菌效果,只有酸的粗提物对所检测的6种病原菌有明显的抑制作用,且抑制作用由大到小的排列顺序是:维氏气单胞菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌、沃氏葡萄球菌。用SDS-PAGE定量分析酸的粗提物蛋白质表达谱,其蛋白大小〈95 kD,且在34-55 kD之间含量最高。初步研究表明松江鲈鱼体表黏液酸的粗提物在抵抗上述病原菌入侵方面发挥了主要作用,其抗菌蛋白的确定还有待进一步分析。 展开更多
关键词 松江鲈鱼 体表黏液 抑菌效果 抗菌蛋白
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细菌诱导对昆虫细胞系NIH-SaPe-4生长与抗菌蛋白活性的影响
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作者 宁超 冯颖 +3 位作者 丁伟峰 孙龙 何钊 张欣 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期 565-572,共8页
离体昆虫细胞系在昆虫免疫、抗菌肽及蛋白研究和药物开发方面具有较好的应用前景。该文对双翅目麻蝇科麻蝇成虫卵巢胚细胞系NIH-SaPe-4在藤黄微球菌诱导和非诱导条件下,细胞密度和活力的变化、诱导对细胞生长的影响、抗菌活性及其活性... 离体昆虫细胞系在昆虫免疫、抗菌肽及蛋白研究和药物开发方面具有较好的应用前景。该文对双翅目麻蝇科麻蝇成虫卵巢胚细胞系NIH-SaPe-4在藤黄微球菌诱导和非诱导条件下,细胞密度和活力的变化、诱导对细胞生长的影响、抗菌活性及其活性随时间的变化关系等进行了研究,并对所得抗菌蛋白进行了初步分离纯化和稳定性评估。结果表明,诱导使得细胞密度增长减缓,活力变弱。诱导和非诱导组细胞均可产生对3种革兰氏阳性菌具有抑菌活性的抗菌蛋白,其中对藤黄微球菌的抑菌活性最明显;诱导组细胞抗菌蛋白活性出现时间、稳定期抑菌活性均大于非诱导组,诱导菌消失一段时间后抗菌活性恢复到同等水平。抗菌蛋白具有酸碱稳定性和热稳定性。2组抗菌蛋白粗提液经凝胶、反相分离纯化后均得到一种60 kDa左右的抗菌蛋白,诱导组电泳后条带亮度大于非诱导组。该研究为昆虫细胞抗菌蛋白性质、分离纯化等研究奠定了科学基础。 展开更多
关键词 昆虫细胞系 诱导 NIH-SaPe-4 抗菌蛋白 藤黄微球菌
CIII-1菌株胞外抗菌蛋白诱导辣椒抗炭疽病作用研究——对防御酶体系的影响 预览 被引量:4
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作者 柳凤 陈振明 何红 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第6期 226-230,共5页
为了解CIII-1抗菌蛋白对辣椒炭疽病的防病机理,本文研究了用CIII-1抗菌蛋白处理后的辣椒果内可溶性蛋白、丙二醛(MDA)含量及过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化。结果表明... 为了解CIII-1抗菌蛋白对辣椒炭疽病的防病机理,本文研究了用CIII-1抗菌蛋白处理后的辣椒果内可溶性蛋白、丙二醛(MDA)含量及过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化。结果表明:CIII-1抗菌蛋白粗提液喷雾后立即接种辣椒炭疽,9 d的防治效果为 81.82%,13 d仍有52.00%;抗菌蛋白处理辣椒果后,可溶性蛋白及MDA含量和超氧化物歧化酶(SOD)变化不明显,其它3种防御酶在辣椒体内都有明显提高,但各酶活提高程度、酶活高峰出现的时间不同,说明不同的酶在辣椒体内发挥作用的时间不同。因此,CIII-1抗菌蛋白可通过诱导植株防御酶系活性的提高增强植株的抗病性。 展开更多
关键词 CIII-1抗菌蛋白 丙二醛 过氧化物酶 多酚氧化酶 苯丙氨酸解氨酶
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CⅢ-1菌株胞外抗菌蛋白防治香蕉炭疽病研究 预览 被引量:6
6
作者 柳凤 陈振明 何红 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期580-584,共5页
为明确红树内生细菌CⅢ-1菌株的抗菌蛋白对香蕉炭疽病的控制作用,采用平板对峙法结合显微观察测定其对致病菌的抑制活性,进行抗菌蛋白对香蕉炭疽病的防病试验,并测定了香蕉果实内丙二醛的含量及防御酶活性的变化。结果表明,CⅢ-1抗菌蛋... 为明确红树内生细菌CⅢ-1菌株的抗菌蛋白对香蕉炭疽病的控制作用,采用平板对峙法结合显微观察测定其对致病菌的抑制活性,进行抗菌蛋白对香蕉炭疽病的防病试验,并测定了香蕉果实内丙二醛的含量及防御酶活性的变化。结果表明,CⅢ-1抗菌蛋白粗提液喷雾后立即接种香蕉炭疽病菌,处理8d后其防治效果达71.44%,10d后防效仍有56.67%;防病机制测定表明,(1)CⅢ-1抗菌蛋白对香蕉炭疽病菌的菌丝生长及分生孢子萌发等具有极强的抑制作用,处理后的病菌菌丝出现肿胀、膨大、成泡囊状畸形,分生孢子基本不萌发。(2)抗菌蛋白处理香蕉后,与对照比,抗菌蛋白处理的香蕉丙二醛(MDA)的含量较低,同时过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)等活性也均有不同程度的变化。 展开更多
关键词 香蕉 抗菌蛋白 炭疽病 生物防治 机制
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水稻稻瘟病拮抗菌L1鉴定及抑菌特性的初步研究 预览 被引量:19
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作者 李永刚 宋兴舜 +2 位作者 马凤鸣 文景芝 赵雪莹 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期 898-902,共5页
本研究对水稻稻瘟病菌的拮抗菌L1形态、生理生化特性等进行测定,结果发现其为杆状细胞、革兰氏阳性、菌落不规则有褶皱、好氧生长、颜色较深等,初步鉴定为枯草芽孢杆菌;拮抗菌L1培养5d的发酵液抑菌活性最高,抑菌率为74.57%;拮抗菌L1对... 本研究对水稻稻瘟病菌的拮抗菌L1形态、生理生化特性等进行测定,结果发现其为杆状细胞、革兰氏阳性、菌落不规则有褶皱、好氧生长、颜色较深等,初步鉴定为枯草芽孢杆菌;拮抗菌L1培养5d的发酵液抑菌活性最高,抑菌率为74.57%;拮抗菌L1对水稻稻瘟病菌的拮抗活性物质对温度不敏感;拮抗菌L1的发酵液用硫酸铵梯度沉淀法提取粗蛋白,在50%~60%硫酸铵饱和度下沉淀的粗蛋白质对水稻稻瘟病菌抑菌效果最好,平均抑菌半径达0.51cm。 展开更多
关键词 生物防治 枯草芽孢杆菌 拮抗蛋白 鉴定
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葫芦种子中抗菌蛋白的初步研究 预览 被引量:1
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作者 阿不来提江.吐尔逊 木巴拉克.艾合买提 +1 位作者 郑树涛 孙素荣 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2008年第8期 30-32,共3页
用硫酸铵沉淀法从葫芦种子中提取蛋白粗提物,经过SP-sepharose fast flow阳离子交换柱层析分离得到3个不同峰的蛋白质,初步纯化的抗菌蛋白对植物致病菌指状青霉(Penicillium degitatum)和意大利青霉(Penicillium italicum)具有明... 用硫酸铵沉淀法从葫芦种子中提取蛋白粗提物,经过SP-sepharose fast flow阳离子交换柱层析分离得到3个不同峰的蛋白质,初步纯化的抗菌蛋白对植物致病菌指状青霉(Penicillium degitatum)和意大利青霉(Penicillium italicum)具有明显抑制作用,同样,发现此抗菌蛋白细菌臭鼻克雷伯菌(Klebsiella penumoniae)鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)的生长也有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 葫芦 抗菌蛋白 抗菌活性
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多粘类芽孢杆菌及其产生的生物活性物质研究进展 预览 被引量:41
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作者 杨少波 刘训理 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期 1621-1625,共5页
多粘类芽孢杆(Paenibacillus polymyxa)对人或动植物没有致病性,某些菌株可产生如抗生素、拮抗蛋白、植物激素、酶、絮凝剂等多种生物活性物质。这些活性物质在植物病害防治以及人和动物疾病治疗方面具有诱人的应用前景。本文对近年... 多粘类芽孢杆(Paenibacillus polymyxa)对人或动植物没有致病性,某些菌株可产生如抗生素、拮抗蛋白、植物激素、酶、絮凝剂等多种生物活性物质。这些活性物质在植物病害防治以及人和动物疾病治疗方面具有诱人的应用前景。本文对近年来多粘类芽孢杆菌及其产生的生物活性物质的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 多粘类芽孢杆菌 生物活性物质 抗生素 抗菌蛋白 PGPR
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辣椒抗菌蛋白cDNA的分离与表达的初步分析 预览
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作者 邱敏 曹蕾 +6 位作者 贺俐 王育娜 徐波 许先松 赖燕 林明 何水林 《漳州师范学院学报:自然科学版》 2007年第3期 91-94,46,共5页
本研究从经辣椒疫霉侵染处理的辣椒叶片cDNA文库中分离获得了一个辣椒抗菌蛋白cDNA阳性克隆,其长度为255bp,含有长度为85个氨基酸的开放读码框架,与其它植物抗菌蛋白或几丁质酶有不同程度的同源性,推测为辣椒抗菌蛋白,命名为CansLTPS.cD... 本研究从经辣椒疫霉侵染处理的辣椒叶片cDNA文库中分离获得了一个辣椒抗菌蛋白cDNA阳性克隆,其长度为255bp,含有长度为85个氨基酸的开放读码框架,与其它植物抗菌蛋白或几丁质酶有不同程度的同源性,推测为辣椒抗菌蛋白,命名为CansLTPS.cDNA-AFLP分析表明,CansLTPS的转录受UV-B照射和辣椒疫霉侵染的诱导,外源脱落酸(ABA)、乙烯(ETH)、水杨酸(SA)等可不同程度的诱导CansLTPS基因的转录,而MeJA处理对CansLTPS基因的转录表达影响不大,表明CansLTPS基因可应答生物和非生物逆境胁迫,其上游可能涉及ABA、ETH、SA等介入的信号传递途径. 展开更多
关键词 辣椒 抗菌蛋白 CDNA克隆 基因表达
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鲑点石斑鱼皮肤抗菌活性蛋白的纯化及抗菌活性 预览 被引量:3
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作者 张英霞 邹瑗徽 +2 位作者 满初日嘎 周永灿 王世峰 《动物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期 627-632,共6页
近年来在多种生物体中都发现有抗菌活性蛋白和多肽。由于其具有生物化学多样性,抗病毒、微生物、真菌、原生动物、肿瘤,促进伤口愈合等生物学活性,而引起研究者的极大兴趣。抗菌活性蛋白和多肽在动物的先天免疫中具有重要作用,它们... 近年来在多种生物体中都发现有抗菌活性蛋白和多肽。由于其具有生物化学多样性,抗病毒、微生物、真菌、原生动物、肿瘤,促进伤口愈合等生物学活性,而引起研究者的极大兴趣。抗菌活性蛋白和多肽在动物的先天免疫中具有重要作用,它们直接作用于细菌,并将其杀死。鲑点石斑鱼(Epinephelusfario)是中国南方水产养殖中重要的海水鱼。近年来,由于细菌和病毒引发的病害造成鲑点石斑鱼大量死亡,但其抗菌活性蛋白及多肽目前还未见报道。本研究发现鲑点石斑鱼皮肤具有抗菌活性成分,鲑点石斑鱼皮肤匀浆物经胰蛋白酶水解后抗菌活性丧失,说明该活性是由蛋白质引起的。经离子交换层析及凝胶过滤层析,从鲑点石斑鱼皮肤中分离纯化到抗菌活性蛋白(Efap)。SDS—PAGE显示,Efap为单链蛋白,分子量约41kD。该成分能同时抑制革兰氏阳性菌,如金黄色葡萄球菌、滕黄微球菌、枯草牙胞杆菌和革兰氏阴性菌,如溶藻弧菌、副溶血弧菌、河流弧菌、多杀性巴氏杆菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌。革兰氏阴性菌中,溶藻弧菌、副溶血弧菌、河流弧菌和多杀性 巴氏杆菌对Efap较敏感,MIC〈20mol/L,其他3种菌敏感性较差,MIC〉20mol/L。另外,Efap显示出较强的抗金黄色葡萄球菌的活性,MIC为5—10mol/L。Efap的广谱抗菌性,说明其在鲑点石斑鱼免疫防御中具有一定的作用。 展开更多
关键词 鲑点石斑鱼 抗菌蛋白及多肽 纯化 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌
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禽抗微生物肽的结构、分布及活性研究进展 预览 被引量:2
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作者 左珂菁 张祥斌 +4 位作者 冀君 陈峰 杨小梅 梁梓森 谢青梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第4期 38-46,共9页
抗微生物肽是生物体产生的一种具有抗微生物活性的多肽,具有抵抗原生动物、真菌、病毒、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的活性,不易产生耐药性,有取代传统抗生素的发展趋势。众多学者对禽类抗微生物肽进行了大量的研究,从禽类中陆续分... 抗微生物肽是生物体产生的一种具有抗微生物活性的多肽,具有抵抗原生动物、真菌、病毒、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的活性,不易产生耐药性,有取代传统抗生素的发展趋势。众多学者对禽类抗微生物肽进行了大量的研究,从禽类中陆续分离到20多种新的抗微生物肽,主要综述了禽抗微生物肽的结构、分布及活性研究进展,为禽抗微生物肽的进一步探索研究奠定基础。 展开更多
关键词 禽类 抗微生物肽 结构 分布 活性
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1株广谱抗菌活性菌株的筛选鉴定及其抗菌蛋白的分离纯化 预览 被引量:3
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作者 赵圣明 赵岩岩 +1 位作者 马汉军 何鸿举 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第2期170-176,共7页
从湖南传统腊肉中分离筛选得到1株具有广谱抑菌活性的菌株HLR13,该菌株发酵液对蜡样芽孢杆菌、荧光假单胞菌、藤黄微球菌和肠炎沙门菌等食品中常见的致病菌具有较强的抑制活性。通过形态学特征、生理生化特征及16S rRNA序列分析,该菌株... 从湖南传统腊肉中分离筛选得到1株具有广谱抑菌活性的菌株HLR13,该菌株发酵液对蜡样芽孢杆菌、荧光假单胞菌、藤黄微球菌和肠炎沙门菌等食品中常见的致病菌具有较强的抑制活性。通过形态学特征、生理生化特征及16S rRNA序列分析,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌斯皮兹仁亚种(Bacillus subtilis subsp.spizienii)。采用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析(Q Sepharose FF)和凝胶过滤层析(Sephadex G-75)等方法对该菌株所产抗菌蛋白进行分离纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测显示纯化后的蛋白为单一条带,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析和NCBI/nr蛋白数据库比对初步确定该抗菌蛋白分子质量为31 494 Da,是枯草芽孢杆菌产生的一种假定蛋白。本实验可为新型天然防腐剂的开发提供一定理论依据。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌斯皮兹仁亚种(Bacillus SUBTILIS subsp.spizienii) 抗菌蛋白 菌株鉴定 分离 纯化
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Cloning and Analysis of TasA Gene in Bacillus subtilis HAS 预览
14
作者 Guoruo XIONG Gengfeng ZHAO +3 位作者 Wenwei CAI SuranWU Benpeng YANG Shuzhen ZHANG 《农业生物技术:英文版》 CAS 2017年第2期48-50,54共4页
In order to clarify the mechanism for the inhibitory action of the Bacillus subtilis strain HAS on Sporisorium scitamineum(Syd.),which can cause sugarcane smut,the full-length TasA gene which encodes a protein with br... In order to clarify the mechanism for the inhibitory action of the Bacillus subtilis strain HAS on Sporisorium scitamineum(Syd.),which can cause sugarcane smut,the full-length TasA gene which encodes a protein with broad-spectrum antimicrobial activity,was PCR-amplified from HAS,and cloned into pMD18-T vector.Sequence analysis indicated that the full-length Tas A cloned from HAS consisted of 786 nucleotides,and shared 99% homology in nucleotide sequence with the TasA gene sequence published in Genbank(AJ871386.1).It was predicted that the molecular weight of Tas A protein was about 28 kD.Base transitions or transversions occurred at positions 104,164,169,250,399,623 and 627,at the 2~(nd),2~(nd),3~(rd),1~(st),3~(rd),2~(nd) and 3~(rd) bases of TasA codons.The mutations in the seven bases may cause the missense mutations of the polypeptide chain.Compared with the amino acid sequences of the TasA protein encoded by Bacillus subtilis subsp.subtilis str.168,mutations in two amino acids at positions 150 and 209of the protein encoded by the cloned TasA gene were found,and as a result,an alanine was replaced with a threonine,and a glutamic acid was replaced with an asparagine. 展开更多
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生防细菌K2-1抗菌蛋白纯化及其拮抗水产病原菌分析 预览
15
作者 唐旭 刘源森 +3 位作者 林凌 黄仕新 方卫东 徐长安 《农业科学与技术:英文版》 CAS 2015年第8期1582-1583,1675共3页
[目的]纯化源自生防细菌K2-1的抗菌蛋白并进行抗菌蛋白于体外对主要水产病原菌的拮抗分析。[方法]利用硫酸铵沉淀,而后透析,获得抗菌蛋白粗品,应用凝胶色谱结合水浴,进一步对抗菌蛋白粗品进行纯化;采用琼脂扩散法,进行抗菌蛋白体外拮抗... [目的]纯化源自生防细菌K2-1的抗菌蛋白并进行抗菌蛋白于体外对主要水产病原菌的拮抗分析。[方法]利用硫酸铵沉淀,而后透析,获得抗菌蛋白粗品,应用凝胶色谱结合水浴,进一步对抗菌蛋白粗品进行纯化;采用琼脂扩散法,进行抗菌蛋白体外拮抗溶藻弧菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、荧光假单胞菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌及鳗弧菌实验,分析其抗菌活性。[结果]应用上述分离纯化方法,获得色谱纯的抗菌蛋白APK2,过程回收率为0.08%,拮抗实验表明,该抗菌蛋白对多数应试病原菌具有较强的抑制作用。[结论]抗菌蛋白APK2有可能作为化学抗生素的替代品,用于水产细菌病的绿色防治。 展开更多
关键词 抗菌蛋白 纯化 水产病原菌
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产抑菌蛋白的丁酸梭菌的筛选和鉴定及体外益生功能研究 被引量:13
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作者 王腾浩 宗鑫 +1 位作者 宋德广 汪以真 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2015年第13期75-81,共7页
试验旨在筛选产高效抑菌蛋白的丁酸梭菌,并研究其体外生物学特性,为其在动物生产中的应用奠定基础。采用厌氧培养法进行菌种分离,孔穴琼脂扩散法进行抑菌活性筛选,并通过形态学、生理生化特性和16S rDNA基因序列同源性分析进行菌种... 试验旨在筛选产高效抑菌蛋白的丁酸梭菌,并研究其体外生物学特性,为其在动物生产中的应用奠定基础。采用厌氧培养法进行菌种分离,孔穴琼脂扩散法进行抑菌活性筛选,并通过形态学、生理生化特性和16S rDNA基因序列同源性分析进行菌种鉴定。选取丁酸梭菌ZJU—1进行体外抗逆性和益生功能研究,采用试剂盒进行酶活测定。顶空一气相色谱发测定挥发性脂肪酸。结果表明:从盲肠内容物中分离到6株丁酸梭菌,其中3株菌种对大肠杆菌K88、金黄色葡萄球菌ATCC25923均具有明显抑制作用。目标菌株ZJU-F1经鉴定结果为丁酸梭菌。丁酸梭菌ZJU—F1具有较好人工胃液、人工肠液、胆盐和抗生素耐受性;分泌淀粉酶和蛋白酶,活性分别达2515.43U/mL和93.72U/mL;并具有分泌挥发性脂肪酸的功能,其中乙酸和丁酸的分泌量分别达2.29g/L和1.87g/L。本试验获得的丁酸梭菌ZJU—Fl具有较强的抗逆性和益生功能,作为潜在的抗生素替代物具有巨大的开发利用价值. 展开更多
关键词 丁酸梭菌 抑菌蛋白 抑菌活性 筛选 鉴定
短小芽胞杆菌抑菌蛋白TasA基因克隆及功能分析 预览 被引量:4
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作者 刘通 陈云鹏 +1 位作者 李琼洁 顾振芳 《上海交通大学学报:农业科学版》 2014年第5期48-52,56共6页
为了研究短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的抑菌相关基因的功能,采用PCR方法从DX01基因组DNA中扩增出编码死诅基因的全长DNA序列,并构建原核表达载体pET2-TasA,在大肠杆菌Escherichia coli BL21中表达获得TasA基因的融合表达... 为了研究短小芽胞杆菌Bacillus pumilus DX01菌株的抑菌相关基因的功能,采用PCR方法从DX01基因组DNA中扩增出编码死诅基因的全长DNA序列,并构建原核表达载体pET2-TasA,在大肠杆菌Escherichia coli BL21中表达获得TasA基因的融合表达蛋白,分别利用悬滴法和平板打饼法检测融合蛋白对玉米小癍病菌(Bipolaris maydis)分生孢子萌发和对玉米小斑病菌及水稻稻瘟病菌菌丝体生长的抑制活性,结果表明TasA融合蛋白对这2种植物病原真菌的生长有着显著的抑制作用。TasA基因包含1个780bp的完整开放阅读框(GenBank:KC692521),编码259个氨基酸残基;该序列与B.subtilis菌株PEBS2501(GenBank::FJ713581)、B.amyloliquefaciens HF-01(GenBank:JF781312)和B.subtilis菌株BWST7003(GenBank:AP012496)同源抑菌蛋白基因序列相似性达99%。原核表达产物经SDSPAGE分析检测到约32.3kDa的融合蛋白;经Ni-NTA柱纯化后的融合蛋白对供试病原菌均有显著的抑制作用。经测定发酵液的TasA融合蛋白产率为28μg/mL,短小芽胞杆菌抑菌蛋白TasA基因具有良好的抑菌效果。 展开更多
关键词 短小芽胞杆菌 TasA基因 抑菌蛋白 抑菌活性
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江蓠内生真菌NSS1蛋白活性的初步研究 预览
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作者 王维才 张付云 +3 位作者 刘晔 卢航 李振 赵宇 《生物技术进展》 2014年第2期124-128,共5页
为促进江蓠内生真菌NSS1抗菌蛋白的应用研究,利用硫酸铵沉淀法制备抗菌蛋白,最佳硫酸铵饱和度为65%。采用滤纸片法检测其对细菌指示菌的抑菌活性,抗菌粗蛋白均能抑制五种细菌指示菌的生长,当浓度达到750μg/mL时。抑制效果最好。... 为促进江蓠内生真菌NSS1抗菌蛋白的应用研究,利用硫酸铵沉淀法制备抗菌蛋白,最佳硫酸铵饱和度为65%。采用滤纸片法检测其对细菌指示菌的抑菌活性,抗菌粗蛋白均能抑制五种细菌指示菌的生长,当浓度达到750μg/mL时。抑制效果最好。采用邻苯三酚自氧化法测定蛋白对超氧阴离子自由基(0j)的清除作用,MTT法检测蛋白对肿瘤细胞的影响。抗菌蛋白在100℃以下,pH中性时抑菌活性稳定,对紫外线照射不敏感,丙三醇、甲醇和胰蛋白酶对抗菌蛋白的抑菌活性没有影响。不同浓度的蛋白液对超氧阴离子均有清除效果。当蛋白浓度达到360μg/mL时对肿瘤细胞的抑瘤作用最强。上述结果显示抗菌蛋白具有较强的抑菌活性、抗氧化活性和抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 内生真菌 抗菌蛋白 抑菌活性 抗氧化活性 抗肿瘤活性
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枯草芽孢杆菌对蝇蛆饲养效果及抗菌蛋白的影响 预览
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作者 雷土青 邓江华 +1 位作者 李建文 杨志强 《饲料工业》 北大核心 2014年第10期51-53,共3页
试验旨在探究麦麸中添加枯草芽孢杆菌对蝇蛆生长性能及其抗菌蛋白含量和抗菌活性的影响、蝇蛆饲养以纯麦麸作为基础饲粮,添加枯草芽孢杆菌进行发酵处理后作为试验组饲粮。收集4日龄蝇蛆及饲粮残料进行分析。试验结果表明,麦麸中添加... 试验旨在探究麦麸中添加枯草芽孢杆菌对蝇蛆生长性能及其抗菌蛋白含量和抗菌活性的影响、蝇蛆饲养以纯麦麸作为基础饲粮,添加枯草芽孢杆菌进行发酵处理后作为试验组饲粮。收集4日龄蝇蛆及饲粮残料进行分析。试验结果表明,麦麸中添加枯草芽孢杆菌,能明显提高蝇蛆生长发育速度和干物质沉积率,对蝇蛆抗菌蛋白的含量和抗菌活性有提高作用。试验组蝇蛆干物质得率比对照组提高1%~2%,饲料净消耗量没有显著差异(P〉0.05)。试验组蝇蛆粗脂肪比对照组提高2%~5%(P〈0.01),粗蛋白和粗灰分的影响差异不显著(P〉0.05)。各组残料的粗蛋白质比原料低2.79%~4.27%(P〈0.05或P〈0.01),粗脂肪各组间没有明显差异,试验组极显著低于原料(P〈O.01)。枯草芽孢杆菌能提高蝇蛆抗菌蛋白含量及其抗菌活性,但影响不显著(P〉0.05)。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 蝇蛆 生长指标 抗菌蛋白 抗菌活性
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乳铁蛋白对大肠杆菌生长的抑制与促进研究 预览
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作者 孙玥 李畅 +1 位作者 冯一兵 李铁晶 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2014年第22期13-16,共4页
研究不同浓度(2、4、6、8、10 mg/mL)乳铁蛋白对大肠杆菌生长促进或抑制的情况。结果表明,浓度≥6 mg/mL时,乳铁蛋白在初期发挥抑菌作用,其后表现出良好的营养促进剂的作用,大肠杆菌的生长比对照组更加旺盛;浓度≤4 mg/mL时,乳... 研究不同浓度(2、4、6、8、10 mg/mL)乳铁蛋白对大肠杆菌生长促进或抑制的情况。结果表明,浓度≥6 mg/mL时,乳铁蛋白在初期发挥抑菌作用,其后表现出良好的营养促进剂的作用,大肠杆菌的生长比对照组更加旺盛;浓度≤4 mg/mL时,乳铁蛋白并不抑制大肠杆菌的生长,表现出明显的营养作用。 展开更多
关键词 乳铁蛋白 大肠杆菌 抑菌性 营养性
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