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810nm弱激光作用下巨噬细胞对星形胶质细胞的影响
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作者 孙嘉锴 张家玮 +5 位作者 李鲤 郑峤 宋基伟 梁卓文 胡学昱 王哲 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期156-163,共8页
目的:探讨810nm弱激光作用下巨噬细胞对星形胶质细胞活化及硫酸软骨素蛋白多糖(Chondroitin sulfate proteoglycans,CSPG)分泌的影响。方法:构建脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)动物模型,设立脊髓损伤(SCI)组和脊髓损伤后弱激光治疗(l... 目的:探讨810nm弱激光作用下巨噬细胞对星形胶质细胞活化及硫酸软骨素蛋白多糖(Chondroitin sulfate proteoglycans,CSPG)分泌的影响。方法:构建脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)动物模型,设立脊髓损伤(SCI)组和脊髓损伤后弱激光治疗(low level laser therapy,LLLT)组,免疫荧光检测脊髓损伤区星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和CSPG的表达情况;建立体外巨噬细胞-星形胶质细胞共培养模型,分为Ctrl组(空白对照),M1组(采用M1型巨噬细胞条件培养基培养星形胶质细胞);M1+LLLT组(采用M1条件培养基培养星形胶质细胞,同时进行弱激光照射),采用Western Blot检测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和星形胶质细胞活化经典通路信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription,STAT3)的表达,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测星形胶质细胞的活性,实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测CSPG的核心蛋白聚集蛋白聚糖(aggrecan)和多功能蛋白聚糖(versican)的表达情况。结果:体内实验发现,LLLT组小鼠脊髓损伤区GFAP和CSPG表达较SCI组均减少(P<0.05)。体外实验结果显示,LLLT后巨噬细胞iNOS的表达显著降低(P<0.05)。与Ctrl组相比,M1组星形胶质细胞的活性明显升高(P<0.05),磷酸化信号转导与转录激活因子3(phosphorylated-signal transduction and activators of transcription 3,pSTAT3)的表达显著增加(P<0.05)。而相较于M1组,M1+LLLT组星形胶质细胞活性显著下降(P<0.05),pSTAT3/STAT3的表达明显抑制(P<0.05)。RT-qPCR及ELISA结果显示,M1组星形胶质细胞aggrecan、versican的mRNA和蛋白的表达比Ctrl组均显著增强(P<0.05);M1+LLLT组相较于M1组,aggrecan的mRNA和蛋白的表达受到抑制(P<0.05),versican的蛋白表达虽有下降,但无统计 展开更多
关键词 脊髓损伤 弱激光治疗 M1型巨噬细胞 星形胶质细胞 硫酸软骨素蛋白多糖
白藜芦醇通过影响细胞外信号调节蛋白激酶信号通路对创伤性脑损伤后的神经保护作用 预览 被引量:1
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作者 巴方 陈学云 刘洪亮 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期402-405,共4页
目的观察脑损伤后白藜芦醇对细胞外信号调节蛋白激酶( ERK)信号通路在星形胶质细胞中活化表达的影响,探讨其神经保护的作用机制。方法建立创伤性脑损伤小鼠模型,随机分为DMSO组和白藜芦醇预处理组。采用FJC染色检测脑损伤后神经元凋亡情... 目的观察脑损伤后白藜芦醇对细胞外信号调节蛋白激酶( ERK)信号通路在星形胶质细胞中活化表达的影响,探讨其神经保护的作用机制。方法建立创伤性脑损伤小鼠模型,随机分为DMSO组和白藜芦醇预处理组。采用FJC染色检测脑损伤后神经元凋亡情况,采用免疫荧光双重染色检测ERK信号通路在星形胶质细胞中的活化表达。结果 FJC染色结果显示,与DMSO组相比,白藜芦醇预处理组脑损伤后纹状体神经元凋亡的数量明显减少。白藜芦醇预处理组ERK信号通路在星形胶质细胞的活化表达降低。结论白藜芦醇对脑损伤后的神经保护作用与降低ERK信号通路在星形胶质细胞中的活化表达有关。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 白藜芦醇 细胞外信号调节蛋白激酶信号通路 星形胶质细胞
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肠促胰岛素类似物拮抗APP/PS1转基因鼠认知功能损伤的研究 预览
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作者 原丽 韩玲娜 +1 位作者 常永丽 张翠英 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第7期721-729,共9页
目的:观察探讨肠促胰岛素类似物DAla2GIP-Glu-PAL对APP/PS1转基因小鼠认知功能损伤的神经保护效应。方法:9月龄雄性APP/PS1小鼠与同窝野生型小鼠(WT)随机分为:WT-PBS组、APP/PS1-PBS组、WT-DAla2GIP-Glu-PAL组和APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PA... 目的:观察探讨肠促胰岛素类似物DAla2GIP-Glu-PAL对APP/PS1转基因小鼠认知功能损伤的神经保护效应。方法:9月龄雄性APP/PS1小鼠与同窝野生型小鼠(WT)随机分为:WT-PBS组、APP/PS1-PBS组、WT-DAla2GIP-Glu-PAL组和APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PAL组。各组小鼠连续腹腔注射5 μmol/L DAla2GIP-Glu-PAL 0.2 mL或同等体积 0.01 mol/L PBS 21 d并持续至Morris行为学实验结束,进行免疫荧光、Western blot和ELISA实验。结果:Morris水迷宫定位航行实验后3~5 d,与WT-PBS组相比,APP/PS1-PBS组小鼠逃逸潜伏期明显延长( P < 0.01 );而APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PAL组小鼠第4~5天的逃逸潜伏期小于APP/PS1-PBS组小鼠( P < 0.01 )。空间探索实验,APP/PS1-PBS组小鼠目标象限游泳时间百分比显著小于WT-PBS组小鼠( P < 0.01 );DAla2GIP-Glu-PAL治疗后,APP/PS1转基因小鼠目标象限游泳时间百分比明显升高( P < 0.01 );小鼠海马脑区Aβ和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光强度及Aβ蛋白含量的检测中,APP/PS1-PBS组明显高于WT-PBS组( P < 0.01 ),APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PAL组明显低于APP/PS1-PBS组( P < 0.01 );ELISA实验中,与WT-PBS组比较,APP/PS1-PBS组小鼠海马脑区IL-1β和TNF-α含量明显增高,胰岛素降解酶含量显著下降( P < 0.01 ),与APP/PS1-PBS组比较,APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PAL组IL-1β和TNF-α含量明显下降,胰岛素降解酶含量明显升高( P < 0.01 )。结论:DAla2GIP-Glu-PAL通过抑制海马脑区Aβ沉积,星形胶质细胞增生和炎症因子分泌,以及上调胰岛素降解酶含量来拮抗APP/PS1小鼠认知功能伤害。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 学习记忆 APP/PS1转基因鼠 肠促胰岛素类似物 星形胶质细胞
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星形胶质细胞在三方突触中对突触信息的加工处理和调控作用 预览
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作者 郭航 马亚群 +4 位作者 李海红 马丽 卢彦 王筱君 马玉龙 《中华神经创伤外科电子杂志》 2019年第3期182-185,共4页
传统观念认为脑组织功能专属于神经元活动,最新研究表明除了经典的突触前、后神经元之间存在“双向”信息流之外,星形胶质细胞也参与突触的神经元间信息交换、对突触活性做出反应、调节突触传递等过程。本文将对星形角质细胞在突触生理... 传统观念认为脑组织功能专属于神经元活动,最新研究表明除了经典的突触前、后神经元之间存在“双向”信息流之外,星形胶质细胞也参与突触的神经元间信息交换、对突触活性做出反应、调节突触传递等过程。本文将对星形角质细胞在突触生理学中的作用,就其整合和加工处理突触信息并通过释放胶质递质最终调节突触传递和可塑性综述如下。 展开更多
关键词 三方突触 星形胶质细胞 突触传递 突触可塑性
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Astrocyte syncytium:a functional reticular system in the brain 预览
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作者 Conrad M.Kiyoshi Min Zhou 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第4期595-596,共2页
In contrary to the discrete neuronal circuits,astrocytes share their cytoplasm through gap junctional coupling into a syncytium.This distinctive difference in neuronal and astrocytic anatomy recalls the historical deb... In contrary to the discrete neuronal circuits,astrocytes share their cytoplasm through gap junctional coupling into a syncytium.This distinctive difference in neuronal and astrocytic anatomy recalls the historical debate between Camillo Golgi and Ramon y Cajal on the wiring principle of the nervous system over a century ago(Cimino,1999).At that neuron-centric era,the Cajal advocated the cell theory that considered the nervous system to be made up of discrete individual cells.Golgi on the other hand favored the reticular theory that viewed the nervous system as a singular continuing network system.Nevertheless,regardless of the difference in their viewpoints,both theories were intended to postulate an anatomical blueprint of neural circuitry,with no attention given to neuroglia.It was until the 1950s,the distinct membrane borders between synapses were revealed by electron microscopy,which means that neurons are indeed discrete individual cells.This declared Ramon y Cajal’s cell theory the victor in the debate,while Golgi’s reticular theory was disregarded.However,the existence of a“low-resistance pathway”between neuroglia was soon identified in the optic nerve in the 1960s(Kuffler et al.,1966),which we now know to be gap junction coupling that connects the cytoplasm of astrocytes into a syncytial network.Ever since,decades of studies clearly demonstrated that syncytial coupling into the network is a most prominent feature of astrocytes and these glial networks are intimately interwoven with the neuronal circuits running across the entire central nervous system(Giaume et al.,2010).Surprisingly,the question of whether a reticular system exists in parallel with the neuronal circuits has received a little research attention to this day.Interestingly,the wiring pattern of astrocyte syncytium is reminiscent of the reticular theory postulated by Golgi.In this perspective,the“revived”use of“reticular theory”is solely dedicated to the brain reticular system established by astrocytes. 展开更多
关键词 ASTROCYTE SYNCYTIUM a FUNCTIONAL RETICULAR SYSTEM BRAIN
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血红素加氧酶1及其产物在脑出血中的作用 预览
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作者 刘明君 戚基萍 《医学综述》 2019年第18期3590-3594,共5页
血红素加氧酶-1(HO-1)是脑出血后血红蛋白裂解产生的血红素分解代谢的初始酶和限速酶。它在脑出血后主要通过激活小胶质细胞及星形胶质细胞发挥作用。HO-1在小胶质细胞中的功能可随疾病的进展发生改变,而在星形胶质细胞中,过表达的HO-1... 血红素加氧酶-1(HO-1)是脑出血后血红蛋白裂解产生的血红素分解代谢的初始酶和限速酶。它在脑出血后主要通过激活小胶质细胞及星形胶质细胞发挥作用。HO-1在小胶质细胞中的功能可随疾病的进展发生改变,而在星形胶质细胞中,过表达的HO-1则对脑出血预后起到保护作用。同时,HO-1通过催化血红素产生的代谢产物胆红素、一氧化碳可起到抗炎、抗氧化等保护作用,脑出血后检测HO-1及其代谢产物在患者体内的表达水平可能成为临床诊治及评估预后的参考。 展开更多
关键词 脑出血 血红素加氧酶1 小胶质细胞 星形胶质细胞 血红素产物
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心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧星形胶质细胞神经营养因子分泌的影响及对神经元的保护作用 预览
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作者 李芮琳 刘文杰 +4 位作者 袁庆 张彤 徐耀 胡利民 柴丽娟 《天津中医药》 CAS 2019年第1期63-66,共4页
[目的]探讨心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)处理的星形胶质细胞(C8-D1A)神经生长因子分泌的影响,以及研究心脑舒通药物处理的OGD/R胶质细胞条件培养液对神经元细胞(Neuro-2A)的保护作用。[方法]CCK-8检测心脑舒通对正常培养和OGD/R... [目的]探讨心脑舒通胶囊对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)处理的星形胶质细胞(C8-D1A)神经生长因子分泌的影响,以及研究心脑舒通药物处理的OGD/R胶质细胞条件培养液对神经元细胞(Neuro-2A)的保护作用。[方法]CCK-8检测心脑舒通对正常培养和OGD/R胶质细胞活力的影响;酶联免疫吸附(ELISA)法检测心脑舒通对OGD/R胶质细胞的脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)释放的影响;CCK-8检测心脑舒通处理的胶质细胞条件培养液对OGD/R神经元细胞活力的影响。[结果]1)心脑舒通对正常培养的胶质细胞活力无显著影响,但可以提高OGD/R后胶质细胞的增殖活力。2)0.1μg/mL心脑舒通可以显著提高OGD/R胶质细胞BDNF的释放。3)0.1μg/mL心脑舒通药物处理的胶质细胞条件培养液可提高OGD/R神经元的存活能力。[结论]心脑舒通对OGD/R损伤后的胶质细胞有一定保护作用,其处理后的胶质细胞条件培养液对神经元有一定的保护作用。 展开更多
关键词 心脑舒通胶囊 星形胶质细胞 神经元 脑源性神经营养因子 胶质源性神经营养因子
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SHR-SP脑梗死后微血管形成与星形胶质细胞的关系 预览
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作者 侯惠莲 田美丽 +4 位作者 张冠军 王鸿雁 宫惠琳 李晓锋 张学斌 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期76-81,共6页
目的探讨自发性高血压大鼠(stroke-prone,spontaneously hypertensive,SHR-SP)脑梗死周围半暗区微血管形成及其构筑变化与星形胶质细胞的关系。方法建立SHR-SP脑梗死模型,从SHR-SP大鼠股静脉注入FITC-dextran后在共聚焦显微镜下观察大... 目的探讨自发性高血压大鼠(stroke-prone,spontaneously hypertensive,SHR-SP)脑梗死周围半暗区微血管形成及其构筑变化与星形胶质细胞的关系。方法建立SHR-SP脑梗死模型,从SHR-SP大鼠股静脉注入FITC-dextran后在共聚焦显微镜下观察大鼠脑血管的构筑,测定微血管直径及分支数;通过免疫组织化学及免疫荧光染色法检测SHR-SP脑梗死周围半暗区GFAP、FⅧ的表达,测定其GFAP阳性细胞数、微血管密度(microvessel density,MVD),分析SHR-SP脑梗死周围半暗区星形胶质细胞数量与MVD、微血管直径及分支数的相互关系。结果SHR-SP在饮用高盐(13g/LNaCl)水溶液后第7周开始出现脑梗死;与对照组WKY比较,在SHR-SP脑梗死周围半暗区GFAP表达的阳性细胞数、MVD、微血管分支数显著升高,微血管直径显著增粗,且明显高于对侧半球相应区及非高盐饮水SHR-SP脑的相应区(P<0.01)。直线相关分析显示,GFAP表达的阳性细胞数与MVD及微血管直径及分支数呈正相关性(P<0.01)。结论高盐(13g/LNaCl)饮水可诱发SHR-SP发生脑梗死;在SHR-SP脑梗死周围半暗区,微血管形成及构筑的变化促使了星形胶质细胞的增生。 展开更多
关键词 SHR-SP脑梗死 星形胶质细胞 胶质纤维酸性蛋白 微血管密度 微血管构筑
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Genetic targeting of astrocytes to combat neurodegenerative disease 预览
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作者 Rachel Kéry Allen P. F. Chen Gregory W. Kirschen 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第2期199-211,共13页
Astrocytes, glial cells that interact extensively with neurons and other support cells throughout the central nervous system, have recently come under the spotlight for their potential contribution to, or potential re... Astrocytes, glial cells that interact extensively with neurons and other support cells throughout the central nervous system, have recently come under the spotlight for their potential contribution to, or potential regenerative role in a host of neurodegenerative disorders. It is becoming increasingly clear that astrocytes, in concert with microglial cells, activate intrinsic immunological pathways in the setting of neurodegenerative injury, although the direct and indirect consequences of such activation are still largely unknown. We review the current literature on the astrocyte’s role in several neurodegenerative diseases, as well as highlighting recent advances in genetic manipulation of astrocytes that may prove critical to modulating their response to neurological injury, potentially combatting neurodegenerative damage. 展开更多
关键词 Alzheimer's DISEASE amyotrophic lateral SCLEROSIS GLIA immune system inflammation Parkinson's DISEASE reactive ASTROCYTE regeneration
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鞘氨醇激酶1在颞叶癫痫中的作用机制研究 预览
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作者 董媛媛 褚旭 +3 位作者 崔帅 王艳丽 吴兴饶 孔庆霞 《临床神经病学杂志》 2019年第5期341-346,共6页
目的观察鞘氨醇激酶1(SphK1)在难治性颞叶癫痫(TLE)患者及匹罗卡品诱导的TLE大鼠模型中的表达,探讨其在TLE发病中的作用机制。方法收集TLE患者手术切除的皮质标本,纳入癫痫组(n=16)。收集脑外伤患者切除的颞叶皮质标本,纳入对照组(n=10... 目的观察鞘氨醇激酶1(SphK1)在难治性颞叶癫痫(TLE)患者及匹罗卡品诱导的TLE大鼠模型中的表达,探讨其在TLE发病中的作用机制。方法收集TLE患者手术切除的皮质标本,纳入癫痫组(n=16)。收集脑外伤患者切除的颞叶皮质标本,纳入对照组(n=10)。将72只雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型对照组(MC组,n=32)和匹罗卡品组(PILO组,n=40),PILO组根据匹罗卡品诱导癫痫持续状态(SE)后的观察时间随机分为4个亚组:E6h组、E1d组、E3d组和E7d组(n=8)。采用免疫组化染色法检测SphK1在TLE患者颞叶皮质中的表达变化;运用Western blotting法检测SphK1在大鼠海马中的表达变化;采用免疫荧光染色法观察在人颞叶皮质和大鼠海马中星形胶质细胞(AST)活化增生情况和SphK1在AST中的表达。结果癫痫组人颞叶皮质中SphK1的阳性细胞数及AST细胞数均明显多于对照组(均P<0.05)。E6h组、E1d组、E3d组和E7d组大鼠海马SphK1表达水平均明显高于MC组(均P<0.05);PILO组AST细胞数明显多于MC组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,在癫痫组患者颞叶皮质中,SphK1主要在活化的AST的胞质中表达;而在PILO组大鼠海马中,SphK1主要在活化的AST的胞核中表达。结论 SphK1在TLE患者颞叶皮质和TLE大鼠海马中的表达明显增加,SphK1参与了TLE的发病。 展开更多
关键词 颞叶癫痫 鞘氨醇激酶1 星形胶质细胞 匹罗卡品
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Differential neuronal reprogramming induced by NeuroD1 from astrocytes in grey matter versus white matter 预览
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作者 Min-Hui Liu Wen Li +3 位作者 Jia-Jun Zheng Yu-Ge Xu Qing He Gong Chen 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第2期342-351,共10页
A new technology called in vivo glia-to-neuron conversion has emerged in recent years as a promising next generation therapy for neural regeneration and repair. This is achieved through reprogramming endogenous glial ... A new technology called in vivo glia-to-neuron conversion has emerged in recent years as a promising next generation therapy for neural regeneration and repair. This is achieved through reprogramming endogenous glial cells into neurons in the central nervous system through ectopically expressing neural transcriptional factors in glial cells. Previous studies have been focusing on glial cells in the grey matter such as the cortex and striatum, but whether glial cells in the white matter can be reprogrammed or not is unknown. To address this fundamental question, we express NeuroD1 in the astrocytes of both grey matter(cortex and striatum) and white matter(corpus callosum) to investigate the conversion efficiency, neuronal subtypes, and electrophysiological features of the converted neurons. We discover that NeuroD1 can efficiently reprogram the astrocytes in the grey matter into functional neurons, but the astrocytes in the white matter are much resistant to neuronal reprogramming. The converted neurons from cortical and striatal astrocytes are composed of both glutamatergic and GABAergic neurons, capable of firing action potentials and having spontaneous synaptic activities. In contrast, the few astrocyte-converted neurons in the white matter are rather immature with rare synaptic events. These results provide novel insights into the differential reprogramming capability between the astrocytes in the grey matter versus the white matter, and highlight the impact of regional astrocytes as well as microenvironment on the outcome of glia-toneuron conversion. Since human brain has large volume of white matter, this study will provide important guidance for future development of in vivo glia-to-neuron conversion technology into potential clinical therapies. Experimental protocols in this study were approved by the Laboratory Animal Ethics Committee of Jinan University(approval No. IACUC-20180321-03) on March 21, 2018. 展开更多
关键词 ASTROCYTE CONVERSION efficiency corpus callosum cortex grey MATTER in vivo cell CONVERSION NeuroD1 neuron REPROGRAMMING STRIATUM white MATTER
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葛根素对大鼠星形胶质细胞增殖、凋亡和β-catenin、cyclinD1、Bax蛋白表达的影响 预览
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作者 田龙 黄月 丁娜 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第3期402-406,共5页
目的:探讨葛根素对H 2O 2诱导的大鼠星形胶质细胞(AST)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:采用MTT法检测100、200、400、600、800、1 000μmol/L H 2O 2对AST活力的影响;将AST分为空白对照组(细胞未经任何处理)、H 2O 2组(400μmol/L H ... 目的:探讨葛根素对H 2O 2诱导的大鼠星形胶质细胞(AST)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:采用MTT法检测100、200、400、600、800、1 000μmol/L H 2O 2对AST活力的影响;将AST分为空白对照组(细胞未经任何处理)、H 2O 2组(400μmol/L H 2O 2处理AST 24 h)和葛根素+H 2O 2组(1 mmol/L葛根素处理30 min后,400μmol/L H 2O 2处理24 h),应用MTT、Annexin V-FITC/PI双染法及Western blot分别检测细胞活力、凋亡率及β-catenin、cyclinD1和Bax蛋白的表达。结果:随着H 2O 2浓度增加,AST活力降低(P<0.05)。与空白对照组比较,H 2O 2组细胞活力明显降低,凋亡率升高,β-catenin和cyclinD1表达降低,Bax表达升高(P<0.05);与H 2O 2组比较,葛根素+H 2O 2组细胞活力升高,凋亡率降低,β-catenin和cyclinD1表达升高,Bax表达降低(P<0.05)。结论:葛根素可减轻H 2O 2诱导的大鼠AST氧化应激损伤,机制与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 葛根素 凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路 大鼠
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富氢水对氧化应激细胞模型的保护作用及对PI3K/Akt信号通路的影响
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作者 陆瑞婷 刘娅迪 王迪芬 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期762-767,共6页
目的观察富氢水对小鼠星形胶质细胞氧化应激损伤的保护作用及对磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响.方法体外培养小鼠星形胶质细胞,取对数生长期细胞进行实验.①实验一:取部分细胞,用1.25、2.50、5.00、10.00μmol/L过氧... 目的观察富氢水对小鼠星形胶质细胞氧化应激损伤的保护作用及对磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响.方法体外培养小鼠星形胶质细胞,取对数生长期细胞进行实验.①实验一:取部分细胞,用1.25、2.50、5.00、10.00μmol/L过氧化氢(H2O2)作用细胞20 min,以确定H2O2诱导星形胶质细胞损伤所需的适宜浓度;用25、50、100、200μmol/L富氢水分别培养3、6、9、12 h,以确定富氢水预处理的最佳浓度及时间;用50μmol/L富氢水与PI3K/Akt信号通路抑制剂渥曼青霉素200 nmol/L或400 nmol/L共同培养,以确定渥曼青霉素最佳抑制浓度.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测星形胶质细胞存活率.②实验二:取部分细胞,按随机数字表法分为空白对照组、H2O2损伤组、富氢水预处理组(HW+H2O2组)、富氢水与渥曼青霉素共培养预处理组(HW+WM+H2O2组).采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PI3K、Akt的mRNA表达,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测PI3K、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白表达.结果①实验一:以空白对照组细胞存活率为100%.细胞存活率随H2O2浓度的增加而逐渐降低,2.50μmol/L的H2O2作用20 min细胞存活率降至50%左右,故以此浓度建立细胞损伤模型.细胞存活率随富氢水预处理浓度升高、作用时间延长呈先升高后降低趋势,50μmol/L富氢水预处理9 h时细胞存活率最高,故以此建立富氢水预保护模型.200 nmol/L或400 nmol/L渥曼青霉素与富氢水共同培养后,细胞活性得到抑制,200 nmol/L的渥曼青霉素干预后细胞存活率与H2O2损伤组差异无统计学意义,故以此建立星形胶质细胞抑制模型.②实验二:与空白对照组比较,H2O2损伤组PI3K、Akt的mRNA表达及PI3K、Akt、p-Akt的蛋白表达均明显降低.与H2O2损伤组比较,HW+H2O2组PI3K、Akt的mRNA表达及PI3K、Akt、p-Akt的蛋白表达均明显升高〔PI3K mRNA(2^-ΔΔCT):0.843±0.019比0.631±0.038,Akt mRNA(2^-ΔΔCT):0.591± 展开更多
关键词 富氢水 星形胶质细胞 过氧化氢 抗氧化 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路
Tg2576小鼠的行为和病理特征观察 预览
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作者 关雅伦 刘书华 +4 位作者 黄忠强 李韵峰 李雪娇 李舸 张钰 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第4期267-273,共7页
目的针对阿尔茨海默症(AD)研究中常用的具有C57BL/6和SJL杂交背景的Tg2576转基因小鼠,初步探讨长期繁殖可能对该小鼠AD表型产生的影响。方法选取本实验室引进并长期繁育使用的Tg2576小鼠种群,利用Morris水迷宫、免疫组织化学、酶联免疫... 目的针对阿尔茨海默症(AD)研究中常用的具有C57BL/6和SJL杂交背景的Tg2576转基因小鼠,初步探讨长期繁殖可能对该小鼠AD表型产生的影响。方法选取本实验室引进并长期繁育使用的Tg2576小鼠种群,利用Morris水迷宫、免疫组织化学、酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫荧光技术,研究大鼠AD行为和病理表型。结果与对照小鼠相比,长期传代繁育的Tg2576小鼠随着年龄的增长,在水迷宫测试中仍然出现学习记忆能力的显著下降;免疫组织化学结果显示,小鼠脑皮层出现典型的β淀粉样蛋白(Aβ)沉积,且Aβ在脑组织中的含量较野生型小鼠显著升高;免疫荧光分析表明,在皮层Aβ斑块周围出现大量星形胶质细胞聚集的现象。结论长期繁育的Tg2576小鼠仍具有AD小鼠典型的疾病临床和病理特征。 展开更多
关键词 Tg2576小鼠 阿尔兹海默症(AD) 遗传背景 Aβ斑块 星形胶质细胞
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星形胶质细胞与缺血性脑卒中的关系及针刺干预研究进展
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作者 宁文华 李礼 +3 位作者 郭扬 张宝瑜 赵梦雄 王舒 《针刺研究》 CSCD 北大核心 2019年第10期777-780,共4页
星形胶质细胞是中枢神经系统中数量最丰富的细胞类型,作为治疗缺血性脑卒中的潜在靶标,受到广泛关注。多项研究证实,针刺治疗缺血性脑卒中的作用与调控星形胶质细胞密切相关。针刺可以通过修复星形胶质细胞形态结构、调节能量代谢、抑... 星形胶质细胞是中枢神经系统中数量最丰富的细胞类型,作为治疗缺血性脑卒中的潜在靶标,受到广泛关注。多项研究证实,针刺治疗缺血性脑卒中的作用与调控星形胶质细胞密切相关。针刺可以通过修复星形胶质细胞形态结构、调节能量代谢、抑制兴奋性毒性、抑制炎性反应、促进神经再生等途径发挥脑保护作用。本文对星形胶质细胞与缺血性脑卒中的关系及针刺干预研究现状展开综述,并对未来研究方向进行展望。 展开更多
关键词 针刺 缺血性脑卒中 星形胶质细胞 综述
靶向星形胶质细胞治疗缺血性脑卒中的研究进展
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作者 陈华波 黄艳丽 +4 位作者 翟立红 沈小芳 毛春 李通 肖娟 《生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第7期671-677,共7页
缺血性脑卒中(ischemic stroke, IS)发生后,缺血区星形胶质细胞(astrocyte)活化,这些反应性星形胶质细胞对缺血区神经元发挥有利和有害双重作用。星形胶质细胞与IS诱导的谷氨酸功能障碍、线粒体功能障碍和胶质瘢痕形成密切相关,并且在I... 缺血性脑卒中(ischemic stroke, IS)发生后,缺血区星形胶质细胞(astrocyte)活化,这些反应性星形胶质细胞对缺血区神经元发挥有利和有害双重作用。星形胶质细胞与IS诱导的谷氨酸功能障碍、线粒体功能障碍和胶质瘢痕形成密切相关,并且在IS后神经元网络重构中发挥重要调节作用。现重点探讨如何利用星形胶质细胞对IS发挥保护作用的研究进展。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 星型胶质细胞 保护
Characteristic response of striatal astrocytes to dopamine depletion 预览
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作者 Yao-Feng Zhu Wei-Ping Wang +5 位作者 Xue-Feng Zheng Zhi Chen Tao Chen Zi-Yun Huang Lin-Ju Jia Wan-Long Lei 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2020年第4期724-730,共7页
Astrocytes and astrocyte-related proteins play important roles in maintaining normal brain function,and also regulate pathological processes in brain diseases and injury.However,the role of astrocytes in the dopamine-... Astrocytes and astrocyte-related proteins play important roles in maintaining normal brain function,and also regulate pathological processes in brain diseases and injury.However,the role of astrocytes in the dopamine-depleted striatum remains unclear.A rat model of Parkinson’s disease was therefore established by injecting 10μL 6-hydroxydopamine(2.5μg/μL)into the right medial forebrain bundle.Immunohistochemical staining was used to detect the immunoreactivity of glial fibrillary acidic protein(GFAP),calcium-binding protein B(S100B),and signal transducer and activator of transcription 3(STAT3)in the striatum,and to investigate the co-expression of GFAP with S100B and STAT3.Western blot assay was used to measure the protein expression of GFAP,S100B,and STAT3 in the striatum.Results demonstrated that striatal GFAP-immunoreactive cells had an astrocytic appearance under normal conditions,but that dopamine depletion induced a reactive phenotype with obvious morphological changes.The normal striatum also contained S100B and STAT3 expression.S100B-immunoreactive cells were uniform in the striatum,with round bodies and sparse,thin processes.STAT3-immunoreactive cells presented round cell bodies with sparse processes,or were darkly stained with a large cell body.Dopamine deprivation induced by 6-hydroxydopamine significantly enhanced the immunohistochemical positive reaction of S100B and STAT3.Normal striatal astrocytes expressed both S100B and STAT3.Striatal dopamine deprivation increased the number of GFAP/S100B and GFAP/STAT3 double-labeled cells,and increased the protein levels of GFAP,S100B,and STAT3.The present results suggest that morphological changes in astrocytes and changes in expression levels of astrocyte-related proteins are involved in the pathological process of striatal dopamine depletion.The study was approved by Animal Care and Use Committee of Sun Yat-sen University,China(Zhongshan Medical Ethics 2014 No.23)on September 22,2014. 展开更多
关键词 6-HYDROXYDOPAMINE ASTROCYTE dopamine depletion dopaminergic neurons Parkinson’s disease S100B STAT3 STRIATUM
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脊髓损伤模型大鼠软脊膜下注射2型腺相关病毒免疫荧光染色分析 预览
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作者 柏秋实 苏胜 +4 位作者 王亮佳 郑洋洋 康娟娟 徐金影 池光范 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第31期4979-4985,共7页
背景:经软脊膜下注射腺相关病毒的方法可将病毒局限于以注射点为中心的较小范围内,全身毒副作用小,节省病毒的用量,但目前尚无将此方法应用于脊髓损伤大鼠的相关报道,对损伤部位星形胶质细胞和神经细胞的转染情况尚不明确。目的:探讨通... 背景:经软脊膜下注射腺相关病毒的方法可将病毒局限于以注射点为中心的较小范围内,全身毒副作用小,节省病毒的用量,但目前尚无将此方法应用于脊髓损伤大鼠的相关报道,对损伤部位星形胶质细胞和神经细胞的转染情况尚不明确。目的:探讨通过软脊膜下注射2型腺相关病毒对脊髓损伤部位的星形胶质细胞和神经细胞的转染效果及手术过程的技术要点。方法:实验方案经吉林大学动物实验伦理委员会批准。24只Wistar大鼠随机分为2组:腺相关病毒组和模型组,均使用钳夹法构建脊髓损伤模型。腺相关病毒组经软脊膜下注射60μL病毒溶液;模型组经软脊膜下注射等量5%右旋糖酐溶液。于术后7,14和21d取脊髓标本,进行免疫荧光染色,观察星形胶质细胞分布情况和2型腺相关病毒转染情况。结果与结论:①经软脊膜下注射病毒后,病毒溶液最终均匀分布于损伤部位上下约1 cm的范围内;②术后7,14 d仅有微量绿色荧光蛋白在脊髓损伤区域表达,直至术后21 d,在脊髓损伤空洞周围可见有大量反应性星形胶质细胞,其在脊髓空洞周边部表达最为强烈,出现明显的胶质界膜;同时发现,2型腺相关病毒可稳定转染星形胶质细胞和神经细胞,其中星形胶质细胞集中分布于脊髓空洞周边部,而神经细胞散在分布于病毒转染范围内,注射范围以外正常组织仅见微量2型腺相关病毒转染;③该方法具有能将病毒局限于损伤部位,可靶向性转染星形胶质细胞和神经细胞,具有注射量病毒量低,全身毒副作用小,成本节约等优点。 展开更多
关键词 2型腺相关病毒 钳夹型脊髓损伤 软脊膜下注射 星形胶质细胞 神经细胞 绿色荧光蛋白 神经胶质原纤维酸性蛋白 神经丝蛋白H 免疫组化 免疫荧光 胶质瘢痕
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星形胶质细胞特异性敲除Adam10 基因对周细胞和血脑屏障的影响 预览
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作者 熊颖 张强 潘邓记 《神经损伤与功能重建》 2019年第3期109-112,共4页
目的:探讨Adam10基因对于星形胶质细胞与周细胞之间信号交流及对血脑屏障(BBB)完整性的影响。方法:利用Cre-loxp技术得到星形胶质细胞特异性敲除Adam10基因小鼠(Gfapcre-Adam10lox/lox)纳入敲除组,将同胎基因型为Adam10lox/lox的小鼠纳... 目的:探讨Adam10基因对于星形胶质细胞与周细胞之间信号交流及对血脑屏障(BBB)完整性的影响。方法:利用Cre-loxp技术得到星形胶质细胞特异性敲除Adam10基因小鼠(Gfapcre-Adam10lox/lox)纳入敲除组,将同胎基因型为Adam10lox/lox的小鼠纳入对照组。免疫荧光双标技术检测周细胞心肌素(myocardin)蛋白和平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达;电镜分析周细胞的变性和凋亡、基底膜和BBB的破坏;激光散斑衬比成像技术观察脑组织局部血流灌注的改变。结果:特异性敲除星形胶质细胞Adam10基因后,可影响相邻的星形胶质细胞和周细胞之间的信号交流,导致周细胞表达myocardin蛋白和SMA蛋白减少;敲除组呈现出更为明显的周细胞变性、凋亡和BBB破坏;进而影响血管密度和血流速度。结论:Adam10基因可能影响星形胶质细胞与周细胞之间的信号交流,并可能因此而影响BBB完整性和脑组织的血流灌注。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 周细胞 ADAM10 血脑屏障 激光散斑衬比成像
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腰段脊髓背角胶质细胞对内脏痛觉敏化反应的形态学研究
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作者 陈涛 陈思 +4 位作者 朱耀峰 郑雪峰 黄子芸 贾林菊 雷万龙 《解剖学研究》 CAS 2019年第1期39-44,共6页
目的 探察和证实胶质细胞对创伤后应激障碍(PTSD)所属内脏痛觉敏化反应的时程和形态特征。方法 借助单次延长应激(SPS)方法构建内脏痛觉敏化模型,32只雄性SD大鼠被随机分成正常对照组、SPS术后1 d组、SPS术后7 d组、SPS术后14 d组,应用... 目的 探察和证实胶质细胞对创伤后应激障碍(PTSD)所属内脏痛觉敏化反应的时程和形态特征。方法 借助单次延长应激(SPS)方法构建内脏痛觉敏化模型,32只雄性SD大鼠被随机分成正常对照组、SPS术后1 d组、SPS术后7 d组、SPS术后14 d组,应用免疫组化、免疫印迹技术探测腰段脊髓背角星形胶质细胞和小胶质细胞形态结构和蛋白水平的变化。结果 免疫组化实验显示,正常脊髓灰质内明显可以探察到大量GFAP+的细胞,其形态呈星形胶质细胞的典型特征:即微小的胞体和细长的突起,其在脊髓灰质的分布不显示明显的区域特性。定量和比较资料显示,SPS不同时间组的GFAP+细胞密度均多于对照组,7 d组增加最显著。结果同时显示,GFAP~+胞体大小在7 d和14 d组均大于对照组,以7 d组的最大。正常脊髓灰质也明显可以探察到小胶质细胞(Iba1~+),其密度和胞体大小在SPS 1 d组和14 d组与对照组之间具有显著差异,且14 d组差异最为显著(P<0.05),但7 d组的变化不明显。免疫印迹实验显示,正常脊髓灰质背角可以明显探测到GFAP和Iba1蛋白。定量资料显示,SPS 7 d组和14 d组的GFAP蛋白水平均高于对照组,7 d组升高最显著。SPS不同时间点均可诱导Iba1~+蛋白的高表达,且以14 d组最显著。结论 结果提示脊髓星形胶质细胞和小胶质细胞的形态结构和蛋白水平的变化可能牵涉到内脏痛觉敏化的病理过程。 展开更多
关键词 内脏痛觉敏化 单次延长应激 脊髓 星形胶质细胞 小胶质细胞
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