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Shh通路介导损伤后反应性星形胶质细胞获得干细胞潜能 预览
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作者 许子宁 李晓红 +2 位作者 叶益超 刘晓银 涂悦 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第7期678-682,I0001共6页
目的探讨Shh信号通路对大脑皮质反应性星形胶质细胞(RAS)获得神经干细胞潜能的影响。方法体外原代培养SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞,以肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1α和C1q三种因子诱导炎症型RAS,划痕实验制备创伤型RAS,使用... 目的探讨Shh信号通路对大脑皮质反应性星形胶质细胞(RAS)获得神经干细胞潜能的影响。方法体外原代培养SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞,以肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1α和C1q三种因子诱导炎症型RAS,划痕实验制备创伤型RAS,使用免疫荧光染色法观察细胞形态及纯度。实验分为普通星形胶质细胞组(对照组)、炎症组、划痕组(创伤组)。炎症组培养至干预后24h,对照组和划痕组培养至第5天进行免疫荧光染色观察巢蛋白(Nestin)阳性细胞,运用Westernblot技术检测不同损伤模型的细胞中Shh蛋白的表达量。之后各组细胞培养至第7天更换神经干细胞培养基,将前述3组各自再分为激活组(各组细胞更换神经干细胞培养基后添加Shh激活剂SAG)和抑制组(各组细胞更换神经干细胞培养基后添加Shh抑制剂环巴胺)两个亚组,培养14d后采用qRT-PCR检测各亚组RAS源性神经干细胞相关基因的表达量。结果细胞损伤模型中,免疫荧光染色证明各组细胞中划痕组Nestin阳性细胞明显多于炎症组和对照组。Westernblot结果显示2组损伤细胞中划痕组Shh蛋白表达量高于炎症组(P<0.05)。更换神经干细胞培养基后,激活组中2组损伤细胞的干细胞相关基因Nestin、Pax-6、Sox-2、Oct-4和Map-2的表达水平均有所升高,其中由划痕诱导的RAS神经干细胞相关基因Nestin、Pax-6、Sox-2、Oct-4和Map-2的表达水平高于炎症诱导的RAS神经干细胞和普通星形胶质细胞(P<0.01);添加Shh抑制剂后,3组上述基因表达量皆明显降低,但划痕组的表达量仍高于其他2组(P<0.01)。结论在体外,Shh信号通路可以介导损伤后大脑皮质RAS获得干细胞潜能。 展开更多
关键词 星形细胞 基因 反应性星形胶质细胞 SHH SAG 环巴胺 神经干细胞
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氯胺酮体外对星形胶质细胞表面脑保护相关受体表达的影响 预览
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作者 刘邱阿雪 凌晓敏 +1 位作者 方芳 仓静 《中国临床医学》 2019年第3期437-444,共8页
目的:观察消旋体氯胺酮体外对星形胶质细胞表面谷氨酸转运体1(glial glutamate transporter-1,GLT-1)、Na^+-K^+泵和生长相关蛋白43(growth associated protein-43,GAP-43)表达的影响,探讨氯胺酮作用于星形胶质细胞的可能作用机制。方法... 目的:观察消旋体氯胺酮体外对星形胶质细胞表面谷氨酸转运体1(glial glutamate transporter-1,GLT-1)、Na^+-K^+泵和生长相关蛋白43(growth associated protein-43,GAP-43)表达的影响,探讨氯胺酮作用于星形胶质细胞的可能作用机制。方法:建立离体培养的原代星形胶质细胞。选取MK-801及AP-5作为对照药物,采用蛋白质印迹法观察氯胺酮处理不同时间后,星形胶质细胞表面GLT-1、Na^+-K^+泵及GAP-43蛋白表达的变化。同时检测星形胶质细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率,观察氯胺酮处理30min~24h对细胞的毒性作用。结果:经氯胺酮处理30min、2h的星形胶质细胞表面GLT-1表达量较空白组明显增加(P<0.05)。经氯胺酮处理15、30min及MK-801处理6h的星形胶质细胞表面Na^+-K^+泵的表达量较空白组明显增加(P<0.05)。经氯胺酮及MK-801处理6、24h的星形胶质细胞表面GAP-43表达量较空白组明显减少(P<0.05)。终浓度分别为100、1、50μmol/L的氯胺酮、MK-801、AP-5持续作用24h后,离体培养原代星形胶质细胞的LDH漏出率与空白组差异无统计学意义。结论:消旋体氯胺酮可通过非N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)途径体外上调星形胶质细胞表面GLT-1、Na^+-K^+泵表达;100μmol/L氯胺酮持续作用24h对离体培养的原代星形胶质细胞无明显损伤。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 氯胺酮 谷氨酸转运体1 Na^+-K^+泵 生长相关蛋白43
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TFPI-2对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性及机制的研究 预览
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作者 程春郁 任占军 +3 位作者 黄丹华 刘莹 陈舒 蒋丽艳(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1047-1052,共6页
目的:研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性的影响,探讨其对大鼠星形胶质细胞缺氧保护的机制。方法:从大鼠脑组织中分离培养星形胶质细胞,将细胞作缺氧处理,分别采用qRT-PCR和Westernblot法检测星形胶质... 目的:研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性的影响,探讨其对大鼠星形胶质细胞缺氧保护的机制。方法:从大鼠脑组织中分离培养星形胶质细胞,将细胞作缺氧处理,分别采用qRT-PCR和Westernblot法检测星形胶质细胞中TFPI-2表达水平。在星形胶质细胞中转染TFPI-2siRNA后,采用qRT-PCR和Westernblot法检测TFPI-2基因沉默效果,MTT检测星形胶质细胞增殖,流式细胞术检测星形胶质细胞凋亡情况,qRT-PCR检测星形胶质细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)mRNA表达水平。结果:Hypoxia组星形胶质细胞中TFPI-2mRNA水平和蛋白水平明显高于Control组星形胶质细胞,转染TFPI-2siRNA后,si-TFPI-2组星形胶质细胞中TFPI-2mRNA和蛋白表达水平明显低于si-control组细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。缺氧星形胶质细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达明显升高,与正常培养的星形胶质细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对缺氧星形胶质细胞敲减TFPI-2后,细胞存活率升高,细胞凋亡率和细胞中β-catenin、c-myc、Bax、CleavedCaspase-3蛋白水平降低,与缺氧星形胶质细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:下调TFPI-2可以促进缺氧星形胶质细胞增殖,抑制细胞凋亡,其作用机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 增殖 凋亡 TFPI-2
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二甲双胍抑制JNK改善缝隙连接功能缓解骨癌痛的实验研究 预览
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作者 谷宇峰 潘秀秀 +3 位作者 宋玲 杨星 胡亮 刘文涛 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期337-343,共7页
探究星形胶质细胞中c-Jun氨基末端激酶(JNK)-缝隙连接功能在骨癌痛形成中的作用,并考察5′-腺嘌呤核苷酸(AMP)依赖的蛋白激酶(AMPK)激动剂二甲双胍能否通过调节该功能缓解骨癌痛。制备肿瘤细胞植入(TCI)引起的大鼠骨癌痛模型,鞘内注射... 探究星形胶质细胞中c-Jun氨基末端激酶(JNK)-缝隙连接功能在骨癌痛形成中的作用,并考察5′-腺嘌呤核苷酸(AMP)依赖的蛋白激酶(AMPK)激动剂二甲双胍能否通过调节该功能缓解骨癌痛。制备肿瘤细胞植入(TCI)引起的大鼠骨癌痛模型,鞘内注射二甲双胍(50、100μg)、JNK抑制剂SP600125(10μg)、缝隙连接抑制剂(carbenoxolone,CBX)(10μg)、AMPK抑制剂Compound C(CC)(10μg)各20μL。利用Von Frey丝检测大鼠机械痛阈值;用免疫荧光方法检测大鼠脊髓水平胶质纤维酸性蛋白(GFAP),钙离子绑定衔接分子1(IBA-1)和缝隙连接蛋白(Cx43)的变化;Westernblot法检测大鼠脊髓水平p-JNK的变化情况。本研究发现,JNK抑制剂能显著缓解TCI引起的骨癌痛,而CBX则能抑制该效果。二甲双胍处理抑制脊髓水平p-JNK水平的升高。鞘内注射不同浓度的二甲双胍(50、100μg),能够显著改善TCI引起的机械性痛觉异常,同样该作用也被CBX抑制。本研究表明,二甲双胍可通过激活AMPK,抑制JNK来调节缝隙连接功能,进而改善骨癌痛。 展开更多
关键词 二甲双胍 星形胶质细胞 骨癌痛 JNK 缝隙连接
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8-O-乙酰山栀子苷甲酸对慢性炎性痛模型大鼠脊髓背角内HDAC1~5表达的影响及与JAK2-STAT3信号通路的关系研究 预览
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作者 王健 肖小莉 +3 位作者 崔佳 王磊 樊婷婷 张维 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第5期608-613,共6页
目的:研究8-O-乙酰山栀子苷甲酸(8-OaS)对慢性炎性痛模型大鼠脊髓背角内组蛋白去乙酰化酶1~5(HDAC1~5)表达的影响及与Janus激酶2-信号转导与转录活化因子3(JAK2-STAT3)信号通路的关系。方法:取SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组(生理... 目的:研究8-O-乙酰山栀子苷甲酸(8-OaS)对慢性炎性痛模型大鼠脊髓背角内组蛋白去乙酰化酶1~5(HDAC1~5)表达的影响及与Janus激酶2-信号转导与转录活化因子3(JAK2-STAT3)信号通路的关系。方法:取SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组(生理盐水)、完全弗氏佐剂(CFA)组(生理盐水)和8-OaS低、中、高剂量组(2、20、200μg/kg),每组6只,除正常对照组和假手术组外,其余各组大鼠左侧后足趾侧皮下注射CFA复制慢性炎性痛模型,建模后腹腔注射相应药物,每日1次,连续7d。采用热辐射法检测首次给药第1、2、3、4、5、6、7、8、11、15天大鼠的缩足潜伏期。另取大鼠按上述后5组方法进行分组给药,采用Western blot法检测大鼠末次给药后腰膨大节段脊髓背角中HDAC1~5、磷酸化JAK(2pJAK2)、磷酸化STAT(3pSTAT3)蛋白表达情况。再另取大鼠随机分为假手术组(生理盐水)、CFA组(生理盐水)、8-OaS组(20μg/kg)和JAK2-STAT3的拮抗药α-氰基-(3,4-羟基)-N-苄苯乙烯胺(AG490)组(8mg/kg),每组6只,同上法复制IP模型后腹腔注射相应药物,每日1次,连续7d,采用免疫荧光组织化学染色观察各组大鼠HDAC5和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)在脊髓背角的表达情况。结果:与正常对照组和假手术组比较,其余各组大鼠的缩足潜伏期均明显缩短(P<0.05);与CFA组比较,8-OaS低、中、高剂量组大鼠的缩足潜伏期均明显延长(P<0.05),且呈剂量依赖性。与假手术组比较,CFA组大鼠脊髓背角中HDAC1~5、pJAK2、pSTAT3蛋白表达均明显增强(P<0.05);与CFA组比较,8-OaS低、中、高剂量组大鼠脊髓背角中HDAC5、pJAK2、pSTAT3蛋白表达均明显降低(P<0.05),但HDAC1~4蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。HDAC5大量表达于星形胶质细胞上,与假手术组比较,CFA组大鼠脊髓背角中GFAP和HDAC5表达均明显增强(P<0.05);与CFA组比较,8-OaS组和AG490组大鼠脊髓背角中GFAP和HDAC5表达均明显降低(P<0.05)。结论:8- 展开更多
关键词 8-O-乙酰山栀子苷甲酸 慢性炎性痛 组蛋白去乙酰化酶 星形胶质细胞 Janus激酶2-信号转导与转录活化因子3 大鼠
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七氟醚暴露致新生大鼠未成熟脑损伤的研究
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作者 刘光建 魏琼 +1 位作者 李清 罗向红 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期498-503,共6页
目的探讨七氟醚早期暴露对新生大鼠脑发育的影响。方法选取新生6日龄SD大鼠80只,随机分为四组,每组20只,分别为空白对照组(C组),1%七氟醚暴露2 h组(Sev1组),2%七氟醚暴露2 h组(Sev2组),4%七氟醚暴露2 h组(Sev3组);七氟醚暴露组分别置于1... 目的探讨七氟醚早期暴露对新生大鼠脑发育的影响。方法选取新生6日龄SD大鼠80只,随机分为四组,每组20只,分别为空白对照组(C组),1%七氟醚暴露2 h组(Sev1组),2%七氟醚暴露2 h组(Sev2组),4%七氟醚暴露2 h组(Sev3组);七氟醚暴露组分别置于1%、2%、4%七氟醚中每天暴露2 h,连续3 d;出生后第9天采用0.5%戊巴比妥钠麻醉后处死新生大鼠取出脑组织;采用电子天平秤检测各组大鼠在出生后6、9、15、28 d体重和脑重的变化;采用荧光定量PCR法(RT-PCR)检测Cx30、IL-6及BDNF基因mRNA表达量;采用免疫荧光法检测GFP蛋白含量;出生后28 d Morris水迷宫评价新生大鼠学习记忆能力。结果与C组比较,Sev1、Sev2和Sev3组新生大鼠体质量和脑质量均有所减轻,且随着日期延长这种减轻更为明显,Cx30 mRNA和BDNF mRNA表达量明显降低,IL-6mRNA表达量明显升高(P<0.05),GFP细胞数量明显减少(P<0.05);与Sev1组比较,Sev2和Sev3组新生大鼠体质量和脑质量均明显减轻,GFP数量明显减少(P<0.05);与C组比较,Sev1、Sev2和Sev3组逃避潜伏期和游动距离均明显延长(P<0.05),目标象限停留时间明显缩短(P<0.05),穿越虚拟平台次数明显减少(P<0.05)。结论新生大鼠接受七氟醚暴露可致未成熟脑损伤及远期学习记忆能力下降,且这种脑损伤程度与七氟醚浓度呈正相关;其机制可能与其脑内Cx30、BDNF基因表达水平改变有关。 展开更多
关键词 七氟醚 未成熟脑 星型胶质细胞 新生大鼠 MORRIS水迷宫
电针对阿尔茨海默病大鼠齿状回星形胶质细胞和白细胞介素-10表达及其共定位的影响 预览 被引量:2
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作者 陶一鸣 杜艳军 +3 位作者 田青 王静芝 孙国杰 沈峰 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期874-878,共5页
目的观察电针对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马齿状回星形胶质细胞(AC)和白细胞介素(IL)-10表达及其共定位的影响。方法40只雄性Wistar大鼠随机等分成对照组、假手术组、模型组和治疗组。采用双侧海马注射Aβ1~42建立AD模型。对照组、假手术... 目的观察电针对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马齿状回星形胶质细胞(AC)和白细胞介素(IL)-10表达及其共定位的影响。方法40只雄性Wistar大鼠随机等分成对照组、假手术组、模型组和治疗组。采用双侧海马注射Aβ1~42建立AD模型。对照组、假手术组和模型组不予任何治疗;治疗组选取百会、肾俞,电针20 min,1次/d,6 d为1个疗程,2个疗程间休息1 d。采用免疫组化法和免疫双标法检测相关指标。结果模型组和治疗组胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性表达均显著升高(P<0.01),但两组间无显著性差异(P>0.05),模型组AC胞体变大,突起增多增粗,胞核空化,染色深。模型组IL-10阳性表达显著降低(P<0.01),治疗组IL-10阳性表达显著增强(P<0.01)。假手术组IL-10与GFAP共定位呈金黄色,模型组IL-10主要定位于神经元细胞核,治疗组IL-10表达显著增强,不仅表达在神经元细胞核,也表达在神经元纤维。结论电针对AD的调节作用不限于抗炎作用,尚可促进AC对神经元的抗炎保护作用。 展开更多
关键词 电针疗法 阿尔茨海默病 星形胶质细胞
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人脐带间充质干细胞来源外泌体减轻大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧损伤所致的水肿 预览
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作者 张勇 马迅 +4 位作者 孙麟 张丽 关晓明 吕聪 陈旭 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4011-4017,共7页
背景:外泌体对神经细胞具有调控修复作用,从而促进神经细胞增生,减轻脊髓损伤,但外泌体对脊髓损伤水肿作用的相关研究较少。目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体减轻氧糖剥夺/复氧损伤大鼠脊髓星形胶质细胞水肿的作用及机制。方法:... 背景:外泌体对神经细胞具有调控修复作用,从而促进神经细胞增生,减轻脊髓损伤,但外泌体对脊髓损伤水肿作用的相关研究较少。目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体减轻氧糖剥夺/复氧损伤大鼠脊髓星形胶质细胞水肿的作用及机制。方法:超高速离心法分离提取人脐带间充质干细胞外泌体,采用胰酶消化法提取新生SD大鼠脊髓星形胶质细胞。第一部分实验分组:①对照组,细胞正常培养,未进行氧糖剥夺/复氧处理;②模型组:氧糖剥夺6 h/复氧24 h;③人脐带间充质干细胞外泌体组:氧糖剥夺6 h/复氧24 h,在复氧过程的培养基中分别加入30,60,90μg人脐带间充质干细胞外泌体,作用24 h。Western blot检测细胞AQP4蛋白表达,活细胞工作站检测细胞体积,透射电镜观察细胞水肿超微结构变化。第二部分实验分组:①对照组:细胞正常培养,未进行氧糖剥夺/复氧处理;②模型组:氧糖剥夺6 h/复氧24 h;③人脐带间充质干细胞外泌体组:氧糖剥夺6 h/复氧24h,在复氧过程的培养基中加入90μg人脐带间充质干细胞外泌体,作用24h;④JNK受体抑制剂SP600125组:氧糖剥夺6 h/复氧24 h,在复氧过程的培养基中加入5μmol/L JNK受体抑制剂SP600125,作用24 h。Western blot检测细胞AQP4及p-JNK蛋白表达,活细胞工作站检测细胞体积。结果与结论:①与模型组比较,人脐带间充质干细胞外泌体干预24 h后,透射电镜可见线粒体、内质网水肿减轻,溶酶体数量减少,细胞水肿体积显著降低(P <0.05),AQP4蛋白的表达量减少(P <0.05);②与模型组比较,人脐带间充质干细胞外泌体与JNK抑制剂SP600125干预后,细胞中AQP4、p-JNK表达明显降低(P <0.05),细胞水肿体积显著降低(P <0.05);③结果表明,人脐带间充质干细胞外泌体可通过抑制JNK信号通路降低氧糖剥夺/复氧损伤后脊髓星形胶质细胞AQP4蛋白的表达,减轻细胞水肿。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞外泌体 星形胶质细胞 脊髓损伤 氧糖剥夺/复氧损伤 细胞水肿 AQP4 JNK受体抑制剂
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神经炎症与抑郁症相关的研究进展 预览
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作者 杨可心 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2019年第24期32-33,41共3页
抑郁症是一种常见的、损害严重的、经常复发的精神障碍,近年来人群中出现的不明原因的患病率逐渐上升。关于抑郁症的发病机制存在多种假设,这些假设尚未完全得到证实。最新的研究发现神经炎症与抑郁症的发生有关,NLRP3炎症小体、TNF-α... 抑郁症是一种常见的、损害严重的、经常复发的精神障碍,近年来人群中出现的不明原因的患病率逐渐上升。关于抑郁症的发病机制存在多种假设,这些假设尚未完全得到证实。最新的研究发现神经炎症与抑郁症的发生有关,NLRP3炎症小体、TNF-α细胞因子、星形胶质细胞与小胶质细胞均参与其中,为抑郁症的治疗提供了可能靶点。本文就神经炎症与抑郁症相关的研究进展进行分析。 展开更多
关键词 神经炎症 抑郁症 细胞因子 星形胶质细胞 小胶质细胞
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差速贴壁法在原代星形胶质细胞纯化中的应用 预览
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作者 李艳 张瑜 李斐雪 《杭州师范大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第3期268-273,共6页
为获得高纯度的星形胶质细胞,在大鼠新生P0乳鼠大脑皮层的原代培养后,采用差速贴壁法予以纯化.经细胞免疫荧光染色鉴定,差速贴壁30min及1h处理获得的星形胶质细胞纯度高、状态好,能满足神经生物学研究中对高纯度星形胶质细胞培养的实验... 为获得高纯度的星形胶质细胞,在大鼠新生P0乳鼠大脑皮层的原代培养后,采用差速贴壁法予以纯化.经细胞免疫荧光染色鉴定,差速贴壁30min及1h处理获得的星形胶质细胞纯度高、状态好,能满足神经生物学研究中对高纯度星形胶质细胞培养的实验要求,适宜推广. 展开更多
关键词 星形胶质细胞 差速贴壁法 大鼠 原代细胞培养
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The role of connexin43 in neuropathic pain induced by spinal cord injury
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作者 Anhui Wang Changshui Xu 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期555-561,共7页
Neuropathic pain is caused by the damage or dysfunction of the nervous system. In many neuropathic pain models, there is an increase in the number of gap junction (GJ) channels, especially the upregulation of the expr... Neuropathic pain is caused by the damage or dysfunction of the nervous system. In many neuropathic pain models, there is an increase in the number of gap junction (GJ) channels, especially the upregulation of the expression of connexin43 (Cx43), leading to the secretion of various types of cytokines and involvement in the formation of neuropathic pain. GJs are widely distributed in mammalian organs and tissues, and Cx43 is the most abundant connexin (Cx) in mammals. Astrocytes are the most abundant glial cell type in the central nervous system (CNS),which mainly express Cx43. More importantly, GJs play an important role in regulating cell metabolism, signaling, and function. Many existing literatures showed that Cx43 plays an important role in the nervous system, especially in the CNS under normal and pathological conditions. However, many internal mechanisms have not yet been thoroughly explored. In this review, we summarized the current understanding of the role and association of Cx and pannexin chan nets in neuropathic pain, especially after spinal cord injury, as well as some of our own in sights and thoughts which suggest that Cx43 may become an emerging therapeutic target for future neuropathic pain, bringing new hope to patients. 展开更多
关键词 connexin43 astrocytes gap junction NEUROPATHIC pain SPINAL CORD injury
FGF21对Aβ25-35导致星形胶质细胞损伤的保护作用及机制研究 预览
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作者 孙岩 高向东 陈松 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期490-496,共7页
以Aβ25-35诱导星形胶质细胞建立损伤模型,探讨阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)样病变中成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)对星形胶质细胞的作用及机制。采用Aβ25-35诱导C6星形胶质细胞株及原代星形胶... 以Aβ25-35诱导星形胶质细胞建立损伤模型,探讨阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)样病变中成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)对星形胶质细胞的作用及机制。采用Aβ25-35诱导C6星形胶质细胞株及原代星形胶质细胞损伤建立细胞模型;以不同浓度的FGF21对Aβ25-35诱导细胞损伤模型干预,MTT法检测细胞活性;采用DCFH-DA探针结合流式细胞仪检测FGF21及Aβ25-35对C6细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的作用;Western blot检测FGF21及Aβ25-35对C6细胞中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)活性的影响。结果显示:FGF21能够减少Aβ25-35导致C6细胞及原代星形胶质细胞的损伤,下调C6细胞内异常ROS水平,同时缓解Aβ25-35引起的C6细胞MEK1/2、ERK1/2、p38磷酸化水平的异常,提示FGF21可能通过调控ROS途径及MAPKs信号通路进而缓解Aβ25-35导致的星形胶质细胞损伤。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子21 阿尔茨海默病 星形胶质细胞 活性氧 丝裂原活化蛋白激酶
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电离辐射激活海马星形胶质细胞诱导小鼠认知功能障碍 预览
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作者 王贞 罗诗诗 +8 位作者 牛磊 乃爱桃 徐杨 刘政海 何洁 何淑雅 钟小林 万炜 曹文宇 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2019年第1期20-26,共7页
探讨电离辐射引起小鼠认知功能障碍的可能机制。24只雌性昆明小鼠随机分为对照组和辐照组,辐照组小鼠接受137Csγ射线单次全身辐照至吸收剂量4 Gy。35 d后采用Y迷宫实验检测小鼠认知功能;免疫组织化学法检测小鼠海马区星形胶质细胞(Astr... 探讨电离辐射引起小鼠认知功能障碍的可能机制。24只雌性昆明小鼠随机分为对照组和辐照组,辐照组小鼠接受137Csγ射线单次全身辐照至吸收剂量4 Gy。35 d后采用Y迷宫实验检测小鼠认知功能;免疫组织化学法检测小鼠海马区星形胶质细胞(Astrocytes,Ast)标记物胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性细胞数的表达变化;Western blot方法检测海马GFAP蛋白的表达变化;荧光定量PCR检测炎性因子白细胞介素IL-1α、IL-1β、IL-6 mRNA和海马GFAP的表达情况。结果表明:与对照组相比,辐照组小鼠在Y迷宫实验中自发交替率明显降低(78.40±4.16 vs. 67.53±3.08,p<0.05);海马区GFAP阳性细胞数明显增加(133.4±9.6 vs. 280.3±32.7,p<0.01);GFAP蛋白及mRNA表达均显著上调(1.000±0.036vs. 1.300±0.102,p<0.05;1.000±0.031 vs. 1.203±0.078,p<0.05);IL-1α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达均明显上调(1.000±0.133 vs. 1.677±0.164,p<0.01;1.000±0.132 vs. 1.488±0.105,p<0.05;1.000±0.218 vs.2.181±0.188,p<0.01)。研究提示,电离辐射可能是通过激活海马Ast诱导炎症因子释放,从而引起认知功能障碍。 展开更多
关键词 电离辐射 海马 星形胶质细胞 认知功能障碍
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自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星形细胞病患者脊髓磁共振成像及临床特征分析
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作者 徐辉明 黄清梅 +8 位作者 肖小玉 刘天妮 陈百铿 杨华才 刘思 杨洁 黄莉 龙友明 高聪 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期92-97,共6页
目的 分析国人自身免疫性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)星形细胞病患者的脊髓病变的磁共振成像(MRI)特征及其相关临床特点。 方法 使用基于组织法及细胞法检测2013年3月至2018年6月在广州医科大学附属第二医院神经内科收集的1 040份脑脊液和... 目的 分析国人自身免疫性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)星形细胞病患者的脊髓病变的磁共振成像(MRI)特征及其相关临床特点。 方法 使用基于组织法及细胞法检测2013年3月至2018年6月在广州医科大学附属第二医院神经内科收集的1 040份脑脊液和血清标本,发现42例GFAP抗体阳性患者,回顾性分析脑脊液GFAP抗体阳性同时存在脊髓病灶的19例自身免疫性GFAP星形细胞病患者的脊髓MRI资料及其临床资料。 结果 19例患者中,女性12例,男性7例;发病年龄(44±17)岁。患者的主要临床表现为肢体麻木无力(14/19)、视力障碍(5/19)、头痛(4/19)、癫痫发作(4/19)、认知障碍(3/19)等。脊髓MRI提示,脊髓病灶仅累及颈段脊髓者5例(5/19),仅累及胸段脊髓者8例(8/19),同时累及颈胸段脊髓者6例(6/19);脊髓受累长度超过3个脊髓节段者15例(15/19);脊髓病灶有强化者7例(7/19);脊髓病灶合并有颅内病灶者8例(8/19);病灶累及脊髓灰质19例(19/19)。 结论 自身免疫性GFAP星形细胞病患者女性多于男性,患者的脑部和脊髓可以同时受累,患者的脊髓MRI表现形式复杂,脊髓受累节段一般较长,并且以累及脊髓灰质为主,脊髓病灶多累及胸段脊髓,仅累及颈段脊髓较少,腰段脊髓基本不受累。 展开更多
关键词 自身免疫疾病 胶质纤维酸性蛋白 星形细胞 脊髓 磁共振成像
针灸对Aβ1-42诱导阿尔茨海默病模型大鼠齿状回神经元及星形胶质细胞超微结构的影响
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作者 汤双红 杜艳军 +2 位作者 陶一鸣 田青 孔立红 《中国针灸》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期281-286,共6页
目的:观察针灸'百会''肾俞'穴对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马齿状回超微结构的影响。方法:将40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和针灸组,每组10只。模型组与针灸组均双侧海马各注射5μLβ淀粉... 目的:观察针灸'百会''肾俞'穴对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马齿状回超微结构的影响。方法:将40只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和针灸组,每组10只。模型组与针灸组均双侧海马各注射5μLβ淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)制备AD模型,假手术组注射等量0.9%NaCl溶液。针灸组于造模3 d后针灸'百会'及'肾俞'穴,每次20 min,每日1次,6 d为一疗程,连续治疗2个疗程,疗程间间隔1 d。其余各组常规饲养,不予干预。于造模前、造模后第4天、干预后进行水迷宫检测,记录大鼠逃避潜伏期、跨越平台次数,干预后取海马组织齿状回部位,用透射电镜观察大鼠海马齿状回神经元、星形胶质细胞超微结构的变化。结果:①造模后第4天,与正常组和假手术组比较,模型组平均逃避潜伏期明显延长,跨越平台次数明显减少(均P<0.01)。干预后,针灸组与模型组比较,平均逃避潜伏期缩短,跨越平台次数明显增加(均P<0.01)。②正常组和假手术组的神经元、星形胶质细胞形态均完整,核及膜结构清晰,线粒体、内质网及溶酶体等细胞器形态正常。模型组神经元形态较不规则、胞核严重固缩,胞质严重水肿,异染色质颜色加深,内质网扩张并脱颗粒,线粒体数目减少,甚可见线粒体嵴呈畸形样改变;星形胶质细胞周边严重水肿,胞质中少见细胞器,线粒体严重肿胀,内质网轻度扩张。针灸组神经元胞质和星形胶质细胞周边水肿仍较明显,线粒体轻度肿胀,但较模型组均有所减轻,且神经元内质网、核糖体未见明显异常。结论:针灸治疗有助于改善Aβ1-42诱导阿尔茨海默病大鼠海马齿状回神经元和星形胶质细胞的超微病理变化。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 针灸 神经元 星形胶质细胞 超微结构
柴胡皂苷a抑制PTZ诱导的小鼠海马星形胶质细胞活化 预览
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作者 单萍 张继龙 +1 位作者 笱玉兰 罗利俊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期485-490,共6页
目的:探讨柴胡皂苷a(SSa)对戊四氮(PTZ)诱导的小鼠海马星形胶质细胞活化的抑制作用。方法:分离培养小鼠海马星形胶质细胞,将细胞随机分为对照组、PTZ组、PTZ+0.625 mg/L SSa组和PTZ+1.25 mg/L SSa组。通过免疫荧光染色检测胶质细胞原纤... 目的:探讨柴胡皂苷a(SSa)对戊四氮(PTZ)诱导的小鼠海马星形胶质细胞活化的抑制作用。方法:分离培养小鼠海马星形胶质细胞,将细胞随机分为对照组、PTZ组、PTZ+0.625 mg/L SSa组和PTZ+1.25 mg/L SSa组。通过免疫荧光染色检测胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达来鉴定细胞;用MTT检测评估细胞活力;用流式细胞术检测各组细胞的周期变化;ELISA法检测各组细胞中GFAP和间隙连接蛋白43(Cx43)的表达水平;流式细胞术和Hoechst 33258染色检测各组细胞的凋亡情况。结果:体外原代培养的星形胶质细胞贴壁生长,细胞突起明显。免疫荧光显示星形胶质细胞呈GFAP阳性表达。与对照组比较,PTZ组细胞活力和G2/M期细胞百分比显著增加(P<0.05),GFAP和Cx43的表达水平也显著上调(P<0.05);与PTZ组比较,PTZ+0.625 mg/L SSa组和PTZ+1.25 mg/L SSa组细胞活力和G2/M期细胞百分比均明显下降,GFAP和Cx43的表达水平也降低,但细胞凋亡水平显著增加(P<0.05)。结论:SSa能够显著抑制PTZ诱导的海马星形胶质细胞活化,抑制细胞增殖并诱导凋亡。 展开更多
关键词 癫痫 星形胶质细胞 柴胡皂苷A 戊四氮 细胞凋亡
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丹参酮ⅡA对大鼠脊髓损伤后星形胶质细胞增殖的MAPK通路的影响
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作者 于宝龙 李瑞峰 李文选 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期535-537,共3页
目的探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TⅡA)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后星形胶质细胞增殖的MAPK通路的影响。方法建立大鼠SCI模型,获得星形胶质细胞,培养14 d后,采用免疫荧光法检测星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白(glial fib... 目的探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TⅡA)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后星形胶质细胞增殖的MAPK通路的影响。方法建立大鼠SCI模型,获得星形胶质细胞,培养14 d后,采用免疫荧光法检测星形胶质细胞中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达;MTT法选择TⅡA抑制星形胶质细胞生长的最适浓度和时间;Western blot法检测MAPK通路各蛋白的磷酸化情况。结果星形胶质细胞中有GFAP特异性表达;TⅡA抑制星形胶质细胞生长的最适浓度为15μg/mL,最适作用时间为36 h;15μg/mL TⅡA作用0和4 h,星形胶质细胞中p-JNK高于8和12 h,ERK1/2和p38无变化。结论 TⅡA主要通过JNK依赖性途径对星形胶质细胞的生长进行调控。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 脊髓损伤 星形胶质细胞 MAPK通路
淫羊藿素对LPS诱导原代星形胶质细胞COX-2和iNOS基因表达影响 预览
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作者 张文娣 张梅 +3 位作者 白金月 徐蒙莉 刘慧 陈文芳 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2019年第1期32-34,39共4页
目的 探讨淫羊藿素(ICT)对脂多糖(LPS)诱导的原代星形胶质细胞炎症反应的抑制作用及雌激素受体(ER)阻断剂ICI182,780对其影响。方法 常规培养原代星形胶质细胞,将其分为对照组、LPS组、ICT+LPS组、ICI182,780+ICT+LPS组、ICI182,780组... 目的 探讨淫羊藿素(ICT)对脂多糖(LPS)诱导的原代星形胶质细胞炎症反应的抑制作用及雌激素受体(ER)阻断剂ICI182,780对其影响。方法 常规培养原代星形胶质细胞,将其分为对照组、LPS组、ICT+LPS组、ICI182,780+ICT+LPS组、ICI182,780组。对照组给予1g/L二甲基亚砜处理,其余各组在有或无ICT预处理条件下,先加入1μmol/L的ICI182,780作用1h,然后加入10μmol/L的ICT预保护1h,继以1mg/L的LPS作用细胞6h。应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组环氧化酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达。结果 与对照组比较,LPS组COX-2和iNOS基因的表达明显上调(F=18.19、394.80,q=8.89、41.74,P<0.01);ICT预保护能明显降低由LPS诱导的COX-2和iNOS基因表达的上调(q=7.44、13.83,P<0.01),此作用可以被ER特异性阻断剂ICI182,780所阻断(q=6.80、8.80,P<0.01);ICI182,780组二者表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ICT能够抑制LPS诱导的原代星形胶质细胞COX-2和iNOS基因的表达,其抗炎机制与ER途径的激活有关。 展开更多
关键词 淫羊藿素 脂多糖类 星形细胞 环氧化酶2 一氧化氮合酶
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2-氯乙醇经NMDAR/cAMP/PKA信号通路致星形胶质细胞AQP4蛋白表达增强
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作者 罗超红 郭静静 +2 位作者 徐天胜 李坤阳 金亚平 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2019年第1期15-21,共7页
目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)/环磷酸腺苷(cAMP)/cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)信号通路在2-氯乙醇上调星形胶质细胞(AS)表达水通道蛋白-4(AQP4)中的作用。方法①取对数生长期的AS予剂量为0.0、7.5、15.0和30.0 mmol/L 2-氯乙醇(... 目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)/环磷酸腺苷(cAMP)/cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)信号通路在2-氯乙醇上调星形胶质细胞(AS)表达水通道蛋白-4(AQP4)中的作用。方法①取对数生长期的AS予剂量为0.0、7.5、15.0和30.0 mmol/L 2-氯乙醇(设为相应剂量组)刺激12 h后,收集细胞进行检测。②取对数生长期的AS为空白对照组、抑制剂(MK-801或H89)对照组、2-氯乙醇组、抑制剂(MK-801或H89)干预组。空白对照组不予任何处理;抑制剂对照组仅予浓度为10.0μmmol/L MK-801或15.0μmmol/L H89处理;MK-801干预组以浓度为10.0μmmol/L的MK-801提前干预30 min,H89干预组以浓度为15.0μmmol/L的H89提前干预1 h;干预结束后,2-氯乙醇组和MK-801、H89干预组AS均予浓度为30.0 mmol/L的2-氯乙醇刺激12 h。③收集各组AS,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应法检测AS内AQP4、NMDAR受体主亚基(NR1)、NMDAR受体2B亚基(NR2B)、钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的蛋白和mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法检测磷酸化CaMKⅡ(p-CaMKⅡ)和PKA的表达;采用比色法检测AS内钙离子(Ca^2+)浓度,采用酶联吸附试验检测腺苷酸环化酶(AC)活力和cAMP水平。结果①30.0 mmol/L剂量组AS内AQP4、NR1、NR2B的蛋白与mRNA,PKA蛋白、CaMKⅡmRNA的相对表达水平以及p-CaMKⅡ/CaMKⅡ蛋白比值、Ca^2+浓度、AC活力、cAMP水平均高于0.0 mmol/L剂量组(P<0.05)。PKA蛋白相对表达水平和Ca^2+浓度均随着2-氯乙醇剂量的增加而增加(P<0.05)。②2-氯乙醇组AS内AQP4蛋白相对表达水平、Ca^2+浓度均高于空白对照组和MK-801对照组(P<0.05),MK-801干预组AS内AQP4蛋白相对表达水平和Ca^2+浓度均低于2-氯乙醇组(P<0.05);2-氯乙醇组AS内AQP4和PKA蛋白相对表达水平均高于空白对照组和H89对照组(P<0.05),H89干预组AS内AQP4和PKA蛋白相对表达水平均低于2-氯乙醇组(P<0.05)。结论 2-氯乙醇可通过激活NMDAR/cAMP/PKA信号通路诱导AS中AQ 展开更多
关键词 2-氯乙醇 水通道蛋白-4 星形胶质细胞 N-甲基-D-天冬氨酸受体 环磷酸腺苷 蛋白激酶A
G protein-coupled estrogen receptor 1 (GPER) activation triggers different signaling pathways on neurons and astrocytes 预览
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作者 Claudio Roque Graca Baltazar 《中国神经再生研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第12期2069-2070,共2页
Estradiol (E2) is the most potent and prevalent form of estrogen, a well-known hormone that regulates multiple tissues and functions in humans. In the brain, E2 regulates processes as diverse as learning, memory, cogn... Estradiol (E2) is the most potent and prevalent form of estrogen, a well-known hormone that regulates multiple tissues and functions in humans. In the brain, E2 regulates processes as diverse as learning, memory, cognition, mood, as well as neurodevelopment and neurodegeneration. The actions of E2 are mediated by classical estrogen receptors (ERs;α and β), and by the G protein-coupled estrogen receptor 1 (GPER or GPR30)(Prossnitz and Arterburn, 2015). Classical ER are predominantly present in the nucleus and cytoplasm, with less than 2% present on the plasma membrane, and mediate genomic cellular effects that occur in the time frame of hours to days (Prossnitz and Arterburn, 2015). 展开更多
关键词 multiple TISSUES FUNCTIONS ASTROCYTES
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