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磁力诱导细胞靶向移植介导磁化荧光细胞修复小鼠骨缺损及机制研究
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作者 江千里 陈滨 +8 位作者 江雨 陈全凤 陆洋 吕愉芳 麦秋穗 蔡喜雨 干宁 余斌 江汕 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期796-801,共6页
目的探讨磁力诱导细胞靶向移植(MagIC-TT)技术在介导治疗性荧光基因标记细胞进入骨组织内部修复小鼠骨缺损中的效果及其作用机制。方法对比磁化与未磁化绿色荧光蛋白标记的小鼠骨髓基质干细胞(GFP-BMSCs)(n=3)的生物学特性和靶向迁移能... 目的探讨磁力诱导细胞靶向移植(MagIC-TT)技术在介导治疗性荧光基因标记细胞进入骨组织内部修复小鼠骨缺损中的效果及其作用机制。方法对比磁化与未磁化绿色荧光蛋白标记的小鼠骨髓基质干细胞(GFP-BMSCs)(n=3)的生物学特性和靶向迁移能力。将GFP-BMSCs以MagIC-TT法负载到组织工程骨中(实验组,n=5),再植入红色荧光蛋白转基因小鼠的大段股骨缺损模型中修复骨缺损,以未接种细胞的组织工程骨(对照组,n=5)及仅用髓内钉固定的空白组(n=3)为对照。术后3个月分别从X线片、显微CT、半固体脱钙和组织学等方面分析骨修复的效果和机制。结果磁化与非磁化GFP-BMSCs的吸光度值(0.760±0.029、0.733±0.033)、存活率(87.9%±1.0%、87.4%±2.0%)比较差异均无统计学意义(P>0.05),但经磁化的GFP-BMSCs迁移率高于非磁化的GFP-BMSCs,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3个月X线片结果显示:实验组小鼠支架降解,股骨缺损部位近端和远端由新生骨组织相连;空白组术后无新骨形成;对照组见少量骨形成。显微CT结果显示:实验组小鼠去除髓内钉后,股骨缺损区形成稳定的新生骨组织。半固体脱钙实验结果显示:支架材料内的GFP-BMSCs在新生骨髓腔与软骨陷窝中分布密集,红色荧光蛋白受者细胞贯穿其中,即供者细胞和受者细胞都共同参与了新生骨的形成。结论MagIC-TT技术可以介导治疗性细胞深入骨组织,修复小鼠骨缺损取得了良好疗效;红、绿双重荧光蛋白基因标记配合半固体脱钙等技术可观察到供、受者细胞共同参与了骨修复。 展开更多
关键词 组织工程 骨髓细胞 骨缺损 细胞移植 靶向性
骨髓间充质干细胞治疗缺血性卒中:神经谱系定向分化
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作者 伦志刚 汤加家 +2 位作者 邹昌盛 黄璟 李爱民 《国际脑血管病杂志》 2019年第7期543-548,共6页
研究显示,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植具有恢复缺血性卒中患者机体感觉和运动功能的治疗效果。BMSCs移植是一种很有前景的治疗策略,因为其具有分化为神经元样细胞的能力。文章对在体外促进BMSCs... 研究显示,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植具有恢复缺血性卒中患者机体感觉和运动功能的治疗效果。BMSCs移植是一种很有前景的治疗策略,因为其具有分化为神经元样细胞的能力。文章对在体外促进BMSCs向神经元样细胞分化的诱导剂进行了综述。 展开更多
关键词 卒中 脑缺血 骨髓细胞 间质干细胞 神经元 细胞分化
骨髓间充质干细胞移植对Ⅶ型胶原酶诱导的脑出血大鼠模型神经功能的保护作用 预览
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作者 阎晓玲 张学斌 +4 位作者 唐帆 孔繁明 杜从斌 苏心 王新平 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期639-647,共9页
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMMSC)移植对脑出血大鼠模型神经功能的保护作用。方法 采用Ⅶ型胶原酶制备Sprague-Dawley大鼠右侧纹状体出血模型,改良神经功能缺损评分(mNSS)、免疫组织化学染色和TUNEL法观察BMMSC细胞移植治疗后1、3、7... 目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMMSC)移植对脑出血大鼠模型神经功能的保护作用。方法 采用Ⅶ型胶原酶制备Sprague-Dawley大鼠右侧纹状体出血模型,改良神经功能缺损评分(mNSS)、免疫组织化学染色和TUNEL法观察BMMSC细胞移植治疗后1、3、7、14和28 d大鼠神经功能改善程度、脑源性神经营养因子(BDNF)表达变化和细胞凋亡情况。结果 不同处理组大鼠各观察时间点mNSS评分(均P=0.000)、凋亡细胞数目(均P=0.000)差异均有统计学意义。与对照组和模型组相比,移植组大鼠治疗后28 d mNSS评分降低(P <0.05),且呈时间性递减,治疗后7、14和28 d mNSS评分均低于治疗后1和3 d(P <0.05);治疗后1、3、7、14和28 d,模型组和移植组大鼠凋亡细胞数目增加(P <0.05)且于治疗后7 d达峰值(均P <0.05),治疗后14和28 d凋亡细胞数目虽有所减少但仍高于治疗后1和3 d(均P <0.05)。移植组大鼠移植区及周围BDNF表达升高,偶见绿色荧光蛋白和胶质纤维酸性蛋白、绿色荧光蛋白和神经元核抗原双表达细胞,表明移植的BMMSC细胞已在宿主脑组织中存活并向神经元样细胞和神经胶质样细胞分化。结论 由胶原酶诱导的脑出血大鼠模型稳定,可用于脑出血研究。移植的BMMSC细胞通过上调BDNF表达、减少细胞凋亡而发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 脑出血 骨髓细胞 干细胞移植 脑源性神经营养因子 细胞凋亡 细胞 培养的 疾病模型 动物
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二烯丙基一硫抑制苯诱导大鼠外周血白细胞减少的抗氧化机制
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作者 于婷 王琼 +3 位作者 黎显杰 厉铭 刘志丹 谢克勤 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期737-745,共9页
目的研究二烯丙基一硫(DAS)拮抗苯诱导大鼠外周血白细胞(WBC)降低中抗氧化作用的相关机制。方法SPF级成年雄性SD大鼠60只,体重180~220 g,适应性喂养5 d后,随机分为空白对照组、DAS对照组、苯模型组以及苯+DAS低、中、高剂量组,每组10只... 目的研究二烯丙基一硫(DAS)拮抗苯诱导大鼠外周血白细胞(WBC)降低中抗氧化作用的相关机制。方法SPF级成年雄性SD大鼠60只,体重180~220 g,适应性喂养5 d后,随机分为空白对照组、DAS对照组、苯模型组以及苯+DAS低、中、高剂量组,每组10只。DAS各剂量干预组和DAS对照组大鼠分别经口灌胃40、80、160、160 mg/kg·bw DAS,空白对照组和苯模型组给予等体积玉米油;2 h后,苯模型组和DAS各剂量干预组给予苯(1.3 g/kg·bw)-玉米油混合液(体积分数50%),空白对照组和DAS对照组给予等体积玉米油。1次/d,连续4周。提前1 d颈静脉取抗凝血进行外周血细胞计数;腹腔注射戊巴比妥(50 mg/kg·bw)麻醉大鼠,腹主动脉法取血并分离血清,低温剥离胸腺、脾脏和股骨,检测样品中氧化和抗氧化指标;分离一侧股骨进行骨髓中WBC计数。结果与空白对照组比较,苯模型组大鼠脾脏、胸腺体积减小,重量及脏器系数均降低(P<0.05);与苯模型组比较,DAS各剂量干预组大鼠脾脏和胸腺体积增大,脾脏重量及系数均升高(P<0.05),苯+DAS中、高剂量组胸腺重量及系数均升高(P<0.05)。与空白对照组比较,苯模型组大鼠外周血细胞和骨髓中WBC计数均降低(P<0.05);与苯模型组比较,苯+DAS中、高剂量组外周血细胞和骨髓中WBC计数均升高(P<0.05)。与空白对照组比较,苯模型组大鼠血清中丙二醛(MDA)浓度增加(P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽比值(GSH/GSSG值)以及总抗氧化能力(T-AOC)水平均降低(P<0.05);与苯模型组比较,苯+DAS高剂量组MDA浓度降低(P<0.05),T-SOD活力、GSH含量、GSH/GSSG值以及T-AOC水平均增加(P<0.05)。与空白对照组比较,苯模型组大鼠脾脏中MDA浓度增加(P<0.05),GSH含量、GSH/GSSG值和T-AOC水平均降低(P<0.05);与苯模型组比较,DAS各剂量干预组MDA浓度均降低(P<0.05),苯+DAS高剂量组T-SOD� 展开更多
关键词 大鼠 二烯丙基一硫 白细胞减少 氧化性应激 骨髓细胞 外周血单个核细胞
流式细胞术检测多发性骨髓瘤中骨髓细胞表面免疫表型的价值 预览
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作者 苏密龙 《中国卫生标准管理》 2019年第5期88-90,共3页
目的探讨流式细胞术检测多发性骨髓瘤中骨髓细胞表面免疫表型的价值。方法选取2017年1月—2018年9月我院收治的49例多发性骨髓瘤患者作为研究组,并同期选取25例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者作为对照组,对比CD19、CD38、CD45、CD56、C... 目的探讨流式细胞术检测多发性骨髓瘤中骨髓细胞表面免疫表型的价值。方法选取2017年1月—2018年9月我院收治的49例多发性骨髓瘤患者作为研究组,并同期选取25例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者作为对照组,对比CD19、CD38、CD45、CD56、CD138的具体表达情况。结果研究组CD38和CD138荧光强度高于对照组,CD19荧光强度低于对照组(P <0.05)。CD19阳性率为6.1%(3/49),CD38阳性率为100.0%(49/49),为强表达;CD45阳性率为38.8%(19/49),为弱表达;CD56阳性率为81.6%(40/49),为高表达;CD138阳性率为100.0%(49/49),为强表达。结论使用流式细胞仪检测骨髓瘤细胞免疫表型可鉴别骨瘤细胞和正常细胞,具有重要诊断价值。 展开更多
关键词 骨髓瘤 免疫表型 流式细胞仪 荧光强度 骨髓细胞 多发性
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早期移植生长分化因子11表达沉默的骨髓基质干细胞促进大鼠激素性股骨头坏死区成骨的研究
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作者 孔令驰 孙兴亮 +3 位作者 左荣台 王梦玮 关俊杰 康庆林 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期802-809,共8页
目的探讨早期移植生长分化因子(GDF)11表达沉默的骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠激素性股骨头坏死区的成骨作用。方法转染小干扰RNA(siRNA)以沉默大鼠BMSCs中的GDF11表达,并检测转染效率和细胞毒性。细胞实验(n=3)和动物实验(n=8)各分4组... 目的探讨早期移植生长分化因子(GDF)11表达沉默的骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠激素性股骨头坏死区的成骨作用。方法转染小干扰RNA(siRNA)以沉默大鼠BMSCs中的GDF11表达,并检测转染效率和细胞毒性。细胞实验(n=3)和动物实验(n=8)各分4组:空白对照组(未干预)、模型组(糖皮质激素)、实验组(糖皮质激素+siRNA)和阴性对照组(糖皮质激素+siRNA阴性对照物)。采用碱性磷酸酶(ALP)染色与茜素红染色检测BMSCs成骨分化效果;反转录聚合酶链式反应检测成骨标志物的表达水平。利用显微CT、HE染色、免疫组织化学和生物力学等方式评估大鼠股骨头的成骨效果。结果转染siRNA对大鼠BMSCs活性无影响。细胞实验:实验组ALP活性与钙结节数量优于模型组;模型组ALP、核心结合蛋白因子2、骨钙素和Ⅰ型胶原蛋白α1链的mRNA相对表达量分别为0.46±0.11、0.50±0.11、0.35±0.01、0.57±0.02,较空白对照组(1.00±0.09、1.02±0.23、1.03±0.30、1.02±0.25)显著下降,实验组(1.97±0.30、0.94±0.19、1.50±0.18、1.28±0.37)又较模型组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。动物实验:实验组较模型组大鼠股骨头密度升高,骨结构更完整,骨小梁参数和生物力学参数比较差异均有统计学意义(P<0.05),且核心结合蛋白因子2和Ⅰ型胶原表达量升高。结论在糖皮质激素作用下,GDF11表达沉默可增强BMSCs的成骨分化。早期移植GDF11表达沉默的BMSCs可有效促进大鼠股骨头坏死区成骨。 展开更多
关键词 股骨头坏死 骨髓细胞 生长分化因子11 糖皮质激素类 成骨分化
原始细胞不增多骨髓增生异常综合征骨髓细胞发育异常特征分析
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作者 于修文 杨慧健 《临床血液学杂志:输血与检验》 2019年第3期418-422,共5页
目的:分析原始细胞不增多骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓细胞发育异常特征,初步探讨发育异常类型及组合对MDS分型的诊断价值。方法:回顾分析2008-04—2017-08形态特征符合WHO2008分型标准的原始细胞不增多MDS患者132例,对照组83例(包括巨... 目的:分析原始细胞不增多骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓细胞发育异常特征,初步探讨发育异常类型及组合对MDS分型的诊断价值。方法:回顾分析2008-04—2017-08形态特征符合WHO2008分型标准的原始细胞不增多MDS患者132例,对照组83例(包括巨幼细胞贫血37例,免疫性血细胞减少12例,缺铁性贫血12例,类风湿性关节炎及治疗后12例,ITP激素治疗无效4例,肿瘤细胞骨髓润4例,获得性再生障碍性贫血2例)。比较MDS组和对照组中骨髓细胞发育异常类型的约登指数(Youden’s index,YI)和特异度不同,根据MDS组与对照组发育异常YI差异,剔除负值YI和无统计学意义的类型,将MDS特异度100%单列等条件进行组合,粒、红二系发育异常组合分为Ⅰ类异常(YI<0.3)、Ⅱ类异常(YI≥0.3)和Ⅲ类异常(单列)三类;巨系发育异常组合分为Ⅰ类异常(YI≥3)、Ⅲ类异常(单列);并将其初步应用于MDS组和对照组中所有病例。结果:发育异常表现类型不同,临床价值也有差异。粒系环形杆粒细胞;红系核出芽、环状铁粒幼红细胞≥15%和巨核系淋巴样小巨核细胞等MDS组中的特异性均为100%,对照组均为0;粒系双核粒细胞、难分叶、假性Pelger-Huet畸形;红系奇数核,母子核;巨系小巨核细胞、单圆巨核细胞、多圆巨核细胞;既有较高的特异度又有一定的敏感度,也有较强的临床意义。3%≤原始细胞<5%,处于正常与诊断阳性之间,此项国内标准、FAB和WHO均未列入,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),同时通过跟踪观察,发现其向下转化为高危的概率较其他发育类型大。各组合初步应用结果可以看到,组合后发育类型的最高YI均有提高,红系表现的较显著。结论:Ⅰ类、Ⅱ类异常和Ⅲ类细胞发育异常对MDS诊断均有一定的价值;红系、粒系若仅表现Ⅰ类异常,应高度重视,排除影响因素,进一步观察;若同时表现Ⅰ类、Ⅱ类异常,MDS可能性很大;若� 展开更多
关键词 血液肿瘤 原始细胞不增多 骨髓增生异常综合征 骨髓细胞 发育异常
VHL/HIF-α通路在慢性高原病骨髓有核红细胞中的表达
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作者 刘慧慧 苏娟 +6 位作者 马婕 李占全 崔森 冀林华 耿惠 汤锋 格日力 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第34期2670-2674,共5页
目的探讨慢性高原病(CMS)骨髓有核红细胞中VHL/低氧诱导因子(HIF)-α信号通路的表达情况以及相互影响。方法以2016年1月至2017年12月在青海大学附属医院就诊的25例CMS患者及21例健康对照人群为研究对象,免疫磁珠分选出CD71+CD235a+的骨... 目的探讨慢性高原病(CMS)骨髓有核红细胞中VHL/低氧诱导因子(HIF)-α信号通路的表达情况以及相互影响。方法以2016年1月至2017年12月在青海大学附属医院就诊的25例CMS患者及21例健康对照人群为研究对象,免疫磁珠分选出CD71+CD235a+的骨髓有核红细胞,实时荧光定量PCR法以及Western印迹法分别测定骨髓有核红细胞HIF-1α、HIF-2α以及VHL mRNA和蛋白表达水平并进行比较,了解各指标的变化及相互关系。结果CMS患者骨髓有核红细胞中HIF-2αmRNA[1.68(0.81,2.22)]表达水平高于健康对照组[0.98(0.60,1.19)](P<0.05),HIF-1α及VHL mRNA表达差异均无统计学意义(均P>0.05);Spearman相关分析提示CMS患者骨髓有核红细胞中HIF-2αmRNA与血红蛋白呈正相关(ρ=0.504,P<0.05),HIF-2αmRNA与VHL mRNA呈正相关(ρ=0.647,P<0.05);Western印迹测定CMS骨髓有核红细胞HIF-2α表达水平为0.94(0.68,3.30),高于健康对照组0.59(0.30,0.88),差异有统计学意义(P<0.05);但HIF-1α及VHL表达差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论CMS患者骨髓有核红细胞中HIF-2α表达异常增高,可能促进下游低氧感受基因异常表达,参与CMS的发生发展。 展开更多
关键词 慢性高原病 缺氧诱导因子 Von-hippel-lindau基因 骨髓细胞
联合检查骨髓细胞和血小板参数对血液病的诊断价值体会 预览
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作者 汤波 《当代医学》 2019年第5期20-22,共3页
目的探讨联合检查骨髓细胞核血小板参数对血液疾病的诊断与临床价值。方法选取2017年1月至2018年2月本院收治的血液病患者50例作为研究组,选同期体检健康者人员50例作为参照组,两组人员均采取骨髓细胞与血小板联合检查,观察骨髓细胞与... 目的探讨联合检查骨髓细胞核血小板参数对血液疾病的诊断与临床价值。方法选取2017年1月至2018年2月本院收治的血液病患者50例作为研究组,选同期体检健康者人员50例作为参照组,两组人员均采取骨髓细胞与血小板联合检查,观察骨髓细胞与血小板参数对血液病临床诊断价值。结果研究组患者血小板压积与血小板计量低于参照组患者,两组差异有统计学意义(P<0.05)。研究组血小板平均体积要高于参照组患者,两组差异具有统计学意义(P<0.05)。研究组患者的血小板体积分布的宽度要高于参照组,两者差异具有统计学意义(P<0.05)。观察两组骨髓涂片的情况发现:血小板分布比较,研究组能够见一个血小板,参照组可见血小板汇聚分布现象;巨核类细胞比较,研究组可见幼稚式巨核类细胞,参照组可见成熟式巨核类细胞;骨髓增生情况进行观察,研究组骨髓增生显著活跃,参照组骨髓现象正常。结论血液病检查采用骨髓细胞联合血小板参数方式,能够有效提高血液病检查诊断的准确度,有助于血液病的早期检出,有利于血液病的治疗,在临床上有推广与应用作用。 展开更多
关键词 骨髓细胞 血小板参数 血液病 诊断价值
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Calcified Nodule Formation <i>in Vitro</i>Using Rat Mandibular Incisor Pulp Cells 预览
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作者 Hideaki Ikenaga Masataka Yoshikawa +6 位作者 Ayano Miyamoto Hitomi Nakama Ikuo Nishikawa Satoshi Teramoto Hiroaki Aso Nozomi Matsuo Hiroshi Maeda 《生物医学工程(英文)》 2018年第12期327-337,共11页
One great advantage of bone marrow is that a large number of stem cells can be obtained. However, stem cells cannot be taken from the bone marrow of a patient for the purpose of regenerating teeth. In dental practice,... One great advantage of bone marrow is that a large number of stem cells can be obtained. However, stem cells cannot be taken from the bone marrow of a patient for the purpose of regenerating teeth. In dental practice, it may not be practical to obtain mesenchymal stem cells for the regeneration of the tooth from iliac bone marrow, as in orthopedics. Therefore, establishment of a cell source for tooth regeneration is one of the important problems in the field of regenerative medicine. Although the isolation of undifferentiated mesenchymal stem cells or odontoblasts from dental pulp may be difficult, dental pulp may be a favorable source for stem cells to regenerate a tooth via tissue engineering. As a fundamental study for tooth regeneration, this study was performed in order to clarify the culture periods for proliferation and differentiation using rat dental pulp-derived cells. The results of this study were as follows: Primary culture of the dental pulp cells does not require a long period of time. However, for sufficient proliferation of dental pulp cells to form a calcified nodule in the secondary culture, a long culture period is required. Dexamethasone was essential for the formation of calcified nodules by dental pulp-derived cells. Calcified nodule formation by dental pulp-derived cells in vitro required more than one month. The duration of the secondary culture for the dental pulp-derived cells will be much longer. 展开更多
关键词 CALCIFIED NODULE In Vitro Dental Pulp CELLS Bone Marrow CELLS DEXAMETHASONE
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骨形态发生蛋白复合多孔钛铌合金试件的体外成骨分化研究 预览
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作者 彭亮权 许鉴 +5 位作者 周勇 陈康 李瑛 陆伟 朱伟民 王大平 《中国骨科临床与基础研究杂志》 2018年第5期285-292,共8页
目的探讨骨形态发生蛋白(BMP)复合多孔钛铌合金试件的体外成骨分化能力。方法将多孔钛铌合金试件分为单纯实验试件组(A组)和复合rhBMP-2实验试件组(B组),将两组试件分别加至兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)中。通过倒置显微镜、扫描电镜、血... 目的探讨骨形态发生蛋白(BMP)复合多孔钛铌合金试件的体外成骨分化能力。方法将多孔钛铌合金试件分为单纯实验试件组(A组)和复合rhBMP-2实验试件组(B组),将两组试件分别加至兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)中。通过倒置显微镜、扫描电镜、血清碱性磷酸酶(ALP)及骨钙素指标检测,观察BMSCs在两组钛铌合金试件中的生长情况及金属-组织界面的结合情况。结果B组培养液中血清ALP浓度、骨钙素含量较A组明显提升;培养2周后电镜扫描示A组有大量细胞附着于材料外表面和孔洞内,细胞形态呈梭形,表现为单层生长,B组则表现为复层生长;培养4周后B组材料孔洞内可见钙沉积,而A组材料孔洞内未有钙沉积。结论多孔钛铌合金材料细胞相容性良好,兔BMSCs在试件中形态正常,具有良好的增殖分化能力;经BMP诱导,BMSCs在多孔钛铌合金材料中可向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 合金 生物相容性材料 多孔材料 骨代用品 骨形态发生蛋白质类 骨髓细胞 间质干细胞 细胞 培养的 碱性磷酸酶 骨钙素 细胞分化 细胞增殖 骨生成 体外研究
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骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片制备过程中纤维连接蛋白表达检测 预览
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作者 陈玉玲 何梦娇 +4 位作者 许雄程 伍晓红 李艳芬 陈超 骆凯 《福建医科大学学报》 2018年第6期374-378,共5页
目的探讨骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(BMSC)膜片体外构建过程中纤维连接蛋白(FN)的表达情况。方法体外分离培养骨质疏松大鼠BMSC,采用含50μg/mL维生素C的培养基连续培养构建细胞膜片,通过倒置显微镜和组织学染色对细胞膜片进行形态学观察... 目的探讨骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(BMSC)膜片体外构建过程中纤维连接蛋白(FN)的表达情况。方法体外分离培养骨质疏松大鼠BMSC,采用含50μg/mL维生素C的培养基连续培养构建细胞膜片,通过倒置显微镜和组织学染色对细胞膜片进行形态学观察;利用免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链反应及Western-blot检测细胞外基质中FN在基因和蛋白水平的表达情况。结果采用含维生素C的培养基连续培养可获得含多层细胞及丰富胞外基质的BMSC细胞膜片。免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链反应及Western-blot检测结果显示所构建的细胞膜片高表达FN。结论以浓度为50μg/mL的维生素C培养基连续培养可成功构建骨质疏松大鼠BMSC细胞膜片,膜片富含FN,有望应用于骨质疏松状态下牙槽骨缺损的治疗。 展开更多
关键词 骨质疏松 骨髓 骨髓细胞 细胞外基质 纤连蛋白类
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Gefitinib抑制表皮生长因子受体信号通路对大鼠骨内膜来源干细胞增殖及成骨分化的影响
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作者 兰生辉 曾文波 +2 位作者 陈美玲 袁功武 刘曦明 《中华创伤骨科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1072-1078,共7页
目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂Gefitinib对大鼠骨内膜来源干细胞(EDSCs)增殖及成骨分化的影响。方法10只健康雄性4周龄sD大鼠随机分为实验组和对照组(n=5),实验组予以EGFR信号通路抑制剂Gefitinib 100mg/kg·d灌胃,对照组... 目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂Gefitinib对大鼠骨内膜来源干细胞(EDSCs)增殖及成骨分化的影响。方法10只健康雄性4周龄sD大鼠随机分为实验组和对照组(n=5),实验组予以EGFR信号通路抑制剂Gefitinib 100mg/kg·d灌胃,对照组予以等剂量的甲基纤维素灌胃;术后1周取双侧股骨及胫骨,分别分离提取骨髓间充质干细胞(BMSCs)和EDSCs进行体外增殖克隆,通过流式细胞术鉴定第3代(P3)细胞表面抗原CD29、CD34、CD44、CD45;溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺人法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,聚合酶链反应检测细胞周期抑制因子相关基因(p15、p16、p21、p27)的表达。成骨诱导14d后行碱性磷酸酶(ALP)染色,成骨分化21d后行von Kossa染色,并提取mRNA做实时定量聚合酶链反应检测对比成骨分化相关基因(osteocalcin、bsp、runx2、osterix)的表达。结果EDSCs与BMSCs的CD29、CD44均呈阳性表达,CD34、CD45均呈阴性表达。Gefitinib阻断EGFR信号通路后,Brdu检测发现其对BMSCs的抑制(11.15%)比对EDSCs(0.25%)更明显;细胞周期检测可见EDSCs处于GO/G1期和S期的细胞量增加,处于G2-M期的细胞量明显降低;ALP染色可见EDSCs阳性,细胞数升高率(53.31%)明显高于BMSCs(25.04%);EDSCs细胞周期抑制因子相关基因表达的增加百分率(分别为103.9%、58.0%、117.3%、105.1%)明显高于BMSCs(分别为39.3%、38.4%、24.5%、83.4%),对EDSCs成骨分化相关基因表达的增加百分率(分别为247.O%、289.9%、66.1%、233.2%)明显高于BMSCs(分别为106.5%、186.4%、41.7%、190.8%);以上差异均有统计学意义(P<0.05)。结论EGFR抑制剂Gefitinib抑制EDSCs和BMSCs增殖,但促进其成骨分化,且对BMSCs增殖抑制更明显,对EDSCs的分化促进作用更明显。 展开更多
关键词 表皮生长因子 受体 骨髓细胞 干细胞 成骨分化
生物玻璃复合P-15多肽修复兔颅骨缺损的实验研究 预览
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作者 王帅 李成库 周延民 《现代医药卫生》 2018年第19期2969-2972,共4页
目的 探讨生物玻璃复合P-15多肽对兔颅骨缺损的修复能力。方法 将骨髓基质细胞与复合不同质量浓度P-15多肽(100、200、400μg/mL)的生物玻璃(复合材料)进行体外培养(实验组),并以未复合P-15的生物玻璃作为阴性对照组;接种后1、3、... 目的 探讨生物玻璃复合P-15多肽对兔颅骨缺损的修复能力。方法 将骨髓基质细胞与复合不同质量浓度P-15多肽(100、200、400μg/mL)的生物玻璃(复合材料)进行体外培养(实验组),并以未复合P-15的生物玻璃作为阴性对照组;接种后1、3、7、10 d检测骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性,筛选出多肽质量浓度最适宜的复合材料植入兔颅骨缺损内(复合材料组),植入后4、6、8周通过软X射线和组织学染色观察新骨形成情况。结果 P-15多肽质量浓度为200μg/mL时与生物玻璃共培养的骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性明显高于质量浓度为100、400μg/mL的实验组及阴性对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);4、6、8周时复合材料组兔颅骨缺损内新骨形成均优于同时间点阴性对照组。结论 生物玻璃复合P-15多肽可促进兔颅骨缺损的修复。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 细胞 培养的 生物玻璃 生物相容性材料 肽类 颅骨/外科学 动物 实验
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骨髓细胞及血小板参数联合诊断血液疾病的价值分析 预览
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作者 廖美容 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第A01期145-147,共3页
目的 研究分析骨髓细胞联合血小板参数诊断血液疾病的价值。 方法 选取该院2015年9月到2017年9月期间收治的血液疾病患者共110例,按照疾病种类分为AL(急性白血病)组、AA(再生障碍性贫血)组、ITP(特发性血小板减少性紫癜)组,... 目的 研究分析骨髓细胞联合血小板参数诊断血液疾病的价值。 方法 选取该院2015年9月到2017年9月期间收治的血液疾病患者共110例,按照疾病种类分为AL(急性白血病)组、AA(再生障碍性贫血)组、ITP(特发性血小板减少性紫癜)组,同时在我院同期健康体检人群中选取66例作为正常组,对比患病组和正常组的骨髓涂片检查结果,并对比各组患者与正常组之间的血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)和血小板体积分布宽度(PDW)等指标。 结果 血小板参数对比中,PCT比较三组患病组之间无差异不具有统计学意义( P 〉0.05),但三组PCT指标均显著低于正常组( P 〈0.05);PLT对比三组患病组之间无显著差异( P 〉0.05),但三组PLT指标与正常组对比均显著降低( P 〈0.05);三组患病组MPV指标与正常组对比仅有ITP组有显著差异( P 〈0.05);PDW指标对比AA组和ITP组与正常组差异显著( P 〈0.05),但AL组与之差异不显著( P 〉0.05)。观察四组受试者骨髓涂片,AL组巨核细胞数0~34个,多为幼稚型和颗粒型,血小板少,骨髓增生明显较为活跃;AA组巨核细胞数0~2个,多为幼稚型,血小板少,骨髓增生减少;ITP组巨核细胞数7~128个,多为幼稚型,血小板少,增生明显;正常组巨核细胞10~42个,多为成熟产板型,血小板成堆分布,增生正常活跃。 结论 骨髓细胞联合血小板参数检测有利于血液疾病的检出,能够通过血小板参数值和骨髓涂片情况判断是否有患血液疾病的可能以及疾病种类,对丰富临床诊断经验具有重要作用。 展开更多
关键词 骨髓细胞 血小板参数 联合诊断 血液疾病
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复方树莓籽粉对辐照小鼠骨髓细胞的防护作用 预览
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作者 喻培勋 苑伟 孟庆兰 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2018年第2期15-21,共7页
探讨复方树莓籽粉水溶液对急性放射性损伤小鼠骨髓细胞的影响及防护作用。建立小鼠急性放射性损伤模型,设立空白对照组、模型对照组及不同浓度复方树莓籽粉溶液处理组(低、中、高剂量组),观察辐照后各组小鼠骨髓细胞有核细胞数、微核... 探讨复方树莓籽粉水溶液对急性放射性损伤小鼠骨髓细胞的影响及防护作用。建立小鼠急性放射性损伤模型,设立空白对照组、模型对照组及不同浓度复方树莓籽粉溶液处理组(低、中、高剂量组),观察辐照后各组小鼠骨髓细胞有核细胞数、微核率、细胞周期及线粒体膜电位的变化情况。实验结果表明,与空白对照组比较,模型对照组变化均非常显著(p〈0.01)。与模型对照组比较,复方树莓籽粉中、高剂量组有核细胞数分别升高78.2%(p〈0.01)、116.9%(p〈0.01);高剂量组微核率减少27.3%(p〈0.01);中剂量组细胞周期G1期、S期,高剂量组S期细胞比例升高(p〈0.05),高剂量组G1期细胞比例显著升高(p〈0.01);中、高剂量组骨髓细胞线粒体膜电位显著升高(p〈0.01)。实验结果提示,复方树莓籽粉能升高骨髓细胞数,降低骨髓细胞微核率,升高骨髓细胞线粒体膜电位,减少骨髓细胞周期阻滞,抑制辐射损伤骨髓细胞的细胞凋亡,可能对辐照导致的骨髓细胞损伤有防护作用。 展开更多
关键词 急性放射性损伤 复方树莓籽粉 骨髓细胞 损伤 凋亡 辐射防护
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慢性高原病患者骨髓单个核细胞血管内皮生长因子及其受体的表达
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作者 苏娟 李占全 +7 位作者 崔森 冀林华 柴克霞 耿惠 马晓静 杨应忠 白振忠 格日力 《中华医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第14期1088-1092,共5页
目的探讨慢性高原病(CMS)患者骨髓单个核细胞(MNC)中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达情况以及相互影响。方法流式细胞术及实时定量PCR法分别检测34例CMS患者及30名对照者骨髓MNCVEGF及血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)和VEGFR... 目的探讨慢性高原病(CMS)患者骨髓单个核细胞(MNC)中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达情况以及相互影响。方法流式细胞术及实时定量PCR法分别检测34例CMS患者及30名对照者骨髓MNCVEGF及血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)和VEGFR2蛋白及mRNA水平并进行比较,分析VEGF/VEGFR与各项实验室指标的相关性。结果流式细胞测定CMS骨髓MNC VEGFR2表达水平高于对照组[20.7%(8.1%,67.6%)比8.1%(2.2%,14.9%),P〈0,05];两组骨髓MNC中VEGF及VEGFR1表达差异均无统计学意义(均P〉0.05)。CMS骨髓MNC VEGFR2 mRNA表达水平高于对照组[1.7(1.0,5.1)比1.0(0.4,2.7),P〈0.05],两组骨髓MNC中VEGF及VEGFR1表达差异均无统计学意义(均P〉0.05)。CMS患者骨髓MNC中VEGFR2阳性细胞数与血红蛋白含量、VEGF阳性细胞数均正相关(r=0.453,r=0.373,均P〈0.05)。结论骨髓MNC VEGFR2表达异常增高,可能促进VEGF信号传导通路,参与CMS的发生发展。 展开更多
关键词 慢性 高原病 血管内皮生长因子 受体 骨髓细胞
Septin-9在ALL病儿骨髓组织中的表达及意义 预览
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作者 汪玉芳 柯善栋 郑芳 《精准医学杂志》 2018年第6期499-504,共6页
目的 探讨Septin-9在急性淋巴细胞白血病(ALL)病儿骨髓组织中的表达及对人Jurkat细胞生物学功能的影响。方法 选取2014年2月—2017年8月在我院门诊就诊或住院治疗的ALL病儿94例,其中初诊病儿63例,缓解病儿20例,复发病儿11例。选取同期... 目的 探讨Septin-9在急性淋巴细胞白血病(ALL)病儿骨髓组织中的表达及对人Jurkat细胞生物学功能的影响。方法 选取2014年2月—2017年8月在我院门诊就诊或住院治疗的ALL病儿94例,其中初诊病儿63例,缓解病儿20例,复发病儿11例。选取同期行骨骼矫治手术的病儿16例作为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测骨髓单个核细胞中Septin-9mRNA的表达;培养人Jurkat细胞并分为Septin-9干扰组(C组)、阴性对照组(B组)和空白组(A组),采用Westernblot方法检测细胞中Septin-9蛋白表达;采用MTT法检测细胞增殖能力;采用流式细胞术检测细胞周期;采用划痕实验检测细胞迁移能力;采用Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果 初诊病儿骨髓单个核细胞中Septin-9mRNA相对表达量高于对照组,差异具有统计学意义(t=7.283,P<0.05);初诊病儿中,B-ALL和T-ALL病儿骨髓单个核细胞中Septin-9mRNA相对表达量差异无统计学意义(t=0.812,P>0.05);标危组、中危组和高危组病儿骨髓单个核细胞中Septin-9mRNA相对表达量比较差异均有统计学意义(F=108.770,P<0.05);初诊病儿、缓解病儿和复发病儿骨髓单个核细胞中Septin-9mRNA相对表达量比较差异均有统计学意义(F=51.456,P<0.05);C组细胞中Septin-9蛋白相对表达量及24、48、72和96h细胞吸光度值均低于B组和A组(F=7.349~62.232,P<0.05);C组G0/G1期细胞比例高于B组和A组,而S期细胞比例低于B组和A组(F=7.887、8.148,P<0.05);C组24和48h划痕愈合率以及侵袭细胞数均低于B组和A组(F=42.444~97.442,P<0.05)。结论 Septin-9在ALL病儿骨髓单个核细胞中呈高表达,特异性抑制人Jurkat细胞中Septin-9mRNA表达,可抑制细胞迁移和侵袭能力,可能通过改变细胞周期而抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 前体细胞淋巴母细胞白血病淋巴瘤 SEPT9蛋白 骨髓细胞 细胞增殖 细胞运动
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成人免疫性血小板减少症骨髓巨核细胞数变化与疗效的关系 被引量:1
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作者 许杰 《医学临床研究》 CAS 2018年第3期486-488,共3页
【目的】探讨成人免疫性血小板减少症(ITP)患者骨髓巨核细胞数变化与疗效的关系。【方法】本院收治的成人ITP患者140例,在治疗前均行骨髓巨核细胞涂片检查,将巨核细胞数〈7个/4.5cm^2的归为Ⅰ组,巨核细胞数为7~35个/cm。的归... 【目的】探讨成人免疫性血小板减少症(ITP)患者骨髓巨核细胞数变化与疗效的关系。【方法】本院收治的成人ITP患者140例,在治疗前均行骨髓巨核细胞涂片检查,将巨核细胞数〈7个/4.5cm^2的归为Ⅰ组,巨核细胞数为7~35个/cm。的归为Ⅱ组,巨核细胞数〉35个/cm^2的归为Ⅲ组,三组患者均采用相同的方案进行治疗,比较三组患者的疗效。【结果】Ⅰ组总有效率为25.O。%(4/16),Ⅱ组为76.47%(26/34),Ⅲ组为93.33%(84/90),Ⅲ组总有效率明显高于Ⅱ组和Ⅰ组,Ⅱ组明显高于Ⅰ组,且各组之间比较差异均有显著性(P〈0.01)。【结论】成人ITP患者的骨髓巨核细胞数变化对治疗效果有很大的影响,骨髓巨核细胞数增值有利于提高疗效。 展开更多
关键词 免疫系统疾病 血小板减少/治疗 骨髓细胞 巨核细胞
浆母细胞样树突细胞白血病的骨髓细胞形态学及临床分析 被引量:5
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作者 蒋显勇 裴强 +3 位作者 汪玄 葛昌文 李剑 周道斌 《中华检验医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期242-246,共5页
目的探讨浆母细胞样树突细胞白血病(BPDCN)患者骨髓细胞形态学的诊断价值。方法收集北京协和医院2011至2016年确诊的5例BPDCN白血病患者的临床资料。收集患者骨髓涂片标本,在油镜下观察肿瘤细胞的胞体、胞核、染色质,胞浆等方面的... 目的探讨浆母细胞样树突细胞白血病(BPDCN)患者骨髓细胞形态学的诊断价值。方法收集北京协和医院2011至2016年确诊的5例BPDCN白血病患者的临床资料。收集患者骨髓涂片标本,在油镜下观察肿瘤细胞的胞体、胞核、染色质,胞浆等方面的形态学特点。结果5例(100%)BPDCN白血病患者均有皮肤受累,淋巴结肿大4例(80%),肝大3例(60%),脾大4例(80%);免疫表型提示CD4,CD56,CD123均阳性;典型BPDCN细胞具有明显的异质性,中等大小,核圆形或不规则形,染色质丝网状,胞浆灰蓝色,呈不均匀弱嗜碱性,浆内无颗粒,可具有特征性的伪足突出及沿胞膜下呈珍珠项链样排列的空泡,BPDCN细胞可类似3种形态,原始单核细胞样、原幼淋巴细胞样及淋巴瘤细胞样。结论浆母细胞样树突细胞有特征的形态学表现,若患者有皮肤损害,可高度提示BPDCN白血病的诊断,确诊仍需流式细胞学检查及病理活检。 展开更多
关键词 树突细胞 血液肿瘤 骨髓细胞 流式细胞术 骨髓检查
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