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小分子化合物诱导细胞重编程研究进展 预览
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作者 顾珊 赵高平 李喜和 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2018年第1期79-83,共5页
细胞重编程指细胞内的基因表达由一种类型转变为另一种类型,通常包含两层含义:一是分化的细胞重新恢复到多能性或全能性状态;二是从一种分化的细胞转变为另一种分化的细胞。细胞重编程可为临床患者特异性细胞治疗提供无限的细胞资源。... 细胞重编程指细胞内的基因表达由一种类型转变为另一种类型,通常包含两层含义:一是分化的细胞重新恢复到多能性或全能性状态;二是从一种分化的细胞转变为另一种分化的细胞。细胞重编程可为临床患者特异性细胞治疗提供无限的细胞资源。细胞重编程的途径有细胞核移植、转染特定转录因子、小分子化合物诱导等方法。核移植技术由于通常需要使用到卵子,而被认为存在伦理问题;转录因子的导入存在引起宿主基因突变的问题,限制了这一技术的临床应用。然而小分子化合物容易合成、细胞渗透性好,并且生物效应具有可塑性,使用小分子化合物诱导细胞重编程,避免了核移植的伦理问题和基因操作潜在的危害。目前,使用小分子化合物从体细胞诱导获得更安全的i PSCs(induced pluripotent stem cells),ci CMs(chemically induced functional cardiomyocyte cells)和ci NSLCs(chemical-induced neural stem cell-like cells)。对小分子化合物诱导细胞重编程,包括小分子化合物诱导多能干细胞;小分子化合物诱导潜能扩展的多能干细胞,以及小分子化合物诱导细胞转分化等方面的研究做了总结,并对小分子化合物诱导的未来发展做了展望,旨在为今后这方面的研究提供借鉴。 展开更多
关键词 细胞重编程 细胞转分化 小分子化合物
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成纤维细胞向运动神经元的分化研究进展 预览
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作者 施玉婷 李峰 《中国比较医学杂志》 北大核心 2018年第9期110-114,125共6页
脊髓性肌萎缩症、肌萎缩性侧索硬化症等运动神经元损伤性疾病,目前尚无有效的治疗手段。随着多能诱导干细胞的出现和细胞重编程技术的发展,将患者来源的成熟体细胞体外分化得到运动神经元进行自体移植成为一种充满希望的治疗途径。此外... 脊髓性肌萎缩症、肌萎缩性侧索硬化症等运动神经元损伤性疾病,目前尚无有效的治疗手段。随着多能诱导干细胞的出现和细胞重编程技术的发展,将患者来源的成熟体细胞体外分化得到运动神经元进行自体移植成为一种充满希望的治疗途径。此外,分化得到的运动神经元还可作为细胞模型,用于疾病的机制研究和药物筛选。目前由成纤维细胞体外分化得到运动神经元的实验研究较多,就经多能诱导干细胞或神经干细胞中间状态及直接转化这三类方法进行综述。 展开更多
关键词 运动神经元 成纤维细胞 分化 细胞重编程 多能诱导干细胞
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肿瘤坏死因子-α对外周血单个核细胞重编程获得的神经干细胞增殖、分化的影响
3
作者 唐玺和 梁有明 +3 位作者 黄锐 秦国文 蓝胜勇 范益民 《神经疾病与精神卫生》 2018年第8期568-570,F0003共4页
目的 观察肿瘤坏死因子(TNF)-α对人外周血细胞重编程获得的神经干细胞(iNSCs)在体外增殖、分化的影响.方法 将人外周血单个核细胞重编程获得神经干细胞,使用免疫组化技术,观察TNF-α对其增殖以及向神经元及少突胶质细胞方向分化的... 目的 观察肿瘤坏死因子(TNF)-α对人外周血细胞重编程获得的神经干细胞(iNSCs)在体外增殖、分化的影响.方法 将人外周血单个核细胞重编程获得神经干细胞,使用免疫组化技术,观察TNF-α对其增殖以及向神经元及少突胶质细胞方向分化的作用.结果 低剂量TNF-α可以促进iNSCs的增殖,并促进其向神经元及少突胶质细胞方向分化.高剂量TNF-α可以导致其凋亡.结论 不同剂量的TNF-α对人iNSCs作用不同,这对于人iNSCs的应用有重要意义. 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-Α 神经干细胞 体细胞重编程 增殖 分化
Myocardin重组蛋白表达及其在人骨髓间充质干细胞重编程为血管平滑肌细胞中的作用 预览
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作者 麦丽萍 杨翔宇 +3 位作者 吴岳恒 余细勇 何国东 李晓红 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期1409-1414,共6页
目的:研究心肌素(myocardin)重组蛋白的表达及分离纯化方法,并探讨myocardin重组蛋白对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs)向血管平滑肌细胞转分化的作用。方法:构建myocardin原核表达载体,... 目的:研究心肌素(myocardin)重组蛋白的表达及分离纯化方法,并探讨myocardin重组蛋白对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs)向血管平滑肌细胞转分化的作用。方法:构建myocardin原核表达载体,摸索最佳诱导myocardin重组蛋白表达的方法及优化分离纯化方式。使用纳米转导试剂包裹myocardin形成纳米-蛋白复合体,转染h BMSCs,观察蛋白转导效率;蛋白转导成功后,检测血管平滑肌的特异性标志物平滑肌肌球蛋白重链的表达情况,观察h BMSCs向平滑肌细胞转化情况。结果:与传统方法相比较,高浓度法诱导myocardin重组蛋白的表达量更高,新采用的洗脱方式能获取更多的myocardin重组蛋白;纳米-myocardin复合体可成功转染h BMSCs并诱导其向血管平滑肌样细胞转化。结论:Myocardin重组蛋白能被高效转导到细胞内,并促使h BMSCs重编程为血管平滑肌样细胞。 展开更多
关键词 心肌素 重组蛋白 平滑肌肌球蛋白重链 骨髓间充质干细胞 细胞重编程
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卵子介导细胞重编程的基础与应用研究
5
作者 李庆 徐求文 李劲松 《生命科学》 CSCD 2017年第10期983-991,共9页
细胞重编程一般是指将分化细胞转变成全能性胚胎或多能性细胞的过程,是研究发育和分化的重要手段,为再生医学、疾病个体化治疗及药物筛选等提供了巨大的应用前景。诱导细胞重编程的方法有多种,如细胞培养、卵子介导的核移植(nuclear tr... 细胞重编程一般是指将分化细胞转变成全能性胚胎或多能性细胞的过程,是研究发育和分化的重要手段,为再生医学、疾病个体化治疗及药物筛选等提供了巨大的应用前景。诱导细胞重编程的方法有多种,如细胞培养、卵子介导的核移植(nuclear transfer)、细胞融合、山中伸弥因子介导的诱导多能干细胞(i PSC)技术等。以国家自然科学基金重大研究计划为依托,李劲松课题组围绕着卵子介导的细胞重编程领域开展了系统的研究,取得了一系列突破性的进展:完善了卵子介导的核移植体系;建立精子和卵子来源的"类精子"的单倍体胚胎干细胞系和半克隆技术;建立人和猴子的孤雌单倍体胚胎干细胞系;卵子介导的重编程与i PSC技术比较揭示影响重编程的重要因子;建立卵子介导遗传疾病治疗的策略。现主要对卵子介导细胞重编程的基础与应用研究的原创性实验成果进行综述,并展望未来关注的重点研究方向。 展开更多
关键词 卵子 细胞重编程 核移植 单倍体胚胎干细胞 半克隆技术
人外周血单个核细胞体外重编程为少突胶质前体细胞研究 预览
6
作者 唐玺和 李默 +4 位作者 王淑艳 李鹏燕 张愚 陈志国 陈惠 《首都医科大学学报》 北大核心 2017年第4期553-558,共6页
目的利用非整合质粒载体在体外将成人外周血中单个核细胞重编程为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)。方法经外周静脉采集志愿者血液5 m L,利用Ficoll-Paquem密度梯度离心法获得单个核细胞,体外扩增培养后,电... 目的利用非整合质粒载体在体外将成人外周血中单个核细胞重编程为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs)。方法经外周静脉采集志愿者血液5 m L,利用Ficoll-Paquem密度梯度离心法获得单个核细胞,体外扩增培养后,电转染携带外源基因(OCT4,SOX2,KLF4,C-myc,LIN28,Nanog)的质粒,然后在加有化学小分子的特定培养基中分三步培养。结果转染后30 d左右,可以获得血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-α,PDGFR-α)阳性的早期少突胶质前体细胞(Pre-OPC),该细胞能传20代以上,继续分化30 d左右可以获得表达O4的少突胶质前体细胞。结论利用非整合质粒载体携带外源基因可以将成人外周血单个核细胞在较短期时间内重编程为具有增生能力的早期少突胶质前体细胞,且能继续分化为少突胶质前体细胞。 展开更多
关键词 外周血单个核细胞 重编程 少突胶质前体细胞
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Cocktail of chemical compounds robustly promoting cell reprogramming protects liver against acute injury
7
作者 Yuewen Tang Lin Cheng 《蛋白质与细胞:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期273-283,共11页
织物损坏导致房间进像改编的细胞的状态,它贡献织物新生。不管多么,支持房间 reprogramming 的因素是否赞成织物新生,留下逃犯。这里,我们识别了小化学药品的联合要用体力地在 vitro 房间 reprogramming 支持的混合物包括药鸡尾酒... 织物损坏导致房间进像改编的细胞的状态,它贡献织物新生。不管多么,支持房间 reprogramming 的因素是否赞成织物新生,留下逃犯。这里,我们识别了小化学药品的联合要用体力地在 vitro 房间 reprogramming 支持的混合物包括药鸡尾酒。我们然后管理了药鸡尾酒到老鼠,尖锐的肝损害由部分 hepatectomy 或有毒的处理导致了。我们的结果证明在 vitro 支持了房间 reprogramming 的药鸡尾酒改进了肝在在尖锐损害以后的 vivo 的新生和肝的功能。内在的机制能是 pluripotent 基因的表示激活在损害是由药鸡尾酒的进一步的 upregulated 以后。因此,我们的学习提供改进房间 reprogramming 的临床的混合物的鸡尾酒在尖锐损坏以后赞成织物恢复的 proof-of-concept 证据,它是为再生目的吸引人的策略。 展开更多
关键词 急性肝损伤 细胞状态 重新编程 组织损伤 化合物 肝脏 保护 组织再生
提高细胞重编程效率和安全性的策略
8
作者 虞欣璐 张红霞 +2 位作者 王辰 于斌 朱海英 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第11期1391-1397,共7页
细胞重编程是指分化的细胞在特定条件下经过去分化恢复到全能性或多能性状态, 或者通过转分化将一种类型的体细胞转变成另外一种类型的细胞的过程。利用重编程技术获得的诱导型多能干细胞, 谱系重编程技术获得的组织干细胞或组织细胞, ... 细胞重编程是指分化的细胞在特定条件下经过去分化恢复到全能性或多能性状态, 或者通过转分化将一种类型的体细胞转变成另外一种类型的细胞的过程。利用重编程技术获得的诱导型多能干细胞, 谱系重编程技术获得的组织干细胞或组织细胞, 具有患者特异性或者疾病特异性, 可以显著减少免疫反应, 同时也解决了临床细胞治疗的种子细胞来源问题, 具有极大的临床应用价值。但是, 另一方面, 重编程效率低下和安全性问题却一直是其临床应用的瓶颈。近年来, 人们围绕如何优化重编程方法进行了深入的研究, 特别是对细胞重编程过程所涉及到的分子机制, 包括表观遗传调控机制和上皮间质转化机制在这个过程中的作用有了更深入的认识。此外, 采用非整合型载体和利用化学诱导方法替代转录因子的方式也提高了重编程的安全性。该文将就这一领域的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 细胞重编程 诱导型多能干细胞 谱系重编程 化学诱导 表观遗传调控
体细胞重编程中miRNA的鉴定及功能研究 预览
9
作者 程红 《科技资讯》 2016年第21期174-175,共2页
该研究针对非编码RNA研究中的核心科学问题,研究体细胞重编程微RNA功能及调控网络。研究的5年预期目标是:利用分子生物学、细胞生物学、生物化学和信息生物学手段,完成重编程和体细胞重编程和多能性细胞分化多个阶段的微RNA的表达谱... 该研究针对非编码RNA研究中的核心科学问题,研究体细胞重编程微RNA功能及调控网络。研究的5年预期目标是:利用分子生物学、细胞生物学、生物化学和信息生物学手段,完成重编程和体细胞重编程和多能性细胞分化多个阶段的微RNA的表达谱,鉴定出在以上多个阶段表达变化显著的微RNA。找到影响重编程或多能干细胞分化过程的几种微RNA及鉴定其靶基因,并揭示这些基因在上述过程的作用。鉴定到在转录后加工水平和核质转运过程受调控的微RNA,阐明这些特定微RNA的作用机理,揭示其核质转运变化与重编程和多能性细胞分化之间的关联,阐明其分子机制。阐明上述相关微RNA在胚胎发育、细胞分化和重编程过程中的作用及其自身生物合成规律,并揭示其在器官发育中的作用。近3年,已建立体细胞重编程和多能性细胞分化及体细胞转分化的研究系统。采用核移植技术,建立了可用于研究体细胞重编程中miRNA功能的新系统——来自孤雄囊胚的单倍体胚胎干细胞系。已经建立了研究miRNA核质转运和转录后加工调控的研究体系。制作了miRNA敲除小鼠。系统鉴定了体细胞重编程过程中差异表达的miRNA。系统鉴定了体细胞向肝细胞转分化过程中显著差异表达的miRNA。发现了RNA结合蛋白在转录后加工水平调控的特定miRNA的表达。发现在哺乳动物细胞核内存在一种读码机制,可能参与调控非编码RNA的核质转运。揭示了miR-126在小鼠胚胎血管新生和血管完整性维持中的作用,探究了其发挥作用的分子机制。 展开更多
关键词 非编码RNA 细胞重编程 干细胞分化 微RNA 核质转运
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基于分层网络和反馈机制的细胞重编程 预览
10
作者 刘仕进 刘艳伟 王瑞琦 《上海大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期552-559,共8页
在多潜能细胞分化并最终形成相应的谱系结构的过程中,多潜能细胞可能发生重编程.主要研究细胞分化过程中由双重负反馈回路的层级网络如何产生细胞重编程.通过建立数学模型对整个系统的分叉进行分析,揭示分层网络以及反馈机制产生细胞重... 在多潜能细胞分化并最终形成相应的谱系结构的过程中,多潜能细胞可能发生重编程.主要研究细胞分化过程中由双重负反馈回路的层级网络如何产生细胞重编程.通过建立数学模型对整个系统的分叉进行分析,揭示分层网络以及反馈机制产生细胞重编程的机理. 展开更多
关键词 细胞重编程 分层网络 反馈调控 分叉分析
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Methods of induced pluripotent stem cells for clinicalapplication 预览
11
作者 Tomohisa Seki Keiichi Fukuda 《世界干细胞杂志:英文版(电子版)》 2015年第1期116-125,共10页
Reprograming somatic cells using exogenetic geneexpression represents a groundbreaking step inregenerative medicine. Induced pluripotent stem cells(iPSCs) are expected to yield novel therapies withthe potential to s... Reprograming somatic cells using exogenetic geneexpression represents a groundbreaking step inregenerative medicine. Induced pluripotent stem cells(iPSCs) are expected to yield novel therapies withthe potential to solve many issues involving incurablediseases. In particular, applying iPSCs clinically holds thepromise of addressing the problems of immune rejectionand ethics that have hampered the clinical applicationsof embryonic stem cells. However, as iPSC research hasprogressed, new problems have emerged that need tobe solved before the routine clinical application of iPSCscan become established. In this review, we discuss thecurrent technologies and future problems of human iPSCgeneration methods for clinical use. 展开更多
关键词 INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS CELL REPROGRAMMING
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Making cardiomyocytes with your chemistry set:Small molecule-induced cardiogenesis in somatic cells 预览
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作者 Woong-Hee Kim Da-Woon Jung Darren Reece Williams 《世界心脏病学杂志:英文版(电子版)》 2015年第3期125-133,共9页
Cell transplantation is an attractive potential therapy for heart diseases. For example, myocardial infarction(MI) is a leading cause of mortality in many countries. Numerous medical interventions have been developed ... Cell transplantation is an attractive potential therapy for heart diseases. For example, myocardial infarction(MI) is a leading cause of mortality in many countries. Numerous medical interventions have been developed to stabilize patients with MI and, although this has increased survival rates, there is currently no clinically approved method to reverse the loss of cardiac muscle cells(cardiomyocytes) that accompanies this disease. Cell transplantation has been proposed as a method to replace cardiomyocytes, but a safe and reliable source of cardiogenic cells is required. An ideal source would be the patients’ own somatic tissue cells, which could be converted into cardiogenic cells and transplanted into the site of MI. However, these are difficult to produce in large quantities and standardized protocols to produce cardiac cells would be advantageous for the research community. To achieve these research goals, small molecules represent attractive tools to control cell behavior. In this editorial, we introduce the use of small molecules in stem cell research and summarize their application to the induction of cardiogenesis in noncardiac cells. Exciting new developments in this field are discussed, which we hope will encourage cardiac stem cell biologists to further consider employing small molecules in their culture protocols. 展开更多
关键词 CARDIOGENESIS Cell REPROGRAMMING SOMATIC cells Small MOLECULES CARDIOVASCULAR disease
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Studying Multiscale Probabilistic and Deterministic Models for the Annotation of Cellular Networks and Tumor Metastases 预览
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作者 Wilfried Allaerts 《美中医学》 2015年第1期1-11,共11页
关键词 肿瘤转移 蜂窝网络 确定性模型 多尺度研究 概率 表皮生长因子受体 非小细胞肺癌 多尺度模型
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GATA转录因子家族在细胞命运调控中的作用 被引量:1
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作者 张珂 邓宏魁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1018-1028,共11页
在胚胎发育过程中,组织器官的形成依赖于干细胞在空间与时间上正确的定向分化、增殖,以及中间细胞的凋亡.这一细胞命运决定的过程必须被严格精确地调控,从而保证胚胎发育过程中组织器官形成得以顺利地进行.在此过程中,GATA转录因子家族... 在胚胎发育过程中,组织器官的形成依赖于干细胞在空间与时间上正确的定向分化、增殖,以及中间细胞的凋亡.这一细胞命运决定的过程必须被严格精确地调控,从而保证胚胎发育过程中组织器官形成得以顺利地进行.在此过程中,GATA转录因子家族扮演了不可或缺的角色,它们在胚层分化、造血系统和心脏形成、胸腺和肠道发育以及肿瘤发生中都起到了重要的作用.本文结合目前对GATA转录因子家族的研究和本课题组实验结果,介绍其在干细胞分化和维持,以及它们在细胞重编程中所起的作用. 展开更多
关键词 胚胎发育 干细胞 GATA转录因子 细胞重编程
胰腺早期发育及终末分化细胞重编程为胰岛β细胞的研究进展 预览 被引量:3
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作者 曹明君 董焕生 +2 位作者 潘庆杰 王红军 董晓 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期511-518,共8页
1型糖尿病是一种由于自体免疫细胞破坏分泌胰岛素的β细胞而引起胰岛素绝对缺乏的自体免疫病。疾病患者需要依靠外源性途径来补给胰岛素,但胰岛素注射治疗不能根治病症,也不能有效地预防糖尿病并发症。多能性干细胞以及体细胞重编程... 1型糖尿病是一种由于自体免疫细胞破坏分泌胰岛素的β细胞而引起胰岛素绝对缺乏的自体免疫病。疾病患者需要依靠外源性途径来补给胰岛素,但胰岛素注射治疗不能根治病症,也不能有效地预防糖尿病并发症。多能性干细胞以及体细胞重编程产生胰岛素分泌细胞为根治1型糖尿病提供了可能。编程性的细胞能被用来进行移植治疗和药物筛选,为1型糖尿病的治疗带来了新的希望。当前,通过相关转录调节因子重编程终末分化细胞为胰岛β细胞已经取得了很大进展。文章对胰腺早期发育、胰腺相关转录调控因子及目前利用终末分化细胞重编程产生胰岛β细胞的研究内容进行了综述。 展开更多
关键词 糖尿病 胰岛Β细胞 胰腺相关转录因子 重编程
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重组慢病毒载体的构建及其感染人脐带间充质干细胞的研究 预览
16
作者 刘思征 赖秀蓝 +9 位作者 陈元国 贺谷雨 Martín Maldonado 林丽敏 谢丽春 吴卫照 黄天华 蔡志伟 刘必刚 马廉 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2014年第1期14-20,共7页
目的 利用包装制备的重组慢病毒载体感染人脐带间充质干细胞,为后续的细胞重编程奠定基础.方法 利用组织块贴壁法分离、培养、扩增出人脐带间充质干细胞(HUMSC).携带目的基因(oct4、sox2、klf4、c-myc)及绿色荧光蛋白的质粒经验证... 目的 利用包装制备的重组慢病毒载体感染人脐带间充质干细胞,为后续的细胞重编程奠定基础.方法 利用组织块贴壁法分离、培养、扩增出人脐带间充质干细胞(HUMSC).携带目的基因(oct4、sox2、klf4、c-myc)及绿色荧光蛋白的质粒经验证、扩增后,转染HEK-293T细胞,制备携带上述基因的慢病毒上清液.荧光显微镜下梯度稀释法检测病毒滴度.慢病毒液感染3~5代生长良好的HUMSC,荧光显微镜及流式细胞术检测病毒感染力,RT-PCR及定量PCR检测目的基因mRNA水平.结果 成功验证、扩增携带目的基因的质粒.制备的新鲜病毒液滴度达5×108U/mL,冻存后降为5×106 U/ml.重组慢病毒感染HUMSC的感染力高于80%,4种目的基因的表达均明显高于对照.结论 重组慢病毒载体可以在体外高效的转染HUMSC,并稳定表达目的基因,是HUMSC重编程的有效基因转移载体. 展开更多
关键词 重组慢病毒载体 基因转染 人脐带间充质干细胞 绿色荧光蛋白 浓度梯度稀释法 细胞重编程
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重大研究计划“细胞编程和重编程的表观遗传机制”中期进展概述 被引量:1
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作者 谷瑞升 贾文文 +1 位作者 田艳艳 杜生明 《中国基础科学》 2013年第5期43-49,共7页
2012年是国家自然科学基金重大研究计划“细胞编程和重编程的表观遗传机制”执行中期年,本文对该重大研究计划4年来总体进展,从研究成果、人才培养和学术影响力等方面进行了分析。依据指导专家组的顶层设计并结合前期研究进展和管理... 2012年是国家自然科学基金重大研究计划“细胞编程和重编程的表观遗传机制”执行中期年,本文对该重大研究计划4年来总体进展,从研究成果、人才培养和学术影响力等方面进行了分析。依据指导专家组的顶层设计并结合前期研究进展和管理实践,本着集成升华和跨越发展的思路,本文还介绍了未来项目集成和管理方式的初步设想。 展开更多
关键词 重大研究计划 细胞编程 细胞重编程表观遗传 中期进展
小鼠miR367逆转录病毒载体的构建与检测 预览 被引量:1
18
作者 张志人 安铁洙 +2 位作者 王子竹 朴善花 王春生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期49-53,共5页
为了探明小鼠体细胞重编程过程中miR367的作用机制,试验构建小鼠miR367逆转录病毒载体。根据NCBI上小鼠miR367的相关序列,从小鼠基因组中扩增miR367并将其连接到pMD18-T载体,然后对重组质粒进行双酶切并回收目的片段。将目的片段与pMXs... 为了探明小鼠体细胞重编程过程中miR367的作用机制,试验构建小鼠miR367逆转录病毒载体。根据NCBI上小鼠miR367的相关序列,从小鼠基因组中扩增miR367并将其连接到pMD18-T载体,然后对重组质粒进行双酶切并回收目的片段。将目的片段与pMXs逆转录病毒载体连接,然后依次经过酶切、PCR筛选阳性克隆和测序,最终构建逆转录病毒载体miR367-pMXs;采用磷酸钙法将miR367-pMXs转染plat-E细胞,以包装逆转录病毒颗粒;用逆转录病毒颗粒侵染小鼠胚胎成纤维细胞,在侵染后的第5天,提取被侵染细胞的总RNA,逆转录后获得cDNA,并采用Q-PCR方法检测侵染细胞中的miR367表达量。结果表明,被逆转录病毒侵染后,小鼠胚胎成纤维细胞中miR367的相对表达量比侵染前约提高了170倍。上述结果表明,成功构建小鼠miR367的逆转录病毒载体,为开展体细胞重编程机制的相关研究提供依据。 展开更多
关键词 细胞重编程 MICRORNA miR367 逆转录病毒载体
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细胞重编程改写细胞命运:细胞的返老还童——2012年诺贝尔生理学或医学奖简介 预览 被引量:3
19
作者 王昱凯 周琪 《自然杂志》 北大核心 2012年第6期327-331,共5页
科学家们对细胞重编程的研究已经持续了数十年。所谓细胞重编程是指“已分化的特定细胞可以被重新编程为多功能的干细胞”。1962年,约翰·戈登(JohnGurdon)在他的实验室里证明。已分化的动物体细胞在蛙卵中可以被重编程,从而具... 科学家们对细胞重编程的研究已经持续了数十年。所谓细胞重编程是指“已分化的特定细胞可以被重新编程为多功能的干细胞”。1962年,约翰·戈登(JohnGurdon)在他的实验室里证明。已分化的动物体细胞在蛙卵中可以被重编程,从而具有发育成完整个体的能力,证明了细胞的分化是可逆的。2006年,山中伸弥(ShinyaYamanaka)将戈登的这一成果推进了一大步,实现了细胞在体外的重编程,诱导出了具有多能性的细胞(即诱导性多能干细胞,in.ducedpluripotentstemcell,iPS细胞),证明了细胞命运是有选择性地打开或关闭某些基因的结果。与胚胎干细胞相比,iPS细胞的优势在于它避开了使用人体胚胎提取干细胞的伦理道德制约。使干细胞研究能被所有人接受。同时。由于这些细胞来自于病人自身,在临床应用时有希望避免免疫系统对外来组织的排斥。iPS技术的创立开创了一个全新的研究领域。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 诱导性多能干细胞 细胞重编程 诺贝尔生理学或医学奖
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干细胞用于皮肤组织再生及年轻化的研究进展 预览
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作者 常毅 杨松林 《组织工程与重建外科》 2012年第5期298-300,共3页
干细胞具有自我更新、自我复制的能力,有望运用于医学发展的各个领域,包括皮肤损伤的再生。年轻化作为皮肤组织再生的另一种形式.干细胞同样有可能在该领域发挥重要的作用。本文就干细胞用于皮肤组织再生及年轻化的研究进展进行综述。
关键词 干细胞 年轻化 皮肤 细胞重编程
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