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炎症上调NPC1加重高脂负荷下HMCs胆固醇积聚致细胞损伤机制
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作者 李倩倩 杨雪钧 +3 位作者 阳海平 陈压西 张高福 李秋 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第6期1067-1076,共10页
该研究观察炎症因子IL1-β对高脂负荷下人肾脏系膜细胞(human glomerular mesangial cells, HMCs)C型尼曼匹克蛋白1(Niemann-pick protein c1, NPC1)表达水平的影响,并初步探讨NPC1介导的胆固醇积聚致细胞损伤的作用机制。体外培养HMCs... 该研究观察炎症因子IL1-β对高脂负荷下人肾脏系膜细胞(human glomerular mesangial cells, HMCs)C型尼曼匹克蛋白1(Niemann-pick protein c1, NPC1)表达水平的影响,并初步探讨NPC1介导的胆固醇积聚致细胞损伤的作用机制。体外培养HMCs分为正常对照组、高脂组、高脂+炎症组。Western blot测NPC1蛋白含量;酶法测细胞及内质网胆固醇水平;CCK8法测细胞增殖;流式细胞术测细胞周期;荧光定量PCR测NPC1、GRP78、PERK、ATF6、FN、Col IV mRNA;免疫荧光技术测GRP78、FN的表达水平。予U-18666A干预NPC1的功能,观察内质网胆固醇水平、细胞增殖能力、GRP78、FN、Col IV mRNA水平的变化。结果显示,高脂促进NPC1蛋白及mRNA的表达水平,同时细胞总胆固醇及内质网胆固醇浓度增加,增殖加快、S期比例增加、内质网应激相关分子—GRP78、PERK、ATF6 mRNA及系膜基质成分—FN、Col IV mRNA水平均增加, GRP78、FN的荧光强度也增加;炎症进一步上调高脂负荷下上述各指标水平。U-18666A干预后可减轻高脂和炎症导致的内质网胆固醇积聚及细胞损伤。综上,炎症可通过上调NPC1的表达水平,加重高脂负荷下肾系膜细胞及内质网胆固醇积聚,诱发细胞损伤。 展开更多
关键词 NPC1 炎症 高脂 胆固醇沉积 内质网应激 系膜细胞
过表达ESCRT系统成员提升细胞应对U18666A诱发胆固醇积聚的能力
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作者 贾志娟 谭伟 +2 位作者 王亚茹 蔡莹 陈澄 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第5期883-891,共9页
U18666A是一种细胞通透性的两亲性氨基类固醇,能够抑制胆固醇的转运与多泡体的生成,导致细胞内胆固醇的积聚,造成细胞凋亡。该研究发现, U18666A处理MLE12细胞后转运必需的内体分选复合体(endosomal sorting complexes required for tra... U18666A是一种细胞通透性的两亲性氨基类固醇,能够抑制胆固醇的转运与多泡体的生成,导致细胞内胆固醇的积聚,造成细胞凋亡。该研究发现, U18666A处理MLE12细胞后转运必需的内体分选复合体(endosomal sorting complexes required for transport, ESCRT)系统相关蛋白表达降低。该实验构建了过表达ESCRT-III系统成员Vps24以及Chmp1b的转基因细胞系,发现与转空载体的细胞相比,转基因细胞对抗U18666A引发的胆固醇积聚以及后续生理效应的能力有所增强。以上结果提示U18666A可以干扰ESCRT系统的一部分功能诱发细胞内胆固醇积聚,为人类与胆固醇积聚相关疾病的防治提供了新的思路。 展开更多
关键词 U18666A ESCRT系统 胆固醇积聚
脂肪酸结合蛋白4诱导氧化低密度脂蛋白促进胆固醇在血管平滑肌细胞中沉积作用研究 预览
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作者 侯苗苗 李桂忠 《宁夏医科大学学报》 2018年第7期776-780,共5页
目的探讨转录因子FABP4在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)致血管平滑肌细胞(VSMCs)胆固醇沉积中的作用和机制。方法体外培养血管平滑肌细胞,分为4组:0μg·mL^-1 ox-LDL组、50μg·mL^-1 ox-LDL组、100μg·mL^-1ox-LDL组和5... 目的探讨转录因子FABP4在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)致血管平滑肌细胞(VSMCs)胆固醇沉积中的作用和机制。方法体外培养血管平滑肌细胞,分为4组:0μg·mL^-1 ox-LDL组、50μg·mL^-1 ox-LDL组、100μg·mL^-1ox-LDL组和50μg·mL^-1 ox-LDL+脂肪酸结合蛋白4(FABP4)过表达病毒组(成功感染FABP4过表达病毒至平滑肌细胞细胞后,再给予50μg·mL^-1 ox-LDL刺激)。各组ox-LDL刺激细胞时间为48h。刺激培养结束后收集各组细胞,用油红O染色验证脂质沉积模型复制是否成功,过氧化物酶法检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量的变化,qRT-PCR检测平滑肌细胞中FABP4 mRNA的表达,Western blot检测平滑肌细胞中FABP4蛋白的表达情况。结果 ox-LDL刺激细胞48h后,油红O染色显示平滑肌细胞质内充满了大量红染脂质颗粒,胞核呈蓝色,且50μg·mL^-1 ox-LDL处理后细胞内TG、TC含量升高(P〈0.05);qRT-PCR和Western blot结果显示,50μg·mL^-1ox-LDL干预平滑肌细胞后FABP4 mRNA与蛋白表达水平均上调(P〈0.01)。转染FABP4过表达病毒至平滑肌细胞后,可见细胞中FABP4的表达水平升高(P〈0.01),油红O染色显示平滑肌细胞质内红染脂质颗粒较单纯给予50μg·mL^-1 ox-LDL组增多,细胞内TG、TC含量也升高(P〈0.05)。结论 FABP4表达水平上调可能是ox-LDL致平滑肌细胞胆固醇沉积的机制之一。 展开更多
关键词 脂肪酸结合蛋白4 氧化低密度脂蛋白 血管平滑肌细胞 胆固醇沉积
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氧化性低密度脂蛋白诱导浓度和时间对肝癌HepG2细胞胆固醇积累的影响
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作者 李玉平 齐建彤 +6 位作者 郑曙光 林昶 朱璨 柴艺汇 徐昌君 王和生 杨长福 《中国热带医学》 CAS 2018年第2期111-115,共5页
目的探讨氧化性低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)促进肝癌HepG2细胞中胆固醇蓄积的最适浓度和最适作用时间。方法将肝癌Hep G2细胞接种于含10%的胎牛血清和1%双抗(青霉素、链霉素)的高糖DMEM培养基中,置于5%... 目的探讨氧化性低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)促进肝癌HepG2细胞中胆固醇蓄积的最适浓度和最适作用时间。方法将肝癌Hep G2细胞接种于含10%的胎牛血清和1%双抗(青霉素、链霉素)的高糖DMEM培养基中,置于5%浓度的CO_2培养箱中培养,每3天进行一次细胞传代,取对数增长期的细胞用于实验研究。实验分为5组,空白对照组和ox-LDL组(75 mg/L、50 mg/L、25 mg/L、12.5 mg/L)。每组9个样,分3个小组,每个小组3个样,3个小组分别培养24 h、48 h和72 h后测定细胞内胆固醇的积累并用油红O染色法定性观察。应用统计学软件SPSS Statistics 17.0进行t检验分析,数据以均数±标准差表示,对胆固醇定量检测结果进行统计分析,当P〈0.05时认为差异具有统计学意义。结果与空白对照组比较,经过ox-LDL不同浓度和不同时间诱导后,总胆固醇含量(totalcholesterol,TC)、游离胆固醇含量(free cholesterol,FC)及胆固醇酯与总胆固醇比值(the ratio of cholesterol ester and totalcholesterol,CE/TC)均有一定程度的升高。尤以50 mg/Lox-LDL诱导48 h时[空白对照组:TC(98.21±2.85)mmol/L、FC(56.25±0.55)mmol/L、CE/TC 42.64±1.50;ox-LDL组:TC(146.7±3.59)mmol/L、FC(79.9±0.55)mmol/L、CE/TC 49.9±3.49]变化最明显。与空白对照组比较,ox-LDL组胞浆内有不同程度红色脂滴存在,且发现ox-LDL 50 mg/L作用48 h时,因含有过多脂滴而形成了红色聚集的脂团,而未加ox-LDL的空白对照组细胞内无明显脂滴颗粒。结论 ox-LDL不同诱导浓度和不同诱导时间对肝癌HepG2细胞内胆固醇(TC、FC、CE/TC)积累都有促进作用,而ox-LDL对肝癌HepG2细胞内胆固醇积累的影响最适浓度和时间为50 mg/L诱导48 h。 展开更多
关键词 HEPG2细胞 氧化性低密度脂蛋白 胆固醇积累 动脉粥样硬化
仙人掌多糖对THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇蓄积及其相关基因表达的影响 预览
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作者 李恒 罗齐军 +1 位作者 卢向阳 曾富华 《湖南农业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期135-139,共5页
采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后... 采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后胞内蓄积了大量脂质,高剂量(15nmol/L)ODP–Ia能够显著减少胞内脂质、胆固醇蓄积,并增强ABCA1、ABCG1、SR–BImRNA及蛋白表达(与单独ox–LDL处理组比较,P<0.05),但效果均次于阳性对照依折麦布组(P<0.05),低、中剂量(5、10nmol/L)ODP–Ia作用效果均不显著。本研究结果表明,ODP–Ia可通过增强ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达来减少胞内胆固醇蓄积。 展开更多
关键词 仙人掌多糖 THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇蓄积
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Dicer1/miR-29/HMGCR axis contributes to hepatic free cholesterol accumulation in mouse non- alcoholic steatohepatitis
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作者 Ming-xia LIU Man GAO +11 位作者 Chun-zhu LI Cun-zhi YU Hong YAN Chun PENG Yu LI Cheng-gang LI Ze-long MA Yang ZHAO Meng-fan PU Ling-ling MIAO Xin-ming QI Jin RENI 《中国药理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第5期660-671,共12页
Dicer1 是为 microRNA (miRNA ) 的酶必需品成熟。miRNAs 的损失源于 Dicer1 缺乏极大地贡献许多疾病的前进,包括在在非酒精的 steatohepatitis (NASH ) 的发展是批评的免费胆固醇(FC ) 的肝的累积的类脂化合物 dysregulation,而是它... Dicer1 是为 microRNA (miRNA ) 的酶必需品成熟。miRNAs 的损失源于 Dicer1 缺乏极大地贡献许多疾病的前进,包括在在非酒精的 steatohepatitis (NASH ) 的发展是批评的免费胆固醇(FC ) 的肝的累积的类脂化合物 dysregulation,而是它的角色遗体逃犯。在这研究,我们使用了肝特定的 Dicer1 大美人老鼠识别涉及肝的 FC 累积的 miRNAs。在一个广泛地使用的饮食的 NASH 模型,老鼠被喂 methionine-choline-deficient (MCD ) 节食 3 个星期,它在肝象 Dicer1 mRNA 层次的减少一样导致了肝的 FC 层次的重要增加。肝特定的 Dicer1 大美人在 5-6 星期导致了肝的 FC 累积,由增加的 mRNA 和 3-hydroxy-3-methylglutaryl 辅酶的蛋白质层次伴随了 reductase (HMGCR ) ,在肝的胆固醇合成的限制率的酶。十一预言 miRNAs 被屏蔽,表明 miR-29a/b/c 显著地压制了由指向 HMGCR mRNA 3-UTR 的 HMGCR 表示。在 SMMC-7721 房间的 miR-29a 的 Overexpression,脂肪变性肝的房间模型,显著地减少的 HMGCR 表示和 FC 铺平。而且, miR-29a 的表达式层次相反地与在 MCD 食谱鼠标的表达式层次在 vitro 在 vivo 并且在肝的房间建模的 2 脂肪变性(SMMC-7721 和 HL-7702 房间) 建模的 HMGCR 被相关。我们的结果证明那 Dicer1/miR-29/HMGCR 轴在老鼠 NASH 贡献肝的免费胆固醇累积,并且 miR-29 可以用作肝的胆固醇动态平衡的一个重要管理者。因此, miR-29a 能为非酒精的脂肪肝疾病的处理以及为与 FC 累积联系的另外的肝疾病作为一个潜在的治疗学的目标被利用。 展开更多
关键词 非酒精的 steatohepatitis 胆固醇累积 Dicer1 HMGCR microRNA-29 MCD 对待食谱的老鼠
过表达死亡结构相关蛋白加剧胆固醇β环糊精诱导的巨噬细胞凋亡
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作者 邱飞 崔淑华 +5 位作者 杨冬梅 文娟 李天平 张燕 熊国祚 庹勤慧 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期239-244,共6页
目的巨噬细胞凋亡在动脉粥样斑块的发展、病灶的坏死、斑块的不稳定以及急性血管事件中起着重要的作用,因此研究死亡结构相关蛋白(Daxx)对巨噬细胞凋亡的调控作用有利于揭示新的药物靶点,为动脉粥样硬化的发生与发展提供理论依据。方... 目的巨噬细胞凋亡在动脉粥样斑块的发展、病灶的坏死、斑块的不稳定以及急性血管事件中起着重要的作用,因此研究死亡结构相关蛋白(Daxx)对巨噬细胞凋亡的调控作用有利于揭示新的药物靶点,为动脉粥样硬化的发生与发展提供理论依据。方法应用脂质体2000将p CDNA3.1-Daxx、p CDNA3.1转入RAW264.7细胞中,G418(500 mg/L)筛选15天后,建立过表达Daxx稳定细胞株,RT-PCR和Western blot检测稳定细胞株内Daxx的转染效率。模型组和转染的细胞用胆固醇β环糊精(Chol∶MβCD)孵育48 h,建立RAW264.7荷脂和细胞凋亡模型,运用酶荧光法检测细胞内胆固醇蓄积情况,MTT检测细胞活性,流式细胞术观察细胞凋亡。Western blot测定细胞内Caspase3蛋白的表达。结果 RT-PCR和Western blot检测转染细胞内Daxx mRNA和蛋白明显高表达,表明稳定转染成功。在Chol∶MβCD的诱导下,模型组细胞内胆固醇的含量升高,细胞活性下降,凋亡数目增加。而Daxx高表达组可以加剧Chol∶MβCD诱导的胆固醇蓄积,细胞活性显著下降,凋亡细胞数目明显增加;同时,Daxx转染细胞组Caspase3蛋白表达明显增高。结论过表达Daxx可以加剧胆固醇β环糊精诱导的巨噬细胞凋亡。 展开更多
关键词 死亡结构相关蛋白 胆固醇蓄积 巨噬细胞 细胞凋亡
过氧化体增殖物激活型受体γ对巨噬细胞脂质蓄积及CD36表达的影响 被引量:9
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作者 曾颖 孙玉慧 +1 位作者 黄延锦 易光辉 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 121-124,共4页
目的观察过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂和拮抗剂对THP-1巨噬细胞胆固醇蓄积及CD36表达的影响。方法实验分对照组、氧化型低密度脂蛋白组、Ciglitazone处理组和GW9662处理组,后两组用50 mg/L氧化型低密度脂蛋白分别与过氧化体增殖物... 目的观察过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂和拮抗剂对THP-1巨噬细胞胆固醇蓄积及CD36表达的影响。方法实验分对照组、氧化型低密度脂蛋白组、Ciglitazone处理组和GW9662处理组,后两组用50 mg/L氧化型低密度脂蛋白分别与过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂Ciglitazone(10μmol/L)及拮抗剂GW9662(10μmol/L)共同孵育24 h,高效液相色谱分析法检测细胞总胆固醇蓄积情况,RT-PCR和Western blot分别检测THP-1巨噬细胞CD36 mRNA和蛋白的表达。结果与对照组(76.28±10.36 mg/g)相比,氧化型低密度脂蛋白(121.63±13.32 mg/g)能使细胞总胆固醇含量显著增加,而Ciglitazone能使氧化型低密度脂蛋白处理的细胞总胆固醇含量进一步增加(136.23±14.78 mg/g),GW9662能使氧化型低密度脂蛋白处理的细胞总胆固醇含量减少(98.52±11.45 mg/g)。过氧化体增殖物激活型受体γ拮抗剂GW9662使巨噬细胞CD36 mRNA和蛋白的表达下调及胆固醇蓄积减少,过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂Ciglitazone使巨噬细胞CD36 mRNA和蛋白的表达上调及胆固醇蓄积增多。结论过氧化体增殖物激活型受体γ拮抗剂使THP-1巨噬细胞胆固醇蓄积减少及氧化型低密度脂蛋白诱导的CD36表达下调。 展开更多
关键词 THP-1巨噬细胞 CD36 过氧化体增殖物激活型受体Γ 氧化型低密度脂蛋白 脂质蓄积
依泽替米贝对血管平滑肌源性荷脂细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1和肝X受体α表达的影响 被引量:1
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作者 高治平 于伟霞 +4 位作者 袁皓瑜 朱炳阳 夏承来 孙少卫 廖端芳 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期97-100,共4页
目的观察依泽替米贝对血管平滑肌源性荷脂细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1和肝X受体α表达的影响,探讨依泽替米贝促进血管平滑肌源性荷脂细胞胆固醇流出的作用机制。方法采用20mg/L胆固醇、β环糊精混合物处理大鼠主动脉平滑肌细胞建立荷... 目的观察依泽替米贝对血管平滑肌源性荷脂细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1和肝X受体α表达的影响,探讨依泽替米贝促进血管平滑肌源性荷脂细胞胆固醇流出的作用机制。方法采用20mg/L胆固醇、β环糊精混合物处理大鼠主动脉平滑肌细胞建立荷脂细胞模型,用不同浓度的依泽替米贝(3、10μmol/L和30μmol/L)处理荷脂细胞24h,选择30μmol/L的依泽替米贝处理荷脂细胞不同的时间(0、6、12、24h和48h)。通过逆转录聚合酶链反应检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1 mRNA变化和免疫印迹法检测肝X受体α蛋白的表达。结果(1)三种浓度的依泽替米贝处理荷脂细胞后,逆转录聚合酶链反应显示随着依泽替米贝浓度增加,血管平滑肌源性荷脂细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1的mRNA表达明显上调,30μmol/L依泽替米贝处理24h组相比模型组上调3.4倍左右;当选用30μmol/L依泽替米贝处理荷脂细胞不同的时间(0、6、12、24h和48h)后,三磷酸腺苷结合盒转运体A1的mRNA水平在0~24h之间随时间增加而增加并于24h达到峰值。(2)三种浓度的依泽替米贝处理荷脂细胞后,免疫印迹结果显示随着浓度增加血管平滑肌源性荷脂细胞肝X受体α蛋白的表达逐步增加,其中30μmol/L依泽替米贝组作用最强,较模型组增加2倍多。30μmol/L依泽替米贝分别处理荷脂细胞不同时间(0、6、12、24h和48h)后,肝X受体α蛋白表达随时间增加而增加,24h组作用最佳。结论依泽替米贝能明显上调平滑肌源性荷脂细胞ATP结合盒转运体A1和肝X受体α表达。 展开更多
关键词 依泽替米贝 血管平滑肌细胞 胆固醇蓄积 荷脂细胞 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 肝X受体Α
氨氯地平对平滑肌细胞泡沫化过程中亲环素A表达和胆固醇蓄积的影响 被引量:1
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作者 涂剑 周志刚 +4 位作者 王北冰 尹凯 孟军 何瑾 涂玉林 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期177-180,共4页
目的观察氨氯地平预处理对氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞泡沫化过程中亲环素A表达的影响及其对胆固醇蓄积的作用,从新的角度探讨氨氯地平的抗动脉粥样硬化作用。方法实验分为6组:对照组、氧化型低密度脂蛋白组、氨氯地平(0.1... 目的观察氨氯地平预处理对氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞泡沫化过程中亲环素A表达的影响及其对胆固醇蓄积的作用,从新的角度探讨氨氯地平的抗动脉粥样硬化作用。方法实验分为6组:对照组、氧化型低密度脂蛋白组、氨氯地平(0.1、1.0和10.0μmol/L)处理细胞1h后加入80mg/L氧化型低密度脂蛋白共同孵育72h组及10.0μmoL/L氨氯地平单独处理组,Western—blot和RT-PCR分别检测亲环素AmRNA和蛋白质的表达改变;油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量变化。结果氧化型低密度脂蛋白处理组的细胞内亲环素A的表达明显减少;经氨氯地平处理后,随着氨氯地平浓度的增加,细胞内亲环素A的表达逐渐增加,10.0μmol/L氨氯地平预处理细胞组效果最明显,较氧化型低密度脂蛋白组差异有显著性(P〈0.05)。油红O染色显示,氧化型低密度脂蛋白组细胞内大量脂滴形成,细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值为57.9%,符合泡沫细胞特征;预先予氨氯地平处理后,随着药物浓度的增加,细胞内脂滴逐渐减少,细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值逐渐降低,10.0μmol/L氨氯地平预处理细胞组效果最明显,为37.8%;结论氨氯地平预处理,可上调氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞泡沫化过程中亲环素A的表达,减轻细胞内的胆固醇蓄积。 展开更多
关键词 氨氯地平 泡沫细胞 氧化型低密度脂蛋白 亲环素A 胆固醇蓄积
依泽替米贝对血管平滑肌源性荷脂细胞胆固醇蓄积的影响 预览 被引量:3
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作者 高治平 于伟霞 +4 位作者 袁皓瑜 朱炳阳 夏承来 孙少卫 廖端芳 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2008年第1期 25-28,共4页
目的观察依泽替米贝对血管平滑肌源性的荷脂细胞胆固醇蓄积的影响。方法采用20mg/L胆固醇、β-环糊精混合物处理培养的大鼠主动脉平滑肌细胞建立荷脂细胞模型,用不同浓度的依泽替米贝(3、10μmol/L和30μmol/L)处理荷脂细胞24h,... 目的观察依泽替米贝对血管平滑肌源性的荷脂细胞胆固醇蓄积的影响。方法采用20mg/L胆固醇、β-环糊精混合物处理培养的大鼠主动脉平滑肌细胞建立荷脂细胞模型,用不同浓度的依泽替米贝(3、10μmol/L和30μmol/L)处理荷脂细胞24h,随后用30μmol/L的依泽替米贝处理荷脂细胞不同的时间(0、6、12、24h和48h)。通过高效液相色谱仪检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇的含量;油红O染色观察细胞内胆固醇蓄积的情况。结果(1)3、10μmol/L和30μmol/L依泽替米贝处理荷脂细胞后,细胞内总胆固醇含量分别为110.8±3.56、90.5±2.30mg/g和60.9±1.86mg/g,游离胆固醇含量分别为85.5±3.12、74.6±2.89mg/g和53.8±1.56mg/g;与模型组比较,中、高剂量组总胆固醇、游离胆固醇差异均有显著性(P〈0.05),随浓度升高,两者都有降低趋势(趋势性χ^2检验,P=0.007),且30μmol/L组作用最佳。(2)选择30μmol/L依泽替米贝处理荷脂细胞0、6、12、24h和48h,各时间点细胞内总胆固醇含量分别为120.1±2.37、117.9±3.05、80.3±2.81、69.2±1.56mg/g和72.1±2.98mg/g,随着时间的延长,总胆固醇浓度逐渐降低,两者呈负相关(r=-0.776,P〈0.05);游离胆固醇含量分别为92.9±2.11、90.7±3.76、71.4±2.57、60.1±1.21mg/g和64.2±2.48mg/g,随着时间的延长,游离胆固醇浓度逐渐降低,两者呈负相关(r=-0.786,P〈0.05);与0h组比较,12、24h和48h组差异均有显著性(P〈0.01),并呈时间依赖性,24h组效果最显著。结论依泽替米贝能降低血管平滑肌源性荷脂细胞胆固醇蓄积。 展开更多
关键词 药理学 依泽替米贝 血管平滑肌细胞 胆固醇蓄积 动脉粥样硬化 油红O染色法 高效液相色谱法
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Curcumin inhibits cellular cholesterol accumulation by regulating SREBP-1/caveolin-1 signaling pathway in vascular smooth muscle cells 被引量:3
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作者 Hao-yu YUAN Shuang-yu KUAN +5 位作者 Xing ZHENG Hong-yan LING Yun-Bo YANG Peng-Ke YAN Kai LI Duan-Fang LIAO 《中国药理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2008年第5期555-563,共9页
目的: 在 anti-atherosclerosis.Methods 上调查保护的效果和杂种狗枯茗的可能的机制: 从 apoE 大美人拿的动脉粥样硬化患者损害的词法变化(apoE~(-/-))mice 被染色的 hematoxylin 曙红决定。细胞内部的类脂化合物微滴和类脂化合物层次... 目的: 在 anti-atherosclerosis.Methods 上调查保护的效果和杂种狗枯茗的可能的机制: 从 apoE 大美人拿的动脉粥样硬化患者损害的词法变化(apoE~(-/-))mice 被染色的 hematoxylin 曙红决定。细胞内部的类脂化合物微滴和类脂化合物层次是由油红O染色的 assayed , caveolin-1 的 HPLC.The 蛋白质表示被西方的 blotting.Translocation 和甾醇反应元素绑定 protein-1 ( SREBP-1 )的表示确定被免疫荧光 analysis.Results 间接地检测: 20 mg ·k g~的管理( -1)·d~(-1)curcumin 到apoE~(为 4 个月的 -/-)mice 导致了动脉粥样硬化患者损害的50%减小并且作为与模型组相比在 caveolin-1 表示水平产出5褶层增加。有 50 mg ·L ~的老鼠脉管的平滑肌房间( VSMC ) pretreated (为 48 h 的 -1)ox-lipid 密度脂蛋白( ox-LDL )增加了细胞的类脂化合物内容,并且刺激了 SREBP-1 易位,但是减少 装载level.Lipid 的房间在各种各样的集中暴露了到杂种狗枯茗的 caveolin-1 表示( 12.5,25 ,并且 50 亩摩尔 ·L ~( -1))for 不同持续时间( 0,6,12,24 ,和 48 h )显著地减少了细胞的类脂化合物微滴的数字和区域,全部的胆固醇,胆固醇酉旨,并且伴随 caveolin-1 表示的举起的免费胆固醇铺平(近似3褶层);到原子核的从细胞质的 SREBP-1 的易位与暴露于 N-acetyl-Leu-Leu-norleucinal 的 装载models.Lipid 的 VSMC 相比被禁止,一个 SREBP-1 朊酶禁止者, SREBP-1 的显示出的增加的原子易位,减少的 caveolin-1 表示水平,并且在调整细胞的类脂化合物 levels.Conclusion 上面:姜黄色素通过经由 SREBP-1 的原子易位的抑制增加 caveolin-1 表示在有教养的 VSMC 禁止 ox-LDL-induced 胆固醇累积。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 姜黄色素 胆固醇积聚 SREBP-1
亲环素A在巨噬细胞荷脂过程中的表达及普罗布考干预的影响 预览 被引量:3
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作者 涂光辉 王北冰 +3 位作者 严鹏科 廖端芳 尹凯 涂玉林 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2006年第4期 293-296,共4页
目的 观察亲环素A在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而探讨亲环紊A在动脉粥样硬化形成中的作用机制。方法 采用75mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7巨噬细胞共同孵育,建立巨... 目的 观察亲环素A在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而探讨亲环紊A在动脉粥样硬化形成中的作用机制。方法 采用75mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7巨噬细胞共同孵育,建立巨噬细胞荷脂化模型,油红O染色观察细胞内脂滴的形成,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量,Westera-blot检测亲环紊A的蛋白表达;用75mg/L普罗布考干预对上述检测的影响。结果 氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共同孵育48h后,油红O染色显示细胞内有大量脂滴形成,细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量均明显增加,胆固醇酯,总胆固醇的比值为42.3%±5.9%,符合荷脂细胞特征;亲环素A的蛋白表达明显减弱。予普罗布考处理,细胞内脂滴明显减少,胆固醇酯,总胆固醇的比值降至32.9%±2.5%,亲环素A的蛋白表达增加81.3%±3.6%,较对照组差异有显著性(P均〈0.05)。结论 氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7巨噬细胞荷脂过程中,亲环素A表达下调,促进细胞胆固醇蓄积;普罗布考干预可上调亲环素A蛋白表达,减轻细胞内的胆固醇蓄积。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 动脉粥样硬化 油红O染色 亲环素A 巨噬细胞 荷脂化 胆固醇蓄积 普罗布考
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亲环素A在巨噬细胞荷脂过程中的影响 预览 被引量:7
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作者 涂剑 严鹏科 +3 位作者 王北冰 曹轩 王蓉蓉 廖端芳 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第5期 541-544,共4页
目的观察胆固醇转运复合物中关键蛋白亲环素A在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而分析亲环素A在巨噬源性泡沫细胞形成过程中的作用.方法采用75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.... 目的观察胆固醇转运复合物中关键蛋白亲环素A在氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而分析亲环素A在巨噬源性泡沫细胞形成过程中的作用.方法采用75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共同孵育,建立巨噬细胞荷脂化模型;Western-blot、免疫荧光法检测亲环素A蛋白的表达水平;高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变化.结果 75 mg/L氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞共同孵育48 h后,亲环素A的蛋白表达逐渐减弱,48 h、72 h分别较未处理组下降了54.5%±6.3%、59.8%±5.9%(P<0.05).间接免疫荧光定位检测发现氧化型低密度脂蛋白显著抑制RAW264.7细胞中亲环素A在胞膜、胞浆中的表达,且随着处理时间的延长作用更明显.细胞内胆固醇酯/总胆固醇的比值由未处理组的28.3%±1.2 %上升至48 h的42.3%±5.9 %(P均<0.05).结论氧化型低密度脂蛋白诱导的RAW264.7巨噬细胞泡沫化过程中,亲环素A的表达下调与细胞胆固醇蓄积密切相关. 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 亲环素A 巨噬细胞 荷脂化 脂蛋白 低密度 氧化 胆固醇蓄积 Western BLOT法 高效液相色谱法
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