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构建钙荧光探针细胞用于探究胞浆和线粒体钙对ATP刺激的响应 预览
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作者 王恺 赵海鑫 +1 位作者 李金亮 夏晴 《生物技术通讯》 CAS 2019年第1期93-97,共5页
目的:构建表达基因编辑钙探针(GECIs)的细胞系HeLa-GECIs,探究细胞应答外界ATP刺激中钙离子在细胞内的响应和变化。方法:分别用能够直接通过荧光强度反映细胞胞浆内和线粒体内钙离子相对浓度的2种钙探针cyto-GCaMP6和4mt-GCaMP6感染HeL... 目的:构建表达基因编辑钙探针(GECIs)的细胞系HeLa-GECIs,探究细胞应答外界ATP刺激中钙离子在细胞内的响应和变化。方法:分别用能够直接通过荧光强度反映细胞胞浆内和线粒体内钙离子相对浓度的2种钙探针cyto-GCaMP6和4mt-GCaMP6感染HeLa细胞,获得2种表达钙离子探针的HeLa细胞系;在感染了2种腺病毒探针24h后,用共聚焦荧光显微镜检测荧光探针在HeLa细胞内的表达情况;在表达2种钙探针的细胞的培养基中加入外源ATP,用Time-lapse成像动态观测技术观察HeLa细胞内钙离子对外环境中ATP的响应。结果:共聚焦荧光显微镜观察,确定95%以上的细胞表达了对应的钙离子指示荧光探针;Time-lapse成像动态观测技术观察发现,在细胞培养基中加入ATP后,细胞胞浆钙探针荧光强度瞬时(3~6s)升至10倍,200s后逐渐降低到基础水平;线粒体钙到达峰值(4倍)的时间稍滞后(5~8s),并且回落更慢,300s时至1.5倍。在ATP受体P2X7抑制剂A438079预处理的实验组,上述胞浆钙和线粒体钙浓度上升不明显。结论:构建了能在活体细胞内通过荧光探针实时监测钙离子响应胞外ATP刺激的细胞实验体系,为进一步深入探究ATP等危险信号导致细胞的炎性损伤机制奠定了基础。 展开更多
关键词 基因编辑钙探针 ATP 钙稳态 钙瞬变 线粒体钙 胞浆钙
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Arabidopsis transcriptional response to extracellular Ca^2+ depletion involves a transient rise in cytosolic Ca^2+
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作者 Jing Wang Tergel Tergel +3 位作者 Jianhua Chen Ju Yang Yan Kang Zhi Qi 《植物学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期138-150,共13页
Ecological evidence indicates a worldwide trend of dramatically decreased soil Ca2 tlevels caused by increased acid deposition and massive timber harvesting. Little is known about the genetic and cellular mechanism of... Ecological evidence indicates a worldwide trend of dramatically decreased soil Ca2 tlevels caused by increased acid deposition and massive timber harvesting. Little is known about the genetic and cellular mechanism of plants’ responses to Ca2 t depletion. In this study, transcriptional profiling analysis helped identify multiple extracellular Ca2+([Ca2+]ext) depletion-responsive genes in Arabidopsis thaliana L., many of which are involved in response to other environmental stresses. Interestingly, a group of genes encoding putative cytosolic Ca2+([Ca2+]cyt)sensors were significantly upregulated, implying that [Ca2+]cyt has a role in sensing [Ca2+]extdepletion. Consistent with this observation, [Ca2+]extdepletion stimulated a transient rise in[Ca2+]cytthat was negatively influenced by [Kt]ext, suggesting the involvement of a membrane potential-sensitive component.The [Ca2+]cytresponse to [Ca2+]extdepletion was significantly desensitized after the initial treatment, which is typical of a receptor-mediated signaling event. The response was insensiResearch Ative to an animal Ca2 tsensor antagonist, but was suppressed by neomycin, an inhibitor of phospholipase C. Gd3 t, an inhibitor of Ca2 tchannels, suppressed the [Ca2+]ext-triggered rise in[Ca2+]cytand downstream changes in gene expression. Taken together, this study demonstrates that [Ca2+]cytplays an important role in the putative receptor-mediated cellular and transcriptional response to [Ca2+]extdepletion of plant cells. 展开更多
关键词 细胞内钙 拟南芥属 上升 转录 基因编码 敏感元件 受体介导 植物细胞
Mutation of the Arabidopsis Calmodulin-Like Protein CML37 Deregulates the Jasmonate Pathway and Enhances Susceptibility to Herbivory 被引量:1
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作者 Sandra S. Scholz Jyothilakshmi Vadassery +5 位作者 Monika Heyer Michael Reichelt Kyle W. Bender Wayne A. Snedden Wilhelm Boland Axel Mithofer 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 2014年第12期1712-1726,共15页
在整个他们的生活,植物被各种各样的不能生活、关於生命的压力因素质问。在那些之中是从食草的昆虫的攻击。位于草食动物和随后的信号 transduction 的察觉下面的分子的机制很好没被理解。作为第二个送信人,在细胞内部的 Ca <sup&g... 在整个他们的生活,植物被各种各样的不能生活、关於生命的压力因素质问。在那些之中是从食草的昆虫的攻击。位于草食动物和随后的信号 transduction 的察觉下面的分子的机制很好没被理解。作为第二个送信人,在细胞内部的 Ca <sup>2+</sup> 层次的流动在调停起一个关键作用压力反应小径。Ca <sup>2+</sup> 信号被象象 calmodulin 一样蛋白质(电流型逻辑) 那样的 Ca <sup>2+</sup> 传感器蛋白质译码。这里,我们证明 recombinant CML37 在 vitro 象一个 Ca <sup>2+</sup> 传感器一样表现并且在 Arabidopsis, AtCML37 被机械伤害以及由群袭与通晓各方面知识经验丰富的人的幼虫导致鳞翅类的草食动物 Spodoptera littoralis。CML37 的功能的损失导致了建议 CML37 是一个积极防卫管理者的幼虫的更好的喂表演。尽管在 jasmonates 的累积的重要减小被观察,在象 glucosinolates 或 flavonoids 那样的第二等的代谢物的导致 herbivory 的变化都没在 cml37 植物被检测,由于 JAR1 mRNA 和细胞的酶活动的减少的表示。因而, jasmonate 应答的基因的表示也被减少。总结,我们的结果建议 Ca <sup>2+</sup> 传感器蛋白质, CML37,在在 herbivory,连接 Ca <sup>2+</sup> 并且 jasmonate 发信号期间发信号的 Ca <sup>2+</sup> 作为一个积极管理者工作。 展开更多
关键词 钙调蛋白 茉莉酸类 钙调素 拟南芥 敏感性 突变 次级代谢产物 植食性昆虫
突变型人胰高血糖素样肽-1对神经细胞损伤的保护 被引量:1
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作者 张蓝 孙中伟 +3 位作者 黄刚 黄静 孟博 徐敏华 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2012年第3期 185-191,共7页
目的研究突变型人胰高血糖素样肽-1(mutated humang lucagon-like peptide-1,mGLP-1)对谷氨酸诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的影响。方法环磷酸腺苷(cAMP)试剂盒检测细胞内cAMP含量,比较mGLP-1和天然人胰高血糖素样肽-... 目的研究突变型人胰高血糖素样肽-1(mutated humang lucagon-like peptide-1,mGLP-1)对谷氨酸诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的影响。方法环磷酸腺苷(cAMP)试剂盒检测细胞内cAMP含量,比较mGLP-1和天然人胰高血糖素样肽-1(natural human glucagon-like peptide-1,nGLP-1)与GLP-1受体结合的能力;以谷氨酸诱导SH—SY5Y细胞损伤,同时用mGLP-1处理SH—SY5Y细胞,采用MTT法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH的释放量;DAPI染色法观察细胞凋亡形态学特征;钙流法检测胞内钙离子浓度变化;通过检测丙二醛fMDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、总谷胱甘肽(total GS)含量的变化判断细胞氧化损伤程度。结果mGLP-1与nGLP-1类似,都能提高细胞内cAMP水平;mGLP-1能缓解谷氨酸诱导的细胞损伤,增加细胞存活率,降低LDH释放量;mGLP-1对谷氨酸导致的细胞内钙离子变化没有修复作用;mGLP-1能抑制氧化损伤指标MDA含量升高,促进抗氧化系统指标SOD活性增强和totalGS含量增加。结论mGLP-1可导致细胞内cAMP含量增加。mGLP-1对谷氨酸所致神经细胞损伤具有保护作用,这可能是mGLP-1通过对神经细胞的抗氧化损伤作用实现的,而不是改善谷氨酸导致的钙稳态失衡。mGLP-1的保护作用与nGLP-1类似,而mGLP-1在体内稳定性更强,半衰期更长;提示mGLP-1可能对相关神经退行性疾病的治疗具有更佳的潜在价值。 展开更多
关键词 谷氨酸中毒 突变型人胰高血糖素样肽-1 胞内钙离子 氧化损伤 神经母细胞瘤细胞
Dihydrosphingosine-lnduced Programmed Cell Death in Tobacco BY-2 Cells Is Independent of H2O2 Production
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作者 Christophe Lachaud 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期310-318,共9页
关键词 程序性细胞死亡 过氧化氢 生产 烟草 NADPH氧化酶 国土安全部 钙通道阻滞剂 防御机制
阿尔茨海默病转线粒体DNA细胞模型胞质钙稳态的改变 预览 被引量:2
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作者 张兰 刘芳 +2 位作者 万岁桂 贾建平 李林 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第1期 67-72,共6页
目的观察阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)转线粒体DNA细胞模型胞质游离钙水平,探讨线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)缺陷在AD发病中的作用。方法 将正常青年人、正常老年人和AD患者的血小板分别与无mtDNA细胞融合,建立转... 目的观察阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)转线粒体DNA细胞模型胞质游离钙水平,探讨线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)缺陷在AD发病中的作用。方法 将正常青年人、正常老年人和AD患者的血小板分别与无mtDNA细胞融合,建立转mtDNA细胞模型。采用微测量法测定细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase,COX)的活性;用荧光探针Fluo-3标记胞质内游离钙离子,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察细胞胞质钙离子荧光强度。结果 AD转mtDNA细胞COX活性与正常老年对照相比差异有统计学意义(P〈0.05);静息状态胞质钙离子浓度升高,氧化磷酸化解耦联剂CCCP刺激后胞质钙离子的调节能力明显降低。结论 AD患者线粒体存在COX缺陷,使线粒体钙库功能下降,导致细胞内胞质钙稳态失衡。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 线粒体 转线粒体DNA细胞 细胞色素C氧化酶 胞质钙
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谷氨酸致人神经母细胞瘤细胞兴奋性毒损伤的机制 被引量:1
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作者 孙中伟 张蓝 +2 位作者 竺淑佳 陈温纯 梅兵 《神经科学通报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2010年第1期8-16,共9页
目的探讨谷氨酸导致人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y cells)兴奋性毒损伤的机制。方法MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率;测定乳酸脱氢酶释放量观察细胞损伤程度;DAPI染色法观察细胞凋亡形态学特点;钙流法检测胞浆钙离子浓度变化 ;以胞内谷胱甘... 目的探讨谷氨酸导致人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y cells)兴奋性毒损伤的机制。方法MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率;测定乳酸脱氢酶释放量观察细胞损伤程度;DAPI染色法观察细胞凋亡形态学特点;钙流法检测胞浆钙离子浓度变化 ;以胞内谷胱甘肽、超氧化物歧化酶活性和胞外丙二醛含量检测谷氨酸引发SH-SY5Y细胞的氧化应激状态。结果谷氨酸导致SH-SY5Y细胞受损,包括存活率下降、乳酸脱氢酶释放量增多及形态结构发生改变;谷氨酸处理 20 min 后,胞浆钙离子浓度无显著改变,而处理 24 h 后,胞浆钙离子大量增加,且 MK801 (NMDA受体拮抗剂)及LY341495 (代谢型谷氨酸受体拮抗剂)均不能抑制钙离子内流的增多;谷氨酸可导致SH-SY5Y氧化损伤,包括胞内谷胱甘肽含量减少、超氧化物歧化酶活性降低、胞外脂质过氧化产物丙二醛水平升高等,而丹参酮IIA (一种抗氧化剂)可减轻这些氧化损伤。结论谷氨酸导致SH-SY5Y细胞兴奋性毒损伤可能是通过氧化损伤产生的,而不依赖于 NMDA 受体介导的钙稳态的破坏。 展开更多
关键词 谷氨酸 兴奋性毒 胞浆钙离子 氧化损伤
Comparative Detection of Calcium Fluctuations in Single Female Sex Cells of Tobacco to Distinguish Calcium Signals Triggered by in vitro Fertilization
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作者 Xiong-Bo Peng Meng-Xiang Sun Hong-Yuan Yang 《植物学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2009年第8期782-791,共10页
Double fertilization is a key process of sexual reproduction in higher plants. The role of calcium in the activation of female sex cells through fertilization has recently received a great deal of attention. The estab... Double fertilization is a key process of sexual reproduction in higher plants. The role of calcium in the activation of female sex cells through fertilization has recently received a great deal of attention. The establishment of a Ca2+-imaging technique for living, single, female sex cells is a difficult but necessary prerequisite for evaluating the role of Ca2+ in the transduction of external stimuli, including the fusion with the sperm cell, to internal cellular processes. The present study describes the use of Fluo-3 for reporting the Ca2+ signal in isolated, single, female sex cells, egg cells and central cells, of tobacco plants. A suitable loading protocol was optimized by loading the cells at pH 5.6 with 2 μM Fluo-3 for 30 min at 30 °C. Under these conditions, several key factors related to in vitro fertilization were also investigated in order to test their possible effects on the [Ca2+]cyt of the female sex cells. The results indicated that the bovine serum albumin-fusion system was superior to the polyethlene glycol-fusion system for detecting calcium fluctuations in female sex cells during fertilization. The central cell was fertilized with the sperm cell in bovine serum albumin; however, no evident calcium dynamic was detected, implying that a transient calcium rise might be a specific signal for egg cell fertilization. 展开更多
关键词 信号隔离 体外受精 细胞识别 融合检测 波动性 发钙 女性 烟草
ABA诱导的玉米保卫细胞胞质钙离子浓度的变化 预览 被引量:8
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作者 刘子会 张红梅 郭秀林 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期3357-3362,共6页
【目的】以玉米第二真叶下表皮为材料,研究ABA诱导的保卫细胞胞质Ca^2+浓度的变化,并探讨Ca^2+来源。【方法】通过数字激光共聚焦显微镜测定ABA诱导的胞质钙离子浓度变化,并通过异搏啶、EGTA[乙二醇双(2-氨基)乙基醚-N,N,N’,N... 【目的】以玉米第二真叶下表皮为材料,研究ABA诱导的保卫细胞胞质Ca^2+浓度的变化,并探讨Ca^2+来源。【方法】通过数字激光共聚焦显微镜测定ABA诱导的胞质钙离子浓度变化,并通过异搏啶、EGTA[乙二醇双(2-氨基)乙基醚-N,N,N’,N’四乙酸]药理实验探讨钙离子的来源。【结果】ABA不能诱导所有的保卫细胞胞质钙离子浓度的增加,而可被ABA诱导的保卫细胞中又表现了不同的钙离子浓度变化形式。异搏啶预处理后,不能改变保卫细胞对ABA的反应,但EGTA预处理,则抑制了ABA诱导的胞质钙离子浓度升高。此外,气孔运动观察结果显示:ABA可以明显的诱导气孔关闭,但EGTA、异搏啶的预处理延缓了ABA诱导的气孔关闭速度。【结论】ABA作用下,保卫细胞胞质Ca^2+浓度或不发生变化,或持续高浓度,或发生逐渐升高,形成不同的钙信号,最终造成气孔不同步关闭;ABA诱导的胞质钙离子升高主要源自胞外钙离子内流。 展开更多
关键词 ABA 胞质钙离子 玉米
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Cross-talk between calcium-calmodulin and nitric oxide in abscisic acid signaling in leaves of maize plants 预览 被引量:1
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作者 Jianrong Sang Aying Zhang Fan Lin Mingpu Tan Mingyi Jiang 《细胞研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2008年第5期577-588,共12页
用药理学和生物化学的途径,在过氧化氢( H ( 2 ) O ( 2 ))之间的发信号的小径,钙( Ca (2+)) -calmodulin (凸轮),并且氮的氧化物(没有)在 abscisic 酸(骆驼毛的织物),导致的抗氧化剂防卫在玉米( Zea mays L.)的叶子被调查植物。有... 用药理学和生物化学的途径,在过氧化氢( H ( 2 ) O ( 2 ))之间的发信号的小径,钙( Ca (2+)) -calmodulin (凸轮),并且氮的氧化物(没有)在 abscisic 酸(骆驼毛的织物),导致的抗氧化剂防卫在玉米( Zea mays L.)的叶子被调查植物。有骆驼毛的织物, H (2 ) O (2 ) ,和 CaCl (2 ) 的处理在产生导致了增加不,在玉米叶肉房间和氮的氧化物的活动,在 cytosolic 和玉米的 microsomal 部分的 synthase (NOS ) 离开。然而,如此的增加被预告的处理与 Ca (2+) 禁止者和凸轮对手堵住。同时, Ca (2+)导致了的有也压制的二个 NOS 禁止者的预告的处理在另一方面在号码的生产增加,有骆驼毛的织物和 NO 施主钠 nitroprusside ( SNP )的处理也在叶肉房间的原物并且在 calmodulin 的表示在 cytosolic Ca (2+)的集中导致了增加 1 ( CaM1 )基因和在玉米的叶子的凸轮的内容种,并且骆驼毛的织物导致的增加被预告的处理减少与一没有 scavenger 和一个 NOS 禁止者。而且,抗氧化剂基因的表示的 导致SNP 的增加超级氧化物 dismutase 4 ( SOD4 ), cytosolic ascorbate 过氧化物酶(帽子 X ),并且谷胱甘肽 reductase 1 ( GR1 )并且 chloroplastic 和 cytosolic 抗氧化剂酶的活动被预告的处理与 Ca (2+)禁止者和凸轮对手逮捕。我们的结果建议那个 Ca (2+) 凸轮没有生产在上游、下游的功能,主要来自 NOS,导致骆驼毛的织物并且 H (2 ) O (2 ) 在玉米植物的叶子导致了抗氧化剂防卫。 展开更多
关键词 玉米 脱落酸 抗氧化作用 氧化一氮合酶
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模拟失重增强大鼠脑动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道功能 预览 被引量:1
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作者 谢满江 张立藩 +1 位作者 马进 程宏伟 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期 439-445,共7页
本工作旨在探讨短期模拟失重大鼠脑动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,BKCa channels)功能的改变.以尾部悬吊大鼠模型模拟失重对脑... 本工作旨在探讨短期模拟失重大鼠脑动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,BKCa channels)功能的改变.以尾部悬吊大鼠模型模拟失重对脑血管的影响.应用激光扫描共聚焦显微镜测定VSMCs胞内游离钙浓度([Ca2+]i);采用细胞贴附模式,记录BKCa通道的单通道活动.结果表明,模拟失重1周后,大鼠脑动脉VSMCs的[Ca2+]i比对照组显著升高(P<0.05);BKCa通道的开放概率(Po)与平均开放时间(To)显著增加(P<0.05),而单通道电导与平均关闭时间(Tc)则无显著变化.总之,1周模拟失重可引起脑动脉VSMCs的BKCa通道功能显著增强,且与细胞[Ca2+]i的升高同步出现.结果提示,脑动脉VSMCs的离子通道机制可能参与介导模拟失重引起的脑血管适应性变化. 展开更多
关键词 微重力 航天飞行后心血管失调 大鼠 血管平滑肌细胞 胞浆Ca^2+ 大电导钙激活钾通道
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Damaging Effect of Cigarette Smoke Extract on Primary Cultured Human Umbilical Vein Endothelial Cells and Its Mechanism 预览
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作者 Yu-MEIYANG GENG-TAOLIU 《生物医学与环境科学:英文版》 SCIE CAS CSCD 2004年第2期 121-134,共14页
Objective To investigate the cellular effects of cigarette smoke extract (CSE) on primarily cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). Methods The effects of CSE (5%-20%) and nicotine (10-4 mol/L) on HUV... Objective To investigate the cellular effects of cigarette smoke extract (CSE) on primarily cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). Methods The effects of CSE (5%-20%) and nicotine (10-4 mol/L) on HUVEC viability, proliferation, angiogenesis and apoptosis were observed. Results CSE decreased HUVEC survival rate and angiogenesis after 24 h as well as its proliferation after 48 h in a dose-dependent manner. Moreover, CSE induced apoptosis of HUVEC as indicated in condensation of nuclear chromatin and the presence of hypodiploid DNA. HUVEC incubated with CSE for 24 h gave a significant decrease in the expression of Bcl-2 as well as the decline in the Bcl-2/Bax ratio accompanied with the loss of mitochondrial membrane potential and excess cytosolic calcium. Our study also observed that p53 protein level decreased, rather than increased in cells treated with CSE. Nicotine had no discernible inhibitory effects on the above indices of HUVEC. Conclusion Exposure to CSE other than nicotine causes inhibition of viability, proliferation and differentiation of HUVEC. CSE-induced HUVEC injury is mediated in part through accelerated apoptosis but independent of p53 pathway. It appears that mitochondria have played a key role in the apoptosis of HUVEC induced by CSE. 展开更多
关键词 破坏性作用 焦油 脐带血 内皮细胞 吸烟者 HUVEC
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Induction of defence gene expression by oligogalacturonic acid requires in-creases in both cytosolic calcium and hydrogen peroxide in Arabidopsis thaliana 预览 被引量:1
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作者 XiangYangHU StevenJNEILL +1 位作者 WeiMingCAI ZhangChengTANG 《细胞研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2004年第3期 234-240,共7页
Responses to oligogalacturonic acid (OGA) were determined in transgenic Arabidopsis thaliana seedlings expressing the calcium reporter protein aequorin. OGA stimulated a rapid, substantial and transient increase in th... Responses to oligogalacturonic acid (OGA) were determined in transgenic Arabidopsis thaliana seedlings expressing the calcium reporter protein aequorin. OGA stimulated a rapid, substantial and transient increase in the concentration of cytosolic calcium ([Ca2+]cyt) that peaked after ca. 15 s. This increase was dose-dependent, saturating at ca. 50 μg Gal equiv/ml of OGA. OGA also stimulated a rapid generation of H2O2. A small, rapid increase in H2O2 content was followed by a much larger oxidative burst, with H2O2 content peaking after ca. 60 min and declining thereafter. Induction of the oxidative burst by OGA was also dose-dependent, with a maximum response again being achieved at ca. 50 μg Gal equiv/mL. Inhibitors of calcium fluxes inhibited both increases in [Ca2+]cyt and [H2O2], whereas inhibitors of NADPH oxidase blocked only the oxidative burst. OGA increased strongly the expression of the defence-related genes CHS,GST, PAL and PR-1. This induction was suppressed by inhibitors of calcium flux or NADPH oxidase, indicating that increases in both cytosolic calcium and H2O2 are required for OGA-induced gene expression. 展开更多
关键词 防御基因 表达 阿布属 细胞液 过氧化氢 OGA
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钙通道阻滞剂对低温保存大鼠肝脏的保护作用 被引量:4
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作者 刘东举 沈宏 +4 位作者 刘永峰 何三光 崔桂英 魏敏杰 李金鸣 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期 94-96,共3页
目的研究钙通道阻滞剂是否减轻低温保存下肝细胞的钙超载并起到保护肝脏的作用。方法低温保存大鼠肝细胞于不同时限,按保存液的不同成分分组:(1)对照组: DMEM液;(2)实验I组: DMEM液+Verapamil(维拉帕米);(3)实验II组:DMEM... 目的研究钙通道阻滞剂是否减轻低温保存下肝细胞的钙超载并起到保护肝脏的作用。方法低温保存大鼠肝细胞于不同时限,按保存液的不同成分分组:(1)对照组: DMEM液;(2)实验I组: DMEM液+Verapamil(维拉帕米);(3)实验II组:DMEM液+Nifedipine(硝苯地平);(4)实验III组:DMEM液+Diltiazem(硫氮卓酮)。用Fura-2法测定低温保存下的大鼠肝细胞内钙和肝功能,并在光镜和电镜下观察肝脏的结构。结果细胞内钙及肝功能测定,各实验组与对照组差异显著;组织学观察,保存0~48h各实验组损伤明显低于对照组。结论钙通道阻滞剂对低温保存肝脏有保护作用,且三类药物中维拉帕米作用最强,硝苯地平和硫氮卓酮次之。 展开更多
关键词 低温保存 细胞内钙 钙通道阻滞剂 肝功能 测定
细胞外钙调素对百合花粉细胞内钙离子浓度的影响 预览 被引量:14
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作者 尚忠林 马力耕 +1 位作者 王学臣 孙大业 《植物学报:英文版》 CSCD 2001年第1期 12-17,共6页
以川百合(Lilium davidii Duchartre)花粉为材料,利用低温装载法在完整花粉粒中成功地装载了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo_3AM,利用激光共聚焦显微技术研究了细胞外钙调素对细胞内游离钙离子浓度的影响。结果发现外源纯化钙调素... 以川百合(Lilium davidii Duchartre)花粉为材料,利用低温装载法在完整花粉粒中成功地装载了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo_3AM,利用激光共聚焦显微技术研究了细胞外钙调素对细胞内游离钙离子浓度的影响。结果发现外源纯化钙调素可以使细胞内游离钙离子的浓度升高,在一定范围内促进效果与钙调素浓度呈正相关。不能透过细胞膜的钙调素拮抗剂W7_agarose和植物钙调素抗血清处理都可以使花粉细胞质中游离钙离子浓度降低,表明内源细胞外钙调素可能在维持和促进花粉细胞质中游离钙离子方面具有重要作用。 展开更多
关键词 川百合 花粉 细胞外钙调素 游离钙离子 低温装载 激光共聚焦显微术 植物发育生理
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钙超载大鼠肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变 预览 被引量:5
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作者 张晓春 文允镒 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期 250-253,共4页
目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)胞内是否存在钙离子(Ca^2+)稳态调节异常。方法 以Fluo-3/AM作为Ca^2+批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜VSMC(CaOM... 目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)胞内是否存在钙离子(Ca^2+)稳态调节异常。方法 以Fluo-3/AM作为Ca^2+批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜VSMC(CaOMV)与正常Wistar大鼠肠系膜VSMC(WMV)静息态的胞浆与核内游离Ca^2+水平(〖Ca^2+〗i,〖Ca^2+〗n),以及在多各药物刺激下Ca^2+稳态调节的差异。结果 两种V 展开更多
关键词 钙超载 肠系膜血管平滑肌细胞 钙离子稳态调节
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不同钙离子浓度对鲎腹神经光感受器二种光碰击的影响 预览 被引量:1
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作者 袁维佳 H.施蒂夫 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1998年第4期 413-419,共7页
在生理盐水中用持续的弱光(6*10^6-9*10^6个光子/cm^2)刺激鲎的腹神经光感受器细胞可得到二种类型的碰击,一种称谓“标准光碰击”或“C2碰击”,它有对称的形状,信号衰退的指0数常数大于0.01/毫秒。
关键词 光感受器 光碰击 钙离子浓度 EGTA
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胞内钙平衡在培养的牛主动脉内皮细胞低氧和复氧损伤中的作用 预览 被引量:1
18
作者 陈灵红 周兆年 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期 249-254,共6页
本文通过建立培养的牛主动脉内皮细胞体外低氧复氧模型,观察低氧和复氧时胞内钙浓度的改变与存活率的关系。结果显示,随低氧时间延长内皮细胞存活率下降,低氧后再复氧存活率进一步降低。低氧时无钙溶液孵育降低细胞的存活率,但复氧... 本文通过建立培养的牛主动脉内皮细胞体外低氧复氧模型,观察低氧和复氧时胞内钙浓度的改变与存活率的关系。结果显示,随低氧时间延长内皮细胞存活率下降,低氧后再复氧存活率进一步降低。低氧时无钙溶液孵育降低细胞的存活率,但复氧时无钙溶液孵育则增加细胞的存活率。低氧2h胞内钙浓度从99nmol/L降对69nmol/L,无钙时胞内钙进一步降低,低氧4h再复氧40min,胞内钙浓度恢复至正常。提示细胞内钙浓度平衡 展开更多
关键词 低氧 复氧 内皮细胞 主动脉 胞内 钙平衡
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钙敏荧光试剂Fluo—2的合成 预览 被引量:1
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作者 屠惠萍 王隽 +2 位作者 杨利苹 张熊德 朱培闳 《合成化学》 CAS CSCD 1995年第4期 332-335,共4页
Fluo-2是一各矍有大共轭体系的新型荧光试剂,由于Che吨酮的引人,其Ex,Em值分别为493nm及518nm,可用于普通荧光光度计进行(Ca^2+)测定。本文报道了它的全合成,特别是采用在活泼的苯环上引人溴原子,... Fluo-2是一各矍有大共轭体系的新型荧光试剂,由于Che吨酮的引人,其Ex,Em值分别为493nm及518nm,可用于普通荧光光度计进行(Ca^2+)测定。本文报道了它的全合成,特别是采用在活泼的苯环上引人溴原子,与锂交换后再与Che吨酮缩合形成碳-碳键的方法。 展开更多
关键词 钙离子 细胞 荧光试剂 Che吨酮 Fluo-2
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毛喉萜对大鼠成骨样细胞内Ca^2+释出的影响 被引量:2
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作者 杨非易 鲁朋 杜国光 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第6期 707-711,共5页
毛喉萜是一种二萜类化合物,为细胞中腺苷酸环化酶的激活剂,用毛喉萜处理大发习成骨样细胞,发现它可即时激发细胞内Ca^2+水平的增高,当细胞经毛喉萜长期处理(1-2天)后,其对PTH激发细胞内Ca^2+释出的交应也呈增高... 毛喉萜是一种二萜类化合物,为细胞中腺苷酸环化酶的激活剂,用毛喉萜处理大发习成骨样细胞,发现它可即时激发细胞内Ca^2+水平的增高,当细胞经毛喉萜长期处理(1-2天)后,其对PTH激发细胞内Ca^2+释出的交应也呈增高反应,但毛喉萜的即刻反应与其长期效应的作用机理可能并不相同,鉴于毛喉萜具有抑制增殖的作用,其对细胞内Ca^2+ 水平的调节作用或与其对细胞的抑增殖促分化有关。 展开更多
关键词 毛喉萜 成骨样细胞 钙离子
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