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阳和汤含药血清对缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用及其机制
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作者 肖玉洁 王婷 +5 位作者 陈州华 龚辉 张伟 马超 欧阳建 黄立中 《中南药学》 CAS 2019年第8期1219-1223,共5页
目的研究阳和汤含药血清对缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用及其机制。方法体外培养缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231,采用阳和汤高、中、低浓度含药血清,顺铂,单药或联合HIF-1α抑制剂处理。MTT法检测细胞增殖活性,Real-time PCR... 目的研究阳和汤含药血清对缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用及其机制。方法体外培养缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231,采用阳和汤高、中、低浓度含药血清,顺铂,单药或联合HIF-1α抑制剂处理。MTT法检测细胞增殖活性,Real-time PCR法检测HIF-1α、IGF-II、L-Selectin的m RNA表达变化,Western blot检测HIF-1α、IGF-II、L-Selectin的蛋白表达变化。结果阳和汤含药血清能抑制细胞生长,而且呈浓度依赖性,阳和汤含药血清能下调HIF-1α、IGF-II、L-Selectin的m RNA及蛋白表达,且呈浓度依赖性,联合HIF-1α抑制剂效果更明显。结论阳和汤含药血清能抑制缺氧乳腺癌干细胞的增殖,可能通过调节HIF-1α/IGF-II信号通路及L-Selectin的表达抑制乳腺癌细胞的增殖转移。 展开更多
关键词 阳和汤 含药血清 缺氧 乳腺癌干细胞
逍遥散含药血清影响RIN-m5f细胞活性及胰岛素分泌的机制探讨
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作者 陈欢 张铭珈 +2 位作者 倪慧 朱艳芳 敖海清 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期647-652,共6页
目的研究逍遥散含药血清对应激损伤状态糖尿病细胞模型[大鼠胰岛β细胞瘤细胞(RIN-m5f)]的活性、胰岛素(INS)分泌的影响及其干预机制。方法用高浓度葡萄糖(50mmol·L^-1)和皮质酮(CORT,320μmol·L^-1)诱导培养RIN-m5f细胞12h,... 目的研究逍遥散含药血清对应激损伤状态糖尿病细胞模型[大鼠胰岛β细胞瘤细胞(RIN-m5f)]的活性、胰岛素(INS)分泌的影响及其干预机制。方法用高浓度葡萄糖(50mmol·L^-1)和皮质酮(CORT,320μmol·L^-1)诱导培养RIN-m5f细胞12h,制备应激损伤状态糖尿病细胞模型,再用30%逍遥散含药血清干预,并设立空白血清对照。共分为7组:①正常组:RIPM1640+10%FBS;②高糖组(G组):①+50mmol·L^-1的葡萄糖;③应激组(GCo组):②+320μmol·L^-1的CORT;④空白血清高糖组(GC组):②+30%空白组大鼠血清(30%C)⑤逍遥散血清高糖组(GX组):②+30%逍遥散组大鼠血清(30%X);⑥空白血清应激组(GCoC组):③+30%C;⑦逍遥散血清应激组(GCoX组):③+30%X。干预12h后,采用CCK-8法检测细胞活性;酶联免疫法(ELISA)检测细胞INS分泌水平;实时荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞活化转录因子6(ATF-6)、肌醇需酶1(IRE-1)mRNA表达;Western Blot法检测细胞Caspase-12、CHOP蛋白表达。结果与正常组比较,G组细胞活性和ATF6、IRE1 mRNA以及Caspase-12、CHOP蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01),INS水平显著升高(P<0.01)。与G组比较,GCo组细胞活性显著降低(P<0.01),INS水平和ATF6、IRE1 mRNA以及Caspase-12、CHOP蛋白表达水平均明显上调(P<0.05,P<0.01)。与GC组比较,GX组的细胞活性明显升高(P<0.05),ATF6、IRE1mRNA以及Caspase-12蛋白表达水平均明显上调(P<0.05,P<0.01),但INS水平、CHOP蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与GCoC组比较,GCoX组的细胞活性、INS水平明显升高(P<0.05),IRE1mRNA以及Caspase-12、CHOP蛋白表达水平明显下降(P<0.05,P<0.01),但ATF6mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论高浓度葡萄糖和CORT能降低应激损伤状态糖尿病RINm5f细胞的活性,升高INS水平,加重胰岛素抵抗(IR)程度。逍遥散含药血清能缓解细胞IR水平,其作用机制可能与调控内质网应激(ERS)相关。 展开更多
关键词 逍遥散 含药血清 糖尿病 大鼠胰岛β细胞瘤细胞 慢性应激 胰岛素分泌 内质网应激
二至丸抗大鼠肾细胞衰老的GCMS代谢组学研究 预览
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作者 徐佳 刘其南 +4 位作者 翟园园 冯丽 谢彤 姚卫峰 张丽 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期458-464,共7页
目的研究D-半乳糖诱导的衰老大鼠肾细胞(NRK)内源性代谢物的变化,寻找与衰老有关的代谢生物标志物,探讨二至丸对衰老模型的调节作用及其抗衰老的可能机制.方法采用D-半乳糖复制NRK细胞衰老模型,借助气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,对各... 目的研究D-半乳糖诱导的衰老大鼠肾细胞(NRK)内源性代谢物的变化,寻找与衰老有关的代谢生物标志物,探讨二至丸对衰老模型的调节作用及其抗衰老的可能机制.方法采用D-半乳糖复制NRK细胞衰老模型,借助气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,对各组细胞样本进行测定,采用Kruskal-Wallis非参数检验及Dunn's多重比较进行单变量统计分析来筛选差异性代谢物.结果经PLS-DA模式识别分析,对照组、模型组和EZW组细胞样本能够得到很好的区分,共鉴定出31种潜在生物标志物,二至丸含药血清给药后衰老NRK细胞胞内的内源性代谢物水平发生不同程度的回调.结论二至丸可以使D-半乳糖诱导的衰老NRK细胞胞内的异常代谢有所恢复,其治疗作用可能与机体内31个代谢物及10条相关代谢通路的调节有关. 展开更多
关键词 衰老 二至丸 细胞代谢组学 GC-MS 大鼠肾细胞 含药血清
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不同配比人参总皂苷、丹皮总苷、丹皮酚含药血清对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的改善作用研究 预览
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作者 张留记 王建霞 +1 位作者 李开言 屠万倩 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第9期1209-1213,共5页
目的:研究不同配比的人参总皂苷(TGG)、丹皮总苷(TGM)、丹皮酚含药血清对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的改善作用,筛选最优配比并探讨其作用机制。方法:将大鼠随机分为空白组(蒸馏水)、TGG组(TGG,2.025g/kg)、TGM组(TGM,4.05g... 目的:研究不同配比的人参总皂苷(TGG)、丹皮总苷(TGM)、丹皮酚含药血清对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的改善作用,筛选最优配比并探讨其作用机制。方法:将大鼠随机分为空白组(蒸馏水)、TGG组(TGG,2.025g/kg)、TGM组(TGM,4.05g/kg)、丹皮酚组(丹皮酚,1.08g/kg),每组12只,每天灌胃相应药物2次,连续7d,末次给药后1h,腹主动脉取血,制备含药血清。以HUVEC细胞存活率为评价指标,人参总皂苷、丹皮总苷、丹皮酚含药血清不同配比为考察因素设计L(934)正交试验,优选3种含药血清的最优配比;将HUVEC细胞分为空白组、模型组、TGG组、TGM组、丹皮酚组、最优配比组,除空白组细胞加入相应培养基外,其余各组均采用1.2mmol/LH2O2诱导HUVEC损伤,然后TGG组(含药血清体积分数为0.0005%)、TGM组(含药血清体积分数为0.0005%)、丹皮酚组(含药血清体积分数为1%)、最优配比组再加入相应药物含药血清进行干预。采用微板法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的水平。结果:含药血清最优配比为TGG0.0005%、TGM0.0005%、丹皮酚1%。与空白组比较,模型组细胞LDH、ET-1水平更高(P<0.01),NO水平更低(P<0.05);与模型组比较,TGG、TGM、最优配比组细胞NO水平更高(P<0.01),LDH、ET-1水平更低(P<0.05或P<0.01);与TGG组、TGM组、丹皮酚组比较,最优配比组细胞LDH水平更低(P<0.05或P<0.01),NO水平更高(P<0.05或P<0.01)。结论:TGG、TGM、丹皮酚联合应用对H2O2诱导的HUVEC损伤具有良好的改善作用,其作用机制与降低LDH、ET-1水平和升高NO水平有关。 展开更多
关键词 人参总皂苷 丹皮总苷 丹皮酚 联合应用 含药血清 配比 人脐静脉内皮细胞
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骨康方含药血清对新生大鼠成骨细胞增殖的影响 预览
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作者 李强 刘霞 +6 位作者 陈勇 闫威 范龙坤 马超 刘国林 郭燕军 王沐 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第3期20-23,33共5页
目的 探讨骨康方含药血清对大鼠成骨细胞增殖的影响。方法 选取30只健康雌性大鼠,按照随机数字表法分为空白对照组、阳性对照组和骨康组,每组10只。空白对照组用于制备空白血清,阳性对照组用于制备骨化三醇含药血清,骨康组用于制备骨康... 目的 探讨骨康方含药血清对大鼠成骨细胞增殖的影响。方法 选取30只健康雌性大鼠,按照随机数字表法分为空白对照组、阳性对照组和骨康组,每组10只。空白对照组用于制备空白血清,阳性对照组用于制备骨化三醇含药血清,骨康组用于制备骨康方含药血清。另选1日龄雄性大鼠5只制备成骨细胞,分别用3组血清进行培养。实验结束后比较3组成骨细胞的增殖及周期情况。结果 5%和10%含药血清培养时,阳性对照组和骨康组培养第7天时成骨细胞增值率最高( P <0.05)。20%含药血清培养时,阳性对照组和骨康组培养第5天时成骨细胞增值率最高( P <0.05)。10%含药血清培养时,骨康组对成骨细胞增殖的平均影响率较阳性对照组高( P <0.05)。不同浓度含药血清培养时,阳性对照组和骨康组处于G0/G1期比例低于空白对照组,而S期和G2/M期比例以及PI均高于空白对照组( P <0.05);且骨康组较阳性对照组变化更为明显( P <0.05)。阳性对照组和骨康组在20%含药血清培养时处于G0/G1期比例均最低,而S期和G2/M期比例以及PI最高( P <0.05)。结论 骨康方含药血清对成骨细胞的增殖具有促进作用,且高浓度作用更为显著。 展开更多
关键词 骨康方 含药血清 大鼠 成骨细胞 细胞增殖
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栀子—刺五加含药血清对大鼠海马神经元发生的影响
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作者 徐向东 徐向青 +1 位作者 孙灵芝 李恃俊 《中国中西医结合杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期997-1001,共5页
目的观察栀子—刺五加含药血清对体外高浓度皮质酮作用下大鼠海马神经元发生的影响。方法 35只雄性Wistar大鼠按随机数字表分为栀子组(0.23g/d)、刺五加组(0.38g/d)、栀子—刺五加组(栀子0.23g/d,刺五加0.38g/d)、氟西汀组(0.51m... 目的观察栀子—刺五加含药血清对体外高浓度皮质酮作用下大鼠海马神经元发生的影响。方法 35只雄性Wistar大鼠按随机数字表分为栀子组(0.23g/d)、刺五加组(0.38g/d)、栀子—刺五加组(栀子0.23g/d,刺五加0.38g/d)、氟西汀组(0.51mg/d)、空白组,每组7只。连续灌胃10天后取含药血清和空白大鼠血清。体外建立高浓度皮质酮抑制大鼠海马神经元发生模型。采用MTT法测定神经元存活率,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记海马神经元增殖,神经元特异性烯醇化酶(NSE)标记海马神经元生长。结果与空白组及栀子组比较,栀子—刺五加组、刺五加组、氟西汀组海马神经元存活率明显提高(P〈0.05),海马神经元中BrdU及NSE阳性细胞数明显增加(P〈0.05)。结论栀子—刺五加含药血清和刺五加含药血清有利于海马神经元在高皮质激素环境下的存活、增殖、生长,具有促进海马神经元发生的作用。 展开更多
关键词 栀子 刺五加 含药血清 海马神经元发生
豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用 被引量:1
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作者 李慧玲 刘天竹 +2 位作者 王丹 关云霞 张秋华 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2018年第1期89-92,共4页
目的:探讨豆茶决明冲剂含药血清对前脂肪细胞增殖和分化的影响及其机制。方法:制备豆茶决明冲剂含药血清,培养3T3-L1前脂肪细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)对3T3-L1前脂肪细胞增殖过程的影响;... 目的:探讨豆茶决明冲剂含药血清对前脂肪细胞增殖和分化的影响及其机制。方法:制备豆茶决明冲剂含药血清,培养3T3-L1前脂肪细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)对3T3-L1前脂肪细胞增殖过程的影响;采用油红O脂肪染色观察及评价细胞分化情况;异丙醇萃取法、甘油三酯(TG)试剂盒检测分析不同浓度豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质合成的影响;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测关键转录因子CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPβ、C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)mRNA表达水平;采用Western blot法检测关键转录因子C/EBPβ、C/EBPα、PPARγ蛋白表达水平。结果:与对照组(Control)相比,0.9g/kg豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)对3T3-L1前脂肪细胞增殖无显著性影响;采用"鸡尾酒法"成功诱导前脂肪细胞成脂分化为成熟脂肪细胞,豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)干预前脂肪细胞,分化后胞浆中脂滴数量显著性降低。脂滴中TG含量显著性下降,C/EBPβ、C/EBPα、PPARγmRNA和蛋白表达显著性降低。结论:豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化有抑制作用,其分子机制可能与下调PPARγ、C/EBPα和C/EBPβmRNA和蛋白表达相关。 展开更多
关键词 豆茶决明 3T3-L1前脂肪细胞 过氧化物酶体增殖物活化受体Γ 含药血清
通脉降浊煎剂含药血清对泡沫细胞胆固醇流出率的影响
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作者 田苗 王凤荣 +2 位作者 张冰 王帅 刘英楠 《中国中西医结合杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期1112-1117,共6页
目的研究通脉降浊煎剂含药血清(TDMS)对泡沫细胞胆固醇流出率的影响及可能机制。方法采用50mg/L0x-LDL诱导巨噬细胞48h,建立巨噬细胞源泡沫细胞模型,添加TDMS,将细胞分为对照组(正常巨噬细胞),ox-LDL组(50mg/Lox-LDL),β-... 目的研究通脉降浊煎剂含药血清(TDMS)对泡沫细胞胆固醇流出率的影响及可能机制。方法采用50mg/L0x-LDL诱导巨噬细胞48h,建立巨噬细胞源泡沫细胞模型,添加TDMS,将细胞分为对照组(正常巨噬细胞),ox-LDL组(50mg/Lox-LDL),β-环糊精(β-CD)组(50mg/L ox-LDL+10mmoI/L β—CD),正常血清(CS)组(50mg/L ox-LDL+等体积正常血清),TDMS组(50mg/L 0x-LDL+5% TDMS)。检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇含量和细胞胆固醇流出率;采用Western blot方法检测细胞内三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达;Real-time PCR方法检测细胞内ABCA1、miR-33a、miR-33b mRNA表达。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞内总胆固醇、游离胆固醇含量和胆固醇流出率均增加(P〈0.05,P〈O.01),ABCA1 mRNA和蛋白表达水平降低(P〈0.01),miR-33a和miR-33b mRNA表达水平均升高(P〈0.01)。与ox-LDL组比较,β-CD组与TDMS组细胞内总胆固醇和游离胆固醇含量均下降,胆固醇流出率增大(P〈0.05,P〈0.01),ABCA1 mRNA和蛋白表达水平升高(P〈0.01),细胞内miR-33a和miR-33b mRNA表达水平均降低(P〈O.01)。结论TDMS通过调节miR-33a/b和ABCA1表达,从而提高胆固醇流出率,降低泡沫细胞内胆固醇含量。 展开更多
关键词 通脉降浊煎剂 含药血清 泡沫细胞 胆固醇 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 miR-33a/b基因
补肾方药干预过表达、沉默sFRP1的UMR106细胞增殖情况及β-catenin的影响 预览
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作者 柴生颋 谢平金 +3 位作者 史桐雨 万雷 刘海全 林勇 《中国骨质疏松杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期984-988,共5页
目的针对分泌型卷曲相关蛋白1(s FRP1)基因构建沉默及过表达重组腺病毒载体并结合补肾方药含药血清,观察其对大鼠骨肉瘤细胞(UMR106细胞)增殖和β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法构建s FRP1沉默及过表达重组腺病毒载体,制... 目的针对分泌型卷曲相关蛋白1(s FRP1)基因构建沉默及过表达重组腺病毒载体并结合补肾方药含药血清,观察其对大鼠骨肉瘤细胞(UMR106细胞)增殖和β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法构建s FRP1沉默及过表达重组腺病毒载体,制备补肾方药含药血清,将培养好的UMR106细胞分为空白血清+空病毒组、含药血清+空病毒组、空白血清+SFRP1沉默组、含药血清+SFRP1沉默组、空白血清+SFRP1过表达组、含药血清+SFRP1过表达组6组,根据组别不同进行干预,并观察细胞增殖及检测β-catenin蛋白表达。结果与空白血清+空病毒组比较,含药血清+空病毒组、空白血清+SFRP1沉默组、含药血清+SFRP1沉默组的细胞增殖、β-catenin蛋白表达均显著升高。空白血清+SFRP1过表达组、含药血清+SFRP1过表达组的细胞增殖活性、β-catenin蛋白表达降低。其中含药血清+SFRP1沉默组、空白血清+SFRP1过表达组变化最明显。结论沉默s FRP1、补肾方药含药血清可提高UMR106细胞增殖以及β-catenin表达,尤以两者同时干预时的作用最强,而过表达s FRP1则降低UMR106细胞增殖活性,补肾方药含药血清某种程度上可抑制s FRP1的过表达。 展开更多
关键词 分泌型卷曲相关蛋白1 腺病毒 补肾方药 大鼠骨肉瘤细胞 含药血清
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骨质疏松肾阳虚、肾阴虚证型下右归丸含药血清对大鼠成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量:2
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作者 章建华 邢婧 +1 位作者 范连霞 尹华 《中华中医药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期3018-3022,共5页
目的:研究骨质疏松症(OP)肾阳虚和肾阴虚证型下右归丸含药血清对大鼠成骨细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)表达的作用,及对成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin、ERK1、ERK2mRNA及蛋白表达的作用。方法:分别用OP... 目的:研究骨质疏松症(OP)肾阳虚和肾阴虚证型下右归丸含药血清对大鼠成骨细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)表达的作用,及对成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin、ERK1、ERK2mRNA及蛋白表达的作用。方法:分别用OP肾阳虚、OP肾阴虚及OP组(对照组)所得的右归丸含药血清及空白血清干预成骨细胞,采用MTS法检测细胞增殖情况,ELISA法检测ALP表达,RT-PCR法检测ERK1、ERK2、β-catenin mRNA的表达,Western Blot法检测ERK1、ERK2、β-catenin蛋白的表达。结果:OP肾阳虚证型下右归丸含药血清在促进成骨细胞增殖、ALP表达以及对成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin、ERK1、ERK2 mRNA及蛋白表达方面比OP肾阴虚证型下右归丸含药血清的作用更强。结论:与"右归丸补肾阳"的中医理论相吻合,为临床辨证治疗OP提供科学依据。 展开更多
关键词 右归丸 成骨细胞 含药血清 骨质疏松症肾阳虚 肾阴虚 WNT/Β-CATENIN信号通路 ERK1/2信号通路
杞精明目汤含药血清对结膜松弛症MAPK信号通路的影响 预览
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作者 贾元玲 项敏泓 +3 位作者 黄丽 李青松 文杭 詹月萍 《中国中医眼科杂志》 2018年第2期73-80,共8页
目的探讨杞精明目汤含药血清对结膜松弛症(CCh)成纤维细胞表达丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的影响及其作用机制。方法体外培养结膜松弛症结膜成纤维细胞并鉴定,分为CCh对照组、CCh+20%含药血清组(含药血清组)、CCh+20%无药血清组... 目的探讨杞精明目汤含药血清对结膜松弛症(CCh)成纤维细胞表达丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的影响及其作用机制。方法体外培养结膜松弛症结膜成纤维细胞并鉴定,分为CCh对照组、CCh+20%含药血清组(含药血清组)、CCh+20%无药血清组(无药血清组),予20%的含药或无药血清干预48 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测p38MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)及其磷酸化水平的光密度值,Western Blot检测p38 MAPK、JNK、ERK蛋白及其磷酸化水平,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测p38 MAPK、JNK、ERK的m RNA表达,并行统计学分析。结果 ELISA结果显示:含药血清组较CCh对照组p38 MAPK、p-p38 MAPK光密度值明显降低(P〈0.05),而无药血清组与CCh对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。含药血清组较CCh对照组JNK光密度值降低(P〈0.05),而无药血清组与CCh对照组差异无统计学意义(P〉0.05);含药血清组、无药血清组较CCh对照组p-JNK光密度值下降(P〈0.05)。含药血清组较CCh对照组ERK、p-ERK光密度值下降,差异有统计学意义(P〈0.05);而无药血清组与CCh对照组差异均无统计学意义(P〉0.05)。Western Blot结果显示:含药血清组、无药血清组较CCh对照组p-p38MAPK蛋白表达量明显下降(P〈0.05),且20%含药血清的p38 MAPK蛋白磷酸化水平下调更为明显。含药血清组、无药血清组与CCh对照组JNK、p-JNK蛋白表达量差异无统计学意义(P〉0.05)。含药血清组、无药血清组与CCh对照组ERK蛋白表达量差异无统计学意义(P〉0.05);含药血清组、无药血清组较CCh对照组p-ERK蛋白表达量均明显降低(P〈0.05),其中含药血清组的ERK蛋白磷酸化水平下调更为明显。RT-PCR结果显示:无药血清组和含药血清组较CCh对照组p38 MAPK、JNK、ERK的m RNA表达水平均显著下降,差异有统计学意义(P〈0.05 展开更多
关键词 结膜松弛症 丝裂原活化蛋白激酶 杞精明目汤 含药血清 成纤维细胞
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野大黄含药血清体外抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒活性试验 预览
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作者 蔡丙严 田其真 +2 位作者 刘莉 郝福星 戴建华 《中国动物传染病学报》 北大核心 2018年第6期34-41,共8页
为了研究中药野大黄(中药提取物)含药血清体外抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒活性,探讨其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用机理。取“野大黄”药液,生药含量为2g/mL,对照药物利巴韦林终浓度为0.025g/mL,分别灌胃给药,饲喂SD大鼠,制备各组含药... 为了研究中药野大黄(中药提取物)含药血清体外抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒活性,探讨其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用机理。取“野大黄”药液,生药含量为2g/mL,对照药物利巴韦林终浓度为0.025g/mL,分别灌胃给药,饲喂SD大鼠,制备各组含药血清。采用MTT法和细胞形态观察法相结合,测定含药血清对Marc-145细胞的最大无毒稀释度。将含药血清倍比稀释至1∶4、1∶8、1∶16三种浓度,采用三种加药方式,以细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)观察与MTT染色检测OD492值,计算含药血清病毒抑制率为评价指标,观察野大黄含药血清体外抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒活性。结果显示,野大黄含药血清体外抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒活性最显著的是含药血清与病毒混合后加入方式,在1∶4稀释度时,野大黄含药血清组与利巴韦林对照含药血清组OD492均值差异显著(P<0.05),两者对猪繁殖与呼吸综合征病毒抑制率分别为83.51%、73.07%,相差约10%。野大黄含药血清组三种稀释度镜检观察Marc-145细胞均无CPE出现,细胞单层完好,而利巴韦林对照含药血清在1∶16稀释度时病毒抑制率为63.55%,且出现CPE,细胞单层遭到破坏、部分细胞变圆、脱落。结果表明,野大黄含药血清体外具有显著的抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒活性,以同时给药时具有直接杀灭猪繁殖与呼吸综合征病毒作用,有望作为抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物进行开发。 展开更多
关键词 野大黄 含药血清 体外抑制 猪繁殖与呼吸综合征病毒
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四君子汤含药血清抑制晶状体上皮细胞凋亡的实验研究 预览 被引量:1
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作者 胡艳红 李颖 +5 位作者 林淑娜 李四化 胡俊 陈胜 冯春燕 柯发杰 《眼科新进展》 北大核心 2018年第7期630-633,共4页
目的 观察四君子汤含药血清对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)凋亡的抑制作用,从而探讨四君子汤防治老年性白内障的机制。方法 30只SD大鼠随机分为2组,分别用四君子汤(1.725 g·kg-1·d-1)和生理盐水灌胃,用... 目的 观察四君子汤含药血清对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)凋亡的抑制作用,从而探讨四君子汤防治老年性白内障的机制。方法 30只SD大鼠随机分为2组,分别用四君子汤(1.725 g·kg-1·d-1)和生理盐水灌胃,用药7 d后经腹主动脉采血,离心提取四君子汤含药血清和空白血清冻存备用。细胞实验分为4组:阴性对照组、过氧化氢组(300μmol·L-1过氧化氢作用4 h)、空白血清组(300μmol·L-1过氧化氢作用4 h后加入体积分数20%空白血清作用12 h)和四君子汤含药血清组(300μmol·L-1过氧化氢作用4 h后加入体积分数20%四君子汤含药血清作用12 h),流式细胞仪检测HLEC细胞周期;透射电子显微镜观察各组HLEC超微结构的改变。结果 流式细胞仪检测结果示:过氧化氢组G1期细胞比例为(67.127±2.615)%,较阴性对照组明显增加,S期细胞比例为(24.603±2.547)%、G2期细胞比例为(8.270±1.149)%,均较阴性对照组减少,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。四君子汤含药血清组G1期细胞比例为(41.517±20.008)%,较过氧化氢组明显减少,S期细胞比例为(38.423±10.213)%、G2期细胞比例为(20.060±11.004)%,均较过氧化氢组明显增加,差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。透射电子显微镜结果显示:阴性对照组胞膜完整,各细胞器结构正常;过氧化氢组细胞表面微绒毛消失,染色质凝集成块分布于核膜下,核膜欠完整,细胞质内可见溶酶体;空白血清组细胞质内空泡增多,线粒体、内质网等细胞器结构仍可见;四君子汤含药血清组胞膜完整,细胞质内可见少许空泡,线粒体、内质网等细胞器结构清晰。结论 四君子含药血清能有效抑制过氧化氢诱导的HLEC凋亡,这可能是四君子汤防治老年性白内障的机制之一。 展开更多
关键词 老年性白内障 四君子汤 含药血清 人晶状体上皮细胞 细胞凋亡
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青娥方含药血清对破骨细胞前体RAW 264.7细胞FAK/Src/p130Cas通路及上清液炎症因子的影响
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作者 郭世明 郑亚明 +3 位作者 陈盛 吴银生 黄美雅 林燕萍 《中国中西医结合杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期85-90,共6页
目的 观察青娥方含药血清对破骨细胞前体RAW 264.7细胞FAK/Src/p130Cas通路相关基因蛋白表达及上清液炎症因子的影响。方法 制备青娥方含药血清和生理盐水血清,分别干预体外培养的破骨细胞前体RAW 264.7细胞。干预12 h和24 h后,提取mRN... 目的 观察青娥方含药血清对破骨细胞前体RAW 264.7细胞FAK/Src/p130Cas通路相关基因蛋白表达及上清液炎症因子的影响。方法 制备青娥方含药血清和生理盐水血清,分别干预体外培养的破骨细胞前体RAW 264.7细胞。干预12 h和24 h后,提取mRNA和蛋白,荧光定量PCR(q PCR)检测FAK/Src/p130Cas及下游信号关键因子CRK、C3G和RAS mRNA表达的变化,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测FAK/Src/p130Cas及下游信号关键因子CRK、C3G和RAS蛋白表达的变化;应用ELISA法检测细胞上清液IL-6、TNF-α、PGE2含量。结果 与同期生理盐水血清组比较,青娥方含药血清组FAK、Src、p130Cas、CRK、C3G和RAS的RNA和蛋白表达均明显减少(P&lt;0.05,P&lt;0.01),以FAK、Src、p130Cas下降最为显著,而细胞上清液炎症因子IL-6,TNF-α和PGE2含量明显下降(P&lt;0.05,P&lt;0.01)。结论 青娥方含药血清能够下调FAK/Src/p130Cas及其下游信号分子的表达,抑制RAW 264.7细胞分泌炎症因子,从而抑制RANKL+MCSF诱导的破骨细胞分化。 展开更多
关键词 青娥方 含药血清 RAW 264.7 FAK/Src/p130Cas通路 炎症因子
宁夏密点麻蜥含药大鼠血清对人胃癌BCG-823细胞凋亡的影响 预览 被引量:3
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作者 侯卓成 白鲁根 李卫强 《世界华人消化杂志》 CAS 2017年第1期43-48,共6页
目的研究宁夏密点麻蜥高、中、低剂量对人胃癌(gastric cancer,GC)BCG-823细胞增殖凋亡的影响,同时测定细胞P53、Bax、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)及E-cad蛋白表达水平,阐明宁夏密点麻蜥对GC细胞的干预作用... 目的研究宁夏密点麻蜥高、中、低剂量对人胃癌(gastric cancer,GC)BCG-823细胞增殖凋亡的影响,同时测定细胞P53、Bax、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)及E-cad蛋白表达水平,阐明宁夏密点麻蜥对GC细胞的干预作用及其机制.方法50只SPF级♂SD大鼠,随机分为生理盐水对照组(S组),宁夏密点麻蜥高(XH组)、中(X M组)、低(X L组)剂量组、华蟾素片对照组(HC组),共5组,每组10只.各组用生理盐水及相应浓度宁夏密点麻蜥药物灌胃1 wk后处死,腹主动脉取血,离心,制备含药血清.用MTT法检测药物血清对人GC BCG-823细胞增殖活性的影响;用Western blot检测方法测定GC细胞P53、Bax、MMP-9及E-cad蛋白表达水平,并进行统计分析.结果含药大鼠血清各干预组OD均值小于生理盐水对照组;宁夏密点麻蜥高、中、低剂量组之间比较,P〈0.05;P53、Bax以及E-cad蛋白表达水平与生理盐水组比显著升高,MMP-9蛋白表达水平与生理盐水组比降低.随着血清药物浓度的增高,MMP-9的表达呈依赖性降低,P53、Bax以及E-cad的表达呈依赖性增强.结论宁夏密点麻蜥能影响P53、Bax、MMP-9及E-cad蛋白表达水平,抑制人GC BCG-823细胞增殖,并诱导细胞凋亡,具有良好的抗癌作用. 展开更多
关键词 宁夏密点麻蜥 含药血清 人胃癌细胞 细胞凋亡
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龟鹿二仙胶诱导大鼠骨髓基质干细胞成骨分化作用及对Wnt通路的影响 被引量:3
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作者 牛素生 李楠 +2 位作者 张燕 刘俊宁 林建华 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期72-78,共7页
目的 观察龟鹿二仙胶含药血清对SD大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)成骨分化的作用及其对Wnt信号通路相关因子的影响。方法 100只3月龄雌性SD大鼠经腹腔入路切除双侧卵巢,按随机数字表法分为低剂量组... 目的 观察龟鹿二仙胶含药血清对SD大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)成骨分化的作用及其对Wnt信号通路相关因子的影响。方法 100只3月龄雌性SD大鼠经腹腔入路切除双侧卵巢,按随机数字表法分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白组,每组25只。按体表面积换算龟鹿二仙胶剂量并灌胃给药,连续7天后腹主动脉采血制备含药血清。1月龄SD大鼠全骨髓贴壁法分离BMMSCs,流式细胞法(flow cytometry,FCM)法检测F3代细胞CD45和CD90表达;不同浓度龟鹿二仙胶含药血清干预F3代BMMSCs 72 h后,FCM法检测细胞周期的影响并计算增殖指数,确定最佳干预浓度。F3代细胞分为FBS组、空白组、龟鹿二仙胶组和经典诱导组,诱导培养21天后,茜素红(alizarin red staining,ARS)染色法观察BMMSCs成骨分化,RT-PCR检测成骨分化相关基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素(osteocalcin,OC)mRNA的表达;RT-PCR和Western blot检测Wnt5a、β-连环蛋白(β-catenin)、淋巴样增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,Lef-1)mRNA和蛋白的表达。结果 F3代细胞CD45阳性表达率为1.46%±0.23%,CD90阳性表达率为96.97%±3.21%;浓度为10%的龟鹿二仙胶中剂量组含药血清能显著促进BMMSCs增殖;龟鹿二仙胶组和经典诱导组ARS染色可见橘红色钙结节。与空白组及FBS组比较,龟鹿二仙胶组和经典诱导组OC和ALP mRNA表达上调(P〈0.05),Wnt5a、β-catenin mRNA和蛋白表达上调(P〈0.05);与空白组、FBS组和经典诱导组比较,龟鹿二仙胶组Lef-1 mRNA和蛋白表达均升高(P〈0.05);与FBS组和空白组比较,经典诱导组Lef-1蛋白表达上调(P〈0.05)。结论 龟鹿二仙胶含药血清具有促进BMMSCs增殖,诱导BMMSCs向成骨细胞分化的作用,其机制可能与调控Wnt信号通路相关因子的表达有关。 展开更多
关键词 龟鹿二仙胶 含药血清 骨髓基质干细胞 成骨分化 WNT信号通路
骨质疏松肾阳虚和肾阴虚证型下左归丸含药血清干预成骨细胞ERK1/2,Wnt/β-catenin信号通路的研究 被引量:2
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作者 章建华 邢婧 +1 位作者 范连霞 尹华 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2017年第20期3983-3989,共7页
该文研究骨质疏松(OP)肾阳虚和肾阴虚证型下左归丸含药血清对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)表达及对成骨细胞ERKl/2,Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin,ERKl,ERK2mRNA及蛋白表达的作用。采用手术去卵巢法造成大鼠骨... 该文研究骨质疏松(OP)肾阳虚和肾阴虚证型下左归丸含药血清对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)表达及对成骨细胞ERKl/2,Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin,ERKl,ERK2mRNA及蛋白表达的作用。采用手术去卵巢法造成大鼠骨质疏松模型,并在手术10周后,分别注射氢化可的松、灌胃甲状腺素造成大鼠OP。肾阳虚及OP肾阴虚模型;用新生24h乳鼠颅骨体外培养得成骨细胞,以碱性磷酸酶和茜素红染色进行鉴定,分别用OP肾阳虚、OP肾阴虚及OP组(对照组)所得的左归丸含药血清、空白血清干预成骨细胞,采用MTS法检测细胞增殖情况,ELISA法检测ALP表达,RT-PCR法检测ERKl/2,β-cateninmRNA的表达,Westernblot法检测ERKl/2,β-catenin蛋白表达。结果表明:OP肾阴虚证型下左归丸含药血清在促进成骨细胞增殖、ALP表达、成骨细胞ERKl/2,Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin,ERKl,ERK2mRNA及蛋白表达方面比OP肾阳虚证型下左归丸含药血清的作用更强。这与“左归丸滋肾阴”的中医理论相吻合,为临床辩证治疗骨质疏松症提供科学依据。左归丸通过ERKl/2和Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞的增殖与分化,可能是左归丸防治骨质疏松。肾阴虚证的机制之一。 展开更多
关键词 左归丸 成骨细胞 含药血清 骨质疏松肾阳虚 骨质疏松肾阴虚 WNT/Β-CATENIN信号通路 ERK1/2信号通路
芪冬活血饮药物血清对脂多糖刺激下人肺微血管内皮细胞E-selectin和IP-10表达的影响
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作者 马春芳 王寅 +1 位作者 孟丽 蔡宛如 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期2251-2253,共3页
目的:研究芪冬活血饮药物血清对人肺微血管内皮细胞(HPMEC)表达E-selectin和IP-10的影响。方法:将细胞随机分为5组,空白组,LPS组,正常大鼠血清+LPS组,5%药物血清+LPS组,10%药物血清+LPS组,用不同浓度的药物血清培养HPMEC 4h后,... 目的:研究芪冬活血饮药物血清对人肺微血管内皮细胞(HPMEC)表达E-selectin和IP-10的影响。方法:将细胞随机分为5组,空白组,LPS组,正常大鼠血清+LPS组,5%药物血清+LPS组,10%药物血清+LPS组,用不同浓度的药物血清培养HPMEC 4h后,再加入1μg/mL LPS刺激HPMEC,用RT-PCR方法检测E-selectin和IP-10的mRNA表达,ELISA法检测细胞上清液中E-selectin和IP-10蛋白水平。结果:LPS刺激HPMEC细胞后E-selectin和IP-10的表达和分泌显著高于空白对照(P〈0.01),而芪冬活血饮药物血清则能降低该类细胞因子的表达和释放(P〈0.05)。结论:芪冬活血饮药物血清能明显抑制HPMEC的活化,降低E-selectin和IP-10的释放,减轻炎性反应损伤。 展开更多
关键词 芪冬活血饮 药物血清 人肺微血管内皮细胞 细胞因子
补肾祛斑颗粒抑制细胞内黑色素合成机制 被引量:1
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作者 李峰 汤慧 +4 位作者 李世梅 程晓峰 陈艳秋 白雯 马赞 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1373-1377,共5页
目的 观察补肾祛斑颗粒抑制细胞内黑色素合成的分子机制。方法 20只SPF级雌性SD大鼠完全随机分为生理盐水组(对照组)、补肾祛斑颗粒高、中、低剂量组,每组5只。高、中、低剂量组分别灌胃补肾祛斑颗粒4.8、2.4、1.2 g/kg(分别相当于... 目的 观察补肾祛斑颗粒抑制细胞内黑色素合成的分子机制。方法 20只SPF级雌性SD大鼠完全随机分为生理盐水组(对照组)、补肾祛斑颗粒高、中、低剂量组,每组5只。高、中、低剂量组分别灌胃补肾祛斑颗粒4.8、2.4、1.2 g/kg(分别相当于临床剂量24、12、6倍),2次/日,共3日。提取含药血清。RT-PCR检测G蛋白偶联黑皮质素1受体(melanocortin 1 receptor,MC1R)、小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、酪氨酸酶(tyrosinase,TYP)、酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase-related protein 1,TYRP1)及酪氨酸酶相关蛋白2(tyrosinase-related protein 2,TYRP2)mRNA水平的表达,Wertern-blot检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(phosphorylated-extracellular regulated MAP kinase1/2,p-ERK)、TYP、TYRP1及TYRP2蛋白水平的表达,Na OH溶解法测定细胞内黑色素含量,多巴色素法测定细胞TYP活性,MTT检测细胞活性。结果与对照组比较,各给药组MC1R、MITF、TYP、TYRP1及TYRP2 mRNA水平表达降低(P〈0.05),TYP、TYRP1、及TYRP2蛋白水平表达降低(P〈0.05),细胞内黑色素含量及TYP活性降低(P〈0.05),p-ERK及细胞增殖活力升高(P〈0.05);PD98059抑制ERK后,各给药组MC1R、MITFmRNA水平表达差异无统计学意义(P〉0.05)。与对照组比较,高剂量组TYP、TYRP1及TYRP2 mRNA表达降低(P〈0.05),p-ERK、TYP、TYRP1及TYRP2蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05),细胞内黑色素含量、TYP活性及细胞增殖活力差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 补肾祛斑颗粒可能通过上调p-ERK来抑制细胞内TYP及其相关蛋白表达,抑制细胞内黑色素合成。 展开更多
关键词 黄褐斑 补肾祛斑颗粒 含药血清 酪氨酸酶及其相关蛋白 黑色素
HepG2.2.15用于中药复方治疗乙型肝炎研究的相关问题探讨 被引量:1
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作者 陈少芳 万石川 王章林 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1265-1267,共3页
本课题组前期完成了经方小柴胡汤含药血清对HepG2.2.15细胞干预作用的相关研究,在HepG2.2.15用于中药复方治疗乙型肝炎研究过程中摸索出一些经验,现就此细胞培养及相关血清药理学运用等方面内容与心得进行回顾与总结,以期为同仁提供参... 本课题组前期完成了经方小柴胡汤含药血清对HepG2.2.15细胞干预作用的相关研究,在HepG2.2.15用于中药复方治疗乙型肝炎研究过程中摸索出一些经验,现就此细胞培养及相关血清药理学运用等方面内容与心得进行回顾与总结,以期为同仁提供参考与借鉴。 展开更多
关键词 HEP G2.2.15细胞 中药复方 含药血清 乙型肝炎
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