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非洲猪瘟病毒p72蛋白抗原表位预测分析及多表位疫苗的构建 认领
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作者 高瞻 邵军军 +4 位作者 常艳燕 张光磊 孔洁 葛苏丹 常惠芸 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期13-17,共5页
为了预测非洲猪瘟病毒2018/AnhuiXCGQ株p72蛋白的T、B淋巴细胞抗原表位,并完成多表位疫苗的构建。试验采用生物信息学技术ExPASy、SOMPA、PSIPRED Server、DNASTAR及Phyre对该蛋白的理化性质、二级结构、三级结构进行初步预测分析,运用A... 为了预测非洲猪瘟病毒2018/AnhuiXCGQ株p72蛋白的T、B淋巴细胞抗原表位,并完成多表位疫苗的构建。试验采用生物信息学技术ExPASy、SOMPA、PSIPRED Server、DNASTAR及Phyre对该蛋白的理化性质、二级结构、三级结构进行初步预测分析,运用ABCpred Prediction、Scratch、NetCTL及IEDB预测其T、B淋巴细胞表位,最终设计构建得到多表位疫苗。依据各生物学方法分析预测,得到B淋巴细胞优势表位:110~120、77~88、45~55、12~18、27~37位置;T淋巴细胞优势表位298~307、520~531、203~212位置,并设计得到T、B淋巴细胞表位表达盒,ExPASy预测表示该表位盒为亲水性蛋白。以此多表位表达盒为目的基因,以pET-28a构建设计多表位疫苗。表明该蛋白有多个潜在抗原表位,并可依据预测得到的蛋白二级结构、三级结构等参数信息及多个预测抗原位点构建ASFV多表位疫苗,表达纯化用于免疫试验。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 生物信息学 抗原表位 p72 多表位疫苗 预测
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文章速递奶牛妊娠相关糖蛋白BoPAG7和BoPAG8的表达及其结构与功能预测 认领
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作者 杨亚军 何金科 +3 位作者 宋胜男 杨宁宁 陈创夫 王震 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第8期56-63,共8页
试验旨在获得高效表达并且抗原性较好的奶牛妊娠相关糖蛋白BoPAG7和BoPAG8,并对BoPAG7和BoPAG8结构和功能进行生物信息学预测分析。通过PCR扩增荷斯坦奶牛BoPAG7和BoPAG8基因,并将其分别连接在表达载体上,转化至大肠杆菌(BL21)中表达,通... 试验旨在获得高效表达并且抗原性较好的奶牛妊娠相关糖蛋白BoPAG7和BoPAG8,并对BoPAG7和BoPAG8结构和功能进行生物信息学预测分析。通过PCR扩增荷斯坦奶牛BoPAG7和BoPAG8基因,并将其分别连接在表达载体上,转化至大肠杆菌(BL21)中表达,通过SDS-PAGE和Western blot检测其免疫学特性,采用生物信息学方法对BoPAG7和BoPAG8蛋白修饰、蛋白结构、B细胞抗原表位、蛋白互作进行预测分析。结果显示,成功克隆出BoPAG7和BoPAG8基因,大小与预期结果相符,成功表达并纯化获得了BoPAG7和BoPAG8蛋白。BoPAG7有5个位点发生糖基化修饰,BoPAG8有1个糖基化修饰,2个蛋白均有15个氨基酸组成的信号肽,以及含有多个B细胞抗原表位和多个互作蛋白。本研究为BoPAG7和BoPAG8蛋白抗体的制备和功能的研究提供了基础。 展开更多
关键词 妊娠相关糖蛋白 抗原表位 蛋白互作 糖基化
布鲁氏菌Omp25蛋白抗原表位的生物信息学分析 认领
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作者 陈志强 沙桐 +2 位作者 李智伟 丁剑冰 张峰波 《新疆医科大学学报》 CAS 2020年第4期414-418,共5页
目的利用生物信息学方法对羊布鲁氏菌Omp25蛋白进行分析,预测其T细胞以及B细胞的优势抗原表位。方法从NCBI数据库中获取羊布鲁氏菌的Omp25蛋白的氨基酸序列。应用ProtParam在线软件分析Omp25蛋白的理化性质,应用SOMPA在线软件分析Omp25... 目的利用生物信息学方法对羊布鲁氏菌Omp25蛋白进行分析,预测其T细胞以及B细胞的优势抗原表位。方法从NCBI数据库中获取羊布鲁氏菌的Omp25蛋白的氨基酸序列。应用ProtParam在线软件分析Omp25蛋白的理化性质,应用SOMPA在线软件分析Omp25蛋白二级结构,应用Phyre2及SWISS-MODEL在线软件构建并分析Omp25蛋白三级结构,应用ABCpred和BepiPred等在线软件预测Omp25蛋白的B细胞抗原表位,应用SYFPEITHI和IEDB在线软件预测Omp25蛋白的T细胞抗原表位。结果Omp25蛋白含有23个强碱性氨基酸,含有21个强酸性氨基酸,归类为亲水性稳定蛋白,Omp25蛋白的二级结构中α-螺旋占24.88%,β-折叠占25.35%,β-转角占2.82%,无规则卷曲占46.95%。联合不同软件的预测结果分析后,最终获得1段CD4^+T细胞优势抗原表位、3段CD8^+T细胞优势抗原表位以及3段B细胞优势抗原表位。结论通过生物学信息的方法较为全面地预测了羊布鲁氏菌Omp25蛋白的优势T细胞以及B细胞抗原表位,为进一步研制羊布鲁氏菌表位疫苗构建提供了理论基础。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 Omp25 生物信息学 抗原表位
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HPV16/18E6/E7蛋白抗原表位理论预测与分子模拟研究 认领
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作者 何华玉 林勇 +3 位作者 胡勇 王娟 王远强 林治华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期720-726,共7页
目的人乳头瘤病毒(HPV)与全球约4.5%的癌症密切相关,与几乎所有宫颈癌相关,其中HPV16和HPV18约占70%。方法鉴于E6/E7蛋白是维持HPV阳性癌细胞恶性表型的关键因素,是开发治疗性HPV疫苗的潜在靶标,通过分子模拟理论预测潜在抗原表位可以... 目的人乳头瘤病毒(HPV)与全球约4.5%的癌症密切相关,与几乎所有宫颈癌相关,其中HPV16和HPV18约占70%。方法鉴于E6/E7蛋白是维持HPV阳性癌细胞恶性表型的关键因素,是开发治疗性HPV疫苗的潜在靶标,通过分子模拟理论预测潜在抗原表位可以为疫苗开发提供理论指导。结果本研究利用在线工具预测HPV16、HPV18 E6/E7蛋白的潜在抗原表位,通过分子动力学模拟获得表位与MHC结合的稳定构象,结合自由能计算结果显示表位KLPDLCTEL(-31.02 kcal/mol)、TLQQDIVLHL(-31.33 kcal/mol)、YMLDLQPET(-34.09 kcal/mol)与HLA-A*0201具有潜在结合能力。结论通过分析表位与MHC结合模式,为表位的改造与HPV治疗性疫苗研究提供了理论线索。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 表位 预测 疫苗 分子动力学模拟
貉源阿留申病毒VP2和NS1蛋白的抗原性预测 认领
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作者 吴艳虹 赵永强 +5 位作者 韦韬 章秀婷 丛丽 岳志刚 肖家美 邵西群 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1399-1407,共9页
旨在预测和分析貉源阿留申病毒(RFAV)VP2和NS1蛋白的抗原表位特征,筛选阿留申病毒属较保守的B、T细胞抗原表位。本研究对RFAV的近全长基因组进行克隆及测序,对其VP2和NS1基因编码蛋白的理化性质、二级结构、翻译后修饰位点和抗原表位进... 旨在预测和分析貉源阿留申病毒(RFAV)VP2和NS1蛋白的抗原表位特征,筛选阿留申病毒属较保守的B、T细胞抗原表位。本研究对RFAV的近全长基因组进行克隆及测序,对其VP2和NS1基因编码蛋白的理化性质、二级结构、翻译后修饰位点和抗原表位进行预测,并将预测的修饰位点、抗原表位与其他阿留申病毒种的序列进行比较分析,筛选相对保守的修饰位点和抗原表位。结果显示,获得的RFAV基因组长4327 bp,编码VP2蛋白的636个氨基酸,编码NS1蛋白的641个氨基酸。VP2和NS1蛋白均为亲水性蛋白,二级结构以无规则卷曲为主。在阿留申病毒属内,VP2蛋白有3个保守的B细胞抗原表位,3个保守的T细胞表位,8个保守的翻译后修饰位点;NS1蛋白有1个保守的B细胞抗原表位,2个保守的T细胞抗原表位和7个保守的翻译后修饰位点。本研究成功克隆了RFAV近全长基因组序列,全面对RFAV的VP2、NS1蛋白抗原表位、翻译后修饰位点进行预测,并分析其在阿留申病毒属内的保守和变异特征,为阿留申病毒免疫研究提供参考。 展开更多
关键词 阿留申病毒 VP2蛋白 NS1蛋白 抗原表位 翻译后修饰位点
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杨絮蛋白的组分分析及其T、B细胞表位预测 认领
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作者 郭伟 湛孝东 +1 位作者 黄月娥 姜玉新 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期192-196,共5页
杨絮是引起过敏性疾病的重要气传变应原之一。为了分析杨絮的蛋白组分并预测其T、B细胞表位,本研究采用有机溶媒法提取杨絮总蛋白,二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)试剂盒检测蛋白浓度。胰酶酶解总蛋白,经高效液相色谱法(high perfor... 杨絮是引起过敏性疾病的重要气传变应原之一。为了分析杨絮的蛋白组分并预测其T、B细胞表位,本研究采用有机溶媒法提取杨絮总蛋白,二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)试剂盒检测蛋白浓度。胰酶酶解总蛋白,经高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分级、液相色谱-质谱进行组分分析以及质谱质控鉴定;生物信息学方法在线预测不同组分中的T细胞和线性B细胞表位。结果显示,杨絮蛋白总浓度为5.53μg/μL,经酶解及液相色谱-质谱进行组分分析共获得22 023个肽段,质谱质控显示所获肽段的质量偏移(mass error)<10 ppm,肽段长度主要分布在8~20个氨基酸残基之间;生物信息学在线预测结果表明,所得肽段含16个高亲和力T细胞表位、2 300个中等亲和力的T细胞表位以及10个线性B细胞表位。该研究结果表明,杨絮的蛋白组分含有具有潜在诱发Ⅰ型过敏性疾病的T和B细胞表位。 展开更多
关键词 杨絮 表位 变应原 过敏性疾病
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的生物学信息预测 认领
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作者 王文艳 阿孜尔古丽·阿布都克日木 张东军 《中国校医》 2020年第2期89-91,96共4页
目的在线软件分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的生物学信息,为防治金黄色葡萄球菌感染提供理论基础。方法采用在线分析系统蛋白质EXPASYP Protemic(http://www. espasy. org)中的Protparam(http://expasy.org/tools/protparam.htm... 目的在线软件分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的生物学信息,为防治金黄色葡萄球菌感染提供理论基础。方法采用在线分析系统蛋白质EXPASYP Protemic(http://www. espasy. org)中的Protparam(http://expasy.org/tools/protparam.html),分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的分子质量、分子式,氨基酸数目、等电点、正负电荷残基,预测该蛋白的稳定性等理化性质;利用在线分析蛋白质软件Protscale(http://www.espasy.org/cgibin/protscale.p1)分析EsxA蛋白亲(疏)水性;采用SOPMA软件预测和分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的二、三级结构。结果 EsxA蛋白二级结构α螺旋(Hh)占26.15%(68个),延伸链(Ee)占32.69%(85个),无规则卷曲(Cc)占33.46%(87个)。蛋白分子质量为30 428.46 ku;理论pI值为8.18;氨基酸序列Ala占1.9%,Arg占1.9%,Val占3.5%。可能是亲水性蛋白;预测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的糖基化位点为71、87、146、176、200、243氨基酸处,预测存在1个丝氨酸、1个苏氨酸、3个酪氨酸磷酸化位点;同源建模中EsxA蛋白的GMQE值为0.75,Qmean向上手势,模型质量获得较高。结论耐甲氧西林金黄色葡萄球菌EsxA蛋白含有磷酸化位点和糖基化位点,具有免疫原性的基础结构。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 EsxA蛋白 表位 生物信息学
TgAMA1和TgRON2抗原表位合成肽鼻内免疫抗小鼠弓形虫病的作用 认领
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作者 钱学成 张铁娥 +1 位作者 孟晓丽 刘红丽 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第2期189-194,206共7页
目的观察含弓形虫顶膜抗原1(TgAMA1)和棒状体颈部蛋白2(TgRON2)T、B细胞抗原表位的多肽鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫病免疫保护作用。方法化学方法合成含有经生物信息学预测的TgAMA1和TgRON2T细胞和B细胞表位多肽。5周龄BALB/c小鼠48只... 目的观察含弓形虫顶膜抗原1(TgAMA1)和棒状体颈部蛋白2(TgRON2)T、B细胞抗原表位的多肽鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫病免疫保护作用。方法化学方法合成含有经生物信息学预测的TgAMA1和TgRON2T细胞和B细胞表位多肽。5周龄BALB/c小鼠48只随机分为AMA1组、RON2组、A1+R2组和对照组(n=12),分别用AMA1 30μg、RON2 30μg或(A1+R2)各15μg鼻内免疫,对照组用20μl生理盐水滴鼻,共免疫3次,间隔2周。末次免疫后2周,采用ELISA法检测血清抗体水平;处死小鼠,取鼻、膀胱和肠道洗液,ELISA法检测SIgA水平;无菌取脾,制备脾细胞悬液,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测淋巴细胞培养上清细胞因子水平;取肝、脑组织,计数速殖子虫荷,以评价免疫诱导的黏膜及系统免疫应答和抗弓形虫感染保护作用。结果用AMA1和RON2多肽免疫小鼠可诱导产生高水平的特异性抗体反应和淋巴增殖反应。肽免疫小鼠血清特异性IgA、总IgG、IgG1和IgG2a水平均高于对照组(P<0.05或P<0.01),其中A1+R2组最高。小鼠脾淋巴细胞刺激指数(SI)显示,AMA1组(1.171±0.116)、RON2组(1.362±0.110)和A1+R2组(1.941±0.162)高于PBS组(0.743±0.081)(P<0.05或P<0.01),A1+R2组亦高于单肽组(P<0.05)。肽免疫小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-2和IL-4水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。肽免疫诱导了小鼠高水平的黏膜免疫应答,肽免疫小鼠鼻腔、膀胱和小肠冲洗液SIgA水平均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。肽免疫小鼠获得部分抗弓形虫感染保护作用,与对照组比较,肽免疫小鼠肝和脑中速殖子负荷显著降低,减虫率分别为A1+R2组55.79%和55.68%、AMA1组52.36%和46.46%、RON2组40.02%和47.33%(P<0.05或P<0.01)。结论含有T和B细胞表位的AMA1和RON2肽是一种有效的抗弓形虫病候选抗原,鼻内免疫小鼠可诱导强烈的黏膜和系统免疫应答,两种抗原表位肽联合使用的免疫效应比单用AMA1或RON2更强,抗弓� 展开更多
关键词 刚地弓形虫 抗原表位 顶膜抗原1 棒状体颈部蛋白2 肽疫苗 鼻内免疫
大籽蒿花粉新致敏蛋白组分肌动蛋白(组装)抑制蛋白的鉴定、致敏性及表位 认领
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作者 胡巧丽 许志强 +2 位作者 潘晨 朱理想 魏继福 《中华临床免疫和变态反应杂志》 2020年第2期85-91,共7页
目的研究大籽蒿花粉新致敏蛋白组分肌动蛋白(组装)抑制蛋白(profilin)的基因信息、致敏情况、结构模型和B细胞表位。方法通过转录组测序分析鉴定到一个潜在的profilin基因序列;克隆其基因,表达和纯化得到其蛋白。通过酶联免疫吸附试验(E... 目的研究大籽蒿花粉新致敏蛋白组分肌动蛋白(组装)抑制蛋白(profilin)的基因信息、致敏情况、结构模型和B细胞表位。方法通过转录组测序分析鉴定到一个潜在的profilin基因序列;克隆其基因,表达和纯化得到其蛋白。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹实验研究其致敏性;并利用同源模拟,构建三维结构模型。结果ELISA表明大籽蒿花粉profilin在蒿属花粉过敏患者血清中的IgE结合率为22%(11/50)。免疫印迹实验表明11份阳性血清中仅5份显示阳性条带。综合分析氨基酸序列和结构模型,获得5个线性B细胞表位和3个构象性B细胞表位。结论大籽蒿花粉profilin在蒿属过敏患者的致敏率为22%,构象性表位在profilin致敏中发挥作用。 展开更多
关键词 大籽蒿 肌动蛋白(组装)抑制蛋白 过敏 表位
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两种严重急性呼吸综合征冠状病毒S蛋白结构特征及抗原表位比较 认领
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作者 伦永志 刘奔 +2 位作者 董雯 孙杰 潘凌鸿 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期315-323,共9页
目的:通过严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)-2与SARS-CoV S蛋白结构特征及抗原表位的比较分析,从分子水平为SARS-CoV-2致病机制研究提供数据支持,并为疫苗、抗体及药物研发寻找合适的候选靶点。方法:利用生物信息学方法和工具,基于... 目的:通过严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)-2与SARS-CoV S蛋白结构特征及抗原表位的比较分析,从分子水平为SARS-CoV-2致病机制研究提供数据支持,并为疫苗、抗体及药物研发寻找合适的候选靶点。方法:利用生物信息学方法和工具,基于S蛋白参考序列进行理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、结构域、二级结构、三级结构分析及抗原表位预测,同时对受体血管紧张素转换酶2(ACE2)、C型凝集素(CLEC4M)的组织表达及关联通路、途径进行分析。结果:SARS-CoV-2、SARS-CoV S蛋白氨基酸序列一致性为75.80%,两者结构特征具有较高一致性,但SARS-CoV-2高级结构特征不如SARS-CoV明显。受体ACE2、CLEC4M在消化系统及心脏、肾脏、肺、胎盘中均有表达,主要关联的肾素-血管紧张素系统、蛋白质消化吸收通路及血管紧张素前体转化、G蛋白偶联受体(GPCR)配体结合途径与2019冠状病毒病典型症状相关。分析获得S蛋白三对高度或完全同源的抗原表位,即SARS-CoV-2 S蛋白第600~605位氨基酸残基与SARS-CoV第586~591位高度一致,SARS-CoV-2 S蛋白第695~703位、第888~896位氨基酸残基分别与SARS-CoV第677~685位、第870~878位高度或完全一致。结论:SARS-CoV-2与SARS-CoV S蛋白结构上的相似性决定了两者具有相近的感染模式和临床表现。筛选获得的高可信度的SARS-CoV-2候选抗原表位可为病毒诊断和疫苗研制提供参考。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 S蛋白 结构特征 抗原表位
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金黄色葡萄球菌肠毒素B功能表位及中和抗体研究进展 认领
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作者 胡乃静 罗龙龙 +1 位作者 乔春霞 张景海 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期45-51,共7页
金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素B(SEB),是造成食物中毒乃至中毒性休克综合征的主要病因。SEB也是一种超级抗原,可以刺激T细胞,能够同时与抗原呈递细胞上的主要组织相容性复合物Ⅱ类分子和T细胞受体上的Vβ结合。随着SEB的结构逐步得到解... 金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素B(SEB),是造成食物中毒乃至中毒性休克综合征的主要病因。SEB也是一种超级抗原,可以刺激T细胞,能够同时与抗原呈递细胞上的主要组织相容性复合物Ⅱ类分子和T细胞受体上的Vβ结合。随着SEB的结构逐步得到解析,揭示了SEB结构与功能的关键表位。临床上尚无针对SEB中毒的有效疫苗和药物。SEB中和抗体因其高特异性和低毒副作用,成为研究者们的研究首选和重点,从鼠源抗体、人鼠嵌合抗体到人源抗体等均有报道。本文对SEB功能表位及其中和抗体的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 金葡菌 肠毒素B 表位 中和抗体
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HPV抗原表位及其在疫苗中的应用综述 认领
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作者 张文祺 郑博升 +4 位作者 王昱俨 马晓玲 王琳 邱其其 刘伟 《解放军医学院学报》 CAS 2020年第1期92-96,共5页
人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)引起的宫颈癌在全球女性易患癌症中位列第4名,其相应疫苗的研发制备也成为研究的热点。HPV主要致病蛋白有L1、L2两个衣壳蛋白和E6、E7两个致癌蛋白。L1作为主要抗原,其表位分为线性表位、构象... 人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)引起的宫颈癌在全球女性易患癌症中位列第4名,其相应疫苗的研发制备也成为研究的热点。HPV主要致病蛋白有L1、L2两个衣壳蛋白和E6、E7两个致癌蛋白。L1作为主要抗原,其表位分为线性表位、构象表位和B/T细胞表位。其中线性表位的一部分(HPV16-L1蛋白的RHGEEYDLQFIFQLCKITLTA、HPV 18-L1蛋白的PVPGQYDATK等表位)、构象表位的一部分(H16U4、H16V5等)和HPV16-L1部分片段(H2、H3、H4、H9、H11、H12)中的B细胞、T细胞表位都有潜力成为研制以L1为主要抗原疫苗的靶标。近些年来,由于L2蛋白对不同类型HPV的交叉中和保护作用,许多研究的重点开始向L2蛋白转变,尤其是针对L2 N末端处表位加以不同的载体和佐剂赋予L2疫苗不同的特性,L2疫苗比L1疫苗的保护范围更加广泛。E6、E7特异性表位肽和CpG疫苗也是研究HPV治疗性疫苗的新方向。本文将对HPV疫苗及其相关表位的最新进展进行综述。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒疫苗 L1蛋白 L2蛋白 E6蛋白 E7蛋白 表位
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H7N9禽流感病毒血凝素线性B细胞抗原表位单克隆抗体的制备和鉴定 认领
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作者 陶薇 罗永能 +3 位作者 何卓晶 傅婷 高丽美 洪艳 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2020年第1期60-64,共5页
目的研制用于H7N9禽流感病毒诊断的血凝素线性B细胞抗原表位单克隆抗体。方法采用H7N9禽流感病毒血凝素特异性线性B细胞抗原表位免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术和间接ELISA法筛选、鉴定获得稳定分泌抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗... 目的研制用于H7N9禽流感病毒诊断的血凝素线性B细胞抗原表位单克隆抗体。方法采用H7N9禽流感病毒血凝素特异性线性B细胞抗原表位免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术和间接ELISA法筛选、鉴定获得稳定分泌抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株;通过SDS-PAGE、间接ELISA和斑点免疫印迹技术鉴定其亚型、效价、纯度等生物学特征。结果共获得2株单克隆抗体(7C8H8和8E9E2),其中7C8H8抗体亚类为IgG2a,腹水抗体效价>1∶512000,且可以特异性结合H7N9禽流感病毒血凝素。8E9E2仅具有较低的H7N9禽流感病毒血凝素蛋白结合力。结论获得1株可分泌高效价、高特异性的抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株7C8H8。 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素 表位 特异性 单克隆抗体
CA16疫苗及其相关研究进展 认领
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作者 杜瑞晓(综述) 毛群颖 梁争论(审校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第1期80-83,87共5页
手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)为严重影响婴幼儿健康的传染病。肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)与柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)是引起HFMD的主要病原体之一,曾引起包括中国等多个国家或地区HFMD的流行或... 手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)为严重影响婴幼儿健康的传染病。肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)与柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CA16)是引起HFMD的主要病原体之一,曾引起包括中国等多个国家或地区HFMD的流行或暴发。疫苗是控制传染病流行的主要手段。EV71疫苗上市后,CA16疫苗和EV71/CA16联合疫苗及其相关研究已成为人们关注的热点。本文对CA16疫苗研发及其相关研究的最新进展作一综述。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒A组16型 疫苗 单克隆抗体 表位
类弹性蛋白展示NT-proBNP双抗原表位重组蛋白的制备和纯化 认领
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作者 付鑫 龚福梅 +3 位作者 丁宁 朱静 杨春光 胡学军 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期458-463,共6页
目的:利用大肠杆菌(E.coli)高效制备类弹性蛋白(ELP)展示N端脑钠肽前体(NT-proBNP)双抗原表位的重组蛋白,为低成本、高效地制备NT-proBNP检测校准品提供依据。方法:分别设计NT-proBNP第13~20位和第63~71位氨基酸残基表位,通过柔链连接上... 目的:利用大肠杆菌(E.coli)高效制备类弹性蛋白(ELP)展示N端脑钠肽前体(NT-proBNP)双抗原表位的重组蛋白,为低成本、高效地制备NT-proBNP检测校准品提供依据。方法:分别设计NT-proBNP第13~20位和第63~71位氨基酸残基表位,通过柔链连接上述2个抗原表位与ELP融合,获得3种融合蛋白。利用基因工程技术合成编码以上3种融合蛋白的基因并克隆到pET-28a(+)载体上,转入E.coli BL21(DE3)自动诱导表达,利用多次可逆相变循环(ITC)纯化重组蛋白,并应用Western blotting和ELISA法检测其抗体特异结合表位的能力。结果:成功构建了3种ELP展示NT-proBNP抗原表位的载体,并在E.coli中表达获得相应重组蛋白。Western blotting和直接ELISA检测,ELP展示的特异抗原表位均具有良好的与相应抗体结合的能力。夹心ELISA法检测,ELP展示NT-proBNP双抗原表位重组蛋白的蛋白浓度与450 nm处吸光度(A)值呈双对数线性剂量依赖关系(r=0.9197,P<0.01)。结论:成功利用ELP展示NF-proBNP双抗原表位,为低成本、高效地制备出与NT-proBNP检测校准品奠定了基础。 展开更多
关键词 N-端脑钠肽前体 类弹性蛋白 抗原表位 大肠杆菌 心力衰竭
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贝类精氨酸激酶致敏性的研究进展 认领
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作者 赵晓涵 张江涛 +3 位作者 李国明 朱艳 谷瑞增 鲁军 《食品工业》 CAS 北大核心 2020年第2期267-271,共5页
贝类由甲壳类动物和软体动物组成,随着贝类过敏日益增多,贝类过敏原逐渐成为一项重要的研究领域。精氨酸激酶(AK)是贝类中的过敏原之一,关于AK的研究主要集中在酶学性质及分子克隆方向, AK的致敏性方面研究较少,而分析其致敏性的关键是... 贝类由甲壳类动物和软体动物组成,随着贝类过敏日益增多,贝类过敏原逐渐成为一项重要的研究领域。精氨酸激酶(AK)是贝类中的过敏原之一,关于AK的研究主要集中在酶学性质及分子克隆方向, AK的致敏性方面研究较少,而分析其致敏性的关键是系统认识AK的抗原表位,其表位的确定有利于了解相关过敏反应机制。因此,对贝类过敏、贝类精氨酸激酶及其致敏性的研究进展、抗原表位进行论述,并对精氨酸激酶的研究方向进行展望,以期为更好地研究贝类AK的致敏性和开发低致敏甚至无致敏性贝类食品提供参考。 展开更多
关键词 食物过敏 贝类过敏 精氨酸激酶 抗原表位 致敏性
细粒棘球绦虫多价EgA31-EgG1Y162抗原序列优化分析 认领
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作者 张杰 李玉娇 +4 位作者 张峰波 孔慧芳 周晓涛 王红英 丁剑冰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期19-25,共7页
目的:将优化的EgA31-EgG1Y162抗原基因构建于pET30a上,诱导蛋白表达,SDS-PAGE鉴定蛋白表达效果,用生物信息学软件分析优化的EgA31-EgG1Y162抗原序列,为构建高效的疫苗奠定理论基础。方法:运用ProtParam,DNAstar,E.coli Codon Usage Anal... 目的:将优化的EgA31-EgG1Y162抗原基因构建于pET30a上,诱导蛋白表达,SDS-PAGE鉴定蛋白表达效果,用生物信息学软件分析优化的EgA31-EgG1Y162抗原序列,为构建高效的疫苗奠定理论基础。方法:运用ProtParam,DNAstar,E.coli Codon Usage Analyzer等多种生物信息学软件分析优化后EgA31-EgG1Y162蛋白的理化性质,比较其优化前后序列的异同点及抗原表位分布情况等。结果:EgA31-EgG1Y162蛋白属于不稳定性蛋白且亲水性蛋白,通过网上在线软件分析,优化序列的密码子中不含利用率低的密码子。表位预测分析确定6个T细胞表位的氨基酸区域1~15、86~97、177~193、359~388、305~319、344~358和7个B细胞表位为102~112、172~204、318~334、343~353、394~409、415~431、443~458。结论:多价EgA31-EgG1y162融合抗原蛋白的优化序列中不含利用率低的密码子,且T和B细胞表位未受影响,为重组蛋白体外的有效表达奠定实验基础,对包虫病的多价表位疫苗研究具有重要的指导作用。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 EgA31蛋白 EgG1Y162蛋白 表位
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猪圆环病毒2型衣壳蛋白优势B细胞表位重组蛋白免疫原性研究 认领
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作者 高雪 张辛铭 +4 位作者 肖星星 杨顺利 尚佑军 尹双辉 蔡建平 《动物医学进展》 北大核心 2020年第3期1-7,共7页
猪圆环病毒2型(PCV-2)衣壳蛋白(Cap)是研制基因工程疫苗和血清抗体检测方法的主要候选抗原。为筛选免疫原性强的Cap抗原表位,将定位在Cap上的6个B细胞线性表位的编码基因序列重新组合,命名为R1234、R1235、R1236、R2345、R2346和R3456,... 猪圆环病毒2型(PCV-2)衣壳蛋白(Cap)是研制基因工程疫苗和血清抗体检测方法的主要候选抗原。为筛选免疫原性强的Cap抗原表位,将定位在Cap上的6个B细胞线性表位的编码基因序列重新组合,命名为R1234、R1235、R1236、R2345、R2346和R3456,然后克隆至pET32a原核表达载体,转化到大肠埃希菌中进行诱导表达。通过对表达和纯化条件的优化,最终获得6个多抗原表位串联体的重组蛋白。Western blot和间接ELISA结果显示,6组重组表位蛋白均能被PCV-2阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性。将其与完整Cap分别免疫Balb/c小鼠,检测免疫后血清中特异性抗体和细胞因子水平以及脾脏淋巴细胞中CD4^+和CD8^+T淋巴细胞的比例。结果表明,R2346组合刺激机体产生的特异性抗体和细胞因子IFN-γ、IL-4的水平明显高于其他组,脾脏淋巴细胞中CD4^+和CD8^+T淋巴细胞含量与对照组相比显著增加(P<0.05),说明该重组蛋白能够刺激体液免疫和细胞免疫反应。因此,筛选获得的R2346重组表位蛋白可以作为研制PCV-2多表位基因工程疫苗和血清抗体诊断方法的候选抗原,用于PCV-2的预防和控制工作中。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 衣壳蛋白 抗原表位 免疫原性
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埃博拉病毒疫苗相关专利技术分析 认领
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作者 王雨方 李鹤群 《江西化工》 2020年第3期33-35,共3页
埃博拉病毒(Ebola virus)病作为最致命的病毒病之一,被归为A类传染病。由于现在还没有上市的疫苗,研究人员从多方面研究防治方法,包括DNA疫苗、亚单位疫苗、完全复制型/非复制型疫苗等。并对这些疫苗进行了非人灵长类(NHPs)动物实验,取... 埃博拉病毒(Ebola virus)病作为最致命的病毒病之一,被归为A类传染病。由于现在还没有上市的疫苗,研究人员从多方面研究防治方法,包括DNA疫苗、亚单位疫苗、完全复制型/非复制型疫苗等。并对这些疫苗进行了非人灵长类(NHPs)动物实验,取得了一定的进展,表明免疫接种控制该病可行。本文在针对全球的专利申请状况进行数据分析后着重关注疫苗主要有效成分(抗原)并对其进行详细的技术脉络分析。 展开更多
关键词 埃博拉病毒 疫苗 抗原 表位 专利
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信号肽对O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在CHO中表达及分泌的影响 认领
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作者 孙振文 邵军军 常惠芸 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期276-282,共7页
构建融合不同信号肽的O型口蹄疫病毒重组表位蛋白真核表达载体,筛选不同的分泌型信号肽以提高O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)中的表达并使其分泌到CHO培养基中。通过PCR方法将10种不同... 构建融合不同信号肽的O型口蹄疫病毒重组表位蛋白真核表达载体,筛选不同的分泌型信号肽以提高O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)中的表达并使其分泌到CHO培养基中。通过PCR方法将10种不同的分泌型信号肽与串联表位基因的5′端相连,分别构建了真核表达载体并转染哺乳动物细胞CHO,采用Western-blot检测CHO培养基中重组表位蛋白累积量,研究结果表明,O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在CHO中成功分泌表达,不同的分泌型信号肽明显改变O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在CHO培养基中的累积SCGB1D1 isoform信号肽介导的O型口蹄疫病毒重组表位蛋白表达量最高。综上所述,合适的分泌型信号肽促进O型口蹄疫病毒重组表位蛋白在CHO中的分泌。 展开更多
关键词 表位 蛋白质分泌 口蹄疫病毒 信号肽
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