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一株产酯酶窖泥细菌的筛选、鉴定及酶学性质研究 预览
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作者 韩丽 李磊 +3 位作者 曾毅 杨源源 储镇江 何培新 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第6期43-48,共6页
该研究旨在从宋河酒厂窖泥中筛选出一株高产酯酶的菌株,通过形态观察和分子生物学技术对其进行鉴定,通过盐析法纯化酯酶并对其酶学性质进行研究。结果表明,筛选分离出一株高产酯酶的菌株SH-17,被鉴定为约氏不动杆菌(Acinetobacter johns... 该研究旨在从宋河酒厂窖泥中筛选出一株高产酯酶的菌株,通过形态观察和分子生物学技术对其进行鉴定,通过盐析法纯化酯酶并对其酶学性质进行研究。结果表明,筛选分离出一株高产酯酶的菌株SH-17,被鉴定为约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii),其产酯酶活力为2.83 U/mL;经饱和度60%的硫酸铵盐析得到该酯酶分子质量约为42 kDa,最适反应温度为40 ℃,最适pH值为8.0,高温耐受性差,在中性偏碱的环境中相对稳定,且对链长较短的底物催化活性较高,最适反应底物碳链长为6。 展开更多
关键词 窖泥 细菌 筛选 鉴定 酯酶 酶学性质
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高产酯化酶红曲菌的筛选、鉴定及酶学性质研究 预览
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作者 刘欢欢 杨帆 +4 位作者 李贞景 王旭锋 薛意斌 陈勉华 王昌禄 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第5期49-53,共5页
该研究从研究室保藏的10株红曲霉菌株中筛选高产酯化酶菌株,通过分子生物学技术对其进行鉴定,并对其最适培养基进行选择,最后对其所产的酯化酶酶学特性进行初步研究。结果表明,筛选获得一株高产酯化酶菌株X1,并被鉴定为血红红曲霉(Monas... 该研究从研究室保藏的10株红曲霉菌株中筛选高产酯化酶菌株,通过分子生物学技术对其进行鉴定,并对其最适培养基进行选择,最后对其所产的酯化酶酶学特性进行初步研究。结果表明,筛选获得一株高产酯化酶菌株X1,并被鉴定为血红红曲霉(Monascus sanguineus)。其最适产酶培养基为可溶性淀粉70 g/L,大豆蛋白胨20 g/L,NaNO3 2 g/L,KH2PO4 1 g/L,MgSO4·7H2O 2 g/L,初始pH值4.5。采用最优培养基,在30 ℃、180 r/min条件下发酵4 d,酯化酶活力为315.19 U/mL。该酯化酶的最适反应温度为40 ℃,在25~35 ℃范围内稳定性较好;最适pH值为5.0,在pH为6.0时稳定性较高;金属离子Ca2+可提高该酯化酶活性,Mg2+、Fe2+、Na+和Ag+则有不同程度抑制作用,且Ag+抑制作用最明显。 展开更多
关键词 红曲菌 酯化酶 筛选 鉴定 酶学特性
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白酒杂醇油酯化酶的分子构建 预览
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作者 张瑞瑞 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第5期86-89,共4页
为降低白酒中杂醇油含量,构建高活性杂醇油酯化酶,酯化杂醇油为较高沸点的酯从而降低酒体中杂醇油含量。该研究利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增酯化酶基因,酶切、以其为模板,进行易错聚合酶链式反应,连接、转化大肠杆菌(Escheric... 为降低白酒中杂醇油含量,构建高活性杂醇油酯化酶,酯化杂醇油为较高沸点的酯从而降低酒体中杂醇油含量。该研究利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增酯化酶基因,酶切、以其为模板,进行易错聚合酶链式反应,连接、转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,筛选酶活显著提升的酯化酶。结果表明,酯化酶氨基酸中146位缬氨酸突变为天冬氨酸,198位苏氨酸突变为异亮氨酸,376位天冬氨酸突变为谷氨酸。初始酯化酶和构建酯化酶合成乙酸正丙酯、乙酸异丁酯、乙酸异戊酯酶活分别为10.83 U/L、24.72 U/L,2.58 U/L、6.24 U/L,3.83 U/L、8.78 U/L,构建酯化酶酶活分别是初始酯化酶酶活的2.28倍、2.42倍、2.29倍。构建杂醇油酯化酶在白酒生产中具有极大的应用潜力。 展开更多
关键词 白酒 杂醇油 酯化酶 分子构建
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Insecticide toxicity associated with detoxification enzymes and genes related to transcription of cuticular melanization among color morphs of Asian citrus psyllid
4
作者 Xue Dong Chen Torrence A. Gill +3 位作者 Chi D.Nguyen Nabil Killiny Kirsten S.Pelz-Stelinski Lukasz L.Stelinski 《昆虫科学:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期843-852,共10页
The Asian citrus psyllid (Diaphorina citri Kuwayama) is known to exhibit abdominal color polymorphisms. In the current study, susceptibility to four insecticides was compared among orange/yellow, blue/green and gray/b... The Asian citrus psyllid (Diaphorina citri Kuwayama) is known to exhibit abdominal color polymorphisms. In the current study, susceptibility to four insecticides was compared among orange/yellow, blue/green and gray/brown color morphs of field collected D. citri. The LD50 values and 95% fiducial limits were quantified for each insecticide and color morph combination and ranged between 0.10 ng/μL (0.06-0.10) and 6.16 ng//μL (3.30-12.50). Second, we measured the detoxification enzyme activity levels of orange/yellow, blue/green and gray/brown color morphs for cytochrome P450, glutathione "S-transferase, and general esterase. The mean P450 activity (equivalent units) was significantly lower in gray/brown (0.152 ± 0.006) and blue/green morphs (0.149 ± 0.005) than in the orange/yellow morphs (0.179 ± 0.008). GST activity (/imol/min/mg protein) was significantly lower in the orange/yellow morph (299.70 ± 1.24) than gray/brown (350.86 ± 1.19) and blue/green (412.25 ±1.37) morphs. The mean EST activity (/xmol/min/mg protein) was significantly higher in blue/green (416.72±5.12) and gray/brown morphs (362.19 ± 4.69) than in the orange/yellow morphs (282.56 ± 2.93). Additionally, we analyzed the relative expression of assortment genes involved in cuticular melanization and basal immunity. The transcripts of Dopa Decarboxylase and Tyrosine Hydroxylase were expressed higher in blue/green and gray/brown than orange/yellow morphs. The transcription results paralleled the susceptibility of D.citri to organophosphate, neonicotinoid and pyrethroid insecticides. GST and EST activity may also be correlated with low levels of insecticide susceptibility. Cuticular melanization could be a factor for the development of resistance to insecticides among different color morphs. 展开更多
关键词 cuticular MELANIZATION CYTOCHROME P450 ESTERASE gene expression GLUTATHIONE .S-transferase INSECTICIDE susceptibility
固定化红曲酯化酶处理新醋提高其品质的研究 预览
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作者 张媛渊 王如福 +1 位作者 郎繁繁 侯红萍 《中国调味品》 CAS 北大核心 2019年第6期20-25,共6页
以食品级卡拉胶(CG)与食品级海藻酸钠(SA)复合凝胶为固定化载体,采用包埋法固定化红曲酯化酶,在单因素试验基础上,通过响应面法优化固定化条件,将其应用于新醋,并对其与新醋的理化指标进行比对。研究结果表明:固定化载体的浓度为1.68g/... 以食品级卡拉胶(CG)与食品级海藻酸钠(SA)复合凝胶为固定化载体,采用包埋法固定化红曲酯化酶,在单因素试验基础上,通过响应面法优化固定化条件,将其应用于新醋,并对其与新醋的理化指标进行比对。研究结果表明:固定化载体的浓度为1.68g/dL,载体比例为5∶2,固定化时间为153min,固化液浓度为2.4g/dL,酶液添加量为7.23mL,其相对酶活力可达到99.79%。固定化酯化酶作用醋温度为40℃,固定化酯化酶添加量为9g/dL,处理时间为24h,总酯含量可达到12.87g/L,相对于新醋的含量提高了32.31%,感官评定与3个月自然陈酿食醋口感相当。 展开更多
关键词 固定化 酯化酶 催陈 响应面
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新型抗脑瘤化合物CAT3的体外代谢研究
6
作者 赵晟宇 王汝冰 +5 位作者 白洁 范小庆 胡民万 孙燕红 扈金萍 李燕 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1108-1114,共7页
CAT3是一种新型抗脑瘤化合物,在Daoy和U87MG裸鼠原位异种移植模型中具有强效抗瘤活性,但其代谢机制尚不清楚。本研究考察了CAT3在小鼠/犬/人全血和肝微粒体、人源化重组酶等温孵体系中的代谢特征,所有动物福利和动物实验遵循中国医学科... CAT3是一种新型抗脑瘤化合物,在Daoy和U87MG裸鼠原位异种移植模型中具有强效抗瘤活性,但其代谢机制尚不清楚。本研究考察了CAT3在小鼠/犬/人全血和肝微粒体、人源化重组酶等温孵体系中的代谢特征,所有动物福利和动物实验遵循中国医学科学院动物伦理委员会规定。研究结果表明CAT3在小鼠/犬/人全血中可水解为活性代谢物PF403,丁酰胆碱酯酶、羧酸酯酶和丝氨酸水解酶参与其生成,代谢速率存在种属差异小鼠>人>犬;应用CYPs同工酶的选择性抑制剂、人源化重组酶研究结果表明,CYP1A2、1A1、2C9和3A4是参与M1(氧化脱水),M2(双氧化脱水),M3(甲基化氧化脱水),M4(氧化),M5(脱甲基)生成的主要同工酶,CYP2B6、2C8、2C19和2D6等亚型也有少量参与;Ⅱ相酶UGT1A1、1A3、1A9可催化PF403生成葡萄糖醛酸化代谢物GLU-PF403。以上结果提示,CAT3代谢是多酶参与的生物转化过程,代谢酶介导的药物相互作用值得临床关注。 展开更多
关键词 CAT3 体外代谢 酯酶 细胞色素P450 葡萄糖醛酸转移酶
Artificial Esterase Based on Self-assembly Gel Microspheres Constructed from Chitosan and Amino Acids
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作者 CAO Jing WANG Miao +4 位作者 CHEN Weihua SHE Yongxin WANG Jing WANG Fengzhong LAO Shuibing 《高等学校化学研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期504-508,共5页
A novel artificial esterase based on chitosan and amino acids was synthesized in the present study. The Fmoc-His and Glu were linked to chitosan by active ester method(AEM). The hydroxide radical in chitosan, imidazol... A novel artificial esterase based on chitosan and amino acids was synthesized in the present study. The Fmoc-His and Glu were linked to chitosan by active ester method(AEM). The hydroxide radical in chitosan, imidazole group of Fmoc-His and carboxyl from Glu formed a catalytic center of natural esterase. Gel microspheres were coated with a protective layer and a supporting layer by seiassembly construction function in carboxymethylcellulose sodium(CMCS) solution. As for catalytic activity, chitosan-His-Glu was found to be more efficient than chitosan- His and chitosan-Glu in mimicking the core catalytic sites of natural esterase, and the best ratio(mass ratio) of chitosan-His-Glu:CMCS was 1:3. Furthermore, metal ions, such as Ca^2+, Mg^2+, Fe^2+, etc., were able to improve the catalytic efficiency of artificial esterase. And tlie Lineweaver-Burk plot indicated that the catalytic kinetics of artificial esterase conformed to Michaelis-Menten equation. 展开更多
关键词 Artificial ENZYME ESTERASE Cliitosan
Identification and developmental expression of putative gene encoding juvenile hormone esterase(CpJHE-like) in codling moth, Cydia pomonella(L.) 预览
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作者 HUANG Cong WU Qiang +8 位作者 JIANG Chun-yan XING Long-sheng SHI Guo-liang ZHANG Bin QIAN Wan-qiang LI You-zhi XI Yu YANG Nian-wan WAN Fang-hao 《农业科学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第7期1624-1633,共10页
Juvenile hormone esterase(JHE) is a key enzyme for insects,playing an important role in the regulation of insect growth,development,diapause and reproduction.We identified a complete putative JHE of Cydia pomonella(Cp... Juvenile hormone esterase(JHE) is a key enzyme for insects,playing an important role in the regulation of insect growth,development,diapause and reproduction.We identified a complete putative JHE of Cydia pomonella(CpJHE-like) which is comprised of a 1 761 bp coding sequence(CDS) encoding 587 amino acid residues from the transcriptome data.The deduced protein sequence of CpJHE-like showed the highest identity of 60.44% with the Adoxophyes honmai JHE(AhJHE) and the minimal identity of 25.81% with Aedes aegypti JHE(AaJHE).CpJHE-like exhibited all the seven typical motifs of the functional JHEs and had the highly consistent tertiary structure with Manduca sexta JHE(MsJHE).Phylogenetic analysis showed that the CpJHE-like was close to two JHEs from the family Tortricidae.The CpJHE-like transcript level take a leap in the 3-day-old fifth instar larva,increased about 300-fold compared to the basal level.Tissue-specific expression profile showed that the CpJHE-like transcript was expressed mainly in the fat body.This study indicates that the CpJHE-like is the functional JHE,which may play vital roles in the development and reproduction of C.pomonella. 展开更多
关键词 JUVENILE HORMONE ESTERASE CpJHE-like codling MOTH Cydia pomonella
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Utilization of One Novel Microbial Esterase WDEst9 in the Kinetic Resolution of (5)-Methyl 2-chloropropionate and (5)-Ethyl 2-chloropropionate
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作者 WANG Yilong XU Yongkai +2 位作者 ZHANG Yun SUN Aijun HU Yunfeng 《高等学校化学研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期830-836,共7页
One novel microbial esterase WDEst9 from Dactylosporangium aurantiacum subsp. Hamdenensis NRRL 18085 was functionally characterized and the results demonstrated that the enantio-preference of WDEst9 was opposite to th... One novel microbial esterase WDEst9 from Dactylosporangium aurantiacum subsp. Hamdenensis NRRL 18085 was functionally characterized and the results demonstrated that the enantio-preference of WDEst9 was opposite to that of three other microbial esterases(BSE01701, PHE14 and Bae02030) in the kinetic resolution of racemic methyl lactate. We further investigated the potential of esterase WDEst9 in the kinetic resolution of both (±)-methyl 2-chloropropionate and (±)-ethyl 2-chioropropionate. The enantio-preference of WDEst9 was also interestingly opposite to that of esterases EST 12-7 and EstC10, and generated (S)-methyl 2-chloropropionate and (S)-ethyl 2-chloropropionate with high enantiomeric excess(both e.e.>98%) and high yield after many iterations of process optimization. Through genome mining, microbial esterase WDEst9 was characterized to be a novel esterase which may provide valuable complementary enantio-selectivity and possesses very good potential in the kinetic resolution of high value-added chiral chemicals. 展开更多
关键词 BIOCATALYSIS NOVEL ESTERASE Asymmetric hydrolysis COMPLEMENTARY enantio-preference (5)-Methyl 2-chloropropionate (S)-Ethyl 2-chloropropionate
新型深海来源蛋白酯酶E4的纯化、结晶和X射线衍射分析 预览
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作者 申彦芳 杨慧 +3 位作者 霍颖异 胡娟 许学伟 李继喜 《复旦学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期58-63,71共7页
酯酶和脂酶是水解短链酯类和长链甘油三酯的两类水解酶,在制药和食品工业酯(脂)键的合成和分解过程中发挥着关键的作用.我们前期已鉴定深海细菌Croceicoccus marinus E4A9T来源的新型蛋白酯酶E4,该酶属于酯酶SGNH亚家族,具有潜在的水解... 酯酶和脂酶是水解短链酯类和长链甘油三酯的两类水解酶,在制药和食品工业酯(脂)键的合成和分解过程中发挥着关键的作用.我们前期已鉴定深海细菌Croceicoccus marinus E4A9T来源的新型蛋白酯酶E4,该酶属于酯酶SGNH亚家族,具有潜在的水解溶血磷脂键的作用,但其催化机制尚不清楚,因此我们对蛋白E4进行了纯化、结晶和初步的X射线衍射分析.E4在大肠杆菌中高效表达,动态光散射(DLS)分析显示其主要以四体的形态均匀分布在溶液中.我们对E4进行了晶体初筛和优化,最终优化培养出棒状晶体且衍射分辨率达2.2.X射线衍射结果表明E4属于P43212空间群,晶胞参数为a=88.863,b=88.863,c=318.914,α=90°,β=90°,γ=90°.此外,酶学活力测定结果表明,它能够水解具有不同酰基链长度的酯类(C2~C10),尤其倾向于水解己酸酯(C6)和辛酸酯(C8). 展开更多
关键词 酯酶 E4 纯化 动态光散射 X-射线衍射
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红曲霉发酵液酯化酿酒尾水制备酯化液的研究 预览 被引量:1
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作者 方春玉 周健 李智 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第13期46-50,共5页
利用红曲霉发酵生成的酯化酶液,催化酿酒尾水中的有机酸和醇,来制备含酯量较高的酯化液。本研究采用液态发酵法制备酯化酶液,添加到酿酒尾水、乙醇、己酸的混合液中,在一定条件下进行酯化反应,以混合液总酯含量和各有效成分含量为... 利用红曲霉发酵生成的酯化酶液,催化酿酒尾水中的有机酸和醇,来制备含酯量较高的酯化液。本研究采用液态发酵法制备酯化酶液,添加到酿酒尾水、乙醇、己酸的混合液中,在一定条件下进行酯化反应,以混合液总酯含量和各有效成分含量为指标,设计单因素实验考察影响酯化反应因素的范围,采用正交设计实验优化各酯化反应的条件。正交实验所得的最优条件为乙醇添加量为10%、酯化酶液添加量为9%、己酸添加量为1.5%、酯化反应温度为35℃,在此条件下混合液中总酯的含量达137.01mg/100mL,其中己酸乙酯含量高迭222.71mg/L,乳酸乙酯的含量由92.93mg/L下降到74.61mg/L,乳酸乙酯与己酸乙酯的比值小于1。所得酯化液适合用于白酒的勾调,不仅大幅提高了酒体中总酯含量,还减少了乳酸乙酯对主体香型的抑制和青涩杂味,使酒体香气更为突出协调。 展开更多
关键词 酿酒尾水 酯化液 酯化酶 红曲霉
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Rediscovery and analysis of Phytophthora carbohydrate esterase(CE) genes revealing their evolutionary diversity 预览
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作者 QIAN Kun LI Deng-hui +5 位作者 LIN Run-mao SHI Qian-qian MAO Zhen-chuan YANG Yu-hong FENG Dong-xin XIE Bing-yan 《农业科学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期878-891,共14页
A continuous co-evolutionary arms-race between pathogens and their host plants promotes the development of pathogenicfactors by microbes, including carbohydrate esterase (CE) genes to overcome the barriers in plant ... A continuous co-evolutionary arms-race between pathogens and their host plants promotes the development of pathogenicfactors by microbes, including carbohydrate esterase (CE) genes to overcome the barriers in plant cell walls. Identificationof CEs is essential to facilitate their functional and evolutionary investigations; however, current methods may have a limitin detecting some conserved domains, and ignore evolutionary relationships of CEs, as well as do not distinguish CEs fromproteases. Here, candidate CEs were annotated using conserved functional domains, and orthologous gene detection andphylogenetic relationships were used to identify new CEs in 16 oomycete genomes, excluding genes with protease domains.In our method, 41 new putative CEs were discovered comparing to current methods, including three CE4, 14 CE5, eight CE12,five CE13, and 11 CE14. We found that significantly more CEs were identified in Phytophthora than in Hyaloperonosporaand Pythium, especially CE8, CE12, and CE13 that are putatively involved in pectin degradation. The abundance of theseCEs in Phytophthora may be due to a high frequency of multiple-copy genes, supporting by the phylogenetic distributionof CE13 genes, which showed five units of Phytophthora CE13 gene clusters each displaying a species tree like topology,but without any gene from Hyaloperonospora or Pythium species. Additionally, diverse proteins associated with productsof CE13 genes were identified in Phytophthora strains. Our analyses provide a highly effective method for CE discovery,complementing current methods, and have the potential to advance our understanding of function and evolution of CEs. 展开更多
关键词 PHYTOPHTHORA CARBOHYDRATE ESTERASE gene prediction comparative genomic ANALYSIS evolution DIVERSITY
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MeNA, Controlled by Reversible Methylation of Nicotinate, Is an NAD Precursor that Undergoes Long-Distance Transport in Arabidopsis
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作者 Ranran Wu Fengxia Zhang +3 位作者 Lingyun Liu Wei Li Eran Pichersky Guodong Wang 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第10期1264-1277,共14页
关键词 ARABIDOPSIS NAD 运输 可逆 控制 陆地植物 被子植物 甘露糖醇
微生物酯酶的性质及其应用 预览 被引量:1
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作者 李晓如 白晶 张剑 《中国洗涤用品工业》 2018年第4期59-67,共9页
酯酶是一种重要的工业用酶,主要来源于微生物发酵。酯酶广泛应用于食品行业、医药行业、洗涤行业、环保行业等多个行业。本文从酯酶的来源、酯酶的特性、酯酶的分类、产酯酶菌株的筛选以及酯酶的发酵过程和发酵工艺进行了综述,并结合酯... 酯酶是一种重要的工业用酶,主要来源于微生物发酵。酯酶广泛应用于食品行业、医药行业、洗涤行业、环保行业等多个行业。本文从酯酶的来源、酯酶的特性、酯酶的分类、产酯酶菌株的筛选以及酯酶的发酵过程和发酵工艺进行了综述,并结合酯酶的分子结构,对酯酶酶活力的测定方法和应用进行了总结。 展开更多
关键词 微生物 酯酶 酶活力 发酵 应用
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紫色红曲霉FBKL3.0018液态发酵产酯化酶的工艺优化 预览 被引量:1
15
作者 王艳 吴鑫颖 +4 位作者 胡娜 唐佳代 王晓丹 王啸 邱树毅 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第15期147-153,共7页
以分离自贵州某浓香型酒厂中温大曲的产酯化酶紫色红曲霉(Monascus purpureus)FBKL3.0018为研究对象,以发酵液中酯化酶活性为考察指标,通过单因素实验、Plackett-Burman实验和响应面试验对FBKL3.0018产酯化酶的发酵培养条件进行优化... 以分离自贵州某浓香型酒厂中温大曲的产酯化酶紫色红曲霉(Monascus purpureus)FBKL3.0018为研究对象,以发酵液中酯化酶活性为考察指标,通过单因素实验、Plackett-Burman实验和响应面试验对FBKL3.0018产酯化酶的发酵培养条件进行优化。由单因素实验得到FBKL3.0018产胞外酯化酶的条件为:2%牛肉膏、6%蔗糖、0.2%无水氯化钙和0.15%七水硫酸镁、初始pH4.5、发酵温度31℃、摇床转速160r/min、装液量45mL/250mL、接种量9%和发酵时间96h。PB结果表明,对酯化酶生产影响较显著的因素为发酵温度、发酵时间和蔗糖添加量。响应面优化实验得到的最优条件为:发酵温度31℃,发酵时间96 h,蔗糖浓度6%,在优化条件下,酯化酶活性为355.62U/mL,比优化前(133.12U/mL)提高了2.67倍,与预测值368.82 U/m L拟合率达96.4%,说明所建立的回归模型可靠。 展开更多
关键词 紫色红曲霉 酯化酶 液态发酵 响应面 工艺优化
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丁草胺对金鱼主要器官酯酶和过氧化物酶同工酶的影响 预览
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作者 张晓红 高晋华 +2 位作者 范轩坤 陈婉珊 李瑞梅 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2018年第4期286-290,296共6页
目的:探讨丁草胺对金鱼主要器官酯酶(EST)和过氧化物酶(POD)同工酶的影响,为评估丁草胺对水生生物的环境风险提供依据。方法:依据丁草胺对金鱼染毒24 h的半数致死浓度设置0.4、0.8、1.2 mL/L丁草胺染毒组,并以0.1 mL/g腹腔注射急性染毒... 目的:探讨丁草胺对金鱼主要器官酯酶(EST)和过氧化物酶(POD)同工酶的影响,为评估丁草胺对水生生物的环境风险提供依据。方法:依据丁草胺对金鱼染毒24 h的半数致死浓度设置0.4、0.8、1.2 mL/L丁草胺染毒组,并以0.1 mL/g腹腔注射急性染毒金鱼24 h,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法检测金鱼主要器官的EST和POD同工酶活性。结果:对照组金鱼心脏EST和POD同工酶不表达,在丁草胺1.2 mL/L时产生应激反应,出现新条带,活性较对照组显著升高(P<0.01)。随丁草胺浓度增加,与对照组相比,肝胰脏EST同工酶活性逐渐减弱(P<0.01),POD同工酶活性先增强后减弱(P<0.01)。0.4 mL/L时鳃、肾脏EST同工酶活性分别是对照组的2倍和3倍(P均<0.01);0.8 mL/L时鳃、肾脏EST和POD同工酶活性均消失,在1.2 mL/L时活性重现但较对照组差异明显(P<0.05或P<0.01)。结论:丁草胺浓度与金鱼不同组织EST、POD同工酶活性呈剂量-效应关系。中浓度(0.8 mL/L)及以上丁草胺可能破坏金鱼鳃和肾脏的EST、POD同工酶活性。 展开更多
关键词 丁草胺 金鱼 酯酶 过氧化物酶
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七种荞麦子叶期同工酶电泳分析
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作者 李珍 孙丽华 +2 位作者 刘晓光 杨昱萍 赵艳玲 《阴山学刊:自然科学版》 2018年第4期26-29,共4页
本文通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对内蒙古地区七种荞麦的酯酶、过氧化氢酶同3-酶进行分析,比较这七种荞麦间的亲缘关系及抗逆性强弱,结果表明:乌2与其他六种荞麦亲缘关系较远,赤1、武1和通1、通2它们之间的亲缘关系较近,通3与乌1间也... 本文通过聚丙烯酰胺凝胶电泳对内蒙古地区七种荞麦的酯酶、过氧化氢酶同3-酶进行分析,比较这七种荞麦间的亲缘关系及抗逆性强弱,结果表明:乌2与其他六种荞麦亲缘关系较远,赤1、武1和通1、通2它们之间的亲缘关系较近,通3与乌1间也有较近的亲缘关系.其中,这七种荞麦的抗逆性强弱依次为通2、通1、武1、赤1〉通3、乌1〉乌2. 展开更多
关键词 荞麦 过氧化氢酶 酯酶 聚丙烯酰胺凝胶电泳 分析
新颖深海微生物酯酶EstC11的酶学性质及其在手性拆分乙酸苏合香酯中的应用
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作者 公颜慧 马三梅 +4 位作者 王永飞 张继福 张云 孙爱君 胡云峰 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2018年第8期1632-1640,共9页
【背景】手性乙酸苏合香酯是重要的手性香料产品,在食品及精细化工等领域都有重要的应用。酶催化不对称合成手性乙酸苏合香酯产品具有极好的工业应用前景。【目的】研究酯酶EstC11的基本酶学性质及其在制备手性乙酸苏合香酯中的应用。... 【背景】手性乙酸苏合香酯是重要的手性香料产品,在食品及精细化工等领域都有重要的应用。酶催化不对称合成手性乙酸苏合香酯产品具有极好的工业应用前景。【目的】研究酯酶EstC11的基本酶学性质及其在制备手性乙酸苏合香酯中的应用。【方法】对来自西太平洋深海热液口芽孢杆菌Bacillus sp.CX01中的新颖微生物酯酶基因EstC11进行克隆、表达及酶学性质鉴定。通过对p H、温度、有机溶剂等反应条件的优化提高酯酶手性拆分乙酸苏合香酯的光学纯度。【结果】酯酶EstC11的最适反应p H为8.5,最适温度为25°C,一些金属离子和有机溶剂对酯酶EstC11的水解活性具有不同程度的抑制作用。通过对反应条件的优化,在最适反应条件下(p H 9.0 50 mmol/L Tris-HCl,20°C,50 mmol/L底物浓度)反应3 h后,(R)-乙酸苏合香酯的光学纯度达98%,得率为39%。【结论】通过对酯酶拆分条件的优化,手性拆分乙酸苏合香酯生成(R)-乙酸苏合香酯的光学纯度明显提高,为酯酶EstC11在工业化上的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 深海微生物 酯酶 动力学拆分 (R)-乙酸苏合香酯
紫色红曲霉中新型酯酶ESM1的纯化及其酶学特性研究 预览
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作者 张玉 周冉冉 +2 位作者 李可心 黄宇 陈茂彬 《中国酿造》 北大核心 2018年第12期137-142,共6页
该研究以白酒大曲中筛选出的一株高产酯酶菌株HQ为研究对象,采用分子生物学对其进行菌种鉴定。通过硫酸铵二级沉淀、丁基琼脂糖凝胶柱和Superdex G-200柱对其所产的酯酶进行纯化,并进行N-端序列、质谱和酶学性质分析。结果表明,菌株HQ... 该研究以白酒大曲中筛选出的一株高产酯酶菌株HQ为研究对象,采用分子生物学对其进行菌种鉴定。通过硫酸铵二级沉淀、丁基琼脂糖凝胶柱和Superdex G-200柱对其所产的酯酶进行纯化,并进行N-端序列、质谱和酶学性质分析。结果表明,菌株HQ被鉴定为紫红曲霉(Monascus purpureus),经纯化获得一个分子质量为60kDa的酯酶,命名为ESM1。酯酶ESM1具有一段酸性蛋白酶的肽段序列,最适温度为60℃、最适pH值为7.0,在温度为50℃的环境和中性环境中表现出良好的稳定性。Zn^2+、Ca^2+和Na^+对ESM1有促进作用,其中Zn2+促进作用最高,Cu^2+、Mg^2+、Fe^2+和Mn^2+有抑制作用,其中Cu^2+的抑制作用最强。 展开更多
关键词 紫色红曲霉 酯酶 纯化 酶学性质
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白酒大曲产酯化酶犁头霉的分离鉴定及产酶条件优化 预览
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作者 孙晓璐 王明跃 张源 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2018年第10期40-44,123共6页
以安徽金种子集团中温大曲为原料,从中筛选能够产酯化酶的发酵菌种并鉴定其种类,再以酯化力为目标值研究该菌株产酯化酶的发酵培养基组成和发酵条件。结果表明,从金种子中温大曲中分离得到1株高产酯化酶的菌株LD06,通过形态学观察、分... 以安徽金种子集团中温大曲为原料,从中筛选能够产酯化酶的发酵菌种并鉴定其种类,再以酯化力为目标值研究该菌株产酯化酶的发酵培养基组成和发酵条件。结果表明,从金种子中温大曲中分离得到1株高产酯化酶的菌株LD06,通过形态学观察、分子鉴定及Biolog鉴定确定该菌株为犁头霉。以该菌株发酵产物中的酯化力为目标值,得到该犁头霉的固体发酵培养基组成为:麸皮10g,玉米粉1.5g、酵母粉2.0g、亚麻籽油1g/100g·培养基、硫酸铵0.2g、蒸馏水10mL;培养条件分别为温度36℃、时间45h。该条件下得到的犁头霉产酯化酶的酯化力为9.32g/L,与该菌株初始酯化力相比提高了22.55%。 展开更多
关键词 犁头霉 酯化酶 酯化力 产酶条件
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