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光和温度对两种绿潮藻光合途径及抗氧化功能的影响 认领
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作者 马茜 王玉珏 +1 位作者 孙西艳 刘东艳 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期21-29,共9页
绿潮是潮间带绿藻大量增殖形成的高生物量生态灾害,其暴发不仅受到温度、营养盐等环境因素的驱动,而且与自身光合能力的强弱密切相关。本研究以绿潮物种—肠浒苔(Ulva intestinalis)和Ulva expansa为研究对象,通过室外培养实验,检测了... 绿潮是潮间带绿藻大量增殖形成的高生物量生态灾害,其暴发不仅受到温度、营养盐等环境因素的驱动,而且与自身光合能力的强弱密切相关。本研究以绿潮物种—肠浒苔(Ulva intestinalis)和Ulva expansa为研究对象,通过室外培养实验,检测了它们在夏季高温、高光强条件下的光合途径与抗氧化生理特征,并分析了与光合产物的对应关系。研究结果表明,肠浒苔与U. expansa的光合途径与抗氧化能力存在显著差异。前者的C_4光合途径关键酶活性在光合作用过程中出现高表达特征,与光、温度存在显著相关性,C_3光合途径关键酶活性在中午受到强光抑制;组织δ~(13)C的变化范围为-17.1‰~-15.7‰,表明其光合作用可能由C_3和C_4途径共同参与。后者的C_4光合途径关键酶活性表达较弱,且与光、温度不存在显著相关性,C_3光合途径关键酶活性没有出现明显的光抑制现象;组织δ~(13)C的范围为-23.5‰~-21.9‰,表明其光合作用主要依靠C_3途径进行。此外,肠浒苔在培养过程中表现出了较强的抗氧化能力,可能与其在高温、高光强条件下启动C_4光合途径密切相关。肠浒苔与U. expansa的比较研究说明,藻类C_4光合途径存在显著种间差异性。 展开更多
关键词 肠浒苔 Ulva expansa 卡尔文循环 Hatch-Slack光合途径 光合固碳
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扩展莫尼茨绦虫DAZ基因保守结构域所在片段的克隆及原核表达 认领
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作者 王涛 夏党荣 +2 位作者 马勋 薄新文 王静梅 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第7期43-46,共4页
为了克隆和表达编码扩展莫尼茨绦虫无精症缺失(DAZ)基因,试验根据GenBank中扩展莫尼茨绦虫DAZ基因cDNA序列(登录号为GH291478)设计1对特异性引物,以扩展莫尼茨绦虫组织总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZ基因,并克隆到pMD19-T载体中进行序... 为了克隆和表达编码扩展莫尼茨绦虫无精症缺失(DAZ)基因,试验根据GenBank中扩展莫尼茨绦虫DAZ基因cDNA序列(登录号为GH291478)设计1对特异性引物,以扩展莫尼茨绦虫组织总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZ基因,并克隆到pMD19-T载体中进行序列测定,构建重组质粒pET28a-DAZ,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,以异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达;利用非变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分析表达产物,通过螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果表明:重组DAZ基因在大肠杆菌中高效表达,表达的融合蛋白分子量约为14 ku。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa) 无精症缺失(DAZ)基因 克隆 原核表达
生物信息学对扩展莫尼茨绦虫cDNA文库Cavβ基因分析与B细胞抗原表位预测 认领
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作者 赵文娟 康立超 +2 位作者 王正荣 薄新文 王新华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期 735-742,共8页
【目的】分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)电压门控钙通道β亚基(Cavβ)基因,预测蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨Cavβ在寄生虫病治疗中所起的作用。【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克... 【目的】分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)电压门控钙通道β亚基(Cavβ)基因,预测蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨Cavβ在寄生虫病治疗中所起的作用。【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取全长cDNA序列;采用生物信息学方法对其对应的蛋白进行二级结构和B细胞抗原表位的预测。【结果】获得扩展莫尼茨绦虫Cavβ基因,全长946 bp,编码180个氨基酸,理论分子质量为19.788 8 kD,等电点为5.06,属于Cachannel B超家族。二级结构以无规则卷曲为主,结构预测存在4个可能的B细胞抗原表位。【结论】研究对于扩展莫尼茨绦虫Cavβ基因的获得和B细胞抗原表位的预测,为该基因功能的试验性鉴定工作奠定了基础。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 Cavβ 二级结构 B细胞抗原表位 功能预测
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扩展莫尼茨绦虫蛋白激酶C相互作用蛋白(PICK1)基因的克隆及序列分析 认领
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作者 赵文娟 康立超 +1 位作者 薄新文 王新华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期 1307-1312,共6页
【目的】分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生... 【目的】分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生物信息学等分析技术对该cDNA序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导、核苷酸和氨基酸同源性比较及蛋白质二级结构的初步预测。【结果】获得了1个扩展莫尼茨绦虫新基因蛋白激酶C相互作用蛋白,全长1 527 bp,编码447个氨基酸,CDS预测存在明显的BAR,PDZ结构域。编码蛋白的理论分子质量为50.173 3 ku,等电点为5.22。【结论】获得了扩展莫尼茨绦虫蛋白激酶C相互作用蛋白的全长cDNA序列,为该基因功能的试验性鉴定工作奠定基础。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 PICK1 序列分析
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扩展莫尼茨绦虫DAZ基因的分离和cDNA序列分析 认领 被引量:1
5
作者 赵文娟 朱建军 +2 位作者 吕廷德 薄新文 王新华 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2010年第1期 37-42,共6页
为进一步研究扩展莫尼茨绦虫并以其作为模式生物提供基础。通过构建的扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生物信息学等技术对该cDNA序列进行开放阅读... 为进一步研究扩展莫尼茨绦虫并以其作为模式生物提供基础。通过构建的扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生物信息学等技术对该cDNA序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导、核苷酸和氨基酸同源性比较以及蛋白质结构的初步预测。结果显示:获得了1个扩展莫尼茨绦虫新基因DAZ基因,cDNA全长1905bp,包含1个完整的ORF,编码562个氨基酸,登录号为:GH291478。蛋白理论分子量为61.3169kD,等电点为4.77,不稳定系数50.27,脂肪系数65.04,总平均亲水性-0.472。二级结构预测该蛋白有1个跨膜区域,以无规卷曲(L)为主,没有二硫键结合位点。本研究成功分离扩展莫尼茨绦虫DAZ基因。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 DAZ基因 序列分析
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扩展莫尼茨绦虫反应元件结合蛋白基因的克隆和cDNA序列分析 认领
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作者 朱建军 赵文娟 +2 位作者 张慧 吕廷德 薄新文 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2009年第6期 701-705,共5页
克隆扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,通过生物信息学方法分析该基因的生物学信息,初步预测该基因的功能,为进一步研究扩展莫尼茨绦虫并以其作为模式生物,为人类的某些基因未知功能的研究提供基础。构建扩展莫尼茨绦虫成... 克隆扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,通过生物信息学方法分析该基因的生物学信息,初步预测该基因的功能,为进一步研究扩展莫尼茨绦虫并以其作为模式生物,为人类的某些基因未知功能的研究提供基础。构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克降进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;在NCBI上对该cDNA序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导、核苷酸和氨基酸同源性比较以及蛋白质二级结构的初步预测。结果:获得了1个扩展莫尼茨绦虫基因-应结合蛋白,全长1861bp,编码592个氨基酸,属于DUF906家族,与曼氏血吸虫反应结合蛋白基因具有72.1%的同源性。编码蛋白的理论分子量为69.7653kDa,等电点为9.83.结论:获得了扩展莫尼茨绦虫反应结合蛋白的全长cDNA序列,对该基因功能的初步预测,它是一种基因转录因子,在扩展莫尼茨绦虫虫体中的具体作用机制目前还不清楚,推断该基因的功能在脊椎动物,乃至人类的基因功能研究中具有一定借鉴意义. 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 反应结合蛋白 序列分析 表达序列标签
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扩展莫尼茨绦虫引发酶蛋白基因的克隆和cDNA序列分析 认领
7
作者 吕廷德 赵文娟 +2 位作者 朱建军 王新华 薄新文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第9期 59-62,共4页
分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生物信息学等分析技... 分离和鉴定扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)新基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获取其全长cDNA序列;采用生物信息学等分析技术对该cDNA序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导、核苷酸和氨基酸同源性比较及蛋白质二级结构的初步预测。获得了1个扩展莫尼茨绦虫新基因——引发酶蛋白,全长1269 bp,编码422个氨基酸,属于AE_Prim_S家族。编码蛋白的理论分子质量为47.1598 ku,等电点为4.83。获得了扩展莫尼茨绦虫反应结合蛋白的全长cDNA序列,为该基因功能的试验性鉴定工作奠定基础。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 引发酶 序列分析 表达序列标签
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扩展莫尼茨绦虫vasa基因的原核表达及多克隆抗体的制备 认领
8
作者 钱凌霄 王正荣 +5 位作者 李红欢 刘乙 张艳艳 王炜烨 薄新文 马勋 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1136-1141,共6页
试验旨在表达、纯化扩展莫尼茨绦虫VASA蛋白,并制备兔抗VASA多克隆抗体。根据扩展莫尼茨绦虫全基因核苷酸序列设计特异性引物,利用PCR方法扩增vasa基因片段;将扩增产物与原核表达载体pET-22b(+)连接,获得重组质粒pET-22b-VASA;经Amp抗... 试验旨在表达、纯化扩展莫尼茨绦虫VASA蛋白,并制备兔抗VASA多克隆抗体。根据扩展莫尼茨绦虫全基因核苷酸序列设计特异性引物,利用PCR方法扩增vasa基因片段;将扩增产物与原核表达载体pET-22b(+)连接,获得重组质粒pET-22b-VASA;经Amp抗性筛选阳性菌,双酶切、PCR测序鉴定后,将其转化大肠杆菌(DE3)感受态细胞中,并进行IPTG诱导表达;重组融合蛋白经镍柱纯化后,进行Western blot鉴定;将融合蛋白免疫兔,制备多克隆抗体。结果显示,重组质粒pET-22b-VASA构建正确,通过IPTG诱导获得大小约32200的VASA重组融合蛋白;Western blot分析表明其与鼠抗His单克隆抗体呈阳性反应。纯化的VASA蛋白免疫兔获得了多克隆抗体,ELISA检测其效价为1∶128000。本试验成功制备了具有免疫原性的VASA蛋白及其兔源多克隆抗体,为VASA蛋白生物学功能及该蛋白在绦虫体内的分布等研究奠定基础。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 VASA 原核表达 多克隆抗体 ELISA
基于ITS基因分析扩展莫尼茨绦虫种系发育关系 认领 被引量:1
9
作者 侯强红 李进军 《经济动物学报》 CAS 2019年第2期107-109,114共4页
为研究扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列的遗传变异情况,并利用ITS序列探讨扩展莫尼茨绦虫与其它带科绦虫的种群发育关系,本研究利用PCR对扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列进行扩增、测序及分析。结果表明:16株扩展莫尼茨绦虫分离... 为研究扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列的遗传变异情况,并利用ITS序列探讨扩展莫尼茨绦虫与其它带科绦虫的种群发育关系,本研究利用PCR对扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列进行扩增、测序及分析。结果表明:16株扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列长度一致,为1462~1473bP,且分离株与基因库扩展莫尼茨绦虫位于同一大分支,可以与其它带科绦虫有效鉴别。说明ITS序列种内较为保守,种间差异较大,可以作为扩展莫尼茨绦虫的种间遗传变异研究的分子标记。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 核糖体DNA ITS基因 序列分析 种系发育关系
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红树蚬与歪红树蚬对短链氯化石蜡胁迫应答的差别 认领
10
作者 邢永泽 杨明柳 +2 位作者 农莹 陆宇哲 阎冰 《广西科学》 CAS 2017年第5期498-503,515共7页
【目的】研究红树蚬Polymesoda erosa与歪红树蚬Polymesoda expansa对短链氯化石蜡(Short-chain Chlorinated Paraffins,SCCPs)胁迫应答的差别。【方法】观察两种蚬血细胞的溶酶体中性红保持时间(Neutral Red Retention Time,NRRT)... 【目的】研究红树蚬Polymesoda erosa与歪红树蚬Polymesoda expansa对短链氯化石蜡(Short-chain Chlorinated Paraffins,SCCPs)胁迫应答的差别。【方法】观察两种蚬血细胞的溶酶体中性红保持时间(Neutral Red Retention Time,NRRT)、总抗氧化活力(Total Antioxidant Capacity,T-AOC)、丙二醛(MDA)含量对不同剂量-时间SCCPs的响应。【结果】在低浓度SCCPs胁迫早期,两种蚬NRRT均表现出“毒物兴奋效应”,其中红树蚬表现更为明显;T-AOC值、MDA含量表明歪红树蚬对于逆境的抵抗力更强。中、高浓度SCCPs胁迫下两种蚬对SCCPs响应结果相似。【结论】红树蚬与歪红树蚬对SCCPs胁迫应答随剂量-时间变化总体趋势相似。歪红树蚬对逆境的抵抗力略强。 展开更多
关键词 短链氯化石蜡 红树蚬 歪红树蚬 胁迫
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扩展莫尼茨绦虫wnt基因在虫体不同发育体节的差异表达 认领 被引量:2
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作者 王正荣 张艳艳 +2 位作者 薄新文 徐雪平 徐春生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2483-2492,共10页
研究扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)wnt基因家族wnt1、wnt2、wnt4、wnt5和wnt11B5个基因在虫体不同发育体节的差异表达及组织分布规律,为进一步揭示Wnt信号通路在扩展莫尼茨绦虫发育中的作用奠定基础。作者采用SYBR GreenⅠqRT-PC... 研究扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)wnt基因家族wnt1、wnt2、wnt4、wnt5和wnt11B5个基因在虫体不同发育体节的差异表达及组织分布规律,为进一步揭示Wnt信号通路在扩展莫尼茨绦虫发育中的作用奠定基础。作者采用SYBR GreenⅠqRT-PCR方法分析了wnt1、wnt2、wnt4、wnt5和wnt11B在虫体头颈节、幼节、成节和孕节的mRNA相对转录情况;采用核酸原位杂交方法分析上述5个基因在虫体头颈节、幼节、成节和孕节的mRNA分布情况。结果显示,wnt基因家族成员在虫体各发育体节均有表达,wnt1、wnt4、wnt5和wnt11B基因在虫体头颈节的mRNA转录水平相对较高,而在虫体孕节的mRNA转录水平最低;与之相反,wnt2基因在虫体头颈节的mRNA转录水平最低,而在虫体幼节的转录水平较高。原位杂交的结果表明,在虫体的头颈节,wnt基因主要表达于虫体的吸盘部位;在幼节和孕节,主要表达于虫体的节间腺,而在成节,wnt基因在虫体的雌雄生殖系统(如卵巢、睾丸)均有表达,并且在虫体的节间腺以及表皮也有一定的表达。综上,扩展莫尼茨绦虫5个wnt基因在虫体头颈节以及幼节的mRNA转录水平较高,且在虫体的吸盘、节间腺以及雌雄生殖细胞均有分布,因此初步推测Wnt信号通路可能参与扩展莫尼茨绦虫体节以及生殖细胞的发育过程,当然这一假说还有待进一步验证。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 节片发育 wnt基因家族 差异表达
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10个生殖发育相关基因在扩展莫尼茨绦虫不同发育节片的mRNA转录水平分析 认领 被引量:1
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作者 王正荣 薄新文 +1 位作者 张艳艳 马勋 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期75-77,共3页
根据扩展莫尼茨绦虫转录组测序结果,选取在虫体不同发育节片(即头颈节、幼节、成节和孕节)差异表达的10个基因KIFC1、Kif17、Smad D、β转录生长因子、β转录生长因子受体、HSD5、嘌啉毒素胺基肽酶、甲硫氨酸胺基肽酶2,以及转录因子f... 根据扩展莫尼茨绦虫转录组测序结果,选取在虫体不同发育节片(即头颈节、幼节、成节和孕节)差异表达的10个基因KIFC1、Kif17、Smad D、β转录生长因子、β转录生长因子受体、HSD5、嘌啉毒素胺基肽酶、甲硫氨酸胺基肽酶2,以及转录因子fork和Sox,利用实时定量PCR技术验证上述基因在扩展莫尼茨绦虫各发育阶段节片中m RNA转录情况。结果表明,与靶标基因在虫体头颈节的转录水平相比,KIFC1,Kif17基因在幼节的表达呈明显的上调趋势(P〈0.01)。KIFC1、Kif17、β转录生长因子受体和嘌啉毒素胺基肽酶基因在成节的表达呈上调趋势(P〈0.01)。HSD5、β转录生长因子受体和甲硫氨酸胺基肽酶2基因在孕节的表达呈上调趋势(P〈0.01)。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 节片 实时定量PCR
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扩展莫尼茨绦虫感染对成年牦牛小肠不同部位黏膜固有免疫细胞的影响 认领 被引量:1
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作者 曹婷婷 王雯慧 +2 位作者 祁珊珊 李淑娴 张学锋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期973-978,共6页
为研究扩展莫尼茨绦虫对成年牦牛小肠黏膜固有免疫细胞的影响,采用组织学、组织化学染色与细胞数量检测以及统计分析的方法对感染组和对照组牦牛小肠不同部位黏膜固有免疫细胞进行了详细观察、分析,并做了比较。结果显示,感染组牦牛十... 为研究扩展莫尼茨绦虫对成年牦牛小肠黏膜固有免疫细胞的影响,采用组织学、组织化学染色与细胞数量检测以及统计分析的方法对感染组和对照组牦牛小肠不同部位黏膜固有免疫细胞进行了详细观察、分析,并做了比较。结果显示,感染组牦牛十二指肠、空肠和回肠黏膜中的黏膜固有免疫细胞即上皮内淋巴细胞、杯状细胞、嗜酸性粒细胞、浆细胞和肥大细胞数量均远远多于对照组牦牛的相应部位,差异都极显著(P〈0.01)。但感染组和对照组从十二指肠到回肠,上述5种细胞的分布趋势一致:上皮内淋巴细胞和肥大细胞的数量逐渐减少,在小肠各段的数量分布均差异显著(P〈0.05);杯状细胞、嗜酸性粒细胞从前至后呈增多趋势且差异显著(P〈0.05);浆细胞呈增多趋势,然而空肠和回肠浆细胞数量差异不显著(P〉0.05)。研究结果表明,扩展莫尼茨绦虫感染时,成年牦牛感染部位小肠黏膜固有免疫细胞大量增生,但其分布趋势没有发生改变。 展开更多
关键词 牦牛 扩展莫尼茨绦虫 上皮内淋巴细胞 杯状细胞 嗜酸性粒细胞 浆细胞 肥大细胞
扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin部分片段克隆及不同体节mRNA转录水平分析 认领
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作者 叶倩 马勋 +2 位作者 薄新文 王正荣 张艳艳 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第8期16-22,共7页
旨在初步了解丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的作用。采用分子克隆获得扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin基因部分片段,应用MEGA软件对其进行进化分析。同时以beta-Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green re... 旨在初步了解丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的作用。采用分子克隆获得扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin基因部分片段,应用MEGA软件对其进行进化分析。同时以beta-Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR技术检测该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节中的表达差异,最终克隆获得749bp的serpin基因片段。进化分析表明,扩展莫尼茨绦虫serpin基因与多方棘球蚴serpin基因有较近的亲缘关系。标准曲线分析显示,serpin和beta-Tubulin基因的Ct值与阳性质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99,熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。同时试验结果显示,serpin基因在虫体各发育阶段中的表达丰度存在差异,从高到低依次为孕节、头节、成节、幼节。由此初步推测,此基因可能在扩展莫尼茨绦虫虫卵发育为六钩蚴的过程中发挥一定作用。 展开更多
关键词 SERPIN 扩展莫尼茨绦虫 RT-PCR
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红树蚬与歪红树蚬形态差异分析 认领 被引量:3
15
作者 农莹 杨明柳 +2 位作者 邢永泽 高霆炜 阎冰 《广西科学院学报》 2015年第4期268-272,共5页
【目的】从形态上区分红树蚬(Polymesoda erosa)和歪红树蚬(Polymesoda expansa)。【方法】运用多变量形态度量学分析方法,采用14项生物学形态性状指标比较广西廉州湾草头村红树林的红树蚬与歪红树蚬的差异。【结果】方差分析结果... 【目的】从形态上区分红树蚬(Polymesoda erosa)和歪红树蚬(Polymesoda expansa)。【方法】运用多变量形态度量学分析方法,采用14项生物学形态性状指标比较广西廉州湾草头村红树林的红树蚬与歪红树蚬的差异。【结果】方差分析结果显示,1个比例性状达到差异显著水平(P〈O.05),12个比例性状达到差异极显著水平(P〈O.01)。主成分分析构建了4个主成分,第1主成分贡献率为3O.7O%,第2主成分贡献率为17.76%,第3主成分贡献率为1O.11%,第4主成分贡献率为7.80%,累计贡献率为66.37%。逐步判别分析建立判别函数,其判别准确率p,为81.7%~89.0%,夕:为81.7%~87.5%,综合判别率为86.0%。【结论】壳高、壳宽、韧带长、韧带宽等性状决定红树蚬和歪红树蚬两个种问的形态差异,判别方程可以有效将上述种群区分开来。 展开更多
关键词 红树蚬 歪红树蚬 形态差异 多元分析
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扩展莫尼茨绦虫RNA结合蛋白基因的克隆及不同体节mRNA转录水平的分析 认领
16
作者 王正荣 薄新文 +2 位作者 赵文娟 何延华 康立超 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期999-1005,共7页
为研究RNA结合蛋白在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的功能,克隆了该基因的全长序列;同时以beta—Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Gteenreal-timeRT-PCR方法检测了该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段,即头节、幼节、成节、孕节中... 为研究RNA结合蛋白在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的功能,克隆了该基因的全长序列;同时以beta—Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Gteenreal-timeRT-PCR方法检测了该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段,即头节、幼节、成节、孕节中的mRNA转录水平。结果显示,扩展莫尼茨绦虫RNA结合蛋白基因全长为1905bp,编码562个氨基酸。进化分析表明,该基因与人类DAZ基因有一定的同源性;mRNA转录水平分析显示,目的基因和beta-Tubulin基因的Ct值与阳性质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99。熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。结果表明,此RNA结合蛋白在虫体各发育阶段中的表达丰度存在明显差异,在虫体成节的表达水平最高,其次为幼节、孕节和头节,初步推测该基因可能与人类DAz基因有相似的功能,对扩展莫尼茨绦虫生殖细胞的发育具有一定的调控作用。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 RNA结合蛋白 克隆 mRNA转录水平
扩展莫尼茨绦虫不同体节CREB和PICK基因mRNA转录水平研究 认领
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作者 王正荣 薄新文 +3 位作者 赵文娟 何延华 康立超 王新华 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第11期178-182,共5页
为研究CREB和PICK在扩展莫尼茨绦虫不同体节的mRNA转录水平, 以beta Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real time RT PCR方法检测该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节中的表达差异。标准曲线分析... 为研究CREB和PICK在扩展莫尼茨绦虫不同体节的mRNA转录水平, 以beta Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real time RT PCR方法检测该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节中的表达差异。标准曲线分析显示,CREB、PICK基因和beta Tubulin基因标准质粒实时定量扩增Ct值与标准质粒的质量浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于 0.99;熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。同时结果还显示,CREB以及PICK基因在虫体各发育阶段中的表达丰度存在差异。CREB基因在扩展莫尼茨绦虫头颈节、幼节、成节和孕节的表达水平依次呈上升趋势,而PICK基因在扩展莫尼茨绦虫成节以及孕节的表达水平较高。 展开更多
关键词 CREB PICK mRNA转录水平 扩展莫尼茨绦虫
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扩展莫尼茨绦虫不同体节翻译延伸因子和引发酶mRNA转录水平研究 认领 被引量:3
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作者 王正荣 薄新文 +1 位作者 赵文娟 康立超 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 250-252,共3页
本研究以β微管蛋白基因作为内参基因,采用实时荧光定量PCR方法检测该基因在扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)4个不同发育阶段,即头节、幼节、成节和孕节中的表达差异。标准曲线分析显示,翻译延伸因子、引发酶基因和β微管蛋白基因... 本研究以β微管蛋白基因作为内参基因,采用实时荧光定量PCR方法检测该基因在扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)4个不同发育阶段,即头节、幼节、成节和孕节中的表达差异。标准曲线分析显示,翻译延伸因子、引发酶基因和β微管蛋白基因标准质粒实时定量扩增Ct值与标准质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数(R2)均大于0.99。同时实验结果显示,翻译延伸因子和引发酶基因在虫体各发育阶段中的转录水平存在差异。其中,翻译延伸因子和引发酶基因在扩展莫尼茨绦虫头节和幼节的转录水平均较高,提示这2个基因可能在头节和幼节的发育中有重要作用。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 翻译延伸因子 引发酶 mRNA转录水平
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扩展莫尼茨绦虫烯醇化酶基因的原核表达及抗原性鉴定 认领 被引量:3
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作者 夏党荣 陈南颖 +3 位作者 马勋 薄新文 何延华 康立超 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 241-243,250,共4页
为表达扩展莫尼茨绦虫(Monieziaexpansa)的烯醇化酶(Enolase),本研究采用RT-PCR方法以Mexpansa组织总RNA为模板扩增enolase基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a中,并转化BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结... 为表达扩展莫尼茨绦虫(Monieziaexpansa)的烯醇化酶(Enolase),本研究采用RT-PCR方法以Mexpansa组织总RNA为模板扩增enolase基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a中,并转化BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果显示表达的重组Enolase约为47ku。Westernblot分析表明,天然蛋白能够被重组表达产物免疫小鼠的血清识别,出现两条免疫印记条带,即天然蛋白以两种形A(gO47ku和40l(u)存在,并具有抗原性,为该蛋白功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 烯醇化酶基因 原核表达 抗原性
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扩展莫尼茨绦虫β微管蛋白基因的克隆及序列分析 认领
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作者 夏党荣 王涛 +4 位作者 薄新文 马勋 何延华 康立超 王新华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 324-329,共6页
【目的】从扩展莫尼茨绦虫中克隆β微管蛋白基因,进行序列测定和生物信息学分析,为进一步研究该基因的功能奠定基础。 【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA 文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获得... 【目的】从扩展莫尼茨绦虫中克隆β微管蛋白基因,进行序列测定和生物信息学分析,为进一步研究该基因的功能奠定基础。 【方法】构建扩展莫尼茨绦虫成虫cDNA 文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,对部分序列进行引物步移法测序,获得其全长cDNA序列;采用生物信息学等技术对该cDNA序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导、核苷酸和氨基酸同源性比较以及蛋白二级结构的初步预测。【结果】获得了1个扩展莫尼茨绦虫新基因——β微管蛋白基因,全长1 571 bp,编码444个氨基酸,与日本血吸虫的β微管蛋白氨基酸序列具有78.6%的同源性。编码蛋白的理论分子量为49.6 ku,等电点为4.96;1~4位氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号,140~146位GGGTGAG存在一个微管蛋白标志信号片段,在99~106位和391~410位存在两个典型的β微管蛋白保守区;亚细胞定位分析其为细胞的骨架蛋白。【结论】获得了扩展莫尼茨绦虫β微管蛋白基因的全长cDNA序列,为该基因功能的实验性鉴定工作奠定基础。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 β微管蛋白 克隆 序列分析
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