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Bacillus subtilis S21产抗菌脂肽分离鉴定及半固态发酵工艺初探 预览
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作者 田秋月 刘杰 +1 位作者 张亮 胡美忠 《饲料工业》 北大核心 2019年第2期40-46,共7页
采用酸沉、甲醇萃取和LH-20层析,从Bacillus subtilis S21发酵菌液纯化出两种抗菌脂肽,通过质谱鉴定两种抗菌脂肽分别为Surfactin和Fengycin,二级质谱表明Surfactin由β-OH脂肪酸链(C12-15)和Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Leu(Ile)组成,Feng... 采用酸沉、甲醇萃取和LH-20层析,从Bacillus subtilis S21发酵菌液纯化出两种抗菌脂肽,通过质谱鉴定两种抗菌脂肽分别为Surfactin和Fengycin,二级质谱表明Surfactin由β-OH脂肪酸链(C12-15)和Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Leu(Ile)组成,Fengycin由β-OH脂肪酸链(C14-16)和Glu-Orn-Tyr-Thr-Glu-Val-Pro-Gln-Tyr-Ile组成。在前期探索试验基础上,以黄豆为主要培养基质,通过正交实验,确定了B.subtilis S21产Surfactin半固态发酵条件:无机盐体系添加20%,葡萄糖添加5%,发酵时间48 h,发酵温度37℃,验证实验表明此条件下Surfactin产量比landy培养基产量增加了180余倍。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 SURFACTIN FENGYCIN 半固态发酵 分离鉴定
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枯草芽胞杆菌WY8-7的溶磷、抑菌及促生长作用 预览
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作者 宫安东 孔宪巍 +3 位作者 翟新可 路亚南 文淑婷 张静柏 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期697-705,共9页
[目的]本文旨在筛选兼有溶磷和抑菌作用的微生物菌株,分析其在水体和土壤中的溶磷效果以及对植物生长的作用,同时分析其抑菌活性,鉴定其抑菌物质。[方法]采用稀释涂平板法,从茶园土壤中分离具有溶磷和抑菌作用的菌株WY8-7,通过形态学、... [目的]本文旨在筛选兼有溶磷和抑菌作用的微生物菌株,分析其在水体和土壤中的溶磷效果以及对植物生长的作用,同时分析其抑菌活性,鉴定其抑菌物质。[方法]采用稀释涂平板法,从茶园土壤中分离具有溶磷和抑菌作用的菌株WY8-7,通过形态学、生理生化和分子生物学分析,确定菌株WY8-7的分类地位;检测菌株WY8-7在土壤和培养液中对难溶性无机磷的降解作用;检测其对苗期玉米植株生长的影响;对峙培养法分析菌株WY8-7对不同病原真菌的抑菌作用;超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱鉴定抑菌功能物质。[结果]经鉴定,菌株WY8-7为枯草芽胞杆菌(Bacillussubtilis),在固体培养基、液体培养基和土壤中均可转化难溶性无机磷,提升可溶性磷含量;液体振荡培养20d后,可溶性磷含量达512.77mg·L^-1,为对照的174倍;菌株WY8-7可提升土壤中可溶性磷含量,并促进苗期玉米的生长,与对照组相比,在叶长、叶宽、单叶叶面积、株高和鲜质量等指标均有显著增长(P<0.05),增长率分别达17.68%、22.08%、42.62%、20.34%和20.59%;质谱分析表明,菌株WY8-7可产生伊枯草菌素A和丰原素A两类抑菌物质,对3种真菌具有高效广谱抑菌作用,对禾谷炭疽菌的抑菌率最高,达87.34%。[结论]分离自茶园的枯草芽胞杆菌WY8-7,在土壤和液体振荡培养中可高效转化难溶性无机磷为可溶性磷,促进苗期玉米植株生长,同时WY8-7还可产生伊枯草菌素A和丰原素A两种脂肽类物质,抑制多种病原真菌生长。WY8-7具有高效溶磷和抑菌作用,为新型微生物菌肥的研发提供重要材料。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 溶磷 抑菌活性 促生长 伊枯草菌素A 丰原素
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Bacillus velenzensis S3-1基因组中表面活性素、伊枯草菌素和丰原素合成基因簇的定位与分析 预览
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作者 金清 张蕾 +2 位作者 蒋秋悦 苏翠珠 肖明 《上海师范大学学报:自然科学版》 2018年第4期451-457,共7页
通过Gen Bank数据库寻找能产生表面活性素、伊枯草菌素或丰原素并在基因组中其合成基因已得到注释的芽胞杆菌,经过BLAST比对序列初步确定这三类脂肽类抗菌肽的合成基因簇的位置,再运用anti SMASH进行其合成基因簇的最终定位.对表面活性... 通过Gen Bank数据库寻找能产生表面活性素、伊枯草菌素或丰原素并在基因组中其合成基因已得到注释的芽胞杆菌,经过BLAST比对序列初步确定这三类脂肽类抗菌肽的合成基因簇的位置,再运用anti SMASH进行其合成基因簇的最终定位.对表面活性素、伊枯草菌素和丰原素的结构及相关的合成酶结构域进行了预测与分析. 展开更多
关键词 生物信息学 BACILLUS velezensis S3-1 表面活性素 伊枯草菌素 丰原素
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新型抗菌肽——表面活性素、伊枯草菌素和丰原素 预览 被引量:3
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作者 金清 肖明 《微生物与感染》 2018年第1期56-64,共9页
表面活性素(surfactin)、伊枯草菌素(iturin)和丰原素(fengycin)是一类主要由革兰阳性芽胞杆菌通过非核糖体合成途径产生的抗菌肽,一般是由1个β-羟基脂肪酸与7~10个氨基酸肽链以酰胺键连接而成的环肽,具有抗细菌、抗真菌、抗病... 表面活性素(surfactin)、伊枯草菌素(iturin)和丰原素(fengycin)是一类主要由革兰阳性芽胞杆菌通过非核糖体合成途径产生的抗菌肽,一般是由1个β-羟基脂肪酸与7~10个氨基酸肽链以酰胺键连接而成的环肽,具有抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗肿瘤等生物活性,具有良好的医疗应用前景。目前,人们对这3种新型抗菌肽在医药领域中的研究进展所知甚少,故本文对其发现历史、结构特点、作用机制、生物合成和应用价值进行阐述,为后续研究提供借鉴。 展开更多
关键词 抗菌肽 表面活性素 伊枯草菌素 丰原素
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枯草芽胞杆菌MG-4抑制小麦全蚀病菌物质及其性质分析 被引量:1
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作者 陈晓萌 王亚杰 +3 位作者 李佳 高同国 张冬冬 朱宝成 《植物保护学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期511-519,共9页
为明确本实验室筛选并鉴定的枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis菌株MG-4分泌物对小麦全蚀病菌的抑制作用及其性质,采用生长速率法检测了菌株MG-4发酵无菌上清液(cell-free supernatant,CFS)中抑菌物质的稳定性,并通过PCR扩增抑菌物质合... 为明确本实验室筛选并鉴定的枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis菌株MG-4分泌物对小麦全蚀病菌的抑制作用及其性质,采用生长速率法检测了菌株MG-4发酵无菌上清液(cell-free supernatant,CFS)中抑菌物质的稳定性,并通过PCR扩增抑菌物质合成相关基因,利用基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定抑菌物质结构。结果表明,菌株MG-4分泌的抑菌物质在中性及酸性条件下稳定,在pH 2-7时CFS相对活性为98.8%-100.0%;热稳定性强,100℃处理30 min后相对活性仍为88.5%;利用胃蛋白酶和胰蛋白酶处理120 min后相对活性为98.8%;CFS中抑菌物质不能被氯仿、乙醚和乙酸乙酯萃取,且对这3种有机溶剂不敏感;Na+、K+、CO3^(2-)和I-对CFS活性无影响,Mg^(2+)、Ca^(2+)、NO3-、SO4^(2-)、H2PO4^(2-)和Mn^(2+)显著抑制CFS活性。菌株MG-4基因组中含有srfAB、yndJ、bamC、fenD、ituC和ituD共6种抑菌物质合成基因;将菌株MG-4分泌的抑菌物质鉴定为C14-C15伊枯草菌素A、C14-C18芬荠素A和C14-C17芬荠素B。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 抑菌物质 MALDI-TOF-MS 伊枯草菌素A 芬荠素
表面活性素、杆菌霉素L、罗克霉素和泛革素4种脂肽类抗生素高效制备方法及其生物学活性 预览
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作者 罗楚平 张婧 +4 位作者 季冬淳 陈树桥 陈永兴 赵玉萍 李相前 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期2307-2314,共8页
目的建立一种从枯枯草芽胞杆菌中高效快速制备4种脂肽类抗生素的方法,初步阐明制备脂肽类抗生素的生物学活性。方法通过构建脂肽类抗生素突变株,采用酸沉淀、有机溶刊抽提和固相萃取的方法从枯草芽胞杆菌Bs916及其突变株的发酵液中提... 目的建立一种从枯枯草芽胞杆菌中高效快速制备4种脂肽类抗生素的方法,初步阐明制备脂肽类抗生素的生物学活性。方法通过构建脂肽类抗生素突变株,采用酸沉淀、有机溶刊抽提和固相萃取的方法从枯草芽胞杆菌Bs916及其突变株的发酵液中提纯表面活性素、杆菌霉素L、泛革素和罗克霉素4种脂肽类抗生素;运用HPLC—MS、SDS—PAGE电泳对制备脂肽娄抗生素的纯度进行检测;最后采用西瓜枯萎病菌、金黄色葡萄球菌和绵羊血红细胞测定4种脂肽类抗生素的抗真菌、抗细菌和溶血活性。结果蛋白凝胶电泳和液相色谱联用质谱检测结果表明,制备的脂肽类抗生素均达到了电泳纯和色谱纯;生物活性分析实验结果表明,表面活性素和杆菌霉素L具有较强的溶血活性,泛革素和罗克霉素的溶血活性较弱,杆菌霉素L和泛革素具有较强的抗真菌活性,而表面活性素和罗克霉素具有较强的抗细菌活性。结论建立快速从芽胞杆菌中提纯4种脂肽类抗生素色谱方法,测定了4种脂肽类化合物的生物活性,为进一步探宅脂肽类抗生素的构效关系、生物合成和开发应用奠定基础。 展开更多
关键词 丧面活性素 杆菌霉素L 泛革素 罗克霉素 分离纯化 生物活性
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解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌脂肽芬芥素的分离鉴定及抑菌作用
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作者 刘宇帅 张杰 +3 位作者 钟瑾 李晶 孟利强 张淑梅 《中国生物工程杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期20-29,共10页
对一株解淀粉芽孢杆菌TF28产生的抗菌脂肽进行分离鉴定及抑菌活性研究,采用酸沉淀、乙酸乙酯和甲醇萃取技术制备了抗菌脂肽粗提物,经过2次HPLC分离纯化,在保留时间32-42min内获得8个抗菌脂肽纯品,经MALDI-TOF-MS鉴定为芬芥素(fengycins... 对一株解淀粉芽孢杆菌TF28产生的抗菌脂肽进行分离鉴定及抑菌活性研究,采用酸沉淀、乙酸乙酯和甲醇萃取技术制备了抗菌脂肽粗提物,经过2次HPLC分离纯化,在保留时间32-42min内获得8个抗菌脂肽纯品,经MALDI-TOF-MS鉴定为芬芥素(fengycins),对尖孢镰刀菌和禾谷镰刀菌显示出较强的抑菌活性,该研究为提高菌株TF28抗菌脂肽产量的定向遗传改造奠定基础。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 尖孢镰刀菌 禾谷镰刀菌 抗菌脂肽 芬芥素
Bacillus amyloliquefaciensBA-16-8所产fengycin对扩展青霉细胞的抑制机制研究 被引量:1
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作者 付瑞敏 常慧萍 陈五岭 《食品科技》 北大核心 2017年第5期7-13,共7页
目的:从细胞层面探究B.amyloliquefaciensBA-16-8所产fengycin对Penicillium expansum的抑制机制。方法:采用扫描电镜、透射电镜、核酸染色、光谱吸收和荧光显微观察分析fengycin对P.expansum细胞膜通透性及线粒体等细胞器的影响;采... 目的:从细胞层面探究B.amyloliquefaciensBA-16-8所产fengycin对Penicillium expansum的抑制机制。方法:采用扫描电镜、透射电镜、核酸染色、光谱吸收和荧光显微观察分析fengycin对P.expansum细胞膜通透性及线粒体等细胞器的影响;采用凝胶阻滞实验探讨fengycin对菌丝体核酸的作用效果。结果:Fengycin处理P.expansum的菌丝体细胞,会导致细胞表面粗糙且细胞形态发生改变,细胞膜的完整性发生了改变,细胞结构遭到破坏。PI染色及光谱吸收实验结果显示,Fengycin可破坏细胞膜的完整性并增加P.expansum细胞膜的通透性。凝胶阻滞实验结果表明fengycin可与P.expansum的DNA于体外结合。结论:Fengycin可改变P.expansum的细胞膜通透性并作用于核酸,抑制基因的表达和细胞器的合成。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 扩展青霉 FENGYCIN 抑菌机制
双孢菇内生枯草芽孢杆菌AB154中抑制人结肠癌Caco-2活性成分的发现及机理研究
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作者 刘灿 生吉萍 +5 位作者 David Yue Wei Lee 李小可 尚小雅 陈林 申琳 《中国食品学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期26-34,共9页
在研究双孢菇的抗肿瘤活性成分时,发现其内生的一个枯草芽孢杆菌AB154的代谢产物,该产物具有较强的抑制人结肠癌Caco-2细胞活性。借助体外多种细胞毒活性跟踪测试,利用硫酸铵沉淀法和DEAESephadex阴离子交换柱层析,从枯草芽孢杆菌AB154... 在研究双孢菇的抗肿瘤活性成分时,发现其内生的一个枯草芽孢杆菌AB154的代谢产物,该产物具有较强的抑制人结肠癌Caco-2细胞活性。借助体外多种细胞毒活性跟踪测试,利用硫酸铵沉淀法和DEAESephadex阴离子交换柱层析,从枯草芽孢杆菌AB154发酵液中分离得到抑制人结肠癌Caco-2细胞的活性组分,其IC50为109.94μg/m L,而对人正常支气管上皮细胞(NHBE)的抑制作用较弱。经高效液相色谱(HPLC)制备,结合MALDI-TOF MS、ESI-MS/MS分析和查阅文献,从活性组分中分离鉴定了2个亚组分表面活性肽(surfactin)和丰原素(fengycin)B1类脂肽,其抑制人结肠癌Caco-2细胞的IC50依次为80.7μg/m L和312.5μg/m L。此研究首次发现fengycin B1类脂肽具有抑制人结肠癌Caco-2细胞的活性,机理研究发现fengycin B1在12 h时将细胞周期阻滞在G0/G1期,在24 h时阻滞在S期,同时能够损伤肿瘤细胞的细胞核。 展开更多
关键词 双孢菇 内生菌 枯草芽孢杆菌 丰原素 人结肠癌Caco-2细胞
一株扩展青霉拮抗菌的分离、鉴定及抑菌活性物质 被引量:3
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作者 付瑞敏 于烽 +2 位作者 常慧萍 张红 陈五岭 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1715-1724,共10页
【目的】筛选有效抑制扩展青霉(Penicillium expansum)的拮抗菌,并鉴定其所产抑菌物质的主要种类及相对含量。【方法】从苹果表面分离到拮抗扩展青霉的菌株BA-16,经形态学、生理生化及16S r RNA基因序列分析对该菌进行鉴定;根据已知... 【目的】筛选有效抑制扩展青霉(Penicillium expansum)的拮抗菌,并鉴定其所产抑菌物质的主要种类及相对含量。【方法】从苹果表面分离到拮抗扩展青霉的菌株BA-16,经形态学、生理生化及16S r RNA基因序列分析对该菌进行鉴定;根据已知脂肽类抗生素合成相关基因序列设计3对特异性引物对菌株BA-16进行检测,对PCR产物克隆、测序和BLAST分析,采用酸沉淀法从菌株发酵液中制备出抑菌物质粗提液,对活性粗提物进行HPLC和MALDI-TOF-MS分析。【结果】经鉴定,BA-16被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),所得PCR产物经测序和BLAST分析,证实BA-16带有sfp和fen B基因。HPLC和MS结果显示菌株发酵液中含有Fengycin和Surfactin两种脂肽类产物,Fengycin是拮抗扩展青霉的主要因素。【结论】本研究对于苹果采后青霉病的生物防治具有良好的应用开发前景。 展开更多
关键词 扩展青霉 解淀粉芽胞杆菌 丰原素 伊枯草菌素 表面活性素
解淀粉芽孢杆菌BA-16-8所产脂肽丰原素对扩展青霉呼吸及营养利用的影响研究 被引量:3
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作者 付瑞敏 陈五岭 《食品科技》 CAS 北大核心 2016年第11期8-14,共7页
扩展青霉(Pennicilum expansum)是导致苹果采后青霉病的主要致病菌,为探讨Bacillus amyloliquefaciens BA-16-8所产生的脂肽类抗生素丰原素(Fengycin)对Penicillum expansum呼吸代谢、线粒体复合酶活性和营养物质利用的影响。通过... 扩展青霉(Pennicilum expansum)是导致苹果采后青霉病的主要致病菌,为探讨Bacillus amyloliquefaciens BA-16-8所产生的脂肽类抗生素丰原素(Fengycin)对Penicillum expansum呼吸代谢、线粒体复合酶活性和营养物质利用的影响。通过溶氧量测定实验检测Fengycin处理对P.expansum的呼吸抑制率,通过线粒体酶活力测定实验检测Fengycin处理对P.expansum线粒体复合酶活力的影响,通过DNS比色法和双缩脲法测定Fengycin处理对P.expansum利用总糖和总蛋白的能力。结果表明,Fengycin主要抑制病原菌呼吸代谢的TCA途径。Fengycin是通过结合P.expansum线粒体复合酶II和III的相关基因,从而使该基因的表达受阻,进而影响线粒体酶的活性。随着Fengycin处理浓度的增加,P.expansum对总糖和总蛋白质的吸收及利用能力显著下降。研究结果表明,Fengycin的作用可影响P.expansum的呼吸,从而降低其代谢水平,最终抑制病原菌的生长。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 青霉病 丰原素 呼吸链
枯草芽孢杆菌ge25对两种人参病原菌的抑制作用及脂肽类抑菌代谢产物的鉴定 预览 被引量:6
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作者 胡陈云 李勇 +2 位作者 刘敏 秦民坚 丁万隆 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期386-393,共8页
为明确枯草芽孢杆菌ge25抑菌代谢产物的组成,采用层析柱分离结合抑菌活性追踪方法分离、纯化菌株发酵液中的抑菌脂肽,使用UPLC-ESI-Q-TOF对抑菌活性组分进行鉴定。层析柱分离共获得28个组分,其中G23~G27有抑菌活性,且G25和G26的抑菌活... 为明确枯草芽孢杆菌ge25抑菌代谢产物的组成,采用层析柱分离结合抑菌活性追踪方法分离、纯化菌株发酵液中的抑菌脂肽,使用UPLC-ESI-Q-TOF对抑菌活性组分进行鉴定。层析柱分离共获得28个组分,其中G23~G27有抑菌活性,且G25和G26的抑菌活性最强;G25和G26经硅胶柱层析及TLC薄层层析分离,共获得3个组分L1、L2和L3,均有显著抑菌活性。UPLC-ESI-Q-TOF分析发现,L2和L3中包括1个fengycin A和6个fengycin B同系物或其衍生物;L1中发现2个化合物,但其分子量及碎片裂解规律与已知脂肽类成分存在明显差异,且未能获得明确的氨基酸裂解顺序,推测其可能不同于已报道的抑菌脂肽。扫描电镜观察发现,菌株ge25分泌的抑菌脂肽严重影响人参黑斑菌和人参锈腐菌菌丝体的正常生长,导致菌丝体形态异常、发育畸形。 展开更多
关键词 人参 枯草芽孢杆菌 抑菌脂肽 FENGYCIN UPLC-ESI-Q-TOF
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degQ和sfp提高芽孢杆菌泛革素产量及其机理研究 预览 被引量:3
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作者 李响 伍辉军 +2 位作者 张阳 鲁晴辉 高学文 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期221-228,共8页
非核糖体合成途径产生的脂肽化合物泛革素(fengycin)在芽孢杆菌防治真菌病害中起着重要作用。本研究克隆了来自解淀粉芽孢杆菌模式菌株FZB42的sfp和来自枯草芽孢杆菌模式菌株168的多效调控因子deg Q,构建了p P43-deg Q、p MK3-sfp和p ... 非核糖体合成途径产生的脂肽化合物泛革素(fengycin)在芽孢杆菌防治真菌病害中起着重要作用。本研究克隆了来自解淀粉芽孢杆菌模式菌株FZB42的sfp和来自枯草芽孢杆菌模式菌株168的多效调控因子deg Q,构建了p P43-deg Q、p MK3-sfp和p P43-deg Q-sfp 3个表达载体,分别转入不能产生泛革素的168菌株中,得到3株工程菌株。抑菌试验表明,168-deg Q-sfp活菌及其脂肽化合物提取物均能显著抑制油菜菌核病菌的生长,而168、168-deg Q和168-sfp不具备该活性。质谱检测表明,只有168-deg Q-sfp能产生泛革素。进一步的荧光定量反转录PCR检测结果表明,菌株168-deg Q-sfp的泛革素合成酶基因簇pps ABCDE的表达量是其他菌株的6-16倍,而菌株168-deg Q和168-sfp与菌株168无明显差异。该研究表明deg Q和sfp 2个功能基因共同存在时能提高泛革素合成酶基因簇的表达量,进而提高泛革素的产量。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 脂肽化合物 泛革素 degQ SFP
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化学诱变枯草芽孢杆菌对大白菜根肿病的防治效果 预览 被引量:2
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作者 杨晶晶 陈丽华 +3 位作者 李兴玉 吴毅歆 陈映岚 何月秋 《安徽农业科学》 CAS 2014年第9期2597-2599,共3页
[目的]研究化学诱变枯草芽孢杆菌对大白菜根肿病的防治效果.[方法]采用3株来自枯草芽孢杆菌XF-1的化学诱变菌株XF-1A、XF-1C和XF-1E进行大白菜根肿病的盆栽防病试验,并以MALDI-TOF-MS分析了3种抗生素的相对含量.[结果]菌株XF-1A和XF-1C... [目的]研究化学诱变枯草芽孢杆菌对大白菜根肿病的防治效果.[方法]采用3株来自枯草芽孢杆菌XF-1的化学诱变菌株XF-1A、XF-1C和XF-1E进行大白菜根肿病的盆栽防病试验,并以MALDI-TOF-MS分析了3种抗生素的相对含量.[结果]菌株XF-1A和XF-1C防效较好,分别为68.80%和65.06%,XF-1E防效较差为42.21%.3菌株均能分泌表面活性素、伊枯草菌素和丰源素,但表面活性素和伊枯草菌素相对含量为XF-1A> XF-1C> XF-1E,XF-1A的表面活性素和伊枯草菌素分别达29.26%和35.31%,XF-1E的丰源素含量最高,达41.09%.[结论]表面活性素和伊枯草菌素含量与对根肿病防治效果存在一定的关联性 展开更多
关键词 根肿病 表面活性素 伊枯草菌素 丰源素
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脂肽类抗生素fengycin在枯草芽胞杆菌NCD-2菌株抑制番茄灰霉病菌中的功能分析 被引量:9
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作者 董伟欣 李宝庆 +3 位作者 李社增 鹿秀云 马平 郭庆港 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期401-410,共10页
枯草芽胞杆菌NCD-2菌株及其无细胞发酵液对多种植物病原真菌具有较强的拈抗活性。为了明确NCD-2菌株抑菌作用机理,本研究利用快速蛋白液相色谱技术(FPLC)结合抑菌活性测定,对NCD-2菌株的脂肽类抑菌物质进行分离、纯化,经质谱鉴定... 枯草芽胞杆菌NCD-2菌株及其无细胞发酵液对多种植物病原真菌具有较强的拈抗活性。为了明确NCD-2菌株抑菌作用机理,本研究利用快速蛋白液相色谱技术(FPLC)结合抑菌活性测定,对NCD-2菌株的脂肽类抑菌物质进行分离、纯化,经质谱鉴定,该抑菌物质为芬荠素(fengycin)。从NCD-2菌株中克隆出fengycin合成酶基因fenC及其上游启动子序列,通过同源重组技术对fenC基因进行了内缺失突变,同NCD-2野生型菌株相比,fenC基因缺失突变子丧失了fengycin的合成能力,同时该突变子显著降低了对番茄灰霉病菌的拮抗活性。进-步在离体叶片上比较了NCD-2野生型菌株和突变子之间脂肽提取物和菌体细胞对番茄灰霉病的保护作用,结果发现,突变子不论是脂肽提取物还是菌体细胞显著降低了对番茄灰霉病的防治作用。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 番茄灰霉病菌 FENGYCIN 突变
脂肽surfactin、iturin、fengycin性质鉴定的研究与展望 预览 被引量:9
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作者 龚谷迪 周广田 +1 位作者 郭阳 杜芳 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2013年第3期211-215,共5页
脂肽是一类由亲水的肽链和亲油的脂肪烃链两部分组成的生物表面活性剂。相比化学表面活性剂,生物表面活性剂除具有降低表面张力,增加泡沫,稳定乳液等性质外,还具有安全,可降解的特性。一些脂肽还具有抗真菌、抗细菌、抗病毒、抗肿瘤等... 脂肽是一类由亲水的肽链和亲油的脂肪烃链两部分组成的生物表面活性剂。相比化学表面活性剂,生物表面活性剂除具有降低表面张力,增加泡沫,稳定乳液等性质外,还具有安全,可降解的特性。一些脂肽还具有抗真菌、抗细菌、抗病毒、抗肿瘤等生物活性,在日化、食品、制药、生物防治、微生物采油等方面都有良好的应用前景。surfactin,iturin,fengycin是一类主要由革兰氏阳性菌芽孢杆菌产生的常见脂肽,表面活性或抑菌活性均十分突出。目前对surfactin、iturin、fengycin的分子量、结构、性质的研究比较透彻,也相应开发出来一些鉴定方法。本文主要对常见脂肽surfactin、iturin、fengycin的性质,抑菌效果及主要的鉴定方法进行了介绍。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 脂肽 SURFACTIN ITURIN FENGYCIN 鉴定
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生防菌Bs916合成脂肽抗生素泛革素的操纵子结构功能及生物活性 预览 被引量:4
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作者 罗楚平 王晓宇 +2 位作者 周华飞 刘邮洲 陈志谊 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期5142-5149,共8页
【目的】明确枯草芽胞杆菌Bs916(Bacillussubtilis916)分泌的脂肽化合物Fengycin操纵子的结构、功能和生物活性,阐明枯草芽孢杆菌Bs916防治真菌病害的分子作用机制。【方法】在Bs916全基因组测序基础上,采用LA-PCR方法克隆Fengycin... 【目的】明确枯草芽胞杆菌Bs916(Bacillussubtilis916)分泌的脂肽化合物Fengycin操纵子的结构、功能和生物活性,阐明枯草芽孢杆菌Bs916防治真菌病害的分子作用机制。【方法】在Bs916全基因组测序基础上,采用LA-PCR方法克隆Fengycin的操纵子Fen;通过生物信息学方法分析Fen操纵子的遗传特征;运用基质辅助解离质谱法测定Fen操纵子合成的脂肽类化合物中同系物的分子量;采用同源重组方法构建Fengycin突变株BSFG;通过抑菌活性和溶血活性试验测定突变株BSFG的生物活性。【结果】克隆到Bs916基因组DNA中全长约37.67kb的Fen操纵子,含有5个开放阅读框架分别编码FenA、FenB、FenC、Fend和FenE多功能复合酶;与Bsl68对应Fen操纵子的同源性为65%。根据该操纵子特征推测其编码的脂肽类化合物为Fengycin;Fen操纵子负责合成的Fengycin包含5个变异体,分属于两类不同同系物。同系物1的质子化峰分子量分别为1449.8、1463.9、1477.9;属于相差1个(-CH2)亚甲基的同系物,一级结构为[cyclo-([cyclo-(Glu-Orn—Tyr—Thr—Glu—Ala—Pro—Gin—Tyr-β-aminofattyacid)];同系物2的质子化峰分子量分别为1491.9和1505.9,也属于相差1个(-CH2)亚甲基的同系物,相对于同系物1其第6位的A1a氨酸残基变为Val氨酸残基。生物活性测定结果表明突变株BSFC抗菌活性相对于野生型菌株Bs916得到显著下降,但溶血活性的变化不明显。【结论】本研究克隆了生防菌Bs916中合成Fengycin的完整操纵子,通过对操纵子生物信息学分析和生化试验鉴定了Fengycin的5种变异体的化学结构,并阐明了脂肽Fengycin是Bs916抗真菌活性的重要因子之一。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 泛革素 操纵子 结构 生物活性
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BacillussubtilisfmbJ产Fengycin对Rhizopusstolonifer呼吸链及营养物质利用的影响 预览 被引量:4
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作者 唐群勇 周小虹 +3 位作者 陆兆新 吕凤霞 王昱沣 别小妹 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期248-254,共7页
研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)fmbJ产生的Fengycin对桃软腐病菌(Rhizopus stolonifer)呼吸代谢、线粒体NADH脱氢酶活性、琥珀酸脱氢酶活性及营养物质利用的影响。通过比较典型抑制剂(磷酸钠、碘乙酸和丙二酸)对Fengycin的... 研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)fmbJ产生的Fengycin对桃软腐病菌(Rhizopus stolonifer)呼吸代谢、线粒体NADH脱氢酶活性、琥珀酸脱氢酶活性及营养物质利用的影响。通过比较典型抑制剂(磷酸钠、碘乙酸和丙二酸)对Fengycin的叠加率。结果表明,Fengycin主要抑制Rhizopus stolonifer呼吸代谢的HMP途径。酶活性实验结果表明:在体内作用时,随着Fengycin浓度的增大,线粒体NADH脱氢酶活性逐渐减小,而体外活性变化不大;随着Fengycin浓度的增大,体内和体外作用都使琥珀酸脱氢酶活性呈现先降低后升高的现象。此外,Fengycin还使Rhizopus stolonifer对糖和蛋白质的利用受到抑制,蛋白合成受到影响。结论:Fengycin作用后,使Rhizopusstolonifer呼吸代谢受阻,合成和分解代谢的平衡被打破,引起病变,生长受到抑制。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 桃软腐病菌 FENGYCIN 呼吸链 营养物质利用
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芬芥素类脂肽生物表面活性剂的结构性能与合成强化
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作者 谢欢 于慧敏 沈忠耀 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期102-110,共9页
脂肽类生物表面活性剂由亲水的寡肽和疏水的长链脂肪酸两部分组成,根据其结构特征,可将其分为环状脂肽和线性脂肽两大类。芽孢杆菌合成的环状脂肽主要包含芬芥素、表面活性素和伊枯草菌素三大家族,其中芬芥素表现出显著的抑菌活性,在植... 脂肽类生物表面活性剂由亲水的寡肽和疏水的长链脂肪酸两部分组成,根据其结构特征,可将其分为环状脂肽和线性脂肽两大类。芽孢杆菌合成的环状脂肽主要包含芬芥素、表面活性素和伊枯草菌素三大家族,其中芬芥素表现出显著的抑菌活性,在植物病虫害防治方面具有良好的应用前景。综述了芬芥素的基本结构、合成机理、抑菌性能以及生物合成强化的研究进展,旨在为芬芥素的合成与应用研究提供参考。 展开更多
关键词 芬芥素 脂肽类表面活性剂 非核糖体肽合成酶 抑菌活性 合成强化
微生物抗菌肽的电喷雾串联质谱分子结构解析
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作者 姚树森 冷冰 +2 位作者 王鸿丽 刘锋 李萍 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2009年第3期248-250,295共4页
目的:以微生物抗菌肽为研究对象,利用电喷雾串联质谱对其分子结构进行解析。方法:首先通过全扫描模式,得到主要成分的相对分子质量为1 436.76。然后选择主要成分m/z718.38(双电荷离子)进行串联质谱测定。结果:相对分子质量为1 436... 目的:以微生物抗菌肽为研究对象,利用电喷雾串联质谱对其分子结构进行解析。方法:首先通过全扫描模式,得到主要成分的相对分子质量为1 436.76。然后选择主要成分m/z718.38(双电荷离子)进行串联质谱测定。结果:相对分子质量为1 436.76的化合物结构为β-OH-FA-TEAPQYIYNE(该肽的脂肪链为羟基14碳脂肪酸),属于Fengycin家族(families)。结论:本研究结果表明,电喷雾串联质谱适用于分析微生物抗菌肽类具有相似结构的同系物,是测定此类化合物相对分子质量及鉴定其结构的有效工具。 展开更多
关键词 微生物抗菌肽 生物安全 电喷雾串联质谱 Fengycin家族
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