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单基因和双基因联合治疗对小鼠B16-F10黑色素瘤生长抑制作用研究 预览
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作者 韦世元 唐放 +2 位作者 彭旭 何学令 尹海林 《四川动物》 北大核心 2020年第1期34-40,共7页
目的研究阳离子脂质体介导mGM-csf和mFlt-kdr3基因治疗以及2个基因联合治疗对小鼠B16-F10黑色素瘤肺转移以及实体瘤的生长抑制作用。方法通过尾静脉注射法和皮下注射法分别将10~5个以及10~6个对数生长期黑色素瘤细胞注入BALB/c小鼠体内... 目的研究阳离子脂质体介导mGM-csf和mFlt-kdr3基因治疗以及2个基因联合治疗对小鼠B16-F10黑色素瘤肺转移以及实体瘤的生长抑制作用。方法通过尾静脉注射法和皮下注射法分别将10~5个以及10~6个对数生长期黑色素瘤细胞注入BALB/c小鼠体内,构建小鼠肺转移模型和腋下实体瘤模型。将2组模型小鼠分别分成5组:mFlt-kdr3治疗组、mGM-csf治疗组、联合治疗组(1次mFlt-kdr3,2次mGM-csf)、H1299脂质体质粒对照组和生理盐水对照组。肺转移模型小鼠建模3周后,尾静脉给药治疗,每次给药80μL,每次间隔1 d,共3次。完成后3 d,解剖取出小鼠肺组织并对肿瘤灶进行计数、苏木精-伊红染色。实体瘤模型小鼠在建模1周后开始瘤体穿刺给药,每次给药25μL,每次间隔1 d,共9次,每次给药前用游标卡尺测量瘤体的长、短径。结果肺转移治疗实验中,治疗组平均肿瘤个数显著少于对照组(P<0.05),且联合治疗组肿瘤个数最少,并且肺部结构完整,基本未见明显的肿瘤灶,可以看到明显的肺泡结构。实体瘤模型实验中,治疗组瘤体平均体积显著小于对照组(P<0.05),且在观察的时间内联合治疗组瘤体平均体积呈现明显的下降趋势,治疗组的疗效价值为联合治疗组>mFlt-kdr3治疗组>mGM-csf治疗组。结论GM-csf和Flt-kdr3基因药物对黑色素瘤具有协同治疗效用,可以明显抑制肺部肿瘤灶的形成和实体瘤的生长。 展开更多
关键词 B16-F10黑色素瘤 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 血管内皮生长因子 基因治疗
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SERCA2a在心力衰竭中的研究进展 预览
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作者 李红艳 赵思涵 +1 位作者 王世华 李岩松 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期171-174,共4页
由各种心血管疾病导致的心衰严重危害着人类健康,其中收缩和舒张功能障碍是心衰的基本特征。SERCA2a作为钙转运的关键酶,以调节细胞内游离钙离子浓度影响着心肌舒缩过程。该文主要就SERCA2a基因的结构和功能,心衰中SERCA2a的表达和调控... 由各种心血管疾病导致的心衰严重危害着人类健康,其中收缩和舒张功能障碍是心衰的基本特征。SERCA2a作为钙转运的关键酶,以调节细胞内游离钙离子浓度影响着心肌舒缩过程。该文主要就SERCA2a基因的结构和功能,心衰中SERCA2a的表达和调控,及以SERCA2a为靶点的药物治疗、基因治疗和临床研究现状等作一综述。 展开更多
关键词 心衰 SERCA2A 翻译后修饰 激素 转录因子 药物治疗 基因治疗
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目的基因治疗骨折不愈合的研究进展
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作者 王宁 陈俊毅 +3 位作者 朱伦井 段江涛 彭称飞 贝朝涌 《华西医学》 CAS 2020年第1期89-92,共4页
临床上,骨折不愈合常导致患者遭受疼痛的困扰甚至残疾,而且往往需要额外的手术治疗来恢复骨骼肌肉功能,因此骨折不愈合的治疗一直是骨科领域的难点。近些年,随着基因工程的发展,利用基因治疗骨折不愈合的技术得以广泛研究。大量实验证实... 临床上,骨折不愈合常导致患者遭受疼痛的困扰甚至残疾,而且往往需要额外的手术治疗来恢复骨骼肌肉功能,因此骨折不愈合的治疗一直是骨科领域的难点。近些年,随着基因工程的发展,利用基因治疗骨折不愈合的技术得以广泛研究。大量实验证实,将编码骨折愈合相关生长因子的目的基因通过体内或体外不同的传递方式导入至靶细胞,从而表达出特定的生长因子,可以促进骨折修复,这为治疗骨折不愈合提供了新途径。该文将讨论成骨基因不同传递方式的研究现状,以及各自的优缺点,旨在为目的基因治疗骨折不愈合提供理论基础。 展开更多
关键词 基因传递 骨折不愈合 基因治疗 基因活化基质 基因工程细胞
2019年全球肿瘤领域原创新药盘点 预览
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作者 郭雷 程思奇 李嘉敏 《肿瘤综合治疗电子杂志》 2020年第1期70-79,共10页
2019年对于全球生物医药领域是不平凡的一年,肿瘤作为受各大制药企业青睐的领域,在面对机遇挑战的同时,也是收获颇丰。截至2019年12月30日,今年全球获批治疗肿瘤的全新药物共计16个,数量不多但不乏亮点,主要集中在美国、日本和中国。本... 2019年对于全球生物医药领域是不平凡的一年,肿瘤作为受各大制药企业青睐的领域,在面对机遇挑战的同时,也是收获颇丰。截至2019年12月30日,今年全球获批治疗肿瘤的全新药物共计16个,数量不多但不乏亮点,主要集中在美国、日本和中国。本文回顾总结了2019年在全球范围内获批用于肿瘤治疗的全新药物,包括新分子实体和新的治疗用生物制品,并对2020年可能在该领域获批的药物进行了简单展望,以飨读者。 展开更多
关键词 新药批准 新分子实体 新生物制品 孤儿药 基因治疗 肿瘤
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关注遗传性视网膜疾病的治疗性方法 预览
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作者 庞继景 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期689-693,共5页
遗传性视网膜疾病(IRDs)属于难治性眼科疾病,基因疗法正在成为一种治疗IRDs的新方法。目前至少有26个相关的基因疗法临床试验正在进行或将要开展,至少涉及不同类型IRDs的16个突变基因,如常染色体隐性遗传的视网膜色素变性(RP,MERTK突变... 遗传性视网膜疾病(IRDs)属于难治性眼科疾病,基因疗法正在成为一种治疗IRDs的新方法。目前至少有26个相关的基因疗法临床试验正在进行或将要开展,至少涉及不同类型IRDs的16个突变基因,如常染色体隐性遗传的视网膜色素变性(RP,MERTK突变)、无脉络膜症(CHM突变)、青少年黄斑变性(ABCA4突变)、Usher综合征1B亚型(Myo7a突变)、X性连锁先天性视网膜劈裂症(RS1突变)、线粒体相关Leber遗传性视神经病变(ND4突变)、全色盲(CNGA3突变和CNGB3突变)、性连锁遗传RP(RPGR突变)等。新生血管性年龄相关性黄斑病变的基因治疗以及适用于晚期RP患者的、利用异种成视力基因再造感光细胞的光遗传基因治疗也已进入临床试验阶段。采用腺相关病毒(AAV)介导的基因载体治疗对由较小基因突变造成的隐性IRDs,特别是原发病灶在视网膜色素上皮(RPE)细胞和视细胞的IRDs具有较好的疗效,有可能成为将来的首选治疗方案。关于针对常染色体显性遗传性IRDs或较大基因突变引起的隐性IRDs的基因编辑技术动物实验研究也取得了进展,即将进入临床试验阶段。近年来,以RNA治疗为基础的寡核苷酸疗法对目前不适于AAV载体基因治疗的大基因突变所致IRDs也显示出较好的疗效。相关疗法的临床研究值得关注,应用不同生物疗法造福于中国IRDs患者的新时代正在到来。 展开更多
关键词 遗传性视网膜疾病 基因治疗 临床试验 光遗传学基因疗法 寡核苷酸疗法
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干扰TSPAN1的慢病毒LV-TSPAN1对肝癌的影响
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作者 李晓锋 高鹏 +2 位作者 郑权 曾宪成 李海量 《岭南急诊医学杂志》 2019年第4期351-355,358共6页
目的:观察慢病毒LV-TSPAN1对TSPAN1的沉默效果和对肝癌的抑制作用,为肝癌的基因治疗提供实验依据。方法:合成可干扰TSPAN1的LV-TSPAN1及对照组慢病毒LV-NC,并用其感染HepG2肝癌细胞。MTT法检及流式细胞术检测LV-TSPAN1对HepG2的增殖抑... 目的:观察慢病毒LV-TSPAN1对TSPAN1的沉默效果和对肝癌的抑制作用,为肝癌的基因治疗提供实验依据。方法:合成可干扰TSPAN1的LV-TSPAN1及对照组慢病毒LV-NC,并用其感染HepG2肝癌细胞。MTT法检及流式细胞术检测LV-TSPAN1对HepG2的增殖抑制效果;平板克隆形成实验检测LV-TSPAN1对HepG2的克隆形成的抑制效果;Transwell实验检测LV-TSPAN1对HepG2的迁徙抑制效果;荷瘤裸鼠抑制实验检测LV-TSPAN1在动物水平对肿瘤的抑制作用。结果:慢病毒LV-TSPAN1对肝癌细胞TSPAN1有良好的沉默效果,可抑制肝癌细胞HepG2的增殖和促进其凋亡,抑制其克隆形成和迁徙能力,并有效抑制肿瘤细胞及肝癌动物模型肿瘤生长。结论:合成的慢病毒LV-TSPAN1可有效沉默TSPAN1,抑制HepG2细胞及肝癌动物模型肿瘤生长,TSPAN1可作为肝癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 肝癌 基因治疗 TSPAN1 慢病毒 细胞凋亡
携带人端粒酶反转录酶启动子的溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35对乳腺癌干细胞的靶向作用 预览
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作者 王炜川 陈璐璐 +5 位作者 权香兰 李颖 金永民 金文彪 于可心 张松男 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第11期971-976,共6页
目的探讨携带人端粒酶反转录酶启动子的溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35在靶向乳腺癌干细胞中的作用。方法乳腺癌细胞系MCF-7以球体形式在加入生长因子的无血清培养基中生长。同时构建携带TERT启动子的溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35,并通过溶瘤、MT... 目的探讨携带人端粒酶反转录酶启动子的溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35在靶向乳腺癌干细胞中的作用。方法乳腺癌细胞系MCF-7以球体形式在加入生长因子的无血清培养基中生长。同时构建携带TERT启动子的溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35,并通过溶瘤、MTT及体内抗肿瘤实验观察RCA-TERT-Ad35对干细胞样癌细胞的杀伤效果。结果与亲代细胞相比,MCF-7球体细胞显示出干细胞特性,且MCF-7球体细胞中hTERT基因过表达,其对细胞毒性剂紫杉醇具有耐药性。溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35在TERT过表达的细胞中进行复制并抑制细胞生长。在裸鼠移植瘤模型中,与RCA-Ad35相比,RCA-TERT-Ad35显著抑制肿瘤生长并改善小鼠的存活状态。结论溶瘤腺病毒RCA-TERT-Ad35可优先杀伤TERT过表达的乳腺癌干细胞。 展开更多
关键词 乳腺癌干细胞 人端粒酶反转录酶 溶瘤腺病毒 基因治疗
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血友病鼠模型的构建及研究进展 预览
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作者 李杰 闫振宇 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期141-146,共6页
血友病是一种单基因遗传性疾病,主要发病机制为编码凝血因子的基因突变所导致凝血因子减少。临床表现为反复出血,严重时可危及生命,尚不能治愈。目前正在研究的基因治疗则具有治愈血友病的可能。在基因治疗的研究中,动物模型是必不可少... 血友病是一种单基因遗传性疾病,主要发病机制为编码凝血因子的基因突变所导致凝血因子减少。临床表现为反复出血,严重时可危及生命,尚不能治愈。目前正在研究的基因治疗则具有治愈血友病的可能。在基因治疗的研究中,动物模型是必不可少的基础支持条件。血友病鼠模型因其自身特点,如便于运输,研究费用少于其它大型动物等,在众多动物模型中脱颖而出,成为血友病动物模型研究的热点。血友病鼠模型的构建经过20多年的历程,逐渐成熟。极大地促进了血友病基因治疗的发展,现就血友病鼠的构建及研究进展予以综述。 展开更多
关键词 血友病 动物模型 小鼠 基因治疗
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皮肤再生医学相关技术在皮肤科学的应用前景 预览
9
作者 杨扬(综述) 梁晓博(审校) 《中国美容医学》 CAS 2019年第7期170-173,共4页
人表皮干细胞主要来源于表皮,尤其在皮肤创伤后修复和再生方面具有十分重要的功能和作用。皮肤再生医学是再生医学的重要组成部分,也是皮肤科学与再生医学的交叉学科,是两者的完美结合。作为皮肤再生医学的主要特色,表皮干细胞相关技术... 人表皮干细胞主要来源于表皮,尤其在皮肤创伤后修复和再生方面具有十分重要的功能和作用。皮肤再生医学是再生医学的重要组成部分,也是皮肤科学与再生医学的交叉学科,是两者的完美结合。作为皮肤再生医学的主要特色,表皮干细胞相关技术、基因治疗及3D生物打印等前沿技术的研究和应用在一定程度上弥补和解决了当前和未来皮肤科学治疗领域,尤其在重症皮肤疾病和严重皮肤创伤等治疗方面的局限与不足,它们也是皮肤科治疗领域发展最有潜力的治疗技术。虽然皮肤再生医学仍会面临诸多问题和挑战,但其未来发展前景广阔。 展开更多
关键词 皮肤再生医学 表皮干细胞 基因治疗 3D生物打印
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辅助生殖技术进展
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作者 师娟子 陈丽娟 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第10期1-6,共6页
人类辅助生殖技术(ART)发展至今,已经成为治疗不孕症最有效的方法。临床上,ART除应用于治疗不孕症外,也应用于遗传病阻断及生育力保存等领域。目前,在开展ART的过程中,围绕配子和胚胎的遗传学研究、胚胎移植策略及生育力保存等研究也在... 人类辅助生殖技术(ART)发展至今,已经成为治疗不孕症最有效的方法。临床上,ART除应用于治疗不孕症外,也应用于遗传病阻断及生育力保存等领域。目前,在开展ART的过程中,围绕配子和胚胎的遗传学研究、胚胎移植策略及生育力保存等研究也在如火如荼的进行,一系列的研究成果陆续发表。未来ART应用可能会涉及配子或胚胎的基因治疗、干细胞治疗等,这些技术的安全性以及涉及的伦理社会问题也将越来越突出,需要多学科联合解决。 展开更多
关键词 辅助生殖技术 植入前遗传学检测 配子质量 生育力保存 基因治疗
造血干细胞及其应用研究进展
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作者 田晓玲 杨菲 吴宇轩 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第6期1003-1011,共9页
造血干细胞(hematopoietic stem cells, HSCs)是一类多能干细胞,位于特殊的造血微环境,主要存在于骨髓中。其能自我更新和多向分化为各种功能的血细胞,维持血液系统的建立和动态平衡。造血干细胞的这些重要特性以及造血干细胞移植在临... 造血干细胞(hematopoietic stem cells, HSCs)是一类多能干细胞,位于特殊的造血微环境,主要存在于骨髓中。其能自我更新和多向分化为各种功能的血细胞,维持血液系统的建立和动态平衡。造血干细胞的这些重要特性以及造血干细胞移植在临床上的广泛应用,结合基因治疗和基因编辑技术的进步,使得基于造血干细胞治疗多种血液疾病和免疫疾病的基因治疗研究在近年来取得了很大的进展。该文将从造血干细胞生物学特征、来源、造血干细胞微环境的基础研究,以及造血干细胞基因治疗、自体造血干细胞移植治疗β-地中海贫血等方面的临床研究和应用进展进行综述。 展开更多
关键词 造血干细胞 自我更新 分化 基因编辑 基因治疗 地中海贫血
针对中枢神经系统的核酸递送策略及其诊疗应用
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作者 周海斌 李江 +1 位作者 胡霁 王丽华 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期53-69,共17页
近年来,基于核酸分子的探针与药物在针对中枢系统的诊疗应用中展现出强大的潜力。但是,复杂的中枢神经系统以及生理屏障使得核酸分子的递送成为一大难题。因此,开发更加高效而安全的中枢神经递送载体仍是一项迫切需求。本文综述了目前... 近年来,基于核酸分子的探针与药物在针对中枢系统的诊疗应用中展现出强大的潜力。但是,复杂的中枢神经系统以及生理屏障使得核酸分子的递送成为一大难题。因此,开发更加高效而安全的中枢神经递送载体仍是一项迫切需求。本文综述了目前针对中枢神经系统的多种核酸递送方式,包括利用病毒载体、非病毒载体以及无载体递送等方法。这些方法在一定程度上提高了核酸药物递送的效率以及在机体内的稳定性,获得了较好的诊断与治疗效果。本文讨论了这些递送方式的优势和局限性,并对新型核酸递送载体的发展进行了展望。 展开更多
关键词 病毒载体 非病毒载体 中枢神经系统 基因治疗
中试制备临床级别第三代慢病毒
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作者 段德明 季永飘 +1 位作者 周梦洁 高基民 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1307-1316,共10页
基因治疗是一个快速发展的领域,其中关于慢病毒介导的外源基因导入研究得最为广泛。随着研发技术的不断发展,在安全性方面慢病毒已经从第一代发展至第三代,而如何工程化获得高滴度慢病毒仍是当今技术一大瓶颈。运用Fibra-Cel片状载体作... 基因治疗是一个快速发展的领域,其中关于慢病毒介导的外源基因导入研究得最为广泛。随着研发技术的不断发展,在安全性方面慢病毒已经从第一代发展至第三代,而如何工程化获得高滴度慢病毒仍是当今技术一大瓶颈。运用Fibra-Cel片状载体作为HEK293T细胞载体基质,联合多个无菌细胞转瓶在滚瓶机上培养,对贴壁细胞进行规模放大化生产。通过对第三代慢病毒包装过程中影响慢病毒滴度的因素进行逐一筛选,使病毒滴度达到最优。研究结果成功运用Fibra-Cel片状载体作为HEK293T细胞粘附载体基质,作为一种贴壁细胞规模放大的方法,筛选出了利用滚瓶机制备第三代慢病毒的最优条件,规模化生产了3批慢病毒。在时间上,将慢病毒的生产时间从质粒转染到病毒收集的120 h缩短至54 h;在成本上,利用滚瓶机代替生物反应器实现了无需反复灭菌、全程一次性产品的安全有效低成本的运行,为慢病毒的规模化制备提供了技术上的支持,为临床应用奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 慢病毒 规模化制备 Fibra-Cel 基因治疗 CAR-T
干细胞治疗闭合性不完全肌腱损伤的研究进展 预览
14
作者 胡静 李章华 《中国医药导报》 CAS 2019年第25期32-36,48共6页
随着体育事业和全民健身的发展,闭合性不完全肌腱损伤发病率逐年上升。目前,临床上常用的治疗方法如非甾体类抗炎药、针灸理疗和声光电刺激等都存在一定的局限性。近年来,基因工程和组织工程不断发展,为干细胞治疗闭合性不完全肌腱损伤... 随着体育事业和全民健身的发展,闭合性不完全肌腱损伤发病率逐年上升。目前,临床上常用的治疗方法如非甾体类抗炎药、针灸理疗和声光电刺激等都存在一定的局限性。近年来,基因工程和组织工程不断发展,为干细胞治疗闭合性不完全肌腱损伤打下良好基础。但纵观国内外文献,应用干细胞治疗运动员闭合性不完全肌腱损伤的专题研究较少,本文拟对相关研究做一总结,为后续研究和临床治疗提供参考。 展开更多
关键词 间充质干细胞 肌腱损伤 生长因子 基因治疗
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前列腺特异性启动子在慢病毒介导基因治疗中的研究进展 预览
15
作者 魏绪磐 杨波 +4 位作者 李文娟 张发 梁梦天 吕海迪 周逢海 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第16期2958-2961,共4页
前列腺癌多发生于老年男性,其发病率和死亡率正在逐年上升。对于早期前列腺癌,采用阻断雄激素的去势治疗可以有效抑制肿瘤生长,但在治疗2~3年后大部分进展为去势抵抗性前列腺癌,这是导致患者死亡的主要原因。目前,对晚期尤其是去势抵抗... 前列腺癌多发生于老年男性,其发病率和死亡率正在逐年上升。对于早期前列腺癌,采用阻断雄激素的去势治疗可以有效抑制肿瘤生长,但在治疗2~3年后大部分进展为去势抵抗性前列腺癌,这是导致患者死亡的主要原因。目前,对晚期尤其是去势抵抗性前列腺癌尚缺乏有效的治疗策略,随着生物技术的兴起与发展,针对恶性肿瘤的生物靶向治疗研究日趋深入和成熟,其中慢病毒介导的基因治疗成为研究的热点。运用特异性启动子调控相关基因的表达,可以进一步提高抗肿瘤的靶向性和安全性。本文就目前在基础研究中,前列腺特异性启动子在慢病毒介导下基因靶向治疗前列腺癌的研究现状进行综述。 展开更多
关键词 前列腺癌 慢病毒 基因启动子 靶向治疗 基因治疗
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帕金森病的临床治疗概况
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作者 李炜大 汤占斌 +2 位作者 韩有泽 霍鑫 毕胜 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第10期1993-1996,1944共5页
帕金森病(Parkinson’s disease, PD),在医学上称为"原发性震颤麻痹",又称"震颤麻痹",是一种中枢神经系统变性疾病,主要是因位于中脑部位"黑质"中的多巴胺(DA)能神经元病理性改变后,多巴胺的合成减少,对... 帕金森病(Parkinson’s disease, PD),在医学上称为"原发性震颤麻痹",又称"震颤麻痹",是一种中枢神经系统变性疾病,主要是因位于中脑部位"黑质"中的多巴胺(DA)能神经元病理性改变后,多巴胺的合成减少,对与其功能相互拮抗的乙酰胆碱的抑制功能降低,则乙酰胆碱的兴奋作用相对增强。两者失衡的结果便出现了"震颤麻痹"。本综述先从PD发病机制方向总结归纳目前临床常用的西医药物(包括左旋多巴、DA降解酶抑制剂、DA受体激动剂、抗胆碱能药物)、基因治疗靶点、手术治疗(脑深部电刺激术)及物理疗法,又从中医角度整体介绍了目前中医中药治疗以及针灸治疗等。因PD对患者的日常生活及身心健康造成了严重影响,我们希望通过本综述为PD综合治疗提供更广阔的临床思路及更好的方案。 展开更多
关键词 帕金森病 多巴胺 左旋多巴 基因治疗 脑深部电刺激术
基因联合间充质干细胞移植治疗老年性ED的研究进展 预览
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作者 张协武 蒲小勇 刘久敏 《中国性科学》 2019年第1期36-39,共4页
勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的发病率与年龄相关,随着老龄人口的增加,老年ED患者也不断增多。目前仍未找到最适当的治疗方法治愈或阻止ED的发生发展。虽然老年性ED的基因治疗是一个新兴的热点,但是联合间充质干细胞(Mesenchy... 勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的发病率与年龄相关,随着老龄人口的增加,老年ED患者也不断增多。目前仍未找到最适当的治疗方法治愈或阻止ED的发生发展。虽然老年性ED的基因治疗是一个新兴的热点,但是联合间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)移植更是对运用基因治疗ED的升华,本文将对各种基因联合间充质干细胞移植治疗老年性ED进行综述。 展开更多
关键词 勃起功能障碍 基因治疗 间充质干细胞 老年
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椎间盘退变分子生物学机制及再生治疗的优势与未来 预览
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作者 余城墙 张宇 +2 位作者 谢程欣 欧裕福 韦建勋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第30期4889-4896,共8页
背景:多因素引起的椎间盘退行性病变所导致的严重的腰背痛是致残率最高的脊柱疾病,随着医学分子生物学的发展及椎间盘退变机制研究的深入,椎间盘退变的再生疗法为恢复这种难治性疾病提够了可能。目的:文章对近年来国内外各研究者关于椎... 背景:多因素引起的椎间盘退行性病变所导致的严重的腰背痛是致残率最高的脊柱疾病,随着医学分子生物学的发展及椎间盘退变机制研究的深入,椎间盘退变的再生疗法为恢复这种难治性疾病提够了可能。目的:文章对近年来国内外各研究者关于椎间盘退变的相关分子和各种再生疗法在椎间盘退变中应用的研究进行归纳总结。方法:使用计算机检索PubMed、Embase、Web of science 数据库和中国知网、万方、维普数据库在1995年1 月至2019 年3 月发表的关于椎间盘退变再生治疗的相关文献,其中中文的检索关键词包括“椎间盘退变、腰背痛、再生治疗、生长因子、细胞治疗、基因治疗、病毒载体、非病毒载体”,英文的关键词为“Intervertebraldisc degeneration,low back pain,regenerative therapy,growth factor,cell therapy;gene therapy,viralvector,non-viral vector”,筛选出相关文献后再进一步归纳总结。结果与结论:研究显示,近20 多种基因影响着髓核细胞的变性,其中就包括各种非编码RNA(如microRNA、lincRNA 和lncRNA)。目前,生长因子疗法、细胞疗法和基因疗法等再生研究已经取得了预期效果。非病毒载体转导的基因治疗能避免感染的风险和靶细胞突变的可能,将成为恢复或缓解椎间盘退变的强大工具,具用广阔的应用前景。然而,这些再生疗法也有一定的局限性,在其应用于临床之前,需进行大量的基础研究和临床实验,以便评估其疗效和对逆转退变的影响。 展开更多
关键词 椎间盘退变 腰背痛 再生治疗 生长因子 细胞治疗 基因治疗 病毒载体 非病毒载体 组织工程
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过表达CKLF1基因对强直性脊柱炎滑膜成纤维细胞增殖及成骨转化影响的实验研究
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作者 李虎 李儒军 +5 位作者 陶可 赵丹 张立毅 高嘉翔 柯岩 林剑浩 《中国骨与关节杂志》 CAS 2019年第4期307-315,共9页
目的探索趋化素样因子1 (chemokine-like factor1,CKLF1)对强直性脊柱炎(ankylosingspondyliti,AS)髋关节滑膜成纤维细胞增殖和成骨转化的影响。方法对照组和AS髋关节滑膜组织分别取自我科4例股骨颈骨折和3例重度AS拟行髋关节置换患者... 目的探索趋化素样因子1 (chemokine-like factor1,CKLF1)对强直性脊柱炎(ankylosingspondyliti,AS)髋关节滑膜成纤维细胞增殖和成骨转化的影响。方法对照组和AS髋关节滑膜组织分别取自我科4例股骨颈骨折和3例重度AS拟行髋关节置换患者。滑膜组织经常规消化后获得单个细胞,并在倒置相差显微镜下进行观察和抗vimentin免疫荧光染色(immunofluorescence,IFC)检测。对上述髋关节滑膜组织及成纤维细胞分别行原位和体外培养,重组腺相关病毒(rAAV)-lacZ、rAAV-hCKLF1转染后21天收集标本。分别采用ELISA、IFC和荧光定量RT-PCR检测细胞增殖、致炎性细胞因子分泌、成骨分化的关键靶基因CKLF1及CCR4的表达。结果第3代正常和AS细胞抗vimentin IFC检测均为阳性,表明分离培养的细胞为成纤维细胞。rAAV-hCKLF1转染后21天,HE染色并计数单位面积下的细胞数、水溶性四氮唑法(WST-1)检测细胞增殖能力和Hoechst 33258检测细胞DNA含量均显示,CKLF1转染促进细胞增殖,且与无病毒转染组、lacZ组相比,差异有统计学意义(P=0.0000,P=0.0260,P=0.0020);正常和AS髋关节滑膜组织及成纤维细胞分泌的致炎性细胞因子(IL-6和TNF-α),均明显升高,且与无病毒转染组、lacZ组相比,差异有统计学意义(P=0.0060、P=0.0020);CKLF1尚能促进AS成纤维细胞表达特异性骨细胞外基质蛋白(OCN和OPN)表达;荧光定量RT-PCR与上述检测结果一致。结论过表达CKLF1促进AS髋关节滑膜成纤维细胞增殖和致炎性细胞因子分泌,增强成骨转化相关靶基因的转录,CKLF1可能在AS关节病理性骨化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 趋化素样因子1 强直性脊柱炎 滑膜细胞 成骨转化 腺病毒载体 病毒转染
奶牛溶菌酶基因(Lyz)乳腺特异性表达质粒构建与鉴定 预览 被引量:1
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作者 张志鹏 江静宜 +3 位作者 夏海磊 冀德君 李明勋 杨章平 《家畜生态学报》 北大核心 2019年第5期24-28,共5页
研究旨在构建具有高效抗菌、活性持久的奶牛乳腺特异性表达质粒,探索研制新型抗菌制剂,为利用基因工程技术防治奶牛乳房炎提供重要材料。根据GenBank中奶牛溶菌酶基因(lysozyme,Lyz)mRNA序列(GenBank号:NM_180999.1)设计引物,从奶牛乳... 研究旨在构建具有高效抗菌、活性持久的奶牛乳腺特异性表达质粒,探索研制新型抗菌制剂,为利用基因工程技术防治奶牛乳房炎提供重要材料。根据GenBank中奶牛溶菌酶基因(lysozyme,Lyz)mRNA序列(GenBank号:NM_180999.1)设计引物,从奶牛乳腺上皮细胞中RT-PCR扩增Lyz基因编码序列,将其克隆到携带增强型绿色荧光蛋白通用型表达载体pEGFP-N1中测序。重组质粒pEGFP-N1-Lyz经AseI+HindIII双酶切除CMV启动子,将奶牛乳腺特异性表达β-乳球蛋白基因(BLG)启动子同源重组替换到AseI和HindIII酶切位点,构建奶牛溶菌酶基因(Lyz)乳腺特异性表达质粒pBLG-EGFP-N1-Lyz,采用脂质体法转染奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)、人肾脏上皮细胞(HEK293T),荧光显微镜检测转染细胞中绿色荧光蛋白的表达情况。结果表明,重组表达质粒pBLG-EGFP-N1-Lyz测序结果与目的片段长度相符,转染至BMEC细胞和HEK293T细胞,在奶牛乳腺上皮细胞观察到绿色荧光,HEK293T细胞未观察到绿色荧光,奶牛Lyz基因乳腺特异性表达质粒构建成功。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 溶菌酶 乳腺特异性表达载体 基因治疗
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