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芦荟多糖增强免疫功能实验研究 预览
1
作者 朱鸿哲 《哈尔滨医药》 2018年第2期101-103,共3页
目的对芦荟多糖增强免疫力功能进行评价。方法芦荟多糖增强免疫力功能实验分别设人体推荐剂量的20倍、15倍、10倍三个剂量组。清洁级KM小鼠经口灌胃给予芦荟多糖30 d后,进行小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)、血清溶血素实验(半数溶血... 目的对芦荟多糖增强免疫力功能进行评价。方法芦荟多糖增强免疫力功能实验分别设人体推荐剂量的20倍、15倍、10倍三个剂量组。清洁级KM小鼠经口灌胃给予芦荟多糖30 d后,进行小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)、血清溶血素实验(半数溶血值HC50测定)。结果经口分别给予小鼠260、195、130 mg/kg·BW剂量芦荟多糖30 d后,实验前后体重变化、脾脏/体重、胸腺/体重比值各剂量组与阴性对照组比较,差异均无统计学意义。小鼠淋巴细胞转化实验各剂量组与阴性对照组比较,差异均有统计学意义;血清溶血素实验高、中剂量组与阴性对照组比较,差异有统计学意义。结论在本实验条件下,芦荟多糖在细胞免疫、体液免疫两个方面检测结果为阳性,故可判定芦荟多糖具有增强免疫力功能。 展开更多
关键词 芦荟多糖 增强免疫 脾淋巴细胞转化 溶血素
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美人鱼发光杆菌溶血素Hlych基因的原核表达及免疫血清制备 预览
2
作者 吴同垒 靳晓敏 +5 位作者 王洪彬 陈玥 张志强 高桂生 单晓枫 史秋梅 《动物医学进展》 北大核心 2018年第10期31-35,共5页
为研究美人鱼发光杆菌溶血素的携带情况及溶血素的免疫原性,对前期分离的美人鱼发光杆菌的溶血素基因进行了分析,同时进行了原核表达和免疫原性分析。结果显示,该菌携带溶血素Hlych基因,生物信息学分析,该基因与美人鱼发光杆菌溶... 为研究美人鱼发光杆菌溶血素的携带情况及溶血素的免疫原性,对前期分离的美人鱼发光杆菌的溶血素基因进行了分析,同时进行了原核表达和免疫原性分析。结果显示,该菌携带溶血素Hlych基因,生物信息学分析,该基因与美人鱼发光杆菌溶血素基因同源性达到99%以上,细胞定位预测为胞外蛋白,且具有良好的免疫原性。研究结果提示该菌携带Hlych基因,细菌毒力增强,同时Hlych蛋白有一定的免疫原性,有望用于建立ELISA诊断方法。 展开更多
关键词 美人鱼发光杆菌 溶血素 生物信息学 原核表达
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奶牛乳腺炎无乳链球菌Hly基因抗原表位的截短序列表达及抗原性研究
3
作者 吴金花 陈金龙 +3 位作者 锡林高娃 王金良 布日额 于辰龙 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期5-10,共6页
目的 截短克隆奶牛乳腺炎无乳链球菌溶血素(Hly)基因抗原优势区域,构建重组表达载体,实现原核细胞高效表达,进而对表达产物进行抗原性分析。方法 根据GenBank公布的牛源无乳链球菌(CP018623.1)hly基因序列设计引物,以牛乳源性无乳... 目的 截短克隆奶牛乳腺炎无乳链球菌溶血素(Hly)基因抗原优势区域,构建重组表达载体,实现原核细胞高效表达,进而对表达产物进行抗原性分析。方法 根据GenBank公布的牛源无乳链球菌(CP018623.1)hly基因序列设计引物,以牛乳源性无乳链球菌1886菌株基因组DNA为模板,PCR扩增hly基因片段,构建重组质粒pET-30a-hly并转化至E.coli/BL21(DE3)中,经IPTG诱导高效表达后,并进行SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定。表达产物纯化后经水溶性501佐剂乳化,免疫昆明小白鼠,采用间接ELISA法测定血清抗体滴度。结果 成功克隆奶牛乳腺炎无乳链球菌1886菌株hly基因,其碱基长度513bp,编码171个氨基酸殘基,与GenBank公布的牛源无乳链球菌(CP018623.1)Hly基因核苷酸序列及其编码氨基酸序列相似性为100%。重组质粒表达的重组蛋白分子质量单位约为30×103,纯化蛋白含量为1.2mg/ml。Western blot检测重组蛋白可被相应抗体识别。ELISA检测重组蛋白免疫小鼠血清抗体滴度为1∶25 600。结论 内蒙古分离株无乳链球菌Ia型hly基因抗原优势序列编码多肽具有良好的抗原性,可以作为候选免疫抗原,为研究其致病机制及新型疫苗奠设计奠定了基础。 展开更多
关键词 牛乳腺炎 无乳链球菌 溶血素 抗原性
2016年辽宁省婴幼儿配方食品及谷类辅助食品中蜡样芽胞杆菌毒力基因的鉴定
4
作者 孙婷婷 王伟杰 +5 位作者 韩佳敏 李雪 张铭琰 刘海霞 王永菲 张眉眉 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2018年第7期791-794,共4页
目的了解婴幼儿配方食品和谷类辅助食品中蜡样芽胞杆菌的毒力基因携带特点,对辽宁省婴幼儿配方食品和谷类辅助食品中蜡样芽胞杆菌的污染状况进行调查。方法依据GB4789.14-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验》及采... 目的了解婴幼儿配方食品和谷类辅助食品中蜡样芽胞杆菌的毒力基因携带特点,对辽宁省婴幼儿配方食品和谷类辅助食品中蜡样芽胞杆菌的污染状况进行调查。方法依据GB4789.14-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验》及采用PCR扩增技术和血平板检测的方法对2016年采自辽宁省15个监测点,收集的176份乳源性食品中检出的22株蜡样芽胞杆菌进行10种毒力基因检测。结果婴幼儿配方食品和谷类辅助食品蜡样芽胞杆菌检出率为12.5%(22/176),非溶血性的肠毒素Nhe基因、溶血素BL基因、肠毒素T基因和细胞毒素K基因是辽宁省乳源性蜡样芽胞杆菌的主要毒力基因,至少携带2种毒力基因的菌株达到检出菌总数的100.0%。结论研究结果证实辽宁省婴幼儿配方食品及谷类辅助食品存在蜡样芽胞杆菌污染情况,严格监控婴幼儿配方食品及谷类辅助食品的蜡样芽胞杆菌污染,对于生产出优质婴幼儿配方食品及谷类辅助食品具有重要意义,以期提高婴幼儿食品的质量安全。 展开更多
关键词 蜡样芽胞杆菌 毒力基因 溶血素
盐酸左旋咪唑对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响 预览
5
作者 林燕飞 张琴 高芳芳 《食品与药品》 CAS 2018年第6期460-464,共5页
目的研究酸左旋咪唑对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响.方法采用环磷酰胺制备免疫功能低下小鼠模型,分别给予5,10,15mg/kg盐酸左旋咪唑治疗15d,以血清IgG含量、胸腺和脾脏指数、单核巨噬细胞吞噬能力、迟发型超敏反应OD值及血清溶血素O... 目的研究酸左旋咪唑对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响.方法采用环磷酰胺制备免疫功能低下小鼠模型,分别给予5,10,15mg/kg盐酸左旋咪唑治疗15d,以血清IgG含量、胸腺和脾脏指数、单核巨噬细胞吞噬能力、迟发型超敏反应OD值及血清溶血素OD值为考察指标,同时采用胸腺肽为阳性对照,全面考察盐酸左旋咪唑对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响.结果模型组血清IgG含量、胸腺和脾脏指数及K值和α值降低(P〈0.05),胸腺肽组及盐酸左旋咪唑5,10,15mg/kg组各指标均提高(P〈0.05).模型组迟发型超敏反应OD值和血清溶血素OD值降低(P〈0.05),胸腺肽组及盐酸左旋咪唑5,10,15mg/kg组各指标均提高(P〈0.05).结论盐酸左旋咪唑可提高免疫低下小鼠的免疫能力. 展开更多
关键词 盐酸左旋咪唑 环磷酰胺 免疫功能 溶血素
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牛乳源粪肠球菌cyla基因的克隆及编码蛋白抗原表位分析
6
作者 牛天明 布日额 +2 位作者 吴金花 锡林高娃 孙立杰 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期484-488,共5页
目的分离鉴定牛乳腺炎乳中的粪肠球菌并克隆其溶血素基因cyla。方法从内蒙古科左后旗一奶牛场采集奶牛乳腺炎乳样,进行粪肠球菌的分离、培养,生化试验和分子生物学鉴定及药敏试验;对溶血素基因cyla进行同源性比对并分析其编码蛋白的抗... 目的分离鉴定牛乳腺炎乳中的粪肠球菌并克隆其溶血素基因cyla。方法从内蒙古科左后旗一奶牛场采集奶牛乳腺炎乳样,进行粪肠球菌的分离、培养,生化试验和分子生物学鉴定及药敏试验;对溶血素基因cyla进行同源性比对并分析其编码蛋白的抗原表位。结果从奶牛乳腺炎乳中分离出粪肠球菌cyla基因序列比对及进化分析表明,分离菌与GenBank上公布的粪肠球菌序列(CP015883.1)的同源性达100%,与其处于同一个进化分枝,抗原性分析显示cyla基因编码蛋白具有一定的抗原表位区域。该菌具有溶血特性,对氨苄西林、万古霉素敏感,对四环素耐药。结论牛乳腺炎粪肠球菌cyla基因编码蛋白具有抗原表位,可作为粪肠球菌致奶牛乳腺炎防控疫苗研发的靶标抗原。 展开更多
关键词 奶牛乳腺炎 粪肠球菌 溶血素
金钗石斛破壁粉对环磷酰胺致免疫低下小鼠免疫功能的调节作用
7
作者 税小红 税璘 +3 位作者 牛曼思 李薪宇 孙琴 庄元春 《药物评价研究》 CAS 2018年第12期2189-2194,共6页
目的研究金钗石斛破壁粉对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法将180只小鼠随机分为6组,每组30只,分别为对照组、模型组、左旋咪唑(阳性对照,ig给予盐酸左旋咪唑片0.025g/kg)组及金钗石斛破壁粉低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0g/kg)组。除... 目的研究金钗石斛破壁粉对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法将180只小鼠随机分为6组,每组30只,分别为对照组、模型组、左旋咪唑(阳性对照,ig给予盐酸左旋咪唑片0.025g/kg)组及金钗石斛破壁粉低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0g/kg)组。除对照组外,其余5组于给药前3dip75mg/kg新配制的环磷酰胺,每天1次,连续3d,制备免疫功能低下小鼠模型。造模完成后每天ig给药1次,对照组和模型组给予等体积的生理盐水,连续14d。通过计算脾指数与胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、血清溶血素测定、淋巴细胞转化试验及western blotting检测脾脏中细胞因子IL-2、TNF-α的蛋白表达,观察金钗石斛破壁粉对免疫低下小鼠免疫功能的调节作用。结果与模型组比较,金钗石斛破壁粉1.0、2.0g/kg显著升高免疫低下小鼠的脾指数与胸腺指数,提高巨噬细胞吞噬功能,升高血清溶血素含量,促进淋巴细胞转化反应,上调小鼠脾脏中细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白表达(P<0.05、0.01)。结论金钗石斛破壁粉显著增强免疫低下小鼠的免疫功能。 展开更多
关键词 金钗石斛破壁粉 免疫低下 细胞因子 环磷酰胺 吞噬功能 溶血素 淋巴细胞转化反应
阿胶对免疫低下模型小鼠免疫功能的影响 被引量:1
8
作者 安梦培 张守元 +3 位作者 张淹 朱振娜 胡金芳 申秀萍 《药物评价研究》 CAS 2018年第4期567-571,共5页
目的 研究阿胶对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法 小鼠ip环磷酰胺或氢化可的松建立免疫低下模型,高、中、低(3.00、1.50、0.75g/kg)剂量阿胶ig给予小鼠14d后,测定血清溶血素水平,观察阿胶对体液免疫的影响;进行二硝基氯苯... 目的 研究阿胶对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法 小鼠ip环磷酰胺或氢化可的松建立免疫低下模型,高、中、低(3.00、1.50、0.75g/kg)剂量阿胶ig给予小鼠14d后,测定血清溶血素水平,观察阿胶对体液免疫的影响;进行二硝基氯苯诱导的小鼠耳廓肿胀实验,检测小鼠耳廓肿胀度,观察阿胶对细胞免疫的影响;流式细胞术检测阿胶对淋巴细胞亚群的影响;进行碳廓清实验,检测廓清指数K和吞噬指数α,观察阿胶对非特异性免疫的影响。结果 与模型组比较,阿胶3.0、1.5、0.75g/kg均可显著提高免疫功能低下小鼠血清溶血素含量(P〈0.001);3.0、1.5g/kg能明显提高小鼠耳廓肿胀度(P〈O.01、0.001);3酬蟾能显著提高小鼠CD3^+(T淋巴细胞)、CD3^+CD4^+(辅助性和迟发超敏性T细胞)占淋巴细胞百分比(P〈0.05);阿胶对小鼠的碳粒廓清指数K和吞噬指数cc无显著影响。结论 阿胶能显著提高免疫低下小鼠的体液免疫和细胞免疫,提高CD3^+、CD3^+CD4^+阳性细胞比例,对非特异性免疫无明显影响。 展开更多
关键词 阿胶 溶血素 体液免疫 细胞免疫 淋巴细胞 非特异性免疫 迟发型超敏反应
不同动物红细胞制备实验教学用溶血素的方法探讨 预览
9
作者 李洱花 叶吉云 +3 位作者 邹浩 陈芳 刘云霞 张才军 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第14期1921-1924,共4页
目的检测绵羊红细胞(SRBC)和猪红细胞(PRBC)分别经2种程序免疫家兔所制得溶血素的效价,并比较几种溶血素在医学免疫学实验中的应用效果,以寻求制备符合免疫学实验及教学需求的高效价溶血素的较好方法。方法 40只雄性家兔分为4组,分... 目的检测绵羊红细胞(SRBC)和猪红细胞(PRBC)分别经2种程序免疫家兔所制得溶血素的效价,并比较几种溶血素在医学免疫学实验中的应用效果,以寻求制备符合免疫学实验及教学需求的高效价溶血素的较好方法。方法 40只雄性家兔分为4组,分别用SRBC和PRBC,间隔2d经不同程序免疫家兔制备溶血素,再用补体溶血试验检测几种溶血素的效价,比较其在免疫学实验教学中的应用,并探讨高效价溶血素的制备方法。结果经补体溶血试验测得几种溶血素效价,A组兔抗-SRBC血清效价为1∶4 800;B组兔抗-PRBC血清效价为1∶1 200;C组兔抗-SRBC血清效价为1∶1 000,D组兔抗-PRBC血清效价为1∶200。结论用SRBC制备的溶血素效价均高于相同方法下用PRBC制备的溶血素;红细胞抗原相同时,采取先皮内全血注射后耳缘静脉接种的免疫方法制备的溶血素效价也要高于单纯采取耳缘静脉注射的免疫方法制备的溶血素;且PRBC可代替SRBC免疫家兔,制备满足实验教学要求的溶血素。 展开更多
关键词 溶血素 红细胞抗原 效价 免疫学 实验教学
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壳寡糖对海南热带糙海参免疫相关酶的影响 预览
10
作者 刘均玲 康静玮 +1 位作者 符中环 马莎 《海洋科学》 CSCD 北大核心 2017年第12期26-31,共6页
本研究测定了壳寡糖对海南热带糙海参(Holothuria scabra)体腔液和体壁组织中免疫相关因子,酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)和溶血素活性的影响。结果表明,投喂0.5%壳寡糖对糙海参体腔液中AKP、ACP、LSZ和溶血素活性均... 本研究测定了壳寡糖对海南热带糙海参(Holothuria scabra)体腔液和体壁组织中免疫相关因子,酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)和溶血素活性的影响。结果表明,投喂0.5%壳寡糖对糙海参体腔液中AKP、ACP、LSZ和溶血素活性均有明显增强作用(P<0.05),其中对ACP和LSZ活力有极显著的影响(P<0.01),且投喂6 d内活性均持续增强;0.5%壳寡糖对体壁组织匀浆液中AKP、ACP活性明显增强(P<0.05),但随着时间延长,对体壁组织中LSZ和溶血素作用不明显。壳寡糖可以提高海南热带糙海参(Holothuria scabra)的非特异性免疫力。 展开更多
关键词 糙海参(Holothuria scabra) 酸性磷酸酶 碱性磷酸酶 溶菌酶 溶血素 壳寡糖
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鸭疫里默氏杆菌假定溶血素相关蛋白基因Riean_0620的原核表达及溶血活性检测 预览
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作者 陶敏捷 姜盼 +5 位作者 孙冰清 丁云竹 薛亚飞 曹立松 刘光清 胡青海 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期447-450,共4页
为研究鸭疫里默氏杆菌(RA)的假定溶血素相关蛋白Riean_0620的功能,本研究根据血清10型RAHXb2株Riean_0620基因序列设计引物,PCR扩增Riean_0620基因,并进行序列测定与分析。将Riean_0620基因克隆到原核表达载体pET-43.1a进行诱导表... 为研究鸭疫里默氏杆菌(RA)的假定溶血素相关蛋白Riean_0620的功能,本研究根据血清10型RAHXb2株Riean_0620基因序列设计引物,PCR扩增Riean_0620基因,并进行序列测定与分析。将Riean_0620基因克隆到原核表达载体pET-43.1a进行诱导表达,采用亲和层析纯化获得重组蛋白rRiean_0620。溶血活性检测结果表明rRiean_0620具有裂解鸭红细胞的活性。本研究将有利于进一步研究Riean_0620蛋白的生物学特性以及RA的溶血机制。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 溶血素 原核表达 溶血活性检测
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金黄色葡萄球菌溶血素的研究进展 被引量:2
12
作者 徐晓群 王欢 吕火烊 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期720-724,730共6页
金黄色葡萄球菌简称金葡菌,是一类革兰阳性需氧或兼性厌氧菌,可导致化脓性感染、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等局部感染,以及败血症、脓毒血症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决其产生的毒素和侵袭性酶,其中溶血素已经成为... 金黄色葡萄球菌简称金葡菌,是一类革兰阳性需氧或兼性厌氧菌,可导致化脓性感染、肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等局部感染,以及败血症、脓毒血症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决其产生的毒素和侵袭性酶,其中溶血素已经成为该细菌的一个重要致病因子。本文对金黄色葡萄球菌溶血素的分子特征、作用机制、免疫预防及临床应用方面的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 溶血素 分子机制 免疫保护 疫苗
绵羊红细胞与猪红细胞制备溶血素在医学免疫学实验教学中的应用比较 预览
13
作者 李洱花 张才军 +2 位作者 陈芳 刘云霞 叶吉云 《昆明医科大学学报》 CAS 2017年第5期31-34,共4页
目的检测2种动物红细胞(绵羊红细胞SRBC和猪红细胞PRBC)免疫家兔所制得溶血素的效价,比较其在医学免疫学实验中的应用效果,以寻求制备符合免疫学实验及教学需求的高效价溶血素的较好方法.方法分别选择绵羊红细胞(SRBC)和猪红细胞... 目的检测2种动物红细胞(绵羊红细胞SRBC和猪红细胞PRBC)免疫家兔所制得溶血素的效价,比较其在医学免疫学实验中的应用效果,以寻求制备符合免疫学实验及教学需求的高效价溶血素的较好方法.方法分别选择绵羊红细胞(SRBC)和猪红细胞(PRBC)经皮内多点注射、耳缘静脉注射家兔以制备溶血素,再用补体溶血试验检测2种溶血素效价的高低,并比较二者在免疫学溶血实验及教学中的运用效果.结果经补体溶血试验测得2种溶血素效价分别是:抗-SRBC为1:4800;抗-PRBC为1:1200.结论抗-PRBC溶血素效价低于抗-SRBC溶血素,但2种溶血素在溶血反应中均可产生较好的溶血效果,故PRBC能替代SRBC制备溶血素,并成功用于免疫学溶血实验及教学中. 展开更多
关键词 红细胞抗原 溶血素 效价
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金黄色葡萄球菌溶血素研究进展 预览
14
作者 白文丽 锡林高娃 +2 位作者 吴金花 王华 布日额 《内蒙古民族大学学报:自然科学版》 2017年第2期147-149,共3页
自21世纪以来,金黄色葡萄球菌迅速成为国内外人畜受感染的重要致病菌,造成严重的感染与发病.随着人畜抗生素的滥用,多重耐药菌,甚至"超级细菌"产生的报道逐年增多,使得金黄色葡萄球菌成为重要的公共卫生安全问题而备受重视.因此,国内... 自21世纪以来,金黄色葡萄球菌迅速成为国内外人畜受感染的重要致病菌,造成严重的感染与发病.随着人畜抗生素的滥用,多重耐药菌,甚至"超级细菌"产生的报道逐年增多,使得金黄色葡萄球菌成为重要的公共卫生安全问题而备受重视.因此,国内外学者为了能够有效预防金黄色葡萄球菌的危害,近年来针对金黄色葡萄球菌的致病因子进行了一系列的研究,尤其对其溶血素的研究报道较多,并获得了一些进展.本文主要对近年来国内外金黄色葡萄球菌溶血素研究状况作一综述和展望. 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 溶血素 展望
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纳米孔道单分子检测结直肠癌MicroRNAs
15
作者 胡正利 杜冀晖 +3 位作者 应佚伦 彭岳一 曹婵 龙亿涛 《化学学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期1087-1090,共4页
MicroRNA(miRNA)可用于癌症的早期诊断、预后判断,其分析检测具有重要临床意义.结直肠癌的发生、发展与miRNA 21、miRNA 92等的异常表达明显相关.本研究设计了以poly(d T)n为引导链的DNA探针(probe)并尝试使用α-溶血素(α-HL)... MicroRNA(miRNA)可用于癌症的早期诊断、预后判断,其分析检测具有重要临床意义.结直肠癌的发生、发展与miRNA 21、miRNA 92等的异常表达明显相关.本研究设计了以poly(d T)n为引导链的DNA探针(probe)并尝试使用α-溶血素(α-HL)纳米孔道单分子检测方法检测结直肠癌miRNAs.miRNA·probe复合物分子穿过α-HL纳米孔道限域空间时,由于probe链长、序列不同导致probe-α-HL相互作用不同,miRNA 92·probe 92、miRNA 21·probe 21、miRNA 16·probe 16输出为形态、阻断时间不同的多台阶特征信号,实现了三种miRNAs的有效区分.实验证明,此方法可以用于检测血清实际样品.因此,未来有望使用α-HL构建miRNA超灵敏单分子生物传感器. 展开更多
关键词 MICRORNA α-溶血素 纳米孔道限域空间 单分子生物传感器
荧光假单胞菌GcM5-1A溶血素的基因克隆及其活性研究 预览
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作者 刘飞 王林松 +1 位作者 张倩倩 李荣贵 《青岛大学学报:自然科学版》 CAS 2017年第1期46-50,共5页
利用基因克隆技术探究了松材线虫携带的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)GcM5-1A是否含有溶血素基因以及溶血素活性。根据荧光假单胞菌疑似溶血素的基因序列设计一对引物,通过PCR技术扩增得到疑似溶血素基因Hly。将该基因克隆... 利用基因克隆技术探究了松材线虫携带的荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)GcM5-1A是否含有溶血素基因以及溶血素活性。根据荧光假单胞菌疑似溶血素的基因序列设计一对引物,通过PCR技术扩增得到疑似溶血素基因Hly。将该基因克隆到表达载体pET-15b上,构建了pET-15b-Hly。重组质粒pET-15b-Hly转化E.coli BL21(DE3)构建了工程菌,工程菌经过异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,SDS-PAGE分析表明,疑似溶血素在大肠杆菌中得到了表达。利用Ni-Sepharose 6(FF)亲和树脂纯化了重组蛋白,溶血实验显示,纯化的重组蛋白可使鸡的红细胞发生溶血,证实本研究所克隆基因确实编码溶血素,利用黑松切根苗的生测表明,重组荧光假单胞菌溶血素对黑松幼苗有致萎活性,这为深入研究松材线虫携带细菌在松材线虫病病理进程中的作用打下了基础。 展开更多
关键词 荧光假单胞菌 松材线虫 溶血素 克隆 活性
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嘉定地区副溶血性弧菌溶血毒素基因特征的研究
17
作者 陈伟鑫 余玮 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第11期1628-1629,共2页
目的了解嘉定地区从患者肛拭和食品中分离的副溶血性弧菌菌株的溶血毒素基因特征。方法收集近年来嘉定地区从腹泻患者肛拭和食品中分离到的282株副溶血性弧菌菌株,应用PCR技术进行tdh基因、trh基因、tlh基因的检测。结果肛拭来源的226... 目的了解嘉定地区从患者肛拭和食品中分离的副溶血性弧菌菌株的溶血毒素基因特征。方法收集近年来嘉定地区从腹泻患者肛拭和食品中分离到的282株副溶血性弧菌菌株,应用PCR技术进行tdh基因、trh基因、tlh基因的检测。结果肛拭来源的226株副溶血性弧菌,其tdh基因携带率为96.90%,而分离自食品的56株菌株未见有tdh基因携带;肛拭和食品分离到的菌株trh基因携带率分别为2.21%、5.36%;肛拭和食品分离到的菌株tlh基因携带率分别为99.56%、98.21%。结论引起嘉定地区食物中毒及散发腹泻的副溶血性弧菌主要为tdh阳性、trh阴性菌株,而食品中主要是tdh阴性、trh阴性菌株。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 溶血毒素 基因
中药有效成分对细菌溶血素的抑制作用 预览 被引量:1
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作者 黄程程 孙磊 +3 位作者 张泽辉 张鹏 张德显 刘明春 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期3363-3367,共5页
在防制细菌性疾病方面,抗菌药物起着非常重要的作用,但是随着抗菌药物在临床上的广泛应用,细菌的耐药问题日益突出,给临床治疗带来极大困难。近年来,以中药抑制细菌毒力因子控制细菌感染的治疗策略已引起国内外学者的广泛关注。细... 在防制细菌性疾病方面,抗菌药物起着非常重要的作用,但是随着抗菌药物在临床上的广泛应用,细菌的耐药问题日益突出,给临床治疗带来极大困难。近年来,以中药抑制细菌毒力因子控制细菌感染的治疗策略已引起国内外学者的广泛关注。细菌溶血素是细菌产生的主要毒力因子之一,随着研究的不断深入,开发溶血素抑制剂成为解决细菌感染问题的关键。现针对中药对细菌溶血素的抑制作用进行综述,以期为临床治疗细菌性疾病提供理论依据。 展开更多
关键词 中药 有效成分 溶血素 细菌 抑制作用
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金黄色葡萄球菌溶血素对鼻腔黏液纤毛清除系统的影响
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作者 刘洋 张志远 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2016年第17期1415-1418,共4页
鼻腔黏膜与外界直接相通,易受各种吸入性有害因子的影响。鼻腔黏膜表面被覆着一层由纤毛和黏液组成的黏液纤毛毯,通过纤毛的协同规律摆动,将附于其上的凝胶层向咽喉部移动,再通过咳嗽或吞咽动作将外来物彻底清除,因而将黏液纤毛清除(mu... 鼻腔黏膜与外界直接相通,易受各种吸入性有害因子的影响。鼻腔黏膜表面被覆着一层由纤毛和黏液组成的黏液纤毛毯,通过纤毛的协同规律摆动,将附于其上的凝胶层向咽喉部移动,再通过咳嗽或吞咽动作将外来物彻底清除,因而将黏液纤毛清除(mucociliary clear,MCC)系统称为鼻腔第一道防线。 展开更多
关键词 纤毛 金黄色葡萄球菌 溶血素
环介导等温扩增联合横向流动试纸条可视化检测哈维氏弧菌的研究 预览 被引量:3
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作者 程蝶 柴方超 +2 位作者 蔡怡 周前进 陈炯 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期60-68,共9页
以哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)为材料,利用环介导等温扩增技术(LAMP)进行核酸扩增,借助横向流动试纸条(LFD)完成产物检测,旨在建立一种可用于哈维氏弧菌快速检测的LAMP-LFD新技术。以哈维氏弧菌的溶血素基因(vhh A)为检测靶标... 以哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)为材料,利用环介导等温扩增技术(LAMP)进行核酸扩增,借助横向流动试纸条(LFD)完成产物检测,旨在建立一种可用于哈维氏弧菌快速检测的LAMP-LFD新技术。以哈维氏弧菌的溶血素基因(vhh A)为检测靶标设计了3对特异性引物(其中,上游内引物vhh A-FIP由生物素标记),进行由生物素标记的LAMP反应;同时设计1条异硫氰酸荧光素(FITC)标记的探针,与获得的LAMP产物进行特异性杂交,杂交产物经LFD完成检测。经优化,LAMP的反应条件为63℃反应40 min,由LFD完成结果判读共需50 min。结果表明,LAMP-LFD方法能特异性地检出哈维氏弧菌,对创伤弧菌等其他9种水产养殖重要病原菌的检测结果呈阴性。利用该方法,针对细菌纯培养物的检测灵敏度为1.0×102 CFU/m L或2 CFU/反应,针对污染有该菌的大黄鱼组织的检测灵敏度为5×102 CFU/m L或20 CFU/反应,均是以LAMP外引物vhh A-F3/vhh A-B3的常规PCR方法的100倍。因此,该方法能够快速、准确地检出哈维氏弧菌,有望在海水养殖过程哈维氏弧菌的监测和即时检测中普及使用。 展开更多
关键词 哈维氏弧菌 溶血素基因 环介导等温扩增技术 横向流动试纸条 检测
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