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新型大豆苷元苯磺酸酯的药学性质与细胞吸收利用研究
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作者 千丽君 黄华南 +2 位作者 王晓波 胡华南 彭游 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1387-1395,共9页
目的:考察新型大豆苷元苯磺酸酯衍生物(D3、D4)的药学性质和细胞吸收变化,分析其构性关系。方法:利用药动团变换原理对大豆苷元(DA1)进行结构修饰,采用微波法高产率合成DA1苯磺酸酯衍生物,采用HPLC对D3、D4的药学性质进行考察,并采用软... 目的:考察新型大豆苷元苯磺酸酯衍生物(D3、D4)的药学性质和细胞吸收变化,分析其构性关系。方法:利用药动团变换原理对大豆苷元(DA1)进行结构修饰,采用微波法高产率合成DA1苯磺酸酯衍生物,采用HPLC对D3、D4的药学性质进行考察,并采用软件ChemAxon16.1.18对D3、D4的部分药学性质进行计算,利用HPLC考察DA1及衍生物D3、D4在人主动脉血管平滑肌细胞(HAVSMCs)中的吸收利用率。结果:D3、D4相对DA1在乙酸乙酯中的溶解度分别提高4.73×10^5和1.09×10^5倍,表观脂水分配系数(lgP)分别为2.73±0.45和2.19±0.12,D3的水溶性相对于DA1也得以提高,D3在HAVSMCs中的吸收率达74.3%,细胞最大吸收率:D3>DA1>D4。结论:构性关系研究表明,药物的吸收利用与其理化性质密切相关,适宜的脂溶性和水溶性可使药物的细胞吸收利用得以提高。 展开更多
关键词 大豆苷元苯磺酸酯 表观脂水分配系数 主动脉血管平滑肌细胞 细胞吸收 构性关系
氧化型低密度脂蛋白对人血管平滑肌细胞透明质酸表达的影响及机制
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作者 梁雅林 张慧 宁雕 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2019年第6期489-494,共6页
目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人主动脉血管平滑肌细胞透明质酸(HA)合成的影响,并初步探究其分子机制。方法体外培养人主动脉血管平滑肌细胞T/GHAVSMC,使用不同浓度(10、25、50、75、100mg/L)ox-LDL对T/GHAVSMC细胞进行干预,使... 目的观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人主动脉血管平滑肌细胞透明质酸(HA)合成的影响,并初步探究其分子机制。方法体外培养人主动脉血管平滑肌细胞T/GHAVSMC,使用不同浓度(10、25、50、75、100mg/L)ox-LDL对T/GHAVSMC细胞进行干预,使用CCK-8法检测细胞存活率,并进行分组分析。采用浓度为25和50mg/L的ox-LDL干预T/GHAVSMC细胞48h,并设置天然LDL(native-LDL,N-LDL)组(50mg/L的N-LDL)和对照组,使用HPLC法测定HA含量,使用实时定量PCR检测透明质酸合成酶2(HAS2)和透明质酸合成酶3(HAS3)的mRNA表达,使用Westernblot法检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)、氧化脂蛋白的清道夫受体(SR-PSOX)以及脂肪酸转位酶(CD36)的表达。结果低于100mg/L的ox-LDL对T/GHAVSMC细胞无明显细胞毒性。25mg/L和50mg/Lox-LDL组HA含量、HAS2和HAS3的mRNA表达量明显高于N-LDL组和对照组(P<0.05),N-LDL组与对照组组间差异无显著性(P>0.05)。25mg/L和50mg/Lox-LDL组LOX-1表达明显高于N-LDL组和对照组(P<0.05),而LRP-1、SR-PSOX和CD36表达无明显变化(P>0.05)。结论ox-LDL能够诱导人主动脉平滑肌细胞中HA的合成,其机制可能与结合LOX-1有关。 展开更多
关键词 氧化型低密度脂蛋白 人主动脉血管平滑肌细胞 透明质酸 凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1
myocardin通过激活miR-93-5p促进人主动脉血管平滑肌细胞分化 预览
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作者 史丹阳 刘美玲 +3 位作者 刘翔 张建 张同存 王楠 《天津科技大学学报》 CAS 2019年第2期19-24,共6页
myocardin 是促进平滑肌细胞分化的重要转录因子.微小RNA(microRNAs,miRNA)在近年来已经证实参与多种生物学过程,包括平滑肌的表型转化.然而在平滑肌分化过程中myocardin 与哪些microRNA 具有相关性仍有待于阐明.通过将外源性 myocardin... myocardin 是促进平滑肌细胞分化的重要转录因子.微小RNA(microRNAs,miRNA)在近年来已经证实参与多种生物学过程,包括平滑肌的表型转化.然而在平滑肌分化过程中myocardin 与哪些microRNA 具有相关性仍有待于阐明.通过将外源性 myocardin 转入人主动脉血管平滑肌细胞(human aortal vascular smooth muscle cells,HAVSMCs)中,利用免疫印迹(Western blot)检测分化标志基因肌动蛋白α 2(actin alpha 2,ACTA2)和肌动蛋白相关蛋白(smooth muscle 22 alpha,SM22α)的表达;利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测过表达或敲低myocardin 对miR-93-5p 水平的影响;构建miR-93-5p 启动子的荧光素酶报告质粒,利用荧光素酶报告分析证实myocardin 对miR-93-5p 启动子的转录激活作用.上述结果证实myocardin 可能通过激活miR-93-5p 的转录,上调其表达,进而促进血管平滑肌细胞的分化. 展开更多
关键词 MYOCARDIN 人主动脉血管平滑肌细胞 表型转化 miR-93-5p
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黄连素对人主动脉血管平滑肌细胞钙化的作用及其机制 预览
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作者 张鑫鹏 曾存良 +5 位作者 孙晓磊 何虎强 胥雄飞 曾宏 施森 刘勇 《山东医药》 2018年第33期1-4,共4页
目的探讨黄连素影响人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化的作用及机制。方法 利用糖基化终末产物(AGEs)建立HASMCs钙化模型,予以不同浓度(10、25、50μmol/L)的黄连素干预。用冯库萨、茜素红染色观察细胞钙化程度,采用细胞内钙含量试剂... 目的探讨黄连素影响人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化的作用及机制。方法 利用糖基化终末产物(AGEs)建立HASMCs钙化模型,予以不同浓度(10、25、50μmol/L)的黄连素干预。用冯库萨、茜素红染色观察细胞钙化程度,采用细胞内钙含量试剂盒测定钙含量,Western blotting检测各组细胞骨保护素(OPG)、骨桥蛋白(OPN)及骨形成蛋白2(BMP2)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38蛋白表达。结果 与对照组比较,AGEs组钙化程度、细胞内钙含量升高(P均<0.05),不同浓度黄连素干预HASMCs钙含量呈浓度依赖性减少(P均<0.05);AGEs组OPG、BMP2、OPN、ERK、p38蛋白表达量较对照组明显增高(P均<0.05),不同浓度黄连素呈浓度依赖性地减少HASMCs的OPG、BMP2、OPN、ERK、p38蛋白表达量(P均<0.05)。结论 黄连素可抑制AGEs诱导的HASMCs钙化,其机制可能与下调ERK、p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路导致OPG、OPN、BMP2表达减少有关。 展开更多
关键词 黄连素 人主动脉血管平滑肌细胞 血管钙化 糖基化终末产物 丝裂原活化蛋白激酶通路
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油酸调节人血管平滑肌细胞TLR4的增殖活性及炎性因子的表达 预览 被引量:5
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作者 杨海静 陈卫 +3 位作者 权金星 李伟华 刘静 邱明才 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第1期44-48,共5页
目的探讨油酸对人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子表达的调节作用。方法 MTT法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR法检测TLR4及炎性因子mRNA的表达;Western blot法检测细胞TLR4蛋白表达,ELISA法检测炎性因子蛋白含量。结果油酸促进... 目的探讨油酸对人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子表达的调节作用。方法 MTT法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR法检测TLR4及炎性因子mRNA的表达;Western blot法检测细胞TLR4蛋白表达,ELISA法检测炎性因子蛋白含量。结果油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞增殖活性,增加油酸浓度,抑制细胞增殖。油酸上调TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1 mRNA表达最大幅度为6.5、7.4、7.4和7.1倍。IL-6、IL-8和MCP-1蛋白表达最大上调幅度为2.16、1.93和2.06倍。200μmol/L组TLR4蛋白表达的吸光度值为(1.70±0.62),与对照组(0.29±0.22)比较P〈0.05。LPS组TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1的表达明显增加(P〈0.05)。结论油酸促进人主动脉血管平滑肌细胞TLR4及炎性因子mRNA及蛋白表达。 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 油酸 果蝇样受体4 细胞因子 基因表达
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TLR4通路在软脂酸诱导人血管平滑肌细胞IL-6基因表达中的作用 被引量:1
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作者 权金星 高啸波 +4 位作者 杨海静 陈卫 李伟华 李永红 刘静 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期75-78,共4页
构建Toll样受体4(TLR4)shRNA腺病毒表达载体(pGSadeno—TLR4)并感染人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC),采用软脂酸和不同的信号通路阻断剂处理HA—VSMC,以实时定量PCR检测白细胞介素6(IL-6)mRNA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA... 构建Toll样受体4(TLR4)shRNA腺病毒表达载体(pGSadeno—TLR4)并感染人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC),采用软脂酸和不同的信号通路阻断剂处理HA—VSMC,以实时定量PCR检测白细胞介素6(IL-6)mRNA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测NF—KBp65活性和IL-6的蛋白水平。结果显示,软脂酸增加HA—VSMCIL-6mRNA和蛋白水平,且具有明显的剂量依赖关系,软脂酸(400μmol/L)处理6h作用最明显。IL-6mRNA的表达水平为对照组的10.43倍(P〈0.01)。IL-6蛋白水平在软脂酸作用24h时达到峰值,约为对照组的2.18倍(P〈0.01)。NF.KB阻断剂parthenolide下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为65%和59%(均P〈0.01),蛋白激酶C(PKC)阻断剂白屈菜红碱下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为24%和28%(均P〈0.05)。而细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059和磷酸肌醇3激酶抑制剂wortmannin对软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达均无明显作用(均P〉0.05)。pGSadeno.TLR4下调软脂酸诱导的IL-6mRNA和蛋白表达分别为72%和75%(均P〈0.01),下调软脂酸刺激的NF—KBv65活性约62%(P〈0.01)。这些结果提示TLR-4/NF—KB和PKC信号通路介导了软脂酸诱导的人主动脉血管平滑肌细胞IL-6基因表达。 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 软脂酸 TOLL样受体4 白细胞介素6
果蝇样受体4介导游离脂肪酸调节人血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达 被引量:2
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作者 高啸波 权金星 +4 位作者 杨海静 陈卫 李伟华 李永红 刘静 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2013年第2期108-113,共6页
目的探讨软脂酸对人主动脉血管平滑肌细胞(HA—VSMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因表达的调节及果蝇样受体4(TLR4)信号通路的作用。方法采用不同剂量的软脂酸(100、200、400μmol/L)处理HA—VSMC6、12、24h,采用实时荧光定量... 目的探讨软脂酸对人主动脉血管平滑肌细胞(HA—VSMC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因表达的调节及果蝇样受体4(TLR4)信号通路的作用。方法采用不同剂量的软脂酸(100、200、400μmol/L)处理HA—VSMC6、12、24h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞MCP.1mRNA表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测MCP-1蛋白表达,观察软脂酸调节MCP-1表达的剂量依赖关系和时间效应;采用蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜红碱、磷脂酰肌醇3激酶(P13K)抑制剂wortmannin、神经酰胺抑制剂myriocin和核因子KB(NF—KB)抑制剂parthenolide分别处理细胞30min,再加入软脂酸(400μmol/L)处理细胞6h后,实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA的表达水平,ELISA检测MCP-1的蛋白表达水平,研究软脂酸调节MCP-1表达依赖的信号通路;构建TLR4短发夹RNA(shRNA)腺病毒pGSadeno-TLR4并感染HA—VSMC沉默TLR4基因表达,实验同时设空白对照组(PBS缓冲液)和对照病毒(pGSadeno-GFP)组。细胞感染96h后更换培养基,再加入软脂酸(400μmoL/L)处理细胞6h,采用实时荧光定量PCR检测MCP-1mRNA表达水平,ELISA检测MCP-1的蛋白表达水平。提取细胞核蛋白,采用ELISA检测NF—KBp65亚基活性,观察TLR4/NF-KB通路在软脂酸调节HA-VSMCMCP-1基因表达中的作用。组间均数比较采用单因素方差分析。结果采用软脂酸处理细胞6h后,对照组及100、200和400μmoVL软脂酸组MCP-1mRNA表达分别为1.00±0.02、3.30±2.84、8.21±4.31和11.25±2.73(F=7.57,P〈0.05);MCP-1蛋白表达分别为(127±10)、(147±10)、(163±18)和(194±14)ng/L(F=7.81,P〈0.05)。软脂酸可促进HA-VSMCMCP-1mRNA和蛋白表达且具有明显的剂量依赖关系。细胞培养12h和24h后,随着软脂酸浓度的增加,MCP-1mRNA和蛋白表达水平呈逐渐增加趋势,但时间效应则不明显。采用不同� 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 软脂酸 果蝇样受体4 单核细胞趋化蛋白-1
1,25(OH)2D3对人血管平滑肌细胞TLR4基因及炎症因子表达的抑制作用 预览
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作者 杨海静 陈卫 +1 位作者 高啸波 权金星 《中国现代医药杂志》 2012年第3期4-6,共3页
目的探讨1,25(OH)2D3(1,25-dihydroxyvitamin D3)对人主动脉血管平滑肌细胞(human aortic vascular smooth muscle cell,HA-VSMC)果蝇样受体(Toll like receptor 4,TLR4)基因及其下游炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用... 目的探讨1,25(OH)2D3(1,25-dihydroxyvitamin D3)对人主动脉血管平滑肌细胞(human aortic vascular smooth muscle cell,HA-VSMC)果蝇样受体(Toll like receptor 4,TLR4)基因及其下游炎症因子IL-6、IL-8和MCP-1表达的调节作用。方法不同浓度1,25(OH)2D3干预HA-VSMC后,采用实时荧光定量PCR法检测细胞TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mR-NA的表达水平。结果 1,25(OH)2D3在浓度为1-20nmol/L之间抑制TLR4、IL-6、IL-8、MCP-1mRNA水平的表达且具有明显的剂量依赖关系。在浓度为1nmol/L时1,25(OH)2D3下调TLR4和MCP-1mRNA表达的作用最明显,浓度为10nmol/L时,1,25(OH)2D3下调IL-6mRNA表达的作用最明显,浓度为20nmol/L时,1,25(OH)2D3下调IL-8mRNA表达的作用最明显。TLR4、IL-6、IL-8和MCP-1mRNA表达的最大下调幅度分别为对照组的3.08、2.39、3.19、2.23倍(均P〈0.05)。结论 1,25(OH)2D3通过下调TLR-4信号抑制了人主动脉血管平滑肌细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 1 25(OH)2D3 果蝇样受体4 细胞因子 基因表达
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